1. Trang chủ
  2. » Luận Văn - Báo Cáo

Luận Án Tiến Sĩ Y Học Nghiên Cứu Đặc Điểm Lâm Sàng, Cận Lâm Sàng Và Kiểu Gen Của Chlamydia Trachomatis Ở Phụ Nữ Vô Sinh Tại Bệnh Viện Phụ Sản Trung Ương (2020-2021.Pdf

189 4 0

Đang tải... (xem toàn văn)

Tài liệu hạn chế xem trước, để xem đầy đủ mời bạn chọn Tải xuống

THÔNG TIN TÀI LIỆU

Thông tin cơ bản

Định dạng
Số trang 189
Dung lượng 4,66 MB

Cấu trúc

  • Chương 1. TỔNG QUAN TÀI LIỆU (16)
    • 1.1. Đặc điểm sinh học của Chlamydia trachomatis (0)
      • 1.1.1. Đặc điểm hình thái và vòng đời (0)
      • 1.1.2. Đặc điểm hóa sinh và sức đề kháng (0)
      • 1.1.3. Cấu trúc kháng nguyên của Chlamydia (20)
    • 1.2. Nhiễm trùng sinh dục tiết niệu do C. trachomatis (21)
      • 1.2.1. Các loại nhiễm trùng sinh dục tiết niệu do C. trachomatis (21)
      • 1.2.2. Tình hình nhiễm C. trachomatis đường sinh dục – tiết niệu và các yếu tố liên quan (24)
      • 1.2.3. Chẩn đoán xác định và chẩn đoán phân biệt nhiễm C. trachomatis đường sinh dục – tiết niệu (30)
    • 1.3. Các kỹ thuật phát hiện nhiễm C. trachomatis (32)
      • 1.3.1. Các kỹ thuật chẩn đoán vi sinh vật học (32)
      • 1.3.2. Chẩn đoán miễn dịch học (33)
      • 1.3.3. Chẩn đoán bằng sinh học phân tử (35)
    • 1.4. Các kiểu gen của C. trachomatis (37)
    • 1.5. Vô sinh và mối liên quan với nhiễm C. trachomatis (0)
      • 1.5.1. Một số vấn đề chung về vô sinh (0)
      • 1.5.2. Tình hình mắc vô sinh (42)
      • 1.5.3. Liên quan giữa nhiễm C. trachomatis và vô sinh (44)
  • Chương 2. ĐỐI TƯỢNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU (47)
    • 2.1. Đối tượng, thời gian, địa điểm và phương pháp nghiên cứu mục tiêu 1: Mô tả một số đặc điểm lâm sàng, cận lâm sàng và một số yếu tố liên quan tới tình trạng nhiễm C. trachomatis ở phụ nữ vô sinh đến khám, điều trị tại Bệnh viện Phụ sản Trung ương (2020-2021) (0)
      • 2.1.1. Đối tượng nghiên cứu (47)
      • 2.1.2. Địa điểm nghiên cứu (47)
      • 2.1.3. Thời gian nghiên cứu (48)
      • 2.1.4. Thiết kế và cỡ mẫu nghiên cứu (48)
      • 2.1.5. Nội dung nghiên cứu (49)
      • 2.1.6. Các biến số trong nghiên cứu (50)
      • 2.1.7. Các kỹ thuật sử dụng trong nghiên cứu (56)
      • 2.1.8. Các chỉ số nghiên cứu (62)
    • 2.2. Đối tượng, thời gian, địa điểm và phương pháp nghiên cứu mục tiêu 2: Xác định kiểu gen của C. trachomatis phân lập được từ đối tượng nghiên cứu (0)
      • 2.2.1. Đối tượng nghiên cứu (63)
      • 2.2.2. Địa điểm nghiên cứu (63)
      • 2.2.3. Thời gian thực hiện (63)
      • 2.2.4. Thiết kế và cỡ mẫu nghiên cứu (64)
      • 2.2.5. Nội dung nghiên cứu (64)
      • 2.2.6. Các biến số trong nghiên cứu (65)
      • 2.2.7. Các kỹ thuật sử dụng trong nghiên cứu (66)
      • 2.2.8. Các chỉ số nghiên cứu (71)
    • 2.3. Nhập số liệu, phân tích và xử lý số liệu thống kê (0)
    • 2.5. Đạo đức trong nghiên cứu (73)
  • Chương 3. KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU (75)
    • 3.1. Đặc điểm lâm sàng, cận lâm sàng và một số yếu tố liên quan tới tình trạng nhiễm C. trachomatis ở phụ nữ vô sinh đến khám, điều trị tại Bệnh viện Phụ sản (0)
      • 3.1.1. Đặc điểm chung của 761 phụ nữ vô sinh được sàng lọc nhiễm (0)
      • 3.1.2. Đặc điểm lâm sàng, cận lâm sàng và một số yếu tố liên quan nhiễm C. trachomatis đường sinh dục phụ nữ vô sinh đến khám, điều trị tại Bệnh viện Phụ sản Trung ương .......................................................................... 66 3.1.3. Đặc điểm cận lâm sàng của phụ nữ vô sinh nhiễm C. trachomatis 73 (0)
    • 3.2. Kiểu gen của C. trachomatis phân lập được ở đối tượng nghiên cứu (0)
      • 3.2.1. Kết quả xác định các kiểu gen và phân tích đa hình gen ompA (0)
      • 3.3.2. Mối liên quan giữa các kiểu gen và một số đặc điểm của đối tượng nghiên cứu (0)
  • Chương 4. BÀN LUẬN (109)
    • 4.1. Một số đặc điểm chung của đối tượng nghiên cứu (0)
    • 4.2. Đặc điểm lâm sàng, cận lâm sàng và một số yếu tố liên quan tới tình trạng nhiễm C. trachomatis ở phụ nữ vô sinh (0)
      • 4.2.1. Tỷ lệ nhiễm C. trachomatis ở phụ nữ vô sinh (110)
      • 4.2.2. Đặc điểm lâm sàng nhiễm C. trachomatis (114)
      • 4.2.3. Đặc điểm cận lâm sàng nhiễm C. trachomatis (122)
      • 4.2.4. Một số yếu tố liên quan nhiễm C. trachomatis ở phụ nữ vô sinh . 111 4.3. Các kiểu gen của C. trachomatis ở phụ nữ vô sinh (124)
      • 4.3.1. Các kiểu gen và đa hình gen ompA của C. trachomatis (132)
      • 4.3.2. Mối liên quan giữa kiểu gen của C. trachomatis với một số đặc điểm của đối tượng nghiên cứu (136)
  • KẾT LUẬN (141)
  • TÀI LIỆU THAM KHẢO (1)

Nội dung

ĐỐI TƯỢNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU

Đối tượng, thời gian, địa điểm và phương pháp nghiên cứu mục tiêu 2: Xác định kiểu gen của C trachomatis phân lập được từ đối tượng nghiên cứu

+ Phụ nữ vô sinh là đối tượng của mục tiêu 1 được xác định nhiễm C trachomatis

+ Vi khuẩn C trachomatis: là các chủng vi khuẩn C trachomatis phân lập được từ phụ nữ vô sinh đến khám tại Bệnh viện Phụ sản Trung ương trong thời gian từ 1/2020-12/2021

- Tiêu chuẩn lựa chọn đối tượng nghiên cứu

+ Phụ nữ vô sinh được lựa chọn trong mục tiêu 1

+ Được xác định nhiễm C trachomatis bằng xét nghiệm realtime PCR

- Tiêu chuẩn lựa chọn mẫu để xác định kiểu gen

+ Mẫu bệnh phẩm dương tính với C trachomatis bằng xét nghiệm realtime PCR

+ Kết quả khuếch đại gen ompA cho 1 band sản phẩm duy nhất rõ nét, có kích thước khoảng 1100bp

+ Trình tự thu được có chất lượng tốt: các pick của các nucleotide cao, nhọn, không chồng chéo lên nhau

- Địa điểm xác định nhiễm C trachomatis ở phụ nữ vô sinh: Bệnh viện Phụ sản Trung ương

- Địa điểm phân tích kiểu gen của C trachomatis: Học viện Quân y

- Địa điểm giải trình tự gen: Apical Scientific, Kembangan 43.300, Selangor, Malaysia

2.2.3 Thời gian thực hiện : từ 1/2020 đến 12/2022

Luận án tiến sĩ mới nhất

2.2.4 Thiết kế và cỡ mẫu nghiên cứu

2.2.4.1 Thiết kế nghiên cứu: nghiên cứu mô tả cắt ngang có phân tích các kết quả thu được từ phòng thí nghiệm

2.2.4.2 Cỡ mẫu và phương pháp chọn mẫu

- Gồm toàn bộ 119 mẫu dịch phết cổ tử cung của phụ nữ vô sinh nhiễm

C trachomatis đường sinh dục được xác định ở mục tiêu 1 Tuy nhiên, trong số 119 mẫu dịch phết cổ tử cung nhiễm C trachomatis, chỉ có 90 mẫu cho kết quả PCR vòng 2 tốt với 1 band rõ nét Trong 90 mẫu này, chỉ có 81 mẫu cho các trình tự tốt đủ điều kiện để phân tích kiểu gen

+ Phương pháp chọn mẫu, bảo quản và chuyển mẫu nghiên cứu

Sau khi xét nghiệm sàng lọc để xác định tỷ lệ nhiễm C trachomatis ở phụ nữ vô sinh (mục tiêu 1 của luận án) Toàn bộ bệnh nhân có kết quả xét nghiệm dương tính với C trachomatis được phân tích xác định kiểu gen Các mẫu bệnh phẩm dịch phết cổ tử cung chứa trong ống môi trường bảo quản Cobas® PCR Media (Roch) được lưu giữ ở nhiệt độ - 20 o C tại Bệnh viện Phụ sản Trung ương Sau đó mẫu được chuyển từng đợt tới Học viện Quân y để phân tích xác định kiểu gen

Nghiên cứu này lựa chọn kỹ thuật giải trình tự gen ompA và so sánh trình tự gen thu được để xác định kiểu gen của C trachomatis Để tăng độ nhạy của phản ứng khuếch đại gen ompA, kỹ thuật PCR bán lồng (semi- nested PCR) đã được sử dụng theo mô tả trong một nghiên cứu trước được thực hiện bởi Beni và CS (2010) [24] Những mẫu có kết quả PCR vòng 2 tốt (sản phẩm PCR có 1 band rõ nét) sẽ được gửi đi giải trình tự bằng 5 mồi như trình bày trong Bảng 2.5 Trình tự thu được từ 5 mồi được ghép nối và so sánh với ngân hàng gen để xác định các kiểu gen của C trachomatis

+ Thời gian xác định kiểu gen: Từ tháng 1/2020 đến hết tháng 12/2022

- Xác định tần suất các kiểu gen của C trachomatis phân lập từ đối tượng nghiên cứu

Luận án tiến sĩ mới nhất

- Xác định tỷ lệ tương đồng nucleotide của các kiểu gen C trachomatis phân lập từ đối tượng nghiên cứu với dữ liệu trên ngân hàng gen

- Xây dựng cả phả hệ và phân tính đặc điểm đa hình gen ompA các kiểu gen của C trachomatis

- Phân tích mối liên quan giữa kiểu gen và một số đặc điểm của đối tượng nghiên cứu

2.2.6 Các biến số trong nghiên cứu

Bảng 2.2 Các biến số trong nghiên cứu mục tiêu 2

TT Biến số Định nghĩa, cách xác định

1 Kiểu gen C trachomatis Được phân loại thành: A, B/Ba, C, D/Da, E, F, G/Ga, H, I/Ia, J, K, L1, L2, L2a, và L3 Định danh Xét nghiệm

Máy PCR, phần mền tin sinh học…

Là số nucleotide khác nhau giữa trình tự của nghiên cứu này so với trình tự tương ứng trên ngân hàng gen, được xác định bằng cách sử dụng phần mềm tin sinh học Định lượng

Thay đổi nucleotide tại một vị trí trên chuỗi nucleotide Được phân loại thành có và không có thay đổi giữa 2 chuỗi nucleotide được so sánh

Loại thay đổi axít amin Được phân loại thành đồng nghĩa và sai nghĩa Định danh

So sánh, đối chiếu với trình tự tham chiếu

Luận án tiến sĩ mới nhất

2.2.7 Các kỹ thuật sử dụng trong nghiên cứu

2.2.7.1 Kỹ thuật tách chiết và kiểm tra nồng độ ADN

- Tách chiết ADN tổng số mẫu dịch phết cổ tử cung

ADN tổng số mẫu dịch phết cổ tử cung được tách chiết từ dịch bảo quản Cobas® PCR Media bằng bộ sinh phẩm QiAamp® DNA mini kit của hãng QIAGEN (Code 51304, Đức) Quy trình được tóm tắt như sau:

+ Lấy 500 μl môi trường Cobas® PCR Media cho vào ống eppendorf, ly tâm 10.000 vòng/phút trong 10 phút rồi hút bỏ dịch nổi, giữ lại cặn

+ Thêm 180 μl dung dịch đệm ATL, 20 μl proteinase K rồi ủ ở nhiệt độ

56 o C trong máy lắc rung 10-20 phút Sau đó thêm 200 μl đệm AL vào mẫu, vortex trong 15 giây và ủ ở 70 o C trong 10 phút Sau khi ủ, ly tâm 8000 vòng/phút trong 15 giây

+ Tiếp tục thêm 200 μl ethanol (96-100%), vortex trong 15 giây rồi chuyển toàn bộ dung dịch thu được vào cột lọc QIAamp Mini (loại 2 ml) Ly tâm ở 8000vòng/phút trong 1 phút rồi loại bỏ phần dung dịch sau ly tâm

+ Thêm 500 μl đệm AW1 vào cột lọc rồi lại ly tâm 8000 vòng/phút trong 1 phút và loại bỏ phần dung dịch sau ly tâm

+ Lặp lại tương tự bước trên với 500 μl đệm AW2

+ Cuối cùng đặt cột lọc trong một ống ly tâm sạch loại 1,5 ml và thêm

100 μl đệm AE hoặc nước khử ion vào cột lọc Ủ ở nhiệt độ phòng trong thời gian 1 – 2 phút sau đó ly tâm 8000 vòng/phút trong 1 phút để thu ADN

ADN thu được được bảo quản ở -20 o C cho tới khi thực hiện các phản ứng PCR nhân gen ompA của C trachomatis

- Kiểm tra nồng độ ADN sau khi tách chiết

Dung dịch ADN thu được được kiểm ra nồng độ trên máy NanoDrop

2000 (Thermofisher, Mỹ) theo hướng dẫn của nhà sản xuất ADN thu được

Luận án tiến sĩ mới nhất

Tài liệu rẻ được kiểm tra nồng độ sau đó bảo quản ở -20 o C cho tới khi đem sử dụng làm cơ chất cho phản ứng PCR

2.2.7.2 Khuếch đại gen ompA của Chlamydia trachomatis bằng phản ứng semi-nested PCR

Trong nghiên cứu này, để tăng độ nhạy của phản ứng khuếch đại gen ompA, kỹ thuật PCR bán lồng (semi-nested PCR) đã được sử dụng theo mô tả trong một nghiên cứu trước được thực hiện bởi Beni và CS (2010) [24]

- Dụng cụ, vật tư tiêu hao

+ Đĩa Deepwell và AD plate 0,3ml;

+ Ống môi trường bảo quản Cobas® PCR Media (Roch);

+ Tube chạy PCR và realtime PCR;

+ Đầu tớp cú lọc cỏc loại 10 àl, 200 àl, 1000 àl;

+ Một số hóa chất cơ bản: NaCl 0,9%, cồn tuyệt đối

+ Sinh phẩm phát hiện C trachomatis: sử dụng bộ sinh phẩm xét nghiệm cobas® CT/NG cho hệ thống Cobas® 4800 của hãng Roche

+ Bộ sinh phẩm tách chiết ADN vi khuẩn (Qiagen, Đức);

+ Hóa chất điện di: gel agarose, dung dịch TBE 10X (Serva, Đức); + Hóa chất tinh sạch sản phẩm PCR: Thermofisher (Mỹ)

+ Hóa chất, sinh phẩm chạy PCR: Master Mix 2X (Promega, Mỹ), nước khử ion (Corning, Mỹ), mồi…;

+ Hóa chất giải trình tự

- Trang thiết bị sử dụng

+ Máy ly tâm lạnh (Eppendorf, Đức);

Luận án tiến sĩ mới nhất

+ Bộ điện di (EPS 301, Trung Quốc);

+ Máy soi và chụp gel (UVP, Canada);

+ Tủ an toàn sinh học (Nuaire, Hàn Quốc);

+ Buồng mix PCR (Biosan, Latvia);

+ Máy spin down D1008 (Trung Quốc);

+ Tủ lạnh -20 o C (Electrolax, Trung Quốc);

+ Tủ mát 2 - 10 o C (Sanaky, Việt Nam)

- Thực hiện phản ứng PCR vòng 1

Phản ứng PCR vòng 1 được thực hiện với 2 mồi CT1 (5’- GCC GCT TTG AGT TCT GCT TCC TC-3’) và CT5 (5’-ATT TAC GTG AGC AGC TCT CTC AT-3’) Thành phần phản ứng PCR vòng 1 như sau:

Bảng 2.3 Thành phần phản ứng PCR1

TT Thành phần Nồng độ ban đầu

Nồng độ trong phản ứng PCR

Hỗn dịch PCR được đưa vào máy luân nhiệt Thermo Mastercycler gradient cycler (Thermo Scientific, USA) theo chu trình nhiệt như sau

+ 10 chu kỳ, mồi chu kỳ gồm các bước:

Luận án tiến sĩ mới nhất

+ 20 chu kỳ tiếp theo, mỗi chu kỳ gồm các bước:

+ Cuối cùng: một chu kỳ 72 °C trong 10 phút

- Thực hiện phản ứng PCR vòng 2

Thành phần của phản ứng PCR vũng 2 gồm 2 àl dung dịch sản phẩm của phản ứng PCR vòng 1 được sử dụng làm khuân cho phản ứng PCR vòng

2 Phản ứng PCR vòng 2 sử dụng 2 mồi, gồm PCTM3 (forward: 5’- TCC TTG CAA GCT CTG CCT GTG GGG AAT CCT-3’) và mồi CT5 (mồi ngược: 5’-ATT TAC GTG AGC AGC TCT CTC AT-3’) cùng với các sinh phẩm khác như đã sử dụng trong phản ứng PCR vòng 1 Chu trình nhiệt của phản ứng PCR vòng 2 tương tự vòng 1

Các phản ứng PCR khuếch đại gen ompA được chạy với chứng dương là DNA của vi khuẩn C trachomatis do các đồng nghiệp của Viện truyền nhiễm Quốc gia Nhật Bản (NIID) cung cấp

- Kiểm tra sản phẩm PCR vòng 2

Sau khi kết thúc phản ứng PCR vòng 2, sản phẩm PCR vòng 2 được điện di trên gel agarose 1,2 % Các bước tiến hành như sau:

+ Chuẩn bị gel agarose 1,2 % trong dung dịch đệm TAE 1.0X (tính toán để đổ số giếng điện di cần thiết) Gen và dung dịch đệm được đun sôi ở trong lò vi sóng Sau đó pha Redsafe 20.000X (Intron, Hàn Quốc) vào, trộn đều Tiếp theo, để gel nguội xuống còn khoảng 65 – 70 o C thì thì tiến hành đổ vào khay chứa đã được lặp sẵn miếng lược nhựa

+ Để bản gel đông lại, tháo lược và đặt miếng gel vào bể điện di đã có TBE 1,0X hoặc TAE 1,0X

+ Trộn 6 – 10 àl sản phẩm PCR hoặc cắt giới hạn với 1 àl loading dye và dùng pipete trộn đều sản phẩm PCR và loading dye

Luận án tiến sĩ mới nhất

+ Đưa sản phẩm PCR hoặc cắt giới hạn đã trộn loading dye vào bản gel mỗi giếng 6 – 10 àl Sử dụng cỏc đầu cụn khỏc nhau cho mỗi giếng

+ Điện di 90 phút ở 100 volt (thời gian và điện thế có thể thay đổi) + Kết thúc điện di, lấy bản gel ra và ngâm bản gel trong dung dịch ethium bromide 10 – 15 phút

+ Chụp ảnh kết quả trên thiết bị có ánh sáng UV

+ Phân tích kết quả bằng cách so sánh sản phẩm PCR so với thang DNA chuẩn 100bp

- Đánh giá kết quả PCR

Kết quả PCR vòng 2 được đánh giá dựa vào so sánh với thang ADN chuẩn 100bp

+ Mẫu được xác định có kết quả tốt khi chỉ xuất hiện band khoảng

1100 bp như lý thuyết, không có band phụ đi kèm

+ Mẫu được xác định có kết quả chưa tốt khi không xuất hiện band như lý thuyết hoặc có nhiều band phụ kèm theo

2.2.7.3 Kỹ thuật giải trình tự gen

Gen ompA được giải trình tự bằng 5 mồi như trong bảng dưới đây:

Bảng 2.4 Thông tin các mồi sử dụng trong nghiên cứu

Tên mồi Trình tự mồi (5’-3’) Mục đích Nguồn tham khảo

CT1 GCC GCT TTG AGT TCT GCT TCC TC PCR [24]

PCTM3 TCCTTGCAAGCTCTGCCTGTGGGGAATCCT PCR và giải trình tự [24]

CT5 ATT TAC GTG AGC AGC TCT CTC AT PCR và giải trình tự [24] CT3 ACT TTG TTT TCG ACC GTG TTT TG Giải trình tự [117] CT4 GAT TGA GCG TAT TGG AAA GAA GC Giải trình tự [117]

CT789 TGC CTC TAT TGA TTA CCA TG-3 Giải trình tự Thiết kế bởi nghiên cứu này

Luận án tiến sĩ mới nhất

Sản phẩm PCR vòng 2 được gửi tới hãng Apical Scientific Sdn Bhd (Kembangan 43,300, Selangor, Malaysia) để tinh sạch và giải trình tự với 5 mồi PCTM5, CT5, CT3, CT4 và CT789 (Bảng 2.4)

Đạo đức trong nghiên cứu

- Đề cương nghiên cứu được thông qua Hội đồng Đạo đức trong nghiên cứu y sinh học tại Bệnh viện Phụ sản Trung ương theo Quyết định số 221/QĐ-PTSW ngày 05/03/2020 của Giám đốc Bệnh viện Phụ Sản Trung ương và Viện Sốt rét – Ký sinh trùng – Côn trùng Trung ương theo Quyết định số 182/QĐ-VSR ngày 24/02/2020

- Quá trình khám lâm sàng cho bệnh nhân được thực hiện trong 1 phòng kín với tối thiểu 2 nhân viên y tế

- Tất cả những người tham gia được thông báo lợi ích, mục đích của nghiên cứu và các quy trình được sử dụng trong việc thu thập dữ liệu

- Thông tin về tình trạng bệnh, thông tin cá nhân của đối tượng nghiên cứu được giữ bí mật và chỉ được sử dụng vào mục đích nghiên cứu, không dùng vào bất cứ mục đích nào khác

Luận án tiến sĩ mới nhất

- Phụ nữ vô sinh tự nguyện và đồng ý tham gia vào nghiên cứu mới thu thập thông tin và lấy mẫu bệnh phẩm xác định nhiễm C trachomatis

Hình 2.2 Sơ đồ thiết kết nghiên cứu

Luận án tiến sĩ mới nhất

KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU

Kiểu gen của C trachomatis phân lập được ở đối tượng nghiên cứu

4.1 Một số đặc điểm chung của đối tượng nghiên cứu

Trong nghiên cứu này, để mô tả đặc điểm lâm sàng, cận lâm sàng, xác định các yếu tố liên quan của phụ nữ vô sinh nhiễm C trachomatis, tổng số

761 phụ nữ bị vô sinh đến khám, điều trị tại Bệnh viện Phụ sản Trung ương đã được điều tra thu thập thông tin, lấy mẫu bệnh phẩm dịch phết cổ tử cung để xét nghiệm Kết quả, có 119 phụ nữ vô sinh nhiễm Chlamydia trachomatis, chiếm tỷ lệ 15,6% Đa số các trường hợp đến từ các tỉnh phía Bắc Điều này có thể do các tỉnh từ Quảng Bình trở vào sử dụng dịch vụ tại các Trung tâm hỗ trợ sinh sản ở Huế và Đà Nẵng nên không ra Hà Nội khám bệnh

Tuổi trung bình là 29,29 ± 5,95, trong đó nhóm trên 25 tuổi chiếm tỷ lệ cao nhất (70,96%) Kết quả này hoàn toàn phù hợp với tuổi kết hôn trung bình của đối tượng này là 23,72 ± 4,06 Độ tuổi của phụ nữ vô sinh trong nghiên cứu này thấp hơn với độ tuổi của phụ nữ vô sinh trong nghiên cứu của Nguyễn Hải Đăng và CS (2020) thực hiện trên 541 phụ nữ đến khám và điều trị vô sinh tại Trung tâm Nội tiết Sinh sản và Vô sinh - Bệnh viện Trường Đại học Y Dược Huế (29,29 ± 5,95 tuổi so với 33,2 ± 5,1 tuổi) [38] Sự khác biệt về tuổi của phụ nữ vô sinh giữa 2 nghiên cứu có thể do sự khác biệt về khu vực địa lý và đặc điểm của đối tượng nghiên cứu

Dân tộc Kinh chiếm tỷ lệ 93,96%, điều này phù hợp với thực tế vì người Kinh phân bố rộng rãi, có điều kiện kinh tế xã hội tốt hơn và sống ở khu vực dễ tiếp cận với các dịch vụ y tế hơn so với người dân tộc thiểu số Nghề kinh doanh, buôn bán và công chức, viên chức chiếm tỷ lệ cao nhất (28,65% và 28,12%)

Trình độ từ THPT trở xuống chiếm 64,78% nhưng đa phần đối tượng đã tốt nghiệp cấp 3 (54,4%) So với nghiên cứu của Nguyễn Hải Đăng và CS

Luận án tiến sĩ mới nhất

BÀN LUẬN

Đặc điểm lâm sàng, cận lâm sàng và một số yếu tố liên quan tới tình trạng nhiễm C trachomatis ở phụ nữ vô sinh

là người có điều kiện kinh tế và đây thường là đối tượng có học vấn cao Trong khi đó, khu vực phía Bắc mặt bằng kinh tế tốt hơn nên đối tượng đi khám, điều trị vô sinh sẽ bao gồm cả người có học vấn thấp và học vấn cao Tuy nhiên, đây chỉ là những nhận định ban đầu, cần có thêm những thông tin và bằng chứng để đưa ra kết luận chính xác về vấn đề này

4.2 Đặc điểm lâm sàng, cận lâm sàng và một số yếu tố liên quan tới tình trạng nhiễm C trachomatis ở phụ nữ vô sinh

4.2.1 Tỷ lệ nhiễm C trachomatis ở phụ nữ vô sinh

Nhiễm C trachomatis sinh dục là bệnh lý do vi khuẩn phổ biến nhất ở Hoa Kỳ và tần suất gặp cao nhất ở người dưới 25 tuổi [44] Tần suất nhiễm C trachomatis sinh dục thay đổi giữa các quốc gia, khu vực địa lý, quần thể nghiên cứu do phụ thuộc vào phương pháp sử dụng để phát hiện [16], [118] Trên thực tế, có nhiều phương pháp khác nhau có thể được sử dụng để phát hiện nhiễm C trachomatis ở đường sinh dục như soi tươi, nuôi cấy, các kỹ thuật miễn dịch và các kỹ thuật sinh học phân tử [76] Tuy nhiên, đối với các mầm bệnh như C trachomatis, Mycoplasmas và virus, các kỹ thuật truyền thống như soi tươi, nuôi cấy thường gặp nhiều khó khăn thì các kỹ thuật sinh học phân tử là rất quan trọng và hữu ích [76] Nhiều nghiên cứu đã chỉ ra rằng, sinh học phân tử là phương pháp có độ nhạy, độ đặc hiệu cao nhất trong sàng lọc và phát hiện nhiễm C trachomatis [44], [119] Chính vì vậy, Cục quản lý Thực phẩm và Dược phẩm Hoa Kỳ (FDA) cho phép sử dụng sinh học phân tử tại các cơ sở lâm sàng để sàng lọc nhiễm C trachomatis [44], [119] Bệnh phẩm sử dụng cho kỹ thuật sinh học phân tử trong sàng lọc phát hiện

Luận án tiến sĩ mới nhất

Tài liệu rẻ nhiễm C trachomatis đường sinh dục có thể là dịch phết âm đạo/cổ tử cung hoặc nước tiểu đầu bãi [44]

Trong nghiên cứu này, bệnh phẩm dịch phết cổ tử cung của phụ nữ bị vô sinh đến khám và điều trị tại Bệnh viện Phụ sản Trung ương được lấy bởi bác sĩ chuyên khoa Phụ sản rồi chuyển về phòng xét nghiệm trong vòng 2 giờ để làm xét nghiệm xác định nhiễm C trachomatis bằng kỹ thuật realtime

PCR Cụ thể, nhiễm C trachomatis được xác định bằng bộ sinh phẩm

Cobas® CT/NG dựa trên nguyên lý realtime PCR thực hiện tự động trên máy Cobas® 4800 của hãng Roche theo hướng dẫn của nhà sản xuất Kết quả cho thấy, trong số 761 bệnh nhân nữ vô sinh được xét nghiệm, 119 bệnh nhân có kết quả realtime PCR dương tính với C trachomatis, chiếm 15,6% Kết quả từ nghiên cứ này cho thấy, tỷ lệ nhiễm C trachomatis ở phụ nữ vô sinh khá cao so với các nghiên cứu trước đây đã công bố, cao hơn nhiều so với tỷ lệ nhiễm ở phụ nữ không triệu chứng, đang mang thai hoặc không bị vô sinh Tại Việt Nam, trên đối tượng phụ nữ bị vô sinh, chỉ có duy nhất 01 công trình nghiên cứu của Nguyễn Hải Đăng và CS (2020) thực hiện trên 541 trường hợp vô sinh nữ đến khám và điều trị vô sinh tại Trung tâm Nội tiết Sinh sản và Vô sinh Bệnh viện Trường Đại học Y Dược Huế, từ tháng 6/2017 đến 6/2020 cho thấy, tỷ lệ nhiễm C trachomatis là 5,7%, thấp hơn nhiều so với tỷ lệ nhiễm trong nghiên cứu của chúng tôi (5,7% so với 15,6%) [38] Ở các quốc gia châu Âu, tỷ lệ nhiễm C trachomatis ở phụ nữ không có triệu chứng dao động từ 2% đến 17%, phụ thuộc vào từng nghiên cứu, quần thể nghiên cứu, và quốc gia [36] Ví dụ, tại Vương Quốc Anh, tỷ lệ nhiễm ở phụ nữ dưới 25 tuổi vào khoảng 10,3% [36] Một thống kê năm 2005 tại Cộng hòa Pháp cho thấy, tỷ lệ nhiễm C trachomatis ở cộng đồng là 1,5% và ở phụ nữ 18-24 tuổi là 3% [36] Tại Cộng Hòa Liên Bang Đức, một nghiên cứu công bố năm 2022 trên đối tượng phụ nữ được điều tra tại cộng đồng cho thấy, tỷ lệ nhiễm C trachomatis ở phụ nữ nhóm tuổi 15 - 17 là 2,8% (95%CI:

Luận án tiến sĩ mới nhất

1-7,5%) và ở nhóm tuổi 18-24 tuổi là 2,3% (95%CI: 1 - 5,3%) [52] Ở phụ nữ mang thai, tỷ lệ nhiễm C trachomatis dao động từ 4,6 - 18%, thường dưới

10% [16] Ví dụ: nghiên cứu của Li và CS (2021) tại Quảng Đông - Trung Quốc cho thấy, tỷ lệ nhiễm C trachomatis là 6,7% (95% CI: 5,2 - 8,5%) [13] Tại C´ordoba, Argentina cho thấy, tỷ lệ nhiễm C trachomatis ở phụ nữ mang thai là 6,9% [120]

Trên các đối tượng phụ nữ khác, tỷ lệ nhiễm C trachomatis rất khác nhau Một số nghiên cứu trong nước có tỷ lệ nhiễm C trachomatis thấp hơn so với nghiên cứu của chúng tôi bao gồm: Nghiên cứu của Nguyễn Duy Ánh

(2022) [54] thực hiện tại Bệnh viện Phụ sản Hà Nội trên hơn 3000 phụ nữ độ tuổi sinh đẻ có biểu hiện viêm đường tiết niệu sinh dục (9,62%); Nghiên cứu của Phạm Mỹ Hoài và CS (2022) trên 150 đối tượng phụ nữ mắc bệnh phụ khoa đến khám tại Bệnh viện Trường đại học Y Dược Thái Nguyên (3,3%) [55]; Nghiên cứu của Nguyen và CS (2019) thực hiện trên 800 thai phụ tại Bệnh viện Hà Đông, Hà Nội từ tháng 6/2016 đến tháng 7/2017 (6,0%) [56]; Nghiên cứu của Nguyễn Thị Nhu và CS (2013) trên 215 phụ nữ có biểu hiện nhiễm trùng sinh dục tại Bệnh viện đa khoa Thủ Đức - Tp Hồ Chí Minh (8,38%) [57]; Nghiên cứu của Phạm Văn Đức và CS (2009) tại Bệnh viện Từ

Dũ - Tp Hồ Chí Minh trên phụ nữ hút thai 3 tháng đầu (9,1%) [58]; Nghiên cứu của tác giả Lê Thị Phương năm 2001 trên 126 phụ nữ tuổi sinh đẻ có hội chứng tiết dịch âm đạo đến khám tại Viện Da liễu (nay là Bệnh viện Da liễu Trung ương) (5,55%) [59]

Một số nghiên cứu có tỷ lệ nhiễm C trachomatis tương tự nghiên cứu của chúng tôi như: nghiên cứu của Trần Đình Vinh và CS (2020) trên 600 đối tượng phụ nữ ≥ 18 tuổi đã có quan hệ tình dục đến khám tại Bệnh viện Phụ sản - Nhi Đà Nẵng (15,6%) [60]

Một số nghiên cứu có tỷ lệ nhiễm C trachomatis ở đường sinh dục nữ cao hơn so với nghiên cứu của chúng tôi như: Nghiên cứu của Lê Hồng Cẩm

Luận án tiến sĩ mới nhất

Tài liệu rẻ và CS (2001) trên 415 phụ nữ tuổi sinh đẻ tại huyện Hóc Môn Tp Hồ Chí Minh (18,07%) [61]; Nghiên cứu của Hồ Thị Mỹ Châu và CS (2018) trên đối tượng phụ nữ có hội chứng tiết dịch âm đạo đến khám tại Bệnh viện Da liễu

Tp Hồ Chí Minh năm 2016-2017 tỷ lệ nhiễm lên tới 26% [62]; Nghiên cứu của Nguyễn Duy Ánh (2021) tiến hành trên 1176 phụ nữ có gia đình trong độ tuổi từ 18 đến 49 trong cộng đồng tại 2 quận Cầu Giấy và huyện Đông Anh,

Hà Nội có tỷ lệ nhiễm là 22,11% [63]

So với một số nghiên cứu trên thế giới, tỷ lệ nhiễm C trachomatis đường sinh dục nữ trong nghiên cứu này tương tự tỷ lệ nhiễm tại Ấn Độ (15,7%) [32] và Ả Rập Xê Út (15,0%) [121] Một số nơi, tỷ lệ nhiễm C trachomatis thấp hơn so với nghiên cứu này là Trung Quốc (5,9%) [13], Thổ

Nhĩ Kỳ (2,15%) [122], Rwanda (3,3%) [123], Jordan (3,9%) [84], Argentina (5,3%) [124], và Malaysia (7,3%) [125] Tuy nhiên, cũng có một số quốc gia tỷ lệ nhiễm C trachomatis cao hơn nghiên cứu của chúng tôi như là Palestine (20,2%) [72], Nigeria (28,0%) [126], Hà Lan (29,5%) [37], Iran (32,0%)

[127], và Tanzania (36,21%) [128] Một số nghiên cứu khác ở Ấn Độ cũng cho thấy tỷ lệ nhiễm C trachomatis cao hơn so với nghiên cứu này [82] Tỷ lệ nhiễm C trachomatis ở phụ nữ vô sinh đến khám và điều trị tại Bệnh viện

Phụ sản Trung ương khá cao nhưng nằm trong giới hạn đã được thông báo Phân tích trên một lần nữa cho thấy, tỷ lệ nhiễm C trachomatis thay đổi giữa các quốc gia, vùng lãnh thổ và thay đổi giữa các khu vực, giữa các quần thể khác nhau trong cùng một quốc gia

Ngày đăng: 22/02/2024, 15:10

TỪ KHÓA LIÊN QUAN

TÀI LIỆU CÙNG NGƯỜI DÙNG

TÀI LIỆU LIÊN QUAN

w