Không chӍ vұy, vi khuҭn này còn truyӅn khҧ QăQJÿӅ kháng các kháng sinh cӫa bҧn thân cho các vi khuҭn cùng loài và tӹ lӋ ÿӅ NKiQJNKiQJVLQKQJj\FjQJJLDWăQJ9uYұy, viӋc tìm kiӃm các hoҥt chҩt
Cӫ cҧi trҳng
Nguӗn gӕc và phân loҥi
&ӫFҧLWUҳQJFyWrQNKRDKӑFOjRaphanus Sativus /OjORҥLUDXWKXӝFKӑEҳSFҧL 7URQJJLDÿuQKKӑFҧLFӫFҧLFyVӵÿDGҥQJYӅKuQKGiQJNtFKWKѭӟFYjPjXVҳF&ӫ FҧL WUҳQJ WKXӝF JLӟL WKӵF YұW QJjQK Magnoliophyta OӟS Magnoliopsida Eӝ BrassicalesKӑ Brassicaceae, chi Raphanus, loài sativus1KLӅXWjLOLӋXFKRUҵQJFӫ
FҧLKRDQJGҥLFyQJXӗQJӕFWӯNKXYӵF%LӇQĈHQYjĈӏD7UXQJ+ҧLÿmÿѭӧFGQJ QKѭPӝWORҥLWKӵFSKҭPWӯWKӡL$L&ұSFәÿҥL6DXÿyFӫFҧLÿѭӧFWUӗQJӣFKkXặX YjRWKӃNӍ± 17 và Châu 0ӻYjRWKӃNӍӢNKXYӵFĈ{QJÈQKLӅXORҥLFӫFҧL NKiFQKDXÿmÿѭӧFSKiWKLӋQWUӗQJӣ7UXQJ4XӕFNKRҧQJQăPWUѭӟFYjӣ1KұW
Cӫ cҧi trҳQJÿѭӧc trӗng chӫ yӃXÿӇ lҩy cӫ, có thӇ GQJăQVӕng, nҩu chín hoһc ngâm muӕi Mӝt sӕ quӕFJLDOiYjWKkQÿѭӧc sӱ dөQJQKѭPӝt loҥi rau Mҫm cӫ cҧi hiӋn nay FNJQJÿѭӧc sӱ dөQJQKѭPӝt loҥi rau
&ӫFҧLWUҳQJFzQFyFiFWrQJӑLNKiFQKѭZKLWHUDGLVK$QK'DLNRQ1KұW+XD SLDKV7KiL/DQ/DLIX7UXQJ4XӕF/REDNEHXUHP,QGRQHVLD0X+jQ4XӕF 0XOLҨQĈӝ>@
&ӫFҧLWUҳQJFyUӉFӑFSKuQKWRWKjQKFӫFKӭDQKLӅXGLQKGѭӥQJKuQKGiQJPjX VҳFNtFKWKѭӟFSKөWKXӝFYjRJLӕQJ5ӉFӫOjEӝSKұQFKtQKÿѭӧFGQJWURQJWKӵF SKҭPPjWDTXHQJӑLOjFӫFӫFyKuQKGҥQJNKiFQKDXSKөWKXӝFYjR JLӕQJFKӃÿӝ GLQKGѭӥQJÿҩWÿDLYjÿLӅXNLӋQQJRҥLFҧQK&ӫKuQKWKjQKӣJLDLÿRҥQ ± OiWKұW W\WӯQJJLӕQJ>@
/RҥLFk\Qj\ÿѭӧFWUӗQJFKӫ\ӃXÿӇOҩ\FӫGRUӉFӫFKӭDQKLӅXFKҩWGLQKGѭӥQJCây FӫFҧLFKLӅXFDRNKRҧQJ± 120FPFyORҥLEӅPһWOiQJQKҹQQKѭQJFNJQJFyORҥLEӅPһWVҫQVLKRһFFyORҥLFyO{QJFӭQJPӑFWKҷQJÿӭQJYjFXӕQJOiSKkQWKjQKQKiQK&ӫFҧLWUҳQJ9LӋW1DPWKѭӡQJWKRQGjL± FPÿѭӡQJNtQK± 4cm, màu WUҳQJYӏFD\QӗQJFҩXWU~FJLzQ>@
/iFyPjX[DQKKRһF[DQKYjQJ W\JLӕQJ/iPӑFӣSKҫQÿҫXFӫDFӫFҧLJӗP SKLӃQOiYjFӑQJOi&ӑQJGjLKD\QJҳQQKӓKD\WRNK{QJO{QJKD\FyO{QJW\
JLӕQJ3KLӃQOiFyWKӇQJX\rQKD\[ҿWK\UuDOiQJX\rQKD\UăQJFѭDW\JLӕQJ +RDFyGҥQJFKPYjPӑFWKjQKFөPӣÿӍQKYjFyPjXWUҳQJKD\SKӟWWtPKRD có 4 cánh hoa [2]
Hình 1.1 Hoa, lá và qu̫ cͯa cây cͯ c̫i tr̷ng
Thu hoҥch và công nghӋ sau thu hoҥch
Cӫ cҧi trҳQJÿѭӧc thu hoҥFKNKLFK~QJFyÿѭӡng kính tӯ 5 ÷ 10cm tҥi cә cӫ Thӡi ÿLӇm thu hoҥFKÿѭӧc tiӃn hành trong thӡLJLDQWKRiQJPiWWURQJQJj\ĈLӅu kiӋQOѭX trӳ tӕt nhҩt là 0 o &Ĉӝ ҭm tӕt nhҩt là 95 ÷ 100% Thӡi hҥn sӱ dөng có thӇ OrQÿӃn 4 tháng nӃu cӫ cҧi trҳQJÿѭӧc bҧo quҧQWURQJÿLӅu kiӋn nhiӋWÿӝ Yjÿӝ ҭm tӕi ѭX&ӫ cҧi trҳng thu hoҥFKYjRÿҫu mùa xuân sӁ FyKjPOѭӧQJYLWDPLQ&Yjȕ-amylase cao, trong khi cӫ thu hoҥch sau sӁ FyKjPOѭӧQJÿѭӡQJFDRKѫQ
Cӫ cҧi có thӇ ÿѭӧc trӗQJTXDQKQăP0DWKXYjPD[XkQFKRFKҩWOѭӧng cӫ cҧi tӕt nhҩt ThӡLJLDQVLQKWUѭӣng khác nhau tùy thuӝc vào thӡi tiӃWGLQKGѭӥng và sҧn phҭm mong muӕQWK{QJWKѭӡng thӡi gian thu hoҥch tӯ ãQJj\1yWKѭӡng kộo dài tӯ 50 ữ QJj\YjRPDWKXYjãQJj\YjRPDÿ{QJ1KLӋWÿӝ OtWѭӣng cho sӵ VLQKWUѭӡng tӯ 20 ÷ 25 o C NhiӋWÿӝ và ánh sáng vào mùa hè giúp cӫ cҧi phát triӇn nhanh chóng pH tӕLѭXFKRVӵ phát triӇn tӯ 6 ÷ 6,5 Loҥi cây này không chӏXÿѭӧc ÿLӅu kiӋn ngұSQѭӟc ViӋFWѭӟLQѭӟFWKѭӡng xuyên sӁ làm cӫ bӏ thӕi Tuy nhiên, quá tWQѭӟc sӁ làm cӫ NK{QJÿҥWNtFKWKѭӟc và khӕLOѭӧng mong muӕn [2]
4XҧGjLKuQKWUөYjWKҳWOҥLWӯQJÿRҥQPӓTXҧGjLFyPjX[DQKNKLFKtQWKuYӓ TXҧFKX\ӇQVDQJPjXYjQJVӕKҥWWURQJTXҧW\WKHRJLӕQJWK{QJWKѭӡQJPӛLTXҧ cú WӯãKҥW+ҥWKuQKWUzQKRһFWKX{QGjLÿҫXWLrQKҥWFyPjX[DQK khi chớn hoàn WRjQWKuKҥWFKX\ӇQVDQJPjXQkX>@
Hình 1.2 Cây và cͯ cͯa cͯ c̫i tr̷ng
1.1.3 1ăQJVXҩt và sҧQOѭӧng
Tình hình s ̫ n xu ̭ t và tiêu th ͭ trên th ͇ gi ͣ i:
Cӫ cҧi trҳQJÿmWUӣ thành loҥi rau trong khҭu phҫQăQFKtQKFӫa mӝt sӕ Qѭӟc châu È'RÿySKҥm vi sҧn xuҩt cҧi trҳng cho viӋc xuҩt khҭXQJj\FjQJWăQJ&ӫ cҧi trҳng là loҥi rau cӫ ÿӭng thӭ hai tҥi Hàn Quӕc vӟLQăQJVXҩt khoҧng 1,7 tҩQQăP1ăQJVXҩt tәng cӫa Úc khoҧng 40 ÷ 50 tҩQKDYjRQăP1ăQJVXҩt tҥi Hawaii là 15 ± 20 tҩQKD1ăQJVXҩt tҥi Nhұt BҧQÿҥt 41 tҩQKDYjRQăP>@
Tình hình s ̫ n xu ̭ t và tiêu th ͭ t ̩ i Vi t Nam:
Tình hình tiêu thө rau cӫ tҥi ViӋt Nam không ngӯQJWăQJFDRGүQÿӃn diӋn tích canh tác ngày càQJWăQJ+LӋn tҥi, cӫ cҧi trҳQJÿѭӧc trӗQJÿӇ xen canh vӟi nhӳng loҥi cây trӗng ngҳn ngày, không nhӳQJWăQJWKrPWKXQKұSFKRQJѭӡLGkQPjFzQWăQJNKҧ QăQJNKiQJVkXEӋnh Cӫ cҧi trҳQJÿmWUӣ WKjQKÿӕLWѭӧng chuyӇQÿәLFѫFҩu cây trӗng WUrQÿҩt ruӝng luân canh vӟi lúa ӣ mӝt sӕ tӍnh miӅn tây
Mô hình trӗng cӫ cҧi trҳQJÿDQJSKiWWULӇn trong cҧ QѭӟFÿһc biӋt là các tӍnh tҥi ÿӗng bҵng sông cӱu long Tҥi huyӋn Châu Thành, tӍQKĈӗng Tháp vӟi tәng diӋn tích trӗQJUDXKDWURQJÿyFӫ cҧi trҳng chiӃm 55% vӟLQăQJVXҩt trung bình 29 ± 32 tҩn/ha 7ѭѫQJWӵ, tҥi huyӋQ9ƭQK&KkX- 6yF7UăQJ ÿmWUӗng trên 1047 ha cӫ cҧi trҳng, QăQJVXҩt bình quân 44,28 tҩn/ha, sҧQOѭӧQJÿҥt 44 409 tҩn Ngoài ra còn có tҥi mӝt sӕ tӍQK$Q*LDQJYjĈӗQJ7KiSFNJQJÿҥt sӕ OѭӧQJÿiQg kӇ7URQJNKLÿyGLӋn tích trӗng tҥLĈj/ҥt lҥLFy[XKѭӟng giҧm ĈӇ WăQJVҧQOѭӧng trӗng tҥi mӝt sӕ tӍnh miӅQWk\QJѭӡLGkQÿmWLӃn hành trӗng cӫ cҧi trҳng nghӏch mùa Tҥi [m/RQJ6ѫQÿmWLӃn hành trӗng cӫ cҧi trҳng nghӏch mùa và ÿҥWQăQJVXҩt cao
Cӫ cҧi trҳng có tiӅPQăQJSKiWWULӇn tҥi thӏ WUѭӡQJWURQJQѭӟc và xuҩt khҭu Tuy nhiên, thӏ WUѭӡng xuҩt khҭXÿӗ WѭѫLtWNKҧ TXDQKѫQGRҧQKKѭӣng bӣi thӡi gian và chi phí vұn chuyӇQ'RÿyFӫa cҧi trҳQJWKѭӡQJÿѭӧc chӃ biӃQWUѭӟc khi xuҩt khҭu, mӝt sӕ sҧn phҭm có thӇ kӇ tӟLQKѭFӫ cái ngâm muӕi, cӫ cҧi bào sӧi sҩy khô, cӫa cҧi cҳt lỏt sҩy, cӫ cҧi cҳWOiWÿ{QJOҥnh, hoһc kӃt hӧp vӟi cỏc sҧn phҭm khỏc ô[3, 4].
Thành phҫn hóa hӑc
Các thành phҫn hóa hӑFFѫEҧn cӫa 100g cӫ cҧi trҳQJÿѭӧc nêu ӣ bҧng 1.1 Trong cӫ cҧi trҳng, ngoài thành phҫQQѭӟc chiӃm tӍ lӋ cao thì protein chiӃm tӟi 1,5% khӕi Oѭӧng Cӫ cҧi có chӭa nhiӅu acid amin thiӃt yӃXQKѭO\VLQHPHWKLRQLQHWU\SWRSKDQ phenylalanine, threonine, valine, leucine, isoOHXFLQHKLVWLGLQHôFNJQJQKѭFiFDFLG EpRQKѭDFLGSDOPLWLFDFLGROHLFDFLGOLQROHLFDFLGOLQROHQLF>@
Cӫ cҧi trҳQJFyKjPOѭӧng lipid thҩp Lipid trong cӫ cҧi giúp tҥo vӏ ngon cho cӫ
Trong cӫ cҧi, glucid chiӃPKjPOѭӧng cao Sucrose là mӝt loҥi carbohydrate dӵ trӳ quan trӑng trong thӵc vұWÿһc biӋWWURQJFiFFѫTXDQOѭXWUӳ QKѭFӫ, rӉ và hҥt Kích WKѭӟc cӫ cҧi càng lӟQWKuKjPOѭӧng sucrose và glucose càng cao Glucid trong cӫ cҧi trҳng bao gӗP ÿѭӡng, tinh bӝWSHFWLQYj [ѫĈѭӡng trong cӫ cҧi trҳng chӫ yӃu là glucose, mӝWOѭӧng nhӓ fructose, sucrose và pentosan Tinh bӝWWKD\ÿәi tùy theo giӕng, chiӃm tӯ ã;ѫFKLӃm mӝWOѭӧng khoҧng 1,5% gӗm chӫ yӃu là cellulose và hemicellulose có trong phҫn vӓP{QkQJÿӥ và thành tӃ bào cӫa cӫ cҧi trҳnJÿyQJYDL trò tҥo cҩu trúc, chӕng lҥi các va chҥPFѫKӑc Pectin chiӃm khoҧng 0,3%, chӫ yӃu tham gia vào cҩu tҥo cӫa thành tӃ bào, tӗn tҥi chӫ yӃXGѭӟi dҥng calcium pectate Ngoài ra, cӫ cҧi trҳng còn nәi bұt vӟLKjPOѭӧng lipid thҩSKjPOѭӧng vitamin và khoáng cao Mӝt sӕ NKRiQJYLOѭӧQJFNJQJÿѭӧc tìm thҩy trong cӫ cҧi trҳQJQKѭQK{PEDUL liti, mangan, silic, titan, flo và iod vӟLKjPOѭӧng tәQJOrQÿӃn 18àg/100g [6, 7, 8]
B̫ng 1.1 Thành ph̯n hóa h͕c cͯa 100g cͯ c̫i tr̷ng Vi t Nam [5]
STT Thành phҫn ĈѫQYӏ +jPOѭӧng
1.1.4.2 Các hӧp chҩt thӭ cҩp trong cӫ cҧi trҳng
Trong cӫ cҧi trҳng có nhiӅu enzyme ÿѭӧc tìm thҩ\QKѭHQ]\PHDP\ODVHLQYHUWDVH ȕ-JDODFWRVLGDVHSURWHDVHFHOOXODVHSHUR[LGDVH(Q]\PHLQYHUWDVHÿyQJYDLWUzTXDQ trӑng trong viӋc thӫ\SKkQÿѭӡng sucrose thành glucose và fructose ӣ thӵc vұt bұc cao, ÿһc biӋt là ӣ các mô dӵ trӳ Sucrose là mӝt sҧn phҭPEDQÿҫu cӫa phҧn ӭng quang hӧp, FK~QJFNJQJÿѭӧc xem là cacbohydrate vұn chuyӇn tӵ GRWURQJFiFFѫTXDQӣ thӵc vұt
Protease còn là enzyme quan trӑng trong viӋFÿLӅu chӍnh lҥi sӵ lão hóa ӣ cây [6]
Ngoài ra còn có các acid hӳXFѫFyOӧi cho sӭc khӓHQKѭDFLGPDOLFDFLGR[DOLF acid erythorbic có trong cӫ cҧi và acid erucic, acid linoleic, acid linolenic, acid oleic có trong hҥt cӫ cҧi Bên cҥQKÿyWURQJFӫ cҧi còn có acid palmitic, acid stearic trong dӏch trích ly ether dҫu hӓa tӯ hҥt cӫ cҧi, acid glutamic trong cӫ cҧi muӕi chua [9] Ӣ cӫ cҧi có nhiӅXDFLGSKHQROLFQKѭDFLGFDIIHLFDFLGS-coumaric, acid ferulic, acid hydroxycinnamic, acid p-hydroxybenzoic, acid vanillic, acid salicylic, acid gentisic, anthocyanin, pelargonidin, cyanidin Trong cӫ cҧi trҳng có các hӧp chҩWIODYRQRLGQKѭ quercetin, kaempferol, myricetin, apigenin và luteolin Ngoài ra, trong cӫ cҧi còn có polysaccharides, proteoglycans, sҳc tӕ, hӧp chҩt có chӭDOѭXKXǤnh, cDғFFKkғWNKDғQJ NKXkѴQVDSKDQLQYDҒVXOSKRUDSKHQH, ȕ-FDURWHQH+jPOѭӧng raphanusol A và B trong cӫ cҧi trҳQJ WăQJ NKL Fy iQK ViQJ Yj JLҧm khi thiӃu ánh sáng Raphanusol A và raphanusol B là chҩt ӭc chӃ sӵ WăQJWѭӣng cӫa cây trӗQJÿӇ cây cӫ cҧi không bӏ úa vàng và hҥt cӫ cҧi bӏ Kѭ>@
0LKăQJFӫa cӫ cҧLÿѭӧc tìm thҩy bӣi hӧp chҩt glucosinolate Ӣ cӫ cҧi tӗn tҥi 4 loҥi glucosinolate là glucoraphenin, dehydroerucin, glucobrassicin và glucoerucin
Glucosinolate trong cӫ cҧLJL~SWăQJOѭӧng enzyme tham gia vào viӋc giҧLÿӝc các chҩt
Jk\XQJWKѭ&Kҩt này có tiӅPQăQJÿѭӧc sӱ dөQJQKѭPӝt chҩWQJăQFKһn sӵ lão hóa [1].
Tác dөng sinh hӑc cӫa cӫ cҧi trҳng
1ѭӟc ép cӫ cҧi có hoҥt tính kháng khuҭQ ÿiQJ NӇ ÿӕi vӟi Escherichia coli, Pseudomonas aeruginosa, Staphylococcus aureus, Klebsiella pneumoniae, Enterococcus faecalis Dӏch chiӃt xuҩt tӯ vӓ rӉ cӫ cҧi bҵng ethyl acetate ӭc chӃ
S.aureus, Bacillus subtilis, Salmonella typhi, K.pneumoniae Dӏch chiӃt xuҩt bҵng ethanol có khҧ QăQJ ӭc chӃ Micrococcus luteus, P.aeruginosa, Bordetella bronchiseptica và Enterobacter aerogenes Dӏch chiӃt bҵng dung môi acetone và hexane tӯ rӉ, cӫ cҧi, thân và lá có hoҥt tính kháng khuҭn chӑn lӑc chӕng lҥi vi khuҭn
B.subtilis, S.aureus, Staphylococcus epidermidis, E.faecalis, Salmonella
Typhimurium, E.aerogenes, Enterobacter cloacae và E.coli Hoҥt tính kháng khuҭn mҥnh nhҩt là dӏch chiӃt acetone tӯ cӫ cҧi vӟi vùng ӭc chӃ lӟQKѫQYjQӗQJÿӝ ӭc chӃ tӕi thiӇu thҩSKѫQ.Ӄt quҧ WKXÿѭӧFWѭѫQJÿѭѫQJYӟi các kháng sinh tiêu chuҭn Trong sӕ các bӝ phұn khác nhau cӫa R.sativus ÿѭӧc nghiên cӭu, cӫ cҧLFy[XKѭӟng ӭc chӃ sӵ phát triӇn cӫa vi khuҭn mҥQKKѫQVRYӟi các chiӃt xuҩt tӯ thân và lá hӑ Brassicaceae [1]
5DSKDQLQÿѭӧc chiӃt xuҩt tӯ hҥt cӫ cҧLÿmӭc chӃ sӵ WăQJWUѭӣng cӫa Staphylococcus và vi khuҭn Coliform Các acid p-hydroxybenzoic (hydroxycinnamic, p- hydroxybenzoic) có khҧ QăQJӭc chӃ hoҥWÿӝng cӫa vi khuҭQ*UDPGѭѫQJ.KLQX{L vi khuҭn Pseudomonas cichorii trên cӫ cҧi trҳng sӁ WKXÿѭӧc mӝt sӕ hӧp chҩt chӕng nҩPQKѭEUDVVLQLQPHWKR[\EUDVVLQLQVSLUREUDVVLQLQYj-indolecarbaldehyde Acid caffeic có khҧ QăQJӭc chӃ hoҥWÿӝng cӫa nҩm Helminthosporium maydis Acid ferulic ӭc chӃ Corynebacterium diphtheria, Aspergillus niger và Candida albicans Nhӳng acid này còn ӭc chӃ hoҥWÿӝng cӫa vi khuҭQ*UDPGѭѫQJQKѭB.subtilis, S.aureus và vi khuҭQ*UDPkPQKѭE.coli, K.pneumoniae [1, 9]
Các protein giàu cystein (Rs-AFP1và Rs-AFP2) tӯ hҥt cӫ cҧLÿmFKӭng tӓ có hoҥt tính kháng nҩm mҥnh Các protein này nҵm trong thành tӃ bào và xuҩt hiӋn chӫ yӃu giӳa các lӟp tӃ bào phӫ ErQQJRjLFiFFѫTuan cӫa hҥt giӕQJ+ѫQQӳa, các Rs-AFP ÿѭӧFѭXWLrQJLҧi phóng trong quá trình hҥt nҧy mҫm sau khi phá vӥ lӟp vӓ hҥt Hai protein kháng nҩm Rs-AFP1 và Rs-AFP2 phân lұp tӯ hҥt cӫ cҧi (R.sativus) ӭc chӃ hoҥt ÿӝQJWăQJWUѭӣng cӫa C.albicans và Saccharomyces cerevisiae Protein Rs-AFP1 cô lұp tӯ cӫ cҧi cho thҩy hoҥt tính kháng nҩm chӕng lҥi Fusarium culmorum Hoҥt tính kháng khuҭn cӫDFK~QJÿһc hiӋXFDRÿӕi vӟi nҩm sӧi Rs-AFP2 (Raphanus sativus DQWLIXQJDOSHSWLGHNKLWѭѫQJWiFYӟi glucosylceramid (GlcCer) trong màng cӫa nҩm men và các loҥi nҩm, viӋc này gây ra sӵ thҭm thҩu qua màng tӃ bào và gây chӃt tӃ bào nҩm [1, 9]
Trong cӫ cҧi có chӭa các hӧp chҩt diӋt khuҭn, chӫ yӃXOjLVRWKLRF\DQDWHÿѭӧc sҧn sinh ra trong quá trình enzyme phân hӫy glucosinolate trong tӃ bào thӵc vұt Hoҥt tính kháng nҩm cao hay thҩp phө thuӝc vào nӗQJ ÿӝ isothiocyanate NăP ORҥi LVRWKLRF\DQDWH ,7& NKiF QKDX QKѭ DOO\O LVRWKLRF\DQDWH $,7& SKHQ\O isothiocyanate (PITC), benzyl isothiocyanate (BITC), phenethyl isothiocyanate và 4- (methylthio) -3-EXWHQ\OLVRWKLRF\DQDWH07%,7&ÿѭӧc tìm thҩy ӣ các bӝ phұn khác nhau cӫa cây trӗQJ7ѭѫQJTXDQWX\Ӄn tính thҩp giӳa tәQJKjPOѭӧng ITC và hoҥt tính kháng khuҭn cho thҩy khҧ QăQJӭc chӃ WăQJWUѭӣng cӫa vi khuҭn cӫa R.sativus không phө thuӝc vào tәQJKjPOѭӧng ITC Tuy nhiên, hoҥt tính kháng khuҭn cӫa R.sativus
FyWѭѫQJTXDQFKһt chӁ vӟi AITC, PITC và BITC cho tҩt cҧ các vi sinh vұt ngoҥi trӯ
E.faecalis, có tác dөng ӭc chӃ có liên quan nhiӅXÿӃn MTBITC [1]
7UkҒQ7KL ҕ+{ҒQJYDҒF{ ҕQJVѭҕÿDѺQJKLrQFѭғXVѭѴGX ҕQJHQ]\PHSHUR[\GDVHWDғFKFKLrғWWѭҒFXѴFDѴLWUăғQJÿrѴ[DғFÿL ҕQKKDҒPOѭѫҕQJWKXѴ\QJkQWURQJQѭѫғF{QKLrѺP7URQJQJKLrQFѭғXÿDѺchiӃt tách thànhF{QJHQ]\PHSHUR[\GDVH32'WѭҒFXѴFDѴLWUăғQJEăҒQJFDғFKxayQKRѴJFXѴFDѴLWѭѫiYѫғLPOQѭѫғFWKrPml Na2SO3OR ҕFOkғ\QѭѫғFWURQJ/DҒPVD ҕFKHQ]\PHEăҒQJFDғFKNrғWWXѴDYѫғLPX{ғL1+ 4 )2SO4YDҒWKkѴPWÕғFKWURQJWXғLFHOORSKDQHYѫғLP{LWUѭѫҒQJÿr ҕPQDWULDFHWDWHN KrғWTXDѴQJKLrQFѭғXFKRWKkғ\KDҒPOѭѫҕQJSURWHLQWURQJFXѴFDѴLODҒPJJHQ]\PH32'FXѴDFXѴFDѴLKRD ҕWÿ{ ҕQJPD ҕQKQKkғWѫѴS+LRQ+J 2+ DѴQKKѭѫѴQJÿrғQKRD ҕWWÕғQKFXѴD32'HQ]\PHKRDҒQWRDҒQPkғWKRD ҕW tÕғQKWD ҕLJLDғWUL ҕQ{ҒQJÿ{ ҕmg/l Hg 2+ 'RYk ҕ\FRғWKrѴGXҒQJ32'ÿrѴ[DғFÿL ҕQKKDҒPOѭѫҕQJ ion Hg 2+ WURQJQѭѫғF{QKLrѺPQ{ҒQJÿ{ ҕã 5mg/l [10]
GҫQÿk\Fӫ cҧi trҳng xuҩt hiӋn rҩt nhiӅu trong các nghiên cӭu vӅ khҧ QăQJFKӕng oxi hóa, kháng khuҭn và có mӝt sӕ tính chҩWGѭӧc liӋu, mӝt sӕ nghiên cӭXÿLӇn hình có thӇ kӇ ÿӃQQKѭ
G Aruna và cӝng sӵFXѺQJÿDѺQJKLrQFѭғX[iFÿӏQKÿѭӧc công thӭc cҩu tҥo cӫa DQWKRF\DQLQ7DғFJLDѴFXѺQJÿDѺQrXUDFDғFKVѭѴGX ҕQJFDғFE{ ҕSKk ҕQFXѴDFXѴFDѴLWUăғQJ ѭғQJGX ҕQJWURQJ\KR ҕFQKăҒPPX ҕFÿÕғFKFKѭѺDEr ҕQK tӯODғFXѴFDѴLGXҒQJFK{ғQJXQJWKѭYDҒ NKDғQJNKXkѴQGRFRғJO\FRVLGHYDҒIODYRQRLG[11]
Gutierrez và cӝng sӵÿDѺQJKLrQFѭғXvàNKăѴQJÿL ҕQKQѭѫғFHғSWѭҒFXѴFDѴLWUăғQJ FRғWDғFGX ҕQJѭғFFKrғVѭҕVLQKWUѭѫѴQJFXѴDYLNKXkѴQ*UDPGѭѫQJYDҒFDѴ*UDPkPQKLrҒX ORD ҕL QkғP E.coli, Pseudomonas pyocyaneus, S.typhi, B.subtilis, C.albicans,
S.cerevisiaeYDҒF.culmorum, GRVѭҕW{ҒQWD ҕLFXѴDFDғFSHSWLGHJLDҒXF\VWHLQ5V$)3YDҒ 5V$)3FRғNKDѴQăQJѭғFFKrғVѭҕphát trLrѴQFXѴDQKLrҒXORD ҕLQkғPYѫғLQ{ҒQJÿ{ ҕQKRѴQKkғW ± ȝJPO FDғFSURWHLQ5$3N'DYDҒ 5$3-2 (6,2N'D DFLG FDIIHLF DFLG IHUXOLFDFLGSK\GUR[\EHQ]RLF1JRDҒLUDFXѺQJWKHRF{QJE{ғQDҒ\FXѴFDѴLFRҒQFRғKRD ҕW WếғQKPLrѺQGL ҕFKFK{ғQJR[\KRғDFK{ғQJXQJWKѭô[12]
Preeti Singh và Jaspal Singh (2013) ÿDѺF{QJE{ғFDғFWKDҒQKSKkҒQKRD ҕWWÕғQKFRғWDғF GX ҕQJFKѭѺDEr ҕQKFRғWURQJFXѴFDѴLWUăғQJ&DғFSRO\SKHQROLFWURQJFXѴFDѴLWUăғQJÿѭѫҕF[DғF ÿL ҕQK ODҒ DFLG SURWRFDWHFKXLF DFLG YDQLOOLF DFLG V\ULQJLF DFLG RFRXPDULF DFLGS FRXPDULFDFLGFDIIHLFDFLGSKHQ\OS\UXYLFDFLGJHQWLVLFYDҒDFLGSK\GUR[\EHQ]RLF 7URQJGL ҕFKWUÕғFKO\FXѴDFXѴFDѴLWUăғQJÿDѺ[DғFÿL ҕQKVѭҕFRғPă ҕWFXѴDFDWHFKLQYѫғLKDҒPOѭѫҕQJ
1PJJYDҒDFLGVipanic 4,83PJJ1JRDҒLUDFRҒQFRғDFLGIHUXOLFP{ ҕWFKkғWFRғWDғF GX ҕQJFK{ғQJOD ҕLVѭҕR[\KRғDѭғFFKrғSKDѴQѭғQJFKX{ѺLFXѴDFDғFJ{ғFWѭҕGRFXѺQJÿDѺÿѭѫҕF WÕҒPWKkғ\YѫғLKDҒPOѭѫҕQJQKLrҒXKѫQFDѴWURQJFRѴOLQKOăQJUDXELQDEăғSFDѴL7KHRWDғF JLDѴFXѴFDѴLWUăғQJFRғWDғFGX ҕQJÿLrҒXWUL ҕFDғFFKѭғQJKRÿDXGD ҕGDҒ\FDғFYkғQÿrҒYrҒJDQWDғR ERғQFKѭғQJNKRғWLrXYLrPNKѫғSVRѴLPk ҕWVRѴLWKk ҕQYDҒFDѴXQJWKѭ [7]
Amina và cӝng sӵNKDѴRVDғWDѴQKKѭѫѴQJFXѴDGL ҕFKFKLrғWWѭҒKD ҕWFXѴFDѴLEăҒQJ HWKDQROYDҒLactobacillus acidophilusOrQYLNKXkѴQJk\Er ҕQKÿѭѫҒQJUX{ ҕWE.coliWURQJ ÿLrҒXNLr ҕQLQYLWURYDҒLQYLREăҒQJSKѭѫQJSKDғSÿRÿѭѫҒQJNÕғQKYRҒQJѭғFFKrғLQYLWURYDҒ NKDѴRVDғWJLDѴLSKkѺXÿѭѫҒQJUX{ ҕWYDҒJDQWUrQFKX{ ҕWLQYLYR.rғWTXDѴQJKLrQFѭғXFKRWKkғ\
FDѴKDLWDғFQKkQGL ҕFKFKLrғWWѭҒKD ҕWFXѴFDѴLEăҒQJHWKDQROYDҒL.acidophilusÿrҒXFRғWDғFGX ҕQJ ѭғFFKrғVѭҕphátWULrѴQFXѴDE.coli vӟLÿѭӡQJNtQKÿѭӡng kháng khuҭnODҒ± 28PP.KL VѭѴGX ҕQJL.acidophilus NrғWKѫҕSYѫғLE.coliKRD ҕWWÕғQKѭғFFKrғEăғWÿkҒXVDXJLѫҒYDҒVDX JLѫҒQKk ҕQWKkғ\E.coliNK{QJWKrѴSKátWULrѴQÿѭѫҕFQѭѺD*LDѴLSKkѺXP{WUrQJDQYDҒUX{ ҕWFKR WKkғ\FDѴÿrҒXFRғWDғFGX ҕQJѭғFFKrғE.coliYDҒQJăQFDѴQKLr ҕQWѭѫҕQJYLrPQKLrѺPKD\QKѭѺQJ WKD\ÿ{ѴLQJX\KD ҕLWUrQP{ [13]
Faiyaz và cӝng sӵWÕҒPKLrѴXYrҒWÕғQKNKDғQJNKXkѴQFXѴDGL ҕFKFKLrғWWѭҒKD ҕWFXѴFDѴL
Raphanus sativus Linn trên S.aureus, E.coli, P.aeruginosa, Shigella sonnei, S.typhi,
Salmonella Paratyphi, Proteus vulgaris, K.pneumonie.rғWTXDѴQJKLrQFѭғXFKRWKkғ\
GL ҕFKFKLrғWWKXÿѭѫҕFEăҒQJFDғFGXQJP{LNKDғFQKDXÿrҒXFRғKRD ҕWWÕғQKNKDғQJNKXkѴQѭғF FKrғÿѭѫҕFVѭҕVLQKWUѭѫѴQJFXѴDFDғFFKXѴQJYLNKXkѴQNKDѴRVDғWQKѭQJPѭғFÿ{ ҕFRғNKDғFQKDX PD ҕQKQKkғWWKX{ ҕFYrҒQKRғPGXQJP{LHWKDQROYDҒPHWKDQRO.rғWTXDѴSKkQWÕғFKWKDҒQKSKkҒQ GL ҕFKFKLrғWFXѺQJFKRWKkғ\WURQJP{ѺLGXQJP{LNKDғFQKDXWKDҒQKSKkҒQFKLrғWÿѭѫҕFODҒNKDғF QKDX J{ҒP QKѭѺQJ FKkғW VDXflavonoid, alkaloid, glycoside, carbohydrate, phenol, saponin, sterol, tannin [14]
%HHYLYjFӝQJVӵÿm[iFÿӏQKKjPOѭӧQJSRO\SKHQROWURQJR.sativus dao ÿӝQJWURQJNKRҧQJ± 63,54PJJFKҩWNK{.ӃWTXҧSKkQWtFK+3/&FKRWKҩ\
WKjQK SKҫQ QKLӅX QKҩW WURQJ ÿy Oj FDWHFKLQ WURQJ GӏFK FKLӃW EҵQJ QѭӟF Yj DFLG VLQDSLFWURQJGӏFKFKLӃWPHWKDQROHWK\ODFHWDWHKH[DQ>15]
$JDUZDOYj9DUPDÿmQJKLrQFӭXYӅWKjQKSKҫQVLQKKyDYjNKҧQăQJNKӱ JӕFWӵGRFӫDFӫFҧLWUҳQJ.ӃWTXҧF{QJEӕFKRWKҩ\GӏFKFKLӃWWURQJQѭӟFFӫDSKҫQ FӫFyNKҧ QăQJNKiQJR[LKyDӣPӭFYӟLQӗQJÿӝJPOJLiWUӏ,&50 là 166,79JPO.ӃWTXҧSKkQWtFKFKRWKҩ\WURQJGӏFKFKLӃWFyVӵWӗQWҥLFӫDDONDORLG flavonoid, glycoside, tannin, triterpenoid và steroid [16]
1JRDҒLUDFRҒQFó Surekha và cӝng sӵFXѺQJQJKLrQFѭғXYrҒNKDѴQăQJNKDғQJNKXkѴQFXѴDGL ҕFKFKLrғWFXѴFDѴLWUrQP{ ҕWV{ғGRҒQJYLNKXkѴQNKDғF nhau [17].
Flavonoid
Cҩu tҥo
Flavonoid có cҩXWU~FFăQEҧn là 1,3-GLSKHQ\OSURSDQQJKƭDOjYzQJEHQ]HQH$ và B nӕi vӟi nhau qua mӝWGk\FyFDUERQQrQWKѭӡQJÿѭӧc gӑi là C6- C3- C6 Cách ÿiQKVӕ tùy thuӝc vào dây C3ÿyQJKD\Kӣ NӃu dây C3 ÿyQJWKuÿiQKVӕ tӯ dӏ vòng vӟi dӏ nguyên tӕ oxygen mang sӕ 1 rӗLÿiQh tiӃSÿӃQYzQJ$FzQYzQJ%ÿiQKVӕ phө
NӃu dây C3 hӣÿiQKVӕ FKtQKWUrQYzQJ%YjÿiQKVӕ phө trên vòng A [18, 21]
7Kѭӡng các flavonoid có mang mӝt hoһc nhiӅu nhóm ±OH ӣ vӏ trí 5 và 7 trên nhân A và ӣ vӏ trí 3, 4, 5 trên nhân B Các flavonoid có thӇ hiӋn diên ӣ dҥng tӵ do hoһc dҥng JO\FRVLGH&iFÿѭӡQJWKѭӡng gһp nhҩWOjÿѭӡng D-glucose, kӃ ÿyOj'-galactose, L- rhamnose, L-arabinose, D-xylose, D-apiose và acid uronic [18].
Phân loҥi
&iFIODYRQRLGÿѭӧc phân thành nhiӅu nhóm vӟi cҩXWU~FFѫEҧn khác nhau Dӵa vào viӋc sinh tәng hӧp, fODYRQRLGÿѭӧc phân loҥLQKѭVDX
- Euflavonoid là các flavonoid có gӕc aryl ӣ vӏ trí C2.
- Isoflavonoid là flavonoid có gӕc aryl ӣ vӏ trí C3.
- Neoflavonoid là flavonoid có gӕc aryl ӣ vӏ trí C4.
- Biflavonoid là nhӳng flavonoid dimer
- Triflavonoid là nhӳng flavonoid trimer
- Flavonlignan là phân tӱ flavonoid mà phân tӱ có mӝt phҫn cҩu trúc lignan
B̫ng 1.2 Phân lo̩i các nhóm flavonoid theo c̭u trúc
1 Flavon Vòng B gҳn vӟi vòng C qua dây nӕi C2
2 Flavonol Có thêm nhóm ±OH ӣ C3
3 Flavanon ThiӃu dây nӕLÿ{Lӣ C2 và C3 Tҩt cҧ flavonon
WKѭӡng có nhóm ±OH ӣ vòng A hoһc vòng B
4 Flavanol Không có nӕi ÿ{L C2 ± C3, có nhóm ±OH tҥi vӏ trí C2
5 Chalcon Là flavonoid mӣ vòng, 2 nhân WKѫPNӃt hӧp vӟi nhau bҵng mӝWGm\FDUERQĮ ȕNK{QJEmRKzD 5 Dihydrochalcon Là Chalcon bӏ mҩt nӕLÿ{LĮ ± ȕ
6 Anthocyanidin Không có nhóm carbonyl ӣ nhóm C4 R1, R2 là OH,
OCH3 R3 là glycosyl R4 là glycosyl và OH
7 Auron Là mӝt hӋ thӕng hai benzylliden cumaron
Hình 1.4 C̭u trúc hóa h͕c cͯa m͡t s͙ lo̩i flavonoid
Chalcon hiӋn diӋn ít trong tӵ QKLrQIODYDQROYjIODYDQRQROFNJQJKLӃm gһp, flavon và flavonol phân bӕ rӝng trong tӵ QKLrQ&iFJOXFRVLGIODYRQROQKѭUXWLQTXHUFLWULQ kaempherol rҩW WKѭӡng xuyên xuҩt hiӋn Do có nhiӅu nhóm ±OH phenol nên các flavonoid có thӇ liên kӃt vӟLQKDXÿӇ tҥo thành các chҩt phӭc tҥSKѫQKRһc tҥo vӟi các hӧp chҩt khỏc trong cõy, vớ dө kӃt hӧp vӟLÿѭӡng tҥRWKjQKJO\FRVLGHô>1, 22].
Tính chҩt hóa lý cӫa flavonoid
&iFIODYRQRLGWKѭӡng dӉ kӃWWLQKYjWKѭӡng có màu Flavon có màu vàng nhҥt hoһc màu cam; flavonol có màu vàng nhҥWFKDOFRQFyPjXYjQJÿӃQFDPÿӓ Các isoflavon, flavononol, leucoanthocyanidin, catechin kӃWWLQKNK{QJPjX$QWKRF\DQLGLQWKѭӡng hiӋn diӋn ӣ dҥQJ JO\FRVLGH SHODUJRQLGLQ F\DQLGLQJ GHOSKLQLGLQô Wҥo màu xanh GѭѫQJÿӓ, tím cho hoa và trái [18]
Các flavonoid dӉ WDQWURQJQѭӟFWURQJQѭӟc nóng tan tӕt hѫQQѭӟc lҥnh Chúng FNJQJWDQWURQJGXQJP{LSKkQFӵFQKѭPHWKDQROHWKDQRODFHWRQHHWK\ODFHWDWHYjFiF hӛn hӧp cӫa chúng Các flavonoid có khӕLOѭӧng phân tӱ nhӓ FyNKX\QKKѭӟng tan tӕt KѫQWURQJPHWKDQROWURQJNKLFiFIODYRQRLGFyNKӕLOѭӧng phân tӱ lӟn thì tan tӕWKѫQ trong acetone [20]
Các flavonoid dӉ tҥo muӕLWDQWURQJQѭӟc vӟi các hydroxyd kiӅm Khi có thêm nhóm carbonyl trong phân tӱ và khi có nhiӅu nhóm ±OH thì tính acid lҥLFjQJWăQJ thêm và flavonoid có thӇ tan trong dung dӏch NaHCO3
Flavonoid dӉ thӫ\SKkQWURQJP{LWUѭӡng acid, kiӅm nhҽ và bӣLFiFHQ]\PHȕ- glucosidase Nhóm OH WKѭӡng tҥo phӭFÿѭӧc vӟi AlCl3, NaOH, KOH, NH4OH cho PjXYjQJÿһFWUѭQJ6ӵ có mһt cӫa các nhóm chӭc này là nguyên nhân làm cho các flavonoid tӵ nhiên có ái lӵc mҥnh ÿӕi vӟi các ion kim loҥi hóa trӏ QKѭ)H&X=Q, và có thӇ tҥo phӭc chҩt bӅn vӳng vӟi các nguyên tӕ chuyӇn tiӃp ӣ chu kì 4
Các nhóm ±OH tӵ do rҩt dӉ tѭѫQJWiFYӟi các liên kӃt hydro nӝi phân tӱ hoһc giӳa các phân tӱ vӟi nhau HiӋQ Wѭӧng này ҧQK Kѭӣng nhiӅu tӟi nhӳng tính chҩt cӫa IODYRQRLGQKѭÿLӇPV{LÿLӇm nóng chҧ\ÿӝ KzDWDQÿһc tính phә tӱ ngoҥi, cҩu trúc phân tӱ Khҧ QăQJSKҧn ӭQJFNJQJFyWKӇ giҧPÿiQJNӇ
Các flavonoid rҩt dӉ bӏ oxi hóa Quá trình này có kèm theo sӵ mӣ vòng pyron và ÿyFNJng là nguyên nhân gây ra tác dөQJIODYRQRLGÿӕi vӟi enzym oxy hóa khӱ NhiӅu phҧn ӭQJR[LKyDNKiFQKѭ$J123, KMnO4 vүn ÿѭӧFGQJÿӏQKOѭӧQJYjÿӏnh tính flavonoid
HӋ thӕng nӕLÿ{LOLrQKӧp tҥo ra bӟi 2 vòng benzen và vòng pyron làm cho flavonoid có khҧ QăQJKҩp thө tia tӱ ngoҥL7KѭӡQJWKXÿѭӧc 2 dҧi hҩp thө cӵFÿҥi DҧLFyȜmax
= 320 ± 380nm DҧLFyȜmax = 240 ± 280nm Tùy theo pH cӫDP{LWUѭӡQJÿLӅu kiӋn tҥo muӕi và phӭc vӟi kim loҥi (K, Na, Fe hoһF$OPjEѭӟc sóng hҩp thө có thӇ dӏch chuyӇn Dҧi 1 ӭng vӟi vòng A, dҧi 2 ӭng vӟi vòng B NӃu trong phân tӱ có nhiӅu nhóm ±OH thì dҧi 1 sӁ dӏch chuyӇn vӅ SKtDFyEѭӟc sóng dài, còn dҧi 2 sӁ dӏch chuyӇn vӅ SKtDFyEѭӟc sóng ngҳn [23].
Vai trò cӫa flavonoid
Các nhóm phenol cӫa flavonoid có vai trò trong sӵ hòa tan các chҩt vì nó có thӇ di chuyӇn dӉ dàng qua các màng sinh lý Mӝt sӕ flavonoid có tác dөQJQKѭPӝt chҩt chӕng oxi hóa, bҧo vӋ QKѭDFLGDVFRrbic, mӝt thành phҫn quan trӑng trong tӃ bào thӵc vұt Mӝt sӕ có tác dөng ӭc chӃ enzym và các chҩWÿӝc cӫa cây [25]
1.2.4.2 Vai trò ӭc chӃ YjNtFKWKtFKVLQKWUѭӣng
NhiӅu công trình nghiên cӭu vӅ tác dөng cӫa flavonoid ӭc chӃ và kích thích sinh WUѭӣng cӫa cây Nhóm chӭc hydroxyl có vai trò quyӃWÿӏnh vӅ tác dөng này Ví dө: trong cõy әi, cỏc flavonoid cú nhúm OH ӣ vӏ WUtảOjPWăQJFѭӡng hoҥt tớnh cӫa enzym trong khi cỏc flavonoid cú OH ӣ ảYjảOҥi cú tớnh ӭc chӃ Flavonoid cũn tham gia vào sӵ hô hҩp quang hӧp [24]
)ODYRQRLGÿyQJYDLWUzWҥo màu sҳc hҩp dүn cho cây, góp phҫQWK~Fÿҭy sӵ sinh tӗn cӫa cây và phát triӇn hoa, quҧ Sâu bӑ, nhӡ hӋ thӕng thӏ JLiFÿһc biӋt, chúng có thӇ nhұn biӃWÿѭӧc màu sҳc cӫa các loҥi cây
Trong viӋc tҥo màu sҳc, các flavon, flavonol, auron, chalcon cho màu vàng Trong khi, các anthocyanin cho màu hӗQJÿӓ, tím hoһc xanh thүm [18]
Mӝt sӕ IODYRQRLGNK{QJPjXWURQJOiÿyQJYDLWUzPӝt chҩt bҧo vӋ cây, gây cҧn trӣ vӟLÿӝng vұt ăQFӓ Vӏ ÿҳng và khó chӏu cӫDIODYRQRLGOjPFKRÿӝng vұWNKLăQFyFҧm JLiFNK{QJQJRQYjNK{QJWKtFKăQFiFORҥi cây cӓ này [25]
Gӕc tӵ do là nhӳng hӧp chҩt có hoҥWWtQKFDRÿѭӧc tҥRUDWURQJFѫWKӇ trong quá WUuQKWUDRÿәi chҩWKD\ÿѭӧFÿѭDYjRWӯ ErQQJRjL'RFyQăQJOѭӧng lӟn nên các gӕc tӵ GRFy[XKѭӟng phҧn ӭng vӟi mӝt sӕ chҩt hóa hӑc WURQJFѫWKӇ ÿӇ trӣ vӅ mӭFQăQJ
Oѭӧng thҩSKѫQ DRÿyFK~QJOjPWKD\ÿәi các quá trình trong cѫ thӇ Chúng là nguyên nhân gây nên trên 60 loҥi bӋnh cӫDFѫWKӇ, bao gӗm các bӋQKOLrQTXDQÿӃn quá trình OmRKyDXQJWKѭYj[ѫFӭQJÿӝng mҥFK&ѫWKӇ cung cҩp mӝt sӕ enzym ³WUXQJKzD´ các gӕc tӵ GRQj\QKѭQJNK{QJÿӫ'RÿyFXQJFҩp thêm các chҩt chӕng oxi hóa tӯ nguӗQGLQKGѭӥng là cҫn thiӃt cho cѫ thӇ
Các dүn xuҩt flavonoid có khҧ QăQJGұp tҳt các gӕc tӵ GRQKѭ+2522&iF gӕc này sinh ra trong tӃ bào bӣi nhiӅu nguyên nhân và khi sinh ra DNA thì sӁ gây ra ҧQKKѭӣng nguy hҥLQKѭ gây biӃn dӏ, hӫy diӋt tӃ EjRJk\XQJWKѭWăQJQKDQKVӵ lão hóa
Flavonoid tҥRÿѭӧc phӭc vӟi các ion kim loҥi mà chính các ion kim loҥi này là xúc tác cho nhiӅu phҧn ӭng oxy hóa Thành phҫn cӫa màng tӃ bào có các chҩt lipid dӉ bӏ peroxyd hoá tҥo ra nhӳng sҧn phҭm làm rӕi loҥn sӵ WUDRÿәi chҩWFNJQJGүQÿӃn sӵ hӫy hoҥi tӃ EjRĈѭDFiFFKҩt chӕQJR[\KyDQKѭIODYRQRLGYjRFѫWKӇ ÿӇ bҧo vӋ tӃ bào, có thӇ QJăQQJӯa các ngu\FѫQKѭ[ѫYӳDÿӝng mҥch, tai biӃn mҥch máu não, lão hóa tәQWKѭѫQJGREӭc xҥ, thoái hóa gan
Flavonoid cùng vӟi acid ascorbic tham gia trong quá trình hoҥWÿӝng cӫa enzym oxy - hóa khӱ Flavonoid còn ӭc chӃ WiFÿӝng cӫDK\DOXURQLGDVH(Q]\PQj\OjPWăQJ tính thҭm thҩu cӫa mao mҥch Khi enzym này thӯa sӁ gây ra hiӋQWѭӧng xuҩt huyӃt Gѭӟi da còn gӑi là bӋnh thiӃu vitamin P Thӵc nghiӋm này cho thҩy các flavonoid có nhúm ±OH tӵ do ӣ vӏ WUtảFyWiFÿӝng tӕWÿӕi vӟi sӵ nõng cao tớnh bӅn vӳng cӫa thành mҥch [18, 26, 27]
1.2.4.6 Tác dөng chӕng oxy hóa
Các hӑ oxy hoҥt tính là nguyên nhân gây ra các phá hӫy tӃ bào sinh hӑF QKѭ carbohydrat, lipid, protein, DNA Mӝt sӕ gӕc tӵ do nәi bұWQKѭ5221222*, H2O2, HO* Gӕc HO* là gӕc rҩt quan trӑng vì có khҧ QăQJSKҧn ӭng cӵc kǤ mҥnh
Các ion kim loҥLQKѭFe 2+ , Cu 2+ , xuҩt hiӋn rҩt rӝng rãi trong các tӃ bào sӕQJÿyQJYDL trò quan trӑQJWURQJTXiWUuQK[~FWiFÿӇ tҥo ra các gӕc HO*
Trong dung môi phân cӵc hay không phân cӵc, pH cao hay thҩp thì sӵ R[LKyDFNJQJ xҧy ra khác nhau Các nghiên cӭu khҧ QăQJFKӕng oxi hóa, loҥi các gӕc tӵ do gây hҥi
FKRFѫWKӇ còn chӭng minh rҵng khҧ QăQJÿyNK{QJFKӍ phө thuӝc vào sӕ Oѭӧng nhóm ±OH mà còn tùy thuӝc vào vӏ trí cӫa chúng trong cҩu trúc
Flavonoid là chҩt chӕng oxi hóa bҵng cách phҧn ӭng vӟi các gӕc tӵ do peroxyl cӫa lipid, chһWÿӭt phҧn ӭng dây chuyӅn Trong quá trình phҧn ӭng, các gӕc tӵ do cӫa IODYRQRLGFzQÿӗng thӡi kích hoҥt cho chuӛi phҧn ӭng mӟi bҵng cách lҩy hydro trong các acid không bão hòa
Bên cҥnh khҧ QăQJKRҥWÿӝQJQKѭOjPӝt chҩt chӕng oxy hóa, các flavonoid còn ÿѭӧc thӇ hiӋQQKѭOjPӝt chҩt tăQJFѭӡQJR[LKyD7iFÿӝng này là do sӵ tҥo thành các superoxid và hydro peroxid trong quá trình tӵ oxi hóa và làm giҧm hóa trӏ cӫa ion kim loҥi Ví dө:
$ĺ$++ dҥng quinone/dimer Ĉ{LNKLKRҥt tính kích hoҥt các gӕc tӵ do cӫa flavonoid lҥLYѭӧt trӝi Vӟi nӗQJÿӝ thҩSGѭӟi 1 ± 2 x 10 -6 mol/dm 3 ) thì tính chҩWWK~Fÿҭy oxi hóa thӇ hiӋn tӕt nhҩt Nӗng ÿӝ FDRKѫQWKuQJѭӧc lҥi, sӵ ӭc chӃ nәi bұWĈӕi vӟi metyl linoleat trong mӝt sӕ dung môi, hҵng sӕ tӕFÿӝ cӫa phҧn ӭQJÿӭt mҥch dây chuyӅn cӫDTXiWUuQKR[LKyDÿmÿѭӧc [iFÿӏnh rõ ràng [28, 29, 30]
Mӝt dүn xuҩt cӫa luteolin là 6-hydroxyluteolin có thӇ ӭc chӃ HQ]\PHĮ±glucosidaza ÿӃn 92% ӣ nӗQJÿӝ 500àM [24] Mӝt sӕ IODYRQRLGFNJQJÿmFKRWKҩy hoҥt tớnh ӭc chӃ ÿӕi vӟi enzyme xanhthine oxidase, ezyme xúc tác cho sӵ oxi hóa xanthine và hypoxanthine thành acid uric [32]
1.2.4.8 Tác dөng vӟi các bӋnh tim mҥch, tiӇXÿѭӡng
7iFÿӝng bҧo vӋ cӫa FiFIODYRQRLGÿӕi tim mҥch có thӇ do khҧ QăQJFӫa chúng trong viӋFQJăQQJӯa sӵ oxy hóa cӫa các lipoprotein tӹ trӑng thҩp, phòng ngӯD[ѫYӳa ÿӝng mҥFKQJăQFKһn sӵ tө huyӃt khӕLÿLӅu hòa nhӏSWLPQJăQQJӯa bӋnh mҥch vành và nhӗLPjXFѫWLPÿLӅu hòa huyӃt áp [ 32]
Các kӃt quҧ nghên cӭXÿmFKӍ ra rҵng các flavonoid tӵ QyFyYDLWUzQKѭFKҩt kích thích insulin hay có chӭFQăQJJLӕng insulin, ngoài ra chúng còn có sӵ ҧQKKѭӣQJÿӃn hoҥWÿӝng cӫa cỏc enzyme trong quỏ trỡnh chuyӇQKyDÿѭӡQJô>34, 35]
Flavonoid tӯ cӫ cҧi trҳng và khҧ QăQJNKiQJNKXҭn
Nguyên liӋu và thiӃt bӏ dөng cө
Nguyên liӋu
Cӫ cҧi trҳQJÿѭӧc thu hái vào tháng 7 QăPWҥi trang trҥi thuӝc huyӋQĈӭc Trӑng, tӍQK/kPĈӗng, ViӋt Nam
Cӫ cҧi trҳng thí nghiӋm thuӝc giӕng F1 TrӑQJOѭӧng 200 - 300g/cӫĈѭӡng kính 3 ÷ 4cm, chiӅu dài 15 ÷ 20cm
Gi ͙ ng vi khu ̱ n th ͵ nghi m: gӗm Bacillus cereus (VTCC 1005), Pseudomonas aeruginosa (ATCC 9027), Staphylococcus aureus (ATCC 6538), Salmonella typhi
0{LWU˱ͥng: MHA (Anh), MHB (Himedia), TSB (Pháp)
KiQJVLQKWK˱˯QJP̩i: gentamycin (10PJÿƭDÿѭӧc cung cҩp bӣi Công ty Nam
$%76ả-azino-EL]KRһFDFLG- sthylbenzothiazo line-6 sulphonic) (Sigma)
+ Acid galic (Sigma) (C6H 2 (OH) 3 COOH)
+ Chlorofrom (CHCl 3 ) + Natri cacbonat (Na2CO3) + CaCl2
ThiӃt bӏ và dөng cө
- Cân phân tích (Model TX323L, Nhұt Bҧn)
- 0i\ÿRTXDQJUV-VIS (Model Genesys 10S UV-Vis, Mӻ)
- Tӫ cҩy vô trùng (Vertical Laminar Flow Hood, Model: MV 12, Pháp)
- Nӗi hҩp tiӋt trùng (Model: BK 75, Nga)
- Tӫ ҩm lҥnh có lҳc (Model: LM-5'ĈjL/RDQ - %ӃSÿLӋQKӗQJQJRҥL.DQJDURR.*L
- 0i\Vҩ\ҭPKӗQJQJRҥL0$6DUWRULXV Và các thiӃt bӏ, dөng cө WK{QJWKѭӡng khác trong phòng thí nghiӋm
;iF ÿӏQK ÿѭӡng kính kháng khuҭn bҵng SKѭѫQJSKiSNKuӃFKWiQÿƭDJLҩy trên 4 loҥi vi khuҭn: Bacillus cereus, Pseudomonas aeruginosa, Salmonella typhi, Staphylococcus aureus
KhҧRViWÿLӅu kiӋn trích ly cao cӫ cҧi trҳng Ĉӏnh tính mӝt sӕ nhóm chҩt có hoҥt tính sinh hӑc trong cao tәng
7uPUDÿLӅu kiӋn WUtFKO\ÿӇ WKXÿѭӧFKjPOѭӧng flavonoid có hoҥt tính cao Khҧo sát loҥi dung môi, tӍ lӋ dung môi, nhiӋWÿӝ và thӡi gian trích ly Ĉӏnh tính các hӧp chҩt có hoҥt tính sinh hӑc có trong cao cӫ tәQJ QKѭ alkaloid, tannin, anthraquinones, saponin, flavonoid
Khҧo sát khҧ QăQJ kháng khuҭn tӯ cao tәng
;iF ÿӏQK ÿѭӡng kính kháng khuҭn bҵng SKѭѫQJSKiSNKXӃFKWiQÿƭDJLҩy trên 4 loҥi vi khuҭn: Bacillus cereus, Pseudomonas aeruginosa, Salmonella typhi, Staphylococcus aureus
Khҧo sát khҧ QăQJNKiQJ khuҭn tӯ cao flavonoid Khҧo sát quá trình trích ly
Khҧo sát quá trình trích ly cao tәng
;iFÿӏQKÿLӅu kiӋQWUtFKO\ÿӇ thu nhұn dӏch chiӃt giàu flavonoid và hoҥt tính chӕng oxi hóa tӯ cӫ cҧi trҳng bҵng hӋ dung P{LHWKDQROQѭӟc ắ Kh ̫ o sỏt n ͛QJÿ͡ ethanol
NhiӅu nghiên cӭu cho thҩy nӗQJÿӝ ethanol sӁ ҧQKKѭӣQJÿӃQKjPOѭӧng các hӧp chҩt chӕng sinh hӑc và khi trích ly các hӧp chҩt nói chung dӵa trên sӵ WѭѫQJWKtFKYӟi GXQJP{LWUtFKO\ÿyGXQJP{LFyWtQKSKkQFӵc sӁ trích ly tӕt các hӧp chҩt có tình phân cӵFYjQJѭӧc lҥi)
TiӃn hành khҧo sát nӗQJÿӝ ethanol sӱ dөng Các mӭFÿӝ nӗQJÿӝ ethanol khҧo sát: 0%, 25%, 50%, 75%, 100% (v/v) ắ Kh ̫ o sỏt t ͑ l dung mụi
Sau khi chӑQÿѭӧc loҥi dung môi phù hӧp sӁ tiӃp tөc khҧo sát tӍ lӋ dung môi trích ly Các tӍ lӋ giӳa bӝt cӫ cҧi trҳQJYjGXQJP{LGQJÿӇ khҧo sát là: 1/20, 1/30, 1/40, 1/50 (g/ml) ắ Kh ̫ o sỏt nhi Wÿ͡ trớch ly
Sau khi chӑQÿѭӧc loҥi dung môi và tӍ lӋ trích ly TiӃn hành khҧo sát nhiӋWÿӝ trích ly là: 40ႏႏႏႏႏ ắ Kh ̫ o sỏt th ͥ i gian trớch ly
Sau khi chӑQÿѭӧc nhiӋWÿӝ trích ly TiӃn hành khҧo sát nhiӋWÿӝ trích ly: 2 giӡ, 2,5 giӡ, 3 giӡ, 3,5 giӡ, 4 giӡ
KӃt thúc quá trình thí nghiӋm, chúng ta sӁ chӑQÿѭӧFÿLӅu kiӋn trích ly tӕt nhҩt
HiӋu quҧ quá trình ÿiQKJLiTXiWUuQKGӵDWUrQKjPOѭӧng flavonoid và khҧ QăQJ chӕng oxi hóa ABTS xét trên khӕLOѭӧng chҩt khô cӫ cҧi trҳng Các thí nghiӋm khҧo ViWQj\ÿѭӧc tiӃn hành lһp 3 lҫn
2Ĉӏnh tính thành phҫn các hӧp chҩt tӵ nhiên có mһt trong cao cӫ cҧi
Theo Kukum Agarwal và Rajana Varma (2014) cho biӃt trong cӫ cҧi có các nhóm chҩt alkaloid, glycoside, triterpenoid và steroid Bên cҥQKÿyG Aruna và cӝng sӵ
FXѺQJÿDѺQJKLrQFѭғXFDғFKѫҕSSKkҒQFRғWÕғQKFKkғWGѭѫҕFO\ғWURQJFXѴFDѴLWUăғQJYDҒÿDѺ[DғFÿL ҕQKÿѭӧFÿRғODҒFDғFIODYRQRLGJO\FRVLGHDONDORLGVDSRQLQWDQQLQSRO\SKHQRODQWKRF\DQLQJOXFRVLQRODWHYDҒLVRWKLRF\DQWH1JKLrQFӭu cӫa Safia Janiua và cӝng sӵ
FXѺQJFKRWKkғ\WURQJFXѴFDѴLWUăғQJW{ҒQWD ҕLFDғFKѫҕSFKkғWFRғWDғFGX ҕQJFKѭѺDEr ҕQKQKѭ tannin, saponin, flavonoid, phlobatannin, anthraquinone, carbohydrate, VWHURLG SK\WRVWHURODONDORLGDFLGDPLQWHUSHQRLGFDUGLDFJO\FRVLGHYDҒFKDOFRQH [11, 16, 49] ĈӇ làm rõ vӅ thành phҫn cao tәng trong nghiên cӭu này, ta tiӃn hàQKÿӏnh tính các hӧp chҩt alkaloid, tannin, anthraquinones, saponin, flavonoid Các thí nghiӋm khҧo sát Qj\ÿѭӧc tiӃn hành lһp 3 lҫn
2.2.3 Khҧo sát khҧ QăQJNKiQJNKXҭn cӫa cao tәng
Cao cӫ cҧi trҳQJÿѭӧc pha trong dung dӏch DMSO 5% vô trùng vӟi các nӗQJÿӝ 1600, 800, 400, 200 và 100PJPO&DRÿѭӧc cho lên khoanh giҩ\ÿѭӡng kính 6 mm) Y{WUQJ.KiQJVLQKÿѭӧc sӱ dөQJÿӇ ÿӕi chӭng là gentamycin, chӭng âm là là dung dӏch DMSO 5% vô trùng Các thí nghiӋm khҧRViWQj\ÿѭӧc tiӃn hành lһp 9 lҫn
2.2.4 Khҧo sát khҧ QăQJNKiQJNKXҭn cӫa cao flavonoid
7ѭѫQJWӵ&DRIODYRQRLGWKXÿѭӧc tӯ quá trình chiӃt tách sӁ ÿѭӧc pha loãng vӟi dung dӏch 5% vô trùng vӟi các nӗQJÿӝ WѭѫQJWӵ cao tәng: 1600, 800, 400, 200 và 100PJPO&DRÿѭӧc cho lên khoanh giҩ\ÿѭӡng kính 6mm) vô trùng Kháng sinh ÿѭӧc sӱ dөQJÿӇ ÿӕi chӭng là gentamycin, chӭng âm là là dung dӏch DMSO 5% vô trùng Các thí nghiӋm khҧRViWQj\ÿѭӧc tiӃn hành lһp 9 lҫn
Cӫ cҧLWѭѫLVDXNKLWKXKRҥFKÿѭӧc rӱa sҥch, cҳt lát dày 2mm và hҩp tҥi 100 o C trong YzQJSK~WÿӇ vô hoҥt enzyme Sau khi hҩp, cӫ cҧLÿѭӧFPDQJÿLVҩy tҥi 50 o C Trong tҩt cҧ các nghiên cӭu mүu bӝWNK{ÿӅXÿѭӧc sҩy ӣ ႏ trong vòng 4 ± 5 giӡ ÿӇ ÿҥt 6 ± 7% ҭm Theo Miean và cӝng sӵ FNJQJÿmNKҧo sát và cho thҩy tҥLႏFKR kӃt quҧ flavonoid là tӕt nhҩt [50] Cӫ cҧLNK{VDXÿyÿѭӧc xay nhӓ, lӑt qua sàng 40 mesh và bҧo quҧn trong túi PE, tránh ánh sáng ӣ -20 o C làm mүu nghiên cӭu
Nguyên t̷c: ÿӝ ҭPÿѭӧF[iFÿӏnh bҵQJSKѭѫQJSKiSVҩ\NK{ÿӃn khӕLOѭӧng không ÿәi
Cân khӕLOѭӧQJ[iFÿӏnh cӫa becher rӗi cho vào tӫ sҩy và sҩ\ÿӃn khӕLOѭӧng không ÿәL%HFKHUÿѭӧc sҩy ӣ 105 o C ± 2 o C trong vòng 1 giӡ và cho vào bình hút ҭm trong vòng 30 phút rӗi tiӃQKjQKFkQ%HFKHUÿѭӧFÿHPÿLVҩy tiӃp tөFÿӃn khi khӕLOѭӧng
EHFKHU NK{QJ ÿәi thì dӯng quá trình sҩy lҥi TiӃp tөc cân khoҧng 1g mүu cho vào EHFKHUYjÿHPVҩy ӣ 105 o C ± 2 o C trong vòng 1 giӡ6DXÿyFKRPүu vào bình hút ҭm ÿӇ làm nguӝLÿӃn nhiӋWÿӝ phòng rӗLVDXÿyWLӃn hành cân
Quá trình sҩ\Qj\ÿѭӧc tiӃp tөFÿӃn khi khӕLOѭӧng cӫa mүXNK{QJÿѭӧc lӟQKѫQ 0,05% so vӟi khӕLOѭӧng mүXFkQEDQÿҫu thì ngӯng [54]
7URQJÿy m1: là khӕLOѭӧng cӫa mүu thӱ WUѭӟc khi sҩy (g) m2: khӕLOѭӧng mүu thӱ sau khi sҩy (g)
2;iFÿLQKKjPOѭӧng tәng flavonoid
Nguyên t̷c: flavone, flavonol và isoflavonoid tҥo phӭc chҩt màu vàng vӟi dung dӏch nhôm clorua &ѭӡQJÿӝ màu tӍ lӋ thuұn vӟi dung dӏFKIODYRQRLGÿѭӧF[iFÿӏnh tҥi Eѭӟc sóng 415nm [55, 56@4XiWUuQK[iFÿӏnh gӗPFiFEѭӟc sau:
B̫ng 2.1 Thành ph̯n dung d͓FK[iFÿ͓QKÿ˱ͥng chu̱n flavonoid Ӕng 0 Ӕng 1 Ӕng 2 Ӕng 3 Ӕng 4
LҳFÿӅXÿӇ yên tҥi nhiӋWÿӝ SKzQJSK~WĈӝ hҩp thu cӫa dung dӏch ӣ Eѭӟc sóng 415nm, setting blank bҵng ӕng 0
B̫ng 2.2 K͇t qu̫ xây dQJÿ˱ͥng chu̱n flavonoid theo quercetin
Quercetin thӵc trong ӕng nghiӋm (ppm) 0 0,312 0,625 1,25 2,5 5 7,5
;iFÿӏnh trên mүu khҧo ViWOjPWѭѫQJWӵ QKѭQJWKD\ml mүu chuҭn quercetin bҵng dung dӏch chiӃt khҧo sát
7)&KjPOѭӧQJIODYRQRLGWәQJPJ4(J DKjPOѭӧQJTXHUFHWLQÿѭӧc tính tӯ ÿѭӡng chuҭn (ppm)
V: tәng thӇ tích dӏch chiӃt (ml) m: khӕLOѭӧng mүu (g) n: hӋ sӕ pha loãng
2.3;iFÿӏnh hoҥt tính chӕng oxi hóa ABTS
1JX\rQW̷F3KѭѫQJSKiSQj\GӵDWUrQNKҧQăQJOjPJLҧPÿӝKҩSWKXFӫDJӕF
WӵGRFDWLRQ$%76*+ EӣLFiFKRҥWFKҩWFyKRҥWWtQKFKӕQJR[\KyDӣEѭӟFVyQJ
734QP&ѭӡQJ ÿӝPjXFӫDWKXӕFWKӱ$%76*+ WӍOӋQJKӏFKYӟLQӗQJÿӝFiFFKҩW FKӕQJR[\KyDYjWKӡLJLDQSKҧQӭQJ'ӵDYjRÿѭӡQJFKXҭQWUROR[YӟLWKXӕFWKӱ VӁWtQKÿѭӧFKRҥWWtQKFKӕQJR[\KyDFӫDPүXSKkQWtFK
$%76ÿѭӧFSKDWURQJQѭӟFFҩWÿӃQQӗQJÿӝP0GXQJGӏFK$.2O2S8 pha WURQJQѭӟFFҩWÿӃQQ0GXQJGӏFK%*ӕFWӵGRFDWLRQ$%76 + ÿѭӧFWҥRUDEҵQJSKҧQӭQJJLӳDGXQJGӏFKYjGXQJGӏFK%WKHRWӍOӋYӅWKӇWtFKSKҧQӭQJGLӉQUDWURQJEyQJWӕLWӯ± JLӡӣQKLӋWÿӝSKzQJGXQJGӏFKVWRFN3KDORmQJGXQJGӏFKVWRFNEҵQJHWKDQROÿӇÿҥWÿӝKҩSWKXr ӣnm, setting blank
EҵQJGXQJGӏFKHWKDQROGXQJGӏFK&'XQJGӏFK&OX{QÿѭӧFFKXҭQEӏPӟLFKRWӯQJ SKpSWKӱ
B̫ng 2.3 Thành ph̯n dung d͓FK[iFÿ͓QKÿ˱ͥng chu̱n ABTS ӔQJ 0 ӔQJ 1 ӔQJ 2 ӔQJ 3 ӔQJ 4 ӔQJ 5 ӔQJ 6
Dung dich C (ml) 3 ĈӇ\rQSK~WÿӝKҩSWKXFӫDGXQJGӏFKVDXSKҧQӭQJÿѭӧFÿRWҥLEѭӟFVyQJ 734nm, setting EODQNEҵQJHWKDQRO
B̫ng 2.4 K͇t qu̫ xây dQJÿ˱ͥng chu̱n ABTS b̹ng ch̭t chu̱n Trolox
7UROR[WKӵFWURQJӕQJ QJKLӋP0 0,398 0,797 1,195 1,593 1,992 2,390
;iFÿӏQKWUrQPүXNKҧRViWOjPWѭѫQJWӵQKѭQJWKD\POGXQJGӏFKFKXҭQ WUROR[EҵQJGXQJGӏFKPүXNKҧRViW
AControl: ÿӝ hҩp thu cӫa ABTS*+ không có pha mүu
Kh̫ QăQJNK͵ g͙c t GRÿ˱ͫc tính theo công thͱc:
DKjPOѭӧng trolox (0[iFÿӏnh tӯ ÿѭӡng chuҭn
V: tәng thӇ tích chiӃt (ml) m: khӕLOѭӧng chҩt khô (g) n: hӋ sӕ pha loãng
250,29: khӕLOѭӧng phân tӱ trolox 'ӵDYjRÿѭӡQJFKXҭQÿӇWtQKWRiQKRҥWWtQKFKӕQJR[\KyD$%76WURQJPүXWKt QJKLӋP [57, 58].
2.3.4 Ĉӏnh tính thành phҫn các hӧp chҩt tӵ nhiên có mһt trong cao tәng ắ Ĉ͓ nh tớnh alkaloids
Cân 2g mүu cao cho vào 20ml dung dӏch acid sulfuric 5% trong ethanol 50% Thêm 2 giӑt dung dӏFKDPPRQLDFÿұPÿһc và thêm mӝt ít dung môi cloroform vào rӗi lҳc nhҽ ÿӇ trӝQÿӅu và hӛn hӧSÿѭӧFÿѭDYjRSKӉu chiӃt Chӡ mӝWO~FÿӇ hӛn hӧp tách lӟp rӗL ÿHP ÿL FKLӃW WKX ÿѭӧc 2 lӟp dӏch riêng biӋt rӗL ÿHP NLӇm tra vӟi thuӕc thӱ dragendorf LҫQOѭӧt cho 1ml thuӕc thӱ dragendorf vào trong 2 lӟp dӏFKÿѭӧc tách riêng biӋt Hӛn hӧp nào hình thành kӃt tӫDPjXQkXÿӓ chӭng tӓ có sӵ hiӋn diӋn cӫa alkaloids [59] ắ Ĉ͓ nh tớnh tannin
Lҩy 2g cao hòa tan trong 10ml dung dӏch ethanol 50% rӗi chia làm 3 phҫn bҵng nhau:
- Thӱ nghiӋm FeCl3: Nhӓ 3 giӑt dung dӏch FeCl3 vào phҫn thӭ nhҩt, màu sҳc cӫa mүu chuyӇn sang màu xanh lam hoһF PjX[DQK ÿHQ ÿұm chӭng tӓ mүu có tӗn tҥi tannin
- Thӱ nghiӋm gelatin: Hòa tan mӝWOѭӧng nhӓ gelatin dҥng hҥt vào trong phҫn thӭ hai rӗi lҳFÿӅXFKRJHODWLQKzDWDQKRjQWRjQ6DXÿyÿӇ yên hӛn hӧp, nӃu xuҩt hiӋn kӃt tӫa trҳQJOѫOӱng bên trong chӭng tӓ mүu cao có sӵ hiӋn diӋn cӫa tannin
Khҧo sát khҧ QăQJNKiQJNKXҭn cӫa cao tәng
Cao cӫ cҧi trҳQJÿѭӧc pha trong dung dӏch DMSO 5% vô trùng vӟi các nӗQJÿӝ 1600, 800, 400, 200 và 100PJPO&DRÿѭӧc cho lên khoanh giҩ\ÿѭӡng kính 6 mm) Y{WUQJ.KiQJVLQKÿѭӧc sӱ dөQJÿӇ ÿӕi chӭng là gentamycin, chӭng âm là là dung dӏch DMSO 5% vô trùng Các thí nghiӋm khҧRViWQj\ÿѭӧc tiӃn hành lһp 9 lҫn.
Khҧo sát khҧ QăQJNKiQJNKXҭn cӫa cao flavonoid
7ѭѫQJWӵ&DRIODYRQRLGWKXÿѭӧc tӯ quá trình chiӃt tách sӁ ÿѭӧc pha loãng vӟi dung dӏch 5% vô trùng vӟi các nӗQJÿӝ WѭѫQJWӵ cao tәng: 1600, 800, 400, 200 và 100PJPO&DRÿѭӧc cho lên khoanh giҩ\ÿѭӡng kính 6mm) vô trùng Kháng sinh ÿѭӧc sӱ dөQJÿӇ ÿӕi chӭng là gentamycin, chӭng âm là là dung dӏch DMSO 5% vô trùng Các thí nghiӋm khҧRViWQj\ÿѭӧc tiӃn hành lһp 9 lҫn
Cӫ cҧLWѭѫLVDXNKLWKXKRҥFKÿѭӧc rӱa sҥch, cҳt lát dày 2mm và hҩp tҥi 100 o C trong YzQJSK~WÿӇ vô hoҥt enzyme Sau khi hҩp, cӫ cҧLÿѭӧFPDQJÿLVҩy tҥi 50 o C Trong tҩt cҧ các nghiên cӭu mүu bӝWNK{ÿӅXÿѭӧc sҩy ӣ ႏ trong vòng 4 ± 5 giӡ ÿӇ ÿҥt 6 ± 7% ҭm Theo Miean và cӝng sӵ FNJQJÿmNKҧo sát và cho thҩy tҥLႏFKR kӃt quҧ flavonoid là tӕt nhҩt [50] Cӫ cҧLNK{VDXÿyÿѭӧc xay nhӓ, lӑt qua sàng 40 mesh và bҧo quҧn trong túi PE, tránh ánh sáng ӣ -20 o C làm mүu nghiên cӭu
Nguyên t̷c: ÿӝ ҭPÿѭӧF[iFÿӏnh bҵQJSKѭѫQJSKiSVҩ\NK{ÿӃn khӕLOѭӧng không ÿәi
Cân khӕLOѭӧQJ[iFÿӏnh cӫa becher rӗi cho vào tӫ sҩy và sҩ\ÿӃn khӕLOѭӧng không ÿәL%HFKHUÿѭӧc sҩy ӣ 105 o C ± 2 o C trong vòng 1 giӡ và cho vào bình hút ҭm trong vòng 30 phút rӗi tiӃQKjQKFkQ%HFKHUÿѭӧFÿHPÿLVҩy tiӃp tөFÿӃn khi khӕLOѭӧng
EHFKHU NK{QJ ÿәi thì dӯng quá trình sҩy lҥi TiӃp tөc cân khoҧng 1g mүu cho vào EHFKHUYjÿHPVҩy ӣ 105 o C ± 2 o C trong vòng 1 giӡ6DXÿyFKRPүu vào bình hút ҭm ÿӇ làm nguӝLÿӃn nhiӋWÿӝ phòng rӗLVDXÿyWLӃn hành cân
Quá trình sҩ\Qj\ÿѭӧc tiӃp tөFÿӃn khi khӕLOѭӧng cӫa mүXNK{QJÿѭӧc lӟQKѫQ 0,05% so vӟi khӕLOѭӧng mүXFkQEDQÿҫu thì ngӯng [54]
7URQJÿy m1: là khӕLOѭӧng cӫa mүu thӱ WUѭӟc khi sҩy (g) m2: khӕLOѭӧng mүu thӱ sau khi sҩy (g)
2;iFÿLQKKjPOѭӧng tәng flavonoid
Nguyên t̷c: flavone, flavonol và isoflavonoid tҥo phӭc chҩt màu vàng vӟi dung dӏch nhôm clorua &ѭӡQJÿӝ màu tӍ lӋ thuұn vӟi dung dӏFKIODYRQRLGÿѭӧF[iFÿӏnh tҥi Eѭӟc sóng 415nm [55, 56@4XiWUuQK[iFÿӏnh gӗPFiFEѭӟc sau:
B̫ng 2.1 Thành ph̯n dung d͓FK[iFÿ͓QKÿ˱ͥng chu̱n flavonoid Ӕng 0 Ӕng 1 Ӕng 2 Ӕng 3 Ӕng 4
LҳFÿӅXÿӇ yên tҥi nhiӋWÿӝ SKzQJSK~WĈӝ hҩp thu cӫa dung dӏch ӣ Eѭӟc sóng 415nm, setting blank bҵng ӕng 0
B̫ng 2.2 K͇t qu̫ xây dQJÿ˱ͥng chu̱n flavonoid theo quercetin
Quercetin thӵc trong ӕng nghiӋm (ppm) 0 0,312 0,625 1,25 2,5 5 7,5
;iFÿӏnh trên mүu khҧo ViWOjPWѭѫQJWӵ QKѭQJWKD\ml mүu chuҭn quercetin bҵng dung dӏch chiӃt khҧo sát
7)&KjPOѭӧQJIODYRQRLGWәQJPJ4(J DKjPOѭӧQJTXHUFHWLQÿѭӧc tính tӯ ÿѭӡng chuҭn (ppm)
V: tәng thӇ tích dӏch chiӃt (ml) m: khӕLOѭӧng mүu (g) n: hӋ sӕ pha loãng
2.3;iFÿӏnh hoҥt tính chӕng oxi hóa ABTS
1JX\rQW̷F3KѭѫQJSKiSQj\GӵDWUrQNKҧQăQJOjPJLҧPÿӝKҩSWKXFӫDJӕF
WӵGRFDWLRQ$%76*+ EӣLFiFKRҥWFKҩWFyKRҥWWtQKFKӕQJR[\KyDӣEѭӟFVyQJ
734QP&ѭӡQJ ÿӝPjXFӫDWKXӕFWKӱ$%76*+ WӍOӋQJKӏFKYӟLQӗQJÿӝFiFFKҩW FKӕQJR[\KyDYjWKӡLJLDQSKҧQӭQJ'ӵDYjRÿѭӡQJFKXҭQWUROR[YӟLWKXӕFWKӱ VӁWtQKÿѭӧFKRҥWWtQKFKӕQJR[\KyDFӫDPүXSKkQWtFK
$%76ÿѭӧFSKDWURQJQѭӟFFҩWÿӃQQӗQJÿӝP0GXQJGӏFK$.2O2S8 pha WURQJQѭӟFFҩWÿӃQQ0GXQJGӏFK%*ӕFWӵGRFDWLRQ$%76 + ÿѭӧFWҥRUDEҵQJSKҧQӭQJJLӳDGXQJGӏFKYjGXQJGӏFK%WKHRWӍOӋYӅWKӇWtFKSKҧQӭQJGLӉQUDWURQJEyQJWӕLWӯ± JLӡӣQKLӋWÿӝSKzQJGXQJGӏFKVWRFN3KDORmQJGXQJGӏFKVWRFNEҵQJHWKDQROÿӇÿҥWÿӝKҩSWKXr ӣnm, setting blank
EҵQJGXQJGӏFKHWKDQROGXQJGӏFK&'XQJGӏFK&OX{QÿѭӧFFKXҭQEӏPӟLFKRWӯQJ SKpSWKӱ
B̫ng 2.3 Thành ph̯n dung d͓FK[iFÿ͓QKÿ˱ͥng chu̱n ABTS ӔQJ 0 ӔQJ 1 ӔQJ 2 ӔQJ 3 ӔQJ 4 ӔQJ 5 ӔQJ 6
Dung dich C (ml) 3 ĈӇ\rQSK~WÿӝKҩSWKXFӫDGXQJGӏFKVDXSKҧQӭQJÿѭӧFÿRWҥLEѭӟFVyQJ 734nm, setting EODQNEҵQJHWKDQRO
B̫ng 2.4 K͇t qu̫ xây dQJÿ˱ͥng chu̱n ABTS b̹ng ch̭t chu̱n Trolox
7UROR[WKӵFWURQJӕQJ QJKLӋP0 0,398 0,797 1,195 1,593 1,992 2,390
;iFÿӏQKWUrQPүXNKҧRViWOjPWѭѫQJWӵQKѭQJWKD\POGXQJGӏFKFKXҭQ WUROR[EҵQJGXQJGӏFKPүXNKҧRViW
AControl: ÿӝ hҩp thu cӫa ABTS*+ không có pha mүu
Kh̫ QăQJNK͵ g͙c t GRÿ˱ͫc tính theo công thͱc:
DKjPOѭӧng trolox (0[iFÿӏnh tӯ ÿѭӡng chuҭn
V: tәng thӇ tích chiӃt (ml) m: khӕLOѭӧng chҩt khô (g) n: hӋ sӕ pha loãng
250,29: khӕLOѭӧng phân tӱ trolox 'ӵDYjRÿѭӡQJFKXҭQÿӇWtQKWRiQKRҥWWtQKFKӕQJR[\KyD$%76WURQJPүXWKt QJKLӋP [57, 58].
2.3.4 Ĉӏnh tính thành phҫn các hӧp chҩt tӵ nhiên có mһt trong cao tәng ắ Ĉ͓ nh tớnh alkaloids
Cân 2g mүu cao cho vào 20ml dung dӏch acid sulfuric 5% trong ethanol 50% Thêm 2 giӑt dung dӏFKDPPRQLDFÿұPÿһc và thêm mӝt ít dung môi cloroform vào rӗi lҳc nhҽ ÿӇ trӝQÿӅu và hӛn hӧSÿѭӧFÿѭDYjRSKӉu chiӃt Chӡ mӝWO~FÿӇ hӛn hӧp tách lӟp rӗL ÿHP ÿL FKLӃW WKX ÿѭӧc 2 lӟp dӏch riêng biӋt rӗL ÿHP NLӇm tra vӟi thuӕc thӱ dragendorf LҫQOѭӧt cho 1ml thuӕc thӱ dragendorf vào trong 2 lӟp dӏFKÿѭӧc tách riêng biӋt Hӛn hӧp nào hình thành kӃt tӫDPjXQkXÿӓ chӭng tӓ có sӵ hiӋn diӋn cӫa alkaloids [59] ắ Ĉ͓ nh tớnh tannin
Lҩy 2g cao hòa tan trong 10ml dung dӏch ethanol 50% rӗi chia làm 3 phҫn bҵng nhau:
- Thӱ nghiӋm FeCl3: Nhӓ 3 giӑt dung dӏch FeCl3 vào phҫn thӭ nhҩt, màu sҳc cӫa mүu chuyӇn sang màu xanh lam hoһF PjX[DQK ÿHQ ÿұm chӭng tӓ mүu có tӗn tҥi tannin
- Thӱ nghiӋm gelatin: Hòa tan mӝWOѭӧng nhӓ gelatin dҥng hҥt vào trong phҫn thӭ hai rӗi lҳFÿӅXFKRJHODWLQKzDWDQKRjQWRjQ6DXÿyÿӇ yên hӛn hӧp, nӃu xuҩt hiӋn kӃt tӫa trҳQJOѫOӱng bên trong chӭng tӓ mүu cao có sӵ hiӋn diӋn cӫa tannin
- Thӱ nghiӋm chì acetate: Nhӓ 3 giӑt dung dӏch chì acetate vào phҫn thӭ ba, lҳFÿӅu FKRÿӃn khi thҩy xuҩt hiӋn kӃt tӫa màu vàng nhҥt thì chӭng tӓ có sӵ tӗn tҥi cӫa tannin trong mүu cao [59]. ắ Ĉ͓ nh tớnh anthraquinones
Cân 0,5g mүu cao hòa vào 5ml dung môi chloroform và lҳFÿӅu trong vòng 5 phút
TiӃn hành lӑc hӛn hӧSWUrQÿӇ WKXÿѭӧc dӏch trong rӗi bә sung thêm dung dӏch amoniac
10% vӟi thӇ tích bҵng vӟi thӇ tích cӫa dӏch trong vӯa lӑc NӃu ta thҩy có xuҩt hiӋn lӟp QѭӟF PjX ÿӓ hay hӗng hoһc tím sau khi lҳF ÿӅu chӭng tӓ có sӵ hiӋn diӋn cӫa anthraquinones tӵ do có trong mүu cao [59]. ắ Ĉ͓ nh tớnh saponin
- Th͵ nghi m 1: Lҩy 1g mүu cao cho vào 2ml dung dӏch NaCl rӗi lҳFÿӅXVDXÿy hút 2ml hӛn hӧp cho vào ӕng nghiӋm rӗi thêm 3 giӑWPiXÿӝng vұt bҵng ӕng tiêm rӗi nhҽ QKjQJÿҧRQJѭӧc ӕng (không tҥRUXQJYjÿӇ yên trong 15 phút Sӵ lҳng xuӕng cӫa các tӃ bào hӗng cҫu chӭng tӓ có sӵ hiӋn diӋn cӫa saponin trong mүu cao [59].
- Th͵ nghi m 2: Cân 1g mүu cao rӗi hòa tan trong 10POQѭӟc cҩWVDXÿyOҳc mҥnh
WURQJJLk\YjÿӇ yên hӛn hӧp trong vòng 30 phút NӃu có sӵ hình thành cӫa bӑt khí không tan chӭng tӓ có sӵ hiӋn diӋn cӫa saponin trong mүu cao ắ Ĉ͓ nh tớnh flavonoids
Cân 2g mүu cao hòa tan trong 10POQѭӟc cҩt rӗi hút 3ml hӛn hӧp vào trong 2 ӕng nghiӋP3KѭѫQJSKiSQj\Jӗm thӱ nghiӋm vӟi dung dӏch NaOH 10% và thӱ nghiӋm vӟi dung dӏch FeCl3 [60]
- Th͵ nghi m NaOH 10%: Thêm 2 ml dung dӏch NaOH 10% vào 3ml hӛn hӧp rӗi lҳFÿӅu NӃu thҩy xuҩt hiӋn dung dӏch màu vàng rӗi chuyӇn sang không màu nӃu cho acid hydrochloric vào chӭng tӓ có sӵ hiӋn diӋn cӫa flavonoid trong mүu cao
- Th͵ nghi m FeCl 3 : Nhӓ 3 giӑt dung dӏch FeCl3 vào 3ml hӛn hӧp rӗi lҳFÿӅu Sӵ chuyӇn màu cӫa dung dӏFKVDQJPjX[DQKÿHQFKӭng tӓ có tӗn tҥi flavonoid trong mүu cao
2.3.5 Bҧo quҧn và chuҭn bӏ vi khuҭn thӱ nghiӋm
Giӕng vi khuҭn sau khi lҩy vӅ sӁ ÿѭӧc cҩ\ULDWUrQP{LWUѭӡng thҥFKGLQKGѭӥng 76%ÿHPӫ ӣ 37 o &WURQJYzQJÿӃn 24 giӡ ÿӇ chӑn ra các khuҭn lҥFÿһFWUѭQJ Khuҭn lҥFÿһFWUѭQJÿmFKӑn sӁ ÿѭӧc nhuӝm gram NӃu kӃt quҧ nhuӝP*UDPÿ~QJWKHRP{WDKuQKWKiLTX\ÿuQKNKXҭn lҥFÿyVӁ ÿѭӧc ÿHPWăQJVLQKWURQJP{LWUѭӡng lӓng TSB rӗi ӫ ӣ 37 o C, lҳc vӟi tӕFÿӝ 100rpm trong 10 ± 12 giӡ0{LWUѭӡng trӣ nên ÿөc do có sӵ WăQJVLQKFӫa vi sinh vұt Chuҭn bӏ sҹQJO\FHUROYjHIIHQGRUIÿmÿѭӧc hҩp tiӋt trựng TiӃQKjQKEѫPàl dӏch vi khuҭn nuụi cҩy vào effendorf rӗi cho tiӃp
600àl glycerol rӗLÿHPFKRYjRWӫ lҥQKÿ{QJVkXӣ -49 o &ÿӇ giӳ giӕng cho quỏ trỡnh làm thí nghiӋm
Vi khuҭn lҩy ra tӯ tӫ ÿ{QJVkXFҫQÿѭӧFUmÿ{QJNKRҧng 2 tiӃng bҵng cách hҥ nhiӋt ÿӝ tӯ tӯ xuӕQJÿӇ tránh vi khuҭn sӕc nhiӋt gây chӃWĈӇ hoҥt hóa vi khuҭn, tiӃn hành WăQJVLQKYӟi 3POP{LWUѭӡng TSB cho 40àl dӏch vi khuҭn rӗi 10POP{LWUѭӡng vӟi 0,5ml dӏch và 100POP{LWUѭӡng vӟi 1ml dӏch, ӣ mӛLJLDLÿRҥQQj\ÿӅu ӫ ӣ 37 o C trong 100rpm tӯ 10 ± 12 giӡ
Bҧo quҧn và chuҭn bӏ vi khuҭn thӱ nghiӋm
Giӕng vi khuҭn sau khi lҩy vӅ sӁ ÿѭӧc cҩ\ULDWUrQP{LWUѭӡng thҥFKGLQKGѭӥng 76%ÿHPӫ ӣ 37 o &WURQJYzQJÿӃn 24 giӡ ÿӇ chӑn ra các khuҭn lҥFÿһFWUѭQJ Khuҭn lҥFÿһFWUѭQJÿmFKӑn sӁ ÿѭӧc nhuӝm gram NӃu kӃt quҧ nhuӝP*UDPÿ~QJWKHRP{WDKuQKWKiLTX\ÿuQKNKXҭn lҥFÿyVӁ ÿѭӧc ÿHPWăQJVLQKWURQJP{LWUѭӡng lӓng TSB rӗi ӫ ӣ 37 o C, lҳc vӟi tӕFÿӝ 100rpm trong 10 ± 12 giӡ0{LWUѭӡng trӣ nên ÿөc do có sӵ WăQJVLQKFӫa vi sinh vұt Chuҭn bӏ sҹQJO\FHUROYjHIIHQGRUIÿmÿѭӧc hҩp tiӋt trựng TiӃQKjQKEѫPàl dӏch vi khuҭn nuụi cҩy vào effendorf rӗi cho tiӃp
600àl glycerol rӗLÿHPFKRYjRWӫ lҥQKÿ{QJVkXӣ -49 o &ÿӇ giӳ giӕng cho quỏ trỡnh làm thí nghiӋm
Vi khuҭn lҩy ra tӯ tӫ ÿ{QJVkXFҫQÿѭӧFUmÿ{QJNKRҧng 2 tiӃng bҵng cách hҥ nhiӋt ÿӝ tӯ tӯ xuӕQJÿӇ tránh vi khuҭn sӕc nhiӋt gây chӃWĈӇ hoҥt hóa vi khuҭn, tiӃn hành WăQJVLQKYӟi 3POP{LWUѭӡng TSB cho 40àl dӏch vi khuҭn rӗi 10POP{LWUѭӡng vӟi 0,5ml dӏch và 100POP{LWUѭӡng vӟi 1ml dӏch, ӣ mӛLJLDLÿRҥQQj\ÿӅu ӫ ӣ 37 o C trong 100rpm tӯ 10 ± 12 giӡ
HuyӅn phù vi khuҭQVDXÿyÿѭӧc ly tâm trong 15 phút ӣ 5000USPÿӇ tách sinh khӕi ra khӓLP{LWUѭӡng rӗi rӱa sinh khӕi vi sinh vұt bҵng 3 lҫQQѭӟc cҩt vô trùng và pha loãng bҵQJQѭӟc cҩWY{WUQJÿӃQÿӝ ÿөFWѭѫQJÿѭѫQJ0&)DUODQG+X\Ӆn phù vi khuҭQQj\ÿѭӧc dùng trong các khҧo sát hoҥt tính kháng khuҭn.
2.3.6 3KѭѫQJSKiSWKӱ nghiӋm hoҥt tính kháng khuҭn
Thӱ nghiӋm hoҥt tính kháng khuҭn cӫa cao chiӃt bҵng phѭѫQJSKiSNKXӃch tán WUrQÿƭDWKҥch Cho vào mӛLÿƭD3HWULPOP{LWUѭӡng MHA vô trùng (khoҧng 40 ±
50 o C) và 1ml dӏch vi khuҭn mұWÿӝ 1,5 x 10 8 CFU/ml, lҳFÿӅXÿӇ yên khoҧng 45 phút FKRP{LWUѭӡQJÿ{QJÿһc MӛLÿƭD3HWULÿѭӧFÿһWÿƭDJLҩ\WURQJÿyJӗm:
+ ÿƭDJLҩy chӭa 10Pl cao tәng vӟi các nӗQJÿӝ NKiFQKDXÿmWUuQKEj\ӣ mөc
+ ÿƭDFKӭng âm chӭa 10Pl dung dӏch DMSO 5% vô trùng, + ÿƭDJLҩy chӭQJGѭѫQJOjNKiQJVLQKFyQӗQJÿӝ QKѭÿmWUuQKEj\WURQJSKҫn 2.2.1
Mӛi nӗQJÿӝ ÿѭӧc tiӃn hành lһp lҥi 9 lҫQ&iFÿƭDÿѭӧc ӫ ӣ 37 o C trong vòng 16 ± 20 giӡĈѭӡng kính vùng ӭc chӃ ÿѭӧFÿREҵQJWKѭӟFÿRÿѫQYӏ mm [60]
Trích ly flavonoid tӯ cao tәng
Hình 2.4 Quy trình chi͇t flavonoid b̹ng dung d͓ch ki͉PFyÿ͡ ki͉m khác nhau
ChiӃt lӓng ± lӓng vӟi dung dӏch kiӅm 5%
Acid hóa ChiӃt lӓng - lӓng vӟi chloroform
Hòa tan cao tәng bҵng chloroform TiӃp theo, chiӃt lӓng ± lӓng vӟi dung dӏch kiӅm Na2CO2 5% Dung dӏch kiӅm sӁ ÿѭӧc gӝp lҥi và acid hóa Sӱ dөng chloroform chiӃt lӓng ± lӓng Cuӕi FQJOjPNKDQQѭӟc bҵng CaCl2 YjÿXәi dung môi bҵng máy cô TXD\WDWKXÿѭӧc cao flavonoid toàn phҫn NhiӋWÿӝ quá trình thӵc hiӋQEpKѫQ 50ႏ và tránh ánh sáng [18, 61]
KӃt quҧ vòng kháng khuҭQÿRÿѭӧc sӁ ÿѭӧc tính tӯ trung bình cӫa các lҫn lһp lҥi, thӇ hiӋn theo dҥng trung bình ± SD
Xây dӵQJÿѭӡng chuҭn và kiӇm tra sӵ khác biӋt giӳa các nghiӋm thӭc bҵng phân tích ANOVA và LSD trên phҫn mӅm Statgraphic.
KhҧRViWÿLӅu kiӋn trích ly cao tәng
Khҧo sát nӗQJÿӝ ethanol trích ly
TiӃn hành khҧo sát nӗQJÿӝ ethanol theo các nghiӋm thӭc: 0%, 25%, 50%, 75%, 100% (v/v) Cӕ ÿӏnh các thông sӕ sau: nhiӋWÿӝ 60 o C, thӡi gian 4 giӡ, tӏ lӋ dung môi 1/20 (g/ml)
Hình 3.1 ̪QKK˱ͧng n͛QJÿ͡ HWKDQROÿ͇n d͓ch trích ly
7ӯEҧQJQKұQWKҩ\YӟLPӭFNKҧRViWWӯÿӃQFKRWKҩ\NK{QJFyVӵNKiFELӋWYӅPһWWKӕQJNrYӅKjPOѭӧQJ7($&7X\QKLrQӣPӭFNKҧRViWWKuFKRNӃWTXҧ7)&FDRKѫQVRYӟLFiFPӭFNKҧRViWNKiF9uYұ\QӗQJ ÿӝHWKDQRO5ÿѭӧFOӵDFKӑQOjWK{QJVӕSKKӧSQKҩWӣWKtQJKLӋPQj\ÿӇWLӃQKjQKFKRQKӳQJWKtQJKLӋPWLӃSWKHR.ӃWTXҧFyWKӇGR ethanol khi pha loãng YӟLQѭӟFVӁWăQJWtQKSKkQFӵFFӫDGXQJP{LJL~SWKXQKұQQKLӅXIODYRQRLGFy tính phân FӵFKѫQ1JRjLUDPӝW\ӃXWӕQKӓOjVӵWUѭѫQJQӣFӫDPүXFyQѭӟF VӁOjPWăQJGLӋQWtFKWLӃS[~FFӫDPүXYjGXQJP{LWӯÿyJL~SKӛWUӧTXiWUuQKWUtFK ly 7URQJQJKLrQFӭXFӫD'ѭѫQJ7Kӏ3KѭӧQJ/LrQYjFӝQJVӵNKLWUtFKO\
SRO\SKHQROWURQJÿұXQjQKÿmVӱGөQJHWKaQROӣPӭFÿӇWUtFKO\.ӃWTXҧQj\
FNJQJJҫQ WѭѫQJWӵYӟLWKtQJKLӋPQj\>2].
Khҧo sát tӍ lӋ dung môi trích ly
Trong quá trình WUtFKO\WӍOӋPүXYjGXQJP{LҧQKKѭӣQJÿiQJNӇÿӃQYLӋFWKX QKұQGӏFK FKLӃW Fӫ FҧL giàu KRҥW tính FKӕQJ oxy hóa 7LӃQKjQKNKҧRViWWӍOӋPүX YjGXQJP{LҧQKKѭӣQJÿӃQFiFKjPPөFWLrX7)&Yj$%76OҫQOѭӧWӣFiFPӭF
1/20, 1/30, 1/40, 1/50 (g/ml) YӟLFiFWK{QJVӕFӕÿӏQKQKѭVDXQKLӋWÿӝ o &WKӡL JLDQJLӡQӗQJÿӝHWKDQRO (v/v)
Hình 3.2 ̪QKK˱ͧng t͑ l dung môi trích ly
7URQJTXiWUuQKWUtFKO\WӍOӋPүXGXQJP{LҧQKKѭӣQJÿiQJNӇÿӃQKjPOѭӧQJ7)&WҥLWӍOӋYjNK{QJFyVӵNKiFELӃWFyêQJKƭD$%76FӫDWӍOӋFDRKѫQ'RÿyWӹOӋPүXGXQJP{LÿѭӧFFKӑQOj9ӟLWӍOӋQj\VӁWLӃWNLӋPÿѭӧFGXQJP{LVRYӟLWӍOӋYj Theo Cacace và Mazza (2003), Al-Farsi và chang (2007) bLӋQ OXұQ UҵQJ ÿӝQJ OӵF FKR TXi WUuQK WUX\ӅQ NKӕL Oj
JUDGLHQWQӗQJÿӝJLӳDFKҩWUҳQYjGXQJP{L 1JRjLUDOjPWăQJNKҧFiFWKjQKSKҫQKRҥWWtQKVLQKKӑFWLӃS[~FYӟLGXQJP{LWUtFKO\NKLWăQJOѭӧQJGXQJP{LGүQÿӃQWăQJKLӋXVXҩWWUtFKO\7X\QKLrQKjP OѭӧQJFKҩWWDQVӁNK{QJWLӃSWөFWăQJNKLÿm ÿҥWÿѭӧFVӵFkQ EҵQJ+DPGDPFKRELӃWWӍOӋGXQJP{LWUtFKO\FyWKӇҧQKKѭӣQJÿӃQKҵQJVӕFkQEҵQJYjVӵTXDQKӋJLӳDKLӋXVXҩWWKXKӗLYjGXQJP{L>3, 64, 66, 66].
Khҧo sát nhiӋWÿӝ trích ly
KhҧR ViW ÿLӅu kiӋn trích ly vӟi các thông sӕ QKѭ VDX WKӡi gian 4 giӡ, nӗQJ ÿӝ ethanol 75% (v/v), tӍ lӋ dung môi 1/30 (g/ml)
Hình 3.3 ̪QKK˱ͧng nhi Wÿ͡ trích ly
Khҧo sát nhiӋWÿӝ trong quá trình trích ly các hӧp chҩt chӕng oxy hóa là cҫn thiӃt bӣi khi gia nhiӋt làm khҧ QăQJNKXӃch tán cӫa các hӧp chҩWQj\WăQJWK{QJTXDVӵ giҧm ÿӝ nhӟt cӫa dung dӏch, góp phҫn phá vӥ thành tӃ bào thӵc vұt và có thӇ phá vӥ liên kӃt giӳa protein-SKHQROYjWѭѫQJWiFSKHQROYӟi polysaccharide Tuy nhiên, vӟi nhӳQJѭX ÿLӇPWUrQNK{QJÿӗQJQJKƭDYӟi viӋFFjQJWăQJQKLӋWÿӝ hiӋu quҧ trích ly các hӧp chҩt flavonoid sӁ WăQJFDR7KHRVӕ liӋu cho thҩy, tҥi nhiӋWÿӝ 50ႏFKRNӃt quҧ TFC và ABTS là cao nhҩt KӃt quҧ Qj\WѭѫQJNKӟp vӟi nghiên cӭu cӫa Miean và cӝng sӵ
(2001) NhiӋWÿӝ cao có thӇ sӁ làm flavonoid phân hӫy hoһc kӃt hӧp vӟi các hӧp chҩt khác trong dӏch chiӃt Tӯ khҧo sát trên, chӑn nhiӋWÿӝ ႏFKRTXiWUuQKWKӵc nghiӋm tiӃp theo [50].
Khҧo sát thӡi gian trích ly
7ѭѫQJWӵ nhiӋWÿӝ, thӡi gian trích ly ҧQKKѭӣQJÿiQJNӇ ÿӃn viӋc thu hӗi dӏch chiӃt giàu flavonoid có hoҥt tính tӯ cӫ cҧi trҳng TiӃn hành khҧo sát thӡLJLDQWUtFKO\ÿӃn vӟi các thông sӕ cӕ ÿӏnh sau: nӗQJÿӝ ethanol 75% (v/v), tӍ lӋ dung môi 1/30 (g/ml), nhiӋWÿӝ trích ly 50ႏ
Hình 3.4 ̪QKK˱ͧng thͥi gian trích ly
Thӡi gian có ҧQKKѭӣng rõ rӋWÿӃn khҧ QăQJFKӕng oxi hóa cӫa các mүu Trong suӕt quá trình trích ly, khi thӡLJLDQWăQJWKuKjPOѭӧQJIODYRQRLGWăQJWKHR7X\QKLrQNKҧ QăQJNKiQJR[LKyDWăQJVDX± 3 giӡ, và khҧ QăQJFKӕng oxi hóa giҧm tӯ sau 3 giӡ trӣ ÿL.Ӄt quҧ này có thӇ giҧi thích bҵQJÿӏnh luұn 2 cӫa Fick vӅ sӵ khuӃch tán Trҥng thái cân bҵng cӫa nӗQJÿӝ cӫa chҩt tan có thӇ ÿҥWÿѭӧc sau khoҧng thӡi gian nhҩWÿӏnh
Theo Silva và cӝng sӵ (2007) thӡi gian trích ly quá ngҳn sӁ NK{QJÿҧm bҧRÿѭӧc hiӋu suҩt tách chiӃt các hӧp chҩt chӕQJR[LKyD1Jѭӧc lҥi, nӃu thӡi gian quá lâu dài sӁ làm WăQJVӵ phân hӫy và giҧm khҧ QăQJR[LKyDGRVӵ tiӃp xúc vӟi các yӃu tӕ P{LWUѭӡng
QKѭR[LiQKViQJQKLӋWÿӝô1JRjLUDWăQJWKӡi gian cũn làm giҧm hiӋu quҧ kinh tӃ [67]
Cao cӫ cҧLVDXTXiWUuQKWUtFKO\ÿѭӧc bҧo quҧn trong lӑ thӫ\WLQKÿұy kín ӣ 4 o C, WUiQKiQKViQJÿӇ sӱ dөng cho các thí nghiӋm khác
Hình 3.5 H͟n hͫp cao t͝ng Ĉӝ ҭm cao tәng: 18,053 ± 0,363%
HiӋu suҩt thu hӗi cao tәng: 232,67 ± 15,56 (mg/g cӫ cҧi khô)
3.2 Ĉӏnh tính mӝt sӕ nhóm chҩt có hoҥt tính sinh hӑc trong cao tәng ĈӇ [iFÿӏQKVѫEӝ thành phҫn các chҩt có trong mүu cӫ cҧi khҧo sát, tiӃn hành thí nghiӋm ÿӏnh tính mӝt sӕ hӧp chҩt có trong mүXQKѭÿmWUuQKEj\ӣ phҫn 2.2.4 KӃt quҧ ghi nhұQVDXTXiWUuQKÿӏQKWtQKÿѭӧc thӇ hiӋn ӣ bҧng 3.1
B̫ng 3.1 K͇t qu̫ ÿ͓nh tính các hͫp ch̭t có trong m̳u cao t͝ng
Thí nghiӋm KӃt quҧ KӃt luұn Ĉӏnh tính alkaloid
Tӯ 5 thӱ nghiӋm khҧRViWÿӏQKWtQKQKѭWUuQKEj\NӃt quҧ có 3 thӱ nghiӋPÿҥt GѭѫQJWtQK
- Flavonoids Theo nghiên cӭu cӫa G Aruna (2012) trong cӫ cҧi trҳng cho chӭa flavonoid, glycoside, alkaloid, saponin, tannin, polyphHQRO DQWKRF\DQLQ JOXFRVLQRODWH YDҒ isothiocyanate KӃt quҧ thí nghiӋPÿmFKRWKҩy không có sӵ xuҩt hiӋn cӫa saponin và anthraquinones trong cao chiӃt [11]
Nguyên nhân có thӇ do sӵ khác biӋt có thӇ do nguӗn nguyên liӋu, bӣi thành phҫn cӫa nguyên liӋu chӏu ҧQKKѭӣng rҩt nhiӅu cӫa giӕQJÿҩWÿDLWKә QKѭӥQJÿLӅu kiӋn FKăPVyFô
Tӯ kӃt quҧ ÿӏQKWtQK[iFÿӏQKÿѭӧc trong cao cӫ cҧi trҳng có hӧp chҩt alkaloid, tannin và flavonoid Khҧ QăQJNKiQJNKXҭn và chӕng oxi hóa cӫa cao cӫ cҧi trҳng có thӇ do 3 hӧp chҩt này tҥo ra.
Khҧo sát khҧ QăQJNKiQJNKXҭn
Bҧo quҧn và chuҭn bӏ vi khuҭn thӱ nghiӋm
Hình 3.6 K͇t qu̫ nhu͡m gram cͯa B.cereus và P.aeruginosa
Hình 3.7 K͇t qu̫ nhu͡m gram cͯa S.aureus và S.typhi
KӃt quҧ nhuӝm gram cho thҩy hình thái cӫa 2 nhóm vi khuҭn Gram (+) và Gram (-) QKѭVDX
- B.cereus: vi khuҭn gram (+), hình que, sinh bào tӱ, kӷ khí tùy tiӋn, bҳt màu tím khi nhuӝm gram
- P.aeruginosa: vi khuҭn gram (-), hình que, tӗn tҥi dҥQJÿѫQEҳt cһp hoһc tҥo chuӛi dài có khҧ QăQJGLÿӝng vӟi mӝWWLrXPDRÿѫQFӵc, bҳWPjXÿӓ khi nhuӝm gram
- S.aureus: vi khuҭn gram (+), hình que, hình cҫu, có hình dҥng giӕQJQKѭ chùm nho, bҳt màu tím khi nhuӝm gram
- S.typhi: vi khuҭn gram (-), hình que, GLÿӝng nhӡ tiêu mau, hiӃu khi hoһc kӷ khí tùy tiên,bҳWPjXÿӓ khi nhuӝm gram.
Khҧo sát khҧ QăQJNKiQJNKXҭn trên cao tәng
Khҧ QăQJNKiQJNKXҭQÿѭӧF[iFÿӏnh dӵa trên khҧ QăQJӭc chӃ sӵ phát triӇn cӫa vi khuҭQÿѭӧc thӇ KLrQTXDÿѭӡng kính kháng khuҭQÿѭӧc tҥRUDWUrQÿƭDSHWULÿѭӧc trình bày ӣ bҧng 3.2
B̫ng 3.2 Ĉ˱ͥng kính vòng kháng khu̱n cͯa cao t͝ng (mm)
NKXҭQ B.cereus P.aeruginosa S.aureus S.typhi
S͙ li u trình bày d̩ng Mean 6'FͯDO̯QWKtQJKL P
7KHREҧQJNKLÿiQKJLiVѫEӝYӅNKҧQăQJNKiQJNKXҭQFӫDFDRWәQJ WUrQWӯQJ FKӫQJYLNKXҭQFyPӝWVӕÿLӇPFK~êVDX
.KҧQăQJNKiQJNKXҭQFӫDFDRWәQJWҥLQӗQJÿӝPJPOJҫQ EҵQJ PүXÿӕL FKӭQJGѭѫQJJHQWDP\FLQ
6ӵWKD\ÿәLQӗQJÿӝFӫDGӏFKNKiQJNKXҭQҧQKKѭӣQJÿiQJNӇÿӃQNKҧQăQJNKiQJ NKXҭQ WUrQ ORҥL YL NKXҭQ Qj\ 7ҥL QKӳQJ QӗQJ ÿӝ WKҩS JPO PJPO 400mg/ml, 800PJPOFDRNKiQJWӕWWUrQYLNKXҭQS.aureus 7X\QKLrQWҥLQӗQJÿӝ
PJPONKҧQăQJNKiQJNKXҭQFӫDFDRWUrQYLNKXҭQ P.aeruginosa FDRYѭӧWWUӝLVRYӟLFiFYLNKXҭQFzQOҥL
Hình 3.8 Kh̫ Qăng kháng khu̱n cͯa cao t͝ng (1): chͱng âm DMSO 5%, (2): 1600mg/ml, (3): 800mg/ml, (4): 400mg/ml,
(5): 200mg/ml, (6): 100mg/ml, (7): chͱQJG˱˯QJOjJHQWDP\FLQ 7URQJÿy: (a): B.cereus, (b): P.aeruginosa, (c): S.aureus, (d): S.typhi
Hình 3.9 Bi͋Xÿ͛ th͋ hi n kh̫ QăQJNKiQJNKX̱n cͯa cao t͝ng
Khҧo sát khҧ QăQJNKiQJNKXҭn cӫa cao flavonoid
HiӋu suҩt thu hӗi cao flavonoid: 5,29 ± 0,32mg/g chҩt khô
Khҧ QăQJNKiQJNKXҭQÿѭӧF[iFÿӏnh dӵa trên khҧ QăQJӭc chӃ sӵ phát triӇn cӫa vi khuҭQÿѭӧc thӇ KLrQTXDÿѭӡng kính kháng khuҭn tҥRUDWUrQÿƭDSHWULÿѭӧc trình bày ӣ bҧng 3.3
B̫ng 3.3 Ĉ˱ͥng kính vòng kháng khu̱n cͯa cao flavonoid (mm)
NKXҭQ B.cereus P.aeruginosa S.aureus S.typhi
S͙ li u trình bày d̩ng Mean 6'FͯDO̯QWKtQJKL P
7KHREҧQJNKLÿiQKJLiVѫEӝYӅNKҧQăQJNKiQJNKXҭQFӫDFDRIODYRQRLGWUrQ WӯQJFKӫQJYLNKXҭQFyPӝWVӕQKұQ[pWsau:
.Kҧ QăQJ NKiQJ NKXҭQ FӫD FDR IODYRQRLG FDR KѫQ YӟL PүX ÿӕL FKӭQJ GѭѫQJ gentamycin Cao flavonoid có khҧ QăQJ NKiQJ NKXҭn tӕt nhҩt trên vi khuҭn
P.aeruginosa Sӵ WKD\ÿәi khҧ QăQJNKiQJNKXҭn trên P.aeruginosa NKLWKD\ÿәi nӗng ÿӝ thӇ hiӋn rõ dӋt ĈӕL YӟLB.cereus, P.aeruginosa, WҥL QӗQJ ÿӝ FDR IODYRQRLG OҫQ OѭӧW 400mg/ml, 800mg/ml, 400mg/ml FyNKҧQăQJNKiQJNKXҭQEҵQJJHQWDP\FLQĈӕLYӟLS.aureus, kháng NKXҭQ FӫDFDR flavonoid NK{QJOӟQVRYӟLFiFYLNKXҭQQKѭQJQӗQJÿӝ FKӍ NKRҧQJPJPOFyWKӇNKiQJNKXҭQEҵQJ gentamycin
.Hình 3.10 Bi͋Xÿ͛ th͋ hi n kh̫ QăQJNKiQJNKX̱n cͯa cao flavonoid
(1): chͱng âm DMSO 5%, (2): 1600mg/ml, (3): 800mg/ml, (4): 400mg/ml, (5): 200mg/ml, (6): 100mg/ml, (7): chͱQJG˱˯QJOjJHQWDP\FLQ 7URQJÿyDB.cereus, (b): P.aeruginosa, (c): S.aureus, (d): S.typhi
Hình 3.11 Bi͋Xÿ͛ th͋ hi n kh̫ QăQJNKiQJNKX̱n cͯa cao flavonoid
Hình 3.12 Kh̫ QăQJNKiQJNKX̱n giͷa cao t͝ng và cao flavonoid
Khҧ QăQJNKiQJNKXҭn cӫDFDRIODYRQRLGFDRKѫQFDR tәng Sӵ khác biӋt này thӇ hiӋn rõ trên cҧ 4 loҥi vi khuҭn Sӵ khác biӋt vӅ khҧ QăQJFӫa cao tәng và cao flavonoid thӇ hiӋn rõ nhҩt trên vi khuҭn B.cereus
&+ѬѪ1*: KӂT LUҰN VÀ KIӂN NGHӎ 4.ӃWOXұQ ĈLӅu kiӋn trích ly bӝt cӫ cҧi trҳng tҥi nhiӋWÿӝ 50ႏWKӡi gian 3 giӡ, sӱ dөng dung môi ethanol 75% (v/v) và tӍ lӋ bӝt: dung môi là 1/30 (g/ml) sӁ WKXÿѭӧc cao có hàm Oѭӧng flavonoid có hoҥt tính là cao nhҩW+jPOѭӧng flavonoid trong mүu cao tәng là 6,29 r 0,18mg/g và ABTS là 28,99 ± 0,42mg TEAC /g
Cao cӫ cҧi trҳng có có chӭa flavonoid, alkaloids, tannin Các hӧp chҩt saponin và anthraquinones không thҩy sӵ hiӋQĈk\OjÿLӇm khác biӋt vӟi mӕt sӕ nghiên cӭu khác
VӅ khҧ QăQJNKiQJNKXҭn cӫa cao tәng, cao tәng có khҧ QăQJӭc chӃ sӵ phát triӇn cӫa cҧ 4 chӫng vi khuҭn thӱ nghiӋm MӭFÿӝ kháng phө thuӝc nӗQJÿӝ cao sӱ dөng
HiӋu quҧ kháng cӫa cao tәng và cao flavonoid tӕt nhҩt trên P.aeruginosa và thҩp nhҩt vӟi S.typhi Ĉѭӡng kính vòng kháng khuҭn tҥi nhӳng nӗQJÿӝ thҩp nhҩt cӫa cao tәng và cao flavonoid ÿҥt gҫn bҵng 10mm và cao nhҩt gҫn bҵng 22mm
Khi sӱ dөng cùng mӝt nӗQJ ÿӝ kháng khuҭn thì khҧ QăQJ NKiQJ NKXҭn cao flavonoid tӕWKѫQso vӟi cao tәng, cao gҩp 1,1 ÷ 1,2 lҫn
So sỏnh vӟi mүXÿӕi chӭQJGѭѫQJgentamycin (10àg/ÿƭDFDRWәng cú khҧ QăQJ kháng gҫn bҵng tҥi nӗQJÿӝ 1600mg/ml Cao flavonoid có khҧ QăQJNKiQJFDRKѫQso vӟi gentamycin tҥi nӗQJÿӝ 1600mg/ml, và gҫn bҵng tҥi nӗQJÿӝ 400 ÷ 800mg/ml
KӃt quҧ nghiên cӭu trên sӁ là tiӅQÿӅ ÿӇ phát triӇn các ӭng dөng tӯ cao cӫ cҧi và cao flavonoid vào sҧn xuҩt, chӃ biӃn mӝt sӕ thӵc phҭm có hoҥt tính kháng khuҭn hay bҧo quҧn thӵc phҭPWKHRKѭӟng dùng các hӧp chҩt sinh hӑc tӵ nhiên, an toàn
Cҫn nghiên cӭu thêm vӅ khҧ QăQJNKiQJNKXҭn cӫa các hӧp chҩt khác trong cao cӫ cҧi trҳQJQKѭDONDORLGVWDQQLQô
Ngoài ra, có thӇ thӱ hoҥt tính kháng khuҭn cӫa cao tәng và cao flavonoid tӯ cӫ cҧi trҳng trên mӝt sӕ loҥi vi khuҭn và nҩm mӕc gây hҥi khác Ӭng dөng khҧ QăQJNKiQJNKXҭn cao cӫ cҧi trҳng và cao flavonoid trong công nghӋ bҧo quҧn thӵc phҭm và các ngành khác
DANH MӨC TÀI LIӊU THAM KHҦO
[1] 7 /LP ³(GLEOH PHGLFLQDO DQG QRQ-PHGLFLQDO SODQW´Springer Dordrecht Heidelberg New York London, vol 9, pp 829 ± 869, 2015
[2] Morgan W and Midmore D., ´Daikon in Australia´ $XVWUDOLDQ 5XUDO industries research and development corporation, pp 2 ± 4, 2003
[3] 9LHW 1DP ³1{QJ GkQ 9ƭQK &KkX WU~QJ PD Fӫ cҧi trҳQJ´ ,QWHUQHW http://soctrangtv.vn/t/nong-dan-vinh-chau-trung-mua-cu-cai-trang, June 6, 2016
[4] Viet Nam+, ³´;DQK´ Fӫ cҧi trҳng, internet: http://www.vannghedongthap.vn/?id=d&u=news&suail&fid&idnn!1 1 , August 22, 2016
[5] NguyӉn Công Khҭn, Hà Thӏ $QK ĈjR ³%ҧng thành phҫn thӵc phҭm ViӋt 1DP´1Kj[Xҩt bҧn Y hӑc, trang 103 ± 103, 2007
[6] Sarowar Jahan et al ³Screening of some enzyme and nutrients in radish (Raphanus sativus L.) root,´ Philippine Journal of Veterinary and Animal Sciences, vol 37, pp 89 ± 100, 2011
[7] Singh Preeti and Singh Jaspal, ³Medical and therapeutic utilities of Raphanus sativus,´ International Journal of plant, animal and environmental Sciences, vol
[8] -DKDQ0*6HWDO³&RUUHODWLRQEHWZHHQȕ-amylase activity and starch content in different cultivars of radish (Raphanus sativus /´Biotechnology an indian journal, vol 9, pp 298 ± 302, 2014
[9] R.M.P Gutierrez HW DO ³Raphanus sativus (Radish) : their chemistry and biology,´ The Scientific Word journal, vol 4, pp 811 ± 837, 2004
[10] Trҫn Thӏ Hӗng và cӝng sӵ, ³Nghiên cӭX SKѭѫQJ SKiS Vӱ dөng enzyme peroxidase tách chiӃt tӯ cӫ cҧi trҳQJÿӇ [iFÿӏQKKjPOѭӧng thӫ\QJkQWURQJQѭӟc ô nhiӉm,´ T̩p chí Khoa h͕FĈ+4*+1: Khoa h͕c T nhiên và Công ngh , vol
[11] G Aruna et al ³Photochemistry and pharmacology of Raphanus sativus´
International Journal of drug formulation and research, vol 3, pp 43 ± 52, 2012
[12] R.M.P Gutierrez and Rosalinda L.3 ³Raphanus sativus (Radish): their FKHPLVWU\DQGELRORJ\´Scientific World Journal, vol 13, pp 11 ± 37, 2004
[13] Amina N.L et al, ³Effect of Ethanol Extract of Radish (Raphanus sativus L.) Seeds and Lactobacillus acidophilus on Enteropathogenic Escherichia coli in vitro DQGLQYLYR´Nutr Res Pract , vol 2, pp.166 ± 181, 2010
[14] Faiyaz A.HW DO ³$QWLEDFWHULDO DFWLYLW\ of raphanus satius Linn Seed Extract,´Global jounal of medical research, vol 12, pp 25 ± 34, 2012
[15] S.6%HHYLHWDO³Polyphenolics profile and antioxidant properties of Raphanus sativus /´Nat Prod Res, vol 2, pp.557 ± 63, 2012
[16] $JDUZDO DQG 5 9DUPD ³5DGLFDO VFDYHQJLQJ DELOLW\ DQG ELRFKHPLFDO screening of a common Asian vegetable - Raphanus sativus /³Int J Pharm
[17] Surekha S HW DO ³$QWLPLFURELDO HIILFDF\ RI UDSKDQXV VDWLYXV URRW MXLFH´
International Journal of Pharmacy and Pharmaceutical Sciences, vol 3, pp 89 ± 92, 2011
[18] P.P.K NguyӉn, PK˱˯QJ pháp cô l̵p hͫp ch̭t hͷXF˯ ViӋW1DP 1;%Ĉ+ quӕc gia Tp.HCM, 2007
[19] *XOFLQ³$QWLR[LGDQWDFWLYLW\RIIRRGFRQWVWLWXHQWVDQRYHUYLHZ³Arch toxicol, vol.86, pp.345 ± 391, 2012
[20] -'DLHWDO³UHYLHZSODQWSKHQROLFV- extraction, analysis and their antioxidant DQGDQWLFDQFHUSURSHUWLHV´ Molecules, vol.15, pp 7313 ± 7352, 2010
[21] E Grotewold, The science of flavonoids New York: springer science business media, Inc, 2016
[22] S.V Bhat et al, Chemistry of natrural products India: narosa pulishing house, 2008
[23] 77Ĉһng và cӝng sӵ, &˯Vͧ công ngh sinh h͕c, t̵p 2: Công ngh sinh h͕c
ViӋt Nam: NXB giáo dөc ViӋt Nam, 2015
[24] '7UHXWWHU³Significance of flavonoids in plant resistance and enhancement RIWKHLUELRV\QWKHVLV´Plant Biol (Stuttg), vol 7, pp 581-91, 2005
[25] *$JDWLHWDO³Flavonoids as antioxidants in plants: Location and functional VLJQLILFDQFH´Plant Science, vol 196, pp 67±76, 2012
[26] 0DULD /)) HW DO ³)ODYRQRLGV ELRV\QWKHVLV ELRORJLFDO IXQFWLRQV DQG ELRWHFKQRORJLFDODSSOLFDWLRQV´Plant science, vol 3, pp 1 -15, 2012
[27] 0 2NDZDHW DO ³'33+ -Diphenyl 2- Pecrylhydrazyl) Radical scavenging
$FWLYLW\RIIODYRQRLGV2EWDLQHGIURPVRPH0HGLFDOSODQWV´Bio Pharm Bull, vol
[28] %1 $PHV HW DO ³2[LGDQWV DQWLR[LGDQWV DQG WKH GHJHQHUDWLYH GLVHDVHs of DJLQJ´Proc Nalt Acal Sci, vol 90, pp 7915 ± 7922, 1993.
[29] María C C and Fernando S.6 ³'HWHUPLQDWLRQ RI DQWLR[LGDQW FDSDFLW\
IODYRQRLGV DQG WRWDO SKHQROLF &RQWHQW LQ (XFDO\SWXV DQG &ORYHU +RQH\V´
Journal of apicultural science, vol 58, pp 103 ± 111, 2014
[30] H N.T Lai và cӝng sӵ³7UHVVR[LKyDYjFiFFKҩt oxi hóa tӵ QKLrQ´7ҥp chí khoa hӑc và phát triӇn, vol 7, trang 667 ± 677, 2009
[31] 7 1LVKLRND HW DO ³%DLFDOHLQ DQ Į- glucodase inhibitor from scutellaria EDLFDOHPLV,,´Jounal of natural products, vol 61, pp 1413 ± 1415, 1998
[32] -% +DUERUQH DQG &$:LOOLDPV ³5HYLHZ DGYDQFHV LQ IODYRQRLG UHVHDUFKVLQFH´3hytochemistry, vol 55, pp.481 ± 504, 2002
[33] * %UDKPDFKDUL ³%LR-flavonoids with promising antidiabetic potentials: A FULWLFDO VXUYH\ RSSRUWXQLW\´ Challenge and scope of natural products in medicical chemistry, vol 2, pp 187 ± 212, 2011
[34] H 6DQGKDU HW DO ³$ UHYLHZ RI SK\WRFKHPLVWU\ DQG SKDUPDFRORJ\ RI IODYRQRLGV´International pharmaceutica sciencia, vol 1, pp.25 ± 41, 2011
[35] J.M Narvez - Mastache et al, ³$QWLK\SHUJO\FHPLF DFWLYLW\ DQG FKHPLFDO FRQVWLWXHQWVRI(\VHQKDUGWLDSODW\FDUSD´-ournal of Natural Products, vol.69, pp
[36] %\XQJ=XQ$KQ³Proceeding of UNESCO regione seminar on the chemistry, pharmacology and clinical use of Flavonoit compounds; Polyoxyfenate Flavones; synthesis, cytotoxicities and Autitumor activity against ICR Maice carrying S-180 cell´.RUHDSS± 113, 1995
[37] ' 6XVDQWL HW DO ³$QWLR[LGDQW DQG F\WRWRxic flavonoids from the flowers of 0HODVWRPDPDODEDWKULFXP/´Food Chemistry, vol 103, pp 710 ± 716 , 2007
[38] %4/LHWDO³,QKLELWLRQRI+,9by EDLFDOLQ´Cellular Molecular Biological
[39]
![Hình 1.3 S̫n pẖPWUDRÿ͝i ch̭t b̵c m͡t và b̵c hai cͯa thc v̵t [11] - Luận văn thạc sĩ Công nghệ thực phẩm: Nghiên cứu khả năng kháng khuẩn của Flavonoid từ củ cải trắng (Raphanus sativus L.)](https://media.store123doc.com/figures/005/193/hinh-s-n-ph-pwudry-ch-hai-th-5193614.webp)
