Nghiên cứu bệnh lá vàng greening hại cây ăn quả có múi ở một số tỉnh phía bắc việt nam và đề xuất biện pháp phòng chống

BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO BỘ NÔNG NGHIỆP VÀ PTNT VIỆN KHOA HỌC NÔNG NGHIỆP VIỆT NAM LÊ MAI NHẤT NGHIÊN CỨU BỆNH VÀNG LÁ GREENING HẠI CÂY ĂN QUẢ CĨ MÚI Ở MỘT SỐ TỈNH PHÍA BẮC VIỆT NAM VÀ ĐỀ XUẤT BIỆN PHÁP PHÒNG CHỐNG LUẬN ÁN TIẾN SĨ NÔNG NGHIỆP HÀ NỘI, 2014 Tai ngay!!! Ban co the xoa dong chu nay!!! BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO BỘ NÔNG NGHIỆP VÀ PTNT VIỆN KHOA HỌC NÔNG NGHIỆP VIỆT NAM LÊ MAI NHẤT NGHIÊN CỨU BỆNH VÀNG LÁ GREENING HẠI CÂY ĂN QUẢ CÓ MÚI Ở MỘT SỐ TỈNH PHÍA BẮC VIỆT NAM VÀ ĐỀ XUẤT BIỆN PHÁP PHÒNG CHỐNG Chuyên ngành: Bảo vệ thực vật Mã số: 62.62.01.12 LUẬN ÁN TIẾN SĨ NÔNG NGHIỆP Người hướng dẫn khoa học: TS Ngô Vĩnh Viễn PGS.TS Nguyễn Văn Viết Hà Nội, 2014 i LỜI CAM ĐOAN Tơi xin cam đoan cơng trình nghiên cứu riêng Các số liệu, kết nêu luận án trung thực chưa công bố cơng trình khác Hà Nội, ngày tháng năm 2014 Tác giả luận án Lê Mai Nhất ii LỜI CẢM ƠN! Để hoàn thành luận án này, nhận giúp đỡ mặt cấp Lãnh đạo, tập thể cá nhân Trước hết xin chân thành bày tỏ lịng biết ơn sâu sắc kính trọng tới TS Ngô Vĩnh Viễn PGS.TS Nguyễn Văn Viết, người thầy tận tình bảo, hướng dẫn chuyên môn phương pháp luận suốt q trình thực đề tài ln chia sẻ, động viên để tơi hồn thành luận án Luận án thực Bộ môn Bệnh cây, Viện Bảo vệ thực vật số vùng trồng ăn có múi miền Bắc, Việt Nam Tôi nhận giúp đỡ Ban Lãnh đạo Viện Bảo vệ thực vật; Tập thể cán Bộ mơn Bệnh cây; Phịng Khoa học hợp tác quốc tế suốt trình thực đề tài nghiên cứu Tôi xin chân thành cảm ơn giúp đỡ q báu dành cho tơi Tơi xin gửi lời cảm ơn GS Hong Ji Su tạo điều kiện giúp đỡ tơi vật tư, hóa chất cho hướng nghiên cứu bệnh cây, chia sẻ kinh nghiệm đồng thời tìm nguồn kinh phí để giúp tơi học tập làm thí nghiệm Trường Đại học tổng hợp Đài Loan, tham dự Hội nghị quốc tế bệnh Huanglongbing Chân thành cảm ơn bạn đồng nghiệp nhóm nghiên cứu bệnh hại ăn có múi, nơi mà công tác nhiều năm, nơi sinh hoạt chuyên môn chia sẻ kinh nghiệm quý báu nghiên cứu giúp đỡ phương diện Tôi xin gửi lời cảm ơn tới Lãnh đạo Viện Khoa học Nông nghiệp Việt Nam, Ban Đào tạo Sau đại học tập thể cán quý thầy cô giúp đỡ suốt trình học tập, nghiên cứu thực luận án Xin ghi nhận nơi tình cảm yêu thương vợ, con, cha mẹ, anh chị em toàn thể bạn bè, đồng nghiệp ln hết lịng động viên tinh thần suốt thời gian học tập hoàn thành luận án Xin chân thành cảm ơn! Lê Mai Nhất iii MỤC LỤC Lời cam đoan i Lời cảm ơn ii Mục lục iii Dang mục chữ viết tắt iv Danh mục bảng v Danh mục hình vi MỞ ĐẦU Tính cấp thiết đề tài Mục tiêu yêu cầu đề tài 3 Ý nghĩa khoa học thực tiễn đề tài Đối tượng phạm vi nghiên cứu đề tài Những đóng góp luận án CHƯƠNG I CƠ SỞ KHOA HỌC VÀ TỔNG QUAN TÀI LIỆU 1.1 Cơ sở khoa học đề tài 1.2 Tình hình nghiên cứu ngồi nước 1.2.1 Ngn gốc phân loại ăn có múi 1.2.2 Nghiên cứu bệnh vàng greening 1.2.2.1 Triệu chứng, lịch sử phát hiện, phân bố bệnh vàng greening 1.2.2.2 Chẩn đoán giám định bệnh vàng greening 11 1.2.3 Nghiên cứu dịch tễ sinh thái học bệnh vàng greening 14 iii 1.2.3.1 Nghiên cứu lan truyền bệnh vàng greening 14 1.2.3.2 Đặc điểm sinh học, sinh thái rầy chổng cánh Diaphorina 15 citri Kuwayama 1.2.3.3 Nghiên cứu ký chủ rầy chổng cánh Diaphorina citri 19 vi khuẩn Liberibacter asiaticus 1.2.4 Nghiên cứu giải pháp quản lý bệnh vàng greening 20 1.2.4.1 Mối quan hệ phân bón với sinh trưởng suất 20 1.2.4.2 Sử dụng giống bệnh 21 1.2.4.3 Nghiên cứu ảnh hưởng gốc ghép đến sản xuất 23 ăn có múi 1.2.4.4 Trồng xen ổi vườn ăn có múi 23 1.2.4.5 Biện pháp sinh học phịng trừ trùng môi giới 24 (Diaphorina citri Kuwayama) 1.2.4.6 Biện pháp hóa học phịng trừ trùng mơi giới 24 (Diaphorina citri Kuwayama) 1.3 Tình hình nghiên cứu nước 26 1.3.1 Cây ăn có múi Việt Nam thành phần sâu bệnh hại 26 1.3.2 Nghiên cứu bệnh vàng greening nguyên nhân gây bệnh 28 1.3.2.1 Lịch sử phân bố bệnh vàng greening 28 1.3.2.2 Triệu chứng bệnh vàng greening 28 1.3.2.3 Chẩn đoán giám định bệnh vàng greening 30 1.3.3 Nghiên cứu dịch tễ học bệnh vàng greening 30 1.3.3.1 Nghiên cứu lan truyền bệnh vàng greening 30 1.3.3.2 Nghiên cứu ký chủ rầy chổng cánh Diaphorina citri 31 vi khuẩn Liberibacter asiaticus 1.3.4 Nghiên cứu giải pháp quản lý bệnh vàng greening 33 iii 1.3.4.1 Sử dụng giống bệnh 33 1.3.4.2 Biện pháp cánh tác cải thiện giống ăn có múi 35 1.3.4.3 Biện pháp sinh học phịng trừ côn trùng môi giới 37 (Diaphorina citri Kuwayama) 1.3.4.4 Biện pháp hóa học phịng trừ trùng mơi giới 39 (Diaphorina citri Kuwayama) CHƯƠNG II 41 VẬT LIỆU, NỘI DUNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 2.1 Địa điểm thời gian nghiên cứu 41 2.2 Vật liệu nghiên cứu 41 Nội dung nghiên cứu 42 2.4 Phương pháp nghiên cứu 42 2.4.1 Phương pháp nghiên cứu mức độ phổ biến triệu chứng 42 bệnh vàng greening 2.4.1.1 Phương pháp điều tra tỷ lệ bệnh mức độ phổ biến 42 đồng ruộng 2.4.1.2 Phương pháp xác định dạng triệu chứng bệnh vàng 43 greening ăn có múi số tỉnh miền Bắc Việt Nam 2.4.1.3 Phương pháp điều tra rầy chổng cánh (Diaphorina citri 44 Kuwayama) ăn có múi 2.4.2 Phương pháp nghiên cứu giám định tác nhân gây bệnh 44 lan truyền bệnh vàng greening 2.4.2.1 Phương pháp xác định tác nhân gây bệnh hiển vi điện tử 44 2.4.2.2 45 Phương pháp chẩn đoán bệnh vàng greening iii sinh học phân tử 2.4.2.3 Phương pháp nghiên cứu lan truyền bệnh vàng greening 46 qua hạt giống 2.4.2.4 Phương pháp nghiên cứu lan truyền bệnh vàng greening 47 qua nhân giống vô tính 2.4.2.5 Phương pháp nghiên cứu lan truyền bệnh vàng greening 47 môi giới rầy chổng cánh (Diaphorina citri Kuwayama) 2.4.3 Phương pháp nghiên cứu xác định ký chủ phân bố 49 chủng vi khuẩn gây bệnh vàng greening ăn có múi số tỉnh phía Bắc Việt Nam 2.4.3.1 Phương pháp xác định ký chủ bệnh vàng greening 49 2.4.3.2 Phương pháp đánh giá mức độ nhiễm mẫu bệnh vàng 50 greening chủng loại có múi khác 2.4.3.3 Phương pháp xác định chủng vi khuẩn gây bệnh vàng 51 greening 2.4.3.4 Phương pháp cải tiến tách chiết DNA dùng chẩn đoán 52 bệnh vàng greening sinh học phân tử 2.4.4 Phương pháp nghiên cứu giải pháp phòng chống bệnh vàng 52 greening 2.4.4.1 Phương pháp vi ghép đỉnh sinh trưởng 52 2.4.4.2 Phương pháp nghiên cứu làm tăng tỷ lệ sống bệnh 53 vi ghép đỉnh sinh trưởng 2.4.4.3 Phương pháp cải tiến vi ghép đỉnh sinh trưởng 54 2.4.4.4 Phương pháp sản xuất giống bệnh 54 2.4.4.5 Phương pháp đánh giá tính chống chịu gốc ghép 58 iii sử dụng sản xuất giống bệnh vàng greening 2.4.4.6 Phương pháp nghiên cứu chống tái nhiễm bệnh vàng 58 greening đồng ruộng 2.5 Xử lý số liệu thí nghiệm 59 CHƯƠNG III 60 KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU VÀ THẢO LUẬN 3.1 Mức độ phổ biến triệu chứng bệnh vàng greening 60 3.1.1 Hiện trạng sử dụng giống ăn có múi Hà Nội Hịa 60 Bình 3.1.2 Mức độ phổ biến bệnh vàng greening vùng điều tra 62 3.1.3 Mức độ nhiễm bệnh vàng greening số chủng loại 64 có múi vùng sinh thái 3.1.4 Mức độ nhiễm bệnh vàng greeining hỗn hợp với bệnh vi 66 rút, viroid ăn có múi 3.1.5 Xác định nhóm triệu chứng bệnh vàng greening qua phân tích 68 sinh học phân tử 3.1.6 Kiểm chứng khả nhiễm bệnh vàng greening đồng 73 ruộng dựa triệu chứng xác định 3.1.7 Cải tiến phương pháp tách chiết thơ DNA chẩn đốn bệnh 77 vàng greening ăn có múi 3.2 Xác định tác nhân gây bệnh lan truyền bệnh vàng greening 79 3.2.1 Xác định tác nhân gây bệnh vàng greening hiển vi điện tử 79 3.2.2 Xác định tác nhân gây bệnh vàng greening sinh học phân 81 tử iii 3.2.3 Khả lan truyền bệnh vàng greening ăn có múi 82 3.2.3.1 Nghiên cứu lan truyền bệnh vàng greening qua hạt giống 82 3.2.3.2 Nghiên cứu lan truyền bệnh vàng greening qua nhân giống 84 vơ tính 3.2.3.3 Nghiên cứu lan truyền bệnh vàng greening qua rầy chổng 86 cánh Diaphorina citri Kuwayama 3.2.3.4 Mật độ rầy chổng cánh Diaphorina citri Kuwayama ăn 91 có múi 3.3 Nghiên cứu xác định ký chủ phân bố chủng vi khuẩn 96 gây bệnh vàng greening ăn có múi phía Bắc Việt Nam 3.3.1 Ký chủ bệnh vàng greening 96 3.3.2 Xác định chủng vi khuẩn gây bệnh vàng greening qua phản ứng 98 số chủng loại ăn có múi với nguồn bệnh 3.4 Nghiên cứu biện pháp phòng chống bệnh vàng greening 112 3.4.1 Nghiên cứu cải tiến kỹ thuật vi ghép đỉnh sinh trưởng tạo đầu 113 dòng bệnh 3.4.1.1 Nghiên cứu cải tiến kỹ thuật tạo gốc ghép lần vi 113 ghép đỉnh sinh trưởng 3.4.1.2 Nghiên cứu cải tiến môi trường lỏng để nuôi vi ghép lần 117 3.4.1.3 Biện pháp làm tăng tỷ lệ bệnh vàng greening 120 có múi 3.4.1.4 Ảnh hưởng tuổi vi ghép lần đến sinh trưởng 122 phát triển vi ghép lần 3.4.2 Sản xuất giống có múi bệnh hệ thống nhà lưới cấp 125 169 159 Wenninger EJ & Hall DG (2008b), “Importance ofmultiplemating to female reproductive output in Diaphorina citri”, Physiological Entomology 33: 316–321 160 Wenninger EJ, Stelinski LL & Hall DG(2008), Behavioral evidence for a female-produced sex attractant in Diaphorina citri (Hemiptera: Psyllidae) Entomologia Experimentalis et Applicata 128: 450–459 161 Wenninger EJ, Hall DG &Mankin RW (2009a), Vibrational communication between the sexes in Diaphorina citri (Hemiptera: Psyllidae), Annals of the Entomological Society of America 102: 547–555 162 Wenninger EJ, Stelinski LL & Hall DG (2009b), Roles of olfactory cues, visual cues, and mating status in orientation of Diaphorina citri Kuwayama (Hemiptera: Psyllidae) to four different host plants, Environmental Entomology 38: 225–234 163 Xu CF, Xia YH, Li KB & Ke C (1988), Further study of the transmission of citrus huanglongbing by a psyllid, Diaphorina citri Kuwayama, Proceedings of the 10th Conference of the International Organization of Citrus Virologists, 17–21 November 1986, Valencia, Spain (ed by LW Timmer, SM Garnsey & L Navarro), pp 243–248, International Organization of Citrus Virologists, University of California, Riverside, CA, USA 164 Yi Yi Myint and Thein Lwin (2012), The current status of HLB epidemic in Myanmar, International Symposium on Epidemiology and disease management of citrus Huanglongbing disease for sustainable citrus production in the ASPAC Region, NTU, II-1, November – 10, 2012 170 PHỤ LỤC Phụ lục 1: Một số bước tiến hành vi ghép đỉnh sinh trưởng PL1.1 Dụng cụ cần thiết tiến hành vi ghép đỉnh sinh trưởng PL 1.2 Chồi trước vi ghép lần PL 1.3 Các loại môi trường sử dụng vi ghép đỉnh sinh trưởng PL 1.4 Cây cam ba làm gốc ghép lần PL 1.5 Cắt bỏ rễ, thân trước vi ghép đỉnh sinh trưởng lần PL 1.6 Kỹ thuật cắt hình tam giác ngược 171 Phụ lục 2: Một số quy trình chẩn đốn bệnh ăn có múi Phương pháp Iodine bao gồm bước sau Thu thập có triệu chứng bị vàng đồng ruộng bảo quản túi nilon Dùng miếng giấy ráp x 2cm chà lên bề mặt vừa thu thập Miếng giấy ráp vừa thu cho vào túi nilon có chứa 1ml nước tinh khiết sử dụng lượng nước để rửa miếng giấy ráp vừa chà sát bề mặt Cho giọt dung dịch Iodine vào dung dịch vừa thu trộn Quan sát biến mầu của dung dịch cho Iodine vào, mẫu bị bệnh biểu màu đen nâu đen, mẫu không bị bệnh greening giữ nguyên màu vàng thịt Iodine kit - Iodine solution - KI 3% ; I2 5% 2.2 Phương pháp chẩn đoán bệnh tatter leaf 2.2.1 Tách chiết ARN từ mô thực vật - Cân 0,3 gam nghiền ni tơ lỏng, sau cho ml dung dịch TRIzol buffer - Ly tâm 12.000 vòng 10 phút - Lấy ml dung dịch phía chuyển sang tube mới, mẫu cho thêm 200 l Chloroform - Lắc nhẹ máy vortex 30 giây - Ly tâm 12.000 vòng 10 phút - Dùng pipét lấy 600 l dung dịch phía cho sang tube - Thêm 300 l isopropanol 300 l 0.8 M muối nát ri/1.2 M NaCl, lắc nhẹ - Ly tâm 12.000 vòng 40C 15 phút - Rửa kết tủa với 500 l công 75% - Làm khô kết tủa từ 10 – 12 phút - làm tan kết tủa 80 l nước cất khử trùng 172 2.2.2 RT-PCR Phản ứng PCR Tổng số/tube Dd H20 11,5 l 5X Superscript II buffer 2,5 l 10X tag buffer 2,5 l 100 mM DTT 1,25 l 25 mM MgCl2 1,25 l 10 mM dNTPs 2,0 l Tag polymerase (BRL Bertag) 0,25 l Superscript II polymerase 0,25 l CTLV primer 1,0 l RNA template 2,5 l 2.2.3 PCR Bước 1: 500C 35 phút; 940C phút Bước 2: 940C 30 giây; 560C 30 giây; 680C 45 giây (10 chu kỳ) Bước 3: 940C 30 giây; 560C 30 giây; 680C 45 giây (25 chu kỳ) Bước 4: 670C phút 3.Phương pháp giám định bệnh tristeza ELISA Bước 1: Chuẩn bị đĩa phản ứng Kháng thể đơn dịng lai đơn tính vi rút tristeza pha lỗng nồng độ thích hợp nhỏ vào giếng đĩa ELISA 100l Sau ủ tủ định ơn 370C tiếng Bước 2: Chuẩn bị dịch mẫu (Kháng nguyên) 173 Mẫu thu rửa , tách gân cân 0,5gram/mẫu Nghiền mẫu ml dung dịch nghiền, gạn lấy 1,5 ml phần dịch vào eppendoft, ly tâm 3.000 vòng/phút phút Bước 3: Rửa đĩa PBS-t (3 – lần) Bước 4: Tạo phản ứng kháng thể - kháng nguyên Nhỏ 100l dịch mẫu vào lỗ giếng (mỗi mẫu cặp lỗ), sau ủ tủ định ơn 370C tiếng Bước 5: Rửa đĩa PBS-t (3 – lần) Bước 6: Tạo phản ứng kháng thể - kháng nguyên - Chất cộng hợp (kháng thể gắn enzym) Nhỏ 100l chất cộng hợp pha loãng nồng độ thích hợp vào lỗ, sau ủ tủ định ôn 370C tiếng Bước 7: Rửa đĩa PBS-t (3 – lần) Bước 8: Tạo phản ứng màu Viên phản ứng pha dung môi phản ứng với nồng độ 1mg/ml nhỏ 100l vào lỗ giếng, ủ tủ định ôn 370C, sau tiến hành kiểm tra kết thời gian 30, 60 90 phút sau nhỏ dịch phản ứng Phương pháp kết luận: Căn vào màu vàng đặc trưng phản ứng mẫu đối chứng bệnh màu suốt mẫu đối chứng khoẻ Nếu đối chứng có màu vàng đồng thời đối chứng khoẻ suốt: Phản ứng cho kết tốt Tiếp tục so sánh mẫu kiểm tra với đối chứng, mẫu có màu vàng đối chứng bệnh mẫu nhiễm bệnh tương tự mẫu khoẻ Mức độ đậm nhạt màu vàng biểu thị mức độ nặng nhẹ mẫu nhiễm Kết quan sát mắt thường số hoá cụ thể máy đọc ELISA bước sóng 405nm 174 Phương pháp chẩn đốn bệnh exocortis 4.1 Tách chiết acid nucleic từ mô thực vật - Thu mẫu - Cân 0,5 gam nghiền ni tơ lỏng, sau cho 2,7 ml dung dịch chiết - Thêm 0,3 ml sarkosyl 10% giữ 550C - Ly tâm 4.000 vòng phút, lấy 0,8 ml dung dịch phía - Thêm 100 l 5M NaCl 100 l CTAB/NaCl 10%, sau ủ 650C 10 phút - Thêm 600 l Chloroform/Isoamyl alcohol (24:1) lắc mạnh - Ly tâm 10.000 vòng 10 phút, thu phần dung dịch phía - Thêm 500 l Phenol/Chloroform/Isoamyl alcohol (25:24:1) lắc mạnh - Ly tâm 10.000 vòng 10 phút lấy 0,6ml phía - Thêm 0,36 ml isopropanol lắc nhẹ nhàng - Ly tâm 10.000 vòng 10 phút 40C thu kết tủa - Rửa kết tủa với 500 l công 70% - Làm khô kết tủa máy hút chân khơng nhiệt độ phịng từ 10 – 12 phút - Làm tan kết tủa 100 l dung dịch TE 4.2 Two Step RT-PCR (1) Phản ứng RT Tổng số/tube Reverse primer (1 M/l) l dNTPs (10mM) l Template ARN l Tổng 13 l 175 650C phút Giữ đá 5X RT buffer l 0.1 M ĐT l SSRT II RT enzyme (200U/l) 1l Tổng số 20 l hỗn hợp, ly tâm nhẹ 420C 50 phút (2) Phản ứng PCR Phản ứng PCR Tổng số/tube Dd H20 19,25 l 10X PCR buffer (with 15mM MgCl2) 2,5 l 10 mM dNTPs 1,0 l CEVd primer pair 1,0 l Taq DNA polymerase 0,25 l cDNA RT product 1,0 l Tổng 25 l 4.3 PCR Bước 1: 940C phút Bước 2: 940C 1phút; 620C phút; 720C phút (30 chu kỳ) Bước 3: 720C 10 phút Bước 4: Giữ 40C (3) CEVd primer pair (PCR product 332bp) Forward: 5’-GCTCCACATCCGATCGTC-3’ Reverse: 5’-TGGACGCCAGTGATCCGC-3’ 176 Phụ lục 3: Xử lý số liệu thí nghiệm CHIỀU CAO CAM BA LÁ SAU 14 VÀ 21 NGÀY BALANCED ANOVA FOR VARIATE 14N FILE CCCAM 23/8/2010 10: :PAGE VARIATE V002 14N LN SOURCE OF VARIATION DF LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= CT 110822 554111E-01 1.59 0.279 * RESIDUAL 208934 348223E-01 * TOTAL (CORRECTED) 319756 399695E-01 BALANCED ANOVA FOR VARIATE 21N FILE CCCAM 23/8/2010 10: :PAGE VARIATE V003 21N SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= CT 263356 131678 17.48 0.004 * RESIDUAL 452000E-01 753334E-02 * TOTAL (CORRECTED) 308556 385695E-01 TABLE OF MEANS FOR FACTORIAL EFFECTS FILE CCCAM 23/8/2010 10: :PAGE MEANS FOR EFFECT CT CT NOS 3 14N 5.70000 5.77333 5.96333 21N 5.88667 6.05667 6.30333 SE(N= 3) 0.107738 0.501110E-01 5%LSD 6DF 0.372682 0.173342 ANALYSIS OF VARIANCE SUMMARY TABLE FILE CCCAM 23/8/2010 10: :PAGE F-PROBABLIITY VALUES FOR EACH EFFECT IN THE MODEL SECTION - VARIATE 14N 21N GRAND MEAN (N= 9) NO OBS 5.8122 6.0822 STANDARD DEVIATION C OF V |CT SD/MEAN | BASED ON BASED ON % | TOTAL SS RESID SS | 0.19992 0.18661 3.2 0.2791 0.19639 0.86795E-01 1.4 0.0037 | | | | 177 ĐƯỜNG KÍNH GỐC GHÉP CAM BA LÁ SAU 14 VÀ 21 NGÀY BALANCED ANOVA FOR VARIATE 14N FILE DKCAM 23/8/2010 8:32 :PAGE VARIATE V002 14N LN SOURCE OF VARIATION DF LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= CT 306889E-01 153444E-01 8.74 0.017 * RESIDUAL 105333E-01 175556E-02 * TOTAL (CORRECTED) 412222E-01 515278E-02 BALANCED ANOVA FOR VARIATE 21N FILE DKCAM 23/8/2010 8:32 :PAGE VARIATE V003 21N SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= CT 151667 758333E-01 23.29 0.002 * RESIDUAL 195333E-01 325556E-02 * TOTAL (CORRECTED) 171200 214000E-01 TABLE OF MEANS FOR FACTORIAL EFFECTS FILE DKCAM 23/8/2010 8:32 :PAGE MEANS FOR EFFECT CT CT NOS 3 14N 0.933333 1.05000 1.06333 21N 1.19333 1.51000 1.32667 SE(N= 3) 0.241906E-01 0.329422E-01 5%LSD 6DF 0.836792E-01 0.113952 ANALYSIS OF VARIANCE SUMMARY TABLE FILE DKCAM 23/8/2010 8:32 :PAGE F-PROBABLIITY VALUES FOR EACH EFFECT IN THE MODEL SECTION - VARIATE 14N 21N GRAND MEAN (N= 9) NO OBS 1.0156 1.3433 STANDARD DEVIATION C OF V |CT SD/MEAN | BASED ON BASED ON % | TOTAL SS RESID SS | 0.71783E-010.41899E-01 4.1 0.0173 0.14629 0.57057E-01 4.2 0.0019 | | | | 178 CHIỀU CAO GỐC GHÉP LẦN (GỐC CHẤP VÀ BƯỞI CHUA) BALANCED ANOVA FOR VARIATE 14N FILE CCCBUOI 23/10/2010 9: :PAGE VARIATE V002 14N LN SOURCE OF VARIATION DF LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= CT 952016 952016 36.18 0.005 * RESIDUAL 105267 263167E-01 * TOTAL (CORRECTED) 1.05728 211457 BALANCED ANOVA FOR VARIATE 21N FILE CCCBUOI 23/10/2010 9: :PAGE VARIATE V003 21N SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= CT 2.57415 2.57415 58.19 0.003 * RESIDUAL 176934 442335E-01 * TOTAL (CORRECTED) 2.75108 550217 TABLE OF MEANS FOR FACTORIAL EFFECTS FILE CCCBUOI 23/10/2010 9: :PAGE MEANS FOR EFFECT CT CT NOS 3 14N 5.64000 6.43667 21N 6.10333 7.41333 SE(N= 3) 0.936602E-01 0.121427 5%LSD 4DF 0.367128 0.475967 ANALYSIS OF VARIANCE SUMMARY TABLE FILE CCCBUOI 23/10/2010 9: :PAGE F-PROBABLIITY VALUES FOR EACH EFFECT IN THE MODEL SECTION - VARIATE 14N 21N GRAND MEAN (N= 6) NO OBS 6.0383 6.7583 STANDARD DEVIATION C OF V |CT SD/MEAN | BASED ON BASED ON % | TOTAL SS RESID SS | 0.45984 0.16222 2.7 0.0050 0.74177 0.21032 3.1 0.0025 | | | | 179 ĐƯỜNG KÍNH GỐC GHÉP LẦN (GỐC GHÉP CHẤP VÀ BƯỞI CHUA) BALANCED ANOVA FOR VARIATE 14N FILE DKCBUOI 23/10/2010 10:10 :PAGE VARIATE V002 14N LN SOURCE OF VARIATION DF LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= CT 220417 220417 132.25 0.001 * RESIDUAL 666671E-02 166668E-02 * TOTAL (CORRECTED) 227083 454167E-01 BALANCED ANOVA FOR VARIATE 21N FILE DKCBUOI 23/10/2010 10:10 :PAGE VARIATE V003 21N SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= CT 312817 312817 49.13 0.003 * RESIDUAL 254667E-01 636667E-02 * TOTAL (CORRECTED) 338283 676567E-01 TABLE OF MEANS FOR FACTORIAL EFFECTS FILE DKCBUOI 23/10/13 10:10 :PAGE MEANS FOR EFFECT CT CT NOS 3 14N 1.03000 1.41333 21N 1.32000 1.77667 SE(N= 3) 0.235703E-01 0.460676E-01 5%LSD 4DF 0.923905E-01 0.180575 ANALYSIS OF VARIANCE SUMMARY TABLE FILE DKCBUOI 23/10/2010 10:10 :PAGE F-PROBABLIITY VALUES FOR EACH EFFECT IN THE MODEL SECTION - VARIATE 14N 21N GRAND MEAN (N= 6) NO OBS 1.2217 1.5483 STANDARD DEVIATION C OF V |CT SD/MEAN | BASED ON BASED ON % | TOTAL SS RESID SS | 0.21311 0.40825E-01 3.3 0.0009 0.26011 0.79791E-01 5.2 0.0032 | | | | 180 Thí nghiệm ảnh hưởng tuổi gốc ghép lần đến tỷ lệ sống sau vi ghép với gốc cam trưng vương BALANCED ANOVA FOR VARIATE VAR02 FILE NHAT1 14/11/2011 9:28 :PAGE VARIATE V002 VAR02 LN SOURCE OF VARIATION DF LN SOURCE OF VARIATION DF LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= VAR01 972.000 324.000 15.25 0.001 * RESIDUAL 170.000 21.2500 * TOTAL (CORRECTED) 11 1142.00 103.818 BALANCED ANOVA FOR VARIATE VAR03 FILE NHAT1 14/11/2011 9:28 :PAGE VARIATE V003 VAR03 SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= VAR01 5808.00 1936.00 53.41 0.000 * RESIDUAL 290.000 36.2500 * TOTAL (CORRECTED) 11 6098.00 554.364 BALANCED ANOVA FOR VARIATE VAR04 FILE NHAT1 14/11/2011 9:28 :PAGE VARIATE V004 VAR04 SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= VAR01 7521.00 2507.00 30.57 0.000 * RESIDUAL 656.000 82.0000 * TOTAL (CORRECTED) 11 8177.00 743.364 TABLE OF MEANS FOR FACTORIAL EFFECTS FILE NHAT1 14/11/2011 9:28 :PAGE MEANS FOR EFFECT VAR01 VAR01 NOS 3 3 VAR02 10.0000 34.0000 28.0000 20.0000 VAR03 10.0000 26.0000 38.0000 70.0000 VAR04 80.0000 40.0000 36.0000 10.0000 SE(N= 3) 2.66145 3.47611 5.22813 5%LSD 8DF 8.67873 11.3352 17.0484 - ANALYSIS OF VARIANCE SUMMARY TABLE FILE NHAT1 14/11/2011 9:28 :PAGE F-PROBABLIITY VALUES FOR EACH EFFECT IN THE MODEL SECTION - VARIATE VAR02 VAR03 VAR04 GRAND MEAN (N= 12) NO OBS 12 23.000 12 36.000 12 41.500 STANDARD DEVIATION C OF V |VAR01 SD/MEAN | BASED ON BASED ON % | TOTAL SS RESID SS | 10.189 4.6098 20.1 0.0013 23.545 6.0208 16.8 0.0000 27.265 9.0554 21.8 0.0002 | | | | 181 Thí nghiệm Ảnh hưởng BAP đến tỷ lệ sống vi ghép đỉnh sinh trưởng lần giống bưởi phục hòa BALANCED ANOVA FOR VARIATE VAR02 FILE NHAT2 14/ 11/2011 10: :PAGE VARIATE V002 VAR02 LN SOURCE OF VARIATION DF LN SOURCE OF VARIATION DF LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= VAR01 436.342 145.447 7.14 0.012 * RESIDUAL 163.060 20.3825 * TOTAL (CORRECTED) 11 599.403 54.4911 BALANCED ANOVA FOR VARIATE VAR03 FILE NHAT2 14/11/2011 10: :PAGE VARIATE V003 VAR03 SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= VAR01 16.9425 5.64750 10.18 0.005 * RESIDUAL 4.44000 555000 * TOTAL (CORRECTED) 11 21.3825 1.94386 BALANCED ANOVA FOR VARIATE VAR04 FILE NHAT2 14/11/2011 10: :PAGE VARIATE V004 VAR04 SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= VAR01 63.1500 21.0500 11.49 0.003 * RESIDUAL 14.6600 1.83250 * TOTAL (CORRECTED) 11 77.8100 7.07364 TABLE OF MEANS FOR FACTORIAL EFFECTS FILE NHAT2 14/11/2011 10: :PAGE MEANS FOR EFFECT VAR01 VAR01 NOS 3 3 VAR02 27.8000 44.3000 39.4000 35.6000 VAR03 2.10000 5.40000 4.20000 3.60000 VAR04 4.70000 9.80000 7.00000 3.90000 SE(N= 3) 2.60656 0.430116 0.781558 5%LSD 8DF 8.49974 1.40257 2.54858 ANALYSIS OF VARIANCE SUMMARY TABLE FILE NHAT2 14/11/14 10: :PAGE F-PROBABLIITY VALUES FOR EACH EFFECT IN THE MODEL SECTION - VARIATE VAR02 VAR03 VAR04 GRAND MEAN (N= 12) NO OBS 12 36.775 12 3.8250 12 6.3500 STANDARD DEVIATION C OF V |VAR01 SD/MEAN | BASED ON BASED ON % | TOTAL SS RESID SS | 7.3818 4.5147 12.3 0.0123 1.3942 0.74498 19.7 0.0045 2.6596 1.3537 21.1 0.0032 | | | | 182 Thí nghiệm đánh giá tính chống chịu bệnh VLG với gốc ghép BALANCED ANOVA FOR VARIATE VAR02 FILE TCCSUA 23/10/13 10:29 :PAGE VARIATE V002 VAR02 LN SOURCE OF VARIATION DF LN SOURCE OF VARIATION DF LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= VAR01 2690.93 896.978 ****** 0.000 * RESIDUAL 2.00014 250017 * TOTAL (CORRECTED) 11 2692.93 244.812 BALANCED ANOVA FOR VARIATE VAR03 FILE TCCSUA 23/10/13 10:29 :PAGE VARIATE V003 VAR03 SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= VAR01 7911.60 2637.20 256.39 0.000 * RESIDUAL 82.2886 10.2861 * TOTAL (CORRECTED) 11 7993.89 726.717 BALANCED ANOVA FOR VARIATE VAR04 FILE TCCSUA 23/10/13 10:29 :PAGE VARIATE V004 VAR04 SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= VAR01 3464.40 1154.80 76.25 0.000 * RESIDUAL 121.166 15.1457 * TOTAL (CORRECTED) 11 3585.56 325.960 TABLE OF MEANS FOR FACTORIAL EFFECTS FILE TCCSUA 23/10/13 10:29 :PAGE MEANS FOR EFFECT VAR01 VAR01 NOS 3 3 VAR02 25.5500 0.000000 33.3300 0.000000 VAR03 88.8900 31.1100 70.3733 28.8900 VAR04 92.5900 85.0000 92.5933 51.4800 SE(N= 3) 0.288685 1.85167 2.24690 5%LSD 8DF 0.941373 6.03812 7.32692 ANALYSIS OF VARIANCE SUMMARY TABLE FILE TCCSUA 23/10/13 10:29 :PAGE F-PROBABLIITY VALUES FOR EACH EFFECT IN THE MODEL SECTION - VARIATE VAR02 VAR03 VAR04 GRAND MEAN (N= 12) NO OBS 12 14.720 12 54.816 12 80.416 STANDARD DEVIATION C OF V |VAR01 SD/MEAN | BASED ON BASED ON % | TOTAL SS RESID SS | 15.646 0.50002 3.4 0.0000 26.958 3.2072 5.9 0.0000 18.054 3.8918 4.8 0.0000 | | | | 183 Thí nghiệm đánh giá tái nhiễm bệnh VLG đồng ruộng BALANCED ANOVA FOR VARIATE VAR02 FILE Mr NHAT 1/11/13 10:18 :PAGE VARIATE V002 VAR02 LN SOURCE OF VARIATION DF LN SOURCE OF VARIATION DF LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= VAR01 131.556 65.7778 591.98 0.000 * RESIDUAL 666690 111115 * TOTAL (CORRECTED) 132.222 16.5278 BALANCED ANOVA FOR VARIATE VAR03 FILE Mr NHAT 1/11/13 10:18 :PAGE VARIATE V003 VAR03 SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= VAR01 280.889 140.444 421.33 0.000 * RESIDUAL 2.00001 333335 * TOTAL (CORRECTED) 282.889 35.3611 BALANCED ANOVA FOR VARIATE VAR04 FILE Mr NHAT 1/11/13 10:18 :PAGE VARIATE V004 VAR04 SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= VAR01 128.000 64.0000 64.00 0.000 * RESIDUAL 6.00001 1.00000 * TOTAL (CORRECTED) 134.000 16.7500 TABLE OF MEANS FOR FACTORIAL EFFECTS FILE Mr NHAT 1/11/13 10:18 :PAGE MEANS FOR EFFECT VAR01 VAR01 NOS 3 VAR02 9.33333 0.000000 4.00000 VAR03 14.6667 1.33333 10.6667 VAR04 13.3333 5.33333 13.3333 SE(N= 3) 0.192453 0.333334 0.577351 5%LSD 6DF 0.665727 1.15306 1.99715 ANALYSIS OF VARIANCE SUMMARY TABLE FILE Mr NHAT 1/11/13 10:18 :PAGE F-PROBABLIITY VALUES FOR EACH EFFECT IN THE MODEL SECTION - VARIATE VAR02 VAR03 VAR04 GRAND MEAN (N= 9) NO OBS 4.4444 8.8889 10.667 STANDARD DEVIATION C OF V |VAR01 SD/MEAN | BASED ON BASED ON % | TOTAL SS RESID SS | 4.0654 0.33334 7.5 0.0000 5.9465 0.57735 6.5 0.0000 4.0927 1.0000 9.4 0.0002 | | | |