44 Trang 11 MỞ ĐẦU Dựa trên quá trình đông máu tự nhiên của cơ thể các nghiên cứu đã tìm cách tách chiết, cố gắng thu thập được lượng fibrinogen và thrombin trong huyết tương nhiều chất
ĐẠI HỌC THÁI NGUYÊN TRƢỜNG ĐẠI HỌC KHOA HỌC PHẠM THỊ THU HƢƠNG NGHIÊN CỨU KHẢ NĂNG KHÁNG KHUẨN VÀ LÀM LÀNH VẾT LOÉT CỦA KEO FIBRIN TỰ THÂN TRỘN CEFAZOLIN TRÊN THỎ THỰC NGHIỆM LUẬN VĂN THẠC SĨ SINH HỌC ỨNG DỤNG Thái Nguyên - 2021 ĐẠI HỌC THÁI NGUYÊN TRƢỜNG ĐẠI HỌC KHOA HỌC PHẠM THỊ THU HƢƠNG NGHIÊN CỨU KHẢ NĂNG KHÁNG KHUẨN VÀ LÀM LÀNH VẾT LOÉT CỦA KEO FIBRIN TỰ THÂN TRỘN CEFAZOLIN TRÊN THỎ THỰC NGHIỆM Chuyên ngành: Công nghệ sinh học Mã số: 8 42 02 01 LUẬN VĂN THẠC SĨ SINH HỌC ỨNG DỤNG Ngƣời hƣớng dẫn khoa học: TS Hoàng Thu Soan Trƣờng Đại học Y - Dƣợc, ĐH Thái Nguyên Thái Nguyên - 2021 i LỜI CAM ĐOAN Tôi xin cam đoan đây là công trình nghiên cứu của tôi thực hiện dưới sự hướng dẫn của TS Hoàng Thu Soan Mọi trích dẫn trong luận văn đều ghi rõ nguồn gốc Các số liệu, kết quả nghiên cứu trong luận văn là trung thực và chưa từng được ai công bố trong một công trình nào khác Thái Nguyên, ngày 18 tháng 8 năm 2021 Tác giả Phạm Thị Thu Hƣơng ii LỜI CẢM ƠN Lời đầu tiên tôi xin được bày tỏ lòng biết ơn sâu sắc tới TS Hoàng Thu Soan, Bộ môn Sinh lý học, Khoa Y học cơ sở, Trường Đại học Y – Dược, Đại học Thái Nguyên đã tận tình hướng dẫn, chỉ bảo và giúp đỡ tôi trong suốt thời gian thực hiện và hoàn thành luận văn này Tôi xin chân thành cảm ơn Ban giám hiệu Trường Đại học Khoa học, Đại học Thái Nguyên, Ban chủ nhiệm Khoa Công nghệ sinh học và các thầy cô giáo, cán bộ trong Khoa Công nghệ sinh học Tôi xin chân thành cảm ơn các thầy cô giáo Bộ môn Sinh lý học, Sinh lý bệnh – Miễn dịch, Vi sinh, Trường Đại học Y – Dược, Đại học Thái Nguyên Tôi xin cảm ơn gia đình, đồng nghiệp, bạn bè luôn bên cạnh ủng hộ, khuyến khích, động viên tạo động lực để tôi hoàn thành luận văn này Trong quá trình làm luận văn không tránh khỏi những sai sót, tôi mong nhận được sự đóng góp quý báu từ phía thầy cô, đồng nghiệp, bạn bè để tôi hoàn thành bản luận văn Thái Nguyên, ngày 18 tháng 8 năm 2021 Tác giả Phạm Thị Thu Hƣơng iii MỤC LỤC LỜI CAM ĐOAN i LỜI CẢM ƠN ii MỤC LỤC iii DANH MỤC CÁC CHỮ VIẾT TẮT .v DANH MỤC BẢNG vi DANH MỤC HÌNH vii MỞ ĐẦU 1 CHƢƠNG 1 TỔNG QUAN TÀI LIỆU 3 1.1 Quá trình đông máu 3 1.2 Hai thành phần cơ bản của keo fibrin 4 1.2.1 Đặc điểm của fibrinogen 4 1.2.2 Đặc điểm của thrombin .5 1.3 Phương pháp tách chiết các thành phần keo fibrin 7 1.3.1 Phương pháp tách chiết fibrinogen tự thân .7 1.3.2 Phương pháp tạo thrombin tự thân 8 1.4 Tình hình nghiên cứu keo fibrin trên thế giới 9 1.4.1 Sự ra đời của keo fibrin 9 1.4.2 Ứng dụng của keo fibrin 10 1.5 Tình hình nghiên cứu keo fibrin ở Việt Nam 15 CHƢƠNG 2 VẬT LIỆU VÀ PHƢƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU .17 2.1 Vật liệu nghiên cứu 17 2.1.1 Thiết bị và hóa chất nghiên cứu 17 2.1.2 Đối tượng nghiên cứu 17 2.1.3 Xử lý số liệu 18 2.2 Địa điểm và thời gian 18 2.3 Phương pháp nghiên cứu 18 2.3.1 Thiết kế nghiên cứu .18 2.3.2 Phương pháp nghiên cứu mục tiêu 1 .18 iv 2.3.3 Phương pháp nghiên cứu mục tiêu 2 .21 2.3.4 Phương pháp nghiên cứu mục tiêu 3 .22 2.3.5 Sơ đồ nghiên cứu 24 2.4 Đạo đức trong nghiên cứu 25 CHƢƠNG 3 KẾT QUẢ 26 3.1 Qui trình tạo keo fibrin tự thân bằng phương pháp gây đông lạnh 26 3.2 Khả năng kháng khuẩn của keo fibrin kết hợp với kháng sinh Cefazolin 29 3.3 Hiệu quả cầm máu và làm lành vết thương cắt da và vết loét của keo fibrin tự thân 35 3.3.1 Hiệu quả cầm máu và làm lành vết thương của keo fibrin tự thân 35 3.3.2 Hiệu quả làm lành vết loét của keo fibrin tự thân 40 CHƢƠNG 4 BÀN LUẬN .46 4.1 Qui trình tạo keo fibrin tự thân bằng phương pháp gây đông lạnh 46 4.2 Khả năng kháng khuẩn của keo fibrin kết hợp với kháng sinh Cefazolin 49 4.3 Hiệu quả cầm máu, làm lành vết thương và vết loét của keo fibrin tự thân 53 KẾT LUẬN 56 1 Qui trình tạo keo fibrin tự thân bằng phương pháp gây đông lạnh huyết tương 56 2 Khả năng kháng khuẩn của keo fibrin kết hợp với kháng sinh Cefazolin 56 3 Hiệu quả cầm máu, làm lành vết thương và vết loét của keo fibrin tự thân 56 KIẾN NGHỊ .57 TÀI LIỆU THAM KHẢO 58 DANH MỤC CÔNG TRÌNH CÔNG BỐ CỦA TÁC GIẢ 62 PHỤ LỤC 63 v DANH MỤC CÁC CHỮ VIẾT TẮT Fib Fibrinogen Cef Cefazolin VK Vi khuẩn OXP Oxaliplatin K Không đo được vi DANH MỤC BẢNG Bảng 3.1 Nồng độ fibrinogen (fib) thu được sau 2 giờ ở nhiệt độ -180C, -350C và -800C 26 Bảng 3.2 Nồng độ fibrinogen (fib) thu được theo thời gian gây đông ở nhiệt độ -180C 27 Bảng 3.3 Nồng độ fibrinogen (fib) thu được theo thời gian gây đông ở nhiệt độ -350C 27 Bảng 3.4 Thời gian thu thập thrombin và hình thành keo fibrin .28 Bảng 3.5 Đường kính vùng ức chế vi khuẩn Gram dương của các chế phẩm .29 Bảng 3.6 Đường kính vùng ức chế Gram âm của các chế phẩm .30 Bảng 3.7 Thời gian cầm máu của các chế phẩm keo fibrin .35 vii DANH MỤC HÌNH Hình 1.1 Con đường đông máu nội sinh và ngoại sinh 4 Hình 1.2 Sơ đồ mô phỏng cấu trúc fibrinogen của con người 5 Hình 1.3 Vai trò của thrombin chuyển fibrinogen thành fibrin 6 Hình 1.4 Sơ đồ chuyển hóa prothrombin thành thrombin và sự trùng hợp fibrinogen tạo thành các sợi fibrin .6 Hình 3.1 Qui trình tạo keo fibrin tự thân bằng phương pháp gây đông lạnh được thể hiện bằng sơ đồ sau .28 Hình 3.2 Tác dụng kháng khuẩn của các chế phẩm ở thời điểm 3 giờ 31 Hình 3.3 Tác dụng kháng khuẩn của các chế phẩm ở thời điểm 6 giờ 32 Hình 3.4 Tác dụng kháng khuẩn của các chế phẩm ở thời điểm 12 giờ 32 Hình 3.5 Tác dụng kháng khuẩn của các chế phẩm ở thời điểm 24 giờ 33 Hình 3.6 Tác dụng kháng khuẩn của các chế phẩm ở thời điểm 48 giờ 34 Hình 3.7 Tác dụng kháng khuẩn của các chế phẩm ở thời điểm 72 giờ 34 Hình 3.8 Hình ảnh cầm máu của keo fibrin .35 Hình 3.9 Hình ảnh vết thương cắt da sau 1 giờ 36 Hình 3.10 Hình ảnh vết thương cắt da sau 24 giờ 36 Hình 3.11 Hình ảnh vết thương cắt da sau 3 ngày 37 Hình 3.12 Hình ảnh vết thương cắt da sau 5 ngày 37 Hình 3.13 Hình ảnh vết thương cắt da sau 7 ngày 38 Hình 3.14 Hình ảnh vết thương cắt da sau 10 ngày .38 Hình 3.15 Hình ảnh vết thương cắt da sau 14 ngày .39 Hình 3.16 Hình ảnh vết thương cắt da sau 20 ngày .39 Hình 3.17 Hình ảnh tạo vết loét .40 Hình 3.18 Hình ảnh vết loét ngay sau khi đổ các chế phẩm keo fibrin 40 Hình 3.19 Hình ảnh vết loét sau 1giờ 41 Hình 3.20 Hình ảnh vết loét sau 24 giờ 41 Hình 3.21 Hình ảnh vết loét sau 3 ngày 42 Hình 3.22 Hình ảnh vết loét sau 5 ngày 42 Hình 3.23 Hình ảnh vết loét sau 7 ngày 43 viii Hình 3.24 Hình ảnh vết loét sau 10 ngày .43 Hình 3.25 Hình ảnh vết thương sau 14 ngày 44 Hình 3.26 Hình ảnh vết thương sau 20 ngày 44 Hình 3.27 Hình ảnh vết thương sau 30 ngày 45