Trang 1 ĐẠI HỌC THÁI NGUYÊN TRƯỜNG ĐẠI HỌC SƯ PHẠM VILASACK PHANTHALATH NGHIÊN CỨU ĐẶC ĐIỂM HÌNH THÁI VÀ SỰ THAY ĐỔI HÀM LƯỢNG CÁC CHẤT LIÊN QUAN ĐẾN MỘT SỐ YẾU TỐ SINH THÁI CỦA LOÀI THI
ĐẠI HỌC THÁI NGUYÊN TRƯỜNG ĐẠI HỌC SƯ PHẠM VILASACK PHANTHALATH NGHIÊN CỨU ĐẶC ĐIỂM HÌNH THÁI VÀ SỰ THAY ĐỔI HÀM LƯỢNG CÁC CHẤT LIÊN QUAN ĐẾN MỘT SỐ YẾU TỐ SINH THÁI CỦA LOÀI THIÊN LÝ HƯƠNG (Embelia parviflora Wall.ex A.DC.) TẠI VƯỜN QUỐC GIA TAM ĐẢO LUẬN VĂN THẠC SĨ SINH HỌC Thái Nguyên, tháng 12/2023 ĐẠI HỌC THÁI NGUYÊN TRƯỜNG ĐẠI HỌC SƯ PHẠM VILASACK PHANTHALATH NGHIÊN CỨU ĐẶC ĐIỂM HÌNH THÁI VÀ SỰ THAY ĐỔI HÀM LƯỢNG CÁC CHẤT LIÊN QUAN ĐẾN MỘT SỐ YẾU TỐ SINH THÁI CỦA LOÀI THIÊN LÝ HƯƠNG (Embelia parviflora Wall.ex A.DC.) TẠI VƯỜN QUỐC GIA TAM ĐẢO Ngành: Sinh thái học Mã số: 8.42.01.20 LUẬN VĂN THẠC SĨ SINH HỌC Người hướng dẫn khoa học: PGS.TS SỸ DANH THƯỜNG Thái Nguyên, tháng 12/2023 LỜI CAM ĐOAN Tôi xin cam đoan đã thực hiện việc kiểm tra mức độ tương đồng luận văn qua phần mềm Turnitin một cách trung thực và đạt kết quả mức độ tương đồng 27% Bản luận văn kiểm tra qua phần mềm là bản cứng đã nộp để bảo vệ trước hội đồng Nếu sai tôi hoàn toàn chịu trách nghiệm Thái Nguyên, tháng 12 năm 2023 Học viên (Ký, ghi rõ họ tên) VILASACK PHANTHALATH i LỜI CẢM ƠN Lời đầu tiên em xin bày tỏ lòng biết ơn chân thành và sâu sắc tới PGS.TS Sỹ Danh Thường người thầy đã tận tình hướng dẫn, chỉ bảo và tạo mọi điều kiện giúp đỡ em trong quá trình nghiên cứu và hoàn thành luận văn Tôi xin chân thành cảm ơn ThS Trần Thị Hồng và nhóm nghiên cứu, cảm ơn các thầy cô Khoa Sinh học, Trường Đại học Sư phạm - Đại học Thái Nguyên đã tạo mọi điều kiện giúp đỡ tôi trong suốt quá trình học tập, nghiên cứu và hoàn thành khóa học Tôi xin chân thành cảm ơn sự hỗ trợ kinh phí của đề tài cấp Bộ Giáo dục và Đào tạo, mã số B2023-TNA-25 Tôi cũng xin cảm ơn lãnh đạo Trường Trung học phổ thông Viêng Thong, Tỉnh Bolikhamxay, Lào đã tạo mọi điều kiện thuận lợi để tôi hoàn thành khóa học tại Việt Nam Em xin bày tỏ lời biết ơn đến gia đình, bạn bè đã động viên, khuyến khích và giúp đỡ em trong tiến trình học tập và hoàn thành luận văn Thái Nguyên, tháng 12 năm 2023 Tác giả luận văn VILASACK PHANTHALATH ii MỤC LỤC LỜI CAM ĐOAN i LỜI CẢM ƠN ii MỤC LỤC iii DANH MỤC BẢNG iv DANH MỤC HÌNH .v MỞ ĐẦU .1 1 Đặt vấn đề 1 2 Thời gian, phạm vi nghiên cứu 2 3 Mục tiêu nghiên cứu 2 4 Nội dung nghiên cứu 2 5 Ý nghĩa khoa học và ý nghĩa thực tiễn của đề tài 2 Chương 1: TỔNG QUAN TÀI LIỆU 3 1.1 Những nghiên cứu về loài Thiên lý hương ở trên thế giới và ở Việt Nam 3 1.1.1 Trên thế giới 3 1.1.2 Ở Việt Nam 4 1.2 Những nghiên cứu về đặc điểm cấu tạo hiển vi của các loài cây thuốc ở Việt Nam 6 1.3 Những nghiên cứu về mật độ và khả năng tái sinh của các loài cây thuốc ở Việt Nam 8 1.4 Những nghiên cứu về sự biến đổi hàm lượng các nhóm chất lớn có liên quan đến các yếu tố sinh thái của môi trường .10 1.5 Khái quát điều kiện tự nhiên và kinh tế xã hội của Vườn quốc gia Tam Đảo .11 Chương 2: PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU .14 2.1 Phương pháp điều tra theo tuyến và ô tiêu chuẩn (OTC) 14 2.2 Phương pháp thu mẫu thực vật 14 2.3 Phương pháp phân tích mẫu vật 14 iii 2.4 Phương pháp nghiên cứu đặc điểm hình thái ngoài và cấu tạo hiển vi 15 2.5 Phương pháp nghiên cứu mật độ, chất lượng, nguồn gốc cây tái sinh .15 2.6 Phương pháp đánh giá sự thay đổi hàm lượng các chất liên quan đến các điều kiện sinh thái 17 2.6.1 Đánh giá và xác định các điều kiện sinh thái 17 2.6.2 Phương pháp nghiên cứu thành phần hóa học tinh dầu 17 2.7 Phương pháp chiết mẫu nghiên cứu hoạt tính sinh học 18 2.8 Phương pháp nghiên cứu hoạt tính gây độc tế bào .18 2.8.1 Phương pháp xác định tính độc tế bào (cytotoxic assay) đối với tế bào nuôi cấy dạng đơn lớp 19 2.8.2 Phương pháp MTT để xác định hoạt tính ức chế tăng sinh tế bào đối với tế bào nuôi cấy dạng hỗn dịch (HL-60) 21 2.9 Phương pháp xử lý số liệu 22 Chương 3: KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU 23 3.1 Đặc điểm hình thái của loài Thiên lý hương 23 3.1.1 Đặc điểm hình thái ngoài 23 3.1.2 Đặc điểm hình thái hiển vi .25 3.2 Mật độ, chất lượng, nguồn gốc cây tái sinh của loài Thiên lý hương 29 3.2.1 Mật độ 29 3.2.2 Chất lượng và nguồn gốc cây tái sinh .30 3.3 Sự thay đổi hàm lượng các chất lớn có liên quan đến các điều kiện sinh thái .31 3.4 Kết quả thử nghiệm hoạt tính gây độc tế bào .34 KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ 39 1 Kết luận 39 2 Kiến nghị 39 TÀI LIỆU THAM KHẢO .40 iv DANH MỤC BẢNG Bảng 3.1 Mật độ loài cây Thiên lý hương 29 Bảng 3.2 Nguồn gốc và chất lượng cây tái sinh của Thiên lý hương 30 Bảng 3.3 Các nhân tố sinh thái tại thị trấn Tam Đảo 32 Bảng 3.4 Thành phần và hàm lượng tinh dầu 32 Bảng 3.5 Khả năng gây độc tế bào của mẫu nghiên cứu 35 Bảng 3.6 Hình ảnh gây độc tế bào của mẫu nghiên cứu 36 iv DANH MỤC HÌNH Hình 3.1 Ảnh hình thái ngoài cây Thiên lý hương 24 Hình 3.2 Cấu tạo của rễ 25 Hình 3.3 Cấu tạo thân cây 26 Hình 3.4 Cấu tạo phiến lá 27 Hình 3.5 Cấu tạo gân lá 28 v MỞ ĐẦU 1 Đặt vấn đề Thiên lý hương (Embelia parviflora Wall ex A DC.) còn có tên khác là Cẩm xà lặc, Chua ngút hoa thưa, Rè đẹp, Sâm, Xà là pẹt Đây là một loài thực vật làm thuốc quý được sử dụng trong nhiều bài thuốc dân gian Rễ và toàn bộ dây leo già dùng làm thuốc trị vô sinh, thông kinh, khí hư, đau lưng, đau gối, gãy xương, việm ruột mãn tính Loài này phân bố ở Cao Bằng, Lạng Sơn (Văn Lãng), Vĩnh Phúc (Tam Đảo), Hòa Bình (Đà Bắc), Ninh Bình, Nghệ An (Quỳ Châu), Kon Tum (Ngọc Linh), Gia Lai (Măng Giang), Lâm Đồng (Đà Lạt) Ngoài ra, còn phân bố ở Ấn Độ, Trung Quốc (Hải Nam, Vân Nam, Quảng Tây, Quảng Đông), Mianma, Thái Lan, Malaixia và Inđônexia Tuy loài Thiên lý hương có khu phân bố rộng, nhưng nơi cư trú rất rải rác và bị chia cắt, số lượng cá thể ít do nạn phá rừng và khai thác (chặt cả cây làm thuốc), được xếp hạng ở mức sẽ nguy cấp (VU) Vườn quốc gia Tam Đảo nằm trọn trên dãy núi Tam Đảo thuộc địa phận 3 tỉnh gồm Thái Nguyên, Vĩnh Phúc và Tuyên Quang Vườn quốc gia Tam Đảo có 1.282 loài thực vật thuộc 660 chi, 179 họ thực vật bậc cao có mạch, trong đó có các loài điển hình cho vùng cận nhiệt đới Có 42 loài đặc hữu và 64 loài quý hiếm cần được bảo tồn và bảo vệ như Hoàng thảo tam đảo (Dendrobium daoensis), Trà hoa dài (Camellia longicaudata), Trà hoa vàng Tam Đảo (Camellia petelotii), Toa tiên (Asarum petelotii), Thùy hoa leo (Molas tamdaoensis), Trọng lâu kim tiền (Paris delavayi) và Thiên lý hương (Embelia parviflora) Ở Việt Nam, các công trình nghiên cứu về loài thực vật này chủ yếu mô tả đặc điểm hình thái hoặc liệt kê giá trị sử dụng Tuy nhiên chưa có công trình nào đi sâu điều tra nghiên cứu một cách đầy đủ về đặc điểm hình thái, sinh thái và sự biến động hàm lượng một số chất liên quan đến các yếu tố sinh thái của môi trường Với những lý do trên chúng tôi chọn đề tài “Nghiên cứu đặc điểm hình thái và sự thay đổi hàm lượng các chất liên quan đến một số yếu tố sinh thái của loài Thiên lý hương (Embelia parviflora Wall.ex A.DC.) tại vườn quốc gia Tam Đảo 1 2 Thời gian, phạm vi nghiên cứu - Thời gian nghiên cứu: đề tài được thực hiện từ tháng 8 năm 2022 đến tháng 10 năm 2023 - Phạm vi nghiên cứu: đề tài chỉ tập trung nghiên cứu tại điểm có sự phân bố của loài Thiên lý hương tại Vườn quốc gia Tam Đảo thuộc tỉnh Vĩnh Phúc 3 Mục tiêu nghiên cứu - Xác định và mô tả chi tiết được đặc điểm hình thái ngoài và đặc điểm cấu tạo hiển vi của loài Thiên lý hương - Xác định được mật độ, chất lượng, nguồn gốc cây tái sinh của loài Thiên lý hương tại Vườn quốc gia Tam Đảo, tỉnh Vĩnh Phúc - Xác định được sự thay đổi hàm lượng các chất có tinh dầu có liên quan đến các điều kiện sinh thái - Xác định được hoạt tính gây độc tế bào của dịch chiết từ loài thiên lý hương 4 Nội dung nghiên cứu - Nghiên cứu đặc điểm hình thái ngoài và đặc điểm cấu tạo hiển vi của loài Thiên lý hương - Nghiên cứu mật độ, chất lượng, nguồn gốc cây tái sinh của loài Thiên lý hương ở Vườn quốc gia Tam Đảo - Đánh giá sự thay đổi hàm lượng các chất có tinh dầu có liên quan đến các điều kiện sinh thái - Đánh giá hoạt tính gây độc tế bào của dịch chiết từ loài thiên lý hương 5 Ý nghĩa khoa học và ý nghĩa thực tiễn của đề tài - Ý nghĩa khoa học: Kết quả của đề tài cung cấp đầy đủ các thông tin về đặc điểm hình thái ngoài, hình thái giải phẫu hiển vi, mật độ, khả năng tái sinh, phân bố và hoạt tính sinh học kháng 1 số dòng tế bào ung thư trên người của loài Thiên lý hương - Ý nghĩa thực tiễn: Các kết quả thu được cung cấp các cơ sở khoa học quan trọng cho các nghiên cứu tiếp theo về loài Thiên lý hương ở Việt Nam Ngoài ra, đề tài là tài liệu tham khảo cho các sinh viên, học viên cao học chuyên ngành Sinh học 2