Đó là quá trình kếthợp giao tử đực và giao tử cái của cùng một câyBước 1: Quan sát, thu nhập nguồn vật liệu di truyền: Bước 2: Tạo biến dị di truyền bằng các phương pháp:- Lai- Đột biến,
Câu 2: Phân tích quy trình tạo giống tự thụ? Tự thụ phấn hay tự phối việc chuyển phấn hoa từ nhị đực đến nhuỵ hoa, hay đến nhuỵ hoa Đó q trình kết hợp giao tử đực giao tử Bước 1: Quan sát, thu nhập nguồn vật liệu di truyền: Bước 2: Tạo biến dị di truyền phương pháp: - Lai - Đột biến, đa bội - Chuyển gen - Công nghệ tế bào a) Quần thể lai: Các dạng tạo phương pháp lai Từ quần thể phương pháp chọn lọc thích hợp nguời ta phân lập dạng để tạo thành giống Bước 3: chọn lọc - Chọn lọc dòng - Chọn lọc hạt đời sau - Chọn lọc theo phương pháp Marker phân tử Bước 4: Đánh giá Bước 5: Khảo nghiệm Bước 6: Công nhận giống Trình tự: Lai giống bố mẹ Thế hệ f1: Trồng 50-100 F1 Thế hệ F2: trồng 2000-3000 F2 Thu hoạch hạt cây, không nhận dạng F2 4 Thế hệ F3 f4 : gieo hạt thu nhận hệ trước thu hoạch hạt từ Thế hệ F5: gieo hạt hệ trước lên đồng ruộng theo khoảng cách rộng chọn có ưu vượt trội tính trạng mong muốn thu hoạch hạt Thế hệ F6: gieo riêng dòng từ chọn lọc hệ trước thu hoạchs dịng ưu tính trạng mong muốn Thế hệ f7: gieo riêng dòng từ chọn lọc hệ f6 thí nghiệm so sánh sơ Thế hệ 8-10 : Tiến hành thí nghiệm so sách quy nhiều địa điểm Công nhận giống Câu 3: Có Marker thị: Mục phân tử : “Nâng cao hiệu công tác chọn giống, làm giảm bớt thời gian chi phí cần thiết để tạo giống trồng với tính trạng mong muốn” RFLP: (Restriction Fragment Length Polymorphism) (đa hình độ dài đoạn giới hạn) khác biệt chuỗi DNA tương đồng phát diện đoạn có độ dài khác sau phân hủy mẫu DNA đề cập với endonuclease giới hạn cụ thể Hầu hết dấu hiệu RFLP đồng trội đặc hiệu locus cao Ứng dụng: - Lập đồ gen - Phân tích bệnh di truyền - Để phát gen đột biến - Dấu vân tay DNA (xét nghiệm pháp y) RAPD: DNA đa hình khuếch đại ngẫu nhiên (RAPD) dấu hiệu đoạn DNA từ khuếch đại PCR đoạn DNA gen ngẫu nhiên với mồi chuỗi nucleotide tùy ý Ứng dụng: RADP sử dụng nhiều nghiên cứu đa dạng di truyền loài thực vật nghiên cứu đặc điểm giống đánh giá biến đổi di truyền, xác định loài xác định lai AFLP (Amplified Fragment Length Polymorphism): Kỹ thuật AFLP sử dụng để phát đa hình DNA Phân tích AFLP kết hợp RFLP PCR việc gắn chuỗi nhận biết vào mồi hay gọi chuỗi tiếp hợp (adapter) để nhân chọn lọc phân đoạn DNA cắt hạn chế Ứng dụng: AFLP sử dụng nghiên cứu lập đồ genome, đa dạng di truyền quan hệ chủng loại kiểu gen có mối quan hệ gần, nghiên cứu cấu trúc di truyền nguồn gen đánh giá phân hóa di truyền quần thể SSR(simple sequence reapeats) Lặp lại trình tự đơn giản (SSR) microsatellites đoạn DNA bao gồm trình tự di-, tri-, tetra-hoặc pentanucleotide ngắn, lặp lặp lại song song Lặp lại trình tự đơn giản tìm thấy tất loài nhân chuẩn Các dấu hiệu SSR sử dụng rộng rãi nghiên cứu di truyền thực vật Ứng dụng: - Trong chuẩn đoán bệnh - Nghiên cứu quần thể SNP: Đa hình Nucleotide đơn (SNP) biến thể trình tự DNA xảy Nucleotide Adenine (A), Thymine (T), Cytosine (C), Guanine (G) gen khác cá thể loài cặp NST cá thể Ứng dụng: SNP sử dụng lập đồ di truyền, nghiên cứu đa dạng di truyền, nhận biết giống chọn giống MAS: (Maker- assisted selection) chọn giống nhờ thị phân tử liên kết với tính trạng mục tiêu Ứng dụng: Là quy trình sử dụng thị phân tử để chọn lọc gián tiếp nhiều yếu tố định di truyền tính trạng quan trọng Đây phương pháp giới ủng hộ mạnh mẽ kỹ thuật rút ngắn thời gian lai tạo giống cho kết sau hệ chọn lọc VÍ DỤ: Mợt nhà chọn giống cần nâng cao tính chống chịu với bệnh mợt giống trờng thương mại Để làm được việc cần phải lai giống thương mại được sử dụng khả kháng bệnh với giống hoang dại có khả kháng tốt với bệnh Tuy nhiên cần phải thực lần lai lại với dòng thương mại ban đầu phải chọn lọc nhiều cá thể tính kháng cũng khó đánh giá Chọn giống sử dựng thị phân tử - MAS (Marker Assisted Selection) Để chọn giống trồng với tính trạng mong muốn dùng phương pháp lai chọn giống dựa theo tính trạng địi hỏi tốn nhiều thời gian tốn Các dòng trình chọn lọc cần phải đạt đến độ trưởng thành đánh giá bước thí nghiệm lai trước có thành cơng hay khơng Các giống phức tạp địi hỏi nhiều thời gian nhiều cố gắng đạt kết mong muốn Các bước: Lai Quần thể lớn hàng nghìn cá thể Chọn lọc kiểu hình Ruộng thí nghiệm Nhà kính Cây cung cấp nguồn gen Giống thương mại Chọn giống phương pháp truyền thống Câu 4: Thụ phấn chéo trình thụ phấn tiến hành hai hoa khác loài, tức hạt phấn nhị hoa rơi núm nhụy hoa khác loài nảy mầm Trình tự Gieo 1000-2000 từ quần thể nguồn Chọn 200-250 tốt Gieo hạt chọn điểm khác Mỗi gieo riêng hàng mẹ Bố hỗn hợp trộn hạt hàng mẹ( hàng bố vừa hàng cho phấn, vừa hàng đối chứng), thường bố mẹ, bố mẹ trước nở hoa xử lý bỏ hoa đực hàng mẹ xấu hàng bố Chọn tầm 50% hàng tốt Thu 2-3 tốt dịng chọn Chu từ bước đến với ck1 Sau chu kỳ, hạt 10 dòng tốt trộn thành giống Triển vọng tương lai việc tạo giống trồng nhờ hỗ trợ Marker 3.a Nâng cao thơng lượng và giảm chi phí xác định kiểu gen 3.b Chi phí giải trình tự Dự kiến tương lai: Chi phí giải trình tự tiếp tục giảm dần số cách tiếp cận là: Phương pháp Reduced - Representation Sequencing (giảm trình tự đại diện) Low - Coverage Sequencing (giảm trình tự có độ phủ thấp) để phát triển SNP tồn hệ gen => làm giảm chi phí xác định kiểu gen marker Hơn nữa, kế hoạch là: xác định kiểu gen có chọc lọc marker mục tiêu tiềm làm giảm việc xác định kiểu gen, cũng tổng chi phí xác định kiểu gen trình chọn tạo giống trồng 3.c Các marker chức (Functional marker) “Functional markers” – Chỉ thị chức dùng để mô tả thị phân tử thuộc loại => giúp loại bỏ mối nguy làm thay đổi mối quan hệ gen nhiễm sắc thể giảm đáng kể số lượng marker xác định kiểu gen Tuy nhiên, việc phát triển marker chức địi hỏi nhiều khó khăn tốn 3.d Các thị phân tử việc phát hiện và lập bản đồ QTL 3.f Triển vọng và tương lai marker chọn tạo giống trồng: Kĩ thuật lai chéo giống thị phân tử kì vọng dự đốn tổ hợp chéo dị hợp, nhiên vấn đề nan giải Nếu giải vấn đề định dịng lai nhóm dị hợp tử thích hợp đặc điểm nhận dạng lucus ưu lai dự đốn xác bị dị tật