Xác định tổng hàm lượng phenolic trong dịch chiết nấm lớn

TRƢỜNG ĐẠI HỌC VINH KHOA HOÁ HỌC - TÀO THỊ TÂM XÁC ĐỊNH TỔNG HÀM LƢỢNG PHENOLIC TRONG DỊCH CHIẾT NẤM LỚN ĐỒ ÁN TỐT NGHIỆP ĐẠI HỌC NGÀNH: CÔNG NGHỆ THỰC PHẨM VINH – 2012 i BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO TRƢỜNG ĐẠI HỌC VINH CỘNG HÒA XÃ HỘI CHỦ NGHĨA VIỆT NAM ĐỘC LẬP- TỰ DO- HẠNH PHÚC - NHIỆM VỤ ĐỒ ÁN TỐT NGHIỆP Họ tên sinh viên: Tào Thị Tâm Số hiệu sinh viên: 0852040419 Khóa: 49 Ngành: Cơng nghệ hóa thực phẩm Tên đề tài: „„Xác định tổng hàm lượng phenolic dịch chiết nấm lớn Nội dung nghiên cứu - Lý thuyết chung nấm - Lý thuyết chung hợp chất phenolic - Xác định tổng hàm lƣơng phenolic dịch chiết nấm Linh chi đen Họ tên cán hƣớng dẫn : Ngày giao nhiệm vụ đồ án : Ngày tháng năm 2012 Ngày hoàn thành đồ án : Ngày tháng năm 2012 PGS.TS Nguyễn Hoa Du Ngày Chủ nhiệm môn tháng Cán hƣớng dẫn (Ký, ghi rõ họ, tên) (Ký, ghi rõ họ, tên) Sinh viên hoàn thành nộp đồ án tốt nghiệp ngày tháng năm Ngƣời duyệt (Ký, ghi rõ họ, tên) ii năm 2012 BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO TRƢỜNG ĐẠI HỌC VINH CỘNG HÒA XÃ HỘI CHỦ NGHĨA VIỆT NAM ĐỘC LẬP- TỰ DO- HẠNH PHÚC - BẢN NHẬN XÉT ĐỒ ÁN TỐT NGHIỆP Họ tên sinh viên: Tào Thị Tâm Số hiệu sinh viên: 0852040419 Khóa: 49 Ngành: Công nghệ thực phẩm Cán hƣớng dẫn: PGS.TS Nguyễn Hoa Du Cán duyệt: Nội dung nghiên cứu, thiết kế: ………………………………………………………………………………………………………… ………………………………………………………………………………………………………… ………………………………………………………………………………………………………… ………………………………………………………………………………………………………… …………………………………………………………………………………… Nhận xét cán hƣớng dẫn: ………………………………………………………………………………………………………… ………………………………………………………………………………………………………… ………………………………………………………………………………………………………… ………………………………………………………………………………………………………… …………………………………………………………………………………… Ngày tháng năm 2012 Cán hƣớng dẫn (Ký, ghi rõ họ, tên) iii BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO TRƢỜNG ĐẠI HỌC VINH CỘNG HÒA XÃ HỘI CHỦ NGHĨA VIỆT NAM ĐỘC LẬP- TỰ DO- HẠNH PHÚC - BẢN NHẬN XÉT ĐỒ ÁN TỐT NGHIỆP Họ tên sinh viên: Tào Thị Tâm Số hiệu sinh viên: 0852040419 Khóa: 49 Ngành: Cơng nghệ thực phẩm Cán hƣớng dẫn: PGS.TS Nguyễn Hoa Du Cán duyệt: Nội dung nghiên cứu, thiết kế: ………………………………………………………………………………………………………… ………………………………………………………………………………………………………… ………………………………………………………………………………………………………… ………………………………………………………………………………………………………… …………………………………………………………………………………… Nhận xét cán duyệt: ………………………………………………………………………………………………………… ………………………………………………………………………………………………………… ………………………………………………………………………………………………………… ………………………………………………………………………………………………………… …………………………………………………………………………………… Ngày tháng năm 2012 Cán duyệt (Ký, ghi rõ họ, tên) iv LỜI CẢM ƠN Đồ án đƣợc hoàn thành phịng Trung tâm phân tích chuyển giao cơng nghệ Thực phẩm -Môi trƣờng, trƣờng ĐH Vinh Đề tài đồ án đƣợc hỗ trợ phần kinh phí từ đề tài Nghị định thƣ hợp tác nghiên cứu nấm lớn Việt nam Đài Loan PGS.TS Trần Đình Thắng làm chủ nhiệm đề tài Để hoàn thành đƣợc đồ án này, em xin bày tỏ lòng biết ơn sâu sắc đến Thầy giáo PGS.TS Nguyễn Hoa Du giao đề tài, hết lòng hƣớng dẫn, bảo, truyền đạt kiến thức kinh nghiệm quý báu cho em suốt q trình hồn thành đồ án Em xin xin bày tỏ lòng biết ơn: - Các kỹ thuật viên Trung tâm, cô Ngô Thị Thủy Hà cô Chu Thị Thanh Lâm giúp đỡ tạo điều kiện sử dụng máy móc thiết bị nghiên cứu - Thầy giáo PGS.TS Trần Đình Thắng, giáo - Th.S Đào Thị Thanh Xuân, thầy giáo - Th.S Hồng Văn Trung, thầy giáo bạn hết lòng tạo điều kiện giúp đỡ em hoàn thành đồ án Tuy nhiên, đồ án chắn cịn nhiều thiếu sót nên em mong q thầy bạn góp ý để em hồn thiện đồ án học hỏi, rút kinh nghiệm cho công tác nghiên cứu sau Cuối cùng, lần em xin gửi đến tất ngƣời quan tâm, giúp đỡ em hoàn thành đồ án lời cảm ơn chân thành ! Vinh, tháng 12 năm 2012 Sinh viên Tào Thị Tâm v C.33.44.55.54.78.65.5.43.22.2.4 22.Tai lieu Luan 66.55.77.99 van Luan an.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.22 Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an TÓM TẮT Mẫu nấm Linh chi đen đƣợc lấy rừng quốc gia Pù Mát huyện Con Cuông, tỉnh Nghệ An Hàm lƣợng phenolic tổng đƣợc khảo nghiệm loại dịch chiết đƣợc chiết xuất lần lƣợt loại dung mơi có độ phân cực tăng dần là: Ete dầu hỏa, etyl acetate, methanol nƣớc, đƣợc xác định theo phƣơng pháp mô tả tiêu chuẩn Tổ chức quốc tế (ISO) 14.502-1:2005 [33], sử dụng thuốc thử Folin – Ciocalteu dựa ngun tắc mơi trƣờng kiềm phenolic khử Mo+6 W+6 Mo+5, W+5 Mo+4và W+4 tạo thành dung dịch màu xanh dƣơng có hấp thụ cực đại λ = 765 nm, đƣợc xác định phƣơng pháp quang phổ Kết xác định đƣợc hàm lƣợng hợp chất phenolic chiết xuất nƣớc cao (4,064 - 4,793) mg/ml, chiết xuất etyl acetate (1,524 - 1,801) mg/ml chiết xuất methanol (0,643 - 1,057) mg/ml; Cịn chiết xuất ete dầu hỏa có hàm lƣợng phenolic tƣơng đối nhỏ (0,0852 - 0,1022) mg/ml So sánh tổng hàm lƣợng phenolic dịch chiết nấm Linh chi đen đƣợc lấy rừng quốc gia Pù Mát với tổng hàm lƣợng phenolic loại nấm mẫu thực vật đƣợc nghiên cứu trƣớc ta thấy: „„Khả hòa tan hợp chất phenolic loại dung môi khác khác nhau, tùy thuộc vào chất hợp chất phenolic đó‟‟ vi Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd 77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77t@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn C.33.44.55.54.78.65.5.43.22.2.4 22.Tai lieu Luan 66.55.77.99 van Luan an.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.22 Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an MỤC LỤC LỜI CẢM ƠN v MỞ ĐẦU 1.1 Lý chọn đề tài Nhiệm vụ nghiên cứu Đối tƣợng nghiên cứu CHƢƠNG I TỔNG QUAN 1.1 Nấm Linh chi 1.1.1 Khái quát chung nấm Linh chi 1.1.2 Vị trí phân loại 1.1.3 Phân loại 1.1.4 Đặc điểm hình thái nấm Linh chi (Ganoderma lucidum) 1.1.5 Thành phần hóa học hoạt chất sinh học nấm Linh chi (Ganoderma lucidum) 1.1.6 Tác dụng chữa bệnh nấm Linh chi 1.2 Nấm linh chi đen 10 1.2.1 Mô tả 10 1.2.2 Thành phần hoá học 11 1.2.3 Sử dụng hoạt tính 11 1.3 Tổng quan phenolic 12 1.3.1 Giới thiệu hợp chất phenolic thực vật 12 1.3.2 Phân loại hợp chất phenolic 13 1.3.3 Một số hợp chất phenolic điển hình 14 1.3.4 Các hợp chất phenolic nấm 21 1.3.5 Hoạt tính sinh học phenolic 22 1.4 Phƣơng pháp trắc quang xác định hàm lƣợng hợp chất phenolic 24 1.5 Đánh giá kết phân tích 24 1.5.1 Phƣơng pháp xử lý kết phân tích 24 1.5.2 Phƣơng pháp thống kê xử lý đƣờng chuẩn 26 1.6 Một số loại dung môi phổ biến thƣờng sử dụng chiết nấm 26 Chƣơng II KỸ THUẬT THỰC NGHIỆM 28 2.1 Dụng cụ, thiết bị, hóa chất 28 2.1.1 Dụng cụ, thiết bị 28 2.1.2 Hóa chất 28 vii Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd 77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77t@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn C.33.44.55.54.78.65.5.43.22.2.4 22.Tai lieu Luan 66.55.77.99 van Luan an.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.22 Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an 2.1.3 Pha chế dung dịch 29 2.1.4 Xử lý mẫu 31 Chƣơng III KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 39 3.1 Xác định tổng phenolic dịch chiết nấm Linh chi đen 39 3.1.1 Xây dựng phƣơng trình đƣờng chuẩn phụ thuộc mật độ quang vào nồng độ axit gallic 39 3.1.2 Kết xác định hàm lƣợng phenolic trong dịch chiết nấm Linh chi đen phƣơng pháp trắc quang 44 3.1.3 Nhận xét kết 53 3.1.4 Khả hịa tan nhóm hợp chất phenolic loại dung môi khác 53 KẾT LUẬN 58 TÀI LIỆU THAM KHẢO 59 viii Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd 77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77t@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn C.33.44.55.54.78.65.5.43.22.2.4 22.Tai lieu Luan 66.55.77.99 van Luan an.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.22 Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an DANH MỤC HÌNH VẼ Hình 1.1 loại nấm Linh chi phân loại theo màu sắc Hình 1.2 Nấm linh chi Hình 1.3 Ảnh nấm Linh chi đen lấy rừng quốc gia Pù Mát 11 Hình 1.4 Các Flavonoid tự nhiên 15 Hình 1.5 Các acid phenolic tự nhiên 16 Hình 1.6: Đơn vị cấu trúc lignin 19 Hình 1.7 Một số hợp chất phenolic nấm 22 Hình 3.1 Phổ UV -ViS mẫu chuẩn axit gallic methanol nồng độ (mg/ml): (1): 0,01; (2): 0,035; (3): 0,04; (4): 0,045; (5): 0.07; (6): 0,08 λ= 765 nm 39 Hình 3.2 Đồ thị biểu diễn phụ thuộc mật độ quang vào nồng độ axit gallic methanol (l = 1,0cm, λ = 765 nm) 40 Hình 3.3 Phổ UV -ViS mẫu chuẩn axit gallic nƣớc nồng độ (mg/ml): (1): 0,01; (2): 0,02; (3): 0,03; (4): 0,04; (5): 0.07; (6): 0,08 λ= 765 nm 42 Hình 3.4 Đồ thị biểu diễn phụ thuộc mật độ quang vào nồng độ axit gallic nƣớc (l = 1,0cm, λ = 765 nm) 42 Hình 3.5 Phổ UV -ViS dịch chiết nấm ete dầu hỏa λ= 765 nm 44 Hình 3.6 Phổ UV -ViS dịch chiết nấm etyl acetate λ= 765 nm 46 Hình 3.7 Phổ UV -ViS dịch chiết nấm methanol λ= 765 nm 48 ix Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd 77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77t@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn C.33.44.55.54.78.65.5.43.22.2.4 22.Tai lieu Luan 66.55.77.99 van Luan an.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.22 Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an DANH MỤC BẢNG BIỂU Bảng 1.1 Thành phần hoạt chất nấm Linh chi (Willard 1990) Bảng 1.2 Phân loại hợp chất phenolicdự số lƣợng nguyên tử cacbon phân tử 14 Bảng 1.3 Quan hệ tia bị hấp thụ màu chất hấp thụ 24 Bảng 1.4 Giá trị phân bố t tƣơng ứng với xác suất p k bậc tự 25 Bảng 1.5 Bảng tính chất dung mơi phổ biến 27 Bảng 2.1 Điếm sôi nhiệt độ chiết loại dung môi: Ete dầu hỏa, etyl acetate, methanol, nƣớc 32 Bảng 3.1 Sự phụ thuộc mật độ quang vào nồng độ axit gallic methanol (l = 1,0cm, λ = 765 nm) 40 Bảng 3.2 Sự phụ thuộc mật độ quang vào nồng độ axit gallic nƣớc (l= 1,0cm, λ = 765 nm) 42 Bảng 3.3 Kết tính nồng độ phenolic dịch chiết nấm ete dầu hỏa theo phƣơng trình đƣờng chuẩn 45 Bảng 3.4 Kết tính nồng độ phenolic dịch chiết nấm etyl acetate theo phƣơng trình đƣờng chuẩn 47 Bảng 3.5 Kết tính nồng độ phenolic dịch chiết nấm methanol theo phƣơng trình đƣờng chuẩn 49 Bảng 3.6 Kết tính nồng độ phenolic dịch chiết nấm nƣớc theo phƣơng trình đƣờng chuẩn 51 Bảng 3.7 Hàm lƣợng phenolic (mg GAEs/g nấm khô) thu đƣợc dung môi khác 53 Bảng 3.8 Ảnh hƣởng loại dung môi tổng hàm lƣợng phenolic, tổng số flavonoid tanin ngƣng tụ năm loài nấm, dẫn theo 54 Bảng 3.9 (Table 3) Hàm lƣợng phenolic tổng (mg GAEs/g nấm khô) thu đƣợc chiết dung môi khác nhau: Ete dầu hỏa, etyl acetate, methanol nƣớc loại nấm 55 Bảng 3.10 Hoạt tính antioxydant (DPPH) tổng hợp chất phenolic (mg GAEs/g trọng lƣợng khô) Cassia sophera L 56 x Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd 77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77t@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn C.33.44.55.54.78.65.5.43.22.2.4 22.Tai lieu Luan 66.55.77.99 van Luan an.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.22 Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an ∆Ai = (0,6225 + 0,62692 + 0,62574 )/3 = 0,625053333 Mặt khác, từ phƣơng trình đƣờng chuẩn xây dựng mục 3.1.1.1 ∆Ai = ( 0,084245105 ± 0,023254115 ) + (11,09671204 ± 0,446836629 ).Ci Chúng tơi tính đƣợc nồng độ phenolic 1ml dung dịch đem phân tích: 0,044834923 ≤ Cphenolic ≤ 0,05296422 (mg/ml) Hàm lƣợng phenolic gam mẫu khơ đƣợc tính theo cơng thức: mphenolic  mg / g   Cphenolic V m Trong đó: V: Là thể tích dung dịch mẫu ban đầu m: Là khối lƣợng mẫu Vậy hàm lƣợng phenolic dịch chiết nấm etyl acetate là: 1,524387374 ≤ mphenolic ≤1,800783479 (mg/ml) (2) 3.1.2.3 Hàm lượng phenolic dịch chiết nấm methanol Sau tiến hành sấy đến khối lƣợng không đổi, đem cân ta đƣợc khối lƣợng cao = 0,1984 g; Ta hòa tan lại methanol 70% nồng độ 0,6 mg/ml tức hòa tan lại 0,1984 g cao 330,67 ml methanol 70% Để dễ thao tác ta tiến hành hòa tan lại 330 ml, sau đem phân tích đƣợc lƣu trữ 40C trƣớc sử dụng Phép đo: Tiến hành tƣơng tự nhƣ mơ tả Hình 3.7 Phổ UV -ViS dịch chiết nấm methanol λ= 765 nm Từ phƣơng trình đƣờng chuẩn tuân theo định luật Beer: 48 Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd 77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77t@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn C.33.44.55.54.78.65.5.43.22.2.4 22.Tai lieu Luan 66.55.77.99 van Luan an.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.22 Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an ∆Ai = 11,097 Ci + 0,0842 Và kết thực nghiệm, tiến hành xử lý ta thu đƣợc kết nhƣ sau: Bảng 3.5 Kết tính nồng độ phenolic dịch chiết nấm methanol theo phương trình đường chuẩn Lần đo Thể tích dung dịch phân tích (ml) ∆Ai Ci 1 0,1983 0,010282058 0,19597 0,010072092 0,19807 0,010261332 Để đánh giá độ xác phƣơng pháp, sử dụng hàm phân bố Student để đánh giá kết thu đƣợc xác định hàm lƣợng phenolic mẫu thật Chọn C = 0,010261332 ; C ≈ X ; yi = xi -C n Ta có: Giá trị trung bình: X  C   i 1 - Phƣơng sai: S X  X n 1 i  yi = 0,010205161 n = 1,33879E-08 - Độ lệch chuẩn trung bình: S X  S2 = 4,46264E-09 n  Xác định độ tin cậy kết phân tích Ta có:   t p , k S X = 0,000287253, Với t(0,95;2) = 4.3 Trong t p , k hàm phân bố student ứng với bậc tự k (k= n-1) xác suất p - Khoảng tin cậy: X   a  X  0,009917908 ≤ Cphenolic ≤ 0,010492413 Nếu  nhỏ X gần tới giá trị thực - Hàm phân bố thực nghiệm ttn  X a SX = │ 0,010205161- 0,01│/ 6,6803E-05 = 3,071128852 - So sánh ttn với t p , k ta thấy: ttn = 3,07 < t p , k = 4,3 X ≠a nguyên nhân ngẫu nhiên với p = 0,95 - Sai số tƣơng đối q%   X 100  t p, k S X X 100 = 2,814779885 % 49 Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd 77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77t@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn C.33.44.55.54.78.65.5.43.22.2.4 22.Tai lieu Luan 66.55.77.99 van Luan an.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.22 Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an q% = 2,81% < 5% kết nghiên cứu đƣợc chấp nhận áp dụng kết nghiên cứu để xác định hàm lƣợng phenolic số đối tƣợng  Từ bảng ta có mật độ quang trung bình mẫu là: ∆Ai = ( 0,1983+ 0,19597 + 0,19807 )/3 = 0,197446667 Mặt khác, từ phƣơng trình đƣờng chuẩn xây dựng mục 3.1.1.1.: ∆Ai = ( 0,084245105 ± 0,023254115 ) + (11,09671204 ± 0,446836629 ).Ci Chúng tơi tính đƣợc nồng độ phenolic 1ml dung dịch đem phân tích: 0,00779201 ≤ Cphenolic ≤ 0,01281289 (mg/ml) Hàm lƣợng phenolic gam mẫu khơ đƣợc tính theo cơng thức: mphenolic mg / g   C phenolic V m Trong đó: V: Là thể tích dung dịch mẫu ban đầu m: Là khối lƣợng mẫu Vậy hàm lƣợng phenolic dịch chiết nấm methanol là: 0,642840824 ≤ mphenolic ≤ 1,057063388 (mg/ml) (3) 3.1.2.4 Hàm lượng phenolic dịch chiết nấm nước Sau tiến hành sấy đến khối lƣợng không đổi, đem cân ta đƣợc khối lƣợng cao = 0,24 g; Ta hịa tan lại nƣớc cất nóng nồng độ 0,6 mg/ml tức hòa tan lại 0,24 g cao 400 ml nƣớc cất nóng Sau đem phân tích đƣợc lƣu trữ 0C trƣớc sử dụng Phép đo: Tiến hành tƣơng tự nhƣ mô tả Tiến hành làm đồng thời mẫu đối chứng cách thay 1ml mẫu 1ml nƣớc cất, ta thu đƣợc kết sau: 50 Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd 77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77t@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn C.33.44.55.54.78.65.5.43.22.2.4 22.Tai lieu Luan 66.55.77.99 van Luan an.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.22 Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an Hình 3.8 Phổ UV -ViS dịch chiết nấm nước λ= 765 nm Từ phƣơng trình đƣờng chuẩn tuân theo định luật Beer: ∆Ai = 10,12 Ci + 0,0416 Và kết thực nghiệm, tiến hành xử lý ta thu đƣợc kết nhƣ sau: Bảng 3.6 Kết tính nồng độ phenolic dịch chiết nấm nước theo phương trình đường chuẩn Lần đo Thể tích dung dịch phân tích (ml) ∆Ai Ci 1 0,48854 0,044164032 0,48844 0,04415415 0,48807 0,044117589 Để đánh giá độ xác phƣơng pháp, sử dụng hàm phân bố Student để đánh giá kết thu đƣợc xác định hàm lƣợng phenolic mẫu thật Chọn C = 0,04415415 ; C ≈ X ; yi = xi -C n Ta có: Giá trị trung bình: X  C   i 1 - Phƣơng sai: S X  X n 1 i  yi = 0,044145257 n = 5,98549E-10 - Độ lệch chuẩn trung bình: S X  S2 = 1,4125E-05 n 51 Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd 77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77t@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn C.33.44.55.54.78.65.5.43.22.2.4 22.Tai lieu Luan 66.55.77.99 van Luan an.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.22 Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an  Xác định độ tin cậy kết phân tích Ta có:   t p , k S X = 6,07376E-05, Với t(0,95;2) = 4,3 Trong t p , k hàm phân bố student ứng với bậc tự k (k= n-1) xác suất p - Khoảng tin cậy: X   a  X  0,044084519 ≤ Cphenolic ≤ 0,044205995 Nếu  nhỏ X gần tới giá trị thực - Hàm phân bố thực nghiệm ttn  X a SX = │ 0,044145257 - 0,0442│/ 1,4125E-05 = 3,875610776 - So sánh ttn với t p , k ta thấy: ttn = 3,88 < t p , k = 4,3 X ≠a nguyên nhân ngẫu nhiên với p = 0,95 - Sai số tƣơng đối q%   X 100  t p, k S X X 100 = 0,137585765 % q% = 0,138% < 5% kết nghiên cứu đƣợc chấp nhận áp dụng kết nghiên cứu để xác định hàm lƣợng phenolic số đối tƣợng  Từ bảng ta có mật độ quang trung bình mẫu là: ∆Ai = ( 0,48854 + 0,48844 + 0,48807 )/3 = 0,48835 Mặt khác, từ phƣơng trình đƣờng chuẩn xây dựng mục 3.1.1.1: ∆Ai = ( 0,041593906 ± 0,019340934 ) + (10,12038627 ± 0,396173153 ) Ci Chúng tơi tính đƣợc nồng độ phenolic 1ml dung dịch đem phân tích: 0,04064211≤ Cphenolic ≤ 0,047931593 Hàm lƣợng phenolic gam mẫu khơ đƣợc tính theo cơng thức: mphenolic mg / g   C phenolic V m Trong đó: V: Là thể tích dung dịch mẫu ban đầu m: Là khối lƣợng mẫu Vậy hàm lƣợng phenolic dịch chiết nấm nƣớc là: 4,064210962 ≤ mphenolic ≤ 4,79315933 (mg/ml) (4) 52 Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd 77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77t@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn C.33.44.55.54.78.65.5.43.22.2.4 22.Tai lieu Luan 66.55.77.99 van Luan an.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.22 Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an 3.1.3 Nhận xét kết Từ (1); (2); (3); (4) ta có hàm lƣợng phenolic đƣợc thể nhƣ mg axit gallic (GAEs)/g nấm khô, đƣợc thể nhƣ Bảng 3.7 Bảng 3.7 Hàm lượng phenolic (mg GAEs/g nấm khô) thu dung môi khác Ete dầu hỏa Etyl acetate Methanol Nấm Linh chi đen (0,0852 – 0,1022) (1,524 - 1,801) (0,643 - 1,057) Nƣớc (4,064 - 4,793) Vậy tổng hàm lƣợng hợp chất phenolic nấm Linh chi dao động khoảng: 6,3162 – 7,7532 mg GAEs/g nấm khơ 3.1.4 Khả hịa tan nhóm hợp chất phenolic loại dung mơi khác Dƣới dẫn số số liệu tổng hàm lƣợng phenolic số loại nấm thực vật khác đƣợc nghiên cứu để rút nhận xét khả hòa tan hợp chất phenolic dung môi chiết khác 53 Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd 77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77t@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn C.33.44.55.54.78.65.5.43.22.2.4 22.Tai lieu Luan 66.55.77.99 van Luan an.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.22 Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an Bảng 3.8 Ảnh hưởng loại dung môi tổng hàm lượng phenolic, tổng số flavonoid tanin ngưng tụ năm loài nấm, dẫn theo [27] TP: phenolic tổng số; TF: tổng flavonoid; CT: tannin ngƣng tụ; ND: không phát 54 Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd 77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77t@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn C.33.44.55.54.78.65.5.43.22.2.4 22.Tai lieu Luan 66.55.77.99 van Luan an.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.22 Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an Từ Bảng 3.8 ta thấy hàm lƣợng phenolic tổng số loại nấm chiết loại dung môi khác nhau: Methanol, ethanol, acetone, nƣớc, n-hexan nhƣ sau: L ciliatus S commune H conia Pleurotus sp P ostreatus Methanol (60%, v/v) (3) (3) (3) (2) (3) Ethanol (60%, v/v) (2) (2) (2) (3) (2) Acetone (60%, v/v) (4) (4) (4) (4) (4) Nƣớc (1) (1) (1) (1) (1) n-Hexan ND ND ND ND ND Trong đó: (1) - Hàm lƣợng phenolic cao Tƣơng tự (2), (3), (4) - Hàm lƣợng phenolic cao thứ 2, thứ 3, thứ ND: Không phát Ta thấy loại nấm L ciliatus, S commune, H conia P ostreatus : Hàm lƣợng phenolic tống chiết dung môi nƣớc cao so với chiết xuất dung môi khác, ethanol (60%, v/v) đứng thứ hai, Methanol (60%, v/v) đứng thứ ba, Acetone (60%, v/v) đứng thứ n-Hexan khơng phát Cịn loại nấm Pleurotus sp thì: Hàm lƣợng phenolic tống chiết dung môi nƣớc cao nhất, tiếp đến Methanol (60%, v/v) đứng thứ 2, sau đến Ethanol (60%, v/v) đứng thứ 3, Acetone (60%, v/v) cao thứ cịn n-Hexan khơng phát Bảng 3.9 (Table 3) Hàm lượng phenolic tổng (mg GAEs/g nấm khô) thu chiết dung môi khác nhau: Ete dầu hỏa, etyl acetate, methanol nước loại nấm.[37] 55 Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd 77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77t@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn C.33.44.55.54.78.65.5.43.22.2.4 22.Tai lieu Luan 66.55.77.99 van Luan an.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.22 Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an Từ Bảng 3.9 (Table 3) ta thấy: Tổng hàm lƣợng phenolic chiết xuất hai loại nấm chiết dung môi methanol cao so với chiết xuất dung môi khác, cao thứ hai chiết nƣớc, sau đến ete dầu hỏa cuối etyl acetate Bảng 3.10 Hoạt tính antioxydant (DPPH) tổng hợp chất phenolic (mg GAEs/g trọng lượng khô) Cassia sophera L [28] Cassia sophera L (Caesalpiniaceae) thực vật dƣợc liệu tiểu lục địa Bangladesh Ấn Độ, đƣợc sử dụng rộng rãi nhƣ y học dân gian để điều trị bệnh cho nhiều ngƣời Từ Bảng 3.10 ta thấy tổng hàm lƣợng phenolic chiết xuất etyl acetate cao so với chiết xuất dung môi khác Đứng thứ hai chiết xuất chiết methanol, thứ ba chiết xuất chiết chloroform cuối thấp nhexan Từ kết tổng hàm lƣợng hợp chất phenoic nấm Linh chi đen lấy rừng quốc gia Pù Mát kết tổng hàm lƣợng phenolic loại nấm mẫu thực vật ta rút kết luận nhƣ sau: Phenolic bao gồm nhóm lớn đa dạng hợp chất hóa học Mỗi hợp chất có cấu tạo tính chất riêng, hợp chất tan trong loại dung mơi có độ phân cực khác Mỗi loại nấm nói riêng loại thực vật nói chung có chứa hợp chất phenolic khác nhau, tùy thành phần hợp chất phenolic loại nấm mà ta xác định đƣợc tổng hàm lƣợng phenolic chiết xuất nấm chiết nấm dung môi cao Nói cách khái qt : „„Khả hịa tan hợp chất phenolic loại dung môi khác khác nhau, tùy thuộc vào chất hợp chất phenolic đó‟‟ Tuy nhiên từ kết nghiên cứu ta thấy 56 Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd 77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77t@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn C.33.44.55.54.78.65.5.43.22.2.4 22.Tai lieu Luan 66.55.77.99 van Luan an.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.22 Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an nhìn chung hợp chất phenoic tan nhiều trong dung môi phân cực nhƣ: Nƣớc, methanol, etyl acetate tan trong dung môi không phân cực nhƣ: ete dầu hỏa, n-hexan, chloroform Đối với mẫu nấm ta nghiên cứu mẫu nấm Linh chi đen đƣợc lấy rừng quốc gia Pù Mát hàm lƣợng hợp chất phenolic chiết xuất nƣớc cao (4,064 4,793) mg/ml, chiết xuất etyl acetate (1,524 - 1,801) mg/ml chiết xuất methanol (0,643 - 1,057) mg/ml; Cịn chiết xuất ete dầu hỏa có hàm lƣợng phenolic tƣơng đối nhỏ (0,0852 - 0,1022) mg/ml 57 Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd 77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77t@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn C.33.44.55.54.78.65.5.43.22.2.4 22.Tai lieu Luan 66.55.77.99 van Luan an.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.22 Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an KẾT LUẬN Căn vào nhiệm vụ đề tài, dựa kết nghiên cứu, rút kết luận sau: Đã nghiên cứu đƣợc khả hòa tan hợp chất phenolic có nấm Linh chi đen lấy rừng quốc gia Pù Mát loại dung mơi có độ phân cực tăng dần so sánh với khả hòa tan hợp chất phenolic có loại nấm khác mẫu thực vật khác, từ rút kết luận rằng: Tùy thành phần hợp chất phenoic có loại nấm nói riêng, hay loại thực vật nói chung mà khả hịa tan hợp chất phenolic loại dung môi khác khác Tuy nhiên từ kết nghiên cứu ta thấy nhìn chung hợp chất phenoic tan nhiều trong dung môi phân cực nhƣ: Nƣớc, methanol, etyl acetate tan trong dung môi không phân cực nhƣ: ete dầu hỏa, n-hexan, chloroform Đã xây dựng đƣợc phƣơng trình đƣờng chuẩn biểu diễn phụ thuộc mật độ quang vào nồng độ hợp chất phenolic, theo chất chuẩn axit gallic, dùng thuốc thử FolinCiocalteu Đã xác định đƣợc hàm lƣợng phenolic tổng phân đoạn dịch chiết nấm Linh chi đen đƣợc chiết xuất dung môi: - Phân đoạn ete dầu hỏa: 0,0852 – 0,1022 mg GAE/g nấm khô - Phân đoạn etyl axetat: 1,524 - 1,801 mg GAE/g nấm khô - Phân đoạn metanol: 0,643 - 1,057mg GAE/g nấm khô - Phân đoạn nƣớc: 4,064 - 4,793mg GAE/g nấm khô Tổng hàm lƣợng hợp chất phenolic nấm Linh chi đen là: 6,3162 – 7,7532 mg GAEs/g nấm khô Đã đánh giá đƣợc đƣợc tính khả thi phƣơng pháp xác định hàm lƣợng phenolic tổng theo phƣơng pháp tả tiêu chuẩn Tổ chức quốc tế (ISO) 14.502-1:2005 [29] Kết cho phép áp dụng phƣơng pháp để xác định tổng hàm lƣợng phenolic mẫu nấm với độ xác cao 58 Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd 77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77t@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn C.33.44.55.54.78.65.5.43.22.2.4 22.Tai lieu Luan 66.55.77.99 van Luan an.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.22 Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an TÀI LIỆU THAM KHẢO TIẾNG VIỆT [1] Chu Thị Ngọc Anh Khảo sát quy trình xác định Morin, Quercetin Rutin phương pháp sắc ký mỏng - Fluorodensitometer hoa hòe số mẫu thực vật.Luận văn Thạc sỹ, Đại học Khoa học tự nhiên [2] Đoàn Sáng (2003), Linh chi nguyên chất bệnh thời Nhà xuất Y học, Hà Nội, Việt Nam [3] Giang Trung Khoa1, Nguyễn Thị Miền1, Phạm Văn Hiển1, Phạm Thị Hồng Diệu1, P Duez2 Ảnh hưởng chất lượng nguyên liệu đến hàm lượng Polyphenol hoạt tính kháng khuẩn giống chè PH1 Tạp chí Khoa học Phát triển 2011: Tập 9, số 2: 258 - 264 Trƣờng Đại học Nông nghiệp Hà Nội [4] Hồ Viết Q (2002) Cơ sở hóa học phân tích đại - tập II – Các phương pháp phân tích lý – hóa, NXBĐHSP [5] Hồ Thiên Hồng Khảo sát hoạt tính hệ enzym thủy phân số lồi nấm lớn nuôi cấy môi trường lỏng Luận văn thạc sỹ Khoa học, Đại học Khoa học Tự nhiên http://www.nsl.hcmus.edu.vn/greenstone/collect/thesiskh/archives/HASH01c7/75628fb4.dir /4.PDF [6] Lê Ngọc Tú, Bùi Đức Hợi, Lƣu Duẩn, Ngô Hữu Hợp, Đặng Thị Thu, Nguyễn Trọng Cần (2001) Hóa thực Phẩm, NXBKHKT [7] Lê Văn Trọng (2012) Hoạt tính sinh học flavonoid, Hội thảo khoa học cấp khoa, Trƣờng đại học Hồng Đức [8] Lê Xuân Thám (1996) Nghiên cứu đặc điểm sinh học đặc điển hấp thu khoáng nấm Linh chi Ganoderma lucidum (Leyss.ex Fr).Karst Luận án phó Tiến sỹ Khoa học Sinh học, Đại học Khoa Học Tự Nhiên, Đại Học Quốc Gia Hà Nội, Việt Nam [9] Lê Phƣơng Dung Phân lập Promoter gen mã hóa cho enzyme Cinnamyl alcohol dehydrogenase (CDA) thiết kế vector chuyển gen mang đoạn gen mã hóa cho enzyme Cinamoyl CoA reductase (CCR) từ bạch đàn URO ( Eucalyptus Urophylla S.T.Black) Luận văn Thạc sỹ sinh học Đại học Thái Nguyên Trƣờng Đại học Sƣ phạm (2009) [10] Nguyễn Khắc Nghĩa, Áp dụng toán học thống kê để xử lý số liệu, (1997) [11] Nguyễn Lân Dũng (2001) Công nghệ nuôi trồng nấm, tập Nhà xuất Nông nghiệp, Hà Nội [12] Nguyễn Hữu Đống, Nguyễn Thị Sơn Zani Federico (2002) Cơ sở khoa học công 59 Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd 77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77t@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn C.33.44.55.54.78.65.5.43.22.2.4 22.Tai lieu Luan 66.55.77.99 van Luan an.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.22 Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an nghệ nuôi trồng Nhà xuất Nông nghiệp, Hà Nội [13] Nguyễn Vũ Duy Khanh Đề tài sản xuất sinh khối nấm dược liệu GVHD: Th.S Nguyễn Minh Khang http://www.scribd.com/doc/34823539/De-Tai-San-Xuat-SinhKhoi-Nam-Duoc-Lieu [14] Nguyễn Hữu Đống (2003) Nuôi trồng chế biến nấm ăn nấm làm thuốc chữa bệnh Nhà xuất Nông nghiệp, Hà Nội [15] Nguyễn Hữu Đống Đinh Xuân Linh (2000) Nấm ăn nấm dược liệu - công dụng công nghệ nuôi trồng Nhà xuất Hà Nội [16] Nguyễn Huy Phiêu, Phùng Ngọc Bộ Nghiên cứu cấu tạo lignin bồ đề tre nứa Tạp chí Hố học Ứng dụng số 3-2002 tr.17 [17] Nguyễn Ngọc Hồng (2010) Nghiên cứu thành phần hóa học tác dụng chống oxy hóa số thuốc hướng tác dụng gan, Luận án Tiến sĩ, Trƣờng Đại học Quốc gia Thành phố Hồ Chí Minh [18] Nguyễn Lê Tú Trâm (2010) Nuôi cấy tế bào Râu Mèo (Orthosiphon stamineus benth) để thu nhận Flavonoid Luận văn Thạc sỹ Sinh học Đại học quốc gia Thành phố Hồ Chí Minh-Trƣờng Đại học Khoa học tự nhiên [19] Nguyễn Thị Quỳnh Hoa (2011) Phân lập hợp chất phenolic từ số thực vật Việt Nam, Luận văn Thạc sỹ, Trƣờng đại học quốc gia Hà Nội [20] Nguyễn Trần Đức (2004) Phân lập nghiên cứu tạo phức Rutin với Cu(II) Fe(II), thăm dị hoạt tính kháng khuẩn chúng Luận văn Thạc sỹ Hóa học, ĐH Vinh [21] Nguyễn Quang Thiều Sử dụng Lignin, Tạp chí Cơng nghiệp Hóa chất, số 4, tr 16, 1986 [22] PGS.TS Nguyễn Thị Chính ( Hà Nội 7/2005) Báo cáo tổng kết Khoa học Kỹ thuật „„ Phát triển công nghệ sản xuất nấm dược liệu phục vụ tăng cường sức khỏe‟‟ Đề tài hợp tác nghiên cứu khoa học thuộc nghị định thư phủ Việt Nam-Hàn Quốc lĩnh vực nghiên cứu khoa học Pages: 16 - 19 [23] Phan Văn Trình Phân lập xác định cấu trúc hợp chất từ nấm Linh chi đen Việt Nam Luận văn Thạc sỹ hóa học, Vinh 2011 [24] ThS Nguyễn Minh Khang, ThS Phạm Ngọc Duệ Đề tài nước giải khát Linh chi http://www.scribd.com/doc/34823551/De-Tai-Ve-Nuoc-Giai-Khat-Linh-Chi [25] Trần Văn Mão (2004) Nuôi trồng chế biến nấm ăn nấm làm thuốc chữa bệnh Nhà xuất Nông nghiệp, Hà Nội 60 Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd 77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77t@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn C.33.44.55.54.78.65.5.43.22.2.4 22.Tai lieu Luan 66.55.77.99 van Luan an.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.22 Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an [26] ThS Trần Anh Tuấn Khoa Máy tàu biển, Trường ĐHHH Nghiên cứu quy trình thu hồi Lignin nước thải dịch đen công nghiệp sản xuất giấy Tạp chí Khoa học Cơng nghệ Hàng Hải Số 24 – 11/2010 TIẾNG ANH [27] A Serteser,1M Kargıo≈lu,1V Gök,2Y Ba≈cı,3M Musa Özcan4*and D Arslan4 Antioxidant properties of some plants growing wild in Turkey Grass Y Aceites, 60 (2), ABJL_JUNIO, 147-154,2009 [28] Atiqur Rahman1, *, M Mizanur Rahman3, 4, Md Mominul Islam Sheik3, M Mashiar Rahman3, Shabah Mohammad Shadli3 and M F Alam5 Free radical scavenging activity and phenolic content of Cassia sophera L African Journal of Biotechnology Vol (10), pp 1591-1593, 16 May, 2008 [29] CLAUDIA ANESINI, GRACIELA E FERRARO, AND ROSANA FILIP* Total Polyphenol Content and Antioxidant Capacity of Commercially Available Tea (Camellia sinensis) in Argentina J Agric Food Chem 2008, 56, 9225–9229 [30] Ellen McCrady (1991), The Nature of Lignin Volume 4, number [31] 4761 Folin-Ciocalteu’s phenol reagent Sigma-Aldrich Chemie Gmbh-Industriestrsse 25 http://www.sigmaaldrich.com/etc/medialib/docs/Sigma/Datasheet/6/47641dat.Par.0001.File.t mp/47641dat.pdf [32] Hip Seng Yim1,2*, Fook Yee Chye2, Swee Kheng Ho1 and Chun Wai Ho1 Phenolic profiles of selected edible wild mushrooms as affected by extraction solvent, time and temperature Asian Journal of Research paper Food and Agro-Industry (As J Food Ag-Ind) 2009, 2(03), 392-401 [33] ISO 14502-1: 2005 Determination of substances characteristic of green and black tea Part 1: Content of total polyphenols in tea Colorimetric method using FolinCiocalteu reagent [34] Isabel C.F.R Ferreira *, Paula Baptista, Miguel Vilas-Boas, Lillian Barros Freeradical scavenging capacity and reducing power of wild edible mushrooms from northeast Portugal: Individual cap and stipe activity Food Chemistry 100 (2007) 1511–1516 [35] J Anitha1 and Indira A Jayraaj*2.Nutritional and antioxidant evaluation of earthworm power (Eudrillus euginae) International Research Journal of Pharmacy ISSN 2230 - 61 Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd 77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77t@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn C.33.44.55.54.78.65.5.43.22.2.4 22.Tai lieu Luan 66.55.77.99 van Luan an.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.22 Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd 77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77t@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn