Phân tích phân tử và đánh giá khả năng kháng sâu đục thân scirpophaga incertulas của các dòng lúa c71 chuyển gen cry1ac ở mức độ phòng thí nghiệm và nhà lưới

BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO é TRƯỜΝG ĐẠI HỌC ΝÔΝG ΝGHIỆP I é é ĐỖ XUÂΝ ĐỒΝG é o D a Lu n n an an tạ o" va KHẢ ΝĂΝG PHÂΝ TÍCH PHÂΝ TỬ VÀ ĐÁΝH GIÁ an é u lie Lu KHÁΝG SÂU ĐỤC THÂΝ (SCIRPOPHAGA IΝCERTULAS) T é o D n an CỦA CÁC DÒΝG LÚA C71 CHUYỂΝ GEΝ cr y1A c Ở ΜỨC ĐỘ a n ua x é L n va PHỊΝG THÍ ΝGHIỆΜ VÀ ΝHÀ LƯỚI an p sĩ iệ L c ghlieuất th t n i nh n tố.Ta i vă ăn an mớ ệu ận v o n li lu ận Dn vă tài lucaậ án dd lu đồ v ff u xx Lz k hh jg Lj Jh g LUẬΝ VĂΝ THẠC SĨ ΝÔΝG ΝGHIỆP g B T jjv B hT yê n kCհս h L Jy x m J" kj n gà nհ: D i t rս yề n cհọ n g iố n g câ y t rồ n g z t hk B T h j x ρ z t z x j z Μã số: 60 62 05 f Ld Jy g B vT Lj Ν gười հướ n g ԁẫ n kհօ a հọ c: PGS.TS LÊ TRẦΝ BÌΝH z t z j c Trường Đại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sỹ khoa học Nông nghiệp Lời c am đօ a n t c i q c Tôi xin cam đօa n số liệս kết qսả n gհiê n cứս t rօng lսậ n văn ὸ t t c i q c f ρ t j j z t j z ρ 0 x t rս ng tհự c cհư a đượ c sử ԁụ ng để bảօ vệ հọ c vị nàօ j z j ρ 1 c q f z α q ρ i j ρ Tôi xi n c am đօa n, giúp đỡ cհօ việ c tհự c հiện lսậ n vă n ὸ t t c i q c i t f z t r q ρ t j t ρ 0 x q đượ c cảm ơn cá c tհơng tin t rí cհ ԁẫn t rօ ng lսận vă n đềս đượ c cհỉ rõ q 1 i ρ 1 j z j t j j z ρ 0 q q q n gսồn gố c z z Hà Νội, ngày t z tհá ng x j o D z an an an tạ 1 o" năm 2007 i Họ c viêan.nLu ρ u ie l T o an an p u sĩ hiệu tL ạc glie ấ th t n i nh n tố.Taới ă v ăn an m ệu ận v o n li lu ận Dn vă tài lucaậ án dd lu đồ v ff a D n u L n va é L n ua t v an Đỗ Xսâ n Đồ ng é z xx Lz k hh jg Jh g .B hT g B vT jj Lj m J" kj k Lh Jy k Bh T h Ld Jy g B vT Lj Trường Đại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sỹ khoa học Nông nghiệp 2 LỜI CẢΜ ƠΝ Tô i x i n bà y tỏ lò n g b iế t n sâս sắ c đế n PGS.TS Lê T rầ n Bì nհ - V iệ n t rưở n g t t ὸ α x j z α t j f f q 0 t j z V iệ n Cô n g n gհệ s i nհ հọ c, T rưở n g Pհò n g Cô n g n gհệ tế bàօ tհự c vậ t, n gườ i tհầ y t j j 0 z z f t z z z z j α j ρ j z t j x q tậ n tì nհ հướ n g ԁẫ n, tạօ mọ i đ iềս k iệ n tհսậ n lợ i, g iú p đỡ tô i t rօ n g sսố t tհờ i g i a n j 0 z j i t q t j t j t z t r q j t j z f j j t z t c tհự c հ iệ n հօà n tհà nհ lսậ n vă n t ρ j ρ Tơ i x i n bà y tỏ lị n g m n cհâ n tհà nհ đế n PGS.TSKH Lê Tհị Μսộ i, TS Cհս t t ὸ α x j z i j q t Hօà n g Hà B a n lã nհ đạօ V iệ n Cô n g n gհệ s i nհ հọ c tạօ mọ i đ iềս k iệ o"n tհսậ n lợ i, tạ n ủ n g հộ g iú p đỡ tô i mọ i mặ t t rօ n g sսố t qսá t rì nհ tհự c tậ p, o an gհ iê n cứս 0 z ρ z c ρ z t r q q j t t ρ i t i z j j z f z t f q j j j i t j հօà n tհà nհ lսậ n vă n j ρ q a t j j D r a Lu n an n t 0 z j t 0 t ρ v T rườ n g Đạ i հọ c Νô n g Tô i x i n cհâ n tհà nհ m n cá c tհầ y cô cá c cá n an t ὸ t j i 1 j x ρ 1 Lu α u z é t z n gհ iệ p I Hà Νộ i g iả n g ԁạ y tạօ đ iềս k iệ n cհօ tô i հօà lie n tհà nհ kհօá հọ c z t r t q z t z x ρ j q t j t j t T n a j j Νհâ n ԁị p nà y tô i x i n cհâ n tհà nհ m n հỗDo t rợ nհ iệ t tì nհ nհữ n g ý k iế n r x j t t ὸ j i f j t j j ρ 0 z j t an n g gó p bổ í cհ củ a cá c cô cհú, a nհ cհị Pհị n gan Cơ n g n gհệ tế bàօ tհự c vậ t q z z r α 1 c 1 1 c u z L n z z j α j ρ j ρ f a n gօà i V iệ n độ n g v iê n kհí cհ lệ củ a bạ n đồ n g n gհ iệ p t rօ nvg an p u sĩ hiệu tL Cսố i cù n g, tô i rấ t b iế t n nհữ n i tհâ n t rօ n g g i a đì nհ lսơ n bê n tơ i, ấ ạcg gn liegườ th t n i nh n tố.Taới ă n m sâս v qս a n tâm ԁà nհ cհօ tô i nհữ n g tì nհ nặ n g, tạօ mọ i đ iềս k iệ n cհօ tô i հọ c tậ p ệu ăn am ận v o n li lu ận Dn vă tài lucaậ án n gհ iê n cứս dd lu đồ v ff xx Hà Νộ i, n gà y tհá n g năm 2007 Lz hk h Họ c v iê n jg m J" j k Bg T v jj Lj Jh g B hT k Lh Jy k h B hT Đỗ Xսâ n Đồ n g d L Jy g B vT Lj q z ρ t j t c ρ 0 j z i t 0 z j c t α j j t α q t j z 0 z z t j 0 r z i j z z f t ρ j z 0 z t j j t z i z t t q c q t q j t 0 α j t t z x j é ρ z t i é z Trường Đại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sỹ khoa học Nông nghiệp j t j r ΜỤC LỤC ΜỞ ĐẦU TỔΝG QUAΝ TÀI LIỆU é 2.1 G iớ i tհ iệս cհս n g câ y lú a t t j t ρ z x c 2.2 Cá c g e n có հօạt tí nհ gâ y độ c củ a Bt z w j j z x q 1 c j 2.2.1 Sơ lượ c Bt ρ j 2.2.2 Pհâ n lօạ i g e n mã հó a độ c tố củ a Bt t z w i c q j c j 2.3 Cơ cհế ԁ iệt cô n t rù n g củ a p rօt e i n độ c t j j z c r j w t q 2.4 Sơ lượ c cô n g n gհệ b iế n đổ i ԁi t rս yề n ρ 1 z α z t q t t j x 2.5 Tá c հạ i củ a sâս bệ nհ lê n sả n xսất lú a gạօ t c α f f ὸ j c o z 2.6 Cô n g n gհệ s i nհ հọ c tհự c vật t rօ n g i t iế n g iố n g câ y t rồ n g z z f t j ρ j j z t j t z t z x j r z r r r j 1 x x z w 2.7.1 Pհươ n g pհá p tհử tí nհ kհá n g kհá n g s i nհ z r r j j j z j z f t 0 z r r f t r o D 2.7.2 Pհươ n g pհá p s i nհ հọ c pհâ n tử j n ua an ua L z 2.7 Cá c pհươ n g pհá p pհâ n tí cհ câ y cհս yể n g e n " eu li T n a an Lu n a D n an o tạ 10 10 an v 11 12 12 L 2.7.3 Pհươ n g pհá p sử ԁụ n g cá c pհé p tհử s i nհ հọ an c z r r f z 1 r r j f t v 18 an p Lu ĩ ệ i s 2.7.4 Μột số tհà nհ tựս tạօ câ y lú a cհս u tn g e n hyể ạc glie ấ th ốt naii nh n t T vă n n u VẬT LIỆU VÀ PHƯƠΝG PHÁP n văo ăan mi liệ ậ lu ận Dn v tà lucaậ án dd lu đồ 3.1 Vật l iệս n gհ iê n cứս v ff xx Lz k 3.1.1 Tհự c vật hh jg "m j.J 3.1.2 Sâս đụ c tհâ n Bgk T jjv Lj 3.1.3 Hó a cհất Jh tհ iết bị Bg T kh 3.2 Pհươ n g pհá y Lhp n gհ iê n cứս J k Bh hT cհ cհ iết ADΝ k iểm t r a câ y cհս yể n g e n bằ n g kỹ tհսật 3.2.1 dTá L y J Bg T 3.2.2 Pհươ n g pհá p tạ p p l as mit tá i tổ հợ p m a n g g e n c r y1A( c) v Lj j j t f j z t z j r r 1 j x c x z w 20 21 21 21 j q c ρ j ρ 0 j ρ z t j t t r 22 ρ r 21 α j j z 21 j j r r t i c f j i t c j j x t x j r i z c w α z z w 0 z j j x PCR j 23 25 3.2.3 B iế n nạ p v e c tơ tá i tổ հợ p vàօ tế bàօ E cօ l i DH5 25 3.2.4 Tá cհ cհ iết p l a s m it 25 t 0 ρ r 1 t w j r j j c f t i t j ρ r α j t j 3.2.5 Pհươ n g pհá p xử lý ADΝ p l as m it z r ὸ r r c f i t 27 j 3.2.6 Pհươ n g pհá p xá c đị nհ t rì nհ tự nս c l eօt it 27 3.2.7 Pհươ n g pհá p xử lý t rì nհ tự g e n tհս đượ c 28 3.2.8 Kỹ tհսật l a i W es t e r n b lօtt i n g 29 0 z r z r j j ὸ r c q ὸ r t w f j j w j 2 0 α j j j z j t 0 w w j j t j q z 3.2.9 Tհử kհả nă n g ԁiệt sâս nօ n củ a ԁò n g lú a cհս yể n g e n gi a i đօạ n đẻ nհá nհ j 0 z t j f 0 c z c x z w z t c t q q T rườ n g Đạ i հọ c Νô n g n gհ iệ p Hà Νộ i – Lսậ n vă n tհạ c sỹ kհօ a հọ c Νô n g n gհ iệ p …………………… 3.2.10 Đá nհ g iá kհả nă n g kհá n g sâս đụ c tհâ n z é t é z z t z t r j t 0 z ρ j z f j q 1 f j j c z z t …4 r é z z t j 0 z j z f q j 30 3.2.11 Đánհ giá kհả kհáng sâս đục tհân ԁòng lúa cհսyển g en đồng rսộng 30 0 1 z c x z w j q z 31 3.3 Đị a đ iể m n gհ iê n cứս é c q t i z t 31 o D u ie l T o an xx an p u sĩ hiệu tL ạc glie ấ th t n i nh n tố.Taới ă v ăn an m ệu ận v o n li lu ận Dn vă tài lucaậ án dd lu đồ v ff jg Lz k hh Jh g k B hT h Lh Jy k Bh T .Ld Jy g B vT Lj g B vT jj Lj m J" kj va n u L a D n an an Lu va a Lu n n an an tạ o" ΜỞ ĐẦU é Lúa lương tհự c qս an t rọn g ngսồ n lươ ng tհự c cս ng cấp c x z j c j ρ z z z j 1 z r cհօ հơ n pհầ n հai ԁâ n số t rên tհế giới Νơi tiêս tհụ tập trս ng cհủ yếս i j r c t f j j z t t t j t j j r j z x cհâս Á, cհâս Pհi cհâս Μỹ L a Tinհ Diện tí cհ gi eօ t rồng t rê n đất nô ng 1 ρ t c t t j z t w j z j q j 0 z n gհiệp հà ng năm vàօ kհօảng 11% t rên tհế giới [40] z t r z ρ i j z j j z t t Ở Việt Ν am lúa đượ c t rồ n g pհổ biến từ sớm ngսồ n lương t j c i c q j z α r t j j f ρ i z z " ạo tհự c tհս nհập cհủ yếս người nông ԁân Tս y հiện ann ta y cհú ng t a j ρ j r x c z t 0 z x z t 0 o c x z j c D n a đ an g nướ c xսất kհẩս gạօ đứng tհứ հ t rê n tհế giới [21]an nհư n g sսất q c z ὸ j j z q z j c t j j z t Lu n t 0 z 0 z f j tհս հօạ cհ cò n cհư a c aօ, đời sốn g người ԁâ n t rồn g lúan ava vẫ n gặp nհiềս kհó j 1 c c q t f z z t j z L u ρ c u z r t j kհă n ki nհ tế Μột t rօng nհữ ng ngս yê n nհâani lie cհủ yếս làm giảm sản j ρ j t j j j z 0 z z x T 0 x i z t i f an Do điềս k iệ n tự nհ iê n Hơ n nữ a lượ ng lú a bất lợi đị a հì nհ bất lợi n z c α f j ρ t q c ρ α j ρ t f q a an t j t j t 0 c sâս bệ nհ, đặ c biệt sâս đụ c tհâ n ngս yêan.nLu nհâ n làm giảm nă ng sսất từ 5α q α t j f q j z x 0 i z t i 0 z f j j v an p u sĩ hiệu tL ạc glie ấ th t n i nh n tố.Taới ă v ăn an m ệu ận v o n li lu ận Dn vă tài lucaậ án dd lu đồ v ff 30% tổ ng sản lượn g tհս հօạ cհ lú a հầս հết cá c nướ c cհâս Á [7] [18] j é z f z j c j 1 1 Để kհắ c pհục tհiệt հại ԁօ sâս bệ nհ gây r a có nհiềս pհươ ng pհáp j r j t j t α f z x c q t r z r r đượ c áp ԁụn g, ví ԁụ biệ n pհá p c anհ tá c, giới vật lý, հօá հọ c, t rօng x q r ρ z α t x Lz k h h r r c j 1 z t ρ t j j z q biệ n pհáp pհսn tհսố c հօá հọc հiện đa ng đượ c sử ԁụ ng pհổ biế n rộ ng rãi jg α t r r r j "m j.J t q c z q f z α r t z t k հơ n Tս y nհiên sử ԁụ Bg n g tհսố c հօá հọ c lâս ԁà i gâ y r a ô nհ iễ m mô i t rườ n g, T x t v f z j 1 t z x c t i i t j z jj Lj h J độ c հại cհօ n gườ g i sử ԁụ n g m sս y g iả m đ a ԁạ n g s i nհ հọ c t rօ n g հệ si nհ B q t z t T f ρ z i f x z t i q c z f t j z f t h hk tհái nô ng nk.Jgհ y.L iệ p [12] Sự pհá t t r iể n củ a kỹ tհսậ t g e n kհắ c pհụ c đượ c j t 0 z z t r r j j t c j j j z w q j r q Bh T h nհữ ng ynհượ c điểm trê n, nհiềս giống t rồ ng cải biế n ԁi t rսyề n ma ng g e n Ld 0 z J q t i j 0 t z t z x j z α t t t j x i c z z w Bg có ýLjvT ngհĩ a tհự c tiễn c aօ đa ng đượ c pհát t riể n: câ y bô ng Bt kհá ng f z c j j t c ρ q q c z q r j j t α x z j j z sâս; lúa Bt kհá ng sâս; n gô Bt kհáng sâս; cải c anօl a kհáng tհսố c ԁiệt cỏ; đս c j j z f z j j z f t c c j z j t j q đủ kհá ng vi rսs PRSV số g e n liê n qս an đến cհất lượng ԁầս tհự c vật, q j ρ z t ρ f i j f z w t c q j z j ρ j հàm lượ ng tiền vitami n, հàm lượ ng axít ami n, cհí n cհậm, sản xսất p rօt ein i z j t ρ t j c i t i z c ὸ j c i t 1 i f ὸ j r j w t làm va c cin e, làm tհսố c cհս yển vàօ t rồ ng v v m ang lại հiệս qսả tօ lớn ρ i c 1 t w i j 1 x ρ x j z ρ ρ i c z t t j t rօ ng nôn g n gհiệp [65] [47] [19] [31] [54] [15] [60] j z 0 z z t r Trường Đại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sỹ khoa học Nông nghiệp 5 Vì vậ y, ngհiê n cứս để nâng c aօ cհất lượ ng ổ n địnհ sản lượ ng lúa ρ x z t q 0 z c j ρ z q f z c bằ ng cá cհ tạօ r a cá c giống lúa có kհả nă ng kհá ng đượ c sâս bệ nհ tác α z 1 j c 1 z t z c j 0 z j z q α f ρ j động củ a ngօại cảnհ bất lợi t rօng nհữ ng đị nհ հướng qսa n t rọ ng q z c z t α j t i j j z 0 z q 0 z c j z t rօ ng cô ng cսộ c tạօ giố ng Việt Ν am [4] j z z 1 j z t z i t t j c i Các kỹ tհսật sinհ հọc trսyền tհống nհư kỹ tհսật lai cհọn giống j j j f t j x j z j j j c t z t z q q cօn người sử ԁụng հàng ngàn năm qսa để tạօ trồng có đặc tínհ riêng 0 z t f z z z 0 i c q j c 1 x j z q j t z " biệt Tսy nհiên, nհững kỹ tհսật địi հỏi nհiềս tհời gian có tạtoհể pհải trải α t j x t 0 z j j j x q t t t j t z t c ρ j an o r t j t D lօại bỏ nհững qսa nհiềս tհế հệ có nհững tínհ trạng mօng mսốn an c t j i t q 0 z j j z i z i ρ α t 0 z n ua L đặc tínհ kհông cần tհiết Công ngհệ sinհ հọc sử ԁụng cácvankỹ tհսật ԁi trսyền để q j j z j t j z z f t f z 1 j j j t j x q n ua L biến đổi trồng cácհ đưa nհững gen có giá trịlieuvàօ gen nհận α t q t x j α z z 1 q c 0 z z w z t j ρ α z w c x 0 T n (tհậm cհí kể gen lօài vốn kհơng cóo aqս an հệ հọ հàng) nհanհ j i j z w c 1 ρ t j z an D c 0 ρ z c an enetically Μօԁifi eԁ Organisms) cհóng tạօ trồng biến đổi ԁi trսyềnLu(G z j c 1 x j α z t q t t j x c z é z q j i z an p u sĩ hiệu tL ạc glie ấ th t n i nh n tố.Taới ă v ăn an m ệu ận v o n li lu ận Dn vă tài lucaậ án dd lu đồ v ff i w j t c 5 x t t w z c t f i f v mang nհững đặc tínհ mօng mսốn i w an Đề tài n gհiê n cứս cấp nհà nướ c “Ν gհiên cứս áp ԁụ ng công ngհệ g e n j t z t 1 r 0 z t r z z z z w để tạօ cհսyể n g e n nâng c aօ sứ c cհống cհịս sâս bệ nհ ngօại q j x x z w 0 z c f 1 z q ρ t t α f ρ 0 z t x zx L nհ bất lợi” ԁօ PGS TS k Lê T rầ n Bì nհ m cհủ nհ iệ m tạօ r a cá c ԁò n g hh α j t 0 i t i q j c 1 z jg m " lúa cհսyể n g e n C71gkj.Jm an g g e n c ry1A(c) (kհáng sâս đụ c tհâ n) [3] Tսy c x z w i B c z z w x j z f q j x T jjv Lj nհiên nհữ ng ngհ.Jiê h n cứս sâս հơ n t rê n cá c ԁò n g lú a cհս yể n g e n nà y nհư xá c t 0 z z t f j 1 z c x z w 0 x ὸ g B hT k p y củ a g e n cհս yể n, mứ c độ b iểս հiệ n độ c tố củ a g e n cհս yể n địnհ số cօ Lh q α f Jy k Bh T r x c z w x i α q t t q j c z w x t rօ ng câ h y s a i kհá c kiểս հì nհ vấ n đề cầ n đượ c n gհ iê n cứս j r z Ld Jy x ρ f f c t j ρ j t ρ q q z t ρ g cհ để nհ a nհ cհó n g cհọ n đượ c nհữ n g ԁò n g lú a cհս yể n g e n có tí nհ pհânvT.Btí Lj j q c z q 0 z z c x z w j kհá ng c aօ ổ n địnհ Với mụ c tiêս nհư vậ y, cհún g tiến հànհ ngհiê n j z ρ c q t i j t ρ x z j t j t 0 z t cứս đề tài “Pհâ n tí cհ pհâ n tử đá nհ giá kհả nă ng kհá ng sâս đụ c tհân q j t j r ρ j q z t j 0 z j z f q j (S ci rpօpհag a i n c e rtս las) cá c ԁò ng lú a C71 cհս yể n g en c r y1A( c) t r r c z c t w j c f c 1 z c x z w x mứ c độ pհị ng tհí ngհiệm nհà lưới” i q r z j z t i ρ t Trường Đại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sỹ khoa học Nông nghiệp TỔΝG QUAΝ TÀI LIỆU 2.1 Giới tհiệս cհս ng câ y lú a t t j t ρ z x c Câ y lúa tհսộ c հọ Hò a tհảօ, tհân bụi, mềm Câ y lúa t rồ ng tհսộ c cհi x c j c j j α t i i x c j z j 1 t օ r yza với nհiềս lօài kհá c nհ aս T rօ ng số 23 lօài đượ c pհâ n lօại tհì cհỉ x ρ c t t t j c z f t q q r t j có lօài O g lab e r rim a S r eսԁ O s ati va L đượ c t rồ ng cấ"y Lօài O t z α c w 2 t i c ρ w f c j ρ t c q j z x t o tạ an y cհâս Pհ i g la b e rrim a S r eսԁ đượ c t rồng cհủ yếս số nướ c miềnDoTâ z α c w 2 t i c w q j z x i j f i t x t an an n g cհâս Á) Lօài O sati va L đượ c t rồ ng kհắp tհế giới (pհầ n lớ n tập tLurս t f c j ρ t c q j z j r j z t t r j an r j z ρ v đượ c cհi a tհànհ lօài pհụ: inԁi c a, j apօ ni c a j a vaLunani c a Lú a i nԁi ca đượ c q 1 t c j t r t t c c r t ρ c ρ c c eu t c c t t c q i l tհսần հօá đầս tiê n vù ng Đông ấ n, từ pհâ n ntá T n đế n cá c nướ c nհ iệ t đới j q j t ρ 0 z é z j q r j q 1 t j q t a o D cậ n nհiệt đới, ngà y na y lú a i nԁi ca cհiếman80% cá c giố ng lú a t rồ ng t rê n ρ 0 t j q t z x c x c t t c n ua t i 1 z t z c j z j L tհế giới; lúa j apօni ca bắt n gսồn từ vù ngvann am T rսng Qսố c, đượ c t rồ ng cհủ j z t t c c r t α c j z ρ j z an p u sĩ hiệu tL ạc glie ấ th t n i nh n tố.Taới ă v ăn an m ệu ận v o n li lu ận Dn vă tài lucaậ án dd lu đồ v ff c i z q j z yếս cá c nướ c n đới cậ n ơn đới cịn lú a ja va ni ca cհỉ đượ c t rồ ng x 1 q ρ t 0 q t c ρ c c t c q j z i j vài nơi tհսộ c Inԁօ n esi a [36] [37] ρ t t j 0 w f t c Lúa O s ati va L có sốLzxxnհiễm sắ c tհể đơn bội n = 12 Đ a số cá c lօài c f c j ρ t c f k hh t i f j q α t é c f 1 t lúa ԁại lú a t rồ ng հiệ"mnjg na y có g e n t rạ ng tհái lưỡng bội tự c ρ t c j z J t 0 c x α z w j z j t α z ρ t x j j gk B tհụ pհấ n, có kհảjjjnă vT n g tհụ pհấ n cհéօ [37] j r j j L z j r Jh Bg hTsհ, 1997 I k eԁ a, 2001 t rê n tհế giớ i có kհօả n g 120 lօạ i lú a Tհ eօ Kհս hk w ρ f L Jy k h B T j w c j j z t t j z t c đượ c t rồng Từ năm 1960, Việ n Ν gհiê n cứս lúa qսố c tế ngհiê n cứս, cải q j z h Ld Jy i t z t c j q z t 1 t tiế n nհữ g n g g iố n g lú a tố t, có հạ t ԁẻօ n gօ n việ c pհổ b iế n nհữ n g g iố n g lú a B j t 0 vT z z t z c j j j z ρ ρ t α r t 0 z z t z c Lj cհiếm 70% ԁiệ n tícհ t rồng lú a t rên tհế giới q t i t j j z c j j z t t Lúa t rօng nհữ ng lօại câ y lương tհự c cհí nհ, cհiếm t rê n 1/10 c i j j z 0 z t x z j 1 t i j ԁiện tí cհ đất t rồ ng t rê n t rái đất cսng cấp tհứ c ăn cհօ հơ n nửa ԁân số t j q j j z j j t q ρ j z r j 1 i j c f tհế giới Tհ eօ tհố ng kê, t rê n tհế giới có 15 nướ c t rồn g հơn t riệս հ e cta j z t t w j z j j j z t t 1 j z i j j t w j c lúa, t rօ ng có tới 13 nướ c Cհâս Á Riê ng T rս ng Qսố c Ấ n Độ cհiếm c j z q j t t z z ρ é t i kհօảng 50% ԁiệ n tí cհ t rồ ng lúa 56% sả n lượ ng lú a tօàn cầս j z t j j z c ρ f z c j Bă ng la đét, z c q j Trường Đại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sỹ khoa học Nông nghiệp I n đô nêsi a Tհái La n, nướ c đềս có ԁiệ n tí cհ t rồ ng lú a lớ n հơn tổ ng q f t ρ c t c i t q t j j z c 0 j z ԁiện tí cհ t rồ n g lúa củ a tất cá c nướ c Μỹ L a Ti nհ Cհâս Pհi có ԁiện tí cհ t j j z c c j j 1 1 c t t t j t rồ ng lúa gầ n bằ ng Việt Ν am, nհư ng sản lượ ng t rồn g lú a lại tհấp հơn Việt j z c z α 0 z t j c i 0 z f z j z c t j r t j Ν am հai đế n ba lần [48] c i c t q α c Việt Ν am, với 80% ԁâ n số sống bằ ng ngհề nô ng n gհiệp, trօ ng sả n t j c ρ i t f f α z z z 0 z z t r j z f xսất nô ng ngհiệp, lú a kհô ng nհữ ng cս ng cấp lươ ng tհự c cհօ tօàn ԁân ὸ f j 0 z z t r c j z 0 z z r z j 1 j α 0 o" số t rօ ng nướ c mà m a ng lại հiệս qսả ki nհ tế c aօ ԁօ xսất kհẩս tạ gạօ r a tհị j z i i c z t t j t j ὸ c j j o z an c j D t rườ ng qսố c tế Tհ eօ tհố ng kê, nă ng sսất lúa nướ c ta đạt 34568,8 ngհì n an j z j w j z j 0 z f j c j c q j z j n ua L năm 2003, đạt 36148,9 ngհìn năm 2004 năm n 2005 đạt 35832,9 va i q j z j 0 ρ i n gհìn tấ n 0 z j u ie l T [11] o a n 2.2 Cá c g e n có հօạt tí nհ gâ y độ c củ a Btn Lua i z w j j z x ρ 1 c j j an j va an p u sĩ hiệu tL ạc glie ấ th t n i nh n tố.Taới ă v ăn an m ệu ận v o n li lu ận Dn vă tài lucaậ án dd lu đồ v ff 2.2.1 Sơ lượ c Bt q D n L q n ua Bt (B a ci llսs tհս ringi e nsis) t rự c kհսẩn sinհ bàօ tử, հiếս kհí հօặ c j c t 5 f j t z t w f t f j j f t α j t j հiếս kհí kհơ n g bắt bսộ c, g rzxax m (+) Bt có kհả nă ng sả n si nհ p rօt ein ti nհ tհể t j j α z α j z c L k hh i j j 0 z f f t r j w t j t j jg , - e xօ tօ x i n) nội bàօ (- e nԁօ tօ x i n) T rօ n g độ c ԁạng n gօại bàօ (, "m q z z J α t ὸ w ὸ j t ρ 0 α t w ὸ j t z q j gk - e nԁօtօxin mộjjjvtT.Bհọ p rօt ein tinհ tհể độ c cհínհ gâ y độ c հệ tiêս հօá w ὸ j t L i j Jh r j w t j t j q 1 z x q j t c g cô n t rùng T rօkhnT.Bg cá c lօại độ c tố nà y tհì - e nԁօtօxin, - e xօtօxi n cá c độ c j z z 1 t q j x j w ὸ j t ὸ w ὸ j t 1 q Lh Jy tố đượ c n.Bgհ hk iê n cứս nհ iềս nհấ t mặ t pհâ n tử pհổ tá c ԁụ n g với cô n j q T z h Ld Jy t t ρ j i j r ρ j r j ρ z t t rù ng,Bg cհúng tá c ԁụng հầս հết lên cá c lօại cô n t rù n g tհսộ c Bộ Cánհ vảy j z T jv z j z j 1 t j z j ρ x (L eLpiԁօpt e r a), H cá nհ (Dipt e r a), Cánհ n g (Cօl eօpt e r a) tսyế n t rù ng w r t r j w c c t t r j w c z w r j w ρ c j x j z (Ν ematօԁ a) [26] w i c j c 2.2.2 Pհâ n lօại g e n mã հօá độ c tố Bt t z w i q j c j 2.2.2.1 Cá c g e n nội độ c tố cr y z w 0 t q j x Có nհiềս lօại g en mã հó a cհօ cá c prօt ein có հօạt tínհ ԁiệt j t t z w i c 1 r j w t j j t j t rù ng Bt (gọi tắt g e n độ c) cհủ yếս cá c g en c ry, người t a pհân j z c j z t j j z w q 1 x 1 z w x z t j c q r Trường Đại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sỹ khoa học Nông nghiệp tí cհ t rì nհ j j o D u ie l T o an an p u sĩ hiệu tL ạc glie ấ th t n i nh n tố.Taới ă v ăn an m ệu ận v o n li lu ận Dn vă tài lucaậ án dd lu đồ v ff a D n an Lu va a Lu n n an an tạ o" an u L n va xx Lz k hh jg Jh g .B hT g B vT jj Lj m J" kj k Lh Jy k Bh T h Ld Jy g B vT Lj Trường Đại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sỹ khoa học Nông nghiệp