Báo cáo thiết bị và kĩ thuật nhóm 13

Trang 1 BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO TRƯỜNG ĐẠI HỌC NÔNG LÂM TP.HCMKHOA KHOA HỌC SINH HỌCỨNG DỤNG CHỈ THỊ SINH HỌC NHẰM XÁC ĐỊNH KIỂU GEN QUY ĐỊNH TÍNH TRẠNG MÙI THƠM Ở LÚA Trang 3 NỘI DUNG T

BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO TRƯỜNG ĐẠI HỌC NÔNG LÂM TP.HCM

KHOA KHOA HỌC SINH HỌC

ỨNG DỤNG CHỈ THỊ SINH HỌC NHẰM XÁC

ĐỊNH KIỂU GEN QUY ĐỊNH TÍNH TRẠNG MÙI

THƠM Ở LÚA

Giảng viên hướng dẫn:

TS Huỳnh Văn Biết

THÀNH VIÊN NHÓM 4:

HỒ VĂN TIẾN 21126535

LÊ HỮU TÌNH 21126537

ĐẶNG NHẬT BẰNG 20126188

NỘI DUNG TRÌNH BÀY

1 ĐẶT VẤN ĐỀ

2 PHƯƠNG PHÁP QUY TRÌNH NGHIÊN CỨU

3 KẾT QUẢ

4 KẾT LUẬN

1 ĐẶT VẤN ĐỀ

a) Quá trình chọn lọc giống lúa bằng truyền thống còn gặp nhiều khó khăn

+ Mất rất nhiều thời gian, công sức cho một vụ mùa

+Tác động mạnh của môi trường khó kiểm soát

+Tốn kém tài nguyên, chi phí khi trồng trọt

+Các yếu tố chọn lọc của cây trồng còn hạn chế

Thực phẩm chính của người dân Việt Nam

Nền nông nghiệp lúa nước lâu đời

Ảnh hưởng đến nhu cầu lương thực thực phẩm, nhu cầu tăng năng suất và chất lượng cây lúa → Nhu

cầu chọn giống ngày càng tăng b) Nhu cầu thực phẩm tăng cao

1 ĐẶT VẤN ĐỀ

c) Đối tượng nghiên cứu

- Các dòng lúa Jasmine:

giống đối chứng thơm

- VND95-20: giống đối

chứng không thơm

-gen BADH2 quy định tính

trạng mùi thơm

Hình 1 Các dòng lúa Jasmine

2 PHƯƠNG PHÁP VÀ QUY TRÌNH NGHIÊN CỨU

a) Sử dụng chỉ thị sinh học

-Đoạn gen ức chế biểu hiện

gen BADH2

-Chỉ thị sinh học SNP (chỉ thị

đa hình nucleotide đơn)

Hình 5.a Đoạn DNA có cấu trúc ức chế biểu hiện

Thu mẫu Thực hiện PCR Điện di Phân tích kết quả

b) Quy trình thực hiện nghiên cứu

Bước 1:

-Thu mẫu

Hạt được cho nảy mầm, sau 7-10 ngày lá lúa non được ly trích DNA theo quy trình CTAB.

-Quy trình ly trích theo CTAB cải tiến

Bước 2: Phản ứng PCR

Bảng 1 Trình tự các đoạn mồi được sử dụng để PCR gen BADH2

Bước 3: Điện di

Sản phẩm PCR sau khi khuếch đại được phân tích bằng điện di trên gel 1,5% agarose trong dung dịch đệm TBE 1X và chụp bằng

máy chụp hình gel Biorad UV 2000 Thang chuẩn 100bp của công ty Fermentas đã được sử dụng để ước lượng kích thước đoạn sản phẩm PCR.

3 KẾT QUẢ

a) Đánh giá bằng phương pháp chỉ thị phân tử

Hình 6 Kết quả sau khi điện di

-Cặp mồi ESP-EAP sẽ khuếch đại một đoạn DNA khoảng 580bp cho cả hai giống thơm

và không thơm.

-Cặp ESP-IFAP nhận diện gen thơm nếu sản phẩm PCR có đoạn DNA dài 257bp.

-Cặp INSP-EAP nhận diện dòng không thơm nếu PCR ra đoạn DNA dài 355bp.

Nếu có cả hai đoạn DNA 257bp và 355bp thì đó là gen thơm dị hợp.

Đánh giá bằng phương pháp cảm quan: so sánh mức độ mùi thơm

Nghiên cứu này đã cho thấy rằng mối tương quan giữa

việc sử dụng các chỉ thị phân tử với các phương pháp

đánh giá truyền thống về mùi thơm là rất cao

Vì vậy, các chỉ thị phân tử chức năng này có thể được sử

dụng trong các phân tích chẩn đoán để dự đoán tính trạng

mùi thơm là đồng hợp hay dị hợp cao hay thấp

4.Kết luận

THANKS FOR

LISTENING