Theo Yuanman Huang, Ion Ca” có vai trò làm chậm sự lão suy của tử diệp và cần cho sự phát trién ban đầu của cây mdm ; nếu thiếu Ca?* trong giai đoạn này, cây mầm bị héo ngọn và chết Yuan
Trang 1BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠOTRƯỜNG ĐẠI HỌC SU PHAM TP HỒ CHÍ MINH
KHOA SINH HỌC
eon FOF LLL
_LUẬN VAN TỐT NGHIEP
NGANH : SINH HOC
CHUYÊN NGANH : SINH LÝ THUC VAT
NGƯỜI HƯỚNG DAN KHOA HOC : TIEN ST BÙI TRANG VIỆT
= : THAC SĨ LÊ THỊ TRUNG
Taian
Trưởng Đai Hạo Se Phạm
Tt mÔ- cue “MINe
THÀNH PHO HO CHÍ MINH - NĂM 2001
Trang 2Luận văn tốt nghiệ
LOI CAM ON.
Bae
fy hoan thanh luan ưăn tốt nghigp nay tél xin chan thành aẫm ơn sâu
adie đến :
© en si Bai
© Ban chil nhitm ding quý (6A2 kkoa Stak , Tuting Dat Apa Sut
Pham Tb Chi Mink di (da day hit, thite , ki xăng dé tse hign
ede thi nghitm khdo cu
© 12 i Nouyin Du Sank
Trudng Phong thí nghigm
Hoo Khoa hoe tự nhien -Dai hoa
- Di truyén : Cường Dai
Qube Gia Thank Pho Hé Chi Minh,
SVTH : LE TH] THU HA Trang: |
Trang 3Luận văn tốt nghiệp
da tạo điều Biện va qiáp da toi thực hiện ede thí nghiệm trong khi thực hiện
dé tai tat bo môn
© hee i Phan Ngo Hoang , cht Tein Thank Htuomg va quý
thay od trong Bg mon Sink LY thye vat - Dé tuyén , Tring Dat hoe
Khoa hye tye nhitn - Dat hoa quốc gia TP H6 Chi Minh,
da hudng din thi nghitm va gip do toi rat nhitu vé tat (gu tham khdo
© 25 Nouyéin Tht Kim Tuyth, anh Vs Anh Kiet
Nhan vien Phong thi nghigm Sink ly thựa dạt - Sink hóa - Vi sink
Truong Dai hoe Su pham Se M df nhigt tink giúp dé toi vé hóa
chat, dung cu thi nghigm va Á trinh thựa hign dé tai
Caa ban cùng lop, a hai “hường Dat hoa Khoa Hoe Tu NVhien - D dlà Chi Mink va Pai
da luan giáp da dgng vién, góp ú ơà trao đổi trong sudt bốn năm họa, ating
nhu thời gian thự hign dé tai.
Va hon het, gia dink wa anh ahi luan Íà ahä đụa ving ahde nhất cba tôi trong sudt aude dvi di hoe, cho tél ving bude di tron con đường da chon lua.
°
s*
SVTH : LÊ THỊ THU HÀ Trang: 2
Trang 4LOT CAM ƠN óc họ 6 ợc9iọ e9 esesssezeesseseeses Í
DANH MỤC CAC ANB 5< es so S99 ve Seeøsts Sư søseseosseseesseesssesse
Ce) IU 2 [| “
PHAN 1 : MỞ DAU cesesesscssscssseseseenserssseeeessesssessonerunenenssorenesesesereenssneneseessseeseeesB
PHAN II : TONG QUAN TÀI LIỆU HiubsioGifGSRugtSSbuagtrszasqgsif
1 SƠ LƯỢC VE ĐỐI TƯỢNG NGHIÊN CỨU :+:zczcc+vcc 9
1.1 Vài nét về nguồn gốc và giá trị của cây đậu xanh - «S55 Se: 9
12, Vitel pias Mũi cũ GẦN HH qaanuaaoaananirraeoaanooaGeaaoatiaroarrearscsrar 9
li, TINH Hội CORD AI XI as nansnananananannadAAssARennAnanAAnannnonaananbdgansnancaannsananannans H
eS an 11
LS 2 THAR VG CORR gunsegoringtrodnrtnatrointtoangtaottoiig0617101656018/10146101 11
TT, Lá 3a pases AAA AAA AU SA AAAAARAARAERANARAAAARARABEEGARAARAARDAEENANSAARAREARIRRARAAADADRBRAARBAANAAED 12
(Se 12
Pa a ne 12
1.4 Một vài đặc điểm riêng của giống đậu xanh V91 — 13 13
2 SỰ NAY MAM PHÁT TRIỂN VÀ SINH TRƯỞNG CUA CAY CON 13
81, (ERHINHBRINT HN anrcasoavssanenansnaseesroneenenenannenseomnssnstonansadasenoiszinasasnenaies 13
2.2 Khái niệm về sinh trưởng phát triỂH có svckekketkeetesrerse 14
2.3 Vài nét về sự nẩy mâm của hạt đậu xanh c5 scc+Sc<ccreecsree 14
2.4 Vài nét về sinh trưởng và phát triển của cây đậu xanh 15
2.5 Các yếu tố ảnh hưởng đến sự nẩy mdm và sinh trưởng của cây đậu xanh 16
2.5.1.Anh hưởng của điều kiện môi trường -ccccceeeexececee 162.5.2.Anh hưởng của các chất điều hòa tăng trưởng - - - 18
PHAN II : VAT LIEU VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 2
1 VAT LIBU 0® ~ ÔỎ 20
lệch: Eas AGS ATE Uaanonreaerdeninitirariotferrritirgisvrvy0606v010300040030/000000006140060998 20
1.2 Vật liệu dùng trong sinh trắc nghi@m csseceresesesesserersveresesereseassrseeeesenees 20
2, PHHNGIPHAPNEBHIEN CLINI, ssesscsnanssnessiusnsnssnnnsesnnnnsnsnanaonsnassvanessansasatsns 20
2.1 Theo dõi sự tăng trưởng của cây miẲm -.5 c5 cà cccececvececececsee 20
SVTH : LÊ THỊ THU HÀ Trang: 3
Trang 5Luận văn tốt nghiệp
2.2 Khảo sát vai trò của tử diệp đối với cây MAM «. «- 212.3 Xác định thời gian cây mẫm cần Calcium - - + cc<s<5s552 21
2.4 Xử lý Ca?* lên cây mdm và từ điệp tách rời . -e©cse©cscsee 22
2.5 Xác định trọng lượng tươi và trọng lượng khô - S5 23
2:6 Đo cường độ quang hợp và RÔ RẤP ‹ooceoeeeeeeeeenseennnoenoeeeeeeenosoeoen 23
2.60.1 D0 cường đồ quang RỮDnreenraaganyorngeresarraroigtsrosaasgngrauai 23
2.7 Xác định hàm lượng đường tổng số và tỉnh bột -. .-. «-«- 23
2 MEG, ee 25
PHANIV: KẾT QUA VÀ THẢO LUẬN sec 7
1 SU TANG TRƯỞNG CUA CÂY DAU XANH e2 27
2 VAI TRÒ CUA TU DIỆP LEN CAY MẦM -222- 222222222222 28
3 THỜI GIAN CAY MAM CAN CALCIUM sssssssssscesscccsssssssssssssssesssvesseeeee 31
5 SỰ THAY ĐỔI TRONG LƯỢNG KHÔ CUA TỬ DIỆP TÁCH ROI VÀ TỬ
BI NT KT uaswaturaruygatrrrtdrrrrrrrtaaaeaaraearnnuagraernd 35
6 ĐO CƯỜNG ĐỘ QUANG HỢP VÀ CƯỜNG ĐỘ HO HẤP 37
6.1 Sự thay đổi của cường độ quang hợp của tit điệp tách rời 37
Trang 6Luận văn tốt nghiệp
Wank mie cada hình
Hình 1 Thí nghiệm cắt bỏ tit diệp của hạt nảy mâm -. «- 21 Hình 2 : Sơ đề xử lý Ca ?* ở thời gian khác nhau -. .- eo ccc5csc5+ 22
Hình 3 : Dé hấp thu của đường Sacaroz và Glucoz ở bước sóng 490 nm 24
Hình 4 : Sơ đồ ly trích hormon tổng số c«Scceesseeeeriereesee 26
Hình 5 : Sự tăng trưởng cây mâm đậu xanh ngày 2,4,6 - -«- 27Hình 6 : Sự tăng trưởng của cây mam ở thí nghiệm cắt bô tử digp (ngày 2 ) 29
Hình 7 : Sự tăng trưởng của cây mam ở thí nghiệm cắt bỏ tử diệp (Ngày 4) 30
Hình 8 : Sự tăng trưởng của cây mdm khi xử lý Ca?" (0,22 g/1) ở thời điểm
BE TRÍ: co: GEN cree ener NSIS 32
Hình 9 : Sự tăng trường của cây mâm có xử lý Ca2+ và đối chứng (ngày 4 ) 34
Hình 10 : Sự thay đổi trọng lượng tươi , trọng lượng khô của tit diệp tách rời
và tit diệp dính trên cây không xử lý Ca** (ngày 2, ngày 4) .36
Hình 1] : Sự thay đổi trọng lượng tươi , trọng lượng khô của tử diệp dính trên
CAY ( NEAY J, NEAYS) sscssssccsvivevscssssonssavasavecveevessenosesisecssssvesessensceee 377
Hình 12 : Sự thay đổi cường độ quang hợp ở từ diệp tách rời(ngày 2 ,4) 388
Hình 13: Sự thay đổi cường độ hô hấp của tư diệp dính trên cây (ngày 2 ,4) 399
Hình 14 : Sự thay đổi hàm lượng đường của tử diệp ở ngày 2,4 4I Hình 15 : Sự thay đổi hàm lượng tinh bột của tử điệp ngày 2, 4 411 Hình 16 : Su thay đổi hoạt tính các chất điều hoà tăng trưởng của tử diệp.422
SVTH : LÊ THỊ THU HÀ Trang: 5
Trang 7Luận văn tốt nghiệp
Xanh muc cáo bang
Bảng 1 : Độ hấp thu của đường Sacaroz và Glucoz ở bước sóng 490 nm 24
Bảng 2: Sự tăng trưởng của cây mAm đậu xanh c«ccccccscceesves 27
Bảng 3 : Sự tăng trưởng của cây mdm ở thí nghiệm cắt bỏ tử điệp ngày 2 và 4 29
Bảng 4.: Sự tăng trưởng của cây mdm khi xử lý Ca?* ( 0.22 g/l) ở thời
điển thiệt NHHeonynertaaugttiiiartrtidnigat00000000038001218100s16 31
Bảng 5 : Sự tăng trưởng của cây mâm có XL Ca?* và đối chứng (ngày 4) .33
Bảng 6: Sự thay đổi trọng lượng tươi ,trọng lượng khô của từ diệp 36
Bảng 7 : Cường độ quang hgp( ul CO; 7 g /h) của tử điệp tách rời 388
Bảng 8 : Cường độ hô hấp (pil O; / g / h) của tử dbp scccsssssrsssssesssssssccnrseee 38Bảng 9 : Sự thay đổi hàm lượng tỉnh bột và đường tổng số của bảng từ
SG san AA ALA 40
Bảng 10 : Sự thay đổi hoạt tính các chất điều hòa tăng trưởng của tt
HP Ở BERS Zinnia 4]
SVTH : LE TH] THU HA Trang: 6
Trang 8Luận văn tốt nghiệp
Wanh muc adc ảnh
Ảnh 1 : Sự tăng trưởng cây mdm đậu xanh 4 ngày tuổi - 28
Ảnh 2: Sự tăng trưởng cây mdm ở thí nghiệm cắt bỏ tử diệp - 30
Ảnh 3 : Sự tăng trưởng của cây mdm khi xử lý calcium ở thời điểm khác nhau
(trái qua phải : 0 -12h ,0 - 24h ,12 - 24h ,24 -36h ,0 -36h,.) 33
Ảnh 4 : Cây mdm 4 ngày tuổi có xử lý Calcium và không xử lý Calcium 34 Ảnh 5 : Sự thay đổi hình thái của tit điệp tách rời ngày 2, 4 35
SVTH : LÊ THỊ THU HA Trang: 7
Trang 9Luận văn tốt nghiệp
PHAN 1: MO ĐẦU
Đậu xanh ( Vigna radiata (L.) Wilcreck ) là cây ăn hạt cổ truyền ở Vùng
Đông Nam Á, xếp thứ ba trên thế giới trong các cây họ Đậu ( sau đậu tương và
đậu lạc) và đứng đầu trên thế giới trong những cây trồng thuộc chi Vigna về diện
tích và sản lượng.
Tuy nhiên năng suất đậu xanh thường giảm mạnh bởi hiện tượng cây non bị
chết do sức chống chịu còn yếu ( Đinh Thế Lộc, 1998).
Tử diệp có vai trò đặc biệt quan trọng trong giai đọan tăng trưởng của cây
mầm song tử diệp Tử diệp là nơi chứa chất dự trữ cho cây mầm song tử diép
(Lê Khả Kế, 1976; Bùi Trang Việt, 2000).
Theo Yuanman Huang, Ion Ca” có vai trò làm chậm sự lão suy của tử
diệp và cần cho sự phát trién ban đầu của cây mdm ; nếu thiếu Ca?* trong giai
đoạn này, cây mầm bị héo ngọn và chết (Yuanman Huang,1990 ; Trần Đình
Long và Lê Khả Tường,1998).
Với các lý do trên, để tài "Anh hưởng của Calcium trên đời sống của tử diệp trong giai đoạn tăng trưởng cây mầm đậu xanh ( Vigna radiata (L.) Wilczek )" được thực, hiện,nhằm giúp cây mầm tăng trưởng khỏe mạnh và đồng nhất.
SVTH : LÊ THỊ THU HÀ Trang: 8
Trang 10Luận văn tốt nghiệp
DHẨN HH: TONG QUAN TÀI LIỆU
1 SƠ LƯỢC VỀ ĐỐI TƯỢNG NGHIÊN CỨU
1.1 Vai nét về nguồn gốc và giá trị của cây đậu xanh
Cây đậu xanh ( Vigna radiata (L.) Wilczek ) có nguồn gốc từ Ấn Độ và
Trung A, là cây ưa nhiệt, ít mẫn cảm với ánh sáng , chịu hạn tương đối tốt nên
được trồng rộng rãi ở vùng nhiệt đới và Á nhiệt đới của Châu Á và các châu
khác, chiếm 10% diện tích và 5% vé sản lượng của vùng này ( Bùi Việt Nữ,
1995; Nguyễn Văn Trương và Trương Văn Thịnh, 1991) Đây là loại cây trồng
quen thuộc ở Châu A va ở nước ta.
Đậu xanh có giá trị dinh dưỡng cao và có nhiều giá trị sử dụng khác nhau.
Trong 100g hạt đậu xanh có chứa 2,59% prôtê¡n, ,13% lipid, 5,3% glucid và cung
cấp 360 Calo ( Phạm Văn Thiéu, 1997) Do chứa nhiễu chất đỉnh dưỡng như
prétéin, nên hạt đậu xanh được dùng chủ yếu để chế biến thực phẩm (Võ Văn Chi, 1999; Nguyễn Đăng Khôi, 1997) Thân , lá đậu xanh có thể dùng làm phân
xanh và thức ăn cho gia súc (Nguyễn Đăng Khôi, 1979)
Tuy được trồng nhiều nhưng năng suất đậu xanh không cao (khoảng 6,8tạ/ha) Chỉ gần đây , một số nước mới tạo ra được giống cây có năng suất 10-12tạ/ha Còn ở Việt Nam hiện nay ,năng suất có tăng nhưng chủ yếu tăng nhờ diệntích gieo trồng ( Nguyễn Tiến Mạnh, 1995; Nguyễn Xuân Thành, 1994 )
1.2 Vị trí phân loại cây đậu xanh.
Cây đậu xanh thuộc :
- Ngành : Magnoliophyta ( Angiospermatophyta, Anthophyta).
SVTH : LÊ THỊ THU HÀ Trang: 9
Trang 11- Lớp : Magnoliopsida ( Dicotyledo neac)
năm 1970 (Bùi Việt Nữ, 1997).
Trước năm 1925, trong bảng phân loại Decandolle đã xếp đậu xanh vào
chi Phaseolus Năm 1953, Ohwi để nghị chuyển sang chỉ Azkia (Bùi Việt Nữ,1995) Các tên khoa học đã đặt cho đậu xanh là Phaseolus aureus Roxb ( Pham
Hoàng Hộ, 1999; Phạm Văn Thiéu, 1997 ) Phaseolus radiatus L (Đỗ Tất Lợi ,1999; Trần Đình Lý, 1995)
Về sau, có nhiều nghiên cứu vé các đặc tính và hình thái của cây đậu
xanh với các loài trong chỉ Phaseolus đã phát hiện sự gần gũi giữa đậu xanh với chi Vigna (Bùi Việt Nữ, 1995) Năm 1970 Verdcoud dé nghị chuyển đậu xanh sang chi Vigna (Bùi Việt Nữ ,1995 ) Năm 1978, Nguyễn Đăng Khôi đã định danh cây đậu xanh trồng ở Việt Nam là Vigna aureus (Roxb.) (Nguyễn Đăng
Khôi, 1979).
SVTH : LÊ THỊ THU HÀ Trang: 10
Trang 12Luận văn tốt nghiệp
Hiện nay, tên khoa học của cây đậu xanh được nhiễu người xác nhận là
(Vigna radiata (L.) Wlilcreck ) ( Võ Văn Chi ,1999; Phạm Hoàng Hộ, 1999; Bùi
Việt Nữ, 1995).
1.3 Hình thái cây đậu xanh
1.3.1 Rễ
Rễ thuộc loại đậu xanh rễ cọc, ăn sâu 20 — 30 cm Các rễ con mọc từ rễ cái và
phát triển theo chiều ngang
Bộ rễ đậu xanh phát triển liên tục từ khi cây mọc, phát sinh rễ mới khi cây đạt 18 — 20 ngày và tiếp tục phát triển cho đến khi ra hoa kết trái.
Ré đậu xanh có vi khuẩn cố định đạm (Rhizobium sp.) sống cộng sinh trong các
nốt sẵn, tập trung chủ yếu ở phần cổ rễ (Phạm Văn Thiéu, 1997).
1.3.2 Thân và cành
Đậu xanh là cây thân cỏ mọc thẳng đứng hoặc hơi nghiêng Thân có một
lớp lông màu nâu sáng bao bọc Thân cây yếu
Thân tăng trưởng chậm trước thời kỳ có 3 lá kép, nhanh hơn vào thời kỳ ra
hoa kết trái và đạt chiều cao tối đa lúc cây đã có trái chắc.
Trên thân có 7 -8 đốt giữa 2 đốt gọi là lóng Độ dài lóng thay đổi tùy vị trí của cây và các điều kiện khác; có thể từ 3- 4 cm đến 8-10 cm.
Cây đậu xanh thường ít phân cành, nếu có thường muộn Trên mỗi cành có
trung bình 2- 5 mắt, từ các mắt này mọc ra các chùm hoa (Phạm Hoàng
Hộ, 1999 ; Trần Đình Long, Lê Khả Tường, 1998; Phạm Văn Thiểu,
1997).
SVTH : LÊ THỊ THU HÀ Trang: 11
Trang 13Luận văn tốt nghiệp
1.3.3 Lá
- _ Lá đậu xanh là lá kép, gdm: 1 lá kèm, cuống lá và 3 lá chét
- _ Lá kèm mọc ở gốc cuống lá, là cơ quan quang hợp phụ.
- _ Cuống lá dai từ 8 — 10 cm, hình lòng máng Cuống của lá chét ở giữa dài 2
— 5 cm, cuống của 2 lá chét hai bên ngắn hơn từ 0,2 — 0,5 cm.
- - Phiến lá hình dạng nguyên, có lông ở hai mặt Gan lá dạng lông chim nổi
rõ ở mặt dưới lá ( Bùi Việt Nữ, 1995; Phạm Van Thiéu, 1997)
1.3.4 Hoa
- Thường các giống sau khi gieo khoảng 35- 40 ngày là bắt đầu ra hoa
- Hoa đậu xanh lưỡng tính, tự thụ, mọc thành từng chùm với trục chung dài 2
— 10 cm Hoa có hình cánh bướm, màu vàng nhạt, có 5 đài, 5 tràng, 10 nhị,
1 bầu trên.
- Hoa nở rải rác không đều, thường nở rộ trong 10 ngày đầu tiên, sau đó
thưa dần Hoa nở 24 giờ réi tàn Đôi lúc ở đậu xanh có hiện tượng giaophấn ( Trần Dinh Long, Lê Khả Tường, 1998; Phạm Văn Thiéu, 1997 )
1.3.5 Trái và hạt
- TY lệ hoa đậu thành trái ở đậu xanh rất thấp, mỗi chùm chỉ đậu khoảng 1
— 2 trái.
- Trai đậu xanh thuộcloại trái đậu (legume) dai 8 — 10 cm, dang cong hoặc
thẳng, có 2 gân nổi rõ dọc hai bên cạnh trái Trái non màu xanh , khi chín
SVTH : LÊ THỊ THU HÀ Trang: 12
Trang 14Luận văn tốt nghiệp
có màu vàng nâu rồi đen Trái lớn nhanh trong 7 ngày đầu sau khi thụ tỉnh.
Trái chín rải rác vào khoảng 15 — 20 ngày tuổi Số trái trên cây tùy thuộc
vào giống đậu và điều kiện trồng trọt, có thể 8 — 40 trái.
- Hat đậu xanh có hình trụ, thuôn, tròn đều, màu thường là xanh lục, xanh
vàng Mỗi trái có 8 — 15 hạt, và các hạt nằm ngăn cách nhau bằng các
vách xốp Trọng lượng hat thay đổi tùy giống, có thể từ 50 — 80g/ 100 hạt (
Lê Đình Lương, 1991; Phạm Văn Thiểu, 1997 )
1.4 Một vài đặc điểm riêng của giống đậu xanh V91 - 15
Đậu xanh giống V91- 15 được chọn từ giống VC3528A ( Đài Loan) Năng
suất đạt từ 12 — 14 tạ / ha Thời gian sinh trưởng 65-70 ngày Trái chín tập trung ,
lá to xòe, vàng đều khi chín Cây cứng, ít đỗ ngã, ra hoa rộ, dáng to khỏe Hạt to
màu xanh, dạng trục hơi cạnh, khối lượng hạt lớn (55 — 97g/ 100 hạt) Ít bị nhiễm
bệnh vàng lá, trồng được trên nhiéu loại đất Giống V91 — 15 đã được Bộ nôngnghiệp và phát triển nông thôn cho phép khu vực hóa tháng 5 / 1998 tại các tỉnh
phía Nam ( Trần Đình Long, Lê Khả Tường, 1998).
2 SỰ NẨY MẦM PHÁT TRIỂN VÀ SINH TRƯỞNG CỦA CÂY CON
2.1 Khái niệm ndy mầm
Sự nẩy mầm của hột là sự tái lập tăng trưởng của phôi trong điều kiện sinh
lý và ngoại cảnh thích hợp để cho cây ra mầm ( Hopkins, 1995) Sự nảy mầmcủa hột được tính từ lúc hột bắt đầu hút nước đến giai đoạn rễ mầm ( ở vài loạihột tử diệp hoặc trụ hạ diệp ) mọc dài ra hoặc xoi thủng lỗ ló ra ngoài Các giaiđoạn nảy mầm được chia ra như sau:
SVTH : LÊ THỊ THU HÀ Trang: 13
Trang 15Luận văn tốt nghiệp
1 Thu nước và phồng lên
2.2 Khái niệm về sinh trưởng phát triển
Sinh trưởng là quá trình tạo mới các yếu tố, cấu trúc của cây (các thànhphần mới của tế bào, tế bào mới ) thường dẫn đến sự tăng trưởng về kích thước
và sinh chất của cây Sinh trưởng không chỉ đơn thuần là biến đổi về lượng mà
bao giờ cũng đều dẫn đến sự biến đổi về kích thước và trọng lượng (Trịnh Xuân
Vũ, 1976).
Phát triển là quá trình biến đổi về chất lượng của cấu trúc và chức năng
mà cơ thể trải qua trong chu kỳ sống của cơ thể.
Sinh trưởng và phát triển không phải là chức năng sinh lý riêng biệt mà là kết qi hoạt động tổng hợp của nhiều chức năng, quá trình sinh lý trong cây (
Trịnh Xuân Vũ, 1976).
2.3 Vài nét về sự nẩy mâm của hạt đậu xanh
Hạt đậu xanh sau khi gieo trồng sẽ hút nước từ 50-60% trọng lượng của nó
Rễ đầu tiên ( sau khi phát triển thành rễ chính) phát sinh từ phần nhô lên của hạt
kéo đài đâm xuyên vào đất ,d6ng thời với sự kéo dài của rễ xuống phía dudi là
sự phát triển lên trên của thân mầm Đây là giai đoạn thân nằm giữa rễ mầm va
SVTH : LÊ THỊ THU HÀ Trang: 14
Trang 16Luận văn tốt nghiệp
lá mầm Nhờ thân mầm được kéo dài về phía trên mà lá mầm được đẩy lên trên
mặt đất, đánh dấu sự nẩy mầm kết thúc Quá trình nẩy mẫm thường kéo dài 5
-10 ngày sau khi trồng tùy thuộc vào độ ẩm nhiệt độ đất và độ ẩm ( Trần Đình
Long , Lê Khả Tường , 1998, Đoàn Thị Thanh Nhàn, 1996).
2.4 Vài nét về sinh trưởng và phát triển của cây đậu xanh
Sau khi nẩy mầm, thân mầm dài được thời gian rồi ngừng phát triển, lúc
này lá mầm ổn định và tiến hành sự mở lá mâm, lúc đó chổi mầm ở giữa 2 lá
mầm mới dài thêm và phát sinh ra những lá mới
Trong giai đoạn này ,thân mẫầmđược chia thành :
- Doan ở đưới 2 lá mầm còn gọi là trụ hạ diệp do thân mầm phát triển thành
- Đoạn ở trên hai lá mầm còn gọi là trụ thượng điệp do chổi mầm phát triển
thành.
Lá mầm là nơi dự trữ chất dinh dưỡng cung cấp cho cây con sau giai đoạn nầy
mầm Trong giai đoạn này do cây con chưa thể quang hợp được phải sử dung
chất dự trữ ở lá mầm nên mầm chỉ còn 30% trọng lượng chất khô Nếu mất đi một trong hai lá mầm sẽ ảnh hưởng đến cây con không lớn 14m, nhưng nếu mất
đi hai lá mầm sau khi nẩy mầm thì năng suất sẽ giảm đi 8 - 9% Sau giai đoạncây con thì không ảnh hưởng đến năng suất vì cây con có thể tự quang hợp được
Giai đoạn này diễn ra cho đến khi lá thật xuất hiện, cây con tiếp tục tăng trưởng nhờ vào quá trình quang hợp cho đến khi cây ra hoa kết trái ( Lê Khả Kế T3, 1976; Trần Dinh Long , Lê Khả Tường , 1998 ).
SVTH : LÊ THỊ THU HÀ Trang: 15
Trang 17Luận văn tốt nghiệp
2.5 Các yếu tố ảnh hưởng đến sự nẩy mâm và sinh trưởng của cây đậu xanh
2.5.1 Ảnh hưởng của điều kiện môi trường
© Nhiệt độ : Cây đậu xanh có nguồn gốc nhiệt đới và A nhiệt đới nên yêu cầu
nhiệt độ cao để nẩy mầm và sinh trưởng , phát triển Ở đậu xanh,
nhiệt độ từ 25°C trở lên thì hạt giống mới nẩy mầm được thuận lợi,
nếu ở nhiệt độ 14°C thi quá trình nẩy mầm của hạt không xảy ra Ở
điều kiện nhiệt độ 22°C - 30°C, cây đậu xanh sinh trưởng và phát
triển tốt ,nếu ở nhiệt độ 18°C thì cây con sẽ mọc chậm và yếu, sau
cùng là sinh trưởng kém.
e Anh sáng: Anh sáng có ảnh hưởng sâu sắc đến sự nẩy mầm và sinh trưởng
của cây con Đậu xanh là cây ưa sáng, khi hạt ở thời kỳ nẩy mầm nếu được chiếu sáng đầy đủ thì độ nẩy mầm của hat mới cao
(99%) Khi có đủ ánh sáng thì lá sẽ có màu xanh đậm , chính điều
này giúp cho cây quang hợp tốt hơn để giúp cây sinh trưởng tốt
trong giai đoạn cây con (Phạm Văn Thiểu, 1997; Đoàn thị Thanh
Nhàn, 1996).
e Nước: Nước có vai trò đặc biệt trong sự nẩy mầm của hạt cũng như sự sinh
trưởng của cây con Đối với hạt, để nẩy mầm và phá vỡ sự ngủ của
hạt thì cần cung cấp một lượng nước nhất định để các enzime có thể hoạt động tổng hợp nên chất sống Đối với cây con, khi gặp
hạn cây và cành sẽ phát triển kém, lá ít, sau này sẽ cho trái ít ảnhhưởng đến năng suất Tuy cần nước nhưng rất sợ úng, độ ẩm cao sẽ
SVTH : LÊ TH] THU HÀ Trang: 16
Trang 18Luận văn tốt nghiệp
gây thối rễ và cây chết hàng loạt (Phạm Văn Thiểu, 1997,
Ovtsarov,1981).
e Đất và các chất dinh dưỡng: Do cây đậu có đặc điểm chống han và chống
úng kém nên thích hợp với đất có thành phần cơ giới nhẹ, giữ ẩm
và thoát nước tốt Khi đất trồng không phù hợp , sự nảy mầm của
hạt và sự sinh trưởng của cây con kém dẫn đến năng suất trồng
trọt giảm.
Trong giai đoạn cây con, do chưa có khả năng quang hợp để
giúp cây con tăng trưởng mà chủ yếu dựa vào nguồn nước dự trữ ở
tử diép Nên cần thiết phải cung cấp đầy đủ các nguyên tố đa lượng
(N,P,K ) đồng thời cần phải bổ sung thêm lượng đạm vì giai đoạn này rễ chưa có nốt sẵn , bổ sung đạm giúp cho cây sinh trưởng
nhanh khỏe và đạt năng suất cao (Phạm Văn Thiéu, 1997 )
se Vai trò của Calcium : Calcium tham gia nhiều chức năng quan trong cho cây,
là yếu tố “ chìa khóa” tăng trưởng cho cây đậu xanh Calcium cần
cho sự phát triển của rễ, giữ vai trò tạo nốt sin Trong trường hợp
thiếu Calcium rễ chuyển sang màu nâu, din dân suy yếu khả năng
hút nước, hấp thu dinh dưỡng Đậu xanh có hàm lượng Calcium khá
cao, tuy nhiên việc nghiên cứu thành phần Calcium trong cây đậu
xanh còn hạn chế.
Hiện nay những nghiên cứu vé khả năng hấp phụ Calcium của rễ đều
khẳng định chỉ có rễ mới sinh , rễ non và có đầu rễ trắng mới có khả năng hấp
phụ Calcium ( Trần Văn Lài, 1993, Trần Đình Long , Lê Khả Tường, 1998 )
SVTH : LÊ THỊ THU HÀ Trang: 17
Trang 19Luận văn tốt nghiệp 2.5.2 Anh hưởng của các chất điều hòa tăng trưởng
Cây con tăng trưởng từ hạt đã được nẩy mầm và quá trình nảy mầm của hạt
xảy ra khi được cung cấp nước đầy đủ để giúp cho enzime phân giải các chất.Đồng thời , các quá trình này còn chịu ảnh hưởng của chất điều hòa tăng trưởng
Các chất điểu hòa sinh trưởng thực vật đã biết rõ ( Auxin, Giberelin,
Cytokinin, Acid Abcisic, Etylen) có tác động lớn đối với sự nẩy mầm và sinh
trưởng của cây con.
e Đối với sự nầy mầm của hat:
-Hạt nghỉ chứa một lượng lớn các tất ức chế tăng trưởng nhưng hàm lượng
các chất Auxin ,Cytokinin ,Giberelin lại giảm.
-Giberelin giúp sự tạo mới các enzime thủy phân cần thiết cho quá trìnhnay mầm (Nguyễn Như Khanh ,1996).
-Cytokinin phá bỏ trạng thái nghỉ của hạt (Trịnh Xuân Vũ ,1976).
-Acid abcisic ức chế sự nầy mắm của hạt (Bùi Trang Việt , 2000)
e Đối với sự tăng trưởng của cây con:
- Trong giai đoạn tăng trưởng của cây con thì hàm lượng Auxin, Giberelin,
Cytokinin cao.
- Auxin, Giberelin, Cytokinin có tác dụng kích thích sự phân chia tế bào trong
giai đoạn tăng trưởng của cây.
- Auxin chủ yếu được tổng hợp từ đầu rễ và được vận chuyển đến các bộ phận
khác để kích thích sự tăng trưởng.
SVTH : LÊ THỊ THU HÀ Trang: 18
Trang 20Luận văn tốt nghiệp
- Giberelin tạo nên sự tích lũy Auxin, kích thích sự tăng trưởng của cây ( Trịnh
Xuân Vũ, 1976 ).
- Cytokinin tăng cường các chất dinh du@ng về các bộ phận tăng trưởng giúp cây
sinh trưởng tốt ( Trương Thị Đẹp ; Audus, 1972; Salis bury va Ross, 1992)
- Acid abcisic cản sự kéo dài lóng, cản tăng trưởng ( Bùi Trang Việt, 2000).
SVTH : LE TH] THU HA Trang: 19
Trang 21Luận văn tốt nghiệp
PHAN: VAT LIỆU VÀ DHƯƠNC
DHÁP NGHIEN CUU
1 VAT LIEU :
l1 Hạt đậu xanh
Hạt đậu xanh ( Vigna radiata (L.) Wilcreck ) đã nẩy mầm trong điều kiện vô
trùng, khi rễ mầm vừa lú ra khỏi vỏ hạt từ 1 — 2 mm, Được nuôi cấy trên môi trườngdinh dưỡng để thực hiện các khảo cứu ở giai đoạn cây mầm từ 0-7 ngày tuổi
1.2 Vật liệu dùng trong sinh trắc nghiệm
- Khúc cắt diệp tiêu lúa ( Oryza sativa L.) được dùng để đo hoạt tính Auxin và
Acid abcisic.
- L4 mầm dưa chuột (Cucumis sativus L ) được dùng để đo hoạt tinh Cytokinin
2 PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU
2.1 Theo dõi sự tăng trưởng của cây mdm
Hạt đậu xanh nảy mâm trong điều kiện vô trùng, khi rễ mầm vừa lú ra khỏi
vỏ hạt từ 1 —2 mm, được nuôi cấy trên môi trường dinh dưỡng trong phòng tăngtrưởng với các diéu kiện như sau :
- Anh sáng : 3000 lux trong 24h.
- Nhiệt độ : 28°C
- Ẩmđộ : 80%
SVTH : LÊ THỊ THU HÀ Trang: 20
Trang 22Luận văn tốt nghiệp
Các chỉ tiêu được theo dõi : chiểu cao của trụ hạ diệp và trụ thượng diệp,chiều dài rễ, số rễ con, thời gian tử diệp bắt đầu teo và rụng.
2.2 Khảo sát vai trò của từ diệp đối với cây mdm
Hạt nẩy mam trong điều kiện vô trùng , khi rễ mầm vừa lú ra khỏi vỏ hạt từ
1 -2 mm, được dùng để thực hiện cắt bỏ tử diệp : % , 2/3 hay cả tử diệp theo sơ
đồ hình 1 Sau đó các hột được nuôi cấy invitro và sự tăng trưởng của cây mầmđược theo dõi theo ngày tuổi.
4 Hạt cắt hai tử diệp ( phôi).
2.3 Xác định thời gian cây mam cân Calcium
- Tiến hành thí nghiệm trên hạt nẩy mầm Hạt nẩy mầm được xử lý Ca?"
(0,22g/1) theo thời gian khác nhau : O- 12h, 12 - 24h, 0 24 h, 24 —
36 h, xử lý liên tục 4 ngày và không xử lý (Hình 2 ) Sau đó theo dõi sự
tăng trưởng của cây mầm
SVTH : LÊ THỊ THU HÀ Trang: 21
Trang 23Hình 2 : Sơ đồ xử lý Ca?* ở thời gian khác nhau.
2.4 Xử lý Ca”* lên cây mâm và tit digp tách rời
Sau khi xác định được thời gian cây mầm cần Ca” nhất thì tiến hành xử lý
Ca?" vào thời điểm vừa mới xác định.
Hạt nẩy mâm, khi rễ mâm dai 1 — 2 mm, được nuôi cấy tương tự trên haimôi trường MS% có Ca?* ở nổng độ 0,22 g/l và môi trường MS1⁄ không có Ca?*
(môi trường chuẩn).
Các tử diệp tách rời cũng được nuôi cấy tương tự trên hai môi trường MS1⁄2
có Ca?" ( 0,22 g/l) và không có Ca”*.
SVTH : LÊ THỊ THU HÀ Trang: 22
Trang 24Luận văn tốt nghiệp
Theo dõi sự tăng trưởng của cây mầm, tử diệp tách rời , phân tích hàm
lượng đường tổng số,hàm lượng tỉnh bột, hormôn tổng số ở ngày 2 và ngày 4
của tử diệp.
2.5 Xác định trọng lượng tươi và trọng lượng khô
Tử diệp ở cây nguyên hoặc tử diệp tách rời ở thời điểm 9 h sáng được cân
và xác định trọng lượng tươi Sấy mẫu 10 phút ở 110 °C để loại nhanh hoạt động của enzime sau đó sấy mẫu liên tục ở 80°C cho đến khi trọng lượng không đổi để
xác định trọng lương khô (Grodrimx, 1981; Bùi Trang Việt, 2000).
2.6 Do cường độ quang hợp và hô hấp
2.6.1.Do cường độ quang hợp
Cường độ quang hợp của tử diệp tách rời hoặc tử điệp từ cây nguyên được
đo bằng khf áp kế Warburg, dựa vào lượng khí Oxy thải ra của mẫu vật trong
bình khí áp kế Warburg Kết quả được tính bằng đơn vi ul O; / gram trọng lượng
tươi / giờ (ul Os / g/ h) (Grodzinxki, 1981).
2.6.2 Do cường độ hô hấp
Cường độ hô hấp của tử diệp tách rời hay tử diệp từ cây nguyên được đo bằng
máy hô hấp, dựa vào lượng khí CO; thải ra của mẫu vật trong buồng khí của máy
Kết quả tính bằng pl CO; / gram trọng lượng tươi / 1 gid (ul CO; / g/ h).
2.7 Xác định hàm lượng đường tổng số và tỉnh bột
Nghién nhỏ một lượng xác định vật liệu tươi và chiết đường ( 3 lần) bằng
cồn nóng 90° với tỉ lệ cồn mẫu 10 : 1 Tiếp tục trích như trên (2 lần) với cồn nóng
80°C Dịch lọc được làm bay hơi đến cạn khô rồi pha loãng với nước cất để thực
SVTH : LÊ THỊ THU HÀ Trang: 23