trichloroacetic acid, sulphosalicylic acid, photphotungstic acid, picric acid, tannic acid, photphomolybdic acid acid -sulphosalicylate, protein-tungstate, protein-picrate, v.v.. acid ph
Bình tam giác (Erlen)
Bình t nhánh và có nhánh (Hình 1.4) p ine
Khi dùng ph u ng trong h
10 mL, 25 mL, 50 mL, 100 mL, 250 mL, 500 mL, 1 L, 2 L (Hình 1.8) Bình g có xác
1.3.9 ng hút nh xác và pipet chia
Hình 1.9: Pipet và micropipet Hình 1.10: Buret h n
Buret
Ng
i n ng a ch spectrophotometer) m ch y u c a m y l d ng s u lên t b chuy n th nh d n m ng c a n 1 i chuy t qu
Trong ph p , ng qua c c k thuâ x t nghiêm ng ta chuy n ch t c n x m u th h i trong su t
X C t c a 1 ch t b ng c ch l m song song v i 1 ng chu n có n C0 bi c:
C = A/Ao × Co b ng c 1 bi u m u h d ng hê s (factor = Co/Ao), A = OD
**D ng m u tr ch a c c ch t kh c th tao m u) c ng h p thu c c tia s dung Pha 1 m u tr ng (dd không hay dd blank) gi ng khi chu n bi d ng cho thu c th tao m u v o, ch kh c l không cho ch t c n x a i chi u v i m u tr ng
1.4.2 m cu i m cu i (end point method) l
OD = A; CT T hay AT factor
- l glucose, protein, albumin, cholesterol, triglyceride, HDL_c, LDL_c, Urea (so màu), Bilirubin
1.4.3 ng h c hai m a không hoàn toà g A1
CT = (AT/AM).CM e trong
AM CM và ET CT => AM/AT = CM/CT
CT = (AT/AM) × CM hay CT = (AT/AM) × CM ó: OD hay A
- Dùng cân phân tích có 4- n hóa ch
- ch khác nhau ng CN
- hân tích và tính toán khác nhau
1.5.2 Hi u ch nh n dung d ch c ixanal cân chính
H2SO4 màu phenolphtalein, dùng burette
- base CH3COOH (0,1M)/CH3 ít
1000ml dd (b): 6H5O7Na3.2H2 citrate có giá t (a)
(a) (ml) (b) (ml) pH (a) (ml) (b) (ml) pH
(a) (ml) (b) (ml) pH (a) (ml) (b) (ml) pH
51,0 49,0 6,8 5,30 94,7 8,0 m Na2HPO4 - KH2PO4 (pH 5,0-8,0)
(a): ,9g Na2HPO4.12H2O hòa tan và
(a) (ml) (b) (ml) pH (a) (ml) (b) (ml) pH
(c) -boric 0,1M: hòa tan 6,18g acid ortho-
2.2.1 Khái ni m trong sinh hóa (carbohydrate, protein/acid amin,
2.3.1 Nguyên li u t fructose (monosacaride), sucrose, lactose và maltose (disacaride)
1 t carbohydrate H2SO4 - và disacaride phóng monosacaride Các monosacaride
3 : ion cupric (Cu 2+ e thành các ion cuppy (Cu + ) t màu vàng c
4 acid Vì môi acid không t (monosacaride) t sacaride sacaride
8 Phenylhydrazine (C H NHNH trong axetic acid
4 trichloroacetic acid, sulphosalicylic acid, photphotungstic acid, picric acid, tannic acid, photphomolybdic acid acid -sulphosalicylate, protein-tungstate, protein-picrate, v.v
2.4.2 Ph n ng màu g h acid sau: amino acid
Xanthoproteic Benzene ring of aromatic
Millons amino acids (Phe, Tyr, Trp)
Hopkins-Cole Phenolic group (Tyr)
Sulfur test Sulfhydryl groups (Cys)
1 c hình urea o các h acid ng thu
Amino acid + Ninhydrin Keto acid + NH3 + CO2 + Hydrindantin Hydrindantin + NH3 + Ninhydrin
3 e hóa các acid amin acid nitric
2.5.2 Các th nghi m nh tính NPN
4 : Acid acid ni acid purpuric
2.6.2 Các th nghi m nh tính thành ph n c ti u
Hemoglobin Damage to kidneys urinary tract
Glucose Diabetes mellitus, renal glycosuria
Bile pigments Obstructive jaundice và hepatic jaundice
Enzyme glucose oxyase hydro peroxide
9 : nitric acid oxy hóa thành biliverdin
(màu xanh lá c dãy màu s và
10 t bari sulfate acid) oxy hóa bilirubin thành biliverdin (màu xanh lá cây) và bilicyanin (màu xanh) c sinh hóa
3.2.1 Khái ni m c cùng và tiên
3.3.1 ng ng trong huy t thanh
- dase-peroxidase (GOD - POD): pháp x thành acid
- van den Bergh: den Ber acid acid sóng 540nm
3.3.6 nh n n cholesterol trong huy t thanh
3.3.7 ng uric acid trong huy t thanh
- nam 4-8 mg / dl -6 mg / dl)
- e trichloroacetic acid ph molybdic acid
1-amino 2- naphthol-4 sulfonic acid 60 nm
Pyruvate transaminase trong glutamate oxaloacetate transaminase trong OT; aspartate transaminase) là hai e tham
L-Aspartic acid + -ketoglutarate L-glutamate + oxaloacetate
3.3.11 nh ng phosphatase ki m huy t thanh
3.3.13 Phân tích d ch não t y (Cerebrospinal fluid)
50-75 mg/ viêm màng não lao
4.2 TÍNH CH T KH C NG KH
4.2.1 Ph n ng Molish cid o ra furfurals 5-Hydroxy methyl
- : etanolic Alpha Naphthol trong ethanol)
Hình 4.1: etanolic Alpha naphthol cid de de saccharides h
- Các ion Cu + - Cu(OH)2
Na2CO3 4.5H2O 17,3%; thêm saccharose; uctose; mô
Cu 2+ cid monosacaride de de ng khi
Keto hexoses khi acid hydrochloric hành 5-hydroxy methyl furfural n formyl) fructose 1%
4.2.5 Ph n ng th y phân Sucrose
Natri acetate (CH3COONa) cid acetic Thêm phenyl h m oC 20 phút
Glucose, ình thành trong vòng 10-15 phút
4.3.1 Ph n ng gi a tinh b t và iodine
: Hòa tan 4g iodine 50m ó ine và pha nh b thích
Iodine Lugol (IKI hình trái) , iodine Vàng cam - âm tính Màu tím-
4.3.2 Ph n ng th y phân tinh b t thì tinh o ph
- saca lactose, maltose và sucrose
- ; Quan sát- sát; - Fructose - Glucose, galactose và ng d tín seliwanoff
Glucose Fructose Maltose Lactose Sucrose Molisch Positive Positive Positive Positive Positive Benedict Positive Positive Positive Positive Negaive Barfoed Positive Positive Negative Negative Negative Seliwanoff Negative Positive Negative Negative Positive
Lipid có tính ch n tr
Acetyl-C Acetyl-CoA tham gia vào
5.2.3 Ki tinh khi t c a ch t béo và d u
Quá trình xà phòng h acid phòn Ý : acid béo a ch cao id béo dài tiêu )
Catalase là enzyme th c hydrogenperoxide H2O2 nên có t oxy hóa H2O2
5.3.2 Kh o sát v enzyme amylase e amylose, amylopectin, dextrin ugol iodine enzyme amylase
- không có enzyme là amylase i và
1 hút i nh iodine vào và g
4 mL of pH 2 4 mL of pH 4 4 mL of pH 7 4 mL of pH 10
Amylase 1 mL 1 mL 1 mL 1 mL t n AgNO3, ethanol 95%, CaCl2 0,0002M
Canxi clorua (CaCl2 -amylase trong khi
Lipid và dung môi phân benzel, ether Trong bà
Câu 4: yme amylase là gì? h amylase là gì?
6.2 NH TÍNH PROTEIN VÀ ACID AMIN
6.2.1 S bi n tính c a protein ein x n cid trung tính và acid on và c h
Thêm 3 ml d m và dán nhãn
6.2.2 Ph n ng màu c a proteins cid amin, peptide n h acid amin
Các acid amin và dipeptide màu xanh tí màu
Ninhydrin là hóa aci 2, NH3 và aldehyde
Ninhydrin phá n acid cid hydroxyproline cho màu vàng
: cho các acid amin có
- 4 - Ghi t v c amino acid glutamic, leucine, proline
- ng Dung d ch Th tích
2-3 mL NaOH) Chú ý: phát ra
- màu vàng cam, có t theo
- amin tyrosine, prot , làm nóng các m - 4 phút
6.3 NG PROTEIN VÀ ACID AMIN
Sorensen - chu formol bi formaldehyde (formol
Hình 6.3: amine formaldehyde (formol) nh ph
- trung hò formol trung tính
- ch phân protein (acid amin) acid ( , hu )
Dung dich A: 27,8 g NaH2PO4 hoà tan trong 1000ml
,05g Na2HPO4.7H2 2HPO4.12H2O pha trong 1000ml à h A: 39 ml + dung d
- K2HPO4.3H2O trong 1000ml t phenolphthalein, trung hòa
- Bình 2: phenolphthalein 0,5% dung d thành màu tím xanh
Coom serum albumin (BSA) Sau khi c
1 Hòa tan 100mg Coomassie Brilliant Blue G-250 trong 50ml ethanol 95%, thêm 100ml 85% (w/v) acid photphoric
- Bradford vào ng nghi m 0 1 2 3 4 5 KS1 KS2 c c t (ml) 1 0.9 0.8 0.7 0.6 0.5 1 1
595nm ng tuy n tớnh gi a n protein (àg/ml) v i m quang OD595 c hà ng protein P trong m u phân tích KS ng protein trong 1g m u cõn: Protein (àg/g) = ủ
Qua viên tính protein và acid amin thông qua các nhóm NH2
7.2.2 nh tính vitamin B2 acid AgNO3
7.2.3 ng vitamin C b ng chu iodine ng ol Do KIO3
6H8O6), ion iodine (I- iodine óa acid ascorbic thành acid dehydroascorbic
- KIO3/KI 0,001N: Hòa tan 5,0 g kali iodine (KI) và 0,268 g kali iodate (KIO3) trong acid pha lo
7.3.1 Khái ni m spho trong ur trong nzyme, nucleic acid, hormone các enzyme tiêu
7.3.2 ng canxi t ng trong huy t thanh
O-Cresolphthalein (so màu) (R1) borate : 12.404 g acid boric và 1OO ml Natri hydroxit
660nm H này canxi không có canxi
-Cresolphthalein cho màu tím trong
Correct calcium (mg/dL) = total calcium (mg/dL) + 0.8(4-Albumin [g/dL]) ác
- e trichloroace xanh mo -amino 2- naphthol- 620/689 nm
Perchloric acid + Ammonium Molybdate Ammonium chloride + Molybdic acid Molybdic acid + Inorganic Phosphorus Phosphomolybdic acid
1,2,4 Amino Naphthol Sulphonic Acid + Phosphomolybdic acid màu xanh ( 620nm)
1,2,4 Amino Naphthol Sulphonic Acid (ANSA)
Dung (0.004 mg/ml) g 570 nm, Cuvette trên Acid trichloroacetic là
Perchloric acid 0,4 mL 0,4 mL 0,4 mL
Ammonium molybdate 0,4 mL 0,4 mL 0,4 mL
ANSA 0,2 mL 0,2 mL 0,2 mL n 10 ng o OD
(Chronic Nephritis) hospho máu (Hypophosphataemia):
Câu 5: canxi, phospho trong máu
- Ferric clorua trong sunfuric acid và ortho-phosphor
DAM reagent 3 mL 3 mL 3 mL
- FeCl3-CH3COOH; Conc.H2SO4
- Ferric clorua trong acid sunfuric và acid ortho- c tác
FeCl3-CH3COOH 5 mL 4.9 mL -
Conc.H2SO4 3 mL 3 mL 3 mL
8.4 NG URIC ACID TRONG MÁU
8.4.1 Khái ni m nó tro - nam 4- -6 mg/dl) trong ut
- Tungstic acid: Thêm 50ml natri tungstate 50% 50ml 2/3N cid m màu nâu
- Phosphotungstic acid: Hòa tan 50g natri tungstate t
Blank Test Standard 1 Standard 2 Standard 3
Na3CO3 (ml) 0,6 mL 0,6 mL 0,6 mL 0,6 mL 0,6 mL Phosphotungstate (ml) 0,6 mL 0,6 mL 0,6 mL 0,6 mL 0,6 mL