Nguyễn thị minh thơ đánh giá tác dụng ức chế tế bào ung thư của xạ đen (ehretia asperula zoll et mor) phối hợp với một số dược liệu khác luận văn thạc sĩ dược học

BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO BỘ Y TẾ TRƯỜNG ĐẠI HỌC DƯỢC HÀ NỘI NGUYỄN THỊ MINH THƠ ĐÁNH GIÁ TÁC DỤNG ỨC CHẾ TẾ BÀO UNG THƯ CỦA XẠ ĐEN (Ehretia Asperula Zoll et Mor) PHỐI HỢP VỚI MỘT SỐ DƯỢC LIỆU KHÁC LUẬN VĂN THẠC SĨ DƯỢC HỌC HÀ NỘI 2023 BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO BỘ Y TẾ TRƯỜNG ĐẠI HỌC DƯỢC HÀ NỘI NGUYỄN THỊ MINH THƠ ĐÁNH GIÁ TÁC DỤNG ỨC CHẾ TẾ BÀO UNG THƯ CỦA XẠ ĐEN (Ehretia Asperula Zoll et Mor) PHỐI HỢP VỚI MỘT SỐ DƯỢC LIỆU KHÁC LUẬN VĂN THẠC SĨ DƯỢC HỌC CHUYÊN NGÀNH: HÓA SINH DƯỢC MÃ SỐ: 8720208 Người hướng dẫn khoa học: TS Vũ Thị Nguyệt TS Nguyễn Xuân Bắc HÀ NỘI 2023 LỜI CẢM ƠN Với lịng kính trọng biết ơn sâu sắc, xin gửi lời cảm ơn tới TS Nguyễn Xuân Bắc, TS Vũ Thị Nguyệt giáo viên hướng dẫn trực tiếp ln hết lịng giúp đỡ, bảo thúc giục suốt thời gian thực đề tài Tôi xin chân thành cảm ơn anh chị nghiên cứu viên Viện công nghệ mơi trường, thầy giáo mơn Hóa sinh Dược – trường Đại học Dược Hà Nội nhiệt tình giúp đỡ tạo điều kiện thuận lợi để tơi hồn thành luận văn Luận văn tiến hành hỗ trợ đề tài: “Nghiên cứu tạo sản phẩm thực phẩm bảo vệ sức khỏe hỗ trợ điều trị ung thư gan ung thư vú từ cao chiết Xạ đen Hịa Bình với số dược liệu khác.”, TS Vũ Thị Nguyệt, Viện Công nghệ môi trường, Viện Hàn lâm Khoa học Công nghệ Việt Nam làm chủ nhiệm Tôi xin trân trọng cảm ơn Ban giám hiệu, phòng Sau đại học phòng ban khác trường Đại học Dược Hà Nội, đặc biệt ThS Chu Lê Mai tạo điều kiện thuận lợi để tơi hồn thành chương trình đào tạo thạc sĩ hạn Cuối cùng, xin bày tỏ yêu thương biết ơn sâu sắc tới gia đình thân u, bạn bè ln bên tôi, ủng hộ chỗ dựa tinh thần tơi gặp khó khăn học tập sống Hà Nội, ngày 03 tháng 04 năm 2023 Học viên Nguyễn Thị Minh Thơ MỤC LỤC DANH MỤC CÁC KÝ HIỆU, CHỮ VIẾT TẮT DANH MỤC CÁC HÌNH DANH MỤC CÁC BẢNG DANH MỤC CÁC KÝ HIỆU, CHỮ VIẾT TẮT DANH MỤC CÁC HÌNH DANH MỤC CÁC BẢNG ĐẶT VẤN ĐỀ Phần TỔNG QUAN 1.1 Tổng quan Xạ đen 1.1.1 Nguồn gốc đặc điểm phân loại Xạ đen 1.1.2 Đặc điểm hình thái Xạ đen 1.1.3 Đặc điểm phân bố địa lý 1.1.4 Giá trị dược học Xạ đen 1.1.5 Tình hình nghiên cứu Xạ đen 1.1.5.1 Tình hình nghiên cứu Xạ đen Việt Nam 1.1.5.2 Tình hình nghiên cứu Xạ đen giới 1.2 Tổng quan Cà gai leo, Mật nhân, Trinh nữ hồng cung Bồ cơng anh 1.2.1 Cà gai leo 1.2.2 Trinh nữ hoàng cung 11 1.2.3 Mật nhân 13 1.2.4 Bồ công anh 13 1.2.5 Lan kim tuyến 14 1.3 Các phương pháp đánh giá hoạt tính gây độc tế bào 16 1.3.1 Phương pháp MTT 16 1.3.2 Phương pháp SRB 18 1.3.3 Phương pháp ATP 18 1.3.4 Phương pháp LDH 18 1.4 Phương pháp đánh giá hoạt tính ức chế hình thành khối u chiều nuôi cấy in vitro 19 PHẦN ĐỐI TƯỢNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 20 2.1 Chuẩn bị mẫu nghiên cứu 20 2.3 Hóa chất, thiết bị 23 2.3.1 Hóa chất 23 2.3.2 Thiết bị 24 2.4 Phương pháp nghiên cứu 25 2.4.1 Phương pháp đánh giá khả gây độc tế bào 26 2.4.2 Đánh giá hoạt tính ức chế hình thành khối u chiều ni cấy in vitro (Anti-tumor promoting assay) 27 2.5 Xử lý số liệu 29 Phần KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU 30 3.1 Hoạt tính gây độc tế bào ung thư cao chiết Xạ đen 30 3.1.1 Hoạt tính gây độc tế bào ung thư cắn chiết 30 3.1.2 Hoạt tính gây độc tế bào ung thư hợp chất phân lập từ Xạ đen 32 3.2 Đánh giá hoạt tính ức chế tế bào ung thư gan ung thư vú công thức phối hợp 34 3.2.1 Đánh giá hoạt tính ức chế tế bào ung thư gan ba công thức phối hợp CT1, CT2 CT3 34 3.2.2 Đánh giá hoạt tính ức chế tế bào ung thư vú ba công thức phối hợp VT1, VT2 VT3 35 3.2.3 Đánh giá hoạt tính ức chế hình thành khối u ba chiều nuôi cấy in vitro 37 Phần 4: BÀN LUẬN 40 4.1 Về hoạt tính gây độc tế bào Xạ đen hợp chất phân lập 40 4.2 Về hoạt tính gây độc tế bào ung thư gan ung thư vú công thức phối hợp 44 4.2.1 Về hoạt tính gây độc tế bào ung thư vú công thức phối hợp 44 4.2.2 Về hoạt tính gây độc tế bào ung thư gan công thức phối hợp 46 4.2.3 Về khả ức chế hình thành khối u chiều thạch mềm in vitro 49 KẾT LUẬN 51 KIẾN NGHỊ 52 TÀI LIỆU THAM KHẢO DANH MỤC PHỤ LỤC DANH MỤC CÁC KÝ HIỆU, CHỮ VIẾT TẮT TỪ VIẾT VẮT A TIẾNG ANH TIẾNG VIỆT Acetone Phần trăm tế bào sống CS sót Công thức phối hợp đánh giá tác dụng ức CT chế tế bào ung thư gan D DMEM DMSO Dichloromethane Dulbecco’s Modified Eagle Medium Dimethyl Sulfoside Dimetyl sulfoxit Phân đoạn chiết từ Xạ EdD đen EtOAc Ethyl acetate FBS Fetal bovine serum Huyết bào thai bò Giáo sư GS H n-Hexane HeLa HeLa cervical cancer cells Hep-G2 Human hepatocellular carcinoma MCF-7 Human breast adenocarcinoma MEME Minimum n-Hexan Essential with Eagle’s salt Medium Tế bào ung thư cổ tử cung HeLa Tế bào ung thư biểu mô gan người Tế bào ung thư vú người MeOH Methanol NAA Non-Essential Amino Acids PBS Phosphate Buffered Saline PSF yếu Dung dịch đệm phosphat Penicillin-Streptomycin sulfateFungizone SRB Sulforhodamine B TCA Trichloacetic acid Acid tricloacetic Tiến sĩ TS Vero Acid amin không thiết Vero cells Tế bào biểu mô thận khỉ Công thức phối hợp đánh giá tác dụng ức VT chế tế bào ung thư vú XĐ Ehretia asperula Zoll.et Mor Xạ đen DANH MỤC CÁC HÌNH Hình 1: Cấu trúc số hợp chất Xạ đen Celastrus hindsii [14, 15] Hình 2: Cấu trúc hợp chất Emarginatine-E Xạ đen Celastrus Hindsii [23] DANH MỤC CÁC BẢNG Bảng 1: Hoạt tính sinh học cặn chiết Xạ đen vi khuẩn Gram dương Gram âm Bảng 2.1: Hóa chất nghiên cứu 26 Bảng 2.2: Dụng cụ thiết bị nghiên cứu 27 Bảng 3.1: Hoạt tính gây độc tế bào cắn chiết 30 Bảng 3.2: Giá trị ức chế 50% tế bào (IC50, μg/ml) cắn chiết Xạ đen 31 Bảng 3.3: Hoạt tính gây độc tế bào hợp chất phân lập từ Xạ đen 32 sàng lọc phát chất có hoạt tính kháng khuẩn từ dịch chiết thực vật, Tạp chí Khoa học ĐHQGHN, Khoa học tự nhiên Công nghệ, 2, tr 10-17 21 Kuo, Yao-Haur and Kuo, Li-Ming Yang J Phytochemistry (1997), "Antitumour and anti-AIDS triterpenes from Celastrus hindsii", 44(7), pp 1275-1281 22 Huang, Hui-Chi, et al (2000), "A novel agarofuran sesquiterpene, celahin D from Celastrus hindsii Benth", 48(7), pp 1079-1080 23 Đỗ Tất Lợi (2004), Những thuốc vị thuốc Việt Nam, NXB Y học, Hà Nội 24 Viện Dược liệu Cây thuốc động vật làm thuốc Việt Nam, ed 1, tập, NXB Khoa học Kỹ thuật Hà Nội, Hà Nội 25 Nguyễn Minh Khai (1994), Nghiên cứu tác dụng cà gai leo LH1 xơ gan thực nghiệm,, Đại học dược Hà Nội, Hà Nội 26 Nguyễn Thị Bích Thu (2002), Nghiên cứu cà gai leo (Solanum procumbens Lour, Solanaceae) làm thuốc chống viêm gan ức chế xơ gan, Viện dược liệu, Hà Nội 27 Trịnh Thị Xuân Hòa, Nguyễn Văn Mùi, Nguyễn Đinh Mão, (1996), "Đánh giá tác dụng điều trị thuốc HAINA bệnh nhân viêm gan B mạn hoạt động", Cơng trình nghiên cứu Y học Quân sự, 3, tr 43-48 28 Trịnh Thị Xuân Hòa cs (1998), "Một số biến đổi mô học gan marker virus viêm gan B bệnh nhân viêm gan B mạn hoạt động điều trị thuốc HAINA", Cơng trình nghiên cứu Y học Quân sự, 4, tr 84-88 29 Nguyễn Nhật Thành, Phạm Thị Ninh, Trần Thị Phương Thảo, Hoàng Minh Châu, Trần Văn Sung, (2011), Nghiên cứu thành phần hóa học Trinh hoàng cung (Crinum latifolium) trồng Đồng Nai, Việt Nam, Tạp chí Hóa Học, 49 (6A), tr 355-361 30 Nguyễn Hữu Lạc Thủy, Nguyễn Hồng Thiên Thanh, Võ Thị Bạch Huệ, (2013), Phân lập xây dựng chất chuẩn crinamidin từ TNHC (Crinum latifolium L Amaryllidaceae), Tạp chí Dược học, 441, tr 3841 31 Đỗ Huy Bích, Đặng Quang Chung, Bùi Xuân Chương, Nguyễn Thượng Dong, Đỗ Trung Đàm, Phạm Văn Hiển, Vũ Ngọc Lộ, Phạm Duy Mai, Phạm Kim Nhã, Đoàn Thị Thu Trần Đoàn, (2006), Cây thuốc động vật làm thuốc Việt Nam, Nhà xuất Khoa học Kỹ thuật, Hà Nội 32 Võ Văn Chi (2004), Từ điển thực vật thông dụng, 1, NXB Khoa học Kỹ thuật Hà Nội, Hà Nội 33 Trần Bạch Dương, Phan Minh Giang, Phan Tống Sơn, (2003), Nghiên cứu alcaloid náng rộng (Crinum latifolium) Việt Nam, HNHH lần IV, tr 124-129 34 Ghosal, Shibnath, et al (1988), "Mast cell stabilizing effect of glucan A and phosphatidyllycorine isolated from Crinum latifolium", J Phytotherapy Research, 2(2), pp 76-79 35 Chu Quốc Trường, Phạm Thắng, Nguyễn Thị Tuyết Lan, (2008), Nghiên cứu lâm sàng: Đánh giá hiệu viên nén TADIMAX bệnh nhân phì đại lành tính tuyến tiền liệt, Tạp chí Nghiên cứu Y dược học cổ truyền Việt nam, tr 1-4 36 Nguyễn Thị Ngọc Trâm (2009), Nghiên cứu khả kích thích hệ miễn dịch chống ung thư alkaloid flavonoid chiết xuất từ Trinh nữ hoàng cung (Crium latifolium L.) để sử dụng làm nguyên liệu sản xuất thuốc bổ trợ điều trị ung thư., Bungari, Báo cáo tổng hợp kết khoa học công nghệ nhiệm vụ hợp tác quốc tế khoa học công nghệ theo nghị định thư, Hà Nội 37 Ghosal Sh., S.K.S.a.F.A.W (1983), "Alkaloids of Crium latifolium ", Phytochemistry, 22, pp 2305-2309 38 Vũ Kiên, Lê Văn Thảo, Nguyễn Phương Dung, (2004), Nghiên cứu Panacrin điều trị hỗ trợ bệnh nhân ung thư dày, Tạp chí Y học TpHCM, tr 184-190 39 Nguyễn Thị Tuyết Lan, Chu Quốc Trường, Lê Anh Thư, (2005), Nghiên cứu tác dụng lâm sàng viên nang Trinh nữ hoàng cung điều trị phì đại lành tính tuyến tiền liệt, Tạp chí nghiên cứu Y dược học cổ truyền Việt nam, tr 12-17 40 Al-Faqeh, Hamoud Hussein, et al (2010), "The effect of Eurycoma longifolia Jack (Tongkat Ali) on carbon tetrachloride-induced liver damage in rats", J Malay J Pharm Sci, 8(2), pp 71-84 41 Kim, K H., et al (2008), "Terpene and phenolic constituents of Lactuca indica L", Arch Pharm Res, 31(8), pp 983-988 42 Lüthje, P., Dzung, D N., and Brauner, A (2011), "Lactuca indica extract interferes with uroepithelial infection by Escherichia coli", J Ethnopharmacol, 135(3), pp 672-677 43 Wang, S Y., et al (2003), "Antioxidant properties and phytochemical characteristics of extracts from Lactuca indica", J Agric Food Chem, 51(5), pp 1506-1512 44 Martin, K P., et al (2005), "In vitro propagation of Dendrobium hybrids using flower stalk node explants", Indian J Exp Biol, 43(3), pp 280-285 45 Lin, C C., Huang, P C., and Lin, J M (2000), "Antioxidant and hepatoprotective effects of Anoectochilus formosanus and Gynostemma pentaphyllum", Am J Chin Med, 28(1), pp 87-96 46 Budluang, P., et al (2017), "Anti-inflammatory and anti-insulin resistance activities of aqueous extract from Anoectochilus burmannicus", Food Sci Nutr, 5(3), pp 486-496 47 Zhang, F S., et al (2013), "Promoting role of an endophyte on the growth and contents of kinsenosides and flavonoids of Anoectochilus formosanus Hayata, a rare and threatened medicinal Orchidaceae plant", J Zhejiang Univ Sci B, 14(9), pp 785-792 48 Shyur, L F., et al (2004), "Induction of apoptosis in MCF-7 human breast cancer cells by phytochemicals from Anoectochilus formosanus", J Biomed Sci, 11(6), pp 928-939 49 Riss, TL, et al (2004), "Cell viability assays 2013 GS Sittampalam, NP Coussens, K" 50 Smith, C A., Farrah, T., and Goodwin, R G (1994), "The TNF receptor superfamily of cellular and viral proteins: activation, costimulation, and death", Cell, 76(6), pp 959-962 51 Berridge, Michael V, Tan, An S J Archives of biochemistry, and biophysics (1993), "Characterization of the cellular reduction of 3-(4, 5dimethylthiazol-2-yl)-2, 5-diphenyltetrazolium bromide (MTT): subcellular localization, substrate dependence, and involvement of mitochondrial electron transport in MTT reduction", 303(2), pp 474482 52 Hansen, Morten Bagge, Nielsen, Svend Erik, and Berg, Kurt J Journal of immunological methods (1989), "Re-examination and further development of a precise and rapid dye method for measuring cell growth/cell kill", 119(2), pp 203-210 53 Stoddart, Martin J Mammalian cell viability (2011), "Cell viability assays: introduction", pp 1-6 54 Ediriweera, Meran Keshawa, Tennekoon, Kamani Hemamala, and Samarakoon, Sameera Ranganath J Journal of Applied Toxicology (2019), "In vitro assays and techniques utilized in anticancer drug discovery", 39(1) 55 Skehan, P, et al (1991), "New colorimetric cytotoxicity assay for anticancer agents", J Eur J Cancer, 27, pp 1162-1168 56 Voigt, Wieland (2005), "Sulforhodamine B assay and chemosensitivity", Chemosensitivity, Springer, pp 39-48 57 Hannah, Rita, et al (2001), "CellTiter-Glo™ Luminescent cell viability assay: a sensitive and rapid method for determining cell viability", 2, pp 11-13 58 Fotakis, George and Timbrell, John A J Toxicology letters (2006), "In vitro cytotoxicity assays: comparison of LDH, neutral red, MTT and protein assay in hepatoma cell lines following exposure to cadmium chloride", 160(2), pp 171-177 59 Niles, Andrew L, Moravec, Richard A, and Riss, Terry L J Expert opinion on drug discovery (2008), "Update on in vitro cytotoxicity assays for drug development", 3(6), pp 655-669 60 Gao, Huiyuan, et al (2007), "Constituents from anti-tumor-promoting active part of Dioscorea bulbifera L in JB6 mouse epidermal cells", 2(3), pp 104-109 61 Sutherland, R M (1988), "Cell and environment interactions in tumor microregions: the multicell spheroid model", Science, 240(4849), pp 177-184 62 Traganos, F., et al (1980), "Effects of ellipticine on cell survival and cell cycle progression in cultured mammalian cells", Cancer Res, 40(7), pp 2390-2399 63 Muller, A G., et al (2019), "Delivery of natural phenolic compounds for the potential treatment of lung cancer", Daru, 27(1), pp 433-449 64 Niedzwiecki, A., et al (2016), "Anticancer Efficacy of Polyphenols and Their Combinations", Nutrients, 8(9) 65 Duyen, Bui & Hung, Vu & Bui Thanh, Tung, (2020), "Cytotoxicity and Antioxidant Effects of Celastrus hindsii Benth Leaf Extract", VNU Journal of Science 66 Trần Thị Hải Yến (2022), Nghiên cứu phân lập thử hoạt tính gây độc tế bào ung thư in vitro số thành phần hóa học từ Đinh lăng (Polyscias serrata Balf.), Đại học Dược Hà Nội, Hà Nội 67 Balachandran, C., et al (2015), "In vitro anticancer activity of methyl caffeate isolated from Solanum torvum Swartz fruit", Chem Biol Interact, 242, pp 81-90 68 Fiuza, S M., et al (2004), "Phenolic acid derivatives with potential anticancer properties a structure-activity relationship study Part 1: methyl, propyl and octyl esters of caffeic and gallic acids", Bioorg Med Chem, 12(13), pp 3581-3589 69 Lin, L., et al (2011), "Comparative evaluation of rosmarinic acid, methyl rosmarinate and pedalitin isolated from Rabdosia serra (MAXIM.) HARA as inhibitors of tyrosinase and α-glucosidase", Food Chem, 129(3), pp 884-889 70 Jenny, M., et al (2011), "Crinum latifolium leave extracts suppress immune activation cascades in peripheral blood mononuclear cells and proliferation of prostate tumor cells", Sci Pharm, 79(2), pp 323-335 71 Vũ Văn Điền, Hoàng Kim Huyền, Nguyễn Thị Hải Yến, ( 2000), "Góp phần nghiên cứu thành phần hóa học, thăm dị số tác dụng dược lý bồ cơng anh Việt Nam", Tạp chí dược liệu, p 72 Fennell, C W and van Staden, J (2001), "Crinum species in traditional and modern medicine", J Ethnopharmacol, 78(1), pp 15-26 73 Nguyễn Thị Ngọc Trâm, Phan Thị Phi Phi, Phan Thị Thu Anh, Nguyễn Văn Đô, (2013), "Tác dụng tăng cường chức miễn dịch chuyên nhiệm chống ung thư Crilin T", Tạp chí Dược học, pp 22-26 74 Diplock, A T., et al (1998), "Functional food science and defence against reactive oxidative species", Br J Nutr, pp S77-112 75 Valko, M., et al (2007), "Free radicals and antioxidants in normal physiological functions and human disease", Int J Biochem Cell Biol, 39(1), pp 44-84 76 Ziaullah, et al (2013), "Biocatalytic synthesis, structural elucidation, antioxidant capacity and tyrosinase inhibition activity of long chain fatty acid acylated derivatives of phloridzin and isoquercitrin", Bioorg Med Chem, 21(3), pp 684-692 77 Xu, T., et al (2015), "Ferulic acid suppresses activation of hepatic stellate cells through ERK1/2 and Smad signaling pathways in vitro", Biochem Pharmacol, 93(1), pp 49-58 78 Ang, H H and Cheang, H S (1999), "Studies on the anxiolytic activity of Eurycoma longifolia Jack roots in mice", Jpn J Pharmacol, 79(4), pp 497-500 79 Wu, KB (2007), "The use and potential for Anoectochilus formosanus Hayata", Agriculture World, 288, pp 14-19 80 Teh, Chin-Hoe, et al (2010), "2, 3-Dehydro-4α-hydroxylongilactone, a novel quassinoid and two known phenyl propanoids from Eurycoma longifolia Jack", 120(3), pp 794-798 81 Al-Mahrezi, Jamila A, et al (2011), "Essential oil composition and antimicrobial screening of Launaea nudicaulis grown in Oman", 2(12), pp 3166 82 Bataller, R and Brenner, D A (2005), "Liver fibrosis", J Clin Invest, 115(2), pp 209-218 83 Miyake, K., et al (2010), "Canthin-6-one alkaloids and a tirucallanoid from Eurycoma longifolia and their cytotoxic activity against a human HT-1080 fibrosarcoma cell line", Nat Prod Commun, 5(1), pp 17-22 84 Plati, J., Bucur, O., and Khosravi-Far, R (2011), "Apoptotic cell signaling in cancer progression and therapy", Integr Biol (Camb), 3(4), pp 279-296 85 Hatami, T., et al (2014), "Total Phenolic Contents and Antioxidant Activities of Different Extracts and Fractions from the Aerial Parts of Artemisia biennis Willd", Iran J Pharm Res, 13(2), pp 551-559 86 Tran, T V., et al (2014), "NF-κB inhibitors from Eurycoma longifolia", J Nat Prod, 77(3), pp 483-488 87 Trần Thị Hồng Hà, Trần Thị Như Hằng, Lưu Văn Chính (2012), "Phân lập polisaccarit từ Nấm Hầu thủ lên dịch thể đánh giá hoạt tính kháng u chúng", J Vietnam Journal of Science Technology 50(3), tr 327-327 DANH MỤC PHỤ LỤC PHỤ LỤC 1: CÁC CHẤT MỚI ĐƯỢC PHÂN LẬP TỪ CÂY XẠ ĐEN (Ehretia asperula Zoll & Mor) PHỤ LỤC 2: ĐÁNH GIÁ HÀM LƯỢNG PHENOL TỒN PHẦN TRONG CÁC CƠNG THỨC PHỐI HỢP PHỤ LỤC CÁC HỢP CHẤT ĐƯỢC PHÂN LẬP TỪ CÂY XẠ ĐEN (Ehretia asperula Zoll & Mor) Các hợp chất phân lập từ đề tài: Nghiên cứu thành phần hóa học, đánh giá hoạt tính sinh học số chất phân lập từ xạ đen tỉnh Hịa Bình Bảng PL1.1 Các hợp chất phân lập từ Xạ đen (Ehretia asperula Zoll & Mor) Tách từ TT Ký hiệu Tên chất Cấu trúc hoá học phận EdD3.2 Caffeic acid EdD5.5 Lá Lá Methyl caffeate ET3 Thân 4-hydroxy-3-[4- EdD6.1 (2-hydroxyethyl)phenoxy]- Lá benzaldehyde EdD10.5 ET5 Lá Oresbiusin B ER1 EdD11.4 Thân Rễ Methyl rosmarinate Lá EdD17.3 ER2 Lá Rosmarinic acid Rễ Dimethyl EdD14.1 EdD27.1 Astragalin Lá EdD24.1 β-sitosterol Lá 10 ET1 Daucosterol Thân Coniferaldehyde Thân 11 ET2 (Ed 31.1) lithospermate Lá 9′12 ET4 Methoxydehydro (Ed 33.1) diconiferyl Thân alcohol 13 ET6 (Ed 33.4) Acid vanillic Thân 14 ER3 Benzyl (Ed 36.2) glucopyranoside Rễ OH OH 15 ER4 (Ed 37.3) 3' 4' 2' Epigallocatechin HO 1' O 10 OH 5' 6' OH OH Rễ PHỤ LỤC ĐÁNH GIÁ HÀM LƯỢNG PHENOL TOÀN PHẦN TRONG CÁC CÔNG THỨC PHỐI HỢP Bảng PL2.1: Độ ổn định hàm lượng phenol toàn phần Tên mẫu STT Hàm lượng phenol toàn phần (mg/g) Lần Lần Lần Trung bình CT1 13,12 13,42 13,26 13,27 CT2 14,97 14,85 14,59 14,8 CT3 15,74 16,24 16,68 16,22 Kết cho thấy giá trị hàm lượng phenol tồn phần trung bình đạt, giữ mẻ chiết khác hàm lượng phenol biến đổi chứng tỏ độ tập trung giá trị thu được, quy trình xây dựng đảm bảo tính ổn định Bảng PL2.2: Độ ổn định hàm lượng phenol toàn phần STT Tên mẫu Hàm lượng phenol toàn phần (mg/g) Lần Lần Lần Trung bình VT1 11,09 11,3 10,94 11,11 VT2 12,94 12,73 12,27 12,65 VT3 13,71 14,12 14,36 14,06 Kết bảng cho thấy giá trị hàm lượng phenol tồn phần trung bình đạt, giữ mẻ chiết khác hàm lượng phenol biến đổi chứng tỏ độ tập trung giá trị thu được, quy trình xây dựng đảm bảo tính ổn định