Khả năng kháng khuẩn của tinh dầu bạc hà đối với liên cầu khẩn streptococcus agalactiae gây bệnh xuất huyết trên cá điêu hồng oreochromis sp ở môi trường ao nuôi và phòng thí nghiệm

BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO TRƯỜNG ĐẠI HỌC SƯ PHẠM THÀNH PHỐ HỒ CHÍ MINH Nguyễn Thị Trúc Thảo KHẢ NĂNG KHÁNG KHUẨN CỦA TINH DẦU BẠC HÀ ĐỐI VỚI LIÊN CẦU KHUẨN Streptococcus agalactiae GÂY BỆNH XUẤT HUYẾT TRÊN CÁ ĐIÊU HỒNG (Oreochromis sp.) Ở MÔI TRƯỜNG AO NI VÀ PHỊNG THÍ NGHIỆM LUẬN VĂN THẠC SĨ SINH HỌC Thành phố Hồ Chí Minh - 2022 BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO TRƯỜNG ĐẠI HỌC SƯ PHẠM THÀNH PHỐ HỒ CHÍ MINH Nguyễn Thị Trúc Thảo KHẢ NĂNG KHÁNG KHUẨN CỦA TINH DẦU BẠC HÀ ĐỐI VỚI LIÊN CẦU KHUẨN Streptococcus agalactiae GÂY BỆNH XUẤT HUYẾT TRÊN CÁ ĐIÊU HỒNG (Oreochromis sp.) Ở MÔI TRƯỜNG AO NUÔI VÀ PHỊNG THÍ NGHIỆM Chun ngành : Sinh thái học Mã số : 8420120 LUẬN VĂN THẠC SĨ SINH HỌC NGƯỜI HƯỚNG DẪN KHOA HỌC: TS PHẠM CỬ THIỆN Thành phố Hồ Chí Minh – 2022 LỜI CAM ĐOAN Tơi cam đoan luận văn cơng trình nghiên cứu hướng dẫn TS Phạm Cử Thiện Kết trình bày luận văn trung thực chưa tác giả công bố cơng trình Các trích dẫn bảng biểu, kết nghiên cứu tác giả khác; tài liệu tham khảo luận văn/ luận án có nguồn gốc rõ ràng theo quy định TP Hồ Chí Minh, ngày 25 tháng 04 năm 2022 TÁC GIẢ LUẬN VĂN Nguyễn Thị Trúc Thảo LỜI CẢM ƠN Tôi xin chân thành cảm ơn hỗ trợ kinh phí từ đề tài cấp Bộ mã số B2021SPS-08 ThS Võ Văn Thanh chủ nhiệm Tôi xin gửi lời cảm ơn đến TS Phạm Cử Thiện cho nhiều ý kiến quý báu, hướng dẫn trình làm luận văn Tơi xin chân thành cảm ơn ThS Võ Văn Thanh – người tận tình giúp đỡ hỗ trợ tơi q trình học tập, nghiên cứu hồn thiện luận văn Tơi xin gửi lời cảm ơn đến em Trần Thị Hiếu sinh viên K43 em Trần Thị Lan Nhi sinh viên K44 hỗ trợ tơi q trình thực thí nghiệm Tơi xin trân trọng cảm ơn Giáo sư, Phó giáo sư, Tiến sĩ Hội đồng cấp đọc góp ý cho luận văn tơi TP Hồ Chí Minh, ngày 25 tháng 04 năm 2022 TÁC GIẢ LUẬN VĂN Nguyễn Thị Trúc Thảo MỤC LỤC Trang phụ bìa Lời cam đoan i Lời cảm ơn ii Mục lục iii Danh mục chữ viết tắt vi Danh mục bảng vii Danh mục hình viii MỞ ĐẦU Chương TỔNG QUAN 1.1 Lược sử nghiên cứu bệnh xuất huyết liên cầu khuẩn S agalactiae gây 1.1.1 Ngoài nước 1.1.2 Trong nước 1.2 Tổng quan bệnh xuất huyết liên cầu khuẩn S agalactiae gây 1.2.1 Tác nhân gây bệnh 1.2.2 Đặc điểm hình thái, cấu trúc hiển vi 1.2.3 Môi trường phát triển thuận lợi 1.2.4 Dấu hiệu bệnh lí 1.3 Tổng quan cá Điêu hồng 1.3.1 Phân loại 1.3.2 Nguồn gốc đặc điểm hình thái 1.3.3 Đặc điểm thích nghi điều kiện ao ni 1.3.4 Đặc điểm sinh sản 10 1.3.5 Những bệnh lí thường gặp cá Điêu hồng 10 1.4 Tổng quan huyết học cá 11 1.4.1 Khái niệm chung máu 11 1.4.2 Thành phần hữu hình máu 11 1.4.3 Các quan tạo máu 13 1.5 Tình hình nghiên cứu khả kháng khuẩn S agalactiae số loại vắc xin tinh dầu tự nhiên 15 1.5.1 Vắc xin 15 1.5.2 Tinh dầu tự nhiên 15 1.6 Tổng quan tinh dầu bạc hà 16 1.6.1 Phân loại Bạc hà 16 1.6.2 Đặc điểm 16 1.6.3 Tác dụng kháng khuẩn tinh dầu bạc hà 17 1.7 Nhận định lĩnh vực nghiên cứu đề tài 18 Chương PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 19 2.1 Thời gian, địa điểm tư liệu nghiên cứu 19 2.1.1 Thời gian nghiên cứu 19 2.1.2 Địa điểm nghiên cứu 19 2.1.3 Vật liệu nghiên cứu 19 2.2 Bố trí thí nghiệm 21 2.3 Phương pháp nghiên cứu 22 2.3.1 Phương pháp nuôi tăng sinh liên cầu khuẩn S agalactiae 22 2.3.2 Phương pháp pha loãng liên cầu khuẩn 23 2.3.3 Phương pháp thử hoạt tính kháng khuẩn S agalactiae tinh dầu bạc hà 23 2.3.4 Phương pháp chăm sóc cá quản lí thí nghiệm 23 2.3.5 Phương pháp gây nhiễm liên cầu khuẩn S agalactiae 25 2.3.6 Phương pháp bổ sung tinh dầu 25 2.3.7 Phương pháp thu thập phân tích máu 25 2.3.8 Phương pháp đánh giá tổn thương mô học 28 2.3.9 Phương pháp xử lí số liệu 28 Chương KẾT QUẢ VÀ BIỆN LUẬN 29 3.1 Khả kháng khuẩn tinh dầu bạc hà vi khuẩn S agalactiae điều kiện in vitro 29 3.2 Đặc điểm hình thái sinh lí máu cấu trúc mô học số nội quan cá Điêu hồng Oreochromis sp 29 3.2.1 Hình thái số loại tế bào máu 29 3.2.2 Cấu trúc mô học số nội quan cá Điêu hồng 32 3.3 Tác động vi khuẩn S agalactiae gây bệnh xuất huyết cá Điêu hồng thơng qua tiêu sinh lí máu hình thái tế bào hồng cầu 34 3.3.1 Các tiêu sinh lí máu 34 3.3.2 Kích thước hồng cầu 36 3.4 Tác động tinh dầu bạc hà đến số sinh lí máu kích thước hồng cầu cá Điêu hồng trước cảm nhiễm vi khuẩn S agalactiae điều kiện thí nghiệm 38 3.4.1 Các tiêu sinh lí máu 38 3.4.2 Kích thước hồng cầu 39 3.5 Hiệu kháng vi khuẩn S agalactiae gây bệnh xuất huyết tinh dầu bạc hà cá Điêu hồng thơng qua số sinh lí máu kích thước hồng cầu điều kiện thí nghiệm 40 3.5.1 Các tiêu sinh lí máu 40 3.5.2 Kích thước hồng cầu 45 3.6 Hiệu kháng vi khuẩn S agalactiae gây bệnh xuất huyết tinh dầu bạc hà cá Điêu hồng thông qua đánh giá cấu trúc mô bệnh học gan lách điều kiện thí nghiệm 47 3.6.1 Cấu trúc mô bệnh học gan 47 3.6.2 Cấu trúc mô bệnh học lách 49 3.7 Hiệu kháng vi khuẩn S agalactiae gây bệnh xuất huyết tinh dầu bạc hà cá Điêu hồng thông qua số sinh lí máu, kích thước tế bào hồng cầu tổn thương cấu trúc mô gan, lách điều kiện tự nhiên 51 3.7.1 Các số sinh lí máu kích thước hồng cầu 51 3.7.2 Cấu trúc mô học 54 KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ 59 DANH MỤC CƠNG TRÌNH CƠNG BỐ CỦA TÁC GIẢ 61 TÀI LIỆU THAM KHẢO 62 PHỤ LỤC PL1 DANH MỤC CÁC CHỮ VIẾT TẮT Kí hiệu Chú giải BC Bạch cầu ĐC Đối chứng Hb Hemoglobin HC Hồng cầu Hct Hematocrit HE Hematoxylin & Eosin NT Nghiệm thức NTĐC Nghiệm thức đối chứng TC Tiểu cầu TN Thí nghiệm DANH MỤC CÁC BẢNG Bảng 2.1 Dụng cụ thí nghiệm 20 Bảng 2.2 Bảng hố chất sử dụng cho thí nghiệm 20 Bảng 3.1 Một số số sinh lí máu cá Điêu hồng nhiễm vi khuẩn S agalactiae 34 Bảng 3.2 Kích thước hồng cầu cá Điêu hồng nhiễm vi khuẩn S agalactiae 36 Bảng 3.3 Một số số sinh lí máu cá Điêu hồng trước cảm nhiễm vi khuẩn S agalactiae 38 Bảng 3.4 Kích thước hồng cầu cá Điêu hồng nghiệm thức có bổ sung tinh dầu bạc hà phần ăn 39 Bảng 3.5 Một số số sinh lí máu cá Điêu hồng nghiệm thức sau cảm nhiễm vi khuẩn S agalactiae 41 Bảng 3.6 Khối lượng kích thước cá Điêu hồng nghiệm thức tinh dầu sau cảm nhiễm liên cầu khuẩn S agalactiae 45 Bảng 3.7 Kích thước hồng cầu cá Điêu hồng nghiệm thức tinh dầu sau cảm nhiễm vi khuẩn S agalactiae 46 Bảng 3.8 Một số số sinh lí máu cá Điêu hồng nghiệm thức bổ sung tinh dầu vào phần ăn sau năm ngày cảm nhiễm vi khuẩn S agalactiae nuôi điều kiện tự nhiên 51 Bảng 3.9 Kích thước hồng cầu máu cá Điêu hồng nghiệm thức tinh dầu sau năm ngày cảm nhiễm vi khuẩn S agalactiae nuôi điều kiện tự nhiên 53 DANH MỤC CÁC HÌNH Hình 2.1 Bố trí thí nghiệm điều kiện phịng thí nghiệm 24 Hình 2.2 Bố trí thí nghiệm nuôi điều kiện tự nhiên 24 Hình 2.3 Xác định nồng độ Hb huyết sắc kế Sahli 27 Hình 2.4 Sử dụng pipette bơm máu vào ống hematocrit 27 Hình 3.1 Vịng kháng khuẩn tinh dầu bạc hà S agalactiae 29 Hình 3.2 Hồng cầu ngoại vi cá Điêu hồng Oreochromis sp 30 Hình 3.3 Bạch cầu ngoại vi cá Điêu hồng Oreochromis sp 31 Hình 3.4 Cấu trúc mô gan cá Điêu hồng Oreochromis sp khỏe mạnh 32 Hình 3.5 Cấu tạo mơ lách cá Điêu hồng Oreochromis sp bình thường 33 Hình 3.6 Một số dạng hồng cầu bất thường ngoại vi cá Điêu hồng Oreochromis sp nhiễm vi khuẩn S agalactiae 37 Hình 3.7 Đồ thị thể tương quan hai yếu tố thời gian nồng độ tinh dầu bạc hà ảnh hưởng đến tiêu sinh lí máu cá Điêu hồng 43 Hình 3.8 Cấu trúc mô gan cá Điêu hồng nhiễm vi khuẩn S agalactiae 47 Hình 3.9 Cấu trúc mô gan cá Điêu hồng nghiệm thức tinh dầu sau nhiễm vi khuẩn S agalactiae 48 Hình 3.10 Cấu trúc mô lách cá Điêu hồng nhiễm vi khuẩn S agalactiae 49 Hình 3.11 Cấu trúc mơ lách cá Điêu hồng nghiệm thức tinh dầu sau nhiễm vi khuẩn S agalactiae 50 Hình 3.12 Cấu trúc mơ gan cá Điêu hồng nhiễm vi khuẩn S agalactiae nghiệm thức tinh dầu nuôi điều kiện tự nhiên 55 Hình 3.13 Cấu trúc mô lách cá Điêu hồng nhiễm vi khuẩn S agalactiae nghiệm thức bổ sung tinh dầu điều kiện tự nhiên 56 PL9 Means KL-NT1-10N 15 136,8 A B A B Factor N Mean StDev 95% CI KL-NT2-10N 15 133,99 KL-ĐC2-5N 100,36 23,94 (79,76 120,95) KL-ĐC 2-10N 10 98,8 KL-NT1-5N 15 134,19 36,28 (118,24 150,15) KL-NT2-5N 15 135,85 24,17 (119,89 151,80) KL-NT3-5N 15 150,17 33,92 (134,22 166,13) Pooled StDev = 30,7591 Grouping Information Using the Tukey Method and 95% Confidence Factor N Mean Grouping KL-NT3-5N 15 150,17 A KL-NT2-5N 15 135,85 A KL-NT1-5N 15 134,19 A KL-ĐC2-5N 100,36 B B Means that not share a letter are significantly different Means Factor N Mean StDev 95% CI KL-ĐC 2- 98,8 36,7 (76,3 121,3) 10N KL-NT1-10N 136,8 39,0 (118,4 155,2) 133,9 31,7 (115,61 152,38) 138,7 34,4 (120,32 157,09) KL-NT2-10N KL-NT3-10N Pooled StDev = 35,4641 Grouping Information Using the Tukey Method and 95% Confidence Factor KL-NT3-10N N Mean 15 138,71 Grouping A B Means that not share a letter are significantly different PL10 Means that not share a letter are significantly Kích thước (Xử lí số liệu) different Means Factor N Mean StDev 95% CI 22 17,65 0,98 (17,133 18,167) KT-ĐC2-5N 17,30 0,89 (16,442 18,158) KT-ĐC2-10N 10 17,72 1,75 (16,953 18,487) KT-ĐC1 Pooled StDev = 1,19742 Grouping Information Using the Tukey Method and 95% Confidence Factor N Mean Grouping KT-ĐC2-10N 10 17,72 A KT-ĐC1 22 17,65 A 17,30 A KT-ĐC2-5N Means that not share a letter are significantly different Means Factor N Mean StDev 95% CI KT-ĐC1 22 17,65 0,98 (17,133 18,167) KT-NT1-0N 15 17,01 1,39 (16,387 17,640) KT-NT2-0N 15 18,00 1,16 (17,374 18,626) KT-NT3-0N 15 19,41 1,38 (18,787 20,040) Pooled StDev = 1,21374 Grouping Information Using the Tukey Method and 95% Confidence Factor N Mean Grouping KT-NT3-0N 15 19,41 A KT-NT2-0N 15 18,00 B KT-ĐC1 22 17,65 B KT-NT1-0N 15 17,01 B PL11 Means Means Factor N Mean StDev 95% CI KT-ĐC2-5N 17,30 0,89 (16,295 18,305) KT-NT1-5N 15 19,14 1,81 KT-NT2-5N 15 19,39 KT-NT3-5N 15 20,28 Factor N Mean StDev 95% CI KT-ĐC2-10N 10 17,72 1,75 (16,662 18,778) (18,406 19,874) KT-NT1-10N 15 19,55 1,90 (18,683 20,411) 1,12 (18,660 20,127) KT-NT2-10N 15 19,41 1,39 (18,543 20,271) 1,44 (19,546 21,014) KT-NT3-10N 15 19,61 1,61 (18,749 20,477) Pooled StDev = 1,41428 Pooled StDev = 1,66651 Grouping Information Using the Grouping Information Using the Tukey Method and 95% Tukey Method and 95% Confidence Confidence Factor N Mean Grouping Factor N Mean Grouping KT-NT3-5N 15 20,28 A KT-NT3-10N 15 19,61 A KT-NT2-5N 15 19,39 A KT-NT1-10N 15 19,55 A KT-NT1-5N 15 19,14 A KT-NT2-10N 15 19,41 A KT-ĐC2-5N 17,30 KT-ĐC2-10N 10 17,72 B B B Means that not share a letter are significantly Means that not share a letter are significantly different different PL12 Thí nghiệm 2: Cá Điêu hồng ni điều kiện tự nhiên Phụ lục Chỉ số hematocrit Means Factor HCT-NT45N Means N Mean 7 37,9 StDev 9,77 95% CI (35,64 40,23) HCT-NT55N 42,1 12,5 (39,77 44,53) HCT-NT65N 36,9 2,90 (33,339 40,473) Pooled StDev = 10,2257 Grouping Information Using the Tukey Method and 95% Confidence Factor HCT-NT5-5N HCT-NT4-5N N 72 77 Mean 42,15 37,94 HCT-NT6-5N 32 36,91 Grouping A B B Means HCT-NT40N HCT-NT50N HCT-NT60N N Mean StDev 95% CI 13 79 44,5 46,8 38,7 6,5 7,5 5,3 (43,378 45,682) (45,328 48,318) (36,634 40,945) 38 N Mean StDev 95% CI HCT-NT4-0N 133 44,53 6,59 (43,179 45,882) HCT-NT4-5N 77 37,94 9,77 (36,16 39,71) Pooled StDev = 7,90571 Grouping Information Using the Tukey Method and 95% Confidence Factor HCT-NT4-0N N 133 Mean 44,53 HCT-NT4-5N 77 37,94 Pooled StDev = 6,74738 Grouping Information Using the Tukey Method and 95% Confidence Factor HCT-NT5-0N N 79 Mean 46,82 Grouping A HCT-NT4-0N HCT-NT6-0N 133 38 44,53 38,79 B C Means that not share a letter are significantly different Grouping A B Means that not share a letter are significantly different Means Factor Means that not share a letter are significantly different Factor Factor N Mean StDev 95% CI HCT-NT5-0N 79 46,82 7,56 (44,552 49,094) HCT-NT5-5N 72 42,15 12,50 (39,77 44,53) Pooled StDev = 10,2154 Grouping Information Using the Tukey Method and 95% Confidence Factor HCT-NT5-0N HCT-NT5-5N N 79 72 Mean 46,82 42,15 Grouping A B Means that not share a letter are significantly different Means Factor N Mean StDev 95% CI HCT-NT60N 38,7 5,3 (37,369 40,210) HCT-NT65N 36,9 2,9 (35,359 38,454) Pooled StDev = 4,38754 Grouping Information Using the Tukey Method and 95% Confidence Factor HCT-NT6-0N HCT-NT6-5N N 38 32 Mean 38,79 36,91 Grouping A A Means that not share a letter are significantly different PL13 Phụ lục Hàm lượng hemoglobin Means Grouping Information Using the 95% CI Tukey Method and 95% Factor N Mean StDev Hb-NT4- 8,2 0,5 0N 3 Hb-NT5- 8,7 0,3 (8,4060 Factor 0N 9,1469) Hb-NT6- 8,0 1,1 0N (7,807 8,654) (7,606 8,394) Grouping Information Using the Tukey Method and 95% Confidence Hb-NT5-0N N Mean 17 8,78 Hb-NT4-0N 13 8,23 Hb-NT6-0N 15 8,00 N Mean Hb-NT4-0N 13 8,23 Hb-NT4-5N 30 6,90 Grouping A A B different Means Factor N Mean StDev 95% CI Hb-NT5- 8,7 0,3 (8,4520 0N 9,1009) Hb-NT5- 8,0 0,7 5N (7,826 8,314) B B Grouping Information Using the different Tukey Method and 95% Confidence Means Factor N Mean StDev 95% CI Hb-NT4-5N 30 6,90 1,48 (6,482 7,318) Hb-NT5-5N 30 8,07 0,79 (7,652 8,488) Hb-NT6-5N 12 7,21 0,89 (6,547 7,869) Factor N Mean Hb-NT5-0N 17 8,78 Hb-NT5-5N 30 8,07 different Grouping Information Using the Means Tukey Method and 95% Factor Confidence Grouping A B Means that not share a letter are significantly Pooled StDev = 1,14798 N Mean StDev 95% CI Hb-NT6-0N 15 8,0 1,18 (7,435 8,565) Hb-NT6-5N 12 7,2 0,89 (6,577 7,840) Grouping Pooled StDev = 1,06225 8,07 A Grouping Information Using the 12 7,21 A 30 6,90 N Mean Hb-NT5-5N 30 Hb-NT6-5N Hb-NT4-5N B Tukey Method and 95% B Confidence Means that not share a letter are significantly different Factor Means Factor A Pooled StDev = 0,664222 Means that not share a letter are significantly Factor Grouping Means that not share a letter are significantly Pooled StDev = 0,756846 Factor Confidence N Mean StDev 95% CI Hb-NT4-0N 13 8,23 0,50 (7,515 8,946) Hb-NT4-5N 30 6,90 1,48 (6,429 7,371) Pooled StDev = 1,27765 N Mean Grouping Hb-NT6-0N 15 8,00 A Hb-NT6-5N 12 7,21 A Means that not share a letter are significantly different PL14 Phụ lục Số lượng hồng cầu Means Factor N Mean StDev HC-NT40N 6 1,5 0,2 (1,4295 1,5677) 95% CI HC-NT50N 1,8 0,3 (1,7762 1,9263) HC-NT60N 1,4 0,3 (1,3064 1,5266) Pooled StDev = 0,284030 Grouping Information Using the Tukey Method and 95% Confidence Factor HC-NT5-0N HC-NT4-0N HC-NT6-0N N 56 66 26 Mean 1,85 1,50 1,42 Grouping A B B Means that not share a letter are significantly different Means Factor HC-NT45N HC-NT55N HC-NT65N N Mea n 1,19 StDe v 0,18 1,59 0,26 1,39 0,33 95% CI (1,1127 1,2733) (1,4939 1,6764) (1,2912 1,4798) Pooled StDev = 0,255910 Grouping Information Using the Tukey Method and 95% Confidence Factor HC-NT5-5N HC-NT6-5N HC-NT4-5N N 31 29 40 Mean 1,59 1,39 1,19 Grouping A B C Means that not share a letter are significantly different Means Factor N Mean StDev HC-NT40N 6 1,5 0,2 95% CI (1,4437 1,5536) HC-NT45N 1,1 0,1 (1,1224 1,2636) Pooled StDev = 0,225103 Grouping Information Using the Tukey Method and 95% Confidence Factor HC-NT4-0N HC-NT4-5N N 66 40 Mean 1,50 1,19 Grouping A B Means that not share a letter are significantly different Means Factor N Mean StDev HC-NT50N 1,8 0,3 (1,7720 1,9305) 95% CI HC-NT55N 1,5 0,2 (1,4787 1,6917) Pooled StDev = 0,298257 Grouping Information Using the Tukey Method and 95% Confidence Factor HC-NT5-0N HC-NT5-5N N 56 31 Mean 1,8513 1,5852 Grouping A B Means that not share a letter are significantly different Means Factor N Mean StDev HC-NT60N 1,4 0,3 (1,2931 1,5400) 95% CI HC-NT65N 1,3 0,3 (1,2686 1,5024) Pooled StDev = 0,313799 Grouping Information Using the Tukey Method and 95% Confidence Factor HC-NT6-0N HC-NT6-5N N 26 29 Mean 1,42 1,39 Grouping A A Means that not share a letter are significantly different PL15 Phụ lục 10 Tổng BC TC Means Xử lí số liệu Means Factor Factor N Mean StDev 95% CI BC-NT4-0N 87 8,48 3,75 (7,748 9,222) BC-NT5-0N 23 11,79 2,01 (10,360 13,226) BC-NT6-0N 13,36 3,56 (11,06 15,65) Pooled StDev = 3,47015 Grouping Information Using the Tukey Method and 95% Confidence Factor N Mean Grouping BC-NT6-0N 13,36 A BC-NT5-0N 23 11,79 A BC-NT4-0N 87 8,48 B Means that not share a letter are significantly different Means Factor N Mean StDev 95% CI BC-NT4-5N 33 6,44 3,16 (5,249 7,624) BC-NT5-5N 19 8,59 2,30 (7,024 10,154) BC-NT6-5N 29 12,62 4,23 (11,352 13,886) Pooled StDev = 3,42597 Grouping Information Using the Tukey Method and 95% Confidence Factor N Mean Grouping BC-NT6-5N 29 12,62 A BC-NT5-5N 19 8,59 B BC-NT4-5N 33 6,44 B Means that not share a letter are significantly different N Mean StDev 95% CI BC-NT4-0N 87 8,48 3,75 (7,721 9,248) BC-NT4-5N 33 6,44 3,16 (5,197 7,676) Pooled StDev = 3,59613 PL16 Grouping Information Using the BC-NT5-0N 23 11,79 Tukey Method and 95% BC-NT5-5N 19 8,59 B Means that not share a letter are significantly Confidence Factor A different N Mean BC-NT4-0N 87 8,48 BC-NT4-5N 33 6,44 Grouping A B Means that not share a letter are significantly Means Factor N Mean StDev 95% CI BC-NT6-0N 13,36 3,56 (10,59 16,12) BC-NT6-5N 29 12,62 4,23 (11,078 14,160) different Pooled StDev = 4,09155 Means Grouping Information Using the Factor N Mean StDev 95% CI BC-NT5-0N 23 11,79 2,01 (10,890 12,696) BC-NT5-5N 19 8,59 2,30 (7,595 9,583) Tukey Method and 95% Confidence Pooled StDev = 2,14311 Factor N Mean Grouping Grouping Information Using the BC-NT6-0N 13,36 A Tukey Method and 95% BC-NT6-5N 29 12,62 A Means that not share a letter are significantly Confidence Factor different N Mean Grouping PL17 Phụ lục 11 Kích thước tế bào hồng cầu Xử lí số liệu Means Factor Means N Mean StDev 95% CI TL-NT4-0N 460 29,16 2,82 (28,926 29,392) TL-NT5-0N 161 25,62 2,19 (25,224 26,012) TL-NT6-0N 150 25,19 1,95 (24,784 25,600) Pooled StDev = 2,54609 Tukey Method and 95% Confidence N Mean Grouping TL-NT4-0N 460 29,16 A TL-NT5-0N 161 25,62 B TL-NT6-0N 150 25,19 B Means that not share a letter are significantly different Means Factor N Mean StDev TL-NT4-5N 180 25,36 2,58 (25,039 25,680) TL-NT5-5N 281 24,85 2,03 (24,590 25,103) TL-NT6-5N 290 24,25 2,07 (24,002 24,507) 95% CI Pooled StDev = 2,18835 Grouping Information Using the Tukey Method and 95% Confidence Factor N Mean Grouping TL-NT4-5N 180 25,36 A TL-NT5-5N 281 24,85 TL-NT6-5N 290 24,25 B C Means that not share a letter are significantly different N Mean StDev TB-NT4-0N 460 21,01 2,63 (20,796 21,233) TB-NT5-0N 161 17,63 1,89 (17,258 17,996) TB-NT6-0N 150 17,88 2,03 (17,499 18,264) Pooled StDev = 2,38491 Grouping Information Using the Factor Factor 95% CI PL18 Grouping Information Using the Pooled StDev = 5,87121 Tukey Method and 95% Confidence Factor N Mean Grouping TB-NT4-0N 460 21,01 A TB-NT6-0N 150 17,88 B Tukey Method and 95% TB-NT5-0N 161 17,63 B Confidence Grouping Information Using the Means that not share a letter are significantly different Means Factor N Mean StDev 95% CI TB-NT4-5N 180 17,82 2,25 (17,558 18,092) TB-NT5-5N 281 17,39 1,73 (17,175 17,603) TB-NT6-5N 290 17,21 1,61 (16,9978 17,4187) Pooled StDev = 1,82570 Grouping Information Using the Tukey Method and 95% Confidence Factor N Mean Grouping TB-NT4-5N 180 17,82 A TB-NT5-5N 281 17,39 B TB-NT6-5N 290 17,21 B Means that not share a letter are significantly different Means Factor CV-NT40N CV-NT50N CV-NT60N Mea StDe N n v 95% CI 46 80,04 6,46 (79,503 16 80,578) 69,19 5,00 15 (68,286 70,103) 68,75 4,73 (67,809 69,691) Factor N Mean Grouping CV-NT4-0N 460 80,041 CV-NT5-0N 161 69,194 B CV-NT6-0N 150 68,750 B A Means that not share a letter are significantly different PL19 Means Means StDe Factor CV-NT45N CV-NT55N CV-NT65N StDe N Mean v 95% CI Factor 18 68,97 6,455 (68,242 DT-NT4- 69,709) 5N 28 67,48 (66,895 DT-NT5- 68,069) 5N 29 66,16 (65,590 DT-NT6- 66,746) 5N 4,459 4,469 N Mean v 95% CI 18 356,9 68,40 (349,40 28 339,5 29 328,0 364,43) 45,59 (333,54 345,56) 43,70 (322,16 334,00) Pooled StDev = 5,01258 Pooled StDev = 51,3369 Grouping Information Using the Grouping Information Using the Tukey Tukey Method and 95% Confidence Method and 95% Confidence Factor N Mean CV-NT4-5N 180 68,975 CV-NT5-5N 281 67,482 CV-NT6-5N 290 66,168 Grouping A B C Means that not share a letter are significantly different Means StDe Factor DT-NT40N DT-NT50N DT-NT60N N Mean v 95% CI 46 481,9 81,28 (475,38 0 16 355,2 15 354,3 488,42) 52,86 (344,17 366,22) 53,01 (342,91 365,74) Pooled StDev = 71,2420 Grouping Information Using the Tukey Method and 95% Confidence Factor N Mean Grouping DT-NT4-0N 460 481,90 DT-NT5-0N 161 355,20 B DT-NT6-0N 150 354,33 B A Means that not share a letter are significantly different Factor N Mean DT-NT4-5N 180 356,91 DT-NT5-5N 281 339,55 DT-NT6-5N 290 328,08 Grouping A B C Means that not share a letter are significantly different PL20 Means Factor N Mean StDev 95% CI TL-NT4-0N 460 29,16 2,82 (28,907 29,411) TL-NT4-5N 180 25,36 2,58 (24,957 25,763) TB-NT4-0N 460 21,01 TB-NT4-5N 180 17,82 Means Factor Grouping Information Using the Tukey Method and 95% Confidence N Mean Grouping TL-NT4-0N 460 29,16 A TL-NT4-5N 180 25,36 N Mean StDev TB-NT5-0N 161 17,63 1,89 (17,350 17,904) TB-NT5-5N 281 17,39 1,73 (17,179 17,598) Grouping Information Using the Tukey Method and 95% Confidence B Factor Means N Mean StDev TL-NT6-0N 150 25,19 1,95 (24,867 25,518) TL-NT6-5N 290 24,25 2,07 (24,020 24,488) 95% CI Pooled StDev = 2,02874 Grouping Information Using the Tukey N Mean Grouping TL-NT6-0N 150 25,19 A TL-NT6-5N 290 24,25 N Mean Grouping TB-NT5-0N 161 17,63 A TB-NT5-5N 281 17,39 A Means that not share a letter are significantly different Means Factor N Mean StDev TB-NT6-0N 150 17,88 2,03 (17,598 18,165) TB-NT6-5N 290 17,21 1,61 (17,0044 17,4121) Grouping Information Using the Tukey Method and 95% Confidence B Factor N Mean Grouping A Means that not share a letter are significantly different TB-NT6-0N 150 17,88 Means TB-NT6-5N 290 17,21 Factor N Mean StDev TL-NT5-0N 161 25,62 2,19 (25,294 25,941) TL-NT5-5N 281 24,85 2,03 (24,601 25,091) 95% CI Means Factor Means CV-NT40N N Mean StDev 95% CI TB-NT4-0N 460 21,01 2,63 (20,783 21,246) TB-NT4-5N 180 17,82 2,25 (17,454 18,195) Pooled StDev = 2,53075 Tukey Method and 95% Confidence N Mean CV-NT45N Mea StDe N n v 95% CI 46 80,04 6,46 (79,450 18 80,632) 68,98 6,45 (68,031 69,920) Pooled StDev = 6,45508 Grouping Information Using the Tukey Grouping Information Using the Factor B Means that not share a letter are significantly different Pooled StDev = 2,08879 Factor 95% CI Pooled StDev = 1,76647 Method and 95% Confidence Factor 95% CI Pooled StDev = 1,78918 Means that not share a letter are significantly different Factor B Means that not share a letter are significantly different Pooled StDev = 2,75380 Factor A Grouping Method and 95% Confidence Factor CV-NT4-0N N Mean Grouping 460 80,04 A PL21 CV-NT4-5N 180 68,98 Pooled StDev = 77,8799 B Means that not share a letter are significantly different Means Method and 95% Confidence Mea StDe N n v 95% CI 16 69,19 5,00 (68,472 Factor CV-NT50N CV-NT5- Grouping Information Using the Tukey Factor 28 5N 69,917) 67,48 4,46 (66,935 68,029) N Mean DT-NT4-0N 460 481,90 DT-NT4-5N 180 356,91 Grouping A B Means that not share a letter are significantly different Means StDe Pooled StDev = 4,66462 Grouping Information Using the Tukey Method and 95% Confidence Factor Factor DT-NT50N N Mean Grouping DT-NT5- CV-NT5-0N 161 69,19 A 5N CV-NT5-5N 281 67,48 Means v 95% CI 16 355,2 52,86 (347,71 28 339,5 StDe N n v 95% CI 15 68,75 4,73 (68,018 0N 29 5N 69,482) 66,17 4,47 Factor N Mean DT-NT5-0N 161 355,20 DT-NT5-5N 281 339,55 B StDe Factor DT-NT6- N Mean Grouping 0N 68,75 A DT-NT6- CV-NT6-5N 290 66,17 B 5N Means that not share a letter are significantly different N Mean v 95% CI 15 354,3 53,01 (346,77 29 328,0 361,88) 43,70 (322,64 333,51) Pooled StDev = 47,0749 Means Grouping Information Using the Tukey Method StDe 5N A Means 150 DT-NT4- Grouping 66,694) CV-NT6-0N 0N 345,22) Means that not share a letter are significantly different Method and 95% Confidence DT-NT4- (333,88 (65,641 Grouping Information Using the Tukey Factor 45,59 Grouping Information Using the Pooled StDev = 4,56059 Factor 362,69) Tukey Method and 95% Confidence Mea Factor CV-NT6- Mean Pooled StDev = 48,3590 B Means that not share a letter are significantly different CV-NT6- N and 95% Confidence N Mean v 95% CI Factor 46 481,9 81,28 (474,77 489,03) 0 18 356,9 68,40 (345,51 368,31) N Mean DT-NT6-0N 150 354,33 DT-NT6-5N 290 328,08 Grouping A B Means that not share a letter are significantly different PL22 Phụ lục 12 Bảng thành phần hóa học tinh dầu bạc hà PL23