Luận án Tiến sĩ Nghiên cứu phân tích thành phần, cấu trúc hóa học và định lượng hợp chất có tác dụng bảo vệ gan của hai loài Bàn tay ma

BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO VIỆN HÀN LÂM KHOA HỌC VÀ CÔNG NGHỆ VIỆT NAM HỌC VIỆN KHOA HỌC VÀ CÔNG NGHỆ - BÙI VĂN TRUNG NGHIÊN CỨU PHÂN TÍCH THÀNH PHẦN, CẤU TRÚC HĨA HỌC VÀ ĐỊNH LƯỢNG HỢP CHẤT CÓ TÁC DỤNG BẢO VỆ GAN CỦA HAI LOÀI BÀN TAY MA LUẬN ÁN TIẾN SĨ HÓA HỌC Hà Nội – 2023 BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO VIỆN HÀN LÂM KHOA HỌC VÀ CÔNG NGHỆ VIỆT NAM HỌC VIỆN KHOA HỌC VÀ CÔNG NGHỆ - BÙI VĂN TRUNG NGHIÊN CỨU PHÂN TÍCH THÀNH PHẦN, CẤU TRÚC HĨA HỌC VÀ ĐỊNH LƯỢNG HỢP CHẤT CÓ TÁC DỤNG BẢO VỆ GAN CỦA HAI LỒI BÀN TAY MA Chun ngành: Hóa phân tích Mã số: 9440118 LUẬN ÁN TIẾN SĨ HĨA HỌC NGƯỜI HƯỚNG DẪN KHOA HỌC: GS.TS Phạm Hùng Việt PGS.TS Dương Hồng Anh Hà Nội – 2023 LỜI CAM ĐOAN Tôi xin cam đoan: Luận án cơng tình nghiên cứu tơi hướng dẫn GS.TS Phạm Hùng Việt PGS.TS Dương Hồng Anh Các số liệu, kết luận án trung thực chưa công bố công trình khác Hà Nội, ngày tháng năm 2023 Tác giả luận án Bùi Văn Trung LỜI CẢM ƠN Luận án hồn thành Phịng thí nghiệm trọng điểm Cơng nghệ phân tích phục vụ Kiểm định mơi trường An toàn thực phẩm – Trường Đại học Khoa học tự nhiên – Đại học Quốc gia Hà Nội, Viện Hóa sinh biển – Viện Hàn lâm Khoa học Công nghệ Việt Nam Viện Kiểm nghiệm thuốc Trung ương Trong suốt trình thực luận án, tác giả nhận nhiều giúp đỡ quý báu thầy cô, nhà khoa học, đồng nghiệp, bạn bè gia đình Với lịng chân thành biết ơn sâu sắc, tơi xin gửi lời cảm ơn tới GS.TS Phạm Hùng Việt PGS.TS Dương Hồng Anh, người thầy vô tận tâm nhiệt huyết định hướng, hướng dẫn giúp đỡ tơi suốt q trình học tập thực luận án Thầy cô quan tâm, giúp đỡ, động viên tạo điều kiện thuận lợi cho tơi để hồn thiện luận án Tôi xin gửi lời cảm ơn chân thành tới tập thể thầy Phịng Nghiên cứu cấu trúc – Viện Hóa sinh biển, đặc biệt PGS.TS Phan Văn Kiệm, người thầy hướng dẫn bước đầu tiếp cận với chuyên môn hóa học hợp chất thiên nhiên, tiền đề để phân lập, chiết tách chất từ dược liệu Những kiến thức quý báu thầy truyền đạt tảng giúp phát triển để thực số nội dung lớn luận án, mà cịn hữu ích với cơng việc Tôi xin trân trọng cảm ơn Ban Lãnh đạo Viện anh/chị Khoa Vật lý – Đo lường, Viện Kiểm nghiệm thuốc Trung ương tạo điều kiện thời gian, sở vật chất, trang thiết bị đại cho thực luận án Tôi xin trân trọng cảm ơn Ban Giám đốc cán phòng Đào tạo, Học viện Khoa học Công nghệ - Viện Hàn lâm Khoa học Công nghệ Việt Nam thiết kế chương trình kế hoạch đào tạo hợp lý cho tơi giúp đỡ kịp thời thủ tục học tập để tơi hồn thành luận án thời hạn Tơi xin bày tỏ lịng biết ơn chân thành sâu sắc tới tồn thể gia đình, bạn bè người thân quan tâm, khích lệ, động viên tơi suốt q trình học tập, nghiên cứu Tác giả Bùi Văn Trung i MỤC LỤC LỜI CAM ĐOAN .i LỜI CẢM ƠN i MỤC LỤC i DANH MỤC CHỮ VIẾT TẮT iv DANH MỤC BẢNG vii DANH MỤC HÌNH viii MỞ ĐẦU CHƯƠNG TỔNG QUAN 1.1 Tổng quan thuốc “Bàn tay ma” 1.2 Tổng quan hai loài dược liệu H terminalis H lobata 1.2.1 Họ Quắn hoa (Proteaceae) 1.2.2 Chi Heliciopsis Sleum 1.2.3 Loài Bàn tay ma trắng - Heliciopsis terminalis (Kurz) Sleumer 1.1.4 Loài Bàn tay ma đỏ - Heliciopsis lobata (Merr.) Sleumer 1.1.5 So sánh hai loài Bàn tay ma qua nghiên cứu công bố 13 1.1.6 Tri thức sử dụng thuốc Bàn tay ma 15 1.2 Một số phương pháp đánh giá tác dụng bảo vệ gan 17 1.2.1 Đánh giá tác dụng bảo vệ tế bào gan mô hình in vitro 17 1.2.2 Đánh giá tác dụng bảo vệ gan mơ hình in vivo 21 1.2.3 Phương hướng áp dụng mơ hình bảo vệ gan luận án 22 1.3 Chất đánh dấu dược liệu phương pháp xác định 23 1.3.1 Chất đánh dấu dược liệu ứng dụng 23 1.3.2 Phương pháp xác định chất đánh dấu dược liệu 26 1.3.3 Phương pháp xác định chất đánh dấu có tác dụng bảo vệ gan dược liệu Bàn tay ma 26 1.4 Tóm tắt vấn đề đề tài luận án cần giải 27 ii CHƯƠNG ĐỐI TƯỢNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 29 2.1 Đối tượng nghiên cứu 29 2.2 Phương pháp nghiên cứu 30 2.2.1 Áp dụng phương pháp phân tích hóa lý phân tích cấu trúc số thành phần hóa học hai loài Bàn tay ma 31 2.2.2 Đánh giá tác dụng bảo vệ gan hai loài Bàn tay ma 33 2.2.3 Xây dựng quy trình định tính định lượng chất đánh dấu có tác dụng bảo vệ gan hai loài Bàn tay ma 36 CHƯƠNG KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 38 3.1 Cấu trúc số thành phần hóa học phân lập từ dược liệu Bàn tay ma trắng dược liệu Bàn tay ma đỏ 38 3.1.1 Phân tính xác định cấu trúc số thành phần hóa học từ lồi Bàn tay ma trắng (H terminalis) 38 3.1.2 Phân tích xác định cấu trúc số thành phần hóa học từ lồi Bàn tay ma đỏ (H lobata) 54 3.2 Tác dụng bảo vệ gan hai loài dược liệu Bàn tay ma 72 3.2.1 Tác dụng bảo vệ gan hai lồi Bàn tay ma mơ hình in vivo 72 3.2.2 Tác dụng bảo vệ tế bào gan hợp chất phân lập từ loài Bàn tay ma trắng (H terminalis) loài Bàn tay ma đỏ (H lobata) 80 3.2.3 Một số tác dụng liên quan đến khả bảo vệ gan hợp chất 3,5-Dimethoxy4-hydroxy-1-β-D-glucopyranoside 83 3.2.4 Đánh giá độc tính dược liệu Bàn tay ma đỏ 86 3.3 Xây dựng quy trình đính tính định lượng hợp chất 3,5-dimethoxy-4-hydroxy-1β-D-glucopyranoside dược liệu Bàn tay ma 88 3.3.1 Xác định chất đánh dấu có tác dụng bảo vệ gan từ dược liệu Bàn tay ma đỏ 88 3.3.2 Xây dựng qui trình định tính 3,5-dimethoxy-4-hydroxy-1-β-D-glucopyranoside dược liệu Bàn tay ma 90 3.3.3 Xây dựng qui trình định lượng 3,5-dimethoxy-4-hydroxy-1-β-D-glucopyranoside dược liệu Bàn tay ma 91 iii 3.3.4 Quy trình định tính định lượng 3,5-dimethoxy-4-hydroxy-1-β-Dglucopyranoside dược liệu Bàn tay ma 98 3.3.5 Sơ xác định hàm lượng 3,5-dimethoxy-4-hydroxy-1-β-D-glucopyranoside mẫu HL11 tinh chế 99 3.3.6 Thẩm định quy trình định tính định lượng 3,5-dimethoxy-4-hydroxy-1-β-Dglucopyranoside dược liệu Bàn tay ma 101 3.3.7 Định lượng 3,5-dimethoxy-4-hydroxy-1-β-D-glucopyranoside cao chiết nước dược liệu Bàn tay ma đỏ .108 CHƯƠNG KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ 111 4.1 Kết luận .111 4.2 Kiến nghị 112 DANH MỤC CÔNG BỐ LIÊN QUAN ĐẾN LUẬN ÁN 113 TÀI LIỆU THAM KHẢO 114 iv DANH MỤC CHỮ VIẾT TẮT Kí hiệu 13 C-NMR H-NMR Tiếng Anh Diễn giải Carbon-13 Nuclear Magnetic Resonance Spectroscopy Proton Nuclear Magnetic Resonance Spectroscopy Phổ cộng hưởng từ hạt nhân 13C Phổ cộng hưởng từ hạt nhân 1H Allo Allopyranose Nhóm đường allopyranose ALP Alkaline phosphatase Enzyme alkaline phosphatase ALT Alanine aminotransferase Enzyme alanine aminotransferase AOAC international Association Analytical of Official Collaboration International Hiệp hội tổ chức hóa phân tích quốc tế thống Api Apiofuranoside Nhóm đường apiofuranoside Ara(f) Arabinofuranoside Nhóm đường arabinofuranoside Ara(p) Arabinopyranoside Nhóm đường arabinopyranoside AST Aspartate aminotransferase Enzyme aspartate aminotransferase Phổ lưỡng sắc tròn nhằm xác định độ CD Circular dichroism quay cực đồng phân quang học phân tử chất hữu có Spectroscopy nhiều carbon bất đối COSY Correlation Spectroscopy Distortionless Enhancement by DEPT Polarisation Spectroscopy Transfer Phổ hai chiều tương quan 1H-1H Kỹ thuật tăng cường tín hiệu phổ NMR 13C mà không bị biến dạng pic nhờ chuyển phân cực phổ chuyển phân cực 1H DMSO Dimethylsulfoxide Dimethylsulfoxide DPPH 1,1- diphenyl-2-picrylhydrazyl 1,1- diphenyl-2-picrylhydrazyl v Kí hiệu EC50 Tiếng Anh Half maximal Diễn giải effective concentration Nồng độ hiệu tối đa nửa EMA European Medicines Agency Cơ quan Dược phẩm châu Âu Gal Galactopyranoside Nhóm đường galactopyranoside Glu Glucopyranose Nhóm đường glucopyranose GSH Glutathione Glutathione HepG2 HKE-293A HMBC HPLC HR-ESI-MS HSQC IC50 hepatocellular Dòng tế bào ung thư biểu mô gan Human người HepG2 carcinoma cell GepG2 Human embryonic kidney 293 Dòng tế bào gốc thận phôi người cell HKE-293A Heteronuclear Mutiple Bond Phổ tương tác dị hạt nhân (13C-1H) gián Connectivity Spectroscopy High Performance tiếp qua nhiều liên kết Liquid Chromatography Sắc ký lỏng hiệu cao High Resolution Electrospray Phổ khối lượng phân giải cao sử dụng Ionization Mass Spectrometry Heteronuclear Single- Phổ tương tác dị hạt nhân (13C-1H) trực Quantum Coherence Inhibitory nguồn ion hóa phun điện tử concentration tiếp qua liên kết at Nồng độ ức chế 50 % đối tượng thử 50% nghiệm IR Infrared spectroscopy Phổ hồng ngoại LD Lethal dose Liều gây chết động vật thí nghiệm IL Interleukin Interleukin LPS Lipopolysaccharide Lipopolysaccharide vi Kí hiệu Tiếng Anh MTT MTT assy NO Nitric oxide NOESY Diễn giải Phương pháp định lượng tế bào sống phương pháp so màu Gốc tự nitric oxide (NO.) Overhauser Phổ cộng hưởng từ tăng cường nhờ hiệu Nuclear Enhancement Spectroscopy ứng Nuclear Overhauser PAR Paracetamol Paracetamol RAW 264.7 Mammalian cell line Dòng tế bào đại thực bào RAW 264.7 RSD Relative standard deviation Độ lệch chuẩn tương đối SRB Sulforhodamine B Sulforhodamine B TBARs TLC thiobarbituric acid reactive Cơ chất phản substances thiobarbituric Thin layer chromatography Sắc ký lớp mỏng ứng với acid (CH3)4Si sử dụng làm chất chuẩn TMS Tetramethylsilane xác định độ chuyển dịch hóa học hạt nhân nghiên cứu TNF Tumor necrosis factor Yếu tố hoạt tử khối u WHO World Health Organization Tổ chức Y tế giới Phụ lục 3.21.5 Phổ HMBC hợp chất HL12 Phụ lục 3.21.6 Phổ COSY hợp chất HL12 PL123 Phụ lục 3.21.7 Sắc ký đồ đường D-allose phân tích HPLC Phụ lục 3.21.8 Sắc ký đồ đường D-glucose phân tích HPLC PL124 Phụ lục 3.21.9 Sắc ký đồ hợp chất HL12 phân tích HPLC PL125 Phụ lục 3.22 Phổ HR-MS NMR hợp chất HL13: βHydroxypropiovanillone 3-O-β-D-glucopyranoside Phụ lục 3.22.1 Phổ HR-MS hợp chất HL13 Phụ lục 3.22.3 Phổ 1H-NMR hợp chất HL13 PL126 Phụ lục 3.22.3 Phổ 13C-NMR hợp chất HL13 Phụ lục 3.22.4 Phổ HSQC hợp chất HL13 PL127 Phụ lục 3.22.5 Phổ HMBC hợp chất HL13 PL128 Phụ lục 3.23 Phổ HR-MS NMR hợp chất HL14: 3′,5′-Dimethoxy-3,4′dihydroxypropiophenone 3-O-β-D-glucoside Phụ lục 3.23.1 Phổ HR-MS hợp chất HL14 Phụ lục 3.23.2 Phổ 1H-NMR hợp chất HL14 PL129 Phụ lục 3.23.3 Phổ 13C-NMR hợp chất HL14 PL130 Phụ lục 3.23.4 Phổ HSQC hợp chất HL14 Phụ lục 3.23.5 Phổ HMBC hợp chất HL14 PL131 PHỤ LỤC MỘT SỐ KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU Phụ lục 4.1 Kết chống oxy hóa hợp chất 3,5-Dimethoxy-4-hydroxy-1-βD-glucopyranoside mơ hình in vitro IC50 (µg/ml) Mẫu thử nghiệm Quét gốc tự DPPH Định lượng TBARs HL11 6,07 ± 0,17 89,55 ± 8,26 Acid ascorbic 6,97 ± 0,45 - - 8,05 ± 0,62 Trolox Phụ lục 4.2 Đánh giá tác dụng ức chế yếu tố NO hợp chất 3,5-Dimethoxy-4hydroxy-1-β-D-glucopyranoside mơ hình in vitro Phương trình tương quan tuyến tính xác định hàm lượng nitrit sau: y = 0,0077x + 0,0477 Trong đó, x nồng độ NO mẫu, y mật độ quang đo từ mẫu chuẩn Từ giá trị độ hấp thụ giếng chứa mẫu nghiên cứu, tính toán kết % ức chế NO mẫu HL11 nồng độ tương ứng sau: Nồng độ thử HL11 L-NMMA (µg/ml) % tế bào sống % ức chế NO % tế bào sống % ức chế NO 100 106,91 63,07 85,30 93,56 20 98,11 20,02 98,14 77,29 - 8,69 - 30,66 0,8 - 11,32 - 17,84 IC50 (µg/ml) - 76,49 ± 2,46 - 7,10 ± 0,68 PL132 PHỤ LỤC 5: KẾT QUẢ GIÁM ĐỊNH THỰC VẬT CÁC MẪU NGHIÊN CỨU PL133 TRTIONG EAI HOC DIJOC HA NOI li*' i'^ ll-^\J -vl\rl\ rnui', vAT ***,k* PHIEU GIAM DINH TTN KHOA HQC S6:481201,9 Ngudi thu Ngudi giii mAu; Biri Vdn Trung ^ Biri -._ Van Tlung x mflu: vi: Dia chi : Vi6n Ki6m nghi0m thu5c Trung t/ong Do'n 48 Hai Bd Trung, Hodn I(i6m, Hd N6i Nglry thu mfiu: 0411212019 : Kan rJacll nong, bac Noi thu m6u: TOn rlfa Md phuong: ti miu: Mir phi (Tdy), Bdn tay MAu gdni thAn mang ma 16 "trhng" (mAu Bdn tay ma tring M1) I(6t qui gi6m clinh: Cdn cti vdo cac tdi li€u thuc vft hiAn cd tai Tradng Dai hoc Du'oc Hd Noi voi c,ic doc dicm cua coc bo phan mdu cay, dii xitt ctinh ntiu tr?n co; - T6n khoa ho c: Heliciopsis terminalis (I(urz) Sleumer Proteaceae FIg: TOn thuong goi: Song quin ch6t Eia chun dinh, Bdn tay ma tring Hd NSi, ngdy a6 thdng 12 ndnt 2019 Tru6'ng bQ mdn Ngudi gi:im tlinh -1,(w 44 TS Hoing Quj'nh.Hoa ThS Nghi6m Dr?c Trgng Titi Ii6u tham lihrio l Ph4m Hodng H6 (2003), Cdy cd ViAt Nan,NXB Tre, Tdp Brjsban Na Songkhla (1987) Proteaceae, In: Thawatchai Santisuk, Kai Larser (eds), Flora ofThailand, Voltune Five, P(rfi One, The Forest Hetbarium, National Park, Wildlife and Plant Conselvation Deparment, Ba1'rgkol( Huaxing Qiu, Peter H Westor (2003), Ploteaceae, In: Wu, Z, Y,, P H Raven & D y Houg (eds), Flora ofChina, Vol (Ulmaceoe through Basellaceae), Science Press, Beijing, and Missout.i Botanical Garden Press, St Louis Pham Hoang Hd (1992), Proteaceae, In: Ph Morat (eds), Flore dtr Canbodge, Lqos et du VietNqnl, Voltr 26, Rhoipteleaceae" Juglondaceae, Thynrclaeacene, Proteqcgqe, Musduln National D,Flistoire NatU Ie TRUdNGEAIHoCDUdcHANOI nQm I TL.HIiU TRIJ6NG -dNc TRUdI{G rdcurJc -niNs cuiNs TRIIONG DAI HOC DIIOC HA NOI BO MON THUC VAT {:r(t:k* PHIEU GIAM DINH TTN KHOA HQC 56:4912019 Ngudi thu mAu: Bii Vdn Trung l\ gu'o r gu'r mau: Biri Vdn Tlung Don vl: , i -, ^ r,,^ Vidn Ki6m nghidm thudc -Trurrg tJong Dia chi 48 Hai Bd Trung, Hodn Ki6n, Hd N6i : Ngiry thu mfiu: No'i thu 04/12/2019 miu: Bach Th6ng, Bdc Kan TGn tlia phuong: Mit phi (Tdy), Bdn tay ma "d6" Md tri mdu; MAu g6m thAn mang 16 (m5u Bdn tay ma ct6 Ml) K6t qui gi6m tllnh: Cdn c* viro circ tdi li€u thac vdt hiAn c6 tai Tru.dng Dai hoc Duoc Hd N6i t,6i cac dQc di€m c a ctic b6 phdn mdu cdy, dd xdc dinh miu trin c6: - Ho: - TOn thudng Tdn klroa hoc: Heliciopsis lobata (Merr.) Sleumer Proteaceae goi: Song quin thiy, Eia chun, Ban tay ma d6 Hd NQi, ngdy 06 thiing Tru&ng TS Hoing Quj'nh Hoa l ndm 2019 Ngudi gi{m clinh bQ m6n '4de' Tli l2 -4" ThS Nghi6m Dfc Trgng li6u tham khlio Phan Hodng Hd (2003), Cdy c6 ViAt Nam,NXB T16, Tdp BLrsban Na sorgkhla (1987) Ploteaceae, ln: Thawatchai santisuk, I(ai Lar sen (eds), Flora o/ Thcrikmtl, Volttne Five, Part One, The Forest l{erbalium, National Palk, Wildlife and Plant Conservation Deparrnent, Bangl(ok HLraxing Qiu, Petel H, Westor (2003), proteaceae, In: Wu, Z y., p H, Raven & D y Hong (eds), Flora ofChino, Vol (ulmaceae lhrough Btsellaceae), Science Press, Beijing, and Missouri Bo-tanicai Garden Press, St Louis Pham Hoang Hd (1992), Proteaceae, ln: ph Molat (eds), Flore rlu Cantbodge, Lqos et clu I/iaLNqm, volune 26, Rhaipleleqceqe, Juglandaceae, Thymelaeaceae, proteaceae, lluseun National D,Histoire TL.HI6U TRIJ6NG bNc 16'cHdc - HIiNH cHiNH rRrrdr{c D4l ur0c TRTIONG D,f;r HQC Dr/gg HA BO MON TI]U'C VAT Nor X:t+)F+ PHIEU GIAM DINH TTNKHOA HQC 36:791202r mAu: Bii Vdn Trung Ngu'd'i gii'i m6u: Biri Vdn Trung Ngudi thu rr.^ Eon vi: Dfa chi rz./i : Vi€n I(idm nghidnr rhuoc ^Trung l-long 48 Hai Bd Trung, Hoan I(i6m, Hd N6i : Ngiry thu m6u: 09/8/2021 Noi thu mAu: T6n tlia phuong: Md t:i mAu: Bach Thdng, Bdc i(an Mir phi (Tdy), Bdn tay ma "tring,, Mdu gdm thdn mang 16 (m5u Bdn tay ma tr6ng M2) Kdt qui gi:im tlinh: ciin ctiv vdo cdc tdi hau thac viit hi€n c6 tai rradng Eai hoc N6i v6'i cdc ddc didm ctta cdc bo phdn miu cay, dti xdc dinh mdu trAn c6; - T6n klroa ho c: Du.o.c Hd Heliciopsis terminalis (Kurz) Sleumer Ho: Proteaceae T0n thudng goi: Song quin ch6t Dia chun dinh, Bdn tay ma tr6ng Hit NQI ngdy 01 thting 12 ncint 2021 Tru&ng bQ mdn Ngud'i gi:lm ilinh 4w 4a TS Hoirng Quj,nh.Hoa Tii lieu tham khio I ThS Nghi0m Dri.c Trgng Hodng HO (2003), Cdy co lti6t Nqm,NXB Tr€,,T6Lp Busban Na songkhla ( r 987) proteaceae, In: Thawatchai santisuk, I(ai La| sen (eds), Frora ofrhairand, ft.r4ln Voltune Five, Part One, The Forest Herbarium, Natjonal Par.k, Wildlile alld plant Conservation Deparmett, Bangl(ok Flora of China, Vol (Ulmaceae throttgh Botarrical Calden Press, SL Louis Pham Hoang FId (1992), Proteaceae, In; ph Mo'at (eds), Frore dtt cambodge, Laos Xic Lli l TL,HIEU TRUdNG -HANH CHINH NG PHONG TO CHIJC rRUdxc oar Hgo u{firi et crtt yier-Ncn1, TRrtoNG DAr HQC Drlgc HA NQr B0 MoN THUc vAr *++*x PHrEU crArr oryu rtN xnol ugc S6:80/2021 Ngud'i thu mf,u: x Ngudi giiimiu: Biri Vdn Trung , -,, ^Bii Van Trrrng Don vi: , I - ^ Vidn ,1 Kidm nghi6m tlrudc -Trung Ubrrg Efa chi 48 Hai Bd Trung, Hodn Ki5m, Hd NOi : Ngiy thu mAu: Noi thu m6u: Tdn tlia ti M6 phu'ong: m6u: 09/8/2021 Bach Th0ng, Bic Kan Mir phi (Tdy), Bdn tay ma "d6" MAu gdrn thdn mang ki (mAu Bdn tay ma d6 M2) qui gidm tlinh: Cdn u,i,vito cdc tdi li€u thac vdt hi€n c6 tai Trudng Doi Noi voi cac dqc Clien cia cdc bo phon mdu cdy ild xic dinh miu tin co; KOf - TOn khoa ho - Ho: - TOn c: hoc Dttoc IId Heliciopsis lobata (Merr.) Sleumer Proteaceae thudng goi: Song qudu thr)ry, Eia chun, Bdn tay ma d6 Hd N6 Tru'ong bd m6n ndnt 2021 nh lp&e TS Hoing Qulnh Hoa T Trgng Tiri liQu tham khrio Pharn Hodng HO (2003), Cdy co Vi€t Nam,NXB Tr.d, T6p BLlsban Na songl