0790 nghiên cứu thành phần hóa học và hoạt tính sinh học của cây bảy lá một hoa paris polyphylla var chinensis franchet thu thập tại việt nam luận văn tố

BỘGIÁO DỤCVÀĐÀO TẠO VIỆNHÀNLÂMKHOAHỌC VÀCÔNGNGHỆVIỆTNAM HỌCVIỆNKHOAHỌCVÀCÔNGNGHỆ …… ….***………… NguyễnThịDuyên NGHIÊNCỨU THÀNH PHẦN HÓA HỌC VÀ TÁC DỤNGSINH HỌC CỦA CÂY BẢY LÁMỘT HOA – PARISPOLYPHYLLAVAR.CHINENSISTHUTHẬPTẠIVIỆT NAM Chuyênngành:HóahọccáchợpchấtthiênnhiênMãsố :62 44 01 17 TĨMTẮTLUẬNÁNTIẾNSĨHĨAHỌC HàNội-2017 Cơngtrìnhđƣợchồnthànhtại:HọcviệnKhoahọcvàCơngnghệViệnHànlâmKhoa họcvàCơng nghệViệtNam Ngườihướngdẫnkhoahọc: 1.PGS.TS ĐỗThịHà 2.GS.TS.PhạmQuốc Long Phảnbiện1: Phảnbiện2: Phảnbiện3: Luận án bảo vệ trước Hội đồng đánh giá luận án tiến sĩ cấpHọcviện,họptạiHộitrườngHọcviệnKhoahọcvàCôngnghệ-Viện Hàn lâm Khoa học Công nghệ Việt Nam vào hồi … ’,ngày… tháng… năm2017 Có thểtìmhiểuluậnántại: - Thưviện HọcviệnKhoa họcvà Côngnghệ - ThưviệnQuốcgiaViệt Nam MỞ ĐẦU Lýdo chọnđềtài Đất nước Việt Nam có dạng hình chữ S gồm phần đất liền trải dài theo vĩ độBắc từ 8030’ đến 23022’, có 4/5 diện tích đồi núi, khí hậu nhiệt đới gió mùa.Những yếu tố địa lý khí hậu điều kiện thuận lợi để sinh vậtphát triển đa dạng số lượng, phong phú chủng loại Theo ước tính, ViệtNam có khoảng 11.000 lồi thực vật bậc cao có mạch, 800 loài rêu, 600 loàinấm 2000 loài tảo Trong đó, có nhiều lồi dùng làm thuốc Đặcbiệt, năm 2016 Viện Dược liệu cơng bố 5117 lồi thuốc Danh mụcCâythuốcViệtNam Căn theo hệ thống phân loại APG năm 2011 (dựa nhữngdẫn liệu sinh học phân tử) chiParisthuộc họ Hắc dược hoa Melanthiaceaegồm 26 loài với 13 thứ, phân bố vùng cận nhiệt ôn đới ôn đới ẩm Bắcbán cầu Kết nghiên cứu tài liệu cho thấy loài thuộc chiPariscó hoạttính đáng q như: tác dụng chống ung thư, tác dụng điều hòa miễn dịch, tácdụng cầm máu tan máu, tác dụng chống oxy hóa, tác dụng kháng virus,kháng nấm chống ký sinh trùng, tác dụng dày, tác dụng hạ sốt, giảmđau, anthần Về thành phần hóa học, hợp chất phân lập từ số loàiParisbao gồm saponin, flavonol, sphingolipid glycosid khác Trong đó, nhómcấu trúcsaponin đượcnghiêncứu nhiềunhấtlà saponin steroid (cótrên1 hợpchất) từ 22lồithuộc chiParisđã cơngbố Ở Việt Nam, chiParislà chi gặp phân bố chủ yếu số tỉnhmiền núi phía bắc vùng núi cao Tây Nguyên- n i c ó k h í h ậ u m t , đ ộ ẩ m cao Cho đến phát nước ta có lồi thứ thuộc chiParisgồm:ParisdunnianaH.Lév.,ParisfargesiiFranch.,Parisvietnamensis(Tak ht.)H.Li,Paris caobangensisY.H.Ji, H.Li & Z.K.Zhou,Paris cronquistii(Takht.)H.Li,Parisxichouensis(H.Li)Y.H.Ji,H.Li&Z.K.Zhou,Parisd elavayiFranch.,ParispolyphyllaSm.,Parispolyphyllavar.yunnanensis(Franch.) Hand.Mazz.,và Parispolyphyllavar.chinensis(Franch.) H.Hara Tron g y họccổtruyềnViệtNam,thânrễcủamộtsốloàithuộcchiParisvới tên thườnggọi bảy hoa (hay thất diệp chi hoa) dùng để chữa sốt, sốt rétcơn, giải độc bị rắn cắn, chữa mụn nhọt, viêm tuyến vú, sốt rét, holao, ho lâu ngày, hen suyễn Dùng với tác dụng sát trùng nơi bịsưngđau, vếtrắn cắn, tràngnhạc, mụn lở,nhọt[1] Mặc dù có nhiều cơng bố chiP a r i s nước ngoài, chủ yếu tậptrung đối tượngParis polyphyllavar.yunnanensis,các nghiên cứu đốitượngParispolyphyllavar.chinensiscònkhákhiêm tốnchínhvìvậychúngtơi thực đề tài: “Nghiên cứu thành phần hóa học tác dụng sinh học củabảy hoa -Paris polyphyllavar.chinensisFranchet thu thập ViệtNam” Mục tiêuluậnán: Đềtàinghiêncứuthựchiệnhai mục tiêu nghiêncứusau: Mục tiêu 1: Nghiên cứu thành phần hóa họcParis polyphyllavar.chinensisMụctiêu2:Xácđịnhhoạttínhgâyđộctếbàoungthưinvi trocủabảylámộthoa Luậnánđã thựchiệnnhững nội dungnghiêncứusau: NghiêncứuthànhphầnhóahọclồiParispolyphyllavar.chinensisFranchettr ồngtạiLào Cai: +Xác định cấu trúccáchợp chất phânlập +Bước đầu xâydựngdấu vântayhóa họcđể phân biệtmột số lồithuộc chi Paris - Khảo sát khả gây độc tế bào ung thư tìm hiểu chế tác dụng hợpchấtparissaponin IItrên dịngtế bào ungthư vúMCF-7 NỘIDUNGCHÍNHCỦALUẬNÁNCH ƢƠNGI:T Ổ N G QUAN Phầntổngquantậphợpcácnghiêncứutrong nướcvàngồinướcvềcácvấnđề: - Đặc điểmthựcvật,phânbố cơngdụngchiParis; - Cácn g h i ê n c ứ u v ề t h n h p h ầ n h ó a h ọ c v h o t t í n h s i n h h ọ c c ủ a c c loàithuộcchiParis; - Đặcđ i ể m t hự c v ậ t ; p h â n b ố ; v c c n g h i ê n c ứ u v ề t h n h p h ầ n h ó a h ọ c ; hoạttínhsinh họccủacâybảylámộthoaParispolyphyllavar.chinensis CHƢƠNGII:ĐỐITƢỢNGVÀPHƢƠNGPHÁPNGHIÊNCỨU 2.1 Đốitƣợng Mẫu tiêu số P8102013 N.T.T 01/08/2015 giám định tên khoahọclàParispolyphyllavar.chinensisFranchet(tênđồngnghĩalà:Parischinensis Franchet)thuộchọTrọngLâu.MẫudượcliệuPPCsửdụngtrongnghiêncứuthànhphầnhóa họcvàhoạttínhsinhhọclàmẫutrồngtạiSapa–LàoCai Cảhaimẫutiêu đượclưu KhoahóaThực vật 2– ViệnDượcliệu 2.2 Phƣơngpháphóahọc Sử dụng phương pháp chiết lỏng - rắn lỏng - lỏng để chiết xuất cácphân đoạn, lớp chấtcóđộ phâncực khácnhau Sửdụngchủyếuphươngphápsắckýnhưlớpmỏngđểphântíchcácphần chiết, kiểm tra độ tinh khiết chất; sắc ký cột với chất hấp phụ khácnhau để phân lập chất Bên cạnh luận án sử dụng phương pháp kếttinhlạitách làmsạchcác chất Phương phápxác địnhcấutrúccác hợp chất Xác định cấu trúc hợp chất phân lập dựa thông số vật lý:điểm chảy, suất quay cực phương pháp phổ: phổ khối phổ cộnghưởng từ hạt nhân chiều (1D-NMR): 1H-NMR,13C-NMR DEPT, haichiều(2D-NMR):HSQC, HMBC, COSY Phương phápxácđịnhdấuvântay hóahọc SửdụngphươngphápTLCvàHPLCtrongnghiêncứuđadạnghóahọccủacácmẫuthực vậtthuộcchiParis 2.3 Cácphƣơngphápthửhoạttínhsinhhọc 2.3.1 Cácphươngphápđánh giáhoạttính gâyđộc tế bào Sử dụng phương pháp MTTtheo mơ hình Mosmann (1983), dịng tếbào ung thư: A549, HL-60, Hela Caco-2 Sử dụng phần mềm chuyên dụng làgraphpadprism5đểxácđịnhgiátrịIC50 Số liệu định lượng trình dướidạng±SE Phương pháp đánh giá tác dụng ức chế tăng sinh tế bào ung thư vú MCF7bổ sungyếutốtăngtrưởngbiểubì(EGF):TiếnhànhtươngtựnhưphươngphápMTT Sử dụng phần mềm phân tích phương sai ANOVA để xử lý số liệu sựkhácbiệtđượccoilàcóýnghĩakhip