Thực hành hoá sinh 2

câu hỏi ôn tập học phần hoá sinh đại học thực hành hoá sinh 2, phần chuyển hoá, câu hỏi ôn tập về hoá sinh máu, hoá sinh thận, bài tiết các chỉ số hoá sinh, các phản ứng hoá sinh thường dùng, và các điều kiện đi kèm

Glucose tự máu dạng glucid vận chuyển thể Nguồn gốc: + nội sinh: phân ly glucose gan Thuốc thử 1000l 1000µl 1000µl Nước cất 10µl (thăng V) Dd glucose 10µl mẫu Huyết 10µl  dd sau phản ứng xuất màu hồng cánh sen + ngoại sinh: thức ăn từ vào d, Chú ý Thực hành hoá sinh Định lượng glucose máu a, Đại cương - - Các mô thể sử dụng glucose máu nguồn cung cấp lượng cho chúng - Hàm lượng glucose máu trì đimhj 3,96,4 mmol/l  Điều kiện trì định glucose máu gan hệ thống thần kinh nội tiết  Hệ thống hormon điều hồ glucose máu:  ACTH: tuyến n (kích thích vỏ thượng thận)  T3,T4: tuyến giáp T3: triodothyronon, T4: thyroxin  Adrenalin: tuyến thượng thận  Glycagon: làm tăng glucose  Glucocortisol: vỏ thượng thận  Hormon làm giảm glucose huyết insulin dảo langer b, Nguyên tắc - - Phương pháp định lượng: enzym đo quang Nguyên tắc Glucose + O2  gluconic + H2O (xúc tác: glucoseoxydase, GOD) 2H2O + amino antipyrin  Quinoreimin + 4H2O (xúc tác: peroxydase, POD) Đậm độ phức màu tỷ lệ thuận với nồng độ glucose ban đầu Đo mật độ quang bước sóng 546nm so với mẫu glucose chuẩn c, Tiến hành xét nghiệm ống trắng ống mẫu ống thử - Bệnh nhân không ăn 6-8 tiếng Sau lấy máu làm xét nghiệm luôn, chậm sau 1h lấy máu Chuẩn bị đầu col xanh, đầu col vàng, ống nghiệm, hố chất để làm thí nghiệm e, ý nghĩa lâm sàng - Glucose máu tăng (lớn 6,4 mmol/l)  Viêm tuỵ cấp mạn  Đái tháo đường: type I phụ thuộc vào insulin, type II không phụ thuộc insulin  Hôn mê glucose máu lên đến 44,5 mmol/ l ln kèm theo đường niệu dương tính  U tuyến yên  Cường tuyến thượng thận  Nhiễm độc giáp nặng  Shock chấn thương , nhồi máu tim, bỏng nặng - Glucose máu giảm (nhỏ 3,9 mmol/l)  Nhịn đói kéo dài  U thân tuỵ: u adenoma, carcinoma  Hạ đường huyết/ hôn mê hạ đường huyết: dùng liều insulin, theo dõi không chặt chẽ  Thiểu tuyến nội tiết: vỏ thượng thận, tuyến giáp, tuyến yên, tổn thương vùng đồi  Xơ gan nặng  Sốt rét  Nhiễm độc chất Asen, CCl4, chloroform Định lượng cholesterol a, Đại cương - Nguồn gốc: + nội sinh: gan - - - - + ngoại sinh: động vật, thực Hấp thu: ruột hấtp thu cholesterol este hoá cholesterol tạo thành cholesterid este hố tạo lipoprotein Vai trị: tiền chất acid mật, hormon càn thiết b, Nguyên tắc Nguyên tắc: đậm độ phức hợp màu tỷ lệ thuận với nồng độ cholesterol ban đầu, đo mật độ quang bước sóng 546nm so với mẫu chuẩn Phương pháp: định lượng CHO-PA cholesterol este hoá + H2O  Cholesterol + RCOOH (xúc tác: cholesterolesterase) cholesterol + O2  cholesterol-3on + H2O2 (xúc tác : cholesteroloxydase) 2H2O2 + amino antipyrin phenol  phức hợp màu + 4H2O (xúc tác: POD) c, Tiến hành Chuẩn bị huyết thanh, huyết tương chống đông Thuốc thử Thuốc thử - - Ống trắng 1000 µl 10µl Ống mẫu 1000 µl Ống thử 1000 µl Nước cất Dd 10µl cholesterol mẫu (5,17mmol /l) Huyết 10µl Trộn đều, ủ 10p nhiệt độ 20-25⁰C 5p 37⁰C d, ý nghĩa lâm sàng Chỉ số bình thường: 3,9-5,2mmol/l Cholesterol tham gia vào thành phần lipoprotein VLDL, LDL, HDL Khi VLDL, LDL tăng, HDL giảm có ý nghĩa dự báo nguy xơ vữa động mạch, nghẽn mạch Thay đổi sinh lý cholesterol huyết                     Tuổi sơ sinh 0,75-1,2mmol/l Giới tính nam > nữ Nữ giới: giảm giai đoạn thể vàng chu kì KN, giảm tháng đầu mang thai > sau sinh, tăng tháng cuối > mãn kinh Tăng trọng/sau ăn, dùng vitamin D, uống rượu hút thuốc, tuổi 50-60, uống thuốc ngừa thai, mang thai Ăn uống: giảm ăn chay, tăng ăn nhiều mỡ, uống rượu Yếu tố khác tâm lý, stress, động kinh Tăng cholesterol Thứ phát Bệnh lý gan: vàng da tắc mật, viêm ống mật tiến triển Các bệnh thận: thận hư nhiễm mỡ (10-20mmol/ l), viêm thận cấp Bệnh lý tuỵ: sau phẫu thuật tuỵ, viêm tuỵ cấp mạn, thiếu insulin (tiểu đường) Nhược tuyến giáp Nguyên phát: rối loạn lipid, xơ vữa động mạch, tăng huyết áp Giảm cholesterol máu Các tổn thương gan nặng Xơ gan giai đoạn cuối Hoại tử gan cấp bán cấp Nhiễm độc thuốc, hoá chất: chlorofrom, CCl4 Nhiễm trùng huyết Cường giáp trạng Suy thượng thận Các chúng thiếu máu: thiếu máu ác tính, thiếu máu tan huyết, thiếu máu nhược sắc nặng ≥2,5mmol/l rối loạn lipid máu ≥6,0mmol/l xơ vữa động mạch ≥15,0mmol/l  viêm tuỵ cấp hoại tử định lượng triglycerid a, đại cương - Nguồn gốc:  Nội sinh  Tổng hợp gan: triglycerid + apoprotein VLDLmáu  Dự trữ mô mỡ  Ngoại sinh Thức ăn qua Tb niêm mạc ruộtchylomycron (80 triglycerid)qua bạch mạchmáu - Các dạng: VLDL, LDL, HDL Vai trò: thành phần lipoprotein huyết tương b, nguyên tắc - Theo phương pháp GPO-PAP Phương trình Triglycerid + H2O  + RCOOH (xúc tác: LPL) Glycerol + ATP  glycero-3-phosphat + (xúc tác: GK) Glycero-3-P + O2  dihydroxy aceton.P + (xúc tác: GOP) 2H2O2 + amino antipyrin phenol  4-phenazol 4H2O (xúc tác:POD) glycerol             Bệnh lý gan: viêm gan VR, xơ gan rượu Tăng acid uric có biến chứng tim mạch Giảm Xơ gan Thiếu dinh dưỡng: bệnh mãn tính, suy kiệt, K dày Cường giáp Chú ý Nghi ngờ tăng triglycerid > 1,71mmol/l Tăng có giá trị chẩn đốn > 2,29mmol/l ≥2,5mmol/l  rối loạn lipid máu ≥6,0mmol/  xơ vữa động mạch ≥9,0-15,0mmol/l  viêm tuỵ cấp hoại tử định lượng protein toàn phần ADP a, Nguyên tắc 2H2O2 + (màu) - + Dựa phản ứng màu Biure: MT kiềm liên kết pepid protein tạo với ion Cu2+ thành phức hợp màu xanh tím Cường độ màu tỷ lệ thận với số liên kết peptid hay nồng độ protein b, tiến hành c, ý nghĩa lâm sàng           Chỉ số bình thường: 0,46-1,88mmol/l Ý nghĩa: Giúp chẩn đoán phân biệt thể lipid máu Chẩn đoán sớm nguy xơ vữa động mạch nhồi máu tim Theo dõi hiệu chê độ ăn thuốc giảm lipid máu Thay đổi sinh lý Tăng: trọng/sau ăn, dùng vtm D, uống rượu hút thuốc, ăn nhiều mỡ, tuổi trung niên Giảm: trẻ sơ sinh=1/2 người trưởng thành, hoạt động thể lực Thay đổi bệnh lý Tăng Bệnh lý mạch máu Xơ vữa động mạch, nhồi máu tim, thiếu máu tim Hội chứng tăng lipid máu Bệnh lý mãn tính: hội chứng thận hư, đái tháo đường Thuốc thử Nước cất Huyết Dung dịch protein mẫu ống trắng 1000µl ống thử 1000µl ống mẫu 1000µl 20µl 20µl 20µl C, ý nghĩa lâm sàng - Xét nghiệm dùng để đánh giá chức gan Giá trị bình thường: 60-80g/l Tăng protein: gặp, trường hợp máu cơ, globulin máu đơn dòng Giảm protein:  Do thiểu dưỡng: ăn khơng đủ pro, suy dinh dưỡng  Do tiêu hố hấp thụ kém: bệnh đường tiêu hoá, thiếu enzym, thiếu hệ thống vận chuyển aminoacid  Do giảm tổng hợp: xơ gan, viêm gan  Do pro: bệnh thận (hội chúng thận hư, viêm cầu thận mạn, suy thận), qua da bỏng nặng định lượng bilirubin toàn phần huyết a, nguyên tắc có caféin, bilirubin tồn phần kết hợp với acid diazo sulfanilic tạo thành azobilirunin Thêm tartrat tạo dung dịch có màu xanh  Khi tế bào gan bị tổn thương viêm gan VR, nhiễm độc - Vàng da sau gan  Bil: toàn phần tăng, tự tăng nhẹ, liên hợp tăng nhiều, nước tiểu tăng, muối mật dương tính định lượng creatin huyết a, nguyên tắc - Là dẫn xuất a.a Creatin (P) dạng dự trữ NL dạng phosphat Creatin (P) + acid piric (vàng)  picrat creatinin (cam) Phương pháp: đo quang enzym b, tiến hành b, tiến hành Huyết Thuốc thử R1 Thuốc thử R2 Thuốc thử R3 c, ý nghĩa - ống trắng 100µl Thuốc thử Nước cất Creatinin mẫu Huyết c, ý nghĩa ống thử 100µl 500µl 500µl 1000µl Xác định bệnh lý vàng da trước, hay sau gan Bilirubin toàn phần huyết từ 3-17µmol/l Bilirubin liên hợp từ 0-5µmol/l tăng hội chứng vàng da Hồng cầu vecdo Hbbiliverdinbil tự (GT, độc, khơng tan)ganBil liên hợp (ít độc tan)tá tràngphân, nước tiểu - Vàng da trước gan:  Bil: toàn phần tăng, gián tiếp tăng, liên hợp nước tiểu bình thường  Do phá huỷ nhiều hồng cầu tan máu di truyền, bệnh lách, hồng cầu liềm, tan máu mắc phải truyền nhầm nhóm máu, thuốc gây tan máu, nhiễm độc chì, vàng da trẻ sơ sinh - Vàng da gan  Bil: toàn phần tăng, tự tăng nhẹ, liên hợp tăng nhiều, nước tiểu tăng, muối mật nước tiểu âm tính - ống trắng 1000µl ống mẫu 1000µl ống thử 1000µl 50µl 50µl 50µl Đánh giá chức thận Là chất chuyển hoá nitro sp thoái giáng creatinin - Nguồn gốc: ngoại sinh thức ăn cung cấp, nội sinh từ gan thận tuỵ - Đào thải qua thận - Tăng  Suy thận nguồng gốc trước thận: suy tim bù, nước, dùng thuốc lợi tiểu/ hạ áp, hẹp động mạch thận  Suy thận nguồn gốc thận: tổn thương thận (tăng HA, ĐTĐ, lupus ban đỏ, thuốc ức chế chuyển angiotenisin, viềm cầu thận), tổn thương ống thận (viêm/ bể thận, hẹp đường niệu)  Suy thận nguồn gôc sau thận: sỏi thận, u bàng quang, u tử cung - - - Giảm: loãng máu, suy dinh dưỡng nặng, bệnh gây teo mơ, có thai định lượng ure huyết a, Nguyên tắc Ure đương thoái hố pro thể sản phẩm quan trọng chuyển hoá nitro Quá trình tổng hợp ure gan     - proa.aNH3carbamylphosphatcitrulinar gininure -  Pro có nguồn gốc từ thức ăn nội sinh dị hố pro mơ Tại gan NH3 chuyển hoá thành ure Đào thải qua đường tiêu hoá đường thận O=C-(NH2)2  2NH4+ + (CO3)2NH4+ + natri salicylat + nitroprusiat + natrihypoclorid  indophenol (xanh) Pp định lượng: enzym đo quang b, tiến hành ure color  ống trắng ống mẫu ống thử Thuốc 1000µl 1000µl 1000µl thử Ure mẫu 10µl Huyết 10µl Trộn ủ 10p Thuốc 1000µl 1000µl 1000µl thử Kết quả: Nồng độ ure huyết thanh=(A thử/ A mẫu).13,3 Ure UV - - Thuốc thử Ure mẫu Huyết C, ý nghĩa - ống trắng 1000µl ống mẫu 1000µ Định lượng acid uric huyết a, Đại cương nguyên tắc - - chất có nguồn gốc từ q trình dị hố base purin acid nu nguồn tạo thức ăn chúa purin tuqf acid nội sinh thoái biến acid nu trình tổng hợp chủ yếu gan, niêm mạc ruột cần xúc tác enzymexanthioxydase Allopurinol ức chế enzym dùng điều trị tăng acif uric máu thải trừ qua nước tiểu đường tiêu hoá acid uric + H2O +O2= allantoin + CO2 + H2O2 H2O2 + 4-aminoantipyrin + dẫn xuất benzoate = phức hợp màu + H2O b, tiến hành ống trắng Thuốc thử hh Acid uric mẫu Huyết c ý ngĩa ống thử 1000µl 10µl 10µl Chẩn đốn tình trạng suy thận, mức độ cung cấp pro chế độ ăn Chỉ số bthg: 3,3-8,3mmol/l tăng ure huyết: chế độ ăn giàu pro, tăng dị hoá pro sốt, bỏng, suy dinh dưỡng, nhịn đói xuất huyết đường tiêu hoá suy thận nguyên nhân khác: ngộ độc thuỷ ngân, nhiễm trùng nặng giảm nồng độ ure: suy gan, xơ gan, có thai, hội chúng thận hư 1000µl ống mẫu 1000µl ống thử 1000µl 20µl 20µl - chẩn đoán bệnh lý gây biến đổi nồng độ acid uric  Theo dõi điều trị bệnh gout Theo dõi điều trị hoá chất chống ung thư Giá trị bthg: Nam: 200-420µmol/l     - Nữ: 140-340µmol/l Tăng Tăng sản xuất acid uric: tiên phát (30% bệnh nhân gout thuộc loại vô căn), thức ăn chứa nhiều purin, phá huỷ tổ chức hoá trị, xạ trị, nhịn đói Giảm đào thải qua thận: suy thận, dùng thuốc lợi tiểu, tổn thương ống thận, dùng thuốc aspirin, phenylbutazon… Nguyên nhân khác: xơ vữa mạch vành, tăng HA, tăng lipid máu Giảm hoà loãng máu, dùng thuốc gây tăng thải acid uric qua nước tiểu ACTH, allopurinol, cortisol… đo hoạt độ enzym AST (GOT), ALT (GPT) huyết tương a, nguyên tắc  AST α-ceton glutarat + aspartat  glutamat + oxaloacetat (xt: AST: aspartat transaminase) Oxaloacetat + NADHH+  malat + NAD+ (xt: MDH: malat dehydrogenase)  ALT Pư làm giảm nồng độ NADH tạo thành NAD+ nên đo độ giảm độ hâop thụ quang NADH 340nm