Xác định bệnh do trùng bào tử sợi (Myxosporea) gây ra ở cá chẽm Lates calcarifer (Bloch, 1790) giai đoạn giống và thử nghiệm phương pháp chữa trị

Xác định bệnh do trùng bào tử sợi (Myxosporea) gây ra ở cá chẽm Lates calcarifer (Bloch, 1790) giai đoạn giống và thử nghiệm phƣơng pháp chữa trị. Trong những bệnh trên cá chẽm hiện nay thì bệnh do ký sinh trùng mà cụ thể là trùng bào tử sợi Myxosporea gây ra cũng là một điều đáng quan tâm. Myxosporea là tác nhân gây bệnh phổ biến và gây tác hại lớn, gây cá chết nhanh chóng với tỷ lệ cao có thể lên đến 100% hoặc gây ảnh hƣởng đến sinh trƣởng. Bệnh này gây tác hại trong hầu hết các giai đoạn phát triển của cá nhƣng gây hại nghiêm trọng nhất ở giai đoạn cá con. Hiện nay bệnh vẫn chƣa có biện pháp chữa trị, chủ yếu vẫn là áp dụng các biện pháp phòng bệnh tổng hợp. Chính vì lý do trên mà vấn đề cần giải quyết hiện nay là cần có một đề tài để xác định rõ bệnh do Myxosporea gây ra ở cá chẽm.

Trang i LỜI CẢM ƠN Trong thời gian hoàn thành đề tài, ngồi cố gắng thân, tơi nhận đƣợc giúp đỡ nhiều quan cá nhân Với tất chân thành lịng biết ơn sâu sắc tơi xin đƣợc gởi lời cảm ơn tới: Ban giám hiệu Trƣờng đại học Nha Trang, phịng Khoa học cơng nghệ, ban chủ nhiệm Khoa Nuôi trồng Thủy sản thầy cô môn Bệnh học thủy sản giúp đỡ suốt trình thực đề tài Thạc sĩ Phan Văn Út-giáo viên hƣớng dẫn, ngƣời định hƣớng, động viên tạo điều kiện thuận lợi để đƣợc thực đề tài Tiến sĩ Nguyễn Hữu Dũng-giám đốc trung tâm Giống Dịch bệnh thủy sản, trƣờng Đại học Nha Trang tạo điều kiện cho đƣợc thực đề tài Cuối xin cảm ơn gia đình, bạn bè ngƣời thƣơng u tơi ln bên cạnh, giúp tơi có thêm sức mạnh thực tốt đề tài Tôi xin chân thành cảm ơn! Nha Trang, tháng năm 2012 Sinh viên thực Võ Thị Mỹ Dung Trang ii MỤC LỤC LỜI CẢM ƠN i MỤC LỤC ii DANH MỤC CÁC TỪ VIẾT TẮT iv DANH MỤC CÁC BẢNG v DANH MỤC HÌNH vi MỞ ĐẦU .1 PHẦN I: TỔNG QUAN 1.1.Một số đặc điểm sinh học cá chẽm 1.2 Đặc điểm ký sinh trùng Myxosporea bệnh chúng gây 1.3 Tình hình nghiên cứu bệnh ký sinh trùng Myxosporea giới .7 1.4 Tình hình nghiên cứu bệnh ký sinh trùng bệnh ký sinh trùng Myxosporea gây cá chẽm Lates calcarifer ( Bloch, 1790) giới .10 1.5 Tình hình nghiên cứu bệnh ký sinh trùng bệnh trùng Myxosporea gây cá chẽm nuôi Việt Nam 11 PHẦN 2: PHƢƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU .13 2.1 Thời gian, địa điểm đối tƣợng nghiên cứu 13 2.2 Phƣơng pháp nghiên cứu 13 2.2.1 Sơ đồ khối nội dung nghiên cứu 13 2.2.2 Pháp pháp nghiên cứu trùng bào tử sợi ký sinh cá chẽm 14 2.2.3 Kiểm tra mô học 16 2.2.4 Thử nghiệm chữa trị 17 2.2.5 Phƣơng pháp thu thập xử lý số liệu .18 Trang iii 2.2.5.1 Phƣơng pháp tính mức độ cảm nhiễm 18 2.2.5.2 Phƣơng pháp đo kích thƣớc trùng Myxosporea 19 2.2.5.3 Xử lý số liệu 19 PHẦN III: KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 20 3.1 Phân bố mẫu nghiên cứu xác định tác nhân gây bệnh: 20 3.2 Mô tả bệnh bào tử sợi gây cá chẽm 21 3.2.1 Bệnh Ceratomyxosis 21 3.2.2 Bệnh Henneguyosis 24 3.3 Kết thí nghiệm chữa trị: 26 PHẦN 4: KẾT LUẬN VÀ ĐỀ XUẤT Ý KIẾN 31 4.1 Kết luận .31 4.2 Đề xuất ý kiến 31 TÀI LIỆU THAM KHẢO 32 Trang iv DANH MỤC CÁC TỪ VIẾT TẮT CĐCNTB Cƣờng độ cảm nhiễm trung bình ĐC Đối chứng h Giờ KST Ký sinh trùng NT Nghiệm thức ppm Nồng độ phần triệu ppt Nồng độ phần nghìn SE Sai số chuẩn SL (Standard length) Chiều dài thân (không kể đi) TLCN Tỷ lệ cảm nhiễm TTK Thị trƣờng kính Trang v DANH MỤC BẢNG Bảng 3.1 Số lƣợng kích thƣớc mẫu nghiên cứu .20 Bảng 3.2 Mức độ nhiễm bệnh bào tử sợi gây cá chẽm ni Khánh Hịa 20 Bảng 3.3 Kích thƣớc mức độ cảm nhiễm đàn cá chẽm bị bệnh Ceratomyosis trƣớc đƣa vào chữa trị Baycox (BAYER) 26 Bảng 3.4 Mức độ cảm nhiễm cá chẽm bị bệnh Ceratomyosis nghiệm thức sau đƣợc chữa trị trị Baycox (BAYER) .28 Trang vi DANH MỤC HÌNH Hình 1.1 Cá chẽm Lates calcarifer Hình 2.1 Sơ đồ khối nội dung nghiên cứu 13 Hình 2.2 Các bƣớc thực phƣơng pháp nghiên cứu ký sinh trùng cá chẽm giống .14 Hình 2.3.Cách đo kích thƣớc bào tử .19 Hình 3.1 Dấu hiệu cá chẽm bị bệnh Ceretomya gây A- cá bị đen thân; BNội tạng cá chẽm bị xuất huyết, mật bị đen; C- Gan teo, mật xanh 21 Hình 3.2 Ceratomyxa ký sinh mật cá chẽm độ phóng đại 400X: A, BMẫu soi tƣơi; C, D- Mẫu nhuộm với Giemsa; E- Hình vẽ bào tử Ceratomyxa 22 Hình 3.3 Mơ mật cá chẽm bị nhiễm bệnh Ceratomyosis: A- Ceratomyxa ký sinh dịch mật; B- cấu trúc thành ống mật bị phá hủy, Ceratomyxa bám biểu mơ mật Hình ảnh độ phóng đại 400X 23 Hình 3.4 Hình ảnh bào nang bào tử Heneguya cá chẽm: A, B- Bào nang Henneguya cerebralis mang; C, D- Bào tử Henneguya cerebralis độ phóng đại 400X; E- Hình vẽ bào tử Henneguya cerebralis 25 Hình 3.5 Tỷ lệ (%) cƣờng độ cảm nhiễm bào tử sợi khác đàn cá chẽm bị bệnh Ceratomyosis trƣớc đƣợc chữa trị trị Baycox (BAYER) .27 Hình 3.6 Tỷ lệ chết nghiệm thức sau 12 ngày chữa trị Baycox (BAYER) 27 Hình 3.7 Tỷ lệ (%) cƣờng độ cảm nhiễm nghiệm thức dùng thuốc (NT1) đối chứng (ĐC) sau ngày chữa trị Baycox (BAYER) 28 Trang MỞ ĐẦU Cá chẽm Lates calcarifer lồi có giá trị kinh tế, tốc độ sinh trƣởng nhanh, dễ nuôi, suất nuôi cao đối tƣợng nuôi quan trọng nhiều nƣớc giới, nƣớc khu vực Đông Nam Á Nghề nuôi cá chẽm Việt Nam đƣợc phát triển rộng rãi sau nghề nuôi tôm vào giai đoạn suy thoái dịch bệnh Lates calcarifer trở thành đối tƣợng ni đem lại hiệu kinh tế cao cho nhiều hộ nông dân Tuy nhiên, phát triển nghề nuôi cá chẽm gia tăng nhanh chóng quy mơ diện tích, đồng thời thiếu quản lý, quy hoạch trình phát triển thời gian qua dẫn đến số vấn đề môi trƣờng dịch bệnh, kết báo cáo dịch bệnh đối tƣợng nuôi xuất với tần số ngày tăng Trong bệnh cá chẽm bệnh ký sinh trùng mà cụ thể trùng bào tử sợi Myxosporea gây điều đáng quan tâm Myxosporea tác nhân gây bệnh phổ biến gây tác hại lớn, gây cá chết nhanh chóng với tỷ lệ cao lên đến 100% gây ảnh hƣởng đến sinh trƣởng Bệnh gây tác hại hầu hết giai đoạn phát triển cá nhƣng gây hại nghiêm trọng giai đoạn cá Hiện bệnh chƣa có biện pháp chữa trị, chủ yếu áp dụng biện pháp phịng bệnh tổng hợp Chính lý mà vấn đề cần giải cần có đề tài để xác định rõ bệnh Myxosporea gây cá chẽm Đƣợc cho phép giám hiệu nhà trƣờng, phịng khoa học cơng nghệ, khoa nuôi trồng thủy sản trƣờng Đại học Nha Trang định hƣớng, giúp đỡ thầy Phan Văn Út, thực đề tài nghiên cứu khoa học với tiêu đề “Xác định bệnh trùng bào tử sợi (Myxosporea) gây cá chẽm Lates calcarifer (Bloch, 1790) giai đoạn giống thử nghiệm phƣơng pháp chữa trị” Nội dung thực hiện: Xác định tác nhân đặc điểm dịch tễ bệnh Myxosporea gây cá chẽm Thử nghiệm phƣơng pháp chữa trị Trang Mục tiêu đề tài: Xác định tác nhân đặc điểm dịch tễ bệnh Myxosporea gây cá chẽm Lates calcarifer đề xuất biện pháp phịng trị bệnh thích hợp Trang PHẦN I: TỔNG QUAN 1.1.Một số đặc điểm sinh học cá chẽm Cá chẽm có hệ thống phân loại nhƣ sau: Ngành: Chordata Lớp: Actinopterygii Bộ: Perciformes Họ: Latidae Giống: Lates Hình 1.1 Cá chẽm Lates calcarifer Loài: Lates calcarifer (Bloch, 1790) Tên tiếng Việt: Cá chẽm, cá vƣợc Tên tiếng Anh: Sea bass, Barramundi, Giant seaperch Cá chẽm có thân hình thon dài dẹp bên, cuống đuôi khuyết sâu Chiều dài thân 2.7 - 3.6 lần chiều cao Đầu nhọn, nhìn bên cho thấy phía lõm xuống lồi lƣng Miệng rộng so le, hàm kéo dài đến phía dƣới sau hốc mắt Răng dạng nhung, khơng có nanh, nắp mang có gai cứng, vây lƣng gồm có vi: vi trƣớc có 7-9 gai cứng vi sau có 10-11 tia mềm Vi hậu mơn có gai cứng, vi trịn có hình quạt Vẩy dạng lƣợc có kích cỡ vừa phải, có 61 vẩy đƣờng bên Khi cá khoẻ, mặt lƣng có màu nâu, mặt bên bụng có màu bạc sống mơi trƣờng nƣớc biển, màu nâu vàng sống môi trƣờng nƣớc Khi cá giai đoạn trƣởng thành có màu xanh lục hay vàng nhạt lƣng màu vàng bạc mặt bụng Cá chẽm Tại Việt Nam, cá chẽm đƣợc tìm thấy vịnh Bắc bộ, vùng biển Trung Nam Bộ Trang Về khả thích ứng với yếu tố sinh thái, cá chẽm lồi có khả thích ứng rộng với thay đổi độ mặn, cá giai đoạn giống trƣởng thành sống đƣợc độ mặn từ – 35 ppt chịu đựng tốt với thay đổi độ mặn đột ngột Thực tế cho thấy cá giống cỡ – cm hóa từ độ mặn 30 – 32 ppt xuống – 10 ppt – (Kungvankij ctv, 1984; Tucker, 2000) Vì vậy, lồi thích hợp cho phát triển nuôi nƣớc ngọt, nƣớc lợ nhƣ ni biển (Kungvankij ctv, 1984) Cá chẽm thích ứng với nhiệt độ từ 21 – 39oC, thích hợp 27 – 30oC Nhiệt độ thay đổi đột ngột – 3oC gây sốc cho cá giống (Tucker, 2000) Độ pH thích hợp cho cá từ 7.0 – 8.5; DO -9 ppm; NH3-N < 0.025 ppm, H2S < 0.3 ppm (Kungvankij ctv, 1984) Cá chẽm lồi cá dữ, ăn mồi sống có khả ăn thịt đồng loại, đặc biệt tỷ lệ chết ăn cao giai đoạn từ – 10 cm Ngoài tự nhiên, thức ăn cá chẽm gồm cá nhỏ, tơm, cua, mực… Cá có kích thƣớc >20 cm ăn 100% mồi động vật (Kungvankij ctv, 1994) Cá chẽm lồi có kích thƣớc lớn, khối lƣợng tối đa đạt 60 kg Cá tăng trƣởng chậm giai đoạn đầu, đạt 20–30 g tốc độ tăng trƣởng nhanh chậm lại đạt khoảng kg Cá bột nở có chiều dài 1.49 mm, sau 40 ngày đạt cỡ 17.4 mm, 50 ngày đạt 28.9 mm, 90 ngày đạt chiều dài 93 mm, khối lƣợng 9g Trong điều kiện nuôi, cá giống cỡ – 2.5 cm sau thời gian ƣơng từ 30 – 45 ngày đạt cỡ – 11 cm, sau từ đến 24 tháng nuôi thƣơng phẩm cá đạt 0.35 – kg 1.2 Đặc điểm ký sinh trùng Myxosporea bệnh chúng gây Myxosporea thuộc ngành Myxozoa, giới động vật đơn bào Protozoa Myxosporea có hình dạng thể đơn giản, kết q trình phân đơi quy mơ lớn để thích ứng với đời sống ký sinh (Lom Dyková, 2006) Vòng đời Myxosporea trải qua vật chủ khác nhau, theo Wolf Markiw (1984) vòng đời Myxosporea xảy hai ký chủ chia làm giai đoạn Myxospore Actinospore, giai đoạn Myxospore xảy ký chủ trung gian động vật có xƣơng sống bậc thấp nhƣ cá, giai đoạn Actinospore ký sinh động vật không xƣơng sống thƣờng giun nhiều tơ nhằm phục vụ cho sinh sản hữu tính Giai đoạn ký sinh Trang 22 Cá bị cảm nhiễm Ceratomyxa mức độ cảm nhiễm nặng, mật thƣờng chuyển sang màu xanh đen, dịch mật cô đặc lại, tùy theo cƣờng độ nhiễm KST mà màu sắc độ đặc dịch mật khác nhau, cá nhiễm nặng màu sắc mật chuyển sang màu xanh đen dịch mật đặc Ngồi số trƣờng hợp cá nhiễm với cƣờng độ nhiễm cao, mật có kích thƣớc lớn bình thƣờng, gan teo nhỏ lại, ruột cá tích dịch khơng chứa chứa thức ăn A C B D E Hình 3.2 Ceratomyxa ký sinh mật cá chẽm độ phóng đại 400X: A, B- Mẫu soi tƣơi; C, D- Mẫu nhuộm với Giemsa; E- Hình vẽ bào tử Ceratomyxa Khi kiểm tra dịch mật độ phóng đại 400X, thấy ký sinh trùng kích thƣớc hiển vi với nhiều hình dạng khác nhau, dày đặc dịch mật Bào tử Ceratomyxa macrospora có kích thƣớc dài 10-12.5µm, rộng 2.5-5µm gồm hai Trang 23 mảnh vỏ nối đƣờng nối, có cực nang tế bào chất khơng chứa khơng bào ƣa iod Hình dạng bào tử kéo dài nhƣ hình lƣỡi liềm, hai mảnh vỏ kéo dài theo trục dài bào tử, cực nang hình cầu nằm gần đƣờng nối Thể dinh dƣỡng có hình dạng kích thƣớc khác nhau, có dạng hình tam giác hay tựa hình cầu chứa có hay nhiều bào tử thƣờng hai bào tử tạo hình dạng khác quan sát dịch mật Khi quan sát mẫu mô mật đƣợc cắt, nhuộm với Hematoxylin Eosin thấy bào tử hay thể dinh dƣỡng bám thành túi mật hay nằm lơ lửng dịch mật, tế bào biểu mô túi mật bị biến dạng A B Hình 3.3 Mơ mật cá chẽm bị nhiễm bệnh Ceratomyosis: A- Ceratomyxa ký sinh dịch mật; B- cấu trúc thành ống mật bị phá hủy, Ceratomyxa bám biểu mơ mật Hình ảnh độ phóng đại 400X Trên giới, Ceratomyxa gồm nhiều loài khác C arcuata, C drepanopsettae, C macrospora, C agregata, C auerbachi, C schulmani, C maxima, C anguillae, C hongzensis, C shasta ký sinh chủ yếu dịch mật loài cá biển khắp nơi C macrospora (Kalenscher, 1926) đƣợc thơng báo lồi ký sinh cá Sebastes marinus, S viviparus vùng biển Bắc Bắc Đại Tây Trang 24 Dƣơng (trích theo Lom Dyková, 1992) Tuy nhiên, nghiên cứu sâu loài ít, thơng báo lồi Ceratomyxa ký sinh gây bệnh cá biển cho thấy có lồi ký sinh nhƣng khơng gây tác hại lớn, có lồi lại trở thành tác nhân gây bệnh nguy hiểm gây thiệt hại kinh tế nghiêm trọng cho nghề nuôi trồng thủy sản giới Yamamoto Sanders (1979) nghiên cứu bệnh C shasta ký sinh gây chết cá hồi cho thấy ngồi túi mật, KST cịn đƣợc tìm thấy tồn thành ống tiêu hóa, mao mạch mang, mô liên kết, lách ,gan, thận, trứng (Trích theo Lom Dyková, 1992) Tuy nhiên, đề tài theo kết Kalenscher (1926) C macrospora tìm thấy KST dịch mật, thành túi mật ống mật, quan khác khơng phát thấy Có thể xâm nhiễm hệ thống C shasta hầu hết quan quan trọng cá nguyên nhân gây chết cá bị nhiễm KST, C macrospora ký sinh cục mật nên tác động KST với thể cá chủ yếu lấy chất dinh dƣỡng làm cá cịi cọc, chậm lớn mà khơng gây tỷ lệ chết lớn Tuy nguyên nhân trực tiếp làm chết cá, nhƣng tác hại C macrospora thể gián tiếp, gây ảnh hƣởng đến sinh trƣởng cá, cá chậm lớn, gầy yếu dễ bị nhiễm tác nhân gây bệnh khác khả chống lại bệnh thấp làm cá bị nhiễm KST dễ chết hơn, mặc khác cá chậm lớn gây thiệt hại kinh tế cho ngƣời nuôi 3.2.2 Bệnh Henneguyosis Ngành: Myxozoa Lớp: Myxosporea Bộ: Bivalvulida Họ: Myxobolidae Giống: Henneguya Loài: Henneguya cerebralis Trang 25 A B C D E Hình 3.4 Hình ảnh bào nang bào tử Henneguya cá chẽm: A, BBào nang Henneguya cerebralis mang; C, D- Bào tử Henneguya cerebralis độ phóng đại 400X; E- Hình vẽ bào tử Henneguya cerebralis Henneguya cerebralis ký sinh mang cá dạng bào nang, cƣờng độ cảm nhiễm nhẹ cá khơng có dấu hiệu bất thƣờng, nhiên cƣờng độ cảm nhiễm nặng gây ảnh hƣởng đến hô hấp cá, màu sắc cá bị bệnh đen sạm, quan sát mang cá dƣới kính giải phẫu thấy xuất bào nang màu nâu bám dày đặc bên tơ mang cá Khi bị phá vỡ, bào nang giải phóng bào tử Bào tử có dạng hình ellip, có cực nang hình hình lê phía trƣớc thể, cực nang dài ½ kích thƣớc bào Trang 26 tử, sợi thích ty xoắn lần Vỏ kitin gồm hai mảnh khép lại nhƣng phần nối phía sau vỏ kéo dài thành đi, chia hai nhánh khơng cong vút phía sau; tế bào chất có chứa khơng bào ƣa iod chứa β-glycogen Bệnh Henneguyosis thƣờng xảy vào mùa nhiệt độ cao, với xuất tháng 6-8 hàng năm, thời điểm nắng nóng khu vực Khánh Hịa khơng thấy xuất bệnh vào tháng nhiệt độ thấp Bệnh Henneguyosis thƣờng gây chết cá với tỷ lệ lớn cản trở hoạt động hô hấp, cấu tạo chức mang cá bị phá hủy Bệnh Heneguyosis cá chẽm đƣợc thông báo nghiên cứu Vũ Thị Ngọc (2008) Theo Vũ Thị Ngọc (2008), cá nhiễm bệnh Henneguyosis mức độ cảm nhiễm nhẹ thƣờng biểu dấu hiệu bệnh lý bên ngoài; cá nhiễm bệnh nặng, bào nang Henneguya chèn ép tơ mang, làm kênh xƣơng nắp mang, cá gặp khó khăn hô hấp chết Nhƣ vậy, dấu hiệu bệnh lý cá bị nhiễm bệnh Heneguyosis đƣợc mô tả nghiên cứu Vũ Thị Ngọc tƣơng đồng nhau, nhiên loài nghiên cứu đƣợc xác định nghiên cứu trƣớc Henneguya zschokkei Gurley, 1894 3.3 Kết thí nghiệm chữa trị bệnh Ceratomyosis: Đàn cá đƣa vào chữa trị có chiều dài trung bình 8.56 cm ± 0.63, có tỷ lệ cảm nhiễm 100% cƣờng độ nhiễm cao từ đến 100 trùng/thị trƣờng kính 40X (Bảng 3.3) Tỷ lệ cá có cƣờng độ nhiễm 100 trùng/thị trƣờng kính 40X chiếm 50%; cƣờng độ nhiễm từ 30-70 trùng/thị trƣờng kính 40X chiếm 37% (Hình 3.4) Nhƣ vậy, đàn cá đƣa vào chữa trị đàn cá nhiễm bệnh nặng, điển hình phù hợp cho thử nghiệm chữa trị Bảng 3.3 Kích thƣớc mức độ cảm nhiễm đàn cá chẽm bị bệnh Ceratomyosis trƣớc đƣa vào chữa trị Baycox (BAYER) Kích thƣớc cá (cm) Tỷ lệ nhiễm (%) Cƣờng độ nhiễm (trùng/ TTK 40X) 8.56 ± 0.63 100 - >100 Các giá trị bảng giá trị trung bình ± độ lệch chuẩn (SD) Trang 27 13% 50% 37% 100 Hình 3.5 Tỷ lệ (%) cƣờng độ cảm nhiễm bào tử sợi đàn cá chẽm bị bệnh Ceratomyosis trƣớc đƣợc chữa trị Baycox (BAYER) 60% 53,33% Ty le chet (%) 50% 40% 30% Tỷ lệ chết 20% 11,67% 10% 3,33% 0% ĐC NT1 Nghiem thuc NT2 Hình 3.6 Tỷ lệ chết nghiệm thức sau 12 ngày chữa trị Baycox (BAYER) Theo dõi tỷ lệ chết q trình trị bệnh, nghiệm thức đối chứng khơng đƣợc dùng thuốc có tỷ lệ chết cao 53.33% Nghiệm thức dùng thuốc liều lƣợng 0.5ppt 1ppt tỷ lệ chết lần lƣợt 11.67%, 3.33% Theo kết trên, tỷ lệ chết cao đƣợc quan sát nghiệm thức đối chứng hai nghiệm thức dùng thuốc, liều dùng thuốc thấp cho tỷ lệ chết cao Mặt khác, giải phẫu cá sau chết nghiệm thức cho thấy cƣờng độ nhiễm Ceratomyxa dày đặc mật, gan teo, ruột tích nƣớc không chứa thức ăn Nhƣ vậy, cá chết q trình thí nghiệm bệnh nặng, sức khỏe yếu, tác dụng Trang 28 thuốc, nguyên nhân chết chủ yếu ký sinh trùng tác động đến hệ thống tiêu hóa, dẫn đến cá không ăn đƣợc thức ăn Kết chữa trị cho thấy, sau ngày chữa trị đầu tiên, mức độ nhiễm hai nghiệm thức dùng thuốc giảm rõ rệt Nghiệm thức dùng thuốc Toltrazuril nồng độ 0.5ppt, tỷ lệ nhiễm giảm xuống 70%, mức độ nhiễm giảm Nghiệm thức dùng thuốc Toltrazuril nồng độ 1ppt, tỷ lệ nhiễm giảm rõ rệt 15% (Bảng 3.4) Bảng 3.4 Mức độ cảm nhiễm cá chẽm bị bệnh Ceratomyosis nghiệm thức sau đƣợc chữa trị Baycox (BAYER) Toltrazuril 0.5ppt Toltrazuril 1ppt ĐC ngày sau chữa trị Baycox (BAYER) Tỷ lệ Cƣờng độ nhiễm nhiễm (trùng/TTK 40X) (%) 70 8- >100 15 7- >100 100 >100 12 ngày sau chữa trị Baycox (BAYER) Tỷ lệ Cƣờng độ nhiễm nhiễm (trùng/TTK 40X) (%) 0 0 100 25- >100 Tiếp tục chữa trị ngày tiếp theo, cá hai nghiệm thức dùng thuốc khơng cịn bị nhiễm bào tử sợi mật, nghiệm thức đối chứng tỷ lệ nhiễm 100% (Bảng 3.5) 100% Ty le (%) 80% 50% 60% 100% 100 Trang 29 Toltrazuril thuốc đƣợc ứng dụng chữa trị số bệnh ký sinh trùng nội ngoại ký sinh Sản phẩm có chứa Toltrazuril đƣợc sử dụng để điều trị bệnh ký sinh trùng nội ký sinh đƣờng ruột thú y biện pháp cho ăn đem hiệu cao không gây phản ứng phụ khác Trong nuôi trồng thủy sản, Toltrazuril đƣợc sử dụng số thí nghiệm chữa trị bệnh ký sinh trùng ngoại ký sinh Monogenea hay Protozoa gây (Schmahl Mehlhom, 1998; Schmahl ctv, 2011) Biện pháp đƣợc đƣa để chữa trị bệnh ngoại ký sinh cá ngâm nồng độ, thời gian khác Liều lƣợng đƣợc Schmahl Mehlhom (1988) khuyến khích để chữa trị bệnh Gyrodactylus spp., Dactylogyrus vastator, D Extensus Pseudodactylogyrus bini 10ppm ngâm 4h Schmahl ctv (2011) đề nghị chữa trị bệnh Apiosoma spp and Trichodina spp cá phƣớng pháp ngâm 50ppm 20 phút Đối với Ichthyophthirius multifiliis giai đoạn dinh dƣỡng, số thể dinh dƣỡng I multifiliis không chết mà chuyển sang dạng bào nang sau ngâm 10ppm 2h, Schmahl ctv (2011) đƣa phƣơng pháp chữa trị phức tạp đòi hỏi quy trình gồm ngâm 10ppm 2h ngày đầu tiên, 20ppm 1h ngày thứ hai ngày thứ ba Liều lƣợng dùng thí nghiệm cao hẳn với liều khuyến khích chữa trị ký sinh trùng ngoại ký sinh nhƣng quan sát khơng có tƣợng cá chết q liều cho hiệu chữa trị Điều phần thuốc bị trình cho ăn, lƣợng khác bị phân hủy hệ tiêu hóa hay bị thải ngồi trƣớc đƣợc hấp thụ, nồng độ thuốc tác động lên ký sinh trùng nhỏ Cơ chế tác dụng thuốc lên Myxosporea chƣa đƣợc hiểu rõ Tuy nhiên, theo nghiên cứu Schmahl ctv, 2011 cho tác dụng Toltrazuril lên Protozoa ngoại ký sinh làm phá hủy cấu trúc màng ngoài, cấu trúc ty thể nhƣ tiêu hủy hoàn toàn Ribosome Điều chế tác dụng thuốc lên Ceratomyxa KST mang đặc điểm chung Protozoa Cá chẽm giống bị nhiễm bệnh Ceratomyxosis đƣợc chữa trị có hiệu điều kiện thí nghiệm, với tỷ lệ nhiễm cịn 0% sau hai đợt chữa trị Sau đợt Trang 30 chữa trị đầu tiên, tỷ lệ nhiễm giảm từ 100% 70% với nồng độ 0.5ppt Toltrazuril giảm 15% với nồng độ 1ppt Bên cạnh đó, tỷ lệ chết trình chữa trị xảy thấp nồng độ 1ppt Toltrazuril Nhƣ vậy, nồng độ 1ppt cho hiệu chữa trị tốt liều dùng đƣợc đề nghị cho hiệu chữa trị bệnh nhằm giảm tỷ lệ chết bệnh cá nhanh hết bệnh Trang 31 PHẦN 4: KẾT LUẬN VÀ ĐỀ XUẤT Ý KIẾN 4.1 Kết luận Kết kiểm tra 179 cá chẽm giống khu vực Khánh Hòa từ tháng 6/ năm 2011 đến tháng năm 2012 xác định đƣợc hai loài trùng bào tử sợi gây Ceratomyxa macrospora ký sinh mật cá Henneguya cerebralis ký sinh mang cá dạng bào nang Ceratomyxa macrospora ký sinh mật, với tỷ lệ nhiễm 6,81%, cƣờng độ nhiễm >100 trùng/thị trƣờng kính 40X KST gây ảnh hƣởng đến tốc độ sinh trƣởng cá, cá chậm lớn, gầy yếu Henneguya cerebralis ký sinh dạng bào nang với mức độ nhiễm cao làm mang tiết nhiều dịch nhầy, cản trở hoạt động hô hấp cá, gây chết với tỷ lệ cao Thử nghiệm chữa trị bệnh Ceratomyxosis cá chẽm giống sản phẩm Baycox (BAYER) với thành phần Toltrazuril 5% đem lại hiệu Liều dùng đƣợc khuyến nghị Toltrazuril 1ppt 4.2 Đề xuất ý kiến Tiếp tục nghiên cứu đặc điểm cảm nhiễm Myxosporea lên cá chẽm giống ni ao đìa, mối liên hệ cảm nhiễm với yếu tố môi trƣờng, điều kiện nuôi, mùa vụ nuôi vật chủ Tiếp tục sử dụng Toltrazuril để thử nghiệm chữa trị bệnh Ceratomyosis cá chẽm nhiễm bệnh ni ao, đìa với nhiều liều lƣợng khác để chọn đƣợc nộng độ tối ƣu; từ hồn thiện quy trình chữa trị để ứng dụng vào thực tế sản xuất Trang 32 TÀI LIỆU THAM KHẢO Tài liệu tiếng Việt Đỗ Thị Hòa, Bùi Quang Tề, Nguyễn Hữu Dũng, Nguyễn Thị Muội (2004) Giáo trình Bệnh học thủy sản NXB nơng nghiệp TP Hồ Chí Minh Kungvankij, P., Pudadera, B J., Tiro, L B., Potestas, I O., Tookwinas, S., Ruangpan, L., 1994 Sinh học kỹ thuật nuôi cá chẽm (Lates calcarifer Bloch) Nguyễn Thanh Phƣơng dịch Nhà xuất Nông nghiệp Hà Nội, 77 trang Vũ Thị Ngọc, 2008 Nghiên cứu bệnh động vật đơn bào (Protozoa) ký sinh cá chẽm (Lates calcarifer (Bloch, 1790)) ni Khánh Hịa thử nghiệm phƣơng pháp chữa trị Báo cáo đề tài nghiên cứu khoa học sinh viên, trƣờng Đại học Nha Trang Viện Thủy sản Đại học Cần Thơ Sinh học kĩ thuật nuôi cá chẽm Tài liệu tiếng anh Alvarez-Pellitero, P., Sitja-Bobadilla, A., 1993 Pathology of Myxosporea in marine fish culture Disease of Aquatic Organism 17: 229-238 Burger, M A A., Barnes, A C., Adlard, R D., 2008 Wildlife as reservoirs for parasites infecting commercial species: host specificity and a redescription of Kudoa amamiensis from teleost fish in Australia Journal of Fish Diseases 31: 835–844 Freeman, M A., Bell, A S., Sommerville,C., 2003 A hyperparasitic microsporidian infecting the salmon louse, Lepeophtheirus salmonis: an rDNA-based molecular phylogenetic study Journal of Fish Diseases, 26, 667– 676 Freeman, M A., Yokoyama, H., Ogawa, K., 2008 Description and phylogeny of Ceratomyxa anko sp n and Zschokkella lophii sp n from the Japanese anglerfish,Lophius litulon (Jordan) Journal of Fish Diseases, 31, 921–930 Trang 33 Hallett, S L., OIDonoghue, P J., Lester, R J G., 1997 Infections by Kudoa ciliatae (Myxozoa: Myxosporea) in Indo-Pacific whiting Sillago spp Diseases of Aquatic Organisms 30:11-16 10 Lom, J., Dyková, I., 1992 Protozoa parasites of fishes Developments in Aquaculture and fisheries science 26: 159-227 11 Lom, J., Dyková, I., 2006 Myxozoa genera: definition and notes on taxonomy, life-cycle terminology and pathogenic species Flolia Parasitologica 53: 1-36 12 MacKenzie, K., Kalavati, C., Gaard, M., Hemmingsen, W., 2005 Myxosporean gall bladder parasites of gadid fishes in the North Atlantic: Their geographical distributions and an assessment of their economic importance in fisheries and mariculture Fisheries Research 76, 454–465 13 Morrison, C M., Martell, J., Cynthia, L., O’Nell, D., 1996 Ceratomyxa drepanopsettae in the gallbladder of Atlantic haliut, Hippoglossus,from the northwest Atlantic Ocean Folia Parasitologica 43:20-36 14 Palenzuela, O., Trobridge, G., Jerri L.artholomew, 1999 Development of a polymerase chain reaction diagnostic assay for Ceratomyxa shasta, a Myxosporean parasite of salmonid fish Diseases of Aquatic Organisms 36: 45-51 15 Yokoyama, H., Fukuda, Y., 2001 Ceratomyxa seriolae n sp and C buri n sp (Myxozoa: Myxosporea) from the gall-bladder of cultured yellowtail Seriola quinqueradiata Systematic Parasitology 48: 125–130 16 Schmahl, G., Mehlhom, H 1998 Treatment of fish parasites Effects of sym triazinone (toltrazuril) on Monogenea Parasitol Res 75(2):132-43 17 Schamahl, G., Mehlhom, H., Taraschewski, H 2011 Treatment of fish parasites : The effects of sym triazinone (Toltrazuril) on fish parasitic ciliophora (Ichthyophthirius multifiliisFOUQUET, 1876, Apiosoma amoebea Grenfell, Trang 34 1884,Trichodina sp Ehrenberg, 1831) European Journal of Protistology 24 (2): 152-161 18 Leong, T L Wong, S Y., 1986 Parasite fauna off seabass, Lates calcarifer Bloch, from Thailand and from floating cages in Penang, Malaysisa The First Asian Fisheries Forum Asian Fisheries Society, Manila, Philippines 19 Leong, T L Wong, S Y., 1990 Parasite of healthy and diseased juvenile Grouper Epinephelus marlabaricus (Bloch and Schneider) and seabass Lates calcarifer (Bloch) in floating cages in Penang, Malaysia Asian Fisheries Science 3: 319-327 20 Leong, T L Tan, Z., Enright, W T., 2006 Important parasite diseases in culture marine fish in Asia – Pacific region AQUA culture AsiaPacific Magazine 21 Work, T M., Takata, G., Whipps, C M., Kentb, M L., 2008 A New Species of Henneguya (Myxozoa) in the Big-Eyed Scad (Selar crumenophthalmus) from Hawaii Journal of Parasitology, 94(2):524-529 22 Zhao, Y., Song, W., 2001 Myxoproteus cheni sp n and Sinuolinea mai sp n (Myxosporea: Sinuolineidae) Parasitic in the Urinary Bladder of Marine Fish (Thamnaconus septentrionalis Gunther, 1877) from the Yellow Sea, off the Qingdao Coast of China Acta Protozool 40: 125 – 130 Trang PHỤ LỤC PHỤ LỤC 1: Kích thƣớc, quan nhiễm mức độ nhiễm Ceratomyxa đàn cá chẽm giống đƣợc đƣa vào chữa trị SL Cơ quan CĐN (bào Cơ quan CĐN (bào STT (cm) nhiễm nhiễm tử/TTK40X) 7,5 Mật xanh đen >100 16 7,9 Mật vàng Mật xanh 20 17 9,3 Mật xanh đen >100 7,7 Mật xanh đen >100 18 9,4 Mật xanh đen >100 8,4 Mật xanh đen >100 19 8,4 Mật xanh 24 Mật xanh 25 20 10 Mật xanh đen >100 7,7 Mật vàng 22 21 9,2 Mật xanh đen >100 8,3 Mật xanh đen >100 22 9,4 Mật xanh 32 8,6 Mật vàng 14 23 8,2 Mật xanh 17 8,5 Mật xanh đen >100 24 7,9 Mật xanh đen >100 10 8,5 Mật xanh 30 25 8,3 Mật vàng 15 11 9,2 Mật xanh đen >100 26 8,3 Mật xanh đen >100 12 9,3 Mật xanh đen >100 27 7,8 Mật xanh đen >100 13 8,5 Mật xanh 27 28 7,5 Mật xanh đen >100 14 8,4 Mật xanh đen >100 29 9,2 Mật xanh 33 15 7,8 Mật xanh 34 30 9,3 Mật xanh đen >100 SL tử/TTK40X) STT (cm) Trang PHỤ LỤC 2: Phƣơng pháp chữa trị Ceratomyosis sản phẩm Baycox (BAYER) Đối chứng 0.5ppt1 0.5ppt2 1ppt1 1ppt2 Số cá TN (con) 30 30 30 30 30 Thức ăn 10% P thân (gram) 30 30 30 30 30 Baycox (Toltrazuril 5%) (ml) 0.3 0.3 0,6 0,6 Dầu ăn trộn vào thức ăn có có có có có PHỤ LỤC 3: Kết theo dõi mức độ nhiễm sau ngày chữa trị STT cá kiểm tra sau ngày TN Đối chứng 5ppm1 5ppm2 10ppm1 1ppm2 >100 12 0 >100 >100 >100 >100 >100 0 0 >100 >100 >100 0 >100 >100 >100 >100 0 >100 15 >100 >100 >100 0 >100 >100 0 10 >100 12 0 ... học với tiêu đề ? ?Xác định bệnh trùng bào tử sợi (Myxosporea) gây cá chẽm Lates calcarifer (Bloch, 1790) giai đoạn giống thử nghiệm phƣơng pháp chữa trị? ?? Nội dung thực hiện: Xác định tác nhân đặc... tễ bệnh Myxosporea gây cá chẽm Thử nghiệm phƣơng pháp chữa trị Trang Mục tiêu đề tài: Xác định tác nhân đặc điểm dịch tễ bệnh Myxosporea gây cá chẽm Lates calcarifer đề xuất biện pháp phòng trị. .. 100% gây ảnh hƣởng đến sinh trƣởng Bệnh gây tác hại hầu hết giai đoạn phát triển cá nhƣng gây hại nghiêm trọng giai đoạn cá Hiện bệnh chƣa có biện pháp chữa trị, chủ yếu áp dụng biện pháp phịng bệnh