Trang 1 BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠOTRƯỜNG ĐẠI HỌC BÁCH KHOA HÀ NỘI---***--- NGUYỄN THỊ THUNGHIÊN CỨU SỬ DỤNG BÃ DONG RIỀNG ĐỂ LÀM THỨC ĂN CHĂN NUÔILUẬN VĂN THẠC SĨ KHOA HỌCCHUYÊN NGÀNH: CÔNG
BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO TRƯỜNG ĐẠI HỌC BÁCH KHOA HÀ NỘI *** - NGUYỄN THỊ THU NGHIÊN CỨU SỬ DỤNG BÃ DONG RIỀNG ĐỂ LÀM THỨC ĂN CHĂN NUÔI LUẬN VĂN THẠC SĨ KHOA HỌC CHUYÊN NGÀNH: CÔNG NGHỆ SINH HỌC HÀ NỘI - 2017 1708329994750cc8a02c1-ee81-43a9-8da5-91a1e9f69b5c 1708329994750fb89b2ee-83f3-4064-9787-6b6abf07c6bb 1708329994750b0eeb418-342c-48c4-8e4b-5e2714044aa1 BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO TRƯỜNG ĐẠI HỌC BÁCH KHOA HÀ NỘI *** - NGUYỄN THỊ THU NGHIÊN CỨU SỬ DỤNG BÃ DONG RIỀNG ĐỂ LÀM THỨC ĂN CHĂN NUÔI PGS TS - 2017 LỜI CẢM ƠN Để hoàn thành luận văn này, cố gắng nỗ lực thân, nhận ủng hộ, giúp đỡ hướng dẫn tận tình thầy giáo, gia đình bạn bè Trước hết, tơi xin bày tỏ lòng biết ơn sâu sắc tới PGS.TS Trần Liên Hà – Bộ môn Vi sinh - Hóa sinh - Sinh học phân tử - Viện Cơng nghệ sinh học Công nghệ thực phẩm - Trường Đại học Bách Khoa Hà Nội, tận tình định hướng, hướng dẫn, truyền cho niềm đam mê nghiên cứu suốt thời gian thực đề tài Tôi xin chân thành cảm ơn thầy cô giáo, anh chị, bạn học viên, sinh viên phòng thí nghiệm vi sinh - hóa sinh - sinh học phân tử nhiệt tình giúp đỡ, tạo điều kiện thuận lợi cho tơi q trình học tập thực luận văn Cuối xin gửi lời cảm ơn chân thành tới gia đình, bạn bè người thân động viên, khuyến khích giúp tơi vượt qua khó khăn suốt q trình nghiên cứu Xin chân thành cảm ơn! Hà Nôi, ngày 28 tháng 03 năm 2017 Nguyễn Thị Thu Tôi xin cam đoan: Kết luận văn kết nghiên cứu nhóm nghiên cứu chúng tơi thực hướng dẫn khoa học PGS.TS Trần Liên Hà trường Đại học Bách khoa Hà Nội, giúp đỡ tập thể cán nghiên cứu, nghiên cứu sinh, học viên, sinh viên học tập làm việc phịng thí nghiệm Vi sinh – Hóa sinh Sinh học Phân tử, Viện Cơng nghệ Sinh học Công nghệ Thực phẩm, trường Đại học Bách khoa Hà Nội Nội dung luận văn có tham khảo sử dụng tài liệu, thông tin đăng tải tác phẩm, tạp chí trang web theo danh mục tài liệu kham khảo luận văn Tơi xin chịu hồn tồn trách nhiệm với cam đoan Hà Nội, ngày 28 tháng 03 năm 2017 Nguyễn Thị Thu Luận văn thạc sĩ khoa học LI C Công nghệ sinh học MỤC LỤC DANH MC CÁC CH VIT TT DANH MC CÁC BNG DANH MC CÁC HÌNH M U PHN I TNG QUAN Tình hình sn xut bt dong ring min dong 2.Thc trng ti làng ngh sn xut min dong 3.Kh dng bã thi dong ring 10 3.1 Thành phn bã thi 10 3.2 Nhng nghiên cu tái s dng bã thi dong ring 10 Enzyme cellulase vi sinh vt sinh tng hp cellulase 15 4.1 Enzyme cellulase .15 4.2 Vi sinh vt sinh tng hp cellulase 18 Vi khun lactic 19 5.1 Gii thiu v vi khun lactic .19 5.2 m ca vi khun lactic 19 5.3 Các yu t n s ng phát trin ca vi khun lactic 21 5.3.1 Ngung carbon .22 5.3.2 Ngu 22 5.3.3 Ngung vitamin 22 5.3.4 Các hp cht khoáng .23 5.3.5 Các hp cht h 23 5.4 Các yu t ngoi cnh n s ng phát trin ca vi khun lactic 23 5.4.1 nh ng ca nhi .23 5.4.2 ng ca pH .24 5.4.3 ng ca n ng .24 Nguyễn Thị Thu Luận văn thạc sĩ khoa học Công nghệ sinh học 5.4.4 ng ca t l cp ging 24 5.4.5 ng ca n oxy 25 Vai trò ca vi khun lactic th .25 PHN II: VT LIU 27 Vt liu, hóa cht thit b s dng 27 ng nghiên cu .27 1.2 Dng c hóa cht 27 ng 27 u 28 p chng vi sinh vt 28 n chn 28 n chn chng sinh axit latic cao .28 áp tuyn chn chng sinh enzyme cellulase cao 30 n chng sinh bacteriocin cao .30 c tính sinh lý sinh hóa ca chc chn .31 m hình thái khun lc t bào ca chc chn .31 c tính sinh lý ca chc chn 31 nh tên vi sinh vt bc phân t 31 2.4.1 Tách chit DNA tng s .31 2.4.2 Phn n gen 16S rRNA .32 n di gel agarose 33 2.4.4 Gii trình t so sánh vi ngân hàng gen 33 Khu kin nuôi cy n s ng phát trin ca chng 34 3.1 ng ca nhi 34 3.2 ng ca pH 34 3.3 ng ca n ng 34 3.4 ng ca t l cp ging 34 ng hng 35 ng dng vi khun th 35 PHN III KT QU VÀ THO LUN 36 Nguyễn Thị Thu Luận văn thạc sĩ khoa học Công nghệ sinh học Phân lp chng vi khun có kh lên men to axit lactic 36 Tuyn chn chng vi khun lên men to axit lactic cao nht .38 nh tính axit lactic 38 2.2 Tuyn chn by chm 38 Tuyn chn bc l thch 39 2.4 Tuyn chn b NaOH 0,05N 40 Tuyn chn chng sinh enzyme cellulase cao nht 41 3.1 Tuyn chn by chm 41 3.2 Tuyn chn bc l thch 42 Tuyn chn chng da vào kh n sinh bacteriocin 43 nh tên vi khun 46 m sinh lý, sinh hóa 46 5.2 nh tên bc phân t 47 5.2.1 Kt qu n gen 16S rRNA 47 5.2.2 Kt qu gii trình t DNA so sánh vi ngân hàng gen .47 Kho sát ng mt s u kin nuôi cn kh ng phát trin ca chng G5 49 6.1 ng ca nhi 49 6.2 ng ca pH 50 6.3 ng ca n ng 51 6.4 ng ca t l cp ging 52 6.5 ng ca t lc 53 ng hng 54 ng dng vi khun th 55 8.1 Kt qu bã dong không trùng .55 8.2 Kt qu bã dong trùng 58 PHN IV KT LUN VÀ KIN NGH 61 4.1 Kt lun 61 4.2 KIN NGH .62 TÀI LIU THAM KHO .63 PH LC .68 Nguyễn Thị Thu Luận văn thạc sĩ khoa học DANH MỤC CÁC CHỮ VIẾT TẮT BKTT Bã không trùng BTT Bã trùng BOD Biochemical Oxygen Demand CMC Cacboxyl methyl cellulose COD Chemical Oxygen Demand DNA Deoxyribonucleic Acid DNS 3,5-dinitrosalicylic EDTA Axit Ethylenediaminetetraacetic PCR Polymerase Chain Reaction g/l Gam/lít Hecta h kDa Kilo Dalton MRS Man Rogosa Sharpe QCVN RNA Ribonucleic Acid SS Suspended Solids v/p Vịng/phút Nguyễn Thị Thu Cơng nghệ sinh học Luận văn thạc sĩ khoa học Công nghệ sinh học DANH MỤC CÁC BẢNG .9 10 13 14 37 .41 43 44 46 Nguyễn Thị Thu Luận văn thạc sĩ khoa học Cơng nghệ sinh học DANH MỤC CÁC HÌNH Hình 1.1 Hình 1.2 Hình 1.3 Mơ hình enzyme cellulase .16 Hình 1.4 Ba loi phn ng xúc tác bi cellulose .16 Hình 1.5 .20 38 Hình .39 39 .40 42 42 45 46 47 .48 49 Hình 3. .50 51 52 53 54 55 56 56 .58 59 Nguyễn Thị Thu