Nghiên cứu mối liên quan giữa cccdna tế bào gan với hbv dna, hbv rna huyết tương ở bệnh nhân viêm gan b mạn tính và xơ gan do hbv

Nghiên cứu mối liên quan giữa cccdna tế bào gan với hbv dna, hbv rna huyết tương ở bệnh nhân viêm gan b mạn tính và xơ gan do hbv Nghiên cứu mối liên quan giữa cccdna tế bào gan với hbv dna, hbv rna huyết tương ở bệnh nhân viêm gan b mạn tính và xơ gan do hbv Nghiên cứu mối liên quan giữa cccdna tế bào gan với hbv dna, hbv rna huyết tương ở bệnh nhân viêm gan b mạn tính và xơ gan do hbv

BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO BỘ QUỐC PHÒNG HỌC VIỆN QUÂN Y ĐỖ THỊ LỆ QUYÊN NGHIÊN CỨU MỐI LIÊN QUAN GIỮA cccDNA TẾ BÀO GAN VỚI HBV DNA, HBV RNA HUYẾT TƯƠNG Ở BỆNH NHÂN VIÊM GAN B MẠN TÍNH VÀ XƠ GAN DO HBV LUẬN ÁN TIẾN SĨ Y HỌC HÀ NỘI – 2024 BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO BỘ QUỐC PHÒNG HỌC VIỆN QUÂN Y CHỦ NHIỆM BỘ MÔN TS LÊ VĂN NAM ĐỖ THỊ LỆ QUYÊN NGHIÊN CỨU MỐI LIÊN QUAN GIỮA cccDNA TẾ BÀO GAN VỚI HBV DNA, HBV RNA HUYẾT TƯƠNG Ở BỆNH NHÂN VIÊM GAN B MẠN TÍNH VÀ XƠ GAN DO HBV Ngành: Truyền nhiễm Bệnh nhiệt đới Mã số: 9720109 LUẬN ÁN TIẾN SĨ Y HỌC THẦY HƯỚNG DẪN THẦY HƯỚNG DẪN PGS.TS HOÀNG TIẾN TUYÊN TS HỒ HỮU THỌ Hướng dẫn khoa học: PGS.TS Hoàng Tiến Tuyên TS Hồ Hữu Thọ HÀ NỘI – 2024 LỜI CAM ĐOAN Tơi xin cam đoan cơng trình nghiên cứu với hướng dẫn khoa học tập thể cán hướng dẫn Các kết nêu luận án trung thực công bố phần báo khoa học Luận án chưa cơng bố Nếu có điều sai tơi xin hồn tồn chịu trách nhiệm Tác giả Đỗ Thị Lệ Quyên MỤC LỤC Lời cam đoan Lời cảm ơn Mục lục Danh mục chữ viết tắt Danh mục bảng Danh mục biểu đồ Danh mục hình ĐẶT VẤN ĐỀ Chương 1: TỔNG QUAN TÀI LIỆU 1.1 Tình hình nhiễm HBV Thế giới Việt Nam 1.1.1 Tình hình nhiễm HBV Thế giới 1.1.2 Tình hình nhiễm HBV Việt Nam 1.2 Cơ chế bệnh sinh diễn biến nhiễm HBV mạn 1.2.1 Cơ chế bệnh sinh bệnh HBV gây 1.2.2 Tiến trình tự nhiên nhiễm HBV mạn tính 1.3 Viêm gan virus B mạn tính xơ gan HBV 10 1.3.1 Viêm gan virus B mạn tính 10 1.3.2 Xơ gan HBV 12 1.4 Một số dấu ấn HBV 13 1.4.1 HBV DNA 13 1.4.2 HBV pgRNA – HBV RNA 15 1.4.3 cccDNA 16 1.5 Các phương pháp định lượng HBV RNA cccDNA 21 1.5.1 Một số phương pháp định lượng HBV RNA máu ngoại vi bệnh nhân VGBMT 21 1.5.2 Một số phương pháp định lượng cccDNA tế bào gan 22 1.6 Vai trò sinh thiết gan hình ảnh mơ bệnh học viêm gan virus 30 1.7 Các nghiên cứu cccDNA HBV DNA, HBV RNA bệnh nhân nhiễm HBV mạn Thế giới Việt Nam 31 1.7.1 Các nghiên cứu Thế giới 31 1.7.2 Các nghiên cứu Việt Nam 35 Chương 2: ĐỐI TƯỢNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 37 2.1 Đối tượng nghiên cứu 37 2.1.1 Tiêu chuẩn lựa chọn 37 2.1.2 Tiêu chuẩn loại trừ .37 2.2 Phương pháp nghiên cứu 38 2.2.1 Thiết kế nghiên cứu .38 2.2.2 Thời gian địa điểm nghiên cứu 38 2.2.3 Cỡ mẫu phương pháp chọn mẫu 38 2.3 Các tiêu nội dung nghiên cứu 39 2.3.1 Các tiêu nghiên cứu .39 2.3.2 Các nội dung nghiên cứu 40 2.3.3 Phương pháp thu thập số liệu 41 2.4 Kỹ thuật phương tiện nghiên cứu 41 2.4.1 Quy trình thu thập bảo quản mẫu 41 2.4.2 Phương pháp thực tiêu xét nghiệm 42 2.4.3 Phương pháp thực tiêu xét nghiệm sinh học phân tử 44 2.4.3 Phương pháp phân tích xử lý số liệu 60 2.5 Vấn đề đạo đức nghiên cứu 61 Chương 3: KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU 63 3.1 Đặc điểm chung đối tượng nghiên cứu 63 3.1.1 Tuổi giới bệnh nhân nghiên cứu 63 3.1.2 Một số triệu chứng lâm sàng, cận lâm sàng hai nhóm bệnh nhân64 3.2 Nồng độ cccDNA tế bào gan, tải lượng HBV DNA, nồng độ HBV RNA huyết tương bệnh nhân nghiên cứu 68 3.2.1 Nồng độ cccDNA tế bào gan nhóm bệnh nhân nghiên cứu 68 3.2.2 Nồng độ HBV RNA huyết tương hai nhóm bệnh nhân nghiên cứu 72 3.2.3 Tải lượng HBV DNA hai nhóm bệnh nhân nghiên cứu .76 3.3 Mối liên quan nồng độ cccDNA với HBV DNA HBV RNA hai nhóm bệnh nhân nghiên cứu 81 3.3.1 Mối liên quan nồng độ cccDNA với tải lượng HBV DNA nhóm bệnh nhân 81 3.3.2 Mối liên quan nồng độ cccDNA tế bào gan với HBV RNA huyết tương hai nhóm bệnh nhân 84 Chương 4: BÀN LUẬN 90 4.1 Đặc điểm chung bệnh nhân nghiên cứu 90 4.1.1 Đặc điểm tuổi giới tính 90 4.1.2 Một số biểu lâm sàng, cận lâm sàng hai nhóm bệnh nhân nghiên cứu .91 4.2 cccDNA tế bào gan, HBV RNA, HBV DNA huyết tương bệnh nhân nghiên cứu 96 4.2.1 Nồng độ cccDNA bệnh nhân nghiên cứu 96 4.2.2 Nồng độ HBV RNA bệnh nhân nghiên cứu 99 4.2.3 Tải lượng HBV DNA bệnh nhân nghiên cứu .104 4.3 Mối liên quan cccDNA với HBV DNA HBV RNA hai nhóm bệnh nhân nghiên cứu 108 4.3.1 Mối liên quan cccDNA tế bào với HBV DNA huyết tương.108 4.3.2 Mối liên quan cccDNA tế bào gan với HBV RNA huyết tương 110 4.3.3 Mối tương quan nồng độ HBV RNA với tải lượng HBV DNA huyết tương 113 KẾT LUẬN 119 HẠN CHẾ CỦA ĐỀ TÀI 121 KIẾN NGHỊ 122 DANH MỤC CÁC CƠNG TRÌNH NGHIÊN CỨU CỦA TÁC GIẢ ĐÃ CÔNG BỐ LIÊN QUAN ĐẾN LUẬN ÁN TÀI LIỆU THAM KHẢO PHỤ LỤC DANH MỤC CÁC CHỮ VIẾT TẮT TT Phần viết tắt Phần viết đầy đủ ALT Alanine aminotransferase AFP Alpha-fetoprotein AST Aspartate aminotransferase VGBMT Viêm gan virus B mạn tính cccDNA Covalently closed circular Deoxyribonucleic acid Cs Cộng DNA Deoxyribonucleic acid Dsl DNA double-stranded linear DNA: Sợi đơi DNA tuyến tính ddPCR droplet digital Polymerase Chain Reaction 10 EASL European Asscociation for the Study of the Liver Hiệp hội Gan mật Châu Âu 11 FFPE Formalin-Fixed Paraffin-Embedded: parafin cố định formalin 12 GAPDH Glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase 13 HAI Histology Activity Index: số hoạt động mô bệnh học 14 HBV Hepatitis B Virus: Virus viêm gan B 15 HBcAb Hepatitis B core antibody: kháng thể kháng kháng nguyên lõi virus viêm gan B 16 HBeAb Hepatitis B e antibody kháng thể kháng kháng nguyên e virus viêm gan B 17 HBeAg Hepatitis B e antigen kháng nguyên e virus viêm gan B 18 HBsAb Hepatitis B surface antibody: kháng thể kháng kháng nguyên bề mặt virus viêm gan B TT Phần viết tắt Phần viết đầy đủ 19 HBsAg Hepatitis B surface antigen kháng nguyên bề mặt virus viêm gan B 20 HBcrAg Hepatitis B core related Antigen 21 HCC Hepatocellular Carcinoma Ung thư biểu mô tế bào gan 22 IC Internal control: kiểm soát nội 23 Kb Kilobase 24 LHBs Large Hepatitis B Surface Protein Protein lớn bề mặt virus viêm gan B 25 MHBs Middle Hepatitis B Surface Protein Protein trung bình bề mặt virus viêm gan B 26 NA Nucleot(s)ide Analogue 27 NTCP Na+/ taurocholate co-transporting polypeptide: Polypeptide đồng vận chuyển taurocholate phụ thuộc 28 NK Na + 29 NKT Natural killer cells: tế bào diệt tự nhiên 30 mRNA Natural killer T cells: tế bào T diệt tự nhiên 31 RCA Messenger RNA: RNA thông tin 32 rcDNA Rolling Circle Amplification 33 RNA Relaxed circular DNA 34 RT Ribonucleic acid 35 SHBs Reverse Transcriptase: enzym mã ngược Small Hepatitis B Surface Protein 36 ssDNA Protein nhỏ bề mặt virus viêm gan B single-stranded DNA: DNA chuỗi đơn 37 PCR Polymerase Chain Reaction TT Phần viết tắt Phần viết đầy đủ 38 qPCR Quantitative PCR 39 qHBsAg Quantitative Hepatitis B surface antigen 40 Pg RNA Pregenomic Ribonucleic: RNA tiền gen 41 POL Polymerase 42 PSAD Plasmid Safe ATP-dependent DNAase DNAase phụ thuộc ATP an toàn Plasmid 43 RACE A rapid amplification of complimentary DNA (cDNA)-ends: Kỹ thuật khuếch đại nhanh phản ứng 44 tDNA chuỗi polymerase thời gian thực (PCR) dựa DNA circle DNA tự Total Deoxyribonucleic acid: DNA toàn