Khóa luận tốt nghiệp Hóa học: Góp phần nghiên cứu thành phần hóa học của cây cỏ the (Centipeda Minima L.)

Cuỗi cùng em cũng xin cảm ơn tất cả các bạn trong phòng thí nghiệm Hợp chất thiên nhiên trường Đại học Sư phạm thành phố Hồ Chi Minh đã tận tình trao đôi những kinh nghiệm, đoàn kết, gắn

DAIHOC y=

TP HO CHÍ MINH

KHOA LUAN TOT NGHIEP

GOP PHAN NGHIEN CUU THANH PHAN

HOA HOC CUA CAY CO THE

(CENTIPEDA MINIMA L.)

GVHD: TS BUI XUAN HAO

SVTT: TRAN THI LOAN

NHAN XÉT CUA HỘI DONG

CONN RENE EERE EERE EERE EERE ERER EEE EEE EE EERE TREE EEEEEEE EE EEEEEEEE EE EE EEE EEE EEE E EE EE EEE EE EEE see EE EEE EEE EE EEEEEEEEEEEEEEH HEHEHE EERE ES

ARERR EERE RRR R RRO E REDE E REESE EEE E Eee OEE EE EE EE Eee EE EEE Ee Eee eH SEES EEE EEE EEE SEES SHEE EEE HEHEHE EEEE SHEE EEEEEEEEEEEE TEESE EERE EEE hài

"ÔÔÔÔôÔÔÓÔÓÔÔÔÔÔO00/ÓÓÓ,.Hđ EERE EE SESE SEES

ARERR EERE EERE EEE EEREEEER RHEE ES ERE EERE EESERESEEE EEE EEE EEE EEE EE EEE E EEE O EEE E EE EE EEE EEE EEE EEE EEE SHEE SEEEEEEHEEEEEEEEEEE HEHEHE HEHE

¬ ( - do

cố (CC ỐỐỐ.Ố.Ố.ỐỒ Ổ Ố Ố (Á(( cà

Annee HH ee eee eens 06 0000000000006 00V 0060 0 4060 0 sees EES EEE Ee EE SHEE EEE EERE EEE EEEEEEE EE EERE HESS EEEEE EERE EERE EEE EESE EEE EEE EEE EOE EEE ED

SERRE RENEE EERE EEE E EEE EEEEE RENE EE EERE EEEEEEEEREEEEEEEEEEEEREEEEEEEEEESESEREEEE REESE SEER EEE EE ESSERE EERE SESE EEEEEEESEEEEE EERE SERRE EES

An E ERE EEREERREEEREEER THERES REESE ERE SEER ESET ESSER SHEE EEEESE ERSTE SEES EERE SEES HEHEHE EEE E HEHEHE EEE EE HEHEHE EEE EERE EEE EERE ES

ARR Renee eee e eee e nena eens e nese eee 00000 04060 eee e eee see eee ESE EE EE EE EEE 401 HEHEHE HEHEHE EEE EEE EEEEEEEEEEEEEEEEEEEEEE EERE RESET EEE EOE EEE ES

eee eee eee meee eee nena eee e Eee eee e eee EERE EEE E EEE EE EE EEE EEEEE EEE EEE EEES EEE EEEE EEE ESSERE EEEEEESE SESE EEE ESTEE EEE SESE E EOE ES

EEE E EEE EERE EE EEE EEE HEHE RENEE TEEN EE EEEE EERE EERE EEEEEEEEEE TREE ESSE ESSERE EEE EEEEEEEEEEE EEE EEEEEEEE SESE EEE EERE EE EEE EEE EERE ES

PITTI PTIT TTT

/./(L(((QQQ -((‹‹~‹‹ddc‹d‹daiiii-iii-iiiiiiiẳia

bố (di .aaiaia ao.

JợPn EERE HH HP RR Rene eee eee eee teen ee C6 00 0 L3 0 L6 C eee eee ee eee EE EE SHEESH EEEEEEEEEEESEEEEEEESEEEEEEES ERE EREEEE EEE ES ESET EERE REESE ES

TS bú 3<w@› LÁđš neXt pans na

gel UO —

TP.HCM ngày tháng năm 2015

Khoá luận tốt nghiệp Tran Thị Loan

Em cũng xin cảm ơn thay Dương Thúc Huy cô Lê Thị Anh Tuyết và cô LêThi Thu Hương đã giúp đỡ và cho em những ý kiến quý bau dé em có thé hoàn tat

đẻ tài của mình.

Em xin cam ơn quý Thay Cô Bộ môn Hóa hữu cơ khoa Hóa - Dai học Sưphạm thành phố Hỗ Chi Minh các thay cô đã hết lòng hướng dẫn giảng day và

truyền đạt cho em những kiến thức quý báu trong suốt thời gian em học tại trường

Cuỗi cùng em cũng xin cảm ơn tất cả các bạn trong phòng thí nghiệm Hợp chất thiên nhiên trường Đại học Sư phạm thành phố Hồ Chi Minh đã tận tình trao

đôi những kinh nghiệm, đoàn kết, gắn bó và tạo mọi điều kiện giúp đỡ nhau trong

suốt quá trình thực hiện đề tải

Em xin chân thành cam on!

Khoa luận tốt nghiệp Trân Thị Loan

MỤC LỤC

NHAN ẽẽẽ-ẽ- ẻẽ niacin (cố sa eaten l

CHƯƠNG 1 TONG QUANG ca neec ng tennniaeoebsstentoiintiisridfiotrssfigitrses 2

I.1 Vải nent Hồ Cie — ASHGIEEREE su unggggnntroaosttitirtggiagntgitragieiasase 2

1:2) Caécichitrong hig Cúc — ASI€TIGEBEtrccacirrarrtiaptiiiiiiiiigidiiiti1115151ã51.061856g8g888 4

Ì.5.iPBsdilnrthe vật dây cổ ĐH escscccccesscaxesassesescasarosceccanveasvassaserenverexncaseorored 4

Oh Baa et, Aa Ra chế ĐỀN eeanayaneeooaaenrnaeirrnnonnenurenosnunnre 5

1.3.3 Thanh phan hóa học có trong cây cỏ the ecscsecscsecsesesseseeeeseenesesneeeenees 6

CHƯƠNG 2 THỰC NGHIEM VÀ PHƯƠNG PHÁP .- 10

2.1.iĐỗi tượng nghiÊn C6 naaeoesesntrnnniisiioiniiiiiitpGIEDSI.010120078.18385803006104: 10

2.2-| PRONE pap NeniON) Eũi:c::z::¿cc:c:czzzcsczccriittz2gt21211171018211115011671620715003187048685338 10

2.2.1 Phương pháp cô lập các hợp Chat esccssssscsssscsssscssessssessessssesecsscseeses 10

2.2.2 Phương pháp xác định cau trúc các hợp chắt 5 «se 10

231/101 TENIE TTÌ6is6<2161426102255102218556552055035639555164953539536555555884356554935535595556356 95565468888 10

eS 102.3.2 Điều chế các loại cao và cô lập các hợp chất trong cao ethyl acetate 11 CHUONG 3 KET QUA VA BIEN LUẬN 5 <s5 cs<csessese 16

Khoá luận tốt nghiệ Tran Thị LoanP |

DANH MUC HINH ANH, SO BO, BANG BIEU

Trang

HINH ANH

HINH 1,1, Câu E0 sreoernarrnrranrrtrotriirilirtifriitBIITRGIIGEGTVAGGETD9 950/01 1100107010700 4 Hình 1.2 Hoa cỏ thc - -S SH HH ry 4

Hinh 3.1 Phân mảnh vòng A của hợp chat CTC16 0 00c0ccsccssceseeseesesceseeeseeseesees 17

Hinh 3.2 Phan mảnh II của hợp chất CTC l6 -<ccs©cseccsesscez 18

Hình 3.3 Cau trúc phing ba vòng A B C của hợp chất CTC16 - - 18Hình 3.4 Tương quan HMBC và 'H-'HCOSY của hợp chat CTC16 19

Hình 3.5 Cau trúc hoá học của hợp chất CTC16 và Minimosid 20

SƠ DO

Sơ dé 2.1 Quy trinh điều chế các loại CAO Lo ecececeecececsesesesseceescseseessescseseetevececerseevees 12

Sơ đồ 2.2 Quy trình sắc ký cột silica gel cao ethyl acetate .c- 555552 13

Sơ đỏ 2.3 Quy trình sắc ký cột silica gel phân đoạn A4 14

Sơ đồ 2.4 Quy trình sắc ký cột silica gel phân đoạn A2 -c©5c55c5552 15

BANG BIEU

Bang 2.1 Khối lượng của các loại cao và thu suất so với

bột mẫu nguyên liệu ban đầu ban đầu 2 - 2222 eSsx2xz+vzvverxrrrrsrrsrre HH

Bảng 2.2 Kết quả sắc ký cột trên cao ethyl acetate của cây cỏ the 13

Bang 3.1 Số liệu pho "H-NMR va C-NMR của hợp chat CTC16 20

Bang 3.2 Bang so sánh số liệu phố 'H-NMR va "C-NMR của hợp chat CTC 16 va

Miniimosllll:‹:: :ssceiccocoooerrooeoooeoooooo: = " 21

Bang 3.3 Số liệu pho "H-NMR của hợp chất CTT2 .c-5-cscccsseessces 22

Khoa luận tốt nghiệp Trần Thị Loan

DANH MỤC CÁC Ki HIỆU VÀ CHU VIET TAT

brs broad singlet (mũi đơn rộng)

COSY — Correlation Spectroscopy

d doublet (mii đôi)

dd doublet of doublet (mũi đôi đôi)

HSQC — Heteronuclear Multiple Quantum Correlation

HMBC — Heteronuclear Multiple Bonds Correlation

J coupling constant (hang s6 ghép spin)

m multiplet (mũi da)

NMR Nuclear Magnetic Resonance spectroscopy (phô cộng hưởng từ hat

nhan)

s singlet (mũi don)

SKC sắc ký cột

SKDC sắc ký lớp móng điêu ché

Khoá luận tốt nghiệp Tran Thị Loan

MỞ ĐÀU

Cây có từ lâu đã được ding nhiều trong các bai thuốc y học cô truyền dân

gian ở Việt Nam cũng như trên thẻ giới Đây là nguôn tải nguyên thực vật có giá trị

thiết thực trong việc phòng chữa bệnh cho nhân dân Từ cây cỏ các nhả khoa học

trên thẻ giới đã chiết xuât được nhiều hợp chat hóa học được dùng dé chữa trị nhiều

căn bệnh hiểm nghèo như hợp chat taxol được cô lập từ cây thông đỏ hợp chất

vinblastin tử cây đừa cạn dùng điều trị ung thư ngực ở phụ nữ.

Ngày nay sự kết hợp của ngành hóa học các hợp chất tự nhiên với các ngành

y được học sinh học đã khỏng ngừng nghiên cứu thành phan hóa học và hoạt tinhsinh học của các loại được thảo có trong các bai thuốc cỏ truyền, dé ứng dụng vào

việc chữa bệnh cho con người.

Việt Nam thuộc vùng khí hậu cận nhiệt đới với hệ thực vật rất phong phú đa

dạng Nhiều cây thuốc có giả trị sử dụng cao như cây sâm Ngọc Linh mọc ở tỉnh

Quảng Nam, cây thông đỏ mọc ở Lâm Đồng Đây là một thuận lợi lớn cho việc

nghiên cứu của các nhà hóa học các hợp chất thiên nhiên ở nước ta

Cây cỏ the từ lâu đã được dùng trong y học dân tộc để điều trị các chứng

bệnh như viêm họng cấp viêm mũi dj ứng viêm phế quản mãn tinh, ho gà trị chan thương, đau mắt đỏ, viêm mắt có mủ Tuy nhiên, ở Việt Nam chưa có công trình

khoa học nào công bố về nghiên cứu thành phần hóa học của cây cỏ the Vì lý do

đó, chúng tôi chọn cây cỏ the là đối tượng nghiên cứu trong đề tài này, với mongmuốn làm sáng tỏ thành phần hóa học của cây cỏ the, góp phần vào việc nghiên cứucác hợp chất tự nhiên tìm ra những hợp chất có hoạt tính sinh học nhằm nâng cao

gia trị sử đụng của được thảo Việt Nam.

Khoá luận tốt nghiệp Trần Thị Loan

CHƯƠNG 1 TONG QUAN

- Phân họ hoa lưỡi nhỏ (Liguiiflorae Cichorioideae): tất cả các hoa trong

cụm hoa đầu là hoa lưỡi nhỏ, không bao giờ có hoa ông Cây có nhựa mủ.

Ho Cúc phân bỗ rộng khắp thé giới, nhưng phô biến nhất tại các khu vực ôn

đới và miền núi nhiệt đới

Ở Việt Nam, họ Cúc có khoảng 125 chi, trên 350 loài chủ yếu lả cỏ dai, một

số được tròng làm cảnh (các loại hoa cúc) rau ăn (ngải cứu, cải cúc, rau diép), gia

vị (cúc tin)

& Mội sé đặc điểm thực vật của họ Cúc:

Thân cỏ hay bụi sống một năm hay nhiều năm, ít khi là dây leo hay cây gỗ.

Ré có thé phù lên thành củ, nhưng chất dự trừ ở đây không phải là tỉnh bột

mà là inulin (thược được).

Lá có hình đạng biến thiên không có lá kèm thường mọc đối hoặc tụ thành hình hoa ở góc có những loại lá có gai Thông thường phiến lá nguyên, xẻ sâu, hình dang lá kép hình lông chim hay hình chân vịt hiếm gặp.

Cụm hoa: Đầu có thé mang nhiêu hoa hay it hoa Dau có thé đứng riêng lẻhay tụ thành chùm gié, xim nhưng thông thường nhất là tụ thành ngù Có thé xemhoa tự đầu như một gié thu ngắn, trong đó các hoa đính theo một đường xoăn ốc hay liên tục hoa giả ở bia hoa non ở giữa Dạng thông thường của hoa tự đầu là hình nón nhưng cũng có thê phăng hoặc có khi lõm hình chén Đầu mang hai loại lá bắc: lá bắc ngoài bat thụ tạo thành một tông bao Các lá bắc này có thé đính trênmột hang (Seneciio, Tagetes) hoặc đính trên nhiều hàng kết hợp Hình dang và kích

2

Khoá luận tốt nghiệp Tran Thị Loan

SSeS

thước của lá bắc ngoài rat biên thiên O actisô các lá bắc ngoài nạc va phan nảy ăn

được La bắc ngoài có thé nguyên hay có răng có gai có những loại có màu như

cánh Lá bac thật có mang hoa ở nách là nhừng phiến mỏng hẹp đôi có lông Lábắc thật có thẻ phang hay cong xung quanh hoa, chúng có thẻ không có

Hoa: lưỡng tính mẫu năm bau dưới, không có lá bắc con Các hoa trên mộtđầu có thẻ giống nhau có cùng cách cau tạo cùng chức năng Kiểu đầu này gọi là

đồng giao với toàn nhừng hoa hình ông hoặc toan hoa hình lưỡi nhỏ có năm ranghoặc đôi khi toàn hoa hình môi Hoa tự dau có thể gòm hai loại hoa: hoa đều hìnhOng ở giữa có nhiệm vu sinh sản và hoa không đều hình lưỡi nhỏ có ba rang ở bìa,

dong vai trò của trang đề thu hút con trùng Kiéu dau này gọi là di giao.

Bao hoa: lá dai thường giảm vi nhiệm vụ bao vệ đã được đảm nhiệm bởi các

lá bac của tông bao Đài có thẻ biển mat, đôi khi chi còn một go nhỏ nguyên hay có

thiy, gờ có thé mang những vây hoặc một vòng lông tơ Sau khi thụ tinh, đài có thé

phát trién thành một mào lông, có thê láng hay có gai, có nhiệm vụ trong sự phát tán

của quả Tràng đo cánh hoa đính, có thé đều hình ống (trường hợp hia giữa của các

dau dị giao) hoặc không đều có dang lưỡi nhỏ có ba răng hay răng hoặc hình môi2/3 hoặc hình ông đài hơi cong

Bộ nhị: năm nhị bằng nhau đính trên ống tràng và xen kẽ với cánh hoa Chỉ

nhị rời nhau từ tông Cynareae Bao phan mở doc, hướng trong, đính nhau thành mộtông bao quanh vòi Chung đới thường kéo dài trên bao phan thành bộ Ngoài ra bao

phan còn mang ở gốc những phụ bộ choãi ra tạo thành những tai nhỏ che chở cho

mật hoa ở gốc vòi khỏi bị nước mưa

Bộ nhụy: hai lá noãn ở vị trí trước và sau tạo thành bau đưới một 6, đựng

một noãn đính đáy Dia mật ở trên bau Ở hoa lưỡng tính và hoa cái, vòi xuyên quađĩa mật và chia thành hai nhánh đầu nhụy (vòi không chia thành ở hoa bất thụ) Cácnhánh dau nhụy mang ở mặt đưới những lông dé quét hat phan khi vòi mọc xuyên

qua ông cau tạo bởi các bao phan Sự thụ phan nhờ côn trùng.

Quả bẻ thường mang một mao lông do dai biến đổi có khi mao lông đượcmang bởi một cuồng dai hay ngắn Đôi khi qua trần hoặc có móc hay có gai Hạt

không có nội nhũ lá mâm to, nhiều khi chứa đây dau.

3

Khoá luận tốt nghiệp Trần Thị Loan

Họ Cúc là họ có số loài được dùng làm thuốc lớn nhất trong giới thực vật Có

khoảng 51 loài của họ Cúc được dùng làm thuốc, trong đó có 18 loài được dùng

trong công nghiệp dược như các loài: atisô, bạch truật, cỏ nhọ nồi, cỏ ngọt, cúc hoa,cúc tần, hồng hoa, hy thiêm, ké đầu ngựa, khoản đông hoa, man tưới, mộc hương,ngải cứu, ngưu bàng, sài đất, thương truật, thanh hao hoa vàng, tử uyên

1.2 Các chi trong họ Cúc — Asteraceae

Ở Việt Nam, họ Cúc có khoảng 125 chi, trong đó có một số chỉ tiêu biểu, thường

gặp như chi Gerbera, chi Helianthus L, chi Cynara Cây co the là một loài thuộc chi

Centipeda.

1.3 Đặc điểm thực vật cây cỏ the"!

Cây cỏ the thuộc họ Cúc, chỉ Centipeda.

Tên khoa học: Centipeda minima (L).

Tên thông thường: nga bat thực thảo, địa hồ tiêu, cầu tử thảo, cóc man, cúc

man, thạch hồ tuy l

Cỏ the là một loại cỏ mềm, mọc bò lan trên mặt đất dm, thân rất nhiều cành,

ở ngọn có lông mịn trắng, nhưng toàn thân trông nhẫn bóng Lá đơn mọc so le, hình

ba lá cạnh, đầu tù, phía cuống hep lại, mép có một, hai hoặc ba răng cưa; dai 10-18

mm, rộng 6-10 mm, gân chính hơi nôi ở mặt dưới lá, gân phụ không rõ, không cócuống Cụm hoa hình dau mọc ở nách lá, hoa cái gồm nhiều lớp, cánh hoa hình ôngmàu trắng, trên có răng cưa, hoa lưỡng tính ít hơn Trang hoa hình chuông, có bốn

4

, ˆ Fy oye À “ *

Khoa luan tot nghiép Tran Thị Loan

SS

răng hình trứng rộng màu hoi tim Quả bé bốn cạnh, trên cạnh có lông mịn nhỏ

Mùa hoa tháng 2 - 5, mùa quả tháng 4 - 7 Dé dùng làm thuốc thường hái toan cây

gom ca rẻ ding tươi hay phơi hoặc say khô Cây mọc hoang khắp nơi ở vùng đồng ruộng ảm thấp ruộng bỏ hoang bờ rãnh ven đường Ngay cả trong các thành pho chỗ những chân tường âm khe gạch vỡ hở dat cũng thường hay gặp cây nay.

1.3.1 Phân bố, thu hái và chế biến

Co the mọc hoang ở nơi am thap hoặc ruộng bo hoang ở Việt Nam TrungQuốc (Quảng Tay Giang Tô Quang Châu) Malaysia Indonesia An Độ Nhật Bản.Chau Úc Mangat mọc phỏ biến sau vụ gặt mọc nhiều vào tháng giêng

Thu hái toàn cây vào mùa khô rửa sạch, dùng tươi hoặc phơi say khô

1.3.2 Công dụng

Cây cỏ the có vị cay mùi hắc, tính 4m, có tác dụng thông khiếu, tán thấp.khu phong tiêu thing, tiêu viêm, tiêu sung Cỏ the còn thường dùng làm thuốc chữa

ho, viêm phé quan, mat đau đỏ sưng, chảy nước dai, đau màng mộng mắt, viêm mũi

dị ứng hay dùng ngoài dé chữa bệnh mẫn ngứa (eczema), trị rắn cắn, đắp bó gay

xương !?l

Phan thân lá và hoa của cây cỏ the còn được sử dụng phê biến trong các bàithuốc dan gian Ví dụ như trong các bài thuốc dân gian của Trung Quốc, cây cỏ the

được dùng để chữa bệnh đau đầu, cảm lạnh, viêm kết mạc và bệnh sốt rét Ở Đài

Loan, cỏ the được nấu lấy nước dé tắm cho trẻ em bị bệnh ghé lở, hay uống để trị

các bệnh vẻ hệ tiêu hóa

Một số bài thuốc dân gian sử dụng cây co the:

e Chữa man ngứa (eczema): có the hai phan, đậu xanh một phan, muỗi vai hạt

Ca ba thir giã nhỏ dap lên nơi bị man ngứa đã được rửa sạch

e© Chita ho: cỏ the khô 20 g hoặc tươi 30 g, nước 500 ml sắc còn 100 mi chia

ba lan ung trong ngày

e© Chữa viém mũi nghẹt mũi: dùng cỏ the hoa mộc lan (mỗi vị 6 g) ké đầungựa (10 g) sắc lay nước uỏng Nêu dùng ngoài nghiên cỏ the tế tân và bạch chi

roi đặt moi lan một ít vào trong mũi.

Khoá luận tot nghiệp Tran Thị Loan

1.3.3 Thành phan hóa học có trong cây cỏ the

Năm 1989 Dipti Gupta va J Singh công bố bốn triterpenoid saponin mới từ

cay có the là acid - xvlopvranosid (1) acid l/.2z.3/.19ø.23-pentahydroxyurs- | 2-en-28-oic-28-O-/-D- xvlopyranosid (2) 3a.2la.32a.28-tetrahydroxyolean-l2-en-28-Ó-/-DÐ-xylopyranosid (3) 3a.16a.2la.22a,28-pentahy droxyolean-l2-en-3-O-f-D-xylopyranosy |-28-O D-

Nam 1990, cũng Dipti Gupta và J Singh đã nghiên cứu và tìm ra một số chat

trong cây cỏ the gdm: tetratriacontanyl nonadecanoat (5) sitosterol (6)

3.3”.5.5”-tetramethoxy sulben (7) 2-isopropy]-Š-methvlhydroquinon-4-(2-/-I)-xy lonyranosid (8) acid 24.3/.23.19a-tetrahy droxyurs-|2-en-28-oic-28-O-f-D-xylopyranosid (9).

6

Khoả luận tốt nghiệp Tran Thị Loan

Khoa luận tốt nghiệp Trần Thị Loan

——_== đ¬đằẰằẰẶẰĂẰẴĂ

Năm 1998, Robin s L Taylor và g H Neil Towers đã cô lập được ba

sesguiterpen lacton có hoạt tính kháng khuẩn là O-methylacrylylplenolin (12)

angeloyloxy-pnesudoguaia-8/ I2-old (21) 4.6œ-dihydroxy-2œ

-angeloyloxy-pesudoguaia-11(13)-en-8a@12-olid (22) 4-hydroxy-2

@-angeloyloxy-pesudoguaia-11(13)-en-8@,12-olid (23), 4.S-epoxy-2 @-angeloyloxy-guaia-11(13)-en-8,12-olid

8

Khoa luận tốt nghiệp Trần Thị Loan

(24) 4.5-cpoxy-2œ-isobutyryloxy-guaia- 1] 1{13)-en-8/,12-olid (25), plenolin (26) arnicolid D (27) pulchellin-2a-O-isovalerat (28) florilenalin-2a-O-isovalerat (29) Norilenalin-2a-O-isobutyrat (30) florilenalin-2a-O-angelat (31) và helenalin

(32),1!°!

Khoá luận tot nghiệ Tran Thị Loan¬

CHƯƠNG 2 THỰC NGHIỆM VÀ PHƯƠNG PHÁP

NGHIÊN CỨU

2.1 Đối tượng nghiên cứu

Trong phạm vi để tải này, chúng tôi chọn khảo sát cao ethyl acetate của cây

có the được thu hai tại tinh Vĩnh Long vào tháng 07 năm 2013 Cây được nhận danh tên khoa học boi TS Hoàng Việt, khoa Sinh, Trường Đại Học Khoa Học Tự Nhiên.

Thực hiện sac kí cột cao ethyl acetate với chất hap phụ silica gel sử dụng hệ

dung môi giải ly n-hexane-ethyl acetate với độ phân cực tăng dần thu được 5 phân

đoạn (được ký hiệu từ Al dén AS) Do giới hạn vẻ thời gian chúng tôi chỉ khảo sat

phan đoạn A4.

2.2 Phương pháp nghiên cứu

2.2.1 Phương pháp cô lập các hợp chất

Dé cô lập các hợp chat hữu cơ trong dé tai này đã dùng các phương pháp sac

ký, bao gồm sắc ký lớp mỏng silica gel, sắc ky lớp mỏng pha đảo RP-18, sắc ký lớp

mong silica gel điều chế, sắc ký cột silica gel, sắc ký cột pha đảo RP-18

2.2.2 Phương pháp xác định cấu trúc các hợp chấtPhương pháp chung dé xác định cấu trúc hóa học các hợp chất cô lập được làdùng các phương pháp quang phổ hiện dai, bao gồm phổ khối lượng phân giải cao,

phô cộng hưởng từ hạt nhân ( ID-NMR và 2D-NMR)

2.3.Thực nghiệm

2.3.1 Các điêu kiện thí nghiệm

Dung môi dùng trong sắc ký cột và sắc ký lớp mong là n-hexane,

chloroform, methanol, z-buthanol ethyl acetate.

Sắc ký lớp mỏng được thực hiện trên bản mỏng trang sẵn DC-Alufolien 60

Foss (Merck) và bản mong tráng sản RP-18 Foss (Merck) Các chất trên bản mỏng

được phát hiện băng đèn UV hoặc ding dung dịch H2SOx Ban mỏng sau khi khai

10

Khoa luận tot nghiệp Trân Thị Loan

———Ễ—-———ễ—————————————ễ——ễễ

triên bang hệ dung môi giải ly thích hợp được phun déu dung dịch H>SO¿ 25%, saykhỏ vả sấy nóng từ từ cho đến khi hiện mau

Phd công hướng từ hạt nhân được ghi trên máy Bruker AMS00 FT-NMR

Spectrometer (tan so S00 MHz đổi với phô 'H-NMR và 125 MHz đổi với phô

!?C-NMR) với TMS là chat nội chuẩn, CD:OD và CsDsN là dung môi

Khối phô phân giải cao đo trên may Bruker MicroTOF-QIL.

2.3.2 Điều chế các loại cao và cô lập các hợp chat trong cao ethyl acetate

2.3.2.1 Điều chế các loại cao

Cây tươi sau khi thu hái vẻ được rửa sạch va sây ở 60°C cho đến khi khỏi

lượng không đi sau đó mẫu nguyên liệu được xay nghiên thành bột thô thu được

3.3 kg Dun hoàn lưu 3.2 kg bột thô với dung môi methanol (3 lần x 3 giờ) lọc

nóng cô quay ở áp suất thấp thu hỏi dung mỏi được cao methanol Chiết phân bốlỏng - lỏng cao methanol này lần lượt với các dung môi có độ phân cực tăng dan là:eter đầu hoa, ethyl acetate và n-buthanol Cô quay các địch chiết, thu được các loạicao: cao eter dầu hỏa (320.2 gam) cao ethyl acetate (36.5 gam), cao n-buthanol

(13,6 gam).

Quy trình điều chế các loại cao được trình bày trong sơ đồ 2.1 Thu suất các loại cao

được trình bay trong bang 2.1.

Bang 2.1 Khói lượng của các loại cao và thu suất so với bột mẫu nguyên liệu