Biomimetic Based Applications Part 5 doc

The Improvement of LC-MS/MS Proteomic Detection with Biomimetic Affinity Fractionation 151 4. Prefractionation of of rat liver cytosol proteins utilizing cascade composition of affinity chromatography 4.1 Cascade affinity prefractionation of tissue samples e;"6) ='"6'615'7) -88'#'54) 9'$-#/3) 9'=;-;4) '#) "(;) 9-=+) B1) 8';35) 37;11#1/) "(5) 3"61) -88'#'54) 9'$-#/3) 32"B'#$) 9-;$1) -=3";=-#71) /'881;1#713) '#) =-#/) /'35;'=(5'"#) 5") ;-5) 9'A1;) 745"3"9) :;"51'#3?) .21#+) 521) -88'#'54) 9'$-#/3) 2-A'#$) 61/'(6) -=3";=-#71) -='9'54) B1;1) 3191751/+) 7-37-/1)7"6:"3'5'"#)"8)52131)-88'#'54)9'$-#/3)7"(9/)=1)-/":51/)8";)521):;18;-75'"#-5'"#) "8) 5'33(1):;"51'#3?)M#)52'3)35(/4+)7-37-/1)7"6:"3'5'"#)"8)52;11)-88'#'54)9'$-#/3)B-3)-/":51/+)-#/) 521)37216-5'7)'99(35;-5'"#)"8)521)B";Q89"B)B-3)32"B#)'#)eMV?)b?)P;'1894+)-851;)7"6:91>)5'33(1) 3-6:91) B-3) 9"-/1/) 5") 521) 8';35) -88'#'54) 9'$-#/) 7"9(6#+) 89"B52;"($2) -#/) 19(5'"#) B1;1) 7"991751/) 8";) 521) 5B") #1B) 8;-75'"#3?) .21#+) -851;) -="A1) 5B") #1B) 8;-75'"#3) B1;1) :-;-9919) 9"-/1/)5")521)317"#/)-88'#'54)9'-#/)7"9(6#+)89"B52;"($2)-#/)19(5'"#)B1;1)7"991751/)8";)521) 8"(;) #1B) 8;-75'"#3?) 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The Improvement of LC-MS/MS Proteomic Detection with Biomimetic Affinity Fractionation 153 4.3 Cascade affinity fractionation and LTQ-MS/MS analysis .21) "B72-;5) '#) eMV?) b) $-A1) -) 6";1) /15-'91/) "A1;A'1B) "8) 521) 7-37-/1) 8;-75'"#-5'"#) :;"71/(;1?)D88'#'54)9'$-#/)7"9(6#)DNW+)2-A'#$);19-5'A194)2'$2)-=3";=-#71)-='9'54+)B-3):(5) '#)521)8';35)-88'#'54)8;-75'"#-5'"#?)D851;)K6$);-5)9'A1;)745"3"9)B-3)9"-/1/)5")521)7"9(6#)DNW+) 521)89"B%52;"($2)-#/)19(5'"#)B1;1)7"991751/)C-/n(351/)5"):Y)\?G)'#35-#594L+)#-61/)-3)eN%N) -#/)eN%F?).21#+)eN%N)-#/)eN%F)B1;1):-;-9919)9"-/1/)5")521)7"9(6#)DS%WK+)8"(;)8;-75'"#3)CeF% NteF%KL) B1;1) "=5-'#1/) 8;"6) 7"99175'#$) 521) 89"B%52;"($2) -#/) 19(5'"#?) D5) 9-35+) 521) 8"(;) 8;-75'"#3)'#)521)317"#/)-88'#'54)8;-75'"#-5'"#)B1;1)9"-/1/)5")DNN%\G+)1'$25)#1B)8;-75'"#3)CeH% NteH%SL) B1;1) "=5-'#1/) 8;"6) 7"99175'#$) 521) 89"B%52;"($2) -#/) 19(5'"#?) D99) 8;-75'"#3) B1;1) 7"991751/) 8";) 3(=31^(1#5) _0_kdDVX) 19175;":2";13'3) CeMV?) 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Biomimetic Based Applications 156 .21) V!DjJ) A-9(13) C255:mOOBBB?='"'#8";6-5'73?";$O363FO:;"51'#q$;-A4?2569L) B1;1) /151;6'#1/)-77";/'#$)5")[451)-#/)0""9'5591)C[451)-#/)0""9'5591+)NRSFL?).21):;"51'#3)/151751/) '#) F0%dDVX) $193) -;1) $1#1;-994) 24/;":2'9'7+) 52(3) B'52) #1$-5'A1) V!DjJ) A-9(13) Ce"(#5"(9-Q'3+)-#/) Q-73+)FGGNI)e"(#5"(9-Q'3)-#/)_(51;+)FGGFL?)e";)521)5"5-9)SWR):;"51'#3) '/1#5'8'1/+)521';)V!DjJ)A-9(13)A-;4)'#)521);-#$1)"8)kF?GK\tG?HFFCeMV?)RTL?)M5)'3)#"51/)52-5) 6"35) "8) 521) :;"51'#3) -;1) 24/;":2'9'7) C\S\) :;"51'#3) B'52) #1$-5'A1)V!DjJ) A-9(13L+) -#/) \F) CS?HSiL)24/;":2"='7):;"51'#3)B1;1)'/1#5'8'1/)B'52):"3'5'A1)V!DjJ)A-9(13?)) ) ) e'$?)R?)0'35;'=(5'"#)"8)521)5"5-9):;"51'#3)'/1#5'8'1/)'#);19-5'"#)5")521';)521";15'7-9)6"917(9-;) 6-33)CDL+):M)CPL+)V!DjJ)A-9(13)CTL+)-#/)521)#(6=1;)"8):;1/'751/).E)219'713)C0L?)).21)=-;3) '#/'7-51)521):1;71#5-$1)"8):;"51'#3)'#)5"5-9):;"51'#3)'/1#5'8'1/?) 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The Improvement of LC-MS/MS Proteomic Detection with Biomimetic Affinity Fractionation 157 ) e'$?)NG?).21)35;(75(;1)"8)-88'#'54)9'$-#/3)(31/)'#)7-37-/1)-88'#'54):;18;-75'"#-5'"#?)_1:2-;"31) KP)B-3)6-5;'>+)B2'72)B-3)-75'A-51/)B'52)1:'729";"24/;'#?))D)32"B1/)5B")Q'#/3)"8)34#5215'7) 9'$-#/3m)8';35+)3'#$91)-6'#")7"6:"(#/)B-3)/';175194)9'#Q1/)5")-75'A-51/)31:2-;"31+)#-61/)-3) D#I)317"#/+)74-#(;'7)729";'/1)B-3)7"(:91/)5")-75'A-51/)31:2-;"31)-3)-)9-;$1)3:-71;+)-#/)5B") 729";'/1)'#)3:-71;)7"(9/)=1)3(=35'5(51/)=4)5B")-6'#")7"6:"(#/3+))#-61/)-3)D6%#?)P)$-A1) 521)7216'7-9)35;(75(;13)"8)-6'#")7"6:"(#/3)(31/)'#)52;11)3191751/)-88'#'54)9'$-#/3)CDNW+) DNN%\G+)DS%WKL?)) Biomimetic Based Applications 158 5. Discussion M#)"(;)35(/4+)B1)8';35)7"6='#1/)521)7-37-/1)='"6'615'7)-88'#'54):;18;-75'"#-5'"#)B'52)*.,% E_OE_) -#-943'3?) e;"6) ='"6'615'7) -88'#'54) 9'$-#/3)9'=;-;4+) B1)37;11#1/) "(5)52;11) 9'$-#/3) 32"B'#$)9-;$1)-=3";=-#71)/'881;1#713)'#)=-#/)/'35;'=(5'"#)5");-5)9'A1;)745"3"9):;"51'#3?).21) 35;(75(;13)"8)521)52131)191751/)9'$-#/3) B1;1)32"B#)'#)e'$?)NG+)-#/)521)35;(75(;1)/'881;1#71) B-3) "=A'"(3?) 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Bioquímica, Departamento Farmacêutico, Campus Universitário, Martelos, Juiz de Fora-MG Brasil 1 Introduction The cytochromes P 450 (P 450 s) are an important class of heme-containing enzymes that act as monooxigenases P 450 s have a variety of critical roles in biology and are considered the most versatile enzymes in nature because of their key part in the metabolism of biomolecules and xenobiotics The P 450 reacts... 3rd (2003) A method for the comprehensive proteomic analysis of membrane proteins Nat Biotechnol 21: 53 2 -53 8 162 Biomimetic Based Applications Xin, Y, Dong, D, Wang, T & Li, R (2007) Afnity purication of serine proteinase from Deinagkistrodon acutus venom J Chromatogr B Analyt Technol Biomed Life Sci 859 : 111––118 Yates, JR 3rd (2004) Mass spectral analysis in proteomics Annu Rev Biophys Biomol Struct... 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"=A'"(394) 1#2-#71) 52 1) / 151 75& apos;"#) -='9&apos ;54 ) "8) 32" ;5$ (#) 35; -51 $4?) E" 35) '6:" ;5- #59 4+) 52 1) 5- #/16) -88'#&apos ;54 ) :;18;- 75& apos;"# -5& apos;"#). D/S/@/S*( `( lGMG7=1( >JJf( 8'KFeA55LA<( ( AG7<&&73#'#( D&'N0N#'#( cisN%3*<R#'#( AG7<&=#P/'#( ) > U > (F=#<<#'-( #3(/<Q1(0\H( [.#KF55L]A<( [8'KF55L]A<( [.#KF .55 L]A<( [8'KF .55 L]A<( 5* M#$*'#(( 5* M</$3*'#( ( 5= VU( ;7=//R( #3( /<Q1(>J0J( 8'NF85G5( .#NF85G5( eD:( U > ( E > U( 5* 3*?(#3(/<Q1( >JJb( .#KFA55LA<( 8'KFA55LA<( 8'KF .55 LA<( 5$ *"*-&'#( UP*-/3*&'( ( tN XUU)( 8/7(. ;1:1 -51 /) :;":" ;5& apos;"#+)B2'72)'#/'7 -51 / )52 -5) 6" 35) "8 )52 "31):;" ;51 '#3)B1;1)9"B%-=(#/- #5) 7"6:"#1 #53 )'#) 52 1)7199)-#/)1#;'721/)- 851 ;)8;- 75& apos;"# -5& apos;"#?)T"6:-;'#$)B&apos ;52 )52 1 )5; -/&apos ;5& apos;"#-9)F0%dDVX)6 152 "/+) 52 1)32" ;5$ (#) 35; -51 $4):;131 #53 )-)#(6=1;)"8)/ -5- )B&apos ;52 )A1;4);-:'/)3:11/)-#/)9'6&apos ;51 /)3-6:91) 7"#3(6 :5& apos;"#?)