GOP PHAN NGHIÊN CUU THÀNH PHÁN HOA HỌC CUA DAY MUOP DANGPhó Trưởng phòng Hóa Học Các Hợp Chất Thiên Nhiên Thay da truyền dat cho em kiến thức chuyén môn, tận tình hướng dan kỳ thuật cũng
Trang 1BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO TRƯỜNG ĐẠI HỌC SƯ PHẠM TP.HÒ CHÍ MINH
œs£kÌgœ›
KHÓA LUẬN TÓT NGHIỆP
CỬ NHÂN HÓA HỌCChuyên ngành: Hóa hữu cơ
ĐÈ TÀI:
GÓP PHÀN NGHIÊN CỨU THÀNH PHAN HOÁ HỌC DAY MUOP DANG
(MOMORDICA CHARANTIA L.)
Người hướng dẫn Khoa học:
ThS PHUNG VAN TRUNG PGS TS NGUYÊN NGỌC HẠNH
Người thực hiện:
NGUYEN TAN PHÁT
THANH PHO HO CHi MINH
2010
Trang 2BO GIAO ĐỤC VÀ DAO TẠO
LÁT HC SU PHAM EP.I1O CHE VIINH
Người hướng dẫn Khoa học:
ThS PHUNG VAN TRUNG
PGS TS NGUYEN NGOC HANH
_ THU VIEN ` Ngườihựchiện:
hal hieMiNe
THÀNH PHO HO CHÍ MINH
2010
Trang 3GÓP PHAN NGHIÊN CỨU THANH PHAN HÓA HỌC CUA DAY MUGP DANG
(MOMORDICA CHARANTIA L.)
NHAN XET CUA GV
“ e **«« *6*#1999999416 949494969649 699661 69919696969 6969696969996 9696969961499 ESSE ES
SCRE TO TO Cee eee ee
SCORE EHH EEE ETE À EEE EOE ^^ 2 2 ^^
Doo oe Pee eee Pee PPP PPP eR PPR RPP RRR EPR RRR ERR RRR ERR ERR EERE RSS
SEE EEE EEE EEE EEE ETE ERR 44496,
OTERO HOOT Pee eee eee eee eee eee ree
CCE
DIPLO eee eee eee PPP PER ERR EER ERR ERR ERR EER RR ^^ 2 ^^ ^^ 2a
SORE EEE
OEE EEE EEE EEE EEE TEESE ETT CCH 6169699169699 ee eee eee eee eee
(Dea R RRR RRR EER RRR ERR RRR ERR ERR ERR RRR EER ERR EERE REESE REESE RASS
TROP ee eee eee RRR ERR RRR ERR RRR RR RER REE ERR RRR RRR RRR RRR EERE REESE
TROP PRP RRR PEER RRR ERR RRR ERR RRR EERE RRR RRR RRR EERE
TROP eee eee eR RRR ERR ERR ERR RRR ER RRR EERE RRR RRR RRR R RRR EERE EES
LPRoa RRR RRR REE RRR EERE ERR ERR RRR RRR ERR EERE REESE RRR RARE
(PoP eRe eee eee eee RRR ERR EERE RRR RRR REESE REESE 0V V6 6$ 69960 VQ ee
GV
ÔÔ
StTH NGL YEN TAN PHAT
Trang 4GOP PHAN NGHIÊN CUU THÀNH PHÁN HOA HỌC CUA DAY MUOP DANG
Phó Trưởng phòng Hóa Học Các Hợp Chất Thiên Nhiên
Thay da truyền dat cho em kiến thức chuyén môn, tận tình hướng dan kỳ thuật
cũng nue những kinh nghiệm hết site quỷ báu và đẩy tâm huyết trong suốt quả trình
thưc hiện luận van.
Các anh chị và các bạn thực hiện dé tài luận văn tại phỏng Hoá Học Các Hợp Chất Thiên Nhiễn, năm 2010 đã giúp đỡ em trong suốt quá trình học tập.
Quỷ thay cô Ban Giám Hiệu trưởng Đại Học Sư Phạm TP.HCM, Ban chủ
nhiệm Khoa Khoa Héa-Té Hóa Hữu Cơ, cùng tất cả quỷ thây cô giáo đã trang bị
cho em những kiển thức nên tảng vững chắc trong suốt thời gian học tại trưởng, niên
khỏa 2006-2010
Cuối cùng con rất cảm ơn gia đình đã giúp đỡ, động viên, tạo mọi điều kiện từ
vật chất đến tinh thân cho con học tập, nghiên cứu và hoàn thành luận van này
TP Hỏ Chi Minh, thang 0S, năm 2010.
NGUYEN TAN PHÁT
XITH NóI TÊN TAN PHAT
Trang 5GOP PHAN NGHIÊN CUU THÀNH PHÁN HOA HOC CUA DAY MUGP DANG
DANH MỤC CÁC KY HIỆU, CHU VIET TAT 6
DANH MUC CAC BANG §
1.1.2, PHAN BO VÀ SINH THAI 16
1.1.3 Y HỌC DAN GIAN CUA DAY MƯỚP DANG 16
113.1 Rể 16
1.1.3.2 Dây 16
1.1.3.3 Lá 17 1.1.3.4 Hoa 17
Trang 6GOP PHAN NGHIÊN CỨU THÁNH PHAN HOA HOC CUA DAY MUOP DANG
(MOMORDICA CHARANTIA L)
1.3.1.1 Cae triterpene glycoside được cô lập từ hat Mướp Dang 26
1.3.1.2 Cac triterpene glycoside được cô lập tử trải Mướp Đắng 28
1.3.1.3 Cae triterpene glycoside được cô lập từ lá và dây Mướp Dang
3.1.5 KHAO SÁT SỰ HIỆN DIỆN CUA CÁC HOP CHAT DUONG KHỨ
Trang 7GOP PHAN NGHIÊN CỨU THANH PHAN HOA HOC CUA DAY MUOP DANG
4 KET QUA VA THAO LUAN
4.1 ĐỊNH TINH CÁC HOP CHAT HỮU CO TRONG DAY MUOP DANG 33
4.2 CHIET XUAT S4
4.3 TINH CHE 55
5 KET LUẬN VA KIÊN NGHỊ
5.1.CAC KET QUA DAT DUOC 725.2 KIEN NGHỊ 72
TÀI LIEU THAM KHAO 73
PHU LUC 77
STH NGUYEN TAN PHAT
Trang 8GÓP PHAN NGHIÊN CUU THANH PHAN HÓA HOC CUA DAY MUOP DANG
Trang 9GOP PHAN NGHIÊN CUU THANH PHAN HOA HOC CUA DAY MUOP DANG
Trang 10GÓP PHAN NGHIÊN CUU THÁNH PHAN HOA HỌC CUA DAY MUOP DANG
(MOMORDICA CHARANTIA L )
DANH MUC CAC BANG
BANG TRANG
Bang 3.1: Kết qua sắc ky cột thường cao MCPE 50
Bang 4.2 Kết quá định tính các hợp chat hữu cơ trong dây Mudp ding 53
Bang 4.3: Dữ liệu phố ‘H-NMR, "C-NMR; DEPT va HMBC của MCPEI 56
Bang 4.4: Dữ liệu pho H-NMR, "C-NMR , COSY va HSQC của MCPEI 58
Bang 4.5: Dữ liệu pho 'ÌC-NMR va DEPT của MCPEI 60
Bang 4.6: So sánh dữ liệu phỏ "C-NMR của MCPEI với tài liệu tham khao — 6Ì
a
Bang 4.7: Dữ liệu phd H-NMR, "C-NMR va HMBC của MCPE3
Bang 4.8: Dữ liệu phổ "H-NMR, "C-NMR, COSY va HSQC của MCPE3 66
Bang 4.9: So sánh dữ liệu phổ "C-NMR của MCPE3 với tải liệu tham khảo 69
ele
SITH NGUYEN TAN PHAT
Trang 11GOP PHÁN NGHIÊN CỨU THÀNH PHAN HÓA HOC CUA DAY MUOP DANG
(MOMORDICA CHARANTIA L)
DANH MỤC CÁC HÌNH
HÌNH TRANG
Hình 1.1: Var charantia L 13
Hinh 1.2: Var abbreviata Ser 13
Hinh |.3: Dây Mướp ding l4
Hinh I.4: Hạt Mướp dang is
Hình 1.S: Hoa Mướp đẳng 15
Hình 1.6: Trái Mướp ding IS
Hinh |.7: Mướp dang tròng ở Trung tâm Nghiên cứu và Phát triển Dược liệu miễn
Trung (Phú Yên) 15
Hình 1.8: Tra Mướp đẳng của Viện Dược Liệu 21
Hinh 2.9: Dây Mướp đẳng được sấy trên sàn máy sấy 38
Hình 3.10: Sắc ký cột thường 49
Hình 3.11: Sắc ký bản mỏng 49
Hình 4.12: Kết quả khảo sát Alkaloid 54
Hinh 4.13: Két qua khao sat Sterol s4
Hinh 4,14: Kết quả khảo sat Saponin 54
Hinh 4.15: Kết qua khảo sát Tanin 54
Hình 4.16: Kết qua khảo sát Glycoside 54
NITH NGL TÊN TAN PHAT
Trang 12GOP PHÁN NGHIÊN CỨU THANH PHAN HOA HOC CUA DAY MUOP DANG
(MOMORDICA CHARANTIA L)
DANH MUC CAC SO DO
SO DO TRANG
Sơ đỏ 3.1: Quy trình chiết xuất cao 47
Sơ đỏ 3.2: Quy trinh cô lập vả tỉnh chế các hợp chất 49
œ====—=ï=ễEẺÃẼÃẼÃẼïẼ.A HAaa aaaaaá{¡` a5
§SITH NGUYÊN TAN PHAT
Trang 13GOP PHAN NGHIÊN CUU THANH PHAN HÓA HOC CUA DAY MƯỚP DANG
(MOMORDICA CHARANTIA L)
MO DAU
Hiện nay, bệnh đái tháo đường là một trong các bệnh mãn tinh, gây tử vong
cao, đứng hàng thứ ba trên thẻ giới sau bệnh tím mạch vả ung thư Đái tháo đường
ngày trở nên lả van dé lớn đối với giới y khoa cũng như đối với cộng đồng.
Vi vậy, đôi hói phải tìm ra các loại thuốc hiệu quả đối với bệnh đái tháo
đường Theo kinh nghiệm dan gian, có khá nhiều dược liệu được dùng lam thuốccho bệnh đái tháo đường Trong đó, được dùng khá phỏ biến là Mướp đẳng
Mướp dang hay còn gọi là khổ qua (Momordica charantia L., thuộc họ Bau
bí - Cucurbitaceae) được dùng làm thức ăn phỏ biến Trái Mướp đẳng có vị dang,
tinh hàn nên trong dan gian thường dùng để trị các bệnh mụn nhọt, giải nhiệt, sáng mắt, giám đau Khoa học ngày nay đã chứng minh địch chiết từ trái Mướp dang
có kha nang ức chế khỏi u, có tác dụng hỗ trợ men gan đặc biệt điều trị bệnh đáitháo đường Bên cạnh đó, nhiều nghiên cứu trên thé giới cũng chứng minh rằng
trong dây Mướp đăng cũng có nhiều thành phần hoá học quan trọng Tuy nhiên, các
nghiên cứu trong nước đối với dây Mướp đẳng cũng còn hạn chế Chúng tôi tiến
hành thực hiện dé tai: “Góp phần nghiên cứu thành phần hóa học của dây Mướp đắng (Momordica charantia L.)” để góp phần nghiên cứu thành phần hoá học của dây Mướp Đắng, làm cơ sở cho các việc nghiên cứu được tính của các hợp
chat cô lập từ Mướp Dang
Trong luận văn này, chúng tôi trình bày một số kết quả chiết tách, cô lập các
hoạt chất cũng như việc xác định cấu trúc các hoạt chất cô lập được, góp phân làm
sáng tỏ thêm thành phan hóa học của dây Mướp dang.
Trang 14GOP PHÁN NGHIÊN CUU THANH PHAN HOA HOC CUA DAY MUOP DANG
Trang 15GÓP PHAN NGHIÊN CUU THÀNH PHAN HOA HOC CUA DAY MUOP DANG
rén nước ngoài: Bitter melon, bitter gourd (Anh), bitter apple, wild cucumber.
bitter cucumber, ampalaya (Philipines), balsam pear (Mỹ), karela (An Độ)
{13, |
Tên Việt Nam: Khê qua, Mướp đăng, Lương qua, Cam lệ chi
Ngoài ra nó còn có nhiều tên khác như: Mướp mủ, chua hao, dưa mát, hồng cô nương hồng đương, bè dat, lại qua ''!,
Hiện nay dây vẫn còn tồn tại ở hai quần thể: mọc hoang và được trồng trọt Loại trồng trot rat phong phú vẻ giống nhưng đều được xếp chung vào chỉ Mướp
đẳng (Momordica charantia L ) Tuy nhiên, căn cứ vào kích thước, hình dang, màu
sắc của quả mà chia Mướp đắng thành hai loại: !`'!
~ Momordica charantia L var charantia L trái to (đường kính > Sem), mau
xanh nhạt, gai tù, it dang
~ Momordica charantia L var abbreviata Ser., trái nhỏ (đường kính < 5cm),
màu xanh đậm, gai nhọn, vị rất ding
Hình 1.1: Var charantia L Hinh 1.2: Var abbreviata Ser.
eee
SVTH: NGUYEN TAN PHAT
Trang 16Hình 1.5: Hoa Mướp đắng Hình 1.6: Trái Mướp đắng
Hình 1.7: Mướp đắng tròng ở Trung tâm Nghiên cứu và Phát triển Duge liệu miễn
[rung (Phú Yên)
5—= =.—.—.—.—-.-s====mmm====.=m=——x
SVTH: NGUYEN TAN PHAT
Trang 17GOP PHÁN NGHIÊN CỨU THÀNH PHAN HOA HỌC CUA DAY MUOP DANG
(MOMORDICA CHARANTIA L)
mS
1.1.2 PHAN BO VA SINH THÁI '-*Š **!
Diy Mướp đẳng phân bỏ ở vùng nhiệt đới va cận nhiệt đới khắp các châu lục.
Vir thời xa xưa, dây Mướp đắng được trồng lan đầu tiên ở Đông An và Nam Trung Quốc được sứ dung như là loại rau ăn qua giàu chất sắt và vitamin C Sau đó, dây
được du nhập sang châu Phi và khu vực Mỹ Latinh Quần thẻ Mướp đẳng đã trở nên rất phong phú với các giéng cây đa dang được tạo ra trong quá trình chọn giỏng va
lai tạo.
Ở Việt Nam, đây Mướp đẳng được trồng ở hau hết các tính từ Bắc, Trung.
Nam từ đồng bằng đến trung du và miền núi Ở một số vùng núi cao và lạnh như Sa
Pa (Lao Cai), Phó Bang (Hà Giang) không thấy có Mướp đắng.
Trên thể giới day Mướp đắng cũng cỏ mặt ở hau hết các nước nhiệt đới như
An Đỏ, Nam A, Đông Nam A, Trung Quốc, châu Phi và vùng Caribbean.
Dây Mướp đăng có biên độ sinh thái tương đổi rộng, nhiệt độ thích hợp cho
cây sinh trưởng tir 20 đến 35°C, lượng mua hang năm từ 1500mm đến 2500mm, cao
đỏ đến 1000m Dây Mướp đăng chịu đựng được nhiều điều kiện đất khác nhau nhưng phát triển tốt nhất trên đất thoát nước tốt, giàu chất hữu cơ.
Mướp đẳng có thé trồng quanh năm Dây sinh trưởng nhanh trong mùa mưa
âm ra hoa quả sau 7— 8 tuần gieo trồng Hoa thy phan chủ yếu nhờ côn trùng Sau
khi trái già, dây sẽ tàn lụi và kết thúc vòng đời sau 4 - 5 tháng tồn tại.
1.1.3 Y HỌC DÂN GIAN CUA DAY MƯỚP DANG
Hau hết các bộ phận của cây như rể, thân, lá, hoa, trái, hạt đều có thể dang làm
thuốc chữa bệnh |"!,
1.1.3.1 Rễ
Ré tươi, sắc nước uống, mỗi ngày một thang, từ 1000m! nước với 60g rễ
Mướp đăng tươi, sắc còn 400ml, chia làm 2 - 3 lần uống, có thé áp dụng cho mọi dang bệnh ''Ì, Rẻ Mướp ding dùng trị ly, nhất là amip Tại An D6, dịch rể (cũng
như lá, trái) Mướp đảng được dùng trị bệnh tiểu đường do có tác dụng lim giám
đường huyết Rể Mướp đắng còn có thẻ trị bệnh gan |"!
|**I
SITH NGUYEN TAN PHAT
Trang 18GOP PHAN NGHIÊN CUU THÀNH PHAN HOA HOC CUA DAY MUOP DANG
(MOMORDICA CHARANTIA L)
1.1.3.3 La
Lá có vị dang, tinh mát An lá non trị bệnh nóng bức trong mình Giã lá vắt
nước thêm chút muỗi, uống trị bệnh nóng mẻ man |*! hoặc trị mụn nhot, rém say |")
Ngoài ra, lá còn có thẻ trị được rắn cắn, làm thuốc nhuận trường, hạ sót Í'”!
thích hợp với những người đau gan, đau lá lách ©,
Ở Trung Quốc, trái Mướp dang còn dùng dé trị đột quy tím, bệnh sốt, khô
miệng, viêm họng Ở Án Độ dich trái Mướp đắng được dùng trị rắn cin Người ta
còn dùng bột trái Mướp đẳng để hàn các vết thương (làm kéo đa non), trị vết loét ác
tinh Ở Thái Lan, dich trải được dùng trị bệnh về gan, lá lách |"
Với tính diệt khuẩn và chống oxi hóa, trái Mướp đắng làm da mịn mang, trị
mụn trứng cá hay bệnh vấy nến, và ngay cả với vết thương do côn trùng cắn, nhiễm
trùng da Mặt khác, trái Mướp đăng còn cung cap nguồn năng lượng déi dào và tăng khả nang chịu đựng cho cơ thẻ ”!,
Ngoài các công dụng trên, trái Mướp đắng còn được dùng để trị nhiều bệnh như: trị ho, sốt, kiết ly, dạ dày, đau tức, đái đắt, phù thủng do gan, mắt đô đau nhức,
giải nhiệt, hồi hộp, buồn phiền, tắm cho trẻ em trị rôm say, làm ha đường huyết ở
bệnh nhân đái tháo đường type II (không phụ thuộc insulin) ÍŠ '?Ì,
1.1.3.6 Hạt
Hạt có chất béo, vi đăng, hơi ngọt, tính dm, thanh nhiệt, giải độc, giải cảm, trị
ho, lợi tiểu Hat còn chữa rắn cắn, chữa nhọt độc sưng tay, vết thương nhiễm tring,
hạ sot" dau họng và chéng thụ thai °*!, Tại nhiều nước khác, hạt Mướp đẳng
được dùng dé trị bệnh đái tháo đường '° 7!
Ngoài ra, theo một sẻ nghiên cứu gần đây cho biết các hoạt chất trong hạt
Mướp đăng con có tác dụng chống ung thư, làm hạ huyết áp, kháng virus HIV !
SITH NGUYEN TAN PHAT
Trang 19GOP PHAN NGHIÊN CỬU THÀNH PHAN HOA HOC CUA DAY MUOP DANG
(MOMORDICA CHARANTIA L)
1.2 CAC NGHIÊN CỨU VE MƯỚP DANG
1.2.1 THÀNH PHAN HOA HOC
1.2.1.1 Nước ngoài "**"*
Người ta đã tìm thấy khoảng hơn 200 hợp chất có trong cây Mướp đẳng va
được thống kê sơ bộ thành các nhóm chính như sau:
¢ Momordicin I, momordicin II.
~ Triterpene saponin; Goyasaponins I, H, II.
~ Các triterpene khác:
® Momordicin, momordicinin, momordicilin.
e Cucurbitane triterpenoid 3, cucurbitane triterpenoid 6.
¢ Momordicine I.
se ƒ-amyrin, cycloartenol, erythrodiol, gypsogenin, karounidiol,
multiflorenol, oleanolic acid, squalene, taraxerol
~ Sterol: Elasterol; lanosterol; momordenol; f-sitosterol; a-spinasterol:
stigmastcrol; —_ stigmasta-5-ene-3B,25-diol; suigmasta-5,25-dien-3ƒ-ol; stigmasta-7,22,25-trien-3}-ol; stigmasta-7,22-dien-3[}-ol
———————<—«<<—«<«x<<_<_<_=_—_—_——————————E——————————— ee ——
SUTH NGUYEN TAN PHÁT
Trang 20GOP PHAN NGHIÊN CUU THANH PHAN HOA HOC CUA DAY MUOP DANG
(MOMORDICA CHARANTIA L)
1.2.1.1.3 Protein
~ p-insulin, v-insulin.
—Map-30.
~ Momorcharin |, momorcharin I], a-momorcharin, ƒ-momorcharin,
A-momorcharin, €-A-momorcharin, y-momorcharin.
~ Momordin, momordin A, momordin B.
— Ribosome-inactivating proteins 1, 2 3, 4.
— Trypsin inhibitor MCTI-l, trypsin inhibitor MCTI-IL, trypsin inhibitor
MCTI-II.
~ Các protein khác: Alanine, B-alanine, phenylanaline, arginine, asparagine,
aspartic acid, BGIT, y-aminobutyric acid, citrulline, glutamic acid, glycine,
histidine, lectin, leucine, isoleucine, lysine, momordica agglutinin,
omithine, proline, serine, threonline, tyrosine
ƒ-carotene, cryptoxanthin, lutein, lycopene, mutatochrome, phytofluene,
rubixanthin, zeaxantin, zeinoxanthin
Ngoai ra còn có các thành phần khác: Alkaloid: charine, zeatin, zeatin
riboside : Monoterpcnc: p-cymene, menthol; Sesquiterpene: Nerolidol;
Sapogenin: Diosgenin; Các chất khoáng: Ca, Mg, Fe, Cu, Zn, P, N, I, E
Trong nhiều nghiên cứu, người ta đã chứng minh được rằng có ít nhất ba nhóm
hợp chất có tác dụng làm giảm lượng đường huyết hoặc có hoạt tính kháng đái tháo
đường Dé là hỗn hợp của hai saponin steroid gọi là charantin, các peptide gidng
insulin (p-insulin) vả alkaloid Các hợp chất nảy chủ yếu tập trung ở trải Mướp
đăng.
—
SITH NGUYEN TAN PHAT
Trang 21GOP PHÁN NGHIÊN CỨU THÀNH PHAN HOA HOC CUA DAY MUOP DANG
(MOMORDICA CHARANTIA L)
1.2.1.2 Trong nước
Các tác gid Phạm Văn Thanh, Phạm Kim Man, Đoàn Thị Nhu, Nguyễn
Thượng Dong, Vũ Kim Thu, Nguyễn Kim Phượng và Lẻ Minh Phượng của Viện
Dược liệu đã thông kê và khảo sát sơ bộ các nhóm hoạt chất chính của cây Mướp
ding Tuy nhiên, các tác gia này chưa cô lập được các hoạt chất có hoạt tính dưới
dang chat tinh khiết cũng như chưa xác định cau trúc của các hoạt chất này, mà chỉ
định lượng theo chat G6, một aglycon của nhóm glycoside '**!,
Các tác giá Nguyễn Minh Đức va Trần Thị Vy Cam đã chiết tách và phân lập
được 4 hợp chất Mc;, Mc), Me; và Me, từ cao MeOH của hạt Mướp đẳng Trong đó
Me, được xác định la Momordicoside A va Mc; đã được sơ bộ dự kiến cấu trúc t1,
Các tác giả Nguyễn Thanh Hồng, Nguyễn Ngọc Hạnh, Phùng Văn Trung ở
Viện công nghệ Hóa học đã cô lập va nhận danh được hai hợp chất từ hạt:
Momordicoside A va Momordicoside B và bến hợp chat từ trái: Momordicoside K,Momordicoside L, 3-Ó-[ƒl-D-glucopyranosyl]-stigmasta-5,25(27)-diene và 23-0-ÿ-
D-allopyranosy! Š{3,L9-epoxycucurbita-6,24-dien-3/,22,236-triol 3-đ-[ƒ-D-allopyranoside [24]
1.2.2 TÁC DUNG DƯỢC LY
1.2.2.1 Nước ngoai
Theo y học hiện đại, Mướp ding có tác dụng:
— Diệt vi khuẩn và virus, chống lại các tế bao ung thư, hỗ trợ đắc lực cho
bệnh nhân ung thư đang chữa bằng tia xạ
— Chống các gốc tự do - là nguyên nhân gây lão hóa va phát sinh các bệnh
tim mach, tăng huyết áp, rối loạn lipid máu, tổn thương than kinh, viêm đường tiết
niệu, đái tháo đường.
~ Tang oxy hóa glucose, ngăn chặn sự hap thu glucose vảo tế bảo Ue chế
hoạt tính các men tổng hợp glucose.
— Có tác dụng sinh học giống insulin, giúp cơ thẻ tăng tiết insulin.
~ Có tác dụng tốt với người mắc bệnh đái tháo đường type II Hỗ trợ tăng tác
dụng giảm liễu vả giảm tác dung phụ của các loại sulfamid trị đái thảo đường type II
Dịch chiết trai Mướp đẳng có khả năng ức chế khối u Í*”-?* **Ì hỗ trợ men gan
1 chia được nhiều bệnh như đái tháo đường, lách, gan, khớp gout !?3 **- 1% 39).
SITH NGUYEN TAN PHẬT
Trang 22GOP PHÁN NGHIÊN CUU THÁNH PHAN HÓA HỌC CUA DAY MUOP DANG
(MOMORDICA CHARANTIA L.)
I3
Theo tải liệu |", cao MeOH 50% tử trải Mướp đăng cho tác dụng hạ đường
huyệt 25% (liều ding 30mg/kg) cao butanol cho kết qua là 34% với liều dùng như
trên Các tác giả này cho rằng các hợp chất phân cực, tan nhiều trong butanol có khả
nang lam giảm đường huyết Cơ chế hoạt động tương tự insulin hoặc thông qua sự
tiết insulin từ tuyển tụy
Nghiên cứu in vivo trên thỏ gây đái tháo đường thực nghiệm bằng Alloxan chothấy khi dùng nước ép trái Mướp đắng với liễu dùng 6ml/kg B.W cho kết quả tối
ưu làm giám lượng đường máu ở thỏ bình thường sau 2 giờ và tăng trở lại sau 3
giờ Tuy nhiên ở thỏ mắc bệnh, lượng đường mau tiếp tục giảm tới 4 giờ sau khi
cho uống rồi mới bat dau tăng trở lại BI
Theo báo cáo của Đại học Y khoa Calcuta (An Độ) đã thử nghiệm cho 6 bệnh
nhân đái tháo đường type II uống mỗi ngày một lần 100ml nước sắc Mướp đắngtươi Sau 3 tuân lễ uống thuốc liên tục, đo lượng đường trong máu (khi đói) đã giảmđược 54% so với ban đầu Sau 7 tuần dùng thuốc, cả 6 bệnh nhân đều không thấy
đường trong nước tiểu, lượng đường trong máu như người bình thường.
1.2.2.2 Trong nước
Y học cổ truyền và dan gian Việt Nam đã có nhiều kinh nghiệm chữa bệnh từ
Mướp đắng, nhưng chi ở dang nguyên liệu thô ban đầu hoặc ở các dang nước ép,
nước sắc mà thôi Ngày nay, trên thị trường đã xuất hiện nhiều sản phẩm trái Mướpding nhưng đa số ở dang thực phẩm chức năng như trà hòa tan, trả túi lọc Điển
hinh lả sản phẩm tra Mướp đắng của Viện Dược liệu.
Hình 1.8: Trả Mướp đăng của Viện Dược Liệu
Nhóm tác gia Phạm Văn Thanh Phạm Kim Mãn Đoàn Thị Nhu va cộng sự đã
sản xuất chế phẩm Morantin từ thành phan glycoside của trái Mướp dang dạng to.mau trắng va chứng minh tác dụng hạ đường huyết của nhóm glycoside trên thé gây
đái tháo đường thực nghiệm bing Alloxan @*).
SƯTH NGUYEN TẤN PHAT
Trang 23GOP PHAN NGHIÊN CỨU THÀNH PHÁN HOA HOC CUA DAY MƯỚP DANG
(MOMORDICA CHARANTIA L)
Các tác giả Nguyễn Thi Nhu, Nguyễn Thi Bay đã nghiên cứu tác dụng hạ
đường huyết của một bai thuốc nam trên thực nghiệm lâm sảng, đó là sản phẩm trảtúi lọc ma thành phan trai Mướp dang chiếm 60%
Các tác giá Mai Phương Mai, Võ Phùng Nguyên cũng đã thăm dò tác dụng hạ
đường huyết của một số bai thuốc dân gian ở mô hình đái tháo đường bằngstreptozotocin trên chuột nhắt ma thành phan của bai thuốc cũng có chửa trái Mướp
ding,
Các tác giả Mai Phương Mai, Nguyễn Thị Hạnh, Nguyễn Ngọc Hạnh đã chứng
minh tác dụng hạ đường huyết của ¬ dịch chiết từ trái Mướp đắng thu hái tại Phú
Yên bằng các dung môi khác nhau l°
1.2.2.3 Một số hoạt chat đã phân lập từ Mướp Dang
MAP, một protein kháng siêu vi khuẩn, có ức chế nhiễm virus HIV-1 ở tế bảo
Ixmpho T va bạch cau đơn nhân to, nó không độc với tế bảo bình thường không bị
nhiềm.
Hạt va vo trai Mướp dang chứa một chất nhựa, một saponin glycoside, va
những alkaloid gây nôn và tiêu chảy Nhiều protein có hoạt tinh được lý được phânlập từ hạt Mướp dang, như các protein œ-momorcharin và ƒ-momorcharin có tác
dụng độc hại gan trên tế bao gan chuột cô lập.
Ở Trung Quốc, người ta đã phân tách được hai hoạt chất hạn chế sinh sản là
a-protein vả ƒ-protein từ hạt Mướp đắng Các thí nghiệm nuôi cấy, ghép phôi invitro cho thấy 2 hoạt chất này có tác dụng ức chế quá trình làm dảy đặc nguyên bảo
phôi trước khi làm tế và hình thành phôi ở thai ky đầu, từ đó phôi ngừng phát triển, thoái hóa phân hủy dan đến say thai ©!
Những nghiên cứu gin đây cho thấy a-protein và ƒ-protein Mướp đắng cũng
có anh hướng đền sự sinh san của phôi chuột nhất trang và ảnh hướng đến việc tổng
hợp phán tứ lớn tế bảo nội mô tử cung; ching cũng có khả năng ức chế tổng hợp
ADN, ARN và protein, làm cho sự phát triển của nội mạc tử cung bị ức chế Í**],
TĂẮÄ] -Ỷ-Ỷ ẳ-Ỷ=ỶễỶ-sễỶ-ễỶ-Ỷ-ỶẳỶẳễr=z-.-.r-ễỶễẳỶ-
V7 NGUYEN TAN PHAT
Trang 24GOP PHAN NGHIÊN CỨU THANH PHAN HÓA HỌC CUA DAY MUOP DANG
(MOMORDICA CHARANTIA L)
ee —_——— ———————————————————
Năm 1962, Lotlikar và Rao lan đâu tiên cô lập được charantin với hàm lượng
khoảng 0.01% Í“!Ì, Đến năm 1965, Sucrow đã xác định được đây là một hỗn hợp 2
steroid glycosides (ti lệ 1:1) gồm diene va B-sitosterol-3-O-f-glucoside '°Ì, với công thức lần lượt như sau:
3-Ø-[j-D-glucopyranosyl]-stigmasta-5,25(27)->»
,
Ta
CTPT: C;sH„O¿ (M # 576)
Năm 1966, Lotlikar và Rao đã đưa ra qui trình chiết xuất charantin với hảm
lượng cao hơn, đồng thời công bó về hoạt tính kháng đái tháo đường của hoạt chat nay, được phân lập tử địch chiết E(OH của trái Mướp đắng khô "*"!,
Sau dé đến năm 1979, Pugazhenthi và Suryanarayana Murthy đã khẳng định
một Lin nữa charantin là hỗn hợp 2 chat và hoạt tính sinh học của nó vẫn có thé mắt
di trong quá trình chiết xuất kéo dài **
Hoạt tính kháng đái tháo đường của charantin |“
SI7TH NGL YEN TAN PHAT
Trang 25GOP PHAN NGHIÊN CUU THÀNH PHAN HOA HỌC CUA DAY MUGP DANG
(MOMORDICA CHARANTIA L)
os
Tiên hành kháo sát hoạt tính kháng đái tháo đường của charantin trên thỏ gâyđái thảo đường thực nghiệm bang Alloxan:
— Chọn thỏ ở cả con đực vi con cái với trọng lượng cơ thé vao khoảng 1.5
-3kg được gây đái tháo đường bang cách tiêm Alloxan qua tĩnh mạch với liều lượng
300mg/kg Chỉ có 4 trong 20 con còn sống sau 5 ngày được tiếp tục tem đi khảo sat.
~ Charantin hòa tan trong Tween 80 với nồng độ 0.3% Xử lý bằng cách choudng hoặc tiém qua tĩnh mạch 5ml dung dịch này Mức đường huyết giảm dẫn từgiờ thứ nhất đến giờ thứ tư sau khi xử lý nhưng sau đó sẽ từ từ lay lại mức ban dau
- Hoạt tinh cua charantin có hiệu lực hon 5 giờ, cao nhất ở giờ thứ tư, được ghi nhận là có tác động như nhau ngay cả khi xử lý bằng cách cho uống hoặc tiêm
qua tĩnh mạch Với liễu 50mg/kg cho uống làm giám 42% lượng đường huyết ớ giờthir tư va giám còn 28% ở giờ thir năm sau xử lý Tuy nhiên khi sử dung với liễu
lượng 25mg/kg cho uống sẽ cho kết quả giảm đường huyết tương ty chỉ với liều
dùng l5mg/kẹ tiêm qua tinh mạch.
Charantin cho hoạt tính giảm đường huyết cao hon Tolbutamide, một loại
thuốc thông thường đẻ chữa đái tháo đường với cùng liễu dùng Mặc dù cách thứcthay đổi glucose huyết khi xử lý ở cả 2 trường hợp đều giống nhau
Tuy nhiên việc charantin có phải là chất duy nhất trong trái Mướp đắng cóhoạt tính giảm đường huyết hay không vẫn cỏn là vin đề đang được dat ra Vi giá
sử để có được 50mg charantin can tới hơn 1.Skg trái tươi Trong khi theo các nghiên
cứu, chỉ với liều dùng 50 - 60ml nướp ép trái Mướp đắng hàng ngày đã cho kết quả lâm sang tết, chứng tỏ không phụ thuộc hoàn toản vao rất ít khối lượng của charantin có
400mg/kg Trong khi đó hai phan aglycon của charantin đã không thẻ hiện bất ky
tac dung hạ đường huyết Day cũng là nghiên cửu đầu tiên chứng minh hợp chấtCucurbitanoid thuần khiết của dây Mướp Dang có anh hưởng hạ đường huyét
1.3 HO TRITERPEN' '
[riterpen có công thức tổng quát C;;H„; Chất liệu cơ bản để sinh tong hợp làpharnesy! pyrophosphate, Triterpen được phân bố rộng rãi trong giới động va thực
vat, hiện điện o dang tự do hoặc glycoside.
SUTH NGUYEN TAN PHÁT
Trang 26GOP PHAN NGHIÊN CUU THỈNH PHAN HOA HOC CUA DAY MƯỚP DANG
Loại 4 vòng thi được chia thành 3 loại:
— ~ Nhóm dammaran: Đại diện là các saponin của nhân sâm Phần aglycon
gòm 4 vòng và một mạch nhánh Phần đường nổi vaio -OH ở C-3 hoặc nối vào
nhóm -OH ở mạch nhánh
~ Nhóm lanostan: Đại diện là các saponin của loài hải sâm Các saponin của
động vật này có tác dụng phá huyết rat mạnh, mạnh hơn các saponin có nguôn gốc
thực vật.
- Nhóm cucurbitan: Phần lớn các saponin nhóm cucurbitan gặp trong họ
Cucurbitaceae (họ Bau bí) O đây nhóm CH, ở vị trí C-10 sẽ gắn vào vị trí C-9
SITH NGUYEN TAN PHAT
Trang 27GOP PHAN NGHIÊN CỨU THANH PHAN HÓA HOC CUA DAY MUOP DANG
— Công thức chung: CH;;O,‹;ÌM = 816 đvC; mp= 181 - 187°C; [ø]”›= +1.05°.
— Công thức cau tạo:
1.3.1.1.2 Momordicoside B
~ Momordicoside B:
3-Ó-ƒ)-D-xylopyranosyl(I—+4)-[f-D-glucopyranosyl(I—s6)|}-j-D-glucopyranosde của cucurbit -Š-en-3
J.22(S),23(R),24(R) 25pentaol.
~ _ Công thức chung: C„;H„/O¡s: M = 948 đvC; mp = 238 - 242°C; [a]”o= +6.15°.
~ Công thức cau tạo:
eee
SITH NGUYEN TAN PHAT
Trang 28GOP PHAN NGHIÊN CUU THỈNH PHAN HÓA HỌC CUA DAY MUGP DANG
~ _ Công thức chung: Cạ;H;;O¡¿;M = 800 dvC; mp = 224 - 227°C; |a]”o= +l3.9.
— Công thức cau tạo:
1.3.1.1.4 Momordicoside D
- Momordicoside D: 3-Ø-J-gentiobioside của cucurbita-5,24-dien-3
B,22,23-trol
— Công thức chung: CHO); M = 782 dvC; mp = 199 - 203°C; [a}”›= -126°.
— Công thức cau tạo:
SUTM NGUYEN TAN PHÁT
Trang 291.3.1.2 Các triterpene glycoside được cô lập tir trái Mướp đẳng
1.3.1.3.1 Momordicoside F;
- Momordicoside F,: 3-Ó-j-D-glucopyranoside của
Š,l9-epoxy-2Š-methoxy-5J-cucurbita-6,23-dien-33-ol.
~ Công thức chung: CyHwOx; M = 632 đvC; kết tinh trong MeOH-H;O
(1:1) cho tinh thể hình kim, không mau; mp = 198 - 203°C; [a]”’p = -111°
Trang 30GOP PHAN NGHIÊN CUU THÁNH PHAN HOA HỌC CUA DAY MƯỚP DANG
(MOMORDICA CHARANTIA L)
— Công thức chung: C;;H;gO;; M = 618 dvC; kết tinh trong acetone-H;O cho
tỉnh thẻ hình vay, không mau; mp = 155 - 158°C.
~ Công thức cấu tạo:
1.3.1.2.3 Momordicoside G
— Momordicoside G: 3-Ó-J-D-allopyranoside của 5,19
-epoxy-25-methoxy-$B-cucurbita-6,23-dien-3p-ol.
— Công thức chung: C;;H„yOx; M = 632 dvC; két tinh trong CHyCN-H,O cho
tinh thé hinh kim, không mau; mp = 183 - 187°C; [u]}”b»= -107.3°.
— Công thức cấu tạo:
Trang 31GOP PHAN NGHIÊN CUU THÁNH PHAN HOA HỌC CUA DAY MUOP DANG
(MOMORDICA CHARANTIA L)
— Công thức chung: CyHaOs: M = 618 dvC; kết tinh trong MeOH 50% cho
chat bột mau trắng; mp = 210 - 216°C; fa}’"y = -110° (C=1,00; MeOH),
~ Công thức cau tạo:
1.3.1,2.58 Momordicoside K
- Momordicoside K: 3-O-B-D-glucopyranoside của 3ÿ, 7ƒ-dihydroxy
-25-methoxy cucurbita-5,23-dien-19-al,
— Công thức chung: C;;H„¿O¿; M = 648 đvC; kết tinh trong MeOH cho tinh
thé hình kim, không màu, vị đẳng; mp = 236 — 237°C; [a]”’p = 63.3”
— Công thức cấu tạo:
Trang 32GOP PHAN NGHIÊN CUU THỈNH PHAN HOA HOC CUA DAY MUOP DÁNG
(MOMORDICA CHARANTIA L)
~ Công thức chung: CyHssOo; M = 634 đvC; kết tinh rong CHCl;-MeOH
cho tinh thé hinh kim, không mau, vị đắng; mp = 227 - 232°C; [a}TM"y = +57.3°.
— Công thức câu tạo:
*Các saponin glycoside 9!
1.3.1.2.7, Goyasaponin |
- Goyasaponin I: 28-O-f-D-xylopyranosy! (1-4)-
œ-L-rhamnopyranosyl(l-2)-[ a-L-rhamnopyranosy! (1-3)- B-D-fucopyranosy! gypsogenin 3-O- galactopyranosy! (1-2)- B-D-glucopyranosiduronic acid.
j-D COng thức chung: C¿;H;¿O¿;; M = 1378 đvC; dang bột, mau trắng [a]""y
= -13.5° (C=0,5; pyridine),
SUTH NGUYEN TAN PHAT
Trang 33Goyasaponin |
1,3.1.2.8 Goyasaponin II
- Goyasaponin Il: 28-@-J-D-xylopyranosyl (1-3)- ð -D-xylopyranosyl( |
-4)-a-L-rhamnopyranosy! (I-2}-{ q-L-rhamnopyranosul( 1 -3)]- fucopyranosy! gypsogenin- 3-O- j-D-galactopyranosyl(l-2)- ƒ}-D- glucopyranosiduronic acid.
j-D Céng thức chung: CyoH) Oss; M = 1510 dvC; dạng bột, mau trắng, [ơ] ›
= -18.5° (C=1,0; pyridine).
- Công thức cấu tạo:
SITM NGUYÊN TẤN PHAT
Trang 34GOP PHAN NGHIÊN CUU THÀNH PHAN HOA HỌC CUA DAY MUOP DANG
1.3.1.3 Các triterpene glycoside được cô lập từ lá và dây Mướp đắng Í*'“°!
I.3.1.3.1 Cucurbitan triterpenoid |
~ Cucurbitan triterpenoid I: 36.78,23-trihydroxycucurbita-5,24-dien-7-O-
Trang 35GOP PHAN NGHIÊN CUU THÀNH PHAN HÓA HỌC CUA DAY MUOP DANG
— Công thức cấu tạo sau:
1.3.1.3.3 Cucurbitan triterpenoid IIT
~ Cucurbitan triterpenoid Ik 3,7
ƒ-đihydroxy-25-methoxycucurbita-53.(23E)-dien-19-al.
— Công thức chung: C;;H‹¿O,; M = 486 dvC; dang bột vô định hình;
[a]”u = +48.9° (C=0,45: MeOH)
— Công thức cấu tao:
SITH NÓt TẾ N TAN PHAT
Trang 36GOP PHAN NGHIÊN CUU THÁNH PHAN HÓA HỌC CUA DAY MUOP DANG
Trang 37GÓP PHAN NGHIÊN CỨU THÀNH PHAN HOA HOC CUA DAY MUOP DANG
(MOMORDICA CHARANTIA L)
2.1 NGUYEN LIEU
Nguyên liệu là phần trên mat dat của dây Mướp đăng (loại Momordica
charantia L var abbreviata Ser) được cung cấp bởi Trung tâm Nghiên cứu và Phát
triển Dược liệu miền Trung, thu hai ở Đông Hòa — Phú Yên Dây được cắt khúc
nhỏ rồi sấy khô ở nhiệt độ dưới 60°C đến khối lượng không đổi
2.2 HÓA CHAT
— Ether petroleum, AR, Trung Quốc.
Chloroform, AR, Trung Quốc.
~ Ethyl acetate, AR, Trung Quốc.
— Methanol, AR, Trung Quốc
~ Butanol, AR, Trung Quốc
Ethanol 95°, AR, Viét Nam.
— Silica gel 60 Fa‹¿ Scharlau, đường kính hạt: 0.04 - 0.06mm.
2.3 THIET BI
— Các loại cột sắc ky.
Máy cô quay chân không BUCHI Ratavapor R-200
Sắc ký lớp móng TLC được thực hiện trên ban Silica gei 60 E>+s¿, MERCK tráng
sẵn.
_—_—_—_———————cE-=-r-r-cr-r r-rcr=-r-rcccXcTE=—T=Tễï————————
SVTH, NGUYEN TAN PHAT
Trang 38GOP PHAN NGHIÊN CỨU THANH PHAN HOA HỌC CUA DAY MUOP DANG
(MOMORDICA CHARANTIA L)
— Đèn UV: MINERALIGHT ® LAMP, U.S.A
~_ Binh phun xịt thuốc thử
~ Bếp điện dùng nướng bản móng Blacker"
~ Điểm chảy (mp°C) được đo trên máy Electrothermal IA 9000 Series, dùng
mao quan, không hiệu chính.
~ Phỏ cộng hướng từ hạt nhân NMR được đo trên máy AVS00, Bruker (do
Trang 39GOP PHAN NGHIÊN CUU THÀNH PHAN HOA HOC CUA DAY MUOP DANG
Trang 40GOP PHAN NGHIÊN CUU THANH PHAN HOA HOC CUA DAY MUOP DANG
(MOMORDICA CHARANTIA L )
3.1 ĐỊNH TINH CAC HỢP CHAT HỮU CƠ TRONG TRAI MUOP DANG
3.1.1 Khao sat sự hiện diện của các hợp chất alkaloid '" ° '
3.1.1.1 Thuốc thir alkaloid
Có rất nhiều thuốc thứ cho phan ứng mau hoặc kết tủa với alkaloid
* Phan ứng tạo kết tủa có màu:
— Thuốc thử Mayer: 1.35g HgCl hòa tan trong 100ml dung dich KI 5%
e Hiện tượng: tạo két tủa vô định hình màu trăng vàng
— Thuốc thử Dragendoff:
+ Dung dich A: 850mg Bi(NOs); trong 40ml HO va 10ml acetic bảng.
+ Dung dịch B: Hoa tan 8g KI trong 20ml H;O.
Trộn hai thẻ tích bằng nhau của hai dung dịch A vả B để làm thuốc thử
e Hiện tượng: tạo kết tủa có mau từ vàng cam đến đỏ,
~_ Thuốc thử Wagner: hòa tan 5g lod trong 100m! dung dịch KI 10%
e Hiện tượng: Cho kết tủa mau nâu sáng đến nâu đen.
~ _ Thuốc thử Bouchardat: 2.5g lod và 5.0g KI hòa tan trong 10ml nước cắt
e Hiện tượng: kết tủa mau nâu hoặc mau vàng đậm
3.1.1.2 Dinh tính alkaloid
Tam 10g bột dây Mướp ding bảng 5ml dung dịch NH.OH 25% Day kin
bang giấy lọc rồi dé qua đêm Sau đó đem chiết với 25ml CHCl) Dịch CHC]; đượclắc với l0ml dung địch HạSO; 2% Lay dich acid làm mẫu thử
© Với thuốc thử Wagner: cho kết tủa màu nâu.
3.1.2 Khảo sát sự hiện điện của các hợp chất flavonoid
3.1.2.1 Thuốc thir flavonoid
——=—e~>——Tï—F—F—F ễE EEE EEE Eee"
SUTH NGUYEN TAN PHAT