Nghiên cứu phân tích thành phần, cấu trúc hóa học của các hợp chất từ loài Dứa dại(Pandanus tonkinensis Mart.ex B.Stone) bằng các phương pháp hóa lý hiện đại

Nghiên cứu phân tích thành phần, cấu trúc hóa học của các hợp chất từ loài Dứa dại(Pandanus tonkinensis Mart.ex B.Stone) bằng các phương pháp hóa lý hiện đại.Nghiên cứu phân tích thành phần, cấu trúc hóa học của các hợp chất từ loài Dứa dại(Pandanus tonkinensis Mart.ex B.Stone) bằng các phương pháp hóa lý hiện đại.Nghiên cứu phân tích thành phần, cấu trúc hóa học của các hợp chất từ loài Dứa dại(Pandanus tonkinensis Mart.ex B.Stone) bằng các phương pháp hóa lý hiện đại.Nghiên cứu phân tích thành phần, cấu trúc hóa học của các hợp chất từ loài Dứa dại(Pandanus tonkinensis Mart.ex B.Stone) bằng các phương pháp hóa lý hiện đại.Nghiên cứu phân tích thành phần, cấu trúc hóa học của các hợp chất từ loài Dứa dại(Pandanus tonkinensis Mart.ex B.Stone) bằng các phương pháp hóa lý hiện đại.Nghiên cứu phân tích thành phần, cấu trúc hóa học của các hợp chất từ loài Dứa dại(Pandanus tonkinensis Mart.ex B.Stone) bằng các phương pháp hóa lý hiện đại.Nghiên cứu phân tích thành phần, cấu trúc hóa học của các hợp chất từ loài Dứa dại(Pandanus tonkinensis Mart.ex B.Stone) bằng các phương pháp hóa lý hiện đại.Nghiên cứu phân tích thành phần, cấu trúc hóa học của các hợp chất từ loài Dứa dại(Pandanus tonkinensis Mart.ex B.Stone) bằng các phương pháp hóa lý hiện đại.Nghiên cứu phân tích thành phần, cấu trúc hóa học của các hợp chất từ loài Dứa dại(Pandanus tonkinensis Mart.ex B.Stone) bằng các phương pháp hóa lý hiện đại.Nghiên cứu phân tích thành phần, cấu trúc hóa học của các hợp chất từ loài Dứa dại(Pandanus tonkinensis Mart.ex B.Stone) bằng các phương pháp hóa lý hiện đại.Nghiên cứu phân tích thành phần, cấu trúc hóa học của các hợp chất từ loài Dứa dại(Pandanus tonkinensis Mart.ex B.Stone) bằng các phương pháp hóa lý hiện đại.Nghiên cứu phân tích thành phần, cấu trúc hóa học của các hợp chất từ loài Dứa dại(Pandanus tonkinensis Mart.ex B.Stone) bằng các phương pháp hóa lý hiện đại.Nghiên cứu phân tích thành phần, cấu trúc hóa học của các hợp chất từ loài Dứa dại(Pandanus tonkinensis Mart.ex B.Stone) bằng các phương pháp hóa lý hiện đại.Nghiên cứu phân tích thành phần, cấu trúc hóa học của các hợp chất từ loài Dứa dại(Pandanus tonkinensis Mart.ex B.Stone) bằng các phương pháp hóa lý hiện đại.Nghiên cứu phân tích thành phần, cấu trúc hóa học của các hợp chất từ loài Dứa dại(Pandanus tonkinensis Mart.ex B.Stone) bằng các phương pháp hóa lý hiện đại.Nghiên cứu phân tích thành phần, cấu trúc hóa học của các hợp chất từ loài Dứa dại(Pandanus tonkinensis Mart.ex B.Stone) bằng các phương pháp hóa lý hiện đại.Nghiên cứu phân tích thành phần, cấu trúc hóa học của các hợp chất từ loài Dứa dại(Pandanus tonkinensis Mart.ex B.Stone) bằng các phương pháp hóa lý hiện đại.Nghiên cứu phân tích thành phần, cấu trúc hóa học của các hợp chất từ loài Dứa dại(Pandanus tonkinensis Mart.ex B.Stone) bằng các phương pháp hóa lý hiện đại.Nghiên cứu phân tích thành phần, cấu trúc hóa học của các hợp chất từ loài Dứa dại(Pandanus tonkinensis Mart.ex B.Stone) bằng các phương pháp hóa lý hiện đại.Nghiên cứu phân tích thành phần, cấu trúc hóa học của các hợp chất từ loài Dứa dại(Pandanus tonkinensis Mart.ex B.Stone) bằng các phương pháp hóa lý hiện đại.Nghiên cứu phân tích thành phần, cấu trúc hóa học của các hợp chất từ loài Dứa dại(Pandanus tonkinensis Mart.ex B.Stone) bằng các phương pháp hóa lý hiện đại.Nghiên cứu phân tích thành phần, cấu trúc hóa học của các hợp chất từ loài Dứa dại(Pandanus tonkinensis Mart.ex B.Stone) bằng các phương pháp hóa lý hiện đại.Nghiên cứu phân tích thành phần, cấu trúc hóa học của các hợp chất từ loài Dứa dại(Pandanus tonkinensis Mart.ex B.Stone) bằng các phương pháp hóa lý hiện đại.Nghiên cứu phân tích thành phần, cấu trúc hóa học của các hợp chất từ loài Dứa dại(Pandanus tonkinensis Mart.ex B.Stone) bằng các phương pháp hóa lý hiện đại.

BỘGIÁO GIÁODỤC DỤCVÀĐÀOTẠO VÀĐÀOTẠO BỘ VIỆN HÀN LÂM KHOAHỌC VIỆN HÀN LÂM KHOAHỌC VÀCÔNG CÔNGNGHỆ NGHỆVIỆT VIỆTNAM VÀ NAM HỌC VIỆN KHOA HỌC VÀ CÔNG NGHỆ - ĐINH THỊ HUYỀN TRANG NGHIÊN CỨU PHÂN TÍCH THÀNH PHẦN, CẤU NGHIÊN CỨU PHÂN TÍCH THÀNH PHẦN, CẤU TRÚC HĨA TRÚC HĨA HỌC CỦA CÁC HỢP CHẤT TỪ LỒI HỌC CỦA CÁC HỢP CHẤT TỪ LOÀI DỨA DẠI DỨA DẠI (Pandanus tonkinensisMART.EX B.STONE) (PandanustonkinensisMART.EX B.STONE) BẰNG CÁC BẰNG CÁC PHƯƠNG PHÁP HÓA LÝ HIỆN ĐẠI PHƯƠNGPHÁP HÓA LÝ HIỆNĐẠI LUẬN ÁN TIẾN SĨ HĨA HỌC Chun ngành: Hóa Phân Tích Mã số: 44 01 18 LUẬN ÁN TIẾN SĨ HÓA HỌC NGƯỜI HƯỚNG DẪN KHOA HỌC PGS TS Dương Hồng Anh PGS TS Ngô Quốc Anh Hà Nội Nội 2023 2023 Hà LỜI CAM ĐOAN Tôi xin cam đoan đề tài nghiên cứu luận án cơng trình nghiêncứu tơi dựa tài liệu, số liệu tơi tự tìm hiểu nghiên cứu Chính vậy, kết nghiên cứu đảm bảo trung thực khách quan Đồng thời, kết chưa xuất nghiên cứu Các số liệu, kết nêu luận án trung thực, sai tơi hồn tồn chịu trách nhiệm trước pháp luật Hà Nội, ngày tháng năm 2023 Tác giả luận án NCS Đinh Thị Huyền Trang LỜI CẢM ƠN Luận án hồn thành Phịng thí nghiệm trọng điểm Cơng nghệ phân tích phục vụ Kiểm định mơi trường an toàn thực phẩm - Trường Đại học Khoa học tự nhiên - Đại học Quốc gia Hà Nội, Viện Hóa sinh biển - Viện Hàn lâm Khoa học & Công nghệ Việt Nam Trường Đại học Vinh Trong trình nghiên cứu, tác giả nhận giúp đỡ quý báu thầy cô, nhà khoa học, đồng nghiệp, bạn bè giađình Tơi xin bày tỏ lời cảm ơn sâu sắc, cảm phục kính trọng tới PGS TS Dương Hồng Anh PGS TS Ngô Quốc Anh định hướng, tận tâm hướng dẫn khoa học, động viên tạo điều kiện thuận lợi cho suốt thời gian thực luận án Tôi xin trân trọng cảm ơn Ban lãnh đạo Học viện Khoa học Công nghệ, đồng cảm ơn Ban lãnh đạo Viện Hóa học tập thể cán Viện quan tâm, giúp đỡ tạo điều kiện thuận lợi cho tơi suốt q trình học tập nghiên cứu Tơi xin chân thành cảm ơn tập thể phịng Nghiên cứu cấu trúc - Viện Hóa sinh biển tạo điều kiện thời gian, sở vật chất, trang thiết bị đại cho thực luậnán Tôi xin trân trọng cảm ơn ban lãnh đạo Trường Đại học Vinh đặc biệt thầy Khoa Hóa học - Trường sư phạm - Trường Đại học Vinh quan tâm giúp đỡ, đóng góp ý kiến q báu để tơi hồn thành luận án Tơi xin chân thành cảm ơn Phịng thí nghiệm trọng điểm cấp Đại học quốc gia “Cơng nghệ phân tích phục vụ kiểm định mơi trường an tồn thực phẩm” KLATEFOS đặc biệt GS TS Phạm Hùng Việt đóng góp cho tơi kiến thức q báu tạo điều kiện thuận lợi cho thực đề tàinày Tơi xin bày tỏ lịng biết ơn chân thành sâu sắc tới tồn thể gia đình, bạn bè người thân ln ln quan tâm, khích lệ, động viên tơi suốt q trình học tập nghiên cứu Xin trân trọng cảm ơn! Hà Nội, ngày tháng năm 2023 Tác giả luận án NCS Đinh Thị Huyền Trang MỤC LỤC LỜICAMĐOAN i LỜICẢMƠN ii MỤCLỤC iii DANHMỤCBẢNG .vi DANHMỤCHÌNH viii DANH MỤC CÁC CHỮVIẾTTẮT xi MỞĐẦU CHƯƠNG1.TỔNG QUAN .3 1.1.Giới thiệusơlượcvềchiPandanus 1.1.1 Đặcđiểmhình thái chungcủachiPandanus 1.1.2 ChiPandanusởViệtNamvà sơbộvềphânbốcácloài 1.1.3 Giới thiệuvề lồiPandanus tonkinensis MartelliexB.C.Stone .8 1.1.4 Tình hình nghiêncứuvềthành phầnhóahọc củachiPandanus 1.1.5 Cácnghiêncứuvềhoạttínhsinh học dịch chiếtvàcácchấtphânlậptừchiPandanus 15 1.2 Cácphươngpháp hóalýdùngđểchiết tách,phânlập,xácđịnh cấutrúc cácchấttinhkhiếttừdượcliệu 16 1.2.1 Phươngphápchiếtmẫuthựcvật .16 1.2.2 Phươngpháp phânlậpcácchấttinhkhiết 17 1.2.3 Các phương phápphân tíchxácđịnhcấu trúc cácchấtphânlậpđược .17 1.3 Đánh giáhoạttínhsinh họctheođịnh hướngbảovệgan .18 1.3.1 Viêmvàmộtsốyếutốquantrọngtrongphảnứngviêm .19 1.3.2 Sơlượcvềhoạttính chốngoxyhóa 20 1.4 Chấtđánhdấu hóahọcvàphương pháplựachọn chấtđánhdấu hóahọccủadượcliệu 21 1.5 Tóm tắt cácvấnđềđ ề tàiluậnáncầngiảiquyết 22 CHƯƠNG2.PHƯƠNG PHÁPNGHIÊNCỨU 23 2.1 Đốitượngnghiêncứu .23 2.2 Hóachất,dụngcụ vàthiếtbịnghiêncứu .23 2.2.1 Hóachất,dụngcụ 23 2.2.2 Thiếtbịnghiêncứu 24 2.3 Phương phápnghiêncứu 25 2.3.1 Xửlímẫu 25 2.3.2 Chiết xuấtdượcliệu .25 2.3.3 Phươngpháp phânlậpcáchợpchất 26 2.3.4 Phươngpháp xácđịnhcấutrúc 26 2.3.5 Phươngpháp đánh giáhoạttínhsinhhọc .27 2.3.6 Phương pháplựa chọn, chiết xuất-tinhchế chất đánh dấu,xâydựngvàthẩmđịnh quy trình phân tíchđịnhlượngchấtđánhdấu 29 2.4 Phân lập cáchợpchất .30 2.4.1 Phân lập hợp chất từ loàiPandanustonkinensis 30 2.4.2 Phân lậpcác hợpchấttừrễloàiPandanustonkinensis 33 CHƯƠNG3.KẾTQUẢVÀTHẢOLUẬN 35 3.1 Xácđịnhcấu trúc hóa học hợp chấtphânlậptừquảvàrễ loàiPandanustonkinensis 35 3.1.1 Xácđịnh cấutrúc hóahọccác hợpchấtphânlậptừquảlồiPandanustonkinensis 35 3.1.2 Xácđịnh cấu trúchóahọccáchợp chấtphânlậptừ rễlồiPandanustonkinensis 36 3.2 Đánh giáhoạttínhsinhhọccủa hợpchất phânlậpđược 58 3.2.1 Hoạttínhkháng viêmcủa chấtđãphânlậpthơngqua ức chế q trìnhsảnsinhNOtrêntế bào RAW264,7 đượckích thíchbởiLPS 58 3.2.2 Hoạt tínhchống oxy hóa chất đãphânlậpthơngqua ứcchếq trìnhperoxyhố lipidmàngtếbào 59 3.3 Chất đánhdấu(marker) 60 3.3.1 Lựa chọnchấtđánhdấu 60 3.3.2 Chiết xuất,tinhchếchất đánh dấutừdượcliệu .62 3.3.3 Tinh chế chấtđánhdấu 65 3.3.4 Tóm tắt qui trìnhchiếtxuấtvàtinh chếhaichấtđánhdấu 66 3.3.5 Xácnhận lạicấutrúcvà độtinhkhiết củachấtđánhdấu 67 3.4 Xâydựngvàthẩm địnhquy trìnhđịnhlượnghợp chấtpinorecinol 4’-O-β-DglucopyranosidevàchấtvladinolFtronglồi dứa dạiPandanus tonkinensis81 3.4.1 Khảosátquytrìnhxửlýmẫutrướckhiphântíchđịnhlượngchấtđánhdấu 81 3.4.2 Quy trìnhđịnh lượnghợpchất pinorecinol 4’-O-β-D-glucopyranosidevàchất vladinolFtrong dược liệudứa dạiPandanustonkinensis 84 3.4.3 Thẩm địnhquy trìnhđịnh lượnghợpchấtpinorecinol 4’-O-β-D- glucopyranosidevàchất vladinolFtrongdứadạiPandanustonkinensis 85 3.5 Giớihạnpháthiệnvàgiới hạn định lượng củaphươngpháp 93 3.6 Định lượng pinorecinol 4’-O-β-D-glucopyranoside (PT20)vàvladinolF(PT6)trongdứa dạiPandanus tonkinensisthuthậpở sốđịaphương 95 KẾTLUẬN 97 NHỮNG ĐÓNGGÓPMỚI CỦALUẬNÁN 99 KIẾNNGHỊ 100 CÁCCƠNG TRÌNH LIÊN QUAN ĐẾNLUẬNÁN 101 TÀILIỆUTHAMKHẢO .102 DANH MỤC BẢNG Bảng1.1 Tómtắtcácthơngtincơbảncác lồithuộcchiPandanus .4 ởViệtNamhiệnnay Bảng1.2.Cáchợpchấtalkaloids phân lậptừloàiPandanus amaryllifolius9 Bảng1.3.CáchợpchấtcarotenoidphânlậptừloàiPandanustectorius .11 Bảng1.4 Cáchợpchấtterpenoid phânlậptừchiPandanus 11 Bảng1.5 Cáchợpchất dẫnxuất carboxylic acidtừchiPandanus 12 Bảng1.6.Lignanvàcáchợpchất khác từchiPandanus 13 Bảng 3.1.Số liệuphổNMRcủa hợp chất PT10vàchấtsosánh (7R)-2,6dimethoxyphenyl-7,9-propanediol-1-O-β-D-glucopyranoside 42 Bảng3.2.Số liệuphổ NMRcủahợp chấtmớiPT25vàchấtsosánhcis-cinnamylalcohol9O-(6’-O-α-L-arabinofuranosyl)-β-D-glucopyranoside .48 Bảng 3.3.Sốliệuphổ NMRcủahợpchấtmớiPT26vàchấtsosánh[4-(3-hydroxypropyl)-2methoxyphenol β-D-apiofuranosyl(1—6)-β-D-glucopyranoside 54 Bảng3.4.Hoạt tínhức chếsản sinhNOcủacácchất phânlập từdứadại Pandanustonkinensis 59 Bảng 3.5.Hoạttính ứcchế peroxyhóalipid màngtếbàocủacácchất phân lậptừdứadạiPandanustonkinensis 60 Bảng 3.6 Chương trình pha động acid formic 0,1%/acetonitrile 61 Bảng 3.7 Chương trình pha động acid formic 0,1%/acetonitrile… .63 Bảng 3.8.Số liệuphổNMRcủa hợp chất PT2B1Avàchấtsosánhpinorecinol4’-O-βD-glucopyranoside .69 Bảng3.9.Sốliệu phổNMR chấtPT2D1AvàchấtsosánhvladinolF.75Bảng3.10.Kết hợp xácđịnhđộ tinhkhiếtcủahợp chấtPT20-pinorecinol 4’-O-β-D-glucopyranoside 80 Bảng 3.11.Kết xácđịnhđộ tinhkhiếtcủa hợp chất PT6–vladinolF 81 Bảng3.12.Kếtquả diệntích cácchất đánh dấutrongDứa dạiPandanustonkinensischiếtbằngethanol50% 82 Bảng 3.13.Kết diệntíchcácchất đánh dấutrongdứa dạiPandanustonkinensischiếtbằngmethanol50% 83 Bảng3.14.Kết quảdiện tíchcácchấtđánhdấu trongdứa dạiPandanustonkinensischiếtbằngethanol50%vàmethanol50% 83 Bảng 3.15.Chươngtrình phađộng địnhlượng PT20vàPT6trongdượcliệudứadạiPandanustonkinensis .84 Bảng3.16.Sosánhthời gianlưucủacác pic trênsắckýđồcủa dungdịch chuẩnhỗnhợp, dung dịchthửvàmẫutrắng 86 Bảng3.17.KếtquảpicPT20,PT6 thuđược trênsắckýđồ dung dịchchuẩn hỗnhợp (1)vàdung dịchchuẩnhỗnhợp(2) 88 Bảng3.18 Kết khảo sátkhoảng đường chuẩnđểđịnh lượngPT20vàPT690 Bảng3.19.Kết khảo sátđộlặplại 91 Bảng3.20.Kết khảo sátđộtái lặp củaphươngpháp 92 Bảng3.21 Kết đánh giáđộđúng củaphươngpháp 93 Bảng 3.22.Kếtquảđịnhlượng pinoresinol (PT20)vàvladinolF(PT6)trongdứadạiPandanus 4-O-beta-D-glucopyranoside tonkinensislấy tạimộtsố địaphương .96 DANH MỤC HÌNH Hình1.1 Hình ảnh mộtsốlồithuộcchiPandanus[12] .8 Hình2.1.Mẫutiêu quảPandanus tonkinensisMart.exB.Stone 23 Hình2.2.Sơđồphân lập cáchợp chấttừ quảPandanustonkinensis 32 Hình2.3.Sơđồphânlậpcáchợp chấttừrễPandanustonkinensis .35 Hình3.1.Cấu trúc hóahọccáchợpchấtđược phân lậptừ quảPandanustonkinensis.36 Hình 3.2.Cấutrúchóahọccác hợp chấtđượcphânlậptừrễPandanustonkinensis 39 Hình 3.3.Cấu trúc hóa học tương tác HMBC hợpchấtPT10… 40 Hình3.4.Phổ ECD đượctínhtốnlýthuyết của2đồng phân lậpthểcóthểcó vàCDthửnghiệmcho hợpchấtPT10 .41 Hình3.5.Phổ HR-ESI-MScủahợpchấtPT10 43 Hình3.6.Phổ1HNMRcủahợpchấtPT10 43 Hình3.7.Phổ13CNMRcủahợpchấtPT10 44 Hình3.8.Phổ HMBCcủa hợpchấtPT10 44 Hình3.9.Phổ HSQCcủa hợpchấtPT10 45 Hình 3.10.PhổCD củahợpchấtPT10 .45 Hình3.11.Cấu trúc hóahọcvàtươngtác HMBCcủahợpchấtPT25 46 Hình3.12.PhổHR-ESI-MScủa hợpchấtPT25 49 Hình3.13.Phổ1HNMRcủahợpchấtPT25 49 Hình3.14.Phổ13CNMRcủahợpchấtPT25 .50 Hình3.15.Phổ HMBCcủahợpchấtPT25 50 Hình3.16.PhổHSQC củahợpchấtPT25 51 Hình3.17.PhổCOSY củahợpchấtPT25 51 Hình3.18.Phổ NOESYcủahợpchấtPT25 .52 Hình3.19 Cấu trúc hóahọcvàtươngtác HMBCcủahợpchấtPT26 53 Hình3.20.PhổHR-ESI-MScủahợpchấtPT26 55 Hình3.21.Phổ1HNMRcủahợpchấtPT26 55 Hình3.22.Phổ13CNMRcủahợpchấtPT26 .56 Hình 3.23.Phổ HMBCcủahợpchấtPT26 .56 Hình 3.24.PhổHSQC củahợpchấtPT26 57 Hình 3.25.PhổCOSY củahợpchấtPT26 57 Hình 3.26.Phổ NOESYcủahợpchấtPT26 58 Hình3.27.Sắcký đồphân tíchsơbộmẫudượcliệuvàmẫudược liệu thêmchuẩn .62 Hình 3.28.Sắckýđồ phânđoạnPT2A-D 64 Hình 3.29.SosánhphổUVcủa phân đoạnPT2BvàchấtPT20, phânđoạnPT2DvàchấtPT6 65 Hình3.30.SắckýđồHPLCcủaphânđoạn PT2B1 .65 Hình3.31.SắckýđồHPLCcủaphânđoạn PT2D1 66 Hình3.32.Sơđồ chiết xuấtvàtinhchếchấtđánhdấu 67 Hình 3.33.Cấu trúc hóahọcvàtươngtác HMBCcủahợp chấtPT2B1A 68 Hình3.34 PhổHR-ESI-MScủahợpchấtPT2B1A 70 Hình3.35 Phổ1HNMRcủahợpchấtPT2B1A 70 Hình 3.36.Phổ13CNMRcủahợpchấtPT2B1A 71 Hình 3.37.PhổHSQC củahợp chấtP T PT2B1A 71 Hình 3.38.Phổ HMBCcủahợpchấtPT2B1A 72 Hình3.39 PhổUV củahợpchấtPT2B1A 72 Hình3.40 PhổIRcủahợpchấtPT2B1A 73 Hình3.41.Cấu trúc hóahọcvàtươngtác HMBCcủahợpchấtPT2D1A 73 Hình3.42 PhổHR-ESI-MScủa hợpchấtPT2D1A 76 Hình 3.43.Phổ1H-NMRcủahợpchấtPT2D1A 76 Hình3.44 Phổ13C-NMRcủahợpchấtPT2D1A .77 Hình 3.45.PhổHSQC củahợpchấtPT2D1A 77 Hình 3.46.Phổ HMBCcủahợpchấtPT2D1A 78 Hình3.47.PhổUV củahợpchấtPT2D1A 78 Hình3.48.PhổIRcủa hợpchấtPT2D1A 79 Hình 3.49.Sắckýđồphântíchđộ tinh khiết củaPT20mẫubơmlần1 80 Hình3.50.Sắckýđồphântíchđộ tinh khiết củaPT6mẫubơmlần1 81