1. Trang chủ
  2. » Luận Văn - Báo Cáo

Khóa luận tn NGHIÊN CỨU BÀO CHẾ THUỐC NHỎ MŨI DẠNG XỊT TỪ DỊCH CHIẾT CÂY CỎ NGŨ SẮC AGERATUM CONYZOIDES L.

43 18 2

Đang tải... (xem toàn văn)

Tài liệu hạn chế xem trước, để xem đầy đủ mời bạn chọn Tải xuống

THÔNG TIN TÀI LIỆU

Thông tin cơ bản

Tiêu đề Nghiên Cứu Bào Chế Thuốc Nhỏ Mũi Dạng Xịt Từ Dịch Chiết Cây Cỏ Ngũ Sắc Ageratum Conyzoides L.
Tác giả Nguyễn Sơn Tùng
Người hướng dẫn Tiến Sĩ. Đặng Thị Hiền
Trường học Trường Đại Học Phenikaa
Chuyên ngành Dược học
Thể loại khóa luận tốt nghiệp
Năm xuất bản 2023
Thành phố Hà Nội
Định dạng
Số trang 43
Dung lượng 1,32 MB

Cấu trúc

  • CHƯƠNG 1 TỔNG QUAN (10)
    • 1.1 Tổng quan về bệnh viêm mũi dị ứng và viêm xoang 10 .1. Khái niệm bệnh viêm mũi dị ứng, viêm xoang (10)
      • 1.1.2. Một số phương thức điều trị bệnh viêm mũi dị ứng và viêm xoang hiện nay . 11 1.2. Tổng quan cây cỏ ngũ sắc 12 1.2.1. Đặc điểm thực vật (11)
      • 1.2.2. Thành phần hoá học trong cỏ ngũ sắc (13)
      • 1.2.3. Một số nghiên cứu ứng dụng bào chế các dạng thuốc từ dịch chiết cỏ ngũ sắc 13 1.3. Tổng quan về dạng thuốc nhũ tương 14 1.3.1. Khái niệm nhũ tương (13)
      • 1.3.2. Phân biệt các loại nhũ tương (14)
      • 1.3.3. Thành phần nhũ tương (15)
      • 1.3.4. Kỹ thuật bào chế nhũ tương (15)
      • 1.3.5. Một số đặc tính lý hoá của dạng thuốc nhũ tương (17)
    • 1.4. Thuốc dùng qua đường mũi và một số điểm cần quan tâm khi thiết kế dạng thuốc sử dụng tại mũi 18 1. Giải phẫu và sinh lý mũi (18)
      • 1.4.2. Cấu tạo xoang mũi (19)
      • 1.4.3. Ưu, nhược điểm của hệ thống phân phối thuốc qua đường mũi (20)
      • 1.4.4. Một số điểm cần quan tâm khi thiết kế công thức thuốc nhỏ mũi (21)
  • CHƯƠNG 2 ĐỐI TƯỢNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU (24)
    • 2.1. Mục tiêu và nội dung nghiên cứu 24 1. Mục tiêu nghiên cứu (24)
      • 2.1.2. Nội dung nghiên cứu (24)
    • 2.2. Nguyên liệu và thiết bị nghiên cứu 24 1. Nguyên liệu và hoá chất (24)
      • 2.2.2. Dụng cụ, thiết bị nghiên cứu (24)
    • 2.3. Phương pháp nghiên cứu 24 1. Lựa chọn dạng chiết xuất dược liệu cỏ ngũ sắc để bào chế thuốc nhỏ mũi (24)
      • 2.3.2. Phương pháp định tính một số thành phần trong dịch chiết (25)
      • 2.3.3. Xây dựng công thức và quy trình bào chế nhũ tương nhỏ mũi (26)
      • 2.3.4. Phương pháp bào chế nhũ tương (26)
      • 2.3.5. Phương pháp đánh giá một số đặc tính của nhũ tương nhỏ mũi (26)
    • 2.4. Phương pháp xử lý số liệu 28 CHƯƠNG 3 – THỰC NGHIỆM, KẾT QUẢ, BÀN LUẬN (28)
      • 3.1.1. Chiết xuất cỏ ngũ sắc (29)
      • 3.1.2. Khảo sát, lựa chọn các thành phần công thức của thuốc nhỏ mũi (31)
    • 3.2. Xác định tỷ lệ các thành phần (32)
    • 3.3. Thiết lập công thức và quy trình bào chế thuốc nhỏ mũi dạng xịt (33)
      • 3.3.1. Thiết kế thí nghiệm và kết quả (33)
      • 3.3.2. Đánh giá một số chỉ tiêu chất lượng của nhũ tương (36)

Nội dung

Bệnh viêm xoang, viêm mũi dị ứng là một trong những bệnh đường hô hấp với tỉ lệ mắc rất cao. Bệnh thường tái đi tái lại theo chu kỳ hoặc mùa, gây khó chịu cho bệnh nhân. Ở Việt Nam, đây là một bệnh lý phổ biến đặc biệt với người dân sinh sống ở các tỉnh, thành phố phía Bắc. Là một bệnh lý dai dẳng, khó điều trị dứt điểm, bệnh nhân thường sử dụng các thuốc Tây y để điều trị triệu chứng trong các đợt viêm cấp tính. Việc này nếu kéo dài suốt từ mùa này sang mùa khác, lâu dần sẽ dẫn đến nhờn thuốc. Vì vậy việc nghiên cứu, tìm hiểu và sản xuất các chế phẩm thuốc có nguồn gốc tự nhiên để bệnh nhân dùng trong những đợt trị liệu kéo dài nhưng phải đảm bảo ít độc tính; hướng tới điều trị căn nguyên gây ra bệnh, giúp điều trị triệt để, phòng ngừa tái phát đã và đang là mục tiêu hướng tới của ngành y tế Việt Nam. Một trong những ứng dụng được sử dụng nhiều trong các bài thuốc dân gian Việt Nam là dùng cây cỏ ngũ sắc điều trị bệnh viêm xoang, viêm mũi dị ứng. Tuy nhiên chỉ được sử dụng ở dạng dịch chiết nước thông thường, gây kích ứng mạnh niêm mạc đường hô hấp, gây tâm lý ngại sử dụng và không thuận tiện khi sử dụng đối với bệnh nhân.

TỔNG QUAN

Tổng quan về bệnh viêm mũi dị ứng và viêm xoang 10 1 Khái niệm bệnh viêm mũi dị ứng, viêm xoang

1.1.1 Khái niệm bệnh viêm mũi dị ứng, viêm xoang

Viêm mũi dị ứng (VMDƯ) là tình trạng viêm niêm mạc mũi, gây ra các triệu chứng như ngứa mũi, hắt hơi, chảy mũi và ngạt mũi do phản ứng viêm qua trung gian IgE khi tiếp xúc với dị nguyên đường hô hấp Các triệu chứng này có thể tự khỏi hoặc được điều trị VMDƯ thường đi kèm với viêm kết mạc dị ứng, biểu hiện qua ngứa, chảy nước mắt, đỏ mắt và có thể sưng nề mắt.

Viêm xoang cấp là bệnh phổ biến, ảnh hưởng đến khoảng một nửa dân số, từ trẻ nhỏ đến người già, đặc biệt thường gặp ở lứa tuổi học tập và lao động do tiếp xúc với môi trường ô nhiễm Bệnh thường gặp ở xoang hàm, trong khi trẻ em dưới 3-4 tuổi dễ mắc viêm xoang sàng hơn Chẩn đoán viêm xoang cấp không khó, với các dấu hiệu lâm sàng điển hình như sốt, đau nhức vùng mặt, và chảy mũi mủ Sốt có thể cao ở trẻ em, trong khi người lớn thường chỉ sốt nhẹ Đau mặt thường rõ rệt vào buổi sáng và có thể cảm nhận được khi ấn vào vùng má hoặc trên lông mày Chảy mũi mủ, đặc và có thể có mùi hôi, cùng với ngạt tắc mũi là triệu chứng không thể thiếu, gây khó khăn trong việc thở và có thể ảnh hưởng đến giấc ngủ và ăn uống của trẻ em.

Hình 1 1.Các vị trí viêm xoang thường gặp [38]

1.1.2 Một số phương thức điều trị bệnh viêm mũi dị ứng và viêm xoang hiện nay

Viêm xoang cấp thường có thể được điều trị hiệu quả và hồi phục nhanh chóng nếu được nghỉ ngơi và điều trị đúng cách Tuy nhiên, cần lưu ý rằng viêm xoang cấp nếu không được xử lý kịp thời có thể tiến triển thành viêm xoang mạn tính phức tạp và gây ra nhiều biến chứng nghiêm trọng.

Hướng xử trí: cơ bản thực hiện các nguyên tắc sau:

Để đảm bảo sức khỏe, cần nghỉ ngơi, giảm hoạt động mạnh và căng thẳng, đồng thời tránh các yếu tố kích thích như bụi bẩn, nhiệt độ cao, độ ẩm và môi trường ô nhiễm có nguy cơ lây nhiễm Quan trọng là giữ cho mũi thông thoáng, không để dịch nhầy hoặc mủ ứ đọng Nếu có nhiều mủ trong hốc mũi, cần nhỏ dung dịch rửa để thông mũi, sau đó xì mũi sạch và nhỏ thuốc sát khuẩn để duy trì sự thông thoáng Đối với trẻ nhỏ dưới 3 tuổi, do chưa biết cách xì mũi, nên sử dụng dung dịch muối sinh lý (NaCl 0,9%) để giúp làm sạch mũi.

Sử dụng xịt nước biển sinh lý giúp làm sạch các ứ đọng trong hốc mũi, sau đó nhỏ mũi sau vài phút Việc hút sạch mũi bằng bóng cao su tự hút hoặc do bác sĩ thực hiện sẽ mang lại hiệu quả cao.

Lưu ý rằng việc nhỏ mũi chỉ một lần sẽ không mang lại hiệu quả đáng kể Ngoài ra, việc xì mũi hoặc hút mũi khi mũi chưa thông có thể gây hại, vì dịch mủ trong mũi có thể bị đẩy ngược vào xoang, dẫn đến chảy máu mũi.

Nếu được thực hiện: khí dung mũi - xoang hay xông hơi mũi xoang sẽ có tác dụng rất tốt

Sử dụng huốc toàn thân: chỉ thực hiện khi tình trạng phẫu thuật rõ (sốt cao, đau nhức, chảy mủ đặc hôi ) hoặc khi đã ảnh hưởng đến phổi

Các thuốc thường dùng: kháng sinh, kháng viêm: giảm phù nề, và vitamin C [38]

1.2 Tổng quan cây cỏ ngũ sắc

Cây có ngũ sắc, còn được biết đến với nhiều tên gọi như cây cỏ hôi, tiêu viêm thảo, cây hoa ngũ vị, cây bù xít, thắng hồng kế, cỏ thúi địch và hoa ngũ sắc, là một loại cây có giá trị trong y học và có nhiều ứng dụng trong đời sống.

Tên khoa học: Ageratum conyzoides L

Cỏ ngũ sắc là loài cỏ nhiệt đới, phân bố chủ yếu ở Tây Phi, Châu Á và Nam Mỹ, với sự hiện diện rộng rãi tại Việt Nam Loài cỏ này có đặc điểm là cây nhất niên, thẳng mềm, cao từ 30-60 cm, với cụm hoa ở ngọn Lá cỏ hình bầu dục, mọc cách, dài 1-3 cm, mềm như nhung và phủ lớp lông mịn, có khía răng cưa đều Hoa cỏ ngũ sắc thường mọc thành cụm 8-15 bông, có đường kính 3-4 mm, với màu sắc từ tím sang trắng Quả bế không lông, dài khoảng 2 mm, có 5 vảy thon nhọn màu trắng hoặc kem Cỏ ngũ sắc nhân giống bằng hạt, được phát tán nhờ gió và nước, hạt có thể nảy mầm ngay sau khi phát tán.

Bộ phận dùng: Phần cây trên mặt đất [9]

Hình 1 2 Phần trên mặt đất của cây cỏ ngũ sắc Ageratum conyzoides L [1]

1.2.2 Thành phần hoá học trong cỏ ngũ sắc

Một loạt các hợp chất hóa học bao gồm alkaloid, coumarin, chromene, flavonoid, terpines, sesquiterpenes, benzofurones, sterol và terpenoids được tìm thấy có trong loài này

Thành phần chính được công bố liên quan đến tinh dầu của cây cỏ ngũ sắc, với hàm lượng dầu thay đổi từ 0,11% đến 0,58% ở lá và từ 0,03% ở các bộ phận khác.

- 0,18% đối với rễ tùy thời điểm trong năm

Từ quá trình chưng cất nước của hoa tươi, hàm lượng dầu được tìm thấy là 0,2% Sản lượng dầu từ chiết xuất ete dầu mỏ của hạt là 26% [3]

1.2.3 Một số nghiên cứu ứng dụng bào chế các dạng thuốc từ dịch chiết cỏ ngũ sắc

Năm 2014, Rajmani Prajapati và cộng sự đã phát triển công thức nhũ tương từ dịch chiết cỏ ngũ sắc, nghiên cứu độ ổn định và tác dụng kháng khuẩn của dịch chiết cùng các công thức nhũ tương Các thành phần như Tween 80, Span 80, Nonyl phenol ethoxylate, Methyl oleate và dầu đậu tương cho thấy sự ổn định cao Hóa học và độ ổn định của các thành phần trong công thức thuốc được duy trì, đồng thời phát huy tác dụng kháng khuẩn hiệu quả đối với Escherichia coli, Staphylococcus aureus và Candida albicans.

Vào năm 2019, Mia Permawati và cộng sự đã phát triển một dạng thuốc nanoemulgel từ cỏ ngũ sắc (Ageratum conyzoides L.) và cỏ lưỡi rắn (Oldenlandia corymbosa L.), đồng thời tiến hành đánh giá tác dụng kháng viêm trên chuột Nanoemulgel được chế tạo bằng cách hòa tan dịch chiết từ hai loại dược liệu trong ethanol 96% và propylenglycol thông qua phương pháp siêu âm, kết hợp với các tá dược như PEG 400, Tween 80 và dầu dừa tinh khiết Nghiên cứu đã xác định một số đặc tính của nanogel như kích thước hạt, chỉ số PDI, thế zeta, pH và độ nhớt, cho thấy cấu trúc ổn định Việc sử dụng ethanol và propylenglycol không chỉ làm tăng độ tan của các thành phần dược lý mà còn cải thiện khả năng thẩm thấu qua da, trong khi Tween và PEG đóng vai trò là chất diện hoạt phù hợp cho các công thức chứa quervetin.

Năm 2019, Sirikunya Sayompark và cộng sự đã phát triển một loại thuốc dạng gel từ dịch chiết cỏ ngũ sắc Ageratum conyzoides (L.), với quy trình ngâm bột cỏ trong ethanol 95% theo tỉ lệ 1:5 trong 5 ngày Hỗn dịch được khuấy và lọc, phần cặn được ngâm thêm hai lần với cùng thể tích dung môi Các dịch chiết sau đó được cô đặc dưới áp suất giảm ở 40°C để thu được dịch chiết thô, được lưu trữ ở -20°C cho đến khi sử dụng Dịch chiết được hòa tan với propylenglycol, glycerin, ethanol 95%, Carbopol 934, triethanolamin, phenoxyethanol và nước cất để tạo thành gel Gel có màu xanh lá, trong suốt, pH từ 5-7 và độ nhớt khoảng 700-800 cps.

Năm 2017, PGS TS Nguyễn Đức Vượng từ Đại học Quảng Bình đã chia sẻ trên tạp chí Thông tin khoa học và công nghệ Quảng Bình về việc điều chế dung dịch xịt chữa viêm xoang từ cỏ ngũ sắc Tinh dầu được chiết xuất bằng phương pháp ngưng tụ và pha chế với nước muối sinh lý NaCl 0,9% cùng với tinh dầu tỏi Tỷ lệ tối ưu cho hỗn hợp này là 1:3:10 cho thể tích tinh dầu tỏi, tinh dầu cỏ ngũ sắc và nước muối sinh lý.

Chế phẩm Agerhinin, phát triển bởi Viện dược liệu, hiện có mặt trên thị trường dưới dạng thuốc xịt với thành phần bột Sp3 750mg, tương đương 15g cây ngũ sắc Sản phẩm này cùng với nhiều chế phẩm khác được bào chế theo công thức thuốc cổ truyền, nhằm tối ưu hóa công dụng điều trị viêm mũi dị ứng và viêm xoang từ cỏ ngũ sắc Ageratum conyzoides (L.).

1.3 Tổng quan về dạng thuốc nhũ tương

Nhũ tương là hệ phân tán vi dị thể gồm hai chất lỏng không đồng tan, trong đó một chất lỏng là pha phân tán được phân tán vào chất lỏng thứ hai là môi trường phân tán Các tiểu phân cơ học trong nhũ tương có kích thước từ 0,1 đến hàng chục micromet.

1.3.2 Phân biệt các loại nhũ tương

➢ Dựa vào kích thước của các giọt pha phân tán, nhũ tương được chia thành:

Nhũ tương thụ (macroemulsion): 1 – 10 àm [19]

Nhũ tương mịn (miniemulsion): 50 – 1000 nm (thường 50 – 500 nm) [8]

Thuốc dùng qua đường mũi và một số điểm cần quan tâm khi thiết kế dạng thuốc sử dụng tại mũi 18 1 Giải phẫu và sinh lý mũi

1.4.1 Giải phẫu và sinh lý mũi Ở người và các loài động vật khác, các chức năng chính của mũi thở và khứu giác Các nhà nghiên cứu trở nên quan tâm đến đường mũi để cung cấp thuốc toàn thân do quá cao mức độ mạch máu và tính thấm của niêm mạc mũi

Mũi là lối vào chính của đường hô hấp, cho phép không khí vào cơ thể Khi thuốc được đưa vào khoang mũi, nó có thể lắng đọng ở các vùng giải phẫu khác nhau như vùng tiền đình, hô hấp và khứu giác Khoang mũi của con người có tổng thể tích khoảng 16 đến 19 ml và diện tích bề mặt khoảng 150 cm², được chia thành hai hốc mũi qua vách ngăn.

Thể tích của mỗi khoang khoảng 7,5 ml, có bề mặt diện tích xung quanh 75 cm 2 [16]

Hình 1 4 Giải phẫu và tổ chức học của khoang mũi [16]

Xoang mũi là một bộ phận quan trọng trong cấu tạo của mũi, bao gồm các hốc rỗng nằm trong xương thành mũi, được gọi là xoang cạnh mũi Các xoang này cũng được bao phủ bởi niêm mạc giống như khoang mũi, và có các tế bào lông chuyển động giúp quét chất nhầy vào mũi, đảm bảo rằng các xoang luôn rỗng và khô thoáng.

Xoang mũi bao gồm bốn nhóm chính: xoang trán, xoang sàng, xoang hàm trên và xoang bướm Các nhóm xoang này có vai trò quan trọng trong việc cộng hưởng âm thanh, sưởi ấm không khí và duy trì độ ẩm cho niêm mạc mũi, đồng thời giúp giảm trọng lượng của xương đầu mặt Nếu bạn gặp vấn đề về xoang, có thể một trong những xoang này đang gặp bất thường.

Vùng hô hấp mũi, bộ phận lớn nhất của khoang mũi, được chia thành ba phần: cuốn mũi trên, giữa và dưới, với nhiệm vụ tạo ẩm và điều chỉnh nhiệt độ không khí hít vào Khoang thịt giữa các cuốn mũi tạo ra lối đi cho luồng không khí, đảm bảo sự tiếp xúc chặt chẽ với niêm mạc đường hô hấp Khoang thịt dưới và giữa tiếp nhận các ống dẫn mũi và xoang cạnh mũi, là những túi khí nằm trong xương mặt xung quanh khoang mũi Biểu mô hô hấp gồm bốn loại tế bào: tế bào trụ có lông và không có lông, tế bào đáy và tế bào hình cốc, giúp vận chuyển nước và ion, cũng như duy trì độ ẩm cho niêm mạc.

Ngách mũi giữa Cuốn mũi giữa

Vùng khứu giác có diện tích bề mặt khoảng 10 cm², đóng vai trò quan trọng trong việc vận chuyển thuốc đến não và dịch não tủy Nó bao gồm mô liên kết dày và lớp đệm chứa biểu mô khứu giác, trong đó có ba loại tế bào: tế bào đáy, tế bào nâng đỡ và tế bào thụ cảm khứu giác Tế bào thụ cảm khứu giác là tế bào thần kinh lưỡng cực với đuôi gai đơn, kết thúc bằng núm khứu giác mang lông mao không di động Biểu mô đường mũi được bao phủ bởi lớp chất nhầy, giúp cuốn theo các hạt và được làm sạch bằng lông mao sau mỗi 10 đến 15 phút Độ pH của dịch tiết niêm mạc dao động từ 5,5 đến 6,5 ở người lớn và từ 5,0 đến 6,7 ở trẻ em Chất nhầy di chuyển qua mũi với tốc độ khoảng 5 đến 6 mm/phút, dẫn đến thanh thải các hạt trong mũi sau mỗi 15 đến 20 phút, đồng thời chứa nhiều enzym như cytochrom P450, carboxylesterase và glutathione S-transferase.

Bộ phận này, nằm ở cửa mũi, có chức năng lọc các phần tử trong không khí và được xem là khu vực ít quan trọng nhất trong ba khu vực liên quan đến sự hấp thụ thuốc.

1.4.3 Ưu, nhược điểm của hệ thống phân phối thuốc qua đường mũi

- Hấp thu nhanh chóng và phát huy tác dụng của thuốc

- Kích thích đáp ứng miễn dịch tại chỗ trong các bệnh nhiễm trùng đường hô hấp như cúm

- Khả năng vượt qua chuyển hóa đầu tiên liên quan đến miệng

- Có thể tự dùng thuốc

- Các thuốc có phân tử nhỏ có sinh khả dụng cao

- Thuốc không được hấp thu qua đường uống có thể được đưa vào hệ tuần hoàn bằng cách đưa thuốc qua đường mũi

Các nghiên cứu hiện tại cho thấy rằng đường mũi có thể được coi là một phương pháp thay thế hiệu quả cho đường tiêm, đặc biệt là đối với các loại thuốc protein và peptide.

- Thuận tiện cho bệnh nhân, đặc biệt là cho những người điều trị dài hạn, khi so sánh với thuốc đường tiêm

- Các hợp chất phân cực khả năng hấp thu kém qua đường uống có thể đặc biệt thích hợp cho đường phân phối này

- Bệnh nhân tự dùng được thuốc do đó cải thiện sự tuân thủ của bệnh nhân so với đường tiêm

Fentanyl có khả năng hấp thu nhanh chóng và hiệu quả nhờ bề mặt hấp thu lớn cùng với lưu lượng máu tĩnh mạch cao Thời gian đạt đỉnh tác dụng (Tmax) của fentanyl khi sử dụng qua đường mũi chỉ mất khoảng 7 phút, nhanh hơn so với tiêm tĩnh mạch Vì vậy, các thuốc đường mũi phù hợp có thể được sử dụng hiệu quả trong các tình huống khẩn cấp như một lựa chọn thay thế cho tiêm tĩnh mạch.

Việc sử dụng không đúng kỹ thuật có thể dẫn đến việc mất một cách cơ học dạng bào chế vào các bộ phận khác của đường hô hấp, chẳng hạn như phổi.

- Độc tính mô học của các chất tăng cường hấp thu được sử dụng trong hệ thống phân phối thuốc qua đường mũi chưa được xác định rõ ràng

Việc sử dụng dược phẩm có thể dẫn đến nguy cơ phản ứng phụ tại chỗ và gây tổn thương không thể phục hồi cho lông mao trên niêm mạc mũi, do ảnh hưởng từ cả dược chất và các thành phần bổ sung trong công thức bào chế.

- Tương đối bất tiện cho bệnh nhân khi so sánh với hệ thống truyền miệng vì có khả năng gây kích ứng mũi

- Khoang mũi cung cấp diện tích bề mặt hấp thụ nhỏ hơn khi so sánh với thuốc dùng qua đường tiêu hóa

- Một số chất hoạt động bề mặt được sử dụng làm chất tăng cường hóa học có thể phá vỡ và thậm chí làm tan màng ở nồng độ cao

Nghẹt mũi do lạnh hoặc dị ứng có thể làm giảm hiệu quả hấp thu thuốc qua đường mũi Việc sử dụng thuốc qua đường này thường xuyên có thể gây tổn thương niêm mạc mũi Hơn nữa, sự tập trung của thuốc ở các vùng khác nhau của não và tủy sống sẽ thay đổi tùy thuộc vào từng tác nhân.

- Sự phân phối dự kiến sẽ giảm khi trọng lượng phân tử của thuốc tăng lên

- Một số thuốc điều trị có thể dễ bị thoái hóa một phần niêm mạc mũi hoặc có thể gây kích ứng niêm mạc [16]

1.4.4 Một số điểm cần quan tâm khi thiết kế công thức thuốc nhỏ mũi

Để tối ưu hóa sự hấp thu toàn thân của thuốc, cần xem xét cả pH của khoang mũi và pKa của thuốc Việc cung cấp các sản phẩm có độ pH từ 4,5 đến 6,5 giúp giảm thiểu kích ứng mũi.

Ngoài ra, khối lượng và nồng độ cũng cần được xem xét

Khối lượng phân phối bị giới hạn bởi kích thước của khoang mũi Giới hạn trên 25 mg/liều và thể tích từ 25 đến 200 μL/lỗ mũi đã được đề xuất

• Để tránh kích ứng niêm mạc mũi;

• Cho phép thuốc có sẵn ở dạng đơn chất để hấp thu;

• Để ngăn chặn sự phát triển của vi khuẩn gây bệnh trong đường mũi;

• Để duy trì chức năng của tá dược như chất bảo quản

• Để duy trì chuyển động cơ mi sinh lý bình thường

Lysozyme, một enzyme có trong chất tiết mũi, đóng vai trò quan trọng trong việc tiêu diệt một số loại vi khuẩn ở môi trường pH acid Tuy nhiên, trong điều kiện kiềm, lysozyme sẽ bị bất hoạt, dẫn đến việc mô mũi trở nên dễ bị nhiễm trùng bởi các vi sinh vật.

Do đó, nên giữ công thức ở độ pH từ 4,5 đến 6,5, lưu ý các đặc tính hóa lý của thuốc khi thuốc được hấp thụ ở dạng liên kết [16]

Các công thức mũi thường sử dụng thể tích nhỏ từ 25 đến 200μL, điều này có thể làm thay đổi độ pH của dịch tiết mũi, ảnh hưởng đến nồng độ thuốc có sẵn để hấp thụ Vì vậy, việc sử dụng lượng đệm pha chế phù hợp là cần thiết để duy trì pH tại chỗ.

ĐỐI TƯỢNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU

Mục tiêu và nội dung nghiên cứu 24 1 Mục tiêu nghiên cứu

- Xây dựng công thức, thiết lập quy trình bào chế thuốc xịt mũi chứa dịch chiết cỏ ngũ sắc Agelatum L

- Bước đầu đánh giá một số tiêu chuẩn chất lượng cho chế phẩm

- Lựa chọn dạng chiết xuất dược liệu để bào chế thuốc nhỏ mũi

- Xây dựng công thức, thiết lập quy trình bào chế thuốc nhỏ mũi dạng nhũ tương

- Bước đầu đề xuất một số tiêu chuẩn chất lượng cho chế phẩm

Nguyên liệu và thiết bị nghiên cứu 24 1 Nguyên liệu và hoá chất

2.2.1 Nguyên liệu và hoá chất

Bảng 2.1 Nguyên liệu sử dụng trong quá trình thực nghiệm STT Tên nguyên liệu Nguồn gốc Tiêu chuẩn

1 Cỏ ngũ sắc Việt Nam Thu hái tự nhiên

2 Tween 80 Singapore Nhà sản xuất

3 Span 80 Singapore Nhà sản xuất

4 Dầu dừa Việt Nam Nhà sản xuất

5 Propylenglycol Trung Quốc Nhà sản xuất

6 Acid hydrocloric Trung Quốc Tinh khiết phân tích

7 Natri hydroxyd Trung Quốc Tinh khiết phân tích

8 Nước cất Việt Nam DĐVN V

9 Ethanol 70% Việt Nam Nhà sản xuất

2.2.2 Dụng cụ, thiết bị nghiên cứu

- Màng lọc cellulose acetat, kớch thước lỗ lọc 0,2 àm; 0,45μm; màng polyethersulfon kớch thước lỗ lọc 0,45àm (Đức)

- Máy đo pH Eutech Instruments pH 510

- Máy đo phân bố kích thước tiểu phân Zetasizer Nano ZS90 – Malvern (Anh)

- Nhớt kế Brookfield SA ® (Mỹ)

- Cân phân tích, cân kỹ thuật, các dụng cụ thủy tinh khác,…

Phương pháp nghiên cứu 24 1 Lựa chọn dạng chiết xuất dược liệu cỏ ngũ sắc để bào chế thuốc nhỏ mũi

2.3.1 Lựa chọn dạng chiết xuất dược liệu cỏ ngũ sắc để bào chế thuốc nhỏ mũi

Dịch chiết 1: Nghiền 100g lá cỏ ngũ sắc + 100 ml dung dịch NaCl 0,9% → Lọc qua màng 0,45àm → Lọc qua màng 0,2 àm → chấm sắc ký bản mỏng [24]

Dịch chiết 2: Sắc 100 g lá cỏ ngũ sắc + 100 ml nước trong 40 phút → Gạn lấy dịch chiết → Lọc qua màng 0,45àm → Lọc qua màng 0,2 àm → chấm sắc ký bản mỏng [24]

Dịch chiết 3 được thực hiện bằng cách ngấm kiệt 100 g lá cỏ ngũ sắc với dung môi ethanol 70% theo tỉ lệ 1:5 Sau đó, hỗn hợp được cô quay ở nhiệt độ 40°C và cắn khô Cuối cùng, cắn khô được hòa tan trở lại để sử dụng.

100 ml propylenglycol → Lọc qua màng 0,45àm → Lọc qua màng 0,2 àm → chấm sắc ký bản mỏng [22],[26]

2.3.1.2 Lựa chọn dịch chiết xuất dược liệu a) Chuẩn bị dụng cụ và các hệ dung môi cho phương pháp sắc ký bản mỏng

Bình thủy tinh trong suốt với nắp đậy kín được sử dụng để triển khai các phiến kính Đèn tử ngoại phát ra bức xạ với bước sóng ngắn 254 nm và dài 365 nm Dụng cụ phun thuốc thử và tủ sấy điều nhiệt được sử dụng để hoạt hóa, sấy bản mỏng và sắc ký đồ, cũng như cho một số phản ứng phát hiện Tủ hút hơi độc và máy sấy giúp sấy khô sắc ký đồ, cho phép chấm nhanh nhiều lần các dung dịch pha loãng cần phân tích Một máy ảnh chất lượng cao có thể chụp sắc ký đồ ở ánh sáng ban ngày từ khoảng cách 30 cm đến 50 cm.

Micropipet nhiều cỡ từ 1 μl, 2 μl, 5 μl, 10 μl đến 20 μl, các ống mao quản hoặc dụng cụ thích hợp Bản mỏng tráng sẵn chất hấp phụ có chất phát quang thích hợp

Tiến hành chấm 0,2 ml mỗi dịch chiết tại vị trí 1, 2, 3 tương ứng với 03 dịch chiết thu được ở trên

Khảo sát 02 hệ dung môi

- N-hexan : Ethyl Acetate với tỉ lệ 85:15 [11]

- Toluen : Ethyl Acetate với tỉ lệ 9:1 [11]

Để triển khai sắc ký, đặt bản mỏng vào bình và điều chỉnh lượng dung môi sao cho các vết chấm nằm trên bề mặt dung môi Đậy kín bình và giữ ở nhiệt độ từ 20 °C đến 25 °C, tránh ánh sáng mặt trời Nếu không có quy định cụ thể, triển khai cho đến khi dung môi di chuyển khoảng 3/4 chiều dài bản mỏng, sau đó lấy bản mỏng ra, đánh dấu mức dung môi, làm bay hơi dung môi còn lại và hiện vết theo chỉ dẫn.

Soi phát hiện vết tách các dịch chiết ở bước sóng 365 nm

Lựa chọn dịch chiết có nhiều vết phân tách được thành phần, phát hiện tại bước sóng 365nm làm dịch chiết đưa vào công thức bào chế nhũ tương

2.3.2 Phương pháp định tính một số thành phần trong dịch chiết Định tính flavonoid có trong dịch chiết cỏ ngũ sắc

Cho vào khay sứ 1ml dịch chiết Thêm vài giọt dung dịch F𝐞𝐂𝐥 𝟑 5% Sẽ thấy xuất hiện kết tủa màu xanh đen

Cho 1ml dịch chiết vào khay sứ, sau đó thêm vài giọt dung dịch NaOH 10% để quan sát sự xuất hiện của kết tủa vàng Tiếp theo, khi thêm 1ml nước cất, kết tủa sẽ tan và màu vàng của dung dịch sẽ được làm nổi bật hơn.

2.3.3 Xây dựng công thức và quy trình bào chế nhũ tương nhỏ mũi Đề xuất thành phần công thức thuốc nhỏ mũi

Tiến hành khảo sát thành phân công thức kết hợp tham khảo tài liệu nghiên cứu [22],

[29], [33] đề xuất thành phần công thức nhũ tương nhỏ mũi như sau:

Dịch chiết cỏ ngũ sắc 1mg/ml

Dầu dừa tinh khiết 2 - 3 ml (nghiên cứu chỉ ra chỉ số HLB = 12)

NaOH, HCl điều chỉnh pH

2.3.4 Phương pháp bào chế nhũ tương

NTN được bào chế theo các bước sau:

• Bước 1 : Hòa tan đun nóng pha dầu (dầu dừa tinh khiết, Span 80), đun nóng 60 - 65 0 C

• Bước 2 : Hòa tan, đun nóng pha nước (dịch chiết cỏ ngũ sắc 3, Tween 80,

Propylenglycol, NaCl 0,9%, natri benzoat) lên 65 – 70 o C

• Bước 3 : Kết hợp hai pha Khuấy trộn liên tục bằng thiết bị phân cắt tốc độ cao 12.000 vòng/phút trong 5 phút

• Bước 4 : Điều chỉnh pH thích hợp bằng dung dịch natri hydroxyd 0,1 mol/L hoặc acid hydrocloric 0,1 mol/L Thêm NaEDTA, NaCl 0,9% vừa đủ thể tích

• Bước 5 : Lọc qua màng cellulose acetat 0,2 àm

• Bước 6 : Đóng gói, dán nhãn, hoàn chỉnh sản phẩm

2.3.5 Phương pháp đánh giá một số đặc tính của nhũ tương nhỏ mũi

2.3.5.1 Phương pháp xác định phân bố kích thước tiểu phân

Máy quang phổ photon ánh sáng Horiba ZS100 được sử dụng để đo ánh sáng tán xạ ở góc 90 độ Trước khi tiến hành đo, mẫu NT được pha loãng 100 lần với nước cất nhằm tránh hiện tượng đa tán xạ Nhiệt độ đo được duy trì ở mức 25 ± 2 độ C.

Phương pháp tán xạ laser là một kỹ thuật hiệu quả để xác định kích thước tiểu phân Khi chùm tia laser chiếu vào các tiểu phân có kích thước khác nhau, ánh sáng tán xạ sẽ cho ra các mức độ khác nhau, từ đó cho phép tính toán kích thước tiểu phân dựa trên thuyết Mie Kết quả thu được từ phương pháp này cung cấp tỷ lệ phần trăm thể tích các tiểu phân theo đường kính, giúp phân tích chính xác hơn về kích thước và phân bố của chúng.

2.3.5.2.Phương pháp đo độ nhớt

Sử dụng nhớt kế Brookfield Đầu đo S1, tốc độ quay 100 vòng/phút, nhiệt độ đo khoảng

25 ± 2 0 C Đo ba lần và lấy kết quả trung bình [5]

Các phép đo pH cần được thực hiện trong điều kiện nhiệt độ từ 20-25°C Trước khi sử dụng, máy phải được hiệu chuẩn với các mẫu pH 4, 7 và 10 Để đảm bảo độ chính xác, điện cực phải được ngâm hoàn toàn trong mẫu đo và kết quả được ghi nhận Quá trình thử nghiệm nên được lặp lại trên 6 mẫu khác nhau.

2.3.5.4.Phương pháp xác định tỷ trọng

Tỷ trọng tương đối được xác định bằng picnomet theo DĐVN V [40] Đầu tiên, cân picnomet rỗng, khô và sạch, sau đó đổ mẫu thử đã điều chỉnh nhiệt độ dưới 20 o C vào picnomet, tránh bọt khí Giữ picnomet ở 20 o C trong 30 phút, dùng băng giấy lọc để thấm chất lỏng thừa và làm khô bề mặt picnomet trước khi cân Tính khối lượng chất lỏng trong picnomet, sau đó rửa sạch và làm khô picnomet bằng ethanol và aceton, thổi không khí nén để loại bỏ hơi aceton Tiếp theo, xác định khối lượng nước cất trong picnomet ở 20 o C như với mẫu thử Tỷ số giữa khối lượng mẫu thử và khối lượng nước cất là tỷ trọng cần xác định, lặp lại thử nghiệm với 6 mẫu khác nhau.

2.3.5.5 Phương pháp xác định hình dạng xịt

Hình dạng xịt được đánh giá theo hướng dẫn của FDA bằng cách phủ bột talc lên bề mặt giấy vellum A4 Cố định giấy vào mặt phẳng vuông góc với mặt đất và xịt 2-3 lần để ổn định bình xịt Đặt bình sao cho miệng vòi phun vuông góc và cách giấy 7 cm, sau đó nhấn vòi xịt mạnh và dứt khoát Quan sát hình dạng chùm phun trên giấy và lặp lại thử nghiệm 3 lần với 3 mẫu khác nhau Đánh giá dựa trên hình dạng và kích thước chùm phun.

2.3.5.6 Phương pháp đánh giá độ đồng đều khối lượng xịt Độ đồng đều khối lượng xịt: thực hiện theo USP 36 [36] Lặp lại thử nghiệm trên 10 mẫu khác nhau Mỗi mẫu thử trên 10 đơn vị, mỗi đơn vị 2 liều: 1 liều ngay sau liều đầu tiên và 1 liều tương ứng với liều cuối cùng Xịt bỏ 2-3 lần đầu cho bình xịt ổn định Lau sạch thân bình và miệng vòi Cân khối lượng bình ban đầu (mo ) Xịt một liều mạnh và dứt khoát Lau sạch thân bình và miệng vòi Cân khối lượng bình (m1 ) Tính m1 - mo để được khối lượng của liều ngay sau liều đầu tiên Tiếp tục xịt bỏ các liều tiếp theo đến khi chỉ còn lại một liều duy nhất so với tổng số liều Lặp lại các bước trên để tính khối lượng liều tương ứng với liều cuối cùng.

2.3.6 Đánh giá độ ổn định của chế phẩm

Để đảm bảo chất lượng sản phẩm, NT cần được bảo quản trong lọ kín và ở điều kiện phòng Việc quan sát cảm quan và hiện tượng tách pha là rất quan trọng Các chỉ số lý hóa của chế phẩm sẽ được đánh giá sau 0 ngày, 45 ngày và 60 ngày để theo dõi sự ổn định và hiệu quả của sản phẩm.

➢ Điều kiện khắc nghiệt : Luộc sôi mẫu NT trong 60 phút, quan sát sự tách pha

➢ Sự tách pha của NT được mã hóa theo 4 mức (mô tả trên hình 2.1)

Hình 2 1 : Ảnh minh họa cho bốn mức độ tách pha của NTN (ảnh minh hoạ sau này thay bằng ảnh thực của nghiên cứu)

- Mức 1: Hai pha của NT tách hoàn toàn (kém bền nhất)

- Mức 2: NT tách pha chưa hoàn toàn: một trong hai pha vẫn còn hơi đục

- Mức 3: NT tách pha nhưng chưa hoàn toàn, cả hai pha đều còn rất đục

- Mức 4: Chưa quan sát thấy hiện tượng tách pha (bền nhất).

Phương pháp xử lý số liệu 28 CHƯƠNG 3 – THỰC NGHIỆM, KẾT QUẢ, BÀN LUẬN

Quan sát, phân tích lựa chọn

CHƯƠNG 3 – THỰC NGHIỆM, KẾT QUẢ, BÀN LUẬN

3.1 Lựa chọn dạng chiết xuất dược liệu cỏ ngũ sắc để bào chế thuốc nhỏ mũi 3.1.1 Chiết xuất cỏ ngũ sắc

Dịch chiết 1: Nghiền 100g lá cỏ ngũ sắc + 100 ml dung dịch NaCl 0,9% → Lọc qua màng 0,45àm → Lọc qua màng 0,2 àm → chấm sắc ký bản mỏng

Dịch chiết 2: Sắc 100 g lá cỏ ngũ sắc + 100 ml nước trong 40 phút → Gạn lấy dịch chiết → Lọc qua màng 0,45àm → Lọc qua màng 0,2 àm → chấm sắc ký bản mỏng

Dịch chiết 3 được thực hiện bằng cách ngấm kiệt 100 g lá cỏ ngũ sắc với dung môi ethanol 70% theo tỉ lệ 1:5, sau đó cô quay ở nhiệt độ 40°C Sau khi cắn, hòa tan cắn trở lại bằng 100 ml propylenglycol Cuối cùng, lọc qua màng 0,45 μm và tiếp tục lọc qua màng 0,2 μm trước khi tiến hành chấm sắc ký bản mỏng.

Kết quả thu được như sau:

- Với hệ dung môi n-hexan : ethyl acetate với tỉ lệ 85:15 → phát hiện trên đèn sắc bước sóng 365 nm: không phát hiện vết phân tách ở cả 3 dịch chiết số 1, 2, 3

Hệ dung môi Toluen: Ethyl Acetate với tỉ lệ 9:1 cho thấy sự phân tách rõ rệt các thành phần trong dịch chiết số 3, trong khi dịch chiết số 1 và 2 không có hiện tượng phân tách này.

Việc chiết xuất bằng phương pháp 1 và 2 không tách biệt được các thành phần có trong dược liệu cỏ ngũ sắc, do đó chúng tôi quyết định không sử dụng các dịch chiết này cho việc sản xuất thuốc nhũ tương.

Dịch chiết số 3 cho thấy các thành phần phân tách cao, chứng tỏ phương pháp chiết đã thu được nhiều hoạt chất từ dược liệu cỏ ngũ sắc, như thể hiện trong hình 3.1 Kết quả này cũng nhất quán với nghiên cứu đã được đề cập trong tài liệu [22].

- Tiến hành bảo quản dịch chiết trong ngăn đá tủ lạnh (nhiệt độ -18 o C) [33] sau 30 ngày tiến hành chấm lại sắc ký theo mục 2.3.1 thu được kết quả như hình 3.2

Phương pháp số 3 trong dịch chiết đã chứng minh khả năng hòa tan hiệu quả nhiều thành phần tinh dầu có trong cỏ ngũ sắc Ngoài ra, sản phẩm còn đảm bảo tính ổn định khi được bảo quản ở nhiệt độ thích hợp và duy trì chất lượng trong ít nhất 1 tháng.

Kết luận: Lựa chọn dịch chiết số 3 để tiến hành làm các nghiên cứu tiếp theo

Hình 3 1 Hình ảnh phân tách dịch chiết số 1, 2, 3 bằng hệ dung môi Toluen : Ethyl

Acetate (tỉ lệ 9:1) ở bước sóng 365 nm sau khi chiết

Hình 3 2 Hình ảnh phân tách dịch chiết số 3 bằng hệ dung môi Toluen : Ethyl Acetate (tỉ lệ 9:1) ở bước sóng 365nm sau chiết và sau bảo quản 30 ngày

Trong quá trình kiểm tra và thực hiện các phản ứng định tính đối với một số hoạt chất chiết xuất từ cỏ ngũ sắc, chúng tôi đã thu được những kết quả đáng chú ý.

- Phản ứng định tính flavonoid:

Cho vào khay sứ 1ml dịch chiết Thêm vài giọt dung dịch F𝐞𝐂𝐥 𝟑 5% Sẽ thấy xuất hiện kết tủa màu xanh đen

Cho 1ml dịch chiết vào khay sứ và thêm vài giọt dung dịch NaOH 10%, sẽ thấy xuất hiện kết tủa vàng Khi thêm 1ml nước cất, kết tủa sẽ tan, làm tăng cường màu vàng của dung dịch.

Kết quả thử phản ứng định tính cho thấy một số hoạt chất có trong cỏ ngũ sắc Để phát triển thuốc nhỏ mũi hiệu quả, cần tiến hành khảo sát và lựa chọn các thành phần công thức phù hợp.

Từ kết quả nghiên cứu trên dịch chiết từ cỏ ngũ sắc mục 3.1.1; dịch chiết đưa vào nhũ tương được chiết xuất như sau:

Tiến hành ngấm kiệt 100 g lá cỏ ngũ sắc bằng ethanol 70% với tỉ lệ 1:5, sau đó cô quay ở nhiệt độ 40°C Tiếp theo, cắn khô và hòa tan cắn trở lại bằng 100 ml propylenglycol Cuối cùng, lọc qua màng 0,45 µm và sau đó qua màng 0,2 µm để thu dịch chiết.

Bảo quản dịch chiết ở ngăn đá tủ lạnh nhiệt độ -18 o C

Dung môi pha dầu đóng vai trò quan trọng trong việc hình thành nhũ tương và hòa tan các thành phần trong dịch chiết dược liệu Các loại dầu phân cực như triglycerid thường được ưu tiên vì khả năng tạo nhũ tương tốt hơn so với dầu không phân cực Hơn nữa, dầu có mạch carbon dài có khả năng hòa tan dược chất lớn, nhưng lại tạo nhũ tương kém hơn, và ngược lại.

Đặc tính hòa tan của pha dầu trong pha nước có ảnh hưởng đáng kể đến độ ổn định của hệ thống Các loại dầu có mạch carbon dài và thể tích phân tử lớn có khả năng làm giảm quá trình kết tụ Ostwald.

Vì thế, để dung hòa các đặc tính trên, loại dầu được lựa chọn là:

Phản ứng với NaOH tạo 

Sử dụng dầu dừa trong các nghiên cứu gần đây về nano và vi nhũ tương cho thấy khả năng giảm tình trạng viêm nhiễm đường hô hấp.

Lựa chọn CDH dựa vào kiểu NT mong muốn và khả năng gây kích ứng mũi:

Trong công thức NTN, việc kết hợp các chất hoạt động bề mặt (CDH) là rất quan trọng để đạt được HLB cần thiết, giúp tạo ra kiểu NTN mong muốn và nâng cao độ ổn định của hệ thống.

• Khả năng gây kích ứng niêm mạc của CDH giảm dần theo thứ tự: CDH cation > CDH anion ≈ CDH lưỡng cực > CDH không ion [12]

Chọn hai chất diện hoạt không ion hóa là Tween 80 (HLB 15) và Span 80 (HLB 4,3) giúp tăng cường tính thấm của dược chất qua niêm mạc mũi và ít gây kích ứng cho niêm mạc mũi.

Propylenglycol đóng vai trò quan trọng trong việc hình thành và ổn định nhũ tương bằng cách kết hợp với CDH để giảm sức căng bề mặt giữa các pha Điều này không chỉ tăng tính linh động của lớp CDH mà còn cải thiện tính mềm dẻo và linh hoạt của màng phân cách, từ đó tạo điều kiện thuận lợi cho việc hình thành và duy trì nhũ tương một cách dễ dàng và ổn định hơn.

Xác định tỷ lệ các thành phần

Tỷ lệ các thành phần được xác định dựa trên các tiêu chí:

• Không gây kích ứng mũi

• Nằm trong khoảng tạo nhũ tương

Nồng độ các thành phần đã được lựa chọn cụ thể như sau:

Dịch chiết cỏ ngũ sắc tỉ lệ chiết 1/1 (g/ml)

Dầu dừa tinh khiết 3-5 ml (nghiên cứu chỉ ra chỉ số HLB = 12)

NaOH, HCl điều chỉnh pH

Thiết lập công thức và quy trình bào chế thuốc nhỏ mũi dạng xịt

Dựa trên tài liệu tham khảo thiết lập các khoảng nồng độ các thành phần theo Bảng 3.1

Bảng 3.1 Các thành phần trong công thức NT nhỏ mũi

Thành phần NT cỏ ngũ sắc

Dược chất Dịch chiết cỏ ngũ sắc (dịch chiết số 3) 10 ml

Dung môi pha dầu Dầu dừa tinh khiết 3-5ml

Chất sát khuẩn Natri benzoat 0,01%

Pha nước NaCl 0,9% Vừa đủ 100ml pH 5,5-6,5

3.3.1 Thiết kế thí nghiệm và kết quả

Sử dụng phần mềm MODDE 8.0 để thiết kế thí nghiệm cổ điển, một cách ngẫu nhiên, theo nguyên tắc hợp tử tại tâm

Dựa trên công thức cơ bản của NT đã xây dựng, giữ cố định các thành phần:

Các biến độc lập, kí hiệu biến, đơn vị, mức thay đổi trình bày ở bảng

Bảng 3 2 Các biến định tính Tên biến định tính Ký hiệu

Bảng 3 3 Các biến định lượng Tên biến định lượng Ký hiệu Đơn vị Mức thay đổi

• Độ ổn định vật lý

Các phương pháp đánh giá độ ổn định vật lý của NT đã được thực hiện, nhưng do hạn chế về trang thiết bị, các mẫu NT chỉ được quan sát hiện tượng tách pha, kết váng và kết tụ bằng mắt thường Kết quả cho thấy chỉ có phương pháp luộc sôi mẫu NT trong 60 phút cho phép quan sát sự khác biệt về hình thức của các mẫu NTN Do đó, biến phụ thuộc được chọn là độ bền của hệ khi luộc sôi trong 60 phút.

➢ Sự tách pha của NT được mã hóa theo 4 mức

Các biến phụ thuộc, đơn vị được trình bày ở bảng 3.4

Bảng 3 4 Các biến phụ thuộc Tên biến phụ thuộc Ký hiệu Đơn vị Độ bền (1 – 4) * Y -

Hình 3 4 Ảnh minh họa cho bốn mức độ tách pha của nhũ tương bào chế từ dịch chiết cỏ ngũ sắc

3.3.1.3 Bố trí thí nghiệm và kết quả

Tiến hành bào chế 17 công thức nhũ tương theo phương pháp mục 2.3.3 tiến hành đánh giá độ bền theo mục 2.3.5 thu được kết quả như sau:

Bảng 3 5 Thiết kế thí nghiệm cho nhũ tương bào chế từ dịch chiết cỏ ngũ sắc và kết quả đánh giá độ bền

Trong 17 công thức đánh giá, có 4 công thức đạt độ bền mức 4 là CT1, CT6, CT9 và CT11 Chỉ có 2 công thức, CT3 và CT5, có độ bền ở mức 1, trong khi các công thức còn lại đạt độ bền ở mức 2 và 3.

3.3.2 Đánh giá một số chỉ tiêu chất lượng của nhũ tương

3.3.2.1 Một số đặc tính lý hóa

Lựa chọn bốn công thức có độ bền đánh giá ở mức 4, bao gồm CT1, CT6, CT9 và CT11 Đã tiến hành đánh giá một số chỉ tiêu chất lượng như cảm quan, pH, độ đồng nhất, KTTP, PDI và độ nhớt, với kết quả thu được như sau:

Bảng 3 6 Một số đặc tính của nhũ tương chứa dịch chiết cỏ ngũ sắc được đánh giá Đặc tính Đặc tính của nhũ tương

Màu sắc Trắng đục Trắng đục Trắng đục Trắng đục

Tách pha Không phân tách

Không phân tách Không phân tách Không phân tách pH 5.54 5.92 6.18 5.62

Tính đồng nhất Trong suốt Trong suốt Trong suốt Trong suốt

Tỷ trọng 1.01 – 1,03 1.01 – 1,03 1.01 – 1,03 1.01 – 1,03 Hình dạng chùm xịt

Kích thước chùm xịt có đường kính trung bình nằm trong khoảng 8,6 -9,2 cm 2

Kích thước chùm xịt có đường kính trung bình nằm trong khoảng 8,3 -9,7cm 2

Kích thước chùm xịt có đường kính trung bình nằm trong khoảng 8,22 – 9,02 cm 2

Kích thước chùm xịt có đường kính trung bình nằm trong khoảng - 8,21 – 9,3 cm 2 Độ đồng đều khối lượng phân liều

Các liều nằm trong khoảng 0,1176-0,1764 (g) Trung bình các liều đầu và liều cuối phải nằm trong khoảng 0,1251- 0,1691 (g)

Các liều nằm trong khoảng 0,1165-0,1745 (g) Trung bình các liều đầu và liều cuối phải nằm trong khoảng 0,1236- 0,1674 (g)

Các liều nằm trong khoảng 0,1163-0,1751 (g) Trung bình các liều đầu và liều cuối phải nằm trong khoảng 0,1235- 0,1672 (g)

Các liều nằm trong khoảng 0,1161-0,1743 (g) Trung bình các liều đầu và liều cuối phải nằm trong khoảng 0,1238-0,1674 (g)

Các công thức 1, 6 và 9 có chỉ số PDI cao hơn 0,5, trong đó công thức 9 có PDI cao nhất, cho thấy kích thước giọt không đồng nhất Ngược lại, công thức 11 có PDI < 0,5, chứng tỏ mẫu nhũ tương này có sự phân bố kích thước giọt đồng nhất và kích thước giọt nhỏ nhất, điều này cho thấy sự ổn định cao nhất Do đó, công thức 11 sẽ được lựa chọn cho nghiên cứu tiếp theo.

3.3.2.2 Độ ổn định vật lý

Tiến hành bào chế 3 mẫu 100 ml nhũ tương công thức 11 (mẫu 11.1, 11.2, 11.3) theo phương pháp mục 2.3.3

Bảo quản ba mẫu nhũ tương ở điều kiện thường trong 45 và 60 ngày, sau đó tiến hành đánh giá các đặc tính của nhũ tương theo mục 3.3.4, với kết quả được trình bày trong Bảng 3.7.

Bảng 3.7 Đánh giá độ ổn định của mẫu nhủ tương sau bảo quản Công thức 11

Trắng đục như sữa Tách pha

Mùi Không có mùi lạ

Không có mùi lạ Luộc sôi mẫu trong

Mức 4 Mức 4 Mức 4 Mức 4 Mức 4 Mức 4 Mức 4 Mức 4 Mức 4 pH 5,61 5,61 5,61 5,62 5,62 5,62 5,61 5,61 5,61

Từ bảng kết quả cho thấy mẫu nhũ tương được bào chế khá ổn định trong thời gian bảo quản 60 ngày ở nhiệt độ thường

KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ KẾT LUẬN

Sau khi thực hiện đề tài “Nghiên cứu bào chế thuốc nhỏ mũi dạng nhũ tương đặc trị viêm mũi dị ứng, viêm xoang từ dịch chiết cây cỏ ngũ sắc Ageratum conyzoides L.”, chúng tôi đã đạt được những kết quả chính quan trọng.

1 Đã xây dựng và bào chế được nhũ tương từ dịch chiết cây cỏ ngũ sắc Ageratum conyzoides, với:

- Dược chất: Dịch chiết cỏ ngũ sắc

- Dung môi pha dầu: Dầu dừa tinh khiết

- Chất diện hoạt: Tween 80, Span 80

- Các chất khác: Propylen glycol, NaEDTA, natri benzoat, NaCl 0,9%

Và quy trình bào chế nhũ tương theo phương pháp nhũ hoá như sau:

• Bước 1: Hòa tan đun nóng pha dầu (dầu dừa ép lạnh, Span 80), đun nóng 60 - 65 0 C

• Bước 2: Hòa tan, đun nóng pha nước (dịch chiết cỏ ngũ sắc 3, Tween 80, Propylenglycol, NaCl 0,9%, Natri benzoat) lên 65 - 70 0 C

• Bước 3: Kết hợp hai pha Khuấy trộn bằng thiết bị phân cắt trong 5 phút

• Bước 4: Điều chỉnh pH thích hợp bằng dung dịch natri hydroxyd 0,1 mol/L hoặc acid hydrocloric 0,1 mol/L Thêm NaEDTA, NaCl 0,9% vừa đủ thể tích

• Bước 5: Lọc qua màng cellulose acetat 0,2 àm

• Bước 6: Đóng gói, dán nhãn, hoàn chỉnh sản phẩm

2 Đã đánh giá được các chỉ tiêu chất lượng của nhũ tương nano

+ Hình thức; phân bố kích thước tiểu phân; chỉ số PDI; độ nhớt; pH

- Đánh giá độ ổn định vật lý ĐỀ XUẤT

1 Tiến hành bào chế nhũ tương bằng các phương pháp khác (sử dụng máy đồng nhất hóa ở áp suất cao) và nghiên cứu ảnh hưởng của các thông số thiết bị đến chất lượng nhũ tương hình thành

2 Tiến hành đánh giá tác dụng sinh học của dạng thuốc trên một số chủng vi khuẩn, nấm

1 Adewole L Okunade (2002), Ageratum conyzoides L Asteraceae, Fitoterapia 73 , p.1-16

2 Adurní N., Solans C., Azemar N., et al (2005), "Studies on the formation of O/W nano-emulsions, by low-energy emulsification methods, suitable for pharmaceutical applications", European Journal of Pharmaceutical Sciences, 26(5), pp 438-445

3 Anjoo Kamboj, Ajay Kumar Saluja (2008 ), Ageratum conyzoides L.: A review on its phytochemical and pharmacological profile, International Journal of Green Pharmacy, p 59-68

4 Brożek J L, Bousquet J, Agache I et al (2017), Allergic Rhinitis and its Impact on Asthma (ARIA) guidelines—2016 revision, Journal of Allergy Clinical Immunology, 140(4), p 950-958

5 Chiesa M., Garg J., Kang Y., et al (2008), "Thermal conductivity and viscosity of water-in-oil nanoemulsions", Colloids and Surfaces A: Physicochemical and Engineering Aspects, 326(1), pp 67-72

6 Cortes-Munoz M., Chevalier-Lucia D., Dumay E (2009), "Characteristics of submicron emulsions prepared by ultra-high pressure homogenisation: Effect of chilled or frozen storage", Food Hydrocolloids, 23(3), pp 640-654

7 Darshana S Jain, Amrita N Bajaj*, Tiwari Nimisha (2011), Development And Evaluation Of Peppermint Oil Containing Microemulsions For Intranasal Delivery, ISSN 2045-080X, Vol 2, Issue 4, p 174-185

8 Delmotte C., Legros P., Malot T., et al., inventors (2002), Method for making an enamelled metal part without degreasing, Patent No.: 0031797 Sughrue Mion, PLLC

2100 Pennsylvania Avenue, N.W Washington, DC20037 (US), assignee

9 Đỗ Tất Lợi, Cây thuốc và vị thuốc Việt Nam , NXB Hồng Đức, tái bản năm 2019, p1-

10 Fernandez P., André V., Rieger J., et al (2004), "Nano-emulsion formation by emulsion phase inversion", Colloids and Surfaces A: Physicochemical and Engineering Aspects, 251(1-3), pp 53-58

11 Giáo trình thực hành dược liệu (2021), Đại học Phenikaa, lưu hành nội bộ

12 Grant R L., Yao C., Gabaldon D., et al (1992), "Evaluation of surfactant cytotoxicity potential by primary cultures of ocular tissues: I Characterization of rabbit corneal epithelial cells and initial injury and delayed toxicity studies", Toxicology, 76(2), pp 153-176

13 Gupta R B., Kompella U B (2006), Nanoparticle Technology for Drug Delivery, Taylor & Francis Group, New York, pp 1-52, 153-160, 319-360

14 Hippalgaonkar K., Majumdar S., Kansara V (2010), "Injectable lipid emulsions— advancements, opportunities and challenges", AAPS PharmSciTech, 11(4), pp 1526-

15 Izquierdo P., Esquena J., Tadros T F., et al (2002), "Formation and stability of nano- emulsions prepared using the phase inversion temperature method", Langmuir, 18(1), pp 26-30

16 Jaiswal p L.1*, darekar a B.2, saudagar r B(2017), a recent review on nasal microemulsion for treatment of cns disorder, int j curr pharm res, vol 9, issue 4, 5-13

17 Kentish S., Wooster T., Ashokkumar M., et al (2008), "The use of ultrasonics for nanoemulsion preparation", Innovative Food Science & Emerging Technologies, 9(2), pp 170-175

18 Koroleva M Y., Yurtov E V (2012), "Nanoemulsions: the properties, methods of preparation and promising applications", Russian Chemical Reviews, 81(1), p 21

19 Lawrence J., Warisnoicharoen W (2006), Nanoparticulates as drug carriers, Imperial College Press, London, p 125

20 Leong T., Wooster T., Kentish S., et al (2009), "Minimising oil droplet size using ultrasonic emulsification", Ultrasonics Sonochemistry, 16(6), pp 721-727

21 Luo Q., Zhao J., Zhang X., et al (2011), "Nanostructured lipid carrier (NLC) coated with Chitosan Oligosaccharides and its potential use in ocular drug delivery system", International Journal of Pharmaceutics, 403(1), pp 185-191

22 Mia Permawati1, Effionora Anwar2, Ade Arsianti3 and Anton Bahtiar1 (2019), Anti- inflammatory Activity of Nanoemulgel formulated from Ageratum conyzoides (L.) L and Oldenlandia corymbosa L Extracts in Rats, Journal of Natural Remedies | ISSN: 2320-3358

23 N A Kamalaldin, 1 S A Sulaiman, 2 M R Yusop, 1,3 and B Yahaya (2017), Does Inhalation of Virgin Coconut Oil Accelerate Reversal of Airway Remodelling in an Allergic Model of Asthma?, https://doi.org/10.1155/2017/8741851

24 Nguyễn Đức Vượng, Phạm Nam Giang, Mai Thị Mi Ni, Nguyễn Thị Hồng Hạnh

Năm 2017, một nghiên cứu đã được công bố trong Tạp chí thông tin khoa học và công nghệ Quảng Bình, số 1/2017, trang 26-28, về việc điều chế dung dịch xịt chữa viêm xoang từ cỏ ngũ sắc, loài cây được thu hái từ tỉnh Quảng Bình Nghiên cứu này đã chỉ ra tiềm năng của cỏ ngũ sắc trong việc hỗ trợ điều trị viêm xoang, mở ra hướng đi mới trong y học cổ truyền và hiện đại.

25 Patel R P., Joshi J R (2012), "An overview on nanoemulsion: A novel approach", Int J Pharm Sci Res, 3(12), pp 4640-4650

26 Rajmani prajapati1, sunita roy1, sudeep mishra1, s.k raza1 and l.k thakur1*(2014), formulation development, standardization and antimicrobial activity of ageratum conyzoides extracts and their formulation, int j pharm pharm sci, vol 6, suppl 2, 369-374

27 Rao J., Mcclements D J (2011), "Formation of Flavor Oil Microemulsions, Nanoemulsions and Emulsions: Influence of Composition and Preparation Method", Journal of Agricultural and Food Chemistry, pp 5026–5035

28 Rao J., Mcclements D J (2011), "Formation of Flavor Oil Microemulsions, Nanoemulsions and Emulsions: Influence of Composition and Preparation Method",

Journal of Agricultural and Food Chemistry, pp 5026–5035

29 S.V.Shekade*, Dr.S.V.Shirolkar1, Yatesh Chaudhari (2020), A Review on Microemulsion Drug Delivery System for Nasal Application, J Pharm Sci & Res Vol 12(1),p 63-73

30 Sadurni N., Solans C., Azemar N., et al (2005), "Studies on the formation of O/W nano-emulsions, by low-energy emulsification methods, suitable for pharmaceutical applications", European journal of pharmaceutical sciences, 26(5), pp 438-445

31 Sheetal PorechaAcharya (2013), Preparation and evaluation of transnasal microemulsion of carbamazepine, Asian Journal of Pharmaceutical Sciences, Volume

8, Issue 1, February 2013, Pages 64-70, https://doi.org/10.1016/j.ajps.2013.07.008

32 Shegokar R., Müller R H (2010), "Nanocrystals: industrially feasible multifunctional formulation technology for poorly soluble actives", International Journal of Pharmaceutics, 399(1), pp 129-139

33 Sirikunya sayompark*, sopita tangpiriyavaree, yupa khongprik and khanitta meepradit (2019), development and evaluation of stability of gel formulation containing ageratum conyzoides extract, malays appl biol (2019) 48(4): 115–120

34 Sirikunya sayompark*, sopita tangpiriyavaree, yupa khongprik and khanitta meepradit (2019), development and evaluation of stability of gel formulation containing ageratum conyzoides extract, malays appl biol (2019) 48(4): 115–120

35 Tadros T F (2005), Applied surfactants: principles and applications, WILEY-VCH Verlag GmbH & Co.KGaA, pp 115 - 333

36 The United State Pharmacopeial Convention (2013), “Aerosol chapter ”, USP 36 -

37 USFDA CDER (2002), Nasal spray and inhalation solution, suspension, and spray drug product chemistry, manufacturing, and controls documentation

38 Viêm xoang- những điều cần biết, Ngô Ngọc Liễn, NXB Y Học

39 Wooster T J., Golding M., Sanguansri P (2008), "Impact of oil type on nanoemulsion formation and Ostwald ripening stability", Langmuir, 24(22), pp 12758-

40 Y-tế, V B Dược điển Việt Nam (2018)

PHỤ LỤC Hình 1 Một số hình ảnh đo KTTP và chỉ số PDI của công thức 1, 6,9,11

Ngày đăng: 12/01/2024, 15:16