Bước đầu nghiên cứu thành phần hoá học của đông trùng hạ thảo( cordyceps sp1 ) ở nghệ an

1 Bộ giáo dục đào tạo Tr-ờng Đại học vinh Đoàn Thị Tuyến B-ớc Đầu nghiên cứu thành phần hoá Học CủA ông trùng hạ thảo (Cordyceps sp1) Nghệ An Luận văn thạc sĩ hoá học Vinh - 2009 MỞ ĐẦU Lý chọn đề tài Việt Nam nằm vùng trung tâm Đông Nam Á hàng năm có lượng mưa nhiệt độ trung bình tương đối cao Với khí hậu nhiệt đới gió mùa nóng, ẩm cho rừng Việt Nam hệ thực vật đa dạng phong phú Nấm ký sinh côn trùng khơng nhóm có tính đa dạng sinh học cao mà cịn có vai trị quan trọng phòng trừ sinh học sâu hại trồng y - dược tạo hợp chất có hoạt tính sinh học cao Trên giới có khoảng 1,5 triệu lồi nấm, có 400 nghìn lồi nấm ký sinh côn trùng biết giới Nghệ An tỉnh có Vườn Quốc gia Pù Mát, khu Bảo tồn thiên nhiên Pù Huống khu Bảo tồn thiên nhiên Pù Hoạt Đây vùng đánh giá có tính đa dạng sinh học cao Tại chứa đựng nguồn lợi lớn đa dạng sinh học, có nguồn lợi nấm ký sinh trùng sử dụng chúng làm nguyên liệu tốt cho công nghệ sinh học nấm - côn trùng tạo chế phẩm sinh học phòng trừ sâu hại trồng tạo sản phẩm có hoạt tính sinh học cao y - dược Cho đến nay, nấm ký sinh côn trùng nhóm chưa nhận quan tâm mức nhà khoa học công nghệ nghiên cứu nấm côn trùng Việt Nam giới Từ lâu, Đông trùng hạ thảo xem thuốc quý cho y học phương Đông Cho tới bây giờ, người Việt Nam giới cịn chưa biết nhiều lồi dược liệu Trung Quốc, danh y sử dụng Đông trùng hạ thảo thuốc từ 2.000 năm trước Do việc nghiên cứu thành phần hố học Đơng trùng hạ thảo (Cordyceps sp1) chưa tiến hành Việt Nam Chính chúng tơi chọn đề tài: “Bƣớc đầu nghiên cứu thành phần hố học Đơng trùng hạ thảo(Cordyceps sp1) Việt Nam” từ góp phần xác định thành phần hoá học hợp chất tìm hướng cho thực phẩm chức nước ta Nhiệm vụ nghiên cứu Trong luận văn này, chúng tơi có nhiệm vụ: - Chiết chọn lọc với dung mơi thích hợp để thu hỗn hợp hợp chất từ Đông trùng hạ thảo (Cordyceps sp1) - Phân lập xác định cấu trúc hợp chất Đông trùng hạ thảo(Cordyceps sp1) Đối tƣợng nghiên cứu Đối tượng nghiên cứu dịch chiết Đông trùng hạ thảo (Cordyceps sp1) Việt Nam Chƣơng TỔNG QUAN 1.1 Chi Cordyceps 1.1.1 Phân loại Đơng trùng hạ thảo cịn gọi trùng thảo, hạ thảo đông trùng hay đông trùng thảo giống nấm túi có tên khoa học Cordyceps sinensis thuộc nhóm Ascomycetes mọc ký sinh sâu non (ấu trùng) loại sâu thuộc họ sâu Cánh bướm thuộc chi Hepialus Thường gặp sâu non lồi Hepialus armoricanus Ngồi cịn 40 lồi khác thuộc chi Hepialus bị Cordyceps sinensis ký sinh Chi nấm Cordyceps có tới 350 lồi khác nhau, riêng Trung Quốc tìm thấy 60 loài Tuy nhiên người ta nghiên cứu nhiều loài Cordyceps sinensis Cordyceps militaris Link Loài thứ hai gọi Nhộng trùng thảo [5] C.33.44.55.54.78.65.5.43.22.2.4 22.Tai lieu Luan 66.55.77.99 van Luan an.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.22 Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an Hình 1: Ảnh số lồi nấm ký sinh Cordyceps Nấm sâu hợp sinh với Vào mùa đông, sâu non nằm đất, nấm phát triển toàn thân sâu để hút chất dinh dưỡng làm cho sâu chết Đến mùa hạ, nấm sinh chất (stroma) mọc chồi khỏi mặt đất gốc dính liền vào đầu sâu Người ta thường đào lấy tất xác sâu nấm mà dùng làm thuốc Vì mùa đơng sâu, mùa hạ lại thành cỏ nên vị thuốc có tên đông trùng - hạ thảo Chỉ phát Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd 77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77t@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn C.33.44.55.54.78.65.5.43.22.2.4 22.Tai lieu Luan 66.55.77.99 van Luan an.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.22 Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an Đông trùng hạ thảovào mùa hè số cao nguyên cao mặt biển từ 3500 đến 5000m Hàng nghìn năm nay, Đông trùng hạ thảođược coi thần dược y học cổ truyền Việt Nam Trung Quốc Theo y học, Đơng trùng hạ thảo có lồi: Sacc Link (dài từ đến 11 cm) Cordiceps ophiglossoides HerFr (dài từ đến 6cm) Các nhà y học cổ truyền mơ tả hình thành Đơng trùng hạ thảo sau: Bộ nấm nang Ascomyces sống ký sinh vật chủ sâu non loài bướm (Caterpillar) họ cánh vẩy, đặc biệt loài bướm đêm Hepialus armoricanus Ban đêm bướm đẻ trứng, trứng nở thành ấu trùng thành sâu non Mùa đông sâu non chui xuống đất sinh sống Trong môi trường ẩm, bào tử nấm Ascomyces phát triển thân sâu nở thành sợi nấm, lan dần vào thịt sâu, phá hủy thân sâu non Các sợi nấm phát triển thành khối dày, chắc, thân sâu vỏ bao bọc sợi nấm Sang mùa hạ, từ miệng sâu, cuống nấm mọc ra, đội đất nhô lên, cuống phình ra, bề mặt cuống có mầm nhọn Các mầm nhọn nẩy số hạt tròn, chứa bào tử nấm Thân nấm cao gần 10cm Khi đào nấm lên làm thuốc, người ta thấy gốc nấm cịn dính liền với đầu xác sâu Sau vài chi tiết mô tả sâu nấm thực sự: Ấu trùng bướm dài khoảng từ 3-6 cm, dày độ 0,4 - 0,7, sắc nâu vàng, nhám với nhiều vạch chạy ngang Sâu có cặp chân cụt khúc bụng cặp chân dài khúc Cắt ngang sâu thịt sâu ruột màu trắng ngả vàng vàng, cịn chung quanh có màu vàng sẫm Cây nấm mọc từ đầu sâu trông cọng cắm vào, đầu cọng phình chùy thuôn nhỏ lại Cây mầu nâu hay sẫm đen lại, Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd 77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77t@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn C.33.44.55.54.78.65.5.43.22.2.4 22.Tai lieu Luan 66.55.77.99 van Luan an.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.22 Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an dài - cm, kính đo 0.3 cm, chót đầu há cho thấy ruột trắng hốc rỗng, phần mang bào tử thường bị gẫy phơi khơ 1.1.2 Thành phần hố học chi Cordyceps Về thành phần hóa học, đơng trùng hạ thảo chứa 25-32% protit (gần có thơng báo cho tỷ lệ đạt tới 44,26%), thủy phân 14 - 19 axit amin khác Ngồi ra, cịn có chứa nhiều loại vitamin A, B1, B2, B12, C, E, K (trong 100g đông trùng hạ thảo có 0,12 g vitamin B12; 29,19 mg vitamin A; 116,03 mg vitamin C, ) nguyên tố vi lượng Na, K, Ca, Mg, Al, Mn, Cu, Zn, Bo, Fe cao phosphor, lượng đáng kể nước, chất béo, protein, chất sợi thơ, carbohydrat tro khống chống oxy hóa, chống virus, chống ung bướu, axit glutamic [5], [45] Mười bioxanthracen (1-11) đồng phân (12 13), phân lập từ nấm ký sinh côn trùng Cordyceps pseudomilitaris BCC1620 [25] H3CO H3CO OH OH O O CH3 H 3CO OH OH H 3CO OAc OH CH3 CH3 O H3CO H3CO OH (1) CH3 O H3CO OH H3CO (2) Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd 77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77t@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn C.33.44.55.54.78.65.5.43.22.2.4 22.Tai lieu Luan 66.55.77.99 van Luan an.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.22 Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an H3CO H3CO OH OH O H 3CO OAc OAc O CH3 CH3 H 3CO OH H CH3 O H3CO CH3 OH H3CO O H3CO H3CO (3) H3CO OH (4) H3CO OH OH O H CO OAc H O CH3 CH3 H 3CO H H CH3 CH3 O H CO O H3CO OH H3CO H3CO (5) H3CO OH (6) OH H3CO OH O H CO OAc H O CH3 CH3 H 3CO H H CH3 CH3 O H CO O H3CO H3CO OH H3CO (7) Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd 77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77t@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn OH (8) C.33.44.55.54.78.65.5.43.22.2.4 22.Tai lieu Luan 66.55.77.99 van Luan an.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.22 Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an H 3CO OH CH3 H 3CO OH OH CH3 OMe O OH H3CO (9) OCH3 OH OCH3 OH O O H 3CO H 3CO CH3 CH3 OH OH OH H 3CO CH3 H 3CO CH3 O O OCH3 OH OCH3 OH (10) (11) OCH3 OH OCH3 OH O O H3CO CH3 CH3 H3CO OH (12) Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd 77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77t@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn H (13) C.33.44.55.54.78.65.5.43.22.2.4 22.Tai lieu Luan 66.55.77.99 van Luan an.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.22 Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an 10 O HO O O O O O O (14) Cordyanhydride A O HO O O O O O O O O O (15) Cordyanhydride B Kou Y.C cộng [31] dã phân lập từ dịch chiết metanol loài Cordyceps cicadae beauvericin (16), beauvericin A (17), beauvericin B (18) bassiatin (19), bassiatin A (20) CH2CH3 CH3 N O O N O O O O N O O O O O CH3 N (16) Beauvericin N O O O O O O O CH3 N (17) Beauvericin A Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd 77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77t@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn C.33.44.55.54.78.65.5.43.22.2.4 22.Tai lieu Luan 66.55.77.99 van Luan an.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.22 Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an 53 Hình 4.24: Phổ 13C-NMR hợp chất 46 Hình 4.25: Phổ 13C-NMR hợp chất 46 Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd 77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77t@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn C.33.44.55.54.78.65.5.43.22.2.4 22.Tai lieu Luan 66.55.77.99 van Luan an.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.22 Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an 54 Hình 4.26: Phổ DEPT hợp chất 46 Hình 4.27: Phổ DEPT hợp chất 46 Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd 77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77t@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn C.33.44.55.54.78.65.5.43.22.2.4 22.Tai lieu Luan 66.55.77.99 van Luan an.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.22 Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an 55 Hình 4.28: Phổ HMBC hợp chất 46 Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd 77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77t@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn C.33.44.55.54.78.65.5.43.22.2.4 22.Tai lieu Luan 66.55.77.99 van Luan an.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.22 Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an 56 Hình 4.29: Phổ HMBC hợp chất 46 Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd 77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77t@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn C.33.44.55.54.78.65.5.43.22.2.4 22.Tai lieu Luan 66.55.77.99 van Luan an.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.22 Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an 57 Hình 4.30: Phổ HMBC hợp chất 46 Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd 77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77t@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn C.33.44.55.54.78.65.5.43.22.2.4 22.Tai lieu Luan 66.55.77.99 van Luan an.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.22 Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an 58 Hình 4.31: Phổ HSQC hợp chất 46 Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd 77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77t@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn C.33.44.55.54.78.65.5.43.22.2.4 22.Tai lieu Luan 66.55.77.99 van Luan an.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.22 Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an 59 Hì Hình 4.32: Phổ HMBC hợp chất 46 Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd 77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77t@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn C.33.44.55.54.78.65.5.43.22.2.4 22.Tai lieu Luan 66.55.77.99 van Luan an.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.22 Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an 60 KẾT LUẬN Bước đầu nghiên cứu thành phần hoá học đông trùng hạ thảo (Cordyceps sp1) Việt Nam thu số kết sau: - Bằng phương pháp ngâm chiết với dung môi chọn lọc cất thu hồi dung môi thu cao tương ứng cao etylaxetat (17g), cao butanol (5g), pha nước - Sử dụng phương pháp sắc ký khí (GC) sắc ký khí-khối phổ (GC/MS) phân tích thành phần hố học chất béo đơng trùng hạ thảo với thành phần axit (Z, Z) - 9, 12 - octadecadienoic (38,2%), axit n - hexadecanoic (16,9%), metyl - 8, 11 - octadecadienoat (9,7%), metyl (E) - octadecenoic (6,8%), metyl hexadecanoat (6,8%), axit oleic (4,4%), eicosyne (3,7%), axit (Z) - - octadecenoat (3,5%), axit octadecanoic (2,9%) - Phân lập hợp chất từ cao etyl axetat phương pháp sắc ký kết tinh phân đoạn thu chất 45 chất 46 -Đã tiến hành sử dụng phương pháp phổ đại: phổ tử ngoại (UV), phổ hồng ngoại (IR), phổ khối lượng (EI-MS), phổ cộng hưởng từ hạt nhân 1H-NMR, 13C-NMR, DEPT, HMBC, HSQC COSY để xác định cấu trúc hợp chất tách Các kết phổ cho phép khẳng định chất 45 ergosterol (3-hydroxyergosta-5, 7, 22-triene) chất 46 tricin Các hợp chất lần phân lập từ loài Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd 77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77t@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn C.33.44.55.54.78.65.5.43.22.2.4 22.Tai lieu Luan 66.55.77.99 van Luan an.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.22 Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an 61 DANH MỤC CƠNG TRÌNH Trần Đình Thắng, Đồn Thị Tuyễn, Trần Ngọc Lân (2009), Thành phần hố học Đơng trùng hạ thảo(Cordyceps sp1) Việt Nam, Tạp chí Dược học (nhận đăng) Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd 77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77t@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn C.33.44.55.54.78.65.5.43.22.2.4 22.Tai lieu Luan 66.55.77.99 van Luan an.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.22 Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an 62 TÀI LIỆU THAM KHẢO Tiếng Việt Đỗ Huy Bích người khác (2004), Cây thuốc động vật làm thuốc Việt Nam, Nhà xuất Khoa học Kỹ thuật, Hà Nội Võ Văn Chi (1999), Từ điển thuốc Việt Nam Nhà xuất Y học Nguyễn Thượng Dong người khác (2006), Nghiên cứu thuốc từ thảo dược, Nhà xuất Khoa học kỹ thuật, Hà Nội Nguyễn Văn Đàn, Nguyễn Viết Tựu (1985), Phương pháp nghiên cứu hoá học thuốc, Nhà xuất Y học, Hà Nội Đỗ Tất Lợi (1999), Cây thuốc vị thuốc Việt Nam, Nhà xuất Y học, Hà Nội Nguyễn Thiện Luân, Lê Doãn Diên, Phan Quốc Kinh (1999), Các loại thực phẩm thuốc thực phẩm chức Việt Nam, Nhà xuất Nông nghiệp, Hà Nội Đào Hữu Vinh, Nguyễn Xuân Dũng, Trần Thị Mỹ Linh, Phạm Hùng Việt (1985), Các phương pháp sắc ký, Nhà xuất Khoa học Kỹ thuật, Hà Nội Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd 77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77t@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn C.33.44.55.54.78.65.5.43.22.2.4 22.Tai lieu Luan 66.55.77.99 van Luan an.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.22 Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an 63 Tiếng Anh Bok J.W., Lermer L., Chilton J., Klingeman H.G., Towers, G.H., (1999), Antitumor sterols from the mycelia of Cordyceps sinensis, Phytochemistry, 51, 891 - 898 Boros C., Hamilton S.M., Katz B., Kulanthaivel P., (1994), Comparison of balanol from Verticillium balanoides and ophiocordin from Cordyceps ophioglossoides, J Antibiot., 47, 1010 - 1016 10 Bunyapaiboonsri T., Yoiprommarat S., Intereya K., Kocharin K., (2006), New diphenyl ethers from the insect pathogenic fungus Cordyceps sp BBC 1861, Chem Pharm Bull., 55(2), 304 - 307 11 Chen S.Z., Chu J.Z., (1996), NMR and IR studies on the characterization of cordycepin and 20-deoxyadenosine, Zhongguo Kang Sheng Su ZaShi (Chin J Antibiot.), 21, 9-12 12 Chiou, W.F., Chang P.C., Chou C.J., Chen C.F., (2000), Protein constituent contributes to the hypotensive and vasorelaxant activities of Cordyceps sinensis, Life Sci, 66, 1369-1376 13 Choi Y W., Hyde K.D and Ho W W H., (1997), Fugal Diversity 2, 29-38 14 Cunningham K.G., Manson W., Spring F.S., Hutchinson S.A., (1950), Cordycepin, a metabolic product isolated from cultures of Cordyceps militaris (Linn.) Link, Nature, 166, 949 15 Du D.J., (1986), Antitumor activity of Cordyceps sinensis and cultured Cordyceps mycelia, Zhong Yao Tong Bao (Beijing, China: 1981) 11, 51-54 16 Goettel M S., and Inglis G D., (1997), Fungi: Hyphomycetes, In: Manuals of Techniques in Insect Pathology (ed L Lacey), Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd 77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77t@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn C.33.44.55.54.78.65.5.43.22.2.4 22.Tai lieu Luan 66.55.77.99 van Luan an.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.22 Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an 64 Academic Press, 213-247 17 Guarino A.J., Kredich N.M., (1963), Isolation and identification of 30 - amino - 30 - deoxyadenosine from Cordyceps militaris, Biochim Biophys Acta., 68, 317-319 18 Guo C., Zhu J., Zhang C., Zhang L., (1998), Determination of adenosine and 30 - deoxyadenosine in Cordyceps militaris (L.) Link by HPLC, Zhongguo Zhong Yao Za Zhi, 23, 236-237 19 Guo H., Hu H., Liu S., Liu X., Zhou Y., Che Y., (2007), Bioactive pterphenyl derivatives from a Cordyceps - colonizing isolate of Gliocladium sp J Nat Prod., 70, 1519-1521 20 Guo Y.W., (1985), Preliminary study of Cordyceps barnesii comparison of the chemical constituents of Cordyceps barnesii and Cordyceps sinensis, Zhong Yao Tong Bao (Beijing, China: 1981), 10, 33-35 21 Isaka M., Boonkhao B., Rachtawee P., Auncharoen P., (2007), A Xanthocillin - like alkaloid from the insect pathogenic fungus Cordyceps brunnearubra BCC 1395, J Nat Prod., 70, 656-658 22 Isaka M., Kongsaeree P., Thebtaranonth Y., (2001), Bioxanthracenes from the insect pathogenic fungus Cordyceps pseudomilitaris BCC 1620 II Structure elucidation, J Antibiot., 54, 36-43 23 Isaka M., Srisanoh U., Lartpornmatulee N., Boonruangprapa T., (2007), ES-242 derivatives and cycloheptapeptides from Cordyceps sp strains BCC 16173 and BCC 16176, J Nat Prod, 70, 1601-1604 24 Isaka M., Tanticharoen M., Kongsaeree P., Thebtaranonth Y., (2001), Structures of cordypyridones A - D, antimalarial N - hydroxy - and Nmethoxy - - pyridones from the insect pathogenic fungus Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd 77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77t@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn C.33.44.55.54.78.65.5.43.22.2.4 22.Tai lieu Luan 66.55.77.99 van Luan an.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.22 Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an 65 Cordyceps nipponica, J Org Chem., 66, 4803-4808 25 Jaturapat A., Isaka M., Hywel-Jones N.L., Lertwerawat Y., Kamchonwongpaisan S., Kirtikara K., Tanticharoen M., Thebtaranonth Y., (2001), Bioxanthracenes from the insect pathogenic fungus Cordyceps pseudomilitaris BCC 1620 I Taxonomy, fermentation, isolation and antimalarial activity, J Antibiot., 54, 29-35 26 Jia J M., Ma X C., Fu F., Wu L J and Hu G S., (2005), Cordycepdipeptide A, a new cyclodipeptide from the culture liquid of Cordycep sinensis, Chem Pharm Bull., 53(1), 528 - 583 27 Jia J M., Tao H H., Feng B M., (2009), Cordyceamides A and B from the culture liquid of Cordyceps sinensis (BERK) SACC, Chem Pharm Bull., 57(1), 99 - 101 28 Kneifel H., Konig W.A., Loeffler W., Muller R., (1977), Ophiocordin, an antifungal antibiotic of Cordyceps ophioglossoides, Arch Microbiol, 113, 121-130 29 Krasnoff S.B., Reategui R.F., Wagenaar M.M., Gloer J.B., Gibson D.M., (2005), Cicadapeptins I and II: new Aib-containing peptides from the entomopathogenic fungus Cordyceps heteropoda, J Nat Prod., 68, 50-55 30 Kredich N.M., Guarino A.J., (1961), Homocitrullylaminoadenosine, a nucleoside isolated from Cordyceps militaris, J Biol Chem., 236, 3300 - 3302 31 Kuo Y C., Lin L C., Don M J., Liao H F., Tsai Y P., Lee G H and Cho C Y., (2002), Cyclodesipeptid and dioxomorpholine derivatives isolated from the insectbody portion of the fungus Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd 77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77t@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn C.33.44.55.54.78.65.5.43.22.2.4 22.Tai lieu Luan 66.55.77.99 van Luan an.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.22 Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an 66 Cordyceps cicadae, J Chin Med., 13(4), 209-219 32 Kuo Y.C., Tsai W.J., Shiao M.S., Chen C.F., Lin C.Y., (1996), Cordyceps sinensis as an immunomodulatory agent, Am J Chin Med., 24, 111-125 33 Kwon H C., Zee S D., Cho S Y., Choi S U And Lee K R., (2002), Cytotoxic ergosterols from Paecilomyces sp J300, Arch Pham Res 25(6), 851-855 34 Lecay L A and Brooks W M., (1997), Initinal handling and diagnosis of diseased insets In: Manuals of Techniques in Insect Pathology (Ed L Lacey), Academic Press, 1-15 35 Li S.P., Li P., Dong T.T.X., Tsim K.W.K., (2001), Anti - oxidation activity of different types of natural Cordyceps sinensis and cultured Cordyceps mycelia, Phytomedicine, 8, 207-212 36 Li S.P., Li P., Ji H., Zhang P., Dong T.T., Tsim K.W., (2001), The contents and their change of nucleosides from natural Cordyceps sinensis and cultured Cordyceps mycelia, Yao Xue Xue Bao, 36, 436 439 37 Li S.P., Zhao K.J., Ji Z.N., Song Z.H., Dong T.T.X., Lo C.K., Cheung J.K.H., Tsim K.W.K., (2003), A polysaccharide isolated from Cordyceps sinensis, a traditional Chinese medicine, protects PC12 cells against hydrogen peroxide - induced injury, Life Sci 73, 2503 - 2513 38 Luangsa-Ard J J., Tasanatai K., Mongkolsamrit S and Hywel N L., (2007), Atlas of invertebrate pathogenic fungi of Thailand, BIOTEC, NSTDA, Thailand 39 Matsuda H., Akaki J., Nakamura S., Okazaki Y., Kojama H., (2009), Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd 77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77t@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn C.33.44.55.54.78.65.5.43.22.2.4 22.Tai lieu Luan 66.55.77.99 van Luan an.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.22 Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd 77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77t@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn