- Vị khuẩn có hình thái nhất định, hình thái này do mang Vi khuẩn quyết định - Nhin bé ngoài người ta chia vi khuẩn là 5 loại: Cầu khuẩn, trực khuẩn, cầu trực rồi dính với nhau thành từn
Virus viêm não nhật bản Bộ, Di
Có 3 loại tế bào
+ Tế bào nguyên phát + Tế bào thứ cấp + Tế bài thường trực - Tùy từng loại virus ta chon loại tế bào cho phi š ví dụ VưusLMLM: tế bào than bé Virus dai: tế bào xơ phôi gà, tế bào thận chuối nhất, -
- Khi virus xâm nhạp vào tế bào nuôi, chúng nhân lên ay hủy hoạc tế bào
Có thể xác định CPE qua kính hiển vi quang học, căn cứ vào đó xác định được sự có mặt của virus
-Virus gây ra CPE của tế bào có thê có các dạng sau:
+ Dung bào: Tế bào bị tan rã hoàn toàn + Bién dang: Té bao co tron, NSC tan ra chi còn nhân té bao + Tạo lên hợp bào
Nhân các tế bào tập trung lại và được bao bọc bởi một màng, chúng tạo ra một tế bao đa nhân không lỗ
+ Tạo nên tiểu thé bao ham - Môi trường định dưỡng để nuôi cây tế bào thường dùng:
+ Môi trường LH y nhiém virus
+ Mdi trudng Eagle - Đa số tế bào cần 13 axit amin, 8 loại vitamin, glucoza, 6 nguyên tố khoáng:
- Sử dụng huyết thanh bê tỷ lệ 5-10%, Mục đích cho tế bào bám vào đây chai
* Interferon là Yếu tố vật chất gây lên hiên tượng cảm nhiễm, là chất đo tế bào động vật sản sinh ra khi có sự kích thích của các nguồn thông tin ngoại lai như: virus, VK, độc tổ của vi khuẩn là yếu tố miễn địch không đặc hiệu của cơ thê
* Cơ chế tác động cia Interferon - Sau khi tế bảo: bi nhiém virus, nO sinh ra interferon - Interferon] phan 6 lại té bao 1 phan ngắm sang, tế bào bên cạnh chưa nhiễm virus, ở đó inte, n hoạt hóa một đoạn gen của tế bào này, tổng hợp ra một protein kháng viruS(AXP- anti viral protein)
- Chinh AVP nay cand r SU téng hop ARNm cua virus
- Khi không có ARNm sẽ không có quá trình tổng hợp các thành phần khác cua Virus,
=> Nhu vay interferon chi CO | bộn trong tộ bao ơ
Câu 22: Phương pháp làm tiêu bản vi sip Phương pháp làm tiêu bản quan sát VẬV
- Kiếm tra hình thái của vi khuẩn
‘dung g gidn tiếp lên virus, chỉ có tác dụng ở vật đề quan sát vi sinh vật chết?
- Kiểm tra tính chất bắt màu của vị khuẩn Gr(-) hay G tf vo} mau do hay tim
- Kiểm tra câu trúc đặc biệt của vi khuẩn (nếu có): nha bào, biáp hô
Bước Ì Chuẩn bị: phiến kính và que cấy, đèn cần, bệnh phá - Lây phiến kinh sạch sẽ, trong sáng
- Ding bút viết kính đánh dâu vị trí phiệt VSV năm ở mặt sau của phiên kính
- Võ trùng băng cách hơ trên ngọn lửa đèn côn
Bước 2 Phết VSV - Môi trường lỏng: lắc nhẹ — lây 1 giọt
- Môi trường đặc: nhỏ 1 giọt nước sinh lý lên phiên kính rôi lây 1 ít khuân lạc -> tron déu, dan mong - Lấy từ bệnh phẩm:
+ Máu + Gan, lách, phổi, thận
+ Giết ch VS để việc sử dụng không gây nguy hiểm
+ Lam VSV" bayimau uw thuéc nhudm tét hon
+ Lam cho V§$¥V gan cpt với phiên kính, khi rửa nước không bị trôi di
- Phương pháp cô định VN: lùa đèn cồn | 360, côn axeton hương pháp mà trong quá trình nhuộm au chinh thuốc nhuộm đó
+ Dùng nhiệt: hơ trên nga + Hóa chất: cồn tuyệt đối, € Câu 23: Phương pháp nhuộm đợi: chỉ sử dụng Ì loại thuốc nhuộm VSV Ví dụ:
-Dé fucsin + VSV bat mau dd
- Xanh methylen —+ VSV bắt màu xanh - Tím gentian —> VSV bắt màu tím
_~ Nhỏ lên tiêu bản đã cô định vài giọt thuôc nhuộm để 2-5 phiêu - Đô thuộc nhuộm
- Soi kính Câu 24: Phương pháp nhuộm kép, cách nhuộm Gram Khái niệm: Phương pháp nhuộm kép: trong quá trình nhuộm sử dụng 2 loại thuốc nhuộm trở lên
-Nho dung dich tim Gentian lén tiéu ban
Để 1 phút
+ Rửa nước, vậy khô -Nhoé dung dich Lugol
+ Rửa nước, vậy khô - Tây màu bang con axeton
+ Cho côn axeton chảy qua 15-20s + Rủa nước, vậy khô
- Nhó dung dịch Jpchein luãng
Két qua: VK Gr(+) bat mau ¡ tím, VE Gr(-) bat mau dé Cau 25: Khai niém: Phượng Pháp nhuộm kép: trong quá trình nhuộm sử dụng 2 loại thuốc nhuộm trở lên
Phương pháp nhuộm Giemsa (nhuẩm tiêu bán máu)
- Đề tiêu bản máu tự khô
- Cô định tiêu bán bằng côn tuyệt đãi
+Rứa nước - Nhé dung dich Giemsa ngap tiểu ban
+ Rửa nước, vẫy khô - Két qua:
+ Hồng cầu: NSC bắt màu hồng, nhân bất màu tím
+ Bạch cau: NSC cha bach cầu bắt màu xanh, nhân BC bắt màu tím; VK bắt mau tim
Cau 26: Qua trinh điều chế môi trường nuôi cấy vi sinh vat: 6 bước - Bước 1: Phối trộn và hòa tan nguyên liệu
- Bước 2: Đo và điều chỉnh pH - Bước 3: Loc va phân phôi môi trường ra các dụng cụ thủy tình
- Bước 4: Vô trùng môi trường - Bước 5: Kiêm định
- Bước 6: Bảo quản Câu 27: Cách xác định khá năng lên men của đường vì khuẩn:
- VK lén men đường => acid (pyruvic) —pH môi trường giảm —› nhận biết băng chi thi
- Trong qua trinft lêi men, | số VSV còn có khả năng sinh hơi —› xác định bằng ông duynhhan
- Dung dich peptone - | trong cac loai duong (Glucose: Ì actose ) pha thanh dung dich 10% hay 20%
- Pha đường với peptone theo ty Ié tues - Chi thi mau Bromthymol blue (xanh) - Ong duynbhan thả xuống đáy và úp ngược xuống
~ Cay giong vi khuan cân chân đoán vào những ống nisi để trên rồi để trong tủ ấm 370C/24h lấy ra xem kết quả ong pepton co dudng
- MỸ không thay đôi màu—+VK không lên men đường
- MT đôi màu nhưng ông duynhhan chìm — VK lên men loại đường đó nhưng không sinh hơi |
- MT déi mau va é6ng duynhhan bi day néi lén — VK lên men va sinh hơi
Câu 28: Cách xác định khả nắng sinh HạS của VK:
- Ví khuẩn phân giải một số acid amin chứa lưu huỳnh (Cys, met) NH3, H2S
- Đề xác định khả năng này người ta nuôi cấy vi khuẩn trên các môi trường có chứa axetat chì
H25 + Pb(CH3COO)2 LÌ PbŠ + 2CH3COOH
* MT lông: cây VK vào môi trường lông và cài vào miệng éng nghiệm 1 băng giấy lọc có tâm chì axetat 20%, rồi nuôi cây ở tủ ấm 370/24 - 48h, nếu băng giây lọc chuyển màu đen — cé sinh H2S
* MT đặc: đùng que cấy thang lây vi khuẩn rồi cấy chích sâu vào ông nghiệm đựng môi trường —> nuôi cấy ở 370C trong 24 - 48h Nếu đọc đường cây xuất hiện _ mâu đen —> VỀ sinh H2S
Câu 29: Các xác định khả năng sinh Indo của vi khuẩn:
Tryptophan Tryptophangga ôIndo a _dimetyl amino
- Cõy vi khuẩn vào mỗi trường peptone hoặc mụi trường ỉtứne khụng cú đường
- Nuôi cấy ở 370 C/24 - 48h lấy ra, nhỏ vào đó vài giọt thuốc {l Đọc kêt quả sau Š phút
- Trén bê mặt môi trường xuât hiện vòng tròn đỏ -> phản ứng (+)
- Trên bề mặt môi trường không xuất hiện vòng tròn đỏ -> phản ứng (-) Câu 30: ảnh hướng của yếu tố nhiệt độ đến hoạt động sông của vỉ sinh vật:
-Hoạt động sông của VSV gắn liền với các phan ứng hóa hoc Các phần ứng này phụ thuộc nhiều vào nhiệt độ
- Phạm vi nhiệt độ để VSV có thể tồn tai 1a 0°C -90°C
- Mỗi loại vi sinh vật có khoảng nhiệt độ cho hoạt động sống của nó gọi là giớ hạn nhiệt độ sinh trưởng
T? Cực tiểu TP thích hợp T° Cure dai Vi dụ: VK nhiệt thân sinh trưởng được tt 12°C -42°C Nhiệt độ thích hop 37°C
- Cac nhém VSV khac nhau, giới hạn nhiệt độ sinh trưởng khác nhau
- Nếu nhiệt độ nằm ngoài giới hạn nhiệt độ sinh trưởng sẽ ảnh hưởng đến VSV - Dựa vào mối quan hệ VSV với nhiệt độ chia VSV làm nhóm:
+ VỊ sinh vật ưa lạnh: sinh trưởng ở nhiệt độ 0°C-30°C, nhiệt độ thích hợp:
20C Nhóm VSV này sống ở hề sâu hoặc trong phòng lạnh bảo quản thực phẩm
+ Vi sinh vat ua am: Sinh truong ở nhiệt độ 20°C -40°C, nhiệt độ thích hợp ký sinh gây bệnh: eho Rgười va động vật,
Q1: sinh trưởng ở nhiệt độ 35°C — 80°C, nhiệt độ thích hợp 50°-60C, Nhoth nay hổ yếu là xạ khauarn, vi khuẩn có nha bào, thường gặp ở bãi rác, động phân t ủ, suối nước nóng, sa mạc,
* Ảnh hưởng của nhiệt độ thấy/ @ nhiệt độ thấp, sinh trưởng và “hát triển cha VSV bi tre ché
- Hoạt động sinh lý giảm, VSV chuyep ể trạng thái ngủ tiềm sinh
- Cơ chế: Ở nhiệt độ thấp nước tự do trgàg” pao VSV bi dong bang thành những tinh thể nhỏ li ti Nên không phá vỡ màng #ể bào, VSV sống cầm chừng, nêu loại bỏ yếu tố nhiệt độ thấp -> VSV hoạt động trở lại `
- Sức đề kháng của VSV với nhiệt độ thấp phụ Thuốc ào
+ Loại hình vị sinh vật + Trạng thái sinh lý của vị smh vật
Câu 31: Ánh hướng của tỉa bức xạ đến hoạt động sông của vị sinh vật:
- Các tia sáng có bước sóng trao đổi chất ret _
+ pH cần cho hoạt động của nhiều enzim + pH anh hưởng độ hòa tan của một số muối: K, Na
+ pH thay đổi ảnh hưởng đến điện tích màn 8 nguyên sinh chất, tính thâm của màng -> ảnh hưởng đếnvận chuyển các chất qua màng tế bào trong quá trình TĐC
- Mỗi loại VSV có một giới hạn pH sinh trưởng:
+ + + pH Cực tiểu pH thích hợp pH Cực đại
Mỗi nhóm VSV có giớ hạn sinh trưởng khác nhau Nhìn chung: pH cực pH thích tiêu hợp
+ Nam men 2-25 4-6 8 pH cực đại
- Mỗi loại VSV có giớ hạn pH sinh trưởng khác nhau:
+ Vsv tra pH trung tính 5 - 7,5-==err 8.5
+ VSV chiu kiém pH tối thiểu >9,5
* Ứng dụng : - Trong nuôi cấy NV
+ Can ta midi th + Cần duyằ axit yếu: carbonat,
- Trong chộ biộn, bao quar xưẽiực phẩm sử dung axit hitu co: axit axetic, axitlactic dé han chế sự phá hoại cửa VSW Bây thối át chua là biện pháp điều chỉnh pH cho VSV hoạt động tốt #
Cau 33: Tac dung cia clo, fomaidel | của VSV:
- Axit nay rất hoạt động phân hủy tiếp cho r ra mốc Và Ặ - Oxy moi sinh ra cé kha năng oxy hóa mạnh lànr£Phá@ủy màng tế bào
C1; +HạO -> HOCI + HCI HOCI -> HC] +0
- Clo con thay thế Hydro trong nhóm amin của Pr tạo t thay đôi -> tế bào bị phá hủy
Cl + Rạ=NH->R;=NCI +HCI - Ứng dụng:
+ Khí Clo có nồng độ Ippm( một phân triệu) có tác đụng khủ trủng nước, + Cloramin là một chất hoạt động oxy hóa mạnh dùng khủ trùng nước, dụng
Welesamin -> câu trúc pr cu e Ro= NCI + HạO -> Rạ= NH +HOC!I ằ 2HOCI->2HCI +0,
_ + Hypocloritcanxi(clorua voi): Ca(OCD; dùng 30 -50 g/Im” dùng tiêu độc chuông trại, các chât thải, nhà vệ sinh
- Là chất khí có tác dụng khủ trùng mạnh, kích thích niêm mạc mạnh - Cơ chế:
+ fomaldehyt gắn với nhóm amin tự đo của Pr làm biến tính, đông vón Pr, phá hủy axit nucleic cua VSV
- Fomadehit su dung & dang long goi 14 formol Dung dich nay cé thêm 10-15%
,etylic để ngăn sự trùng hợp của formaldehyt thành paraformaldehyl chất rắn
- Ứng dụng + Formol: ® 1%-5% đề tiêu độc, sát trùng ® 10% khử khuẩn va ngâm xác chết ® M.4 I tháng để giảm độc tổ của vi khuẩn uốn ván
+ Phun vào tước : ao, bé 15-25ppm + Tam dộng vat ôsan 200-250ppm/30-60 phut + Dùng 35ml fermg yy” 5g KMnO//1mỶ khử trùng không khí phòng mổ ,máy âm
- Đa số kim loại nặng và bọn tệ kim loại - Độ độc kim loại theo thú tự: Hg, PB - Cơ chế: biến tính pr của VSV gi
+ HạCh;: 0,02% đã tiêu diệt nhiều loại vi khuẩn ] cac nha bao
+ AgNO: 2% co tac dung diét khuẩn/ bã + CuSO,: 0,001% ức chế được vì khuẩn và điệt được tảo À%
+ Hợp chất As hữu cơ như Neosalvacsan điêu trị giang mai
Câu 34: Tác dụng của các chất oxy hóa, etalnol và CaO đến hoạt động sông của VSSV:
* Chất oxy hóa - Là chất tự nó cung cấp oxi hoặc gây ra giải phóng oxy từ các hợp chất khác - Các hất oxy hóa dùng làm chất sát trùng như:
+ Cloramin + Dicloramin thê tiêu diệt được ˆ
- Tác dụng của chat oxi hóa 1a sw oxi héa manh cua oxi mdi giải phóng ra làm bat hoạt các enzim có chứ gốc —SH trong tế bào V§SV
+ Đề sát trùng + KMnO¿ phòng bệnh: liều 10-15ppm, Ippm=l g/m nước tắm cho cá 1-2
gid 20-30°C
+ HạO; nồng độ 3% đùng sát trùng các về thương sâu
- Có tác dụng khủ mạnh - Cơ chế:
+ Hoa tan oa mang té bào và làm đông vón pr nguyên sinh chất vi ‡ trùng của côn liên quan tới trọng lượng phân tử và nông độ tùng : Metylic