Nghiên cứu xây dựng quy trình công nghệ sản xuất khô dầu đậu nành lên men bán rắn sử dụng trong chăn nuôi

ỦY BAN NHÂN DÂN THÀNH PHỐ HỒ CHÍ MINH SỞ KHOA HỌC VÀ CÔNG NGHỆ VIỆN CHĂN NUÔI PHÂN VIỆN CHĂN NI NAM BỘ CHƢƠNG TRÌNH KHOA HỌC VÀ CƠNG NGHỆ CẤP THÀNH PHỐ BÁO CÁO TỔNG HỢP KẾT QUẢ NHIỆM VỤ NGHIÊN CỨU KHOA HỌC VÀ CÔNG NGHỆ NGHIÊN CỨU XÂY DỰNG QUY TRÌNH CƠNG NGHỆ SẢN XUẤT KHƠ DẦU ĐẬU NÀNH LÊN MEN BÁN RẮN SỬ DỤNG TRONG CHĂN NI Cơ quan chủ trì nhiệm vụ: Phân viện Chăn nuôi Nam Chủ nhiệm nhiệm vụ: TS Phạm Huỳnh Ninh Thành phố Hồ Chí Minh - 2019 ỦY BAN NHÂN DÂN THÀNH PHỐ HỒ CHÍ MINH SỞ KHOA HỌC VÀ CÔNG NGHỆ VIỆN CHĂN NUÔI PHÂN VIỆN CHĂN NI NAM BỘ CHƢƠNG TRÌNH KHOA HỌC VÀ CƠNG NGHỆ CẤP THÀNH PHỐ BÁO CÁO TỔNG HỢP KẾT QUẢ NHIỆM VỤ NGHIÊN CỨU KHOA HỌC VÀ CÔNG NGHỆ NGHIÊN CỨU XÂY DỰNG QUY TRÌNH CƠNG NGHỆ SẢN XUẤT KHƠ DẦU ĐẬU NÀNH LÊN MEN BÁN RẮN SỬ DỤNG TRONG CHĂN NUÔI Chủ nhiệm nhiệm vụ: Phạm Huỳnh Ninh Cơ quan chủ trì nhiệm vụ Thành phố Hồ Chí Minh- 2019 PHÂN VIỆN CHĂN NI CỘNG HỒ XÃ HỘI CHỦ NGHĨA NAM BỘ VIỆT NAM Độc lập - Tự - Hạnh phúc Bình dương, ngày 05 tháng 07 năm 2019 BÁO CÁO THỐNG KÊ KẾT QUẢ THỰC HIỆN NHIỆM VỤ NGHIÊN CỨU KH&CN I THÔNG TIN CHUNG Tên nhiệm vụ: Nghiên cứu xây dựng quy trình cơng nghệ sản xuất khô dầu đậu nành lên men bán rắn sử dụng chăn ni Thuộc: Chương trình/lĩnh vực(tên chương trình/lĩnh vực): Chủ nhiệm nhiệm vụ: Họ tên: Phạm huỳnh Ninh Ngày, tháng, năm sinh: 19.06.1980 Nam/ Nữ: Nam Học hàm, học vị: Tiến sỹ Chức danh khoa học: Chức vụ: Phó Bộ mơn dinh dưỡng thức ăn chăn nuôi Điện thoại: Tổ chức: 02743739889 Mobile: 0919369577 Fax: 02743739889 E-mail: ninhpham1980@yahoo.com Tên tổ chức công tác: Phân viện Chăn nuôi Nam Địa tổ chức: Khu phố Hiệp Thắng, Bình thắng, Dĩ An, Bình Dương Địa nhà riêng: 158/65/7 Phạm Văn Chiêu, phường 9, Gị Vấp, Tp HCM Tổ chức chủ trì nhiệm vụ: Tên tổ chức chủ trì nhiệm vụ: Phân viện chăn nuôi Nam Điện thoại: 02743739889 Fax: 02743739889 E-mail:iasvn@.iasvn.vn Website: iasvn.vn Địa chỉ: Khu phố Hiệp Thắng, Bình thắng, Dĩ An, Bình dương Họ tên thủ trưởng tổ chức: GS.TS Lã Văn Kính Số tài khoản: Kho bạc: Dĩ An, Bình Dương Tên quan chủ quản đề tài: Sở KHCN TP.HCM II TÌNH HÌNH THỰC HIỆN Thời gian thực nhiệm vụ: - Theo Hợp đồng ký kết: từ tháng 08 năm 2017 đến tháng 08 năm 2019 - Thực tế thực hiện: từ tháng 08 năm 2017 đến tháng 07 năm 2019 Kinh phí sử dụng kinh phí: a) Tổng số kinh phí thực hiện: 1.100 tr.đ, đó: + Kính phí hỗ trợ từ ngân sách khoa học: 1.100 tr.đ + Kinh phí từ nguồn khác: tr.đ b) Tình hình cấp sử dụng kinh phí từ nguồn ngân sách khoa học: Theo kế hoạch Thực tế đạt Ghi Số Thời gian Kinh phí Thời gian Kinh phí (Số đề nghị TT (Tháng, (Tr.đ) (Tháng, năm) (Tr.đ) toán) năm) 08/2017 550 08/2017 550 550 08/2018 440 08/2017 440 440 07/2019 110 08/2019 110 110 c) Kết sử dụng kinh phí theo khoản chi: Đối với đề tài: Đơn vị tính: Triệu đồng Số Nội dung TT khoản chi Theo kế hoạch Tổng Thực tế đạt NSKH Nguồn Tổng NSKH khác Nguồn khác Trả công lao động (khoa học, 423,281 423,281 423,281 423,281 phổ thông) Nguyên, vật liệu, 543,755 543,755 lượng 543,755 543,755 Thiết bị, máy móc Xây dựng, sửa chữa nhỏ Chi khác Tổng cộng 132,964 132,964 1.100 1.100 132,964 132,964 1.100 1.100 Các văn hành chínhtrong q trình thực đề tài/dự án: Số TT Số, thời gian ban hành văn Ghi Tên văn Quyết định số 742 ngày Về việc phê duyệt nhiệm vụ 21/08/2017 Sở Khoa Học khoa học công nghệ Công Nghệ TP.HCM Hợp đồng số 121/2017/HĐ- Hợp thực nhiệm SKHCN ngày 21/08/2017 vụ nghiên cứu khoa học công nghệ Tổ chức phối hợp thực nhiệm vụ: Số TT Tên tổ chức Tên tổ chức Nội dung Sản phẩm đăng ký theo tham gia thực tham gia chủ chủ yếu đạt Thuyết minh yếu Công TNHH Sàng lọc vi ty Bộ mơn Sinh Cơng hóa, Khoa Sinh khuẩn Vi khuẩn Bacillus sp Nông học- CNSH, Lâm, Đại Học Trường Đại Nơng Lâm học KHTN, Bacillus sp có khả sinh protease Tp.HCM - khu Đại học Quốc phố - Gia TP.HCM sp Nghệ phường Lactobacillus với hoạt tính ≥ 400 U/g Lactobacillus sp có khả Linh Trung - Quận sinh α- Thủ galactosidase Đức, ≥ 20 U/g TP.HCM Ghi chú* tâm Hợp tác xã nghiên cứu chăn nuôi heo huấn luyện an tồn Tiên Trung chăn Bình Thử nghiệm Bộ số liệu khô dầu đậu sinh trưởng, nành heo thức ăn nuôi PhongThắng- TP.HCM Phân viện Chăn nuôi heo Nam Cá nhân tham gia thực nhiệm vụ Số TT Tên cá nhân đăng ký theo Thuyết minh TS Phạm Huỳnh Ninh Tên cá nhân Nội dung tham Sản phẩm chủ Ghi tham gia gia yếu đạt chú* thực Thực Quy trình lên men giám sát thực bán rắn khô dầu tất đậu nành ổn định Phân Viện nội dung Báo cáo giám Chăn nuôi thuyết minh đề định báo cáo tài tổng kết đề tài đáp Nam Bộ ứng tất yêu cầu đặt theo RD TS.Trần Quốc Tuấn Trường Đại Đồng thực Vi khuẩn Bacillus học KHTN nội dung phân sp có hoạt tính TP.HCM lập, tuyển chọn protease ≥ 400 U/g vi sinh vật thích hợp cho lên men khô dầu đậu nành Ths Trương Cơng ty Phước TNHH ThiênHồng Cố vấn tham Các điều kiện lên men bán rắn khô gia xây dựng Cơng Nghệ quy trình cơng dầu đậu nành sử Nông Lâm nghệ lên men dụng Bacillus sp khô dầu đậu Lactobacillus nành vi sp sinh vật TS Đoàn Phân Viện Tham gia thử Bộ số liệu thô Vĩnh Chăn nuôi nghiệm sản tiêu thụ thức ăn, phẩm khô dầu trọng lượng heo đậu nành lên con, tiến hành lấy men heo mẫu máu Nam Bộ KS Phan Phân Viện Tham gia thử Bộ số liệu thô Ngọc Thảo Chăn nuôi nghiệm sản tiêu thụ thức ăn, phẩm khô dầu trọng lượng heo đậu nành lên con, tiến hành lấy men heo mẫu máu Nam Bộ Ths Phan Thị Phân Viện Tham gia thử Bộ số liệu thô Tường Vi Chăn nuôi nghiệm sản tiêu thụ thức ăn, phẩm khô dầu trọng lượng heo đậu nành lên con, tiến hành lấy men heo mẫu máu Nam Bộ CN Vũ Minh Phân Viện Thực khảo Vi khuẩn Chăn nuôi Nam Bộ sát điều Lactobacillus sp kiện thích hợp có hoạt tính α- cho lên men galactosidase ≥ 20 Tham gia xây U/g dựng quy trình Bacillus sp có lên men khơ hoạt tính protease dầu đậu nành ≥ 400 U/g Xây vi sinh dựng quy trình lên vật sản xuất men bán rắn khô dầu đậu lên men KS Nguyễn Phân Viện Thị Hà Chăn nuôi Nam Bộ Thực khảo Vi khuẩn Lactobacillus sp sát điều kiện thích hợp có hoạt tính α- cho lên men galactosidase ≥ 20 Tham gia xây U/g dựng quy trình Bacillus sp có lên men khơ hoạt tính protease dầu đậu nành ≥ 400 U/g Xây vi sinh dựng quy trình lên vật sản xuất men bán rắn ổn khô dầu đậu định lên men Ths Nguyễn Phân Viện Tham gia phân Số liệu phân tích Thị Yến Chăn ni tích chất lượng thành phần dinh ngun liệu dưỡng khô khô dầu đậu dầu đậu nành Nam Bộ nành khô trước sau lên dầu đậu nành men lên men 10 KS Đinh Thị Phân Viện Tham gia thử Bộ số liệu thô Quỳnh Liên Chăn nuôi nghiệm sản tiêu thụ thức ăn, phẩm khô dầu trọng lượng heo đậu nành lên con, tiến hành lấy men heo mẫu máu Nam Bộ Tình hình hợp tác quốc tế: Số Theo kế hoạch Thực tế đạt TT Ghi chú* Tình hình tổ chức hội thảo, hội nghị: Số TT Theo kế hoạch Thực tế đạt (Nội dung, thời gian, kinh (Nội dung, thời gian, phí, địa điểm ) kinh phí, địa điểm ) Tổ chức buổi Hội thảo Đã tổ chức buổi Hội quy trình lên men bán rắn thảo quy trình lên khơ dầu đậu nành men bán rắn khơ dầu đậu nành vào tháng năm 2019 Phân viện Chăn nuôi Nam Bộ Ghi chú* VI PHỤ LỤC Phụ lục 1: Danh sách mẫu phân lập vi khuẩn Bacillus sp Nguồn mẫu Stt Code Ngày lấy Ngƣời lấy mẫu 8/7/2017 Chiên Phân Bò MC3C Ozonbiotic Extra MC4D 8/7/2017 Chiên Mẫu MI1A 8/9/2017 Minh Mẫu MI2B 8/9/2017 Minh Mẫu MI3C 8/9/2017 Minh Biosubtyl DL MI5E 8/9/2017 Minh Bion AQUA MV MI6F 8/9/2017 Minh Biogrowing MI7H 8/9/2017 Minh CP1 MI8I 8/9/2017 Minh 10 Lactotrep plus LC1A 8/28/2017 Chiên 11 Zentozin BH11A 8/28/2017 Hà 12 Sữa chua đậu nành NC5E 8/28/2017 Chiên 13 Sữa chua vinamilk NC9K 8/28/2017 Hà 14 Nước cải chua NT6F 9/15/2017 Thúy 15 Sữa yaourt Lothamilk NT5E 9/15/2017 Thúy 16 Sữa lên men Betagen NT4D 9/15/2017 Thúy 17 Nước măng chua NH13C 9/15/2017 Hà 18 Nước măng chua NT7H 9/15/2017 Thúy 19 Nước cà pháo NC8I 9/15/2017 Chiên 20 BIO II BIO Chiên 21 Phân heo Su Minh 22 Sản phẩm natto Natto Minh 23 Chủng Bộ mơn Sinh hóa– IASVN 139 Ths.Trần Quốc Nguồn mẫu Stt Code Tuấn-Bộ môn KHTN- ĐH Quốc gia TP.HCM Sinh hóa Chủng Bộ mơn Sinh hóa– Ths.Trần Quốc A1A Tuấn-Bộ mơn KHTN- ĐH Quốc gia TP.HCM Sinh hóa Chủng Bộ mơn Sinh hóa– Ths.Trần Quốc Khoa Sinh học- CNSH, Đại học A2B KHTN- ĐH Quốc gia TP.HCM 25 Ngƣời lấy Khoa Sinh học- CNSH, Đại học Khoa Sinh học- CNSH, Đại học 24 Ngày lấy mẫu Tuấn-Bộ mơn Sinh hóa Phụ lục 2: Danh sách mẫu phân lập vi khuẩn Lactobacillus sp STT Kí hiệu mẫu Mẫu Ngƣời lấy mẫu ĐỢT 1 BH1A pms-probio Hà BH2B Bio-acimin Hà BH3C Tech Antibio Hà BH4D Antibio-pro Hà BH5E Lactomin plus Hà BH6F Sữa lên men Yakult Hà BH7H Sữa chuaVinamilk Hà NH1A Nước đậu hũ Hà NH2B Nước cải chua Hà 10 NH3C Nước kim chi Hà 11 NT1A Nước cải chua Thúy 12 NT2B Nước măng chua Thúy 13 NT3C Nước môn chua Thúy 140 STT Kí hiệu mẫu Mẫu Ngƣời lấy mẫu ĐỢT 14 BH8I pms-probio Hà 15 BH9K Antibio-pro Hà 16 BH10T L-Bio Hà 17 BH11A zentozin Hà 18 BH12B Live probiotics himita Hà 19 BH13C Bio II 20 BH14D Sữa chuaVinamilk Hà 21 NH4D Nước cải chua Hà 22 NH5E Nước cà pháo Hà 23 BC1 Lactostrep plus Chiên 24 BC2 Ozonbiotic extra Chiên 25 NC Nước kiệu ngâm Chiên 26 NC2B Nước cà pháo Chiên 27 NC3C Nước măng chua Chiên 28 NC4D Nước cải chua Chiên 29 NC5E Sữa chua đậu nành Chiên 30 NC1Ch Nước cải chua 31 LC3C Nước kiệu ngâm Chiên 32 LC4D Nước cà pháo Chiên 33 LC5E Nước măng chua Chiên 34 LC6F Nước cải chua Chiên Công ty Phương Nam Hà ĐỢT 35 NH6F Sữa lên men Proby Hà 36 NH7H Sữa lên men Betagen Hà 37 NH8I Nước cà pháo Hà 141 STT Kí hiệu mẫu Mẫu Ngƣời lấy mẫu 38 NH9K Nước cải chua Hà 39 NH10T Sữa chua Lif Hà 40 NH11A Nước cà pháo Hà 41 NH12B Nước cải chua Hà 42 NH13C Nước măng chua Hà 43 NT4D Sữa lên men Betagen Thúy 44 NT5E Sữa yaourt Lothamilk Thúy 45 NT6F Nước cải chua Thúy 46 NT7H Nước măng chua Thúy 47 NC6F Nước cải chua Chiên 48 NC7H Nước cải chua Chiên 49 NC8I Nước cà pháo Chiên 50 NC9K Nước cóc ngâm Chiên 51 NC10T Nước cà pháo Chiên ĐỢT 47 NH14D Sữa lên men Yakult Hà 48 NH15E Nước cải chua Hà 49 NH16F Nước cải chua Hà 50 NH17H Nước cải chua Hà 51 NH18I Nước cải chua Hà 52 NH19K Nước cà pháo Hà 53 NH20T Nước cà pháo Hà 54 NH21A Nước cà pháo Hà 55 NH22B Nước cà pháo Hà 56 NH23C Nước măng chua Hà 142 Phụ lục 3: Phƣơng pháp xác định hoạt tính alpha-galactosidase Kiểm tra hoạt tính α-galactosidase theo phƣơng pháp Dey and Pridham Hoạt tính α-galactosidase định nghĩa sau: Một unit (U) hoạt tính lượng enzyme cần thiết để giải phóng μmoL of p-nitrophenol từ pNPG ml dịch phản ứng phút điều kiện phản ứng phía Chuẩn bị phản ứng eppendorf 1,5 ml Stt Hóa chất Test Acetate buffer 0,2M (pH = 5) 400 μl 400 µl Dung dịch chất pNPG 10 mM 50 µl 50 µl Dung dịch enzyme 50 µl - Blank Ghi Vortex, phản ứng 50oC 10 phút Dừng phản ứng cách cho vào dung dịch 0.5 M sodium carbonate lạnh 500 µl 500 µl Dung dịch enzyme - 50 µl Vortex Đo độ hấp thu quang bước sóng 405 nm Tổng thể tích ml Hoạt tính enzyme tính dựa vào đường chuẩn Dựng đƣờng chuẩn theo bảng sau: Đệm acetate 0.2M pH (μl) 400 400 400 400 400 400 10 Nước (μl) 100 98 96 94 92 90 Na2CO3 0.5M (μl) 500 500 500 500 500 500 0,2 0,4 0,6 0,8 pNP 10mM (μl) Nồng độ pNP (μmol/ml) Phụ lục 4: Kết định danh chủng vi khuẩn Bacillus subtilis IASVN 143 144 145 146 Phụ lục 5: Kết định danh chủng vi khuẩn Lactobacillus fermentum NC 147 148 149 Hình ảnh ni cấy vi khuẩn lên men khơ dầu đậu nành Sp Hình Sản phẩm khơ dầu đậu nành lên men Hình Chạy SDS-PAGE Hình Ủ khay lên men khơ dầu đậu nành với B.subtilis IASVN Hình Lên men khay với B.subtilis IASVN Hình Lên men khay với L.fermentum NC Hình Thiết bị hấp khử trùng khô dầu đậu nành 150 Thành phần dinh dƣỡng khô dầu đậu nành lên men tự sản xuất Chỉ tiêu Stt Kết Ẩm độ (%) 5,66 Protein (%) 49,66 Béo thô (%) 0,76 Xơ thơ (%) 3,22 Khống TS (%) 8,01 Chất chiết phi protein (%) 2,72 ME (kcal/kg) 3354 Axít amin (%) Asppartic axít Serine Glutamine Glycine Histidine Arginin Threonine Alanine Proline Cystine Tyrosine Valine Methionine Lysine Isoleucine Leucine Phenylalanine Tryptophan (kết tính trạng thái mẫu) 151 4,64 2,96 8,20 2,69 1,83 4,80 1,88 2,14 2,58 0,78 2,06 2,42 0,74 2,96 2,48 3,66 2,68 0,67 Khẩu phần thức ăn cho heo thí nghiệm Stt Nguyên liệu (kg) Dầu dừa Bắp ép đùn Tấm Bã nành Argentina Bã nành lên men (soytide) NT NT NT NT 9,7 14,4 16,7 19,1 485,4 471,5 464,5 457,6 100 100 100 100 132,1 141,6 146,3 151,0 100 50 25 - 50 75 100 Bã nành lên men tự sản xuất IAS Bột whey (lactose) 50 50 50 50 Bột sữa whey 11% 50 50 50 50 DCP 17% P 15,2 15,2 15,2 15,2 10 Bột đá vôi 10,7 10,6 10,6 10,6 11 Muối 4 4 12 Bột cá 60% CP 25 25 25 25 13 DL-Methionine 2,3 2,2 2,2 2,1 14 L-Threonine 2,7 2,7 2,7 2,7 15 L-Tryptophan 0,9 0,9 0,9 0,9 16 L-Lysine 4,0 4,0 3,9 3,9 17 Kẽm hữu 0,2 0,2 0,2 0,2 18 Vitamin đậm đặc 0,2 0,2 0,2 0,2 19 Men tiêu hóa 1,0 1,0 1,0 1,0 20 Axít hữu 4,0 4,0 4,0 4,0 21 Premix K+ Vitamin heo 2,5 2,5 2,5 2,5 1.000 1.000 1.000 1.000 Tổng 152 Thành phần dinh dƣỡng NL trao đổi heo (kcal/kg) 3.350 3.350 3.350 3.350 Protein (%) 19,00 19,00 19,00 19,00 Độ ẩm (%) 9,49 9,65 9,72 0,00 Chất béo (%) 3,47 3,88 4,10 0,00 Chất xơ (%) 2,46 2,46 2,46 0,00 Calcium (%) 1,00 1,00 1,00 1,00 Phot tổng số (%) 0,67 0,68 0,68 0,00 Phot hữu dụng cho heo (%) 0,45 0,45 0,45 0,45 Muối (NaCl) (%) 0,45 0,45 0,45 0,45 10 Arginine (%) 1,24 1,28 1,29 0,00 11 Lysine (%) 1,40 1,40 1,40 1,40 12 Methionine + Cystine (%) 0,84 0,84 0,84 0,84 13 Methionine (%) 0,53 0,53 0,52 0,52 14 Threonine (%) 0,99 0,99 0,99 0,99 15 Tryptophan (%) 0,30 0,30 0,30 0,30 16 Lactose (%) 8,15 8,15 8,15 8,15 Hình ảnh thí thử nghiệm khơ dầu đậu nành tự sản xuất heo Bố trí thí nghiệm Lấy mẫu máu 153