TRƯỜNG ĐẠI HỌC Y HÀ NỘI NGUYỄN THỊ MỸ THÀNH NGHIÊN CỨU TÁC DỤNG KHÁNG UNG THƯ PHỔI NGƯỜI CỦA VIRUS VACCINE SỞI TRÊN THỰC NGHIỆM Chuyên ngành Dị ứng và Miễn dịch Mã số 62720109 (Khoa học Y sinh Mã số 9[.]
TRƯỜNG ĐẠI HỌC Y HÀ NỘI NGUYỄN THỊ MỸ THÀNH NGHIÊN CỨU TÁC DỤNG KHÁNG UNG THƯ PHỔI NGƯỜI CỦA VIRUS VACCINE SỞI TRÊN THỰC NGHIỆM Chuyên ngành: Dị ứng Miễn dịch Mã số: 62720109 (Khoa học Y sinh Mã số: 9720101) TÓM TẮT LUẬN ÁN TIẾN SĨ Y HỌC HÀ NỘI, NĂM 2023 CƠNG TRÌNH ĐƯỢC HỒN THÀNH TẠI TRƯỜNG ĐẠI HỌC Y HÀ NỘI Người hướng dẫn khoa học: GS.TS Nguyễn Lĩnh Toàn TS Nguyễn Văn Đô Phản biện 1: PGS.TS Nguyễn Thị Xuân Phản biện 2: PGS.TS Vũ Xuân Nghĩa Phản biện 3: PGS.TS Lương Thị Lan Anh Luận án bảo vệ trước Hội đồng đánh giá luận án cấp trường họp Trường Đại học Y Hà Nội Vào hồi: ngày tháng Có thể tìm hiểu luận án tại: Thư viện Quốc Gia Thư viện Trường Đại học Y Hà Nội năm 2023 DANH MỤC CÁC CƠNG TRÌNH CÔNG BỐ KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU CỦA ĐỀ TÀI, LUẬN ÁN Tạo khối ung thư phổi không tế bào nhỏ người thực nghiệm Tạp chí nghiên cứu Y học Số 2022 Trang (182188) https://doi.org/10.52852/tcncyh.v150i2.737 Hiệu kháng ung thư virus sởi mơ hình chuột thiếu hụt miễn dịch mang khối ung thư phổi người Tạp chí nghiên cứu Y học Số tháng năm 2022 Trang (317 -323) (https://doi.org/10.52852/tcncyh.v156i8.1083 ĐẶT VẤN ĐỀ Ung thư phổi loại ung thư phổ biến thứ toàn giới, sau ung thư vú Theo thống kê Tổ chức Y tế Thế giới (WHO), năm 2020 có khoảng 2,21 triệu ca ung thư phổi 1,8 triệu ca tử vong ung thư phổi giới Ung thư phổi thách thức nhà lâm sàng Bệnh thường phát giai đoạn muộn, khối u lớn di căn, tỷ lệ sống năm ước tính 18% cho tất giai đoạn bệnh Hơn 50% trường hợp tử vong năm bệnh ung thư phổi 14,8% 1.1.3 Nguyên nhân yếu tố nguy ung thư phổi - Tiền sử gia đình gen biến thể - Đa hình gen - Hút thuốc - Chế độ ăn uống rượu - Nhiễm trùng mạn tính bệnh lý khác - Bức xạ ion hóa - Phơi nhiễm nghề nghiệp - Ơ nhiễm khơng khí 1.1.4 Phân loại ung thư phổi - Ung thư phổi tế bào nhỏ: Thường liên quan hút thuốc, ác tính - Ung thư phổi khơng tế bào nhỏ: chia thành loại + Ung thư biểu mô tuyến + Ung thư biểu mô tế bào vảy + Ung thư biểu mô phổi tế bào lớn - Một số loại ung thư phổi khác + Carcinoid phế quản + Ung thư mô hỗ trợ phổi 1.1.5 Cơ chế bệnh sinh ung thư phổi 1.1.5.1 Cơ chế bệnh sinh ung thư biểu mô tuyến phổi Rất nhiều chứng cho thấy có hai đường phân tử KRAS EGFR gây unng thư phổi Các đột biến gen EGFR, đặc biệt đột biến đoạn ngắn exon 19, L858R L861Q exon 21 Các đột biến điểm khác thường xảy thay đổi số lượng (Copy-number alterations - CNA) mô tả LUAD xem xét vùng khác gen Rất nhiều chứng cho thấy rõ ràng protein C có hoạt tính bề mặt biểu tế bào tế bào phế nang loại II liên quan đến LUAD Nghiên cứu gần cho thấy AAH có liên quan đến tiến triển tuyến tính tế bào phế nang (thành phần hô hấp tận cùng) thành ung thư biểu mô tuyến chỗ sau LUAD xâm lấn, biểu gen chung tế bào phế nang AAH Mất dị hợp tử (LOH) nhiễm sắc thể 3p (chiếm 18%), 9p (CDKN2A), 9q ( phức hợp xơ cứng củ 1/TSC1), 17q 17p (TP53) giảm biểu chất ức chế khối u, serine threonine kinase 11 (STK11 gọi LKB1) Các thay đổi ngoại gen bao gồm methyl hóa DNA gen CDKN2A PTPRN2 thấy AAH Trong bệnh LUAD, gen NKX2-1 thường bị tăng biểu khuếch đại (vị trí 14q13.3), có vai trị gây ung thư đặc hiệu dòng tế bào phế nang loại II yếu tố phiên mã NKX2-1 LUAD 1.1.3.2 Cơ chế bệnh sinh ung thư biểu mô tế bào vảy phổi (LUSC) Các tế bào tế bào biểu mơ alen nhiều vị trí nhiễm sắc thể 3p (3p21, 3p14, 3p22–24 3p12) 9p21 (CDKN2A) biểu mô phế quản thay đổi phát sớm trình bệnh sinh LUSC Sự cân alen 8p21–23, 13q14 (RB1) 17p13 (TP53) phát tổn thương tế bào vảy tiền xâm lấn CDKN2A bị methyl hóa DNA tổn thương vảy tiền ung thư Các yếu tố tăng trưởng nội mô mạch máu (Vascular endothelial growth factor-VEGF) thụ thể VEGF tăng cường biểu tổn thương loạn sản vảy phế quản Axit béo axit retinoic, liên quan tổn thương vảy tiền xâm lấn LUSC Gen gây ung thư SOX2 bị tăng cường khuếch đại vị trí 3q26.3 1.1.3.3 Cơ chế bệnh sinh ung thư biểu mô phổi tế bào nhỏ LOH số vị trí nhiễm sắc thể, khơng ổn định vi mô tế bào SCLC cao đáng kể so với biểu mô lân cận SCLC khởi động bất hoạt gen TP53 RB1, kích hoạt đường tín hiệu hedgehog SCLC thay đổi cụ thể TP53 RB1, đột biến lặp điều chỉnh histone CREBBP, EP300 MLL khuếch đại gen ung thư FGFR1 1.1.6 Các phương pháp điều trị ung thư phổi Việt Nam 1.1.6.1 Phẫu thuật Trong năm gần đây, có phẫu thuật đại, bao gồm phẫu thuật nội soi lồng ngực cắt phổi có hỗ trợ video xâm lấn (Video assisted thoracic surgery- VATS) 1.1.6.2 Chiếu xạ Phương pháp xạ trị định vị lập thể: Xạ trị tiếp tục phát triển có nhiều kỹ thuật đại sử dụng để điều trị ung thư phổi Sóng cao tần/vi sóng: Sử dụng cho khối u phổi ngoại vi giai đoạn đầu di bệnh nhân không định phẫu thuật 1.1.6.3 Liệu pháp điều trị đích ức chế điểm kiểm sốt miễn dịch Erlotinib ức chế EGFR, gefitinib ức chế PI3K/AKT/mTOR, everolimus entrectinib chất ức chế NTRK/ROS1 Chất ức chế điểm kiểm soát miễn dịch (nivolumab pembrolizumab) 1.2 Liệu pháp virus vaccine sởi điều trị ung thư phổi người 1.2.1 Sinh học virus sởi Virus sởi virus RNA sợi đơn, âm, có vỏ bọc thuộc lồi Morbillivirus họ Paramyxovirus (Hình 1) Hình 1.1 Sơ đồ cấu trúc virus sởi Nguồn: Engeland C.E cộng (2021) (a) Virus sởi; (b) gen virus sởi nucleoprotein (N), Protein lớn (L), Phosphoprotein (P), Matrix (M), protein Haemagglutinin (H), protein Fusion (F), protein phi cấu trúc V C 1.2.2 Virus vaccine sởi lây nhiễm đặc hiệu tế bào ung thư phổi 1.2.2.1 Tế bào ung thư phổi có thụ thể đặc hiệu với virus sởi Do dòng tế bào NSCLC biểu mạnh mẽ thụ thể đặc hiệu CD46 Nectin-4 MeV, có nhiều chứng hóa mơ miễn dịch cho thấy có tới 40% mẫu tế bào NSCLC người biểu mạnh mẽ thụ thể CD46 Nectin-4 1.2.2.2 Cơ chế lây nhiễm đặc hiệu tế bào ung thư Các nghiên cứu gần chứng minh chủng MV‐Edm có hiệu kháng tế bào ung thư phổi tương quan với mức độ biểu thụ thể đặc hiệu (CD46 Nectin-4) * Tế bào ung thư khiếm khuyết đáp ứng với interferon Tế bào khối u phổi có khiếm khuyết đường đáp ứng interferon (IFN) kháng virus, khiến tế bào ung thư dễ lây nhiễm virus so với tế bào bình thường 1.2.3 Các chế virus vaccine sởi ly giải tế bào ung thư phổi 1.2.3.1 Hình thành hợp bào (tế bào khổng lồ nhiều nhân) MeV có protein F protein H gắn vào thụ thể tham gia trình hợp màng, hợp tế bào nhiễm virus tế bào bình thường lân cận tạo thành hợp bào (một khối tế bào khổng lồ có nhiều nhân) Một tế bào bị nhiễm virus hợp 50-100 tế bào lân cận với tạo thành hợp bào 1.2.3.2 Tạo miễn dịch đặc hiệu kháng tế bào u * Tế bào khối u chết nguyên nhân miễn dịch Nhiễm MeV kích hoạt hệ miễn dịch bẩm sinh ly giải tế bào ung thư qua trung gian MeV xác nhận nhiều nghiên cứu Ngày có nhiều chứng cho thấy nhiễm MeVsẽ kích hoạt hệ miễn dịch gây ly giải tế bào ung thư qua trung gian MeV Các mơ hình phân tử nguy hiểm có nguồn gốc từ tác nhân gây bệnh (Pathogen- associated molecular pattern-PAMP) mơ hình phân tử nguy hiểm có nguồn gốc từ tổ chức bị tổn thương (Danger-associated molecular pattern-DAMP), chúng kích hoạt phản ứng miễn dịch - Nhiễm MeV thúc đẩy chức tế bào trình diện kháng nguyên khởi động, hoạt hóa Đáp ứng tế bào T kháng khối u hiệu - MeV kích hoạt thành phần khác hệ miễn dịch kháng tế bào ung thư (Hình 1.2) Hình 1.2 MeV kích hoạt hệ miễn dịch kháng tế bào u * Nguồn: G PidelaserraMartí and C.E Engeland (2020) 1.2.3.3 Biến đổi MeV tăng cường miễn dịch kháng tế bào ung thư MeV biến đổi gen mã hóa GM-CSF, FmIL-12, FmIL-15 (BiTEs … cho thấy hiệu kháng khối u đáng kể 1.2.4 Đáp ứng miễn dịch vật chủ kháng MeV Các kháng thể kháng MeV chứng minh ngăn cản trình ly giải tế bào u qua trung gian MeV, kể tiêm MeV chỗ Tuy nhiên, cần có nhiều thử nghiệm sâu rộng đánh giá thêm 1.2.5 Các thử nghiệm lâm sàng sử dụng MeV điều trị ung thư 10 2.2.3 Đánh giá MeV gây độc tế bào thử nghiệm MTT - Nhiễm MeV vào tế bào A549 H460 đĩa 96 giếng với độ hịa lỗng 1MOI, 0,1 MOI Ở ngày nhiễm thứ 3, 4, cho dung dịch MTT vào giếng, đo độ hấp thụ quang (OD, 570nm) tính kết 2.2.4 Chuẩn bị mẫu tế bào A549 H460 nhiễm MeV đánh giá tỉ lệ tế bào chết theo chương trình phương pháp dòng chảy Tăng sinh tế bào A549 H460 gieo vào đĩa giếng Nhiễm MeV vào tế bào đĩa giếng Thu tế bào thời điểm ngày thứ 3, 4, để đánh giá tỉ lệ tế bào chết apoptosis 2.2.5 Đánh giá tỉ lệ tế bào ung thư phổi A549 H460 chết theo chương trình phương pháp phân tích tế bào dòng chảy Tế bào xử lý nhuộm theo hướng dẫn kèm theo kit Fluorescein isothiocyanate, Annexin V Apoptosis Detection kit (BD) Đánh giá tỉ lệ tế bào chết apoptosis hoại tử hệ thống FACS CANTO II (BD) 2.2.6 Phương pháp nuôi chuột chuột nude Chuột nude chủng BALB/c, ni phịng 2.2.7 Phương pháp tạo khối u dòng tế bào ung thư phổi người H460 dùi chuột nude tính kích thước khối u Tạo khối u đùi chuột nude: Tăng sinh tế bào H460 Tiêm tế bào H460, nồng độ 106 tế bào/chuột vào da đùi Đo kích thước khối u: Đo thước kép chuẩn, đo chiều Cơng thức tính kích thước khối u: V=D x R2 x 0,5 (mm3) V: thể tích khối u D: chiều dài khối u R: chiều rộng khối u 2.2.8 Phương pháp điều trị chuột nude MeV Có nhóm (10 con/nhóm): nhóm điều trị MeV; nhóm chứng tiêm dung dịch PBS Tiêm MeV nội u, liều 107 PFU/lần/con, lần/tuần, tuần điều trị 2.2.9 Phương pháp đánh giá đáp ứng điều trị Theo dõi tình trạng sức khỏe chuột: cân nặng, vận động, đáp ứng kích thích, màu sắc da chuột, phân chuột So sánh kích thước u theo thời gian điều trị Thời gian sống trung bình, tỉ lệ sống, chết nhóm nghiên cứu 11 2.2.10 Phương pháp phẫu tích lấy mơ u nhóm nghiên cứu sau điều trị MeV Phẫu tích mơ u phía ngồi lấy mẫu (2-3 mm) chuột sau điều trị MeV, rửa sạch, cho vào dung dịch cố định tế bào (glutaraldehyte 2% đệm cacodylate có pH=7,3) làm siêu cấu trúc chạy flowcytometry 2.2.11 Xử lý mô u tế bào H460 thành mẫu tế bào để đánh giá tỉ lệ tế bào miễn dịch tế bào chết theo chương trình phương pháp tế bào dịng chảy 2.2.11.1 Xử lý mô u tế bào H460 thành mẫu tế bào - Nghiền nát miếng mô u, thêm dung dịch PBS 1X Ủ dịch với dung dịch Trypsin-EDTA 1X nhiệt độ phòng 20-30 phút, ly tâm tốc độ 5000 vòng, phút - Cho dung dịch PBS 1X vào khối tế bào, trộn lọc qua màng lọc kích thước 70µm, ta thu dịch tế bào H460 mô u - Dùng kháng thể đặc hiệu đánh giá tỉ lệ tế bào miễn dịch ở mô u 2.2.12 Đánh giá siêu cấu trúc mô u tế bào H460 chuột nude sau điều trị MeV Soi, đọc kết kính hiển vi điện tử truyền qua JEM 1400, JEOL, Nhật Bản (Khoa Hình thái - Viện 69, Bộ tư lệnh Lăng Chủ tịch Hồ Chí Minh) 2.2.13 Phân tích giải phẫu bệnh mô u tế bào H460 cấy ghép chuột nude Phẫu tích mẫu u dịng tế bào H460 ghép chuột nude nhóm điều trị MeV nhóm chứng Gửi bệnh phẩm tới Khoa giải phẫu bệnh, Bệnh viện Quân y 103 để phân tích theo bước sau: - Đưa bệnh phẩm qua hóa chất khác nhau: - Đúc bệnh phẩm faraffin: - Cắt nhuộm Hematoxylin – Eosin: 2.13 Phương pháp phân tích kết Sử dụng phần mềm SPSS.20, GraphPad Prism, ý nghĩa thống kê với p 0,05 96,93 ± 29,53 Biểu đồ 3.4 So sánh tỷ lệ tế bào A549 sống theo thời điểm nhiễm MeV 3.3.3 Đánh giá tỉ lệ tế bào H460 A549 chết theo chương trình sau nhiễm MeV in vitro phương pháp phân tích tế bào dịng chảy Hình 3.5 Kết flow cytometry tế bào H460 nhiễm MeV ngày thứ (Q4) vùng apoptosis sớm; (Q2) vùng apoptosis muộn; (Q1) vùng tế bào hoại tử Biểu đồ 3.5 Tỉ lệ tế bào H460 nhiễm MeV ngày thứ chết theo chương trình 15 23,8% 15,7% 5,8% 7,5% 4,9% 1,0% 2,5% 18,1% 2,3% 13,5% 2,4% 2,5% 7,0% 7,7% 12,3% 4,5% 1,2% 2,5% Hình 3.8 Kết flow cytometry tế bào H460 nhiễm MeV ngày thứ (Q4) vùng apoptosis sớm; (Q2) vùng apoptosis muộn; (Q1) vùng tế bào hoại tử Hình 3.9 Kết flow cytometry tế bào H460 nhiễm MeV ngày thứ (Q4) vùng apoptosis sớm; (Q2) vùng apoptosis muộn; (Q1) vùng tế bào hoại tử 10 Biểu đồ 3.8 Tỉ lệ tế bào H460 nhiễm MeV ngày thứ chết theo chương trình Biểu đồ 3.9 Tỉ lệ tế bào H460 nhiễm MeV ngày thứ chết theo chương trình Biểu đồ 3.6 So sánh tế bào H460 chết theo chương trình theo ngày nhiễm MeV 16 Hình 3.10 Kết flow cytometry tế bào A549 nhiễm MeV ngày thứ (Q4) vùng apoptosis sớm; (Q2) vùng apoptosis muộn; (Q1) vùng tế bào hoại tử Biểu đồ 3.11 Tỉ lệ tế bào A549 nhiễm MeV ngày thứ chết theo chương trình Hình 3.11 Kết flow cytometry tế bào A549 nhiễm MeV ngày thứ (Q4) vùng apoptosis sớm; (Q2) vùng apoptosis muộn; (Q1) vùng tế bào hoại tử Biểu đồ 3.12 Tỉ lệ tế bào A549 nhiễm MeV ngày thứ chết theo chương trình Hình 3.12 Kết flow cytometry tế bào A549 nhiễm MeV ngày thứ (Q4) vùng apoptosis sớm; (Q2) vùng apoptosis muộn; (Q1) vùng tế bào hoại tử Biểu đồ 3.13 Tỉ lệ tế bào A549 nhiễm MeV ngày thứ chết theo chương trình 17 Biểu đồ 3.7 So sánh tế bào A549 chết theo chương trình theo ngày nhiễm MeV 3.4 Virus vaccine sởi kháng u tế bào ung thư phổi H460 cấy ghép chuột thiếu hụt miễn dịch Bảng 3.4 Kết tạo khối u tế bào H460 đùi chuột nude Số ngày tiêm tế bào H460 Ngày Ngày thứ thứ (n = 20) (n=20) 12 60 Các số theo dõi Số chuột có u (con) Tỷ lệ có u (%) Ngày thứ (n=20) 20 100 Ngày thứ 10 (n=20) 20 100 Ngày thứ 12 (n=20) 20 100 Hình 3.6 Kết ghép u tế bào H460 da đùi chuột nude Bảng 3.5 Kết theo dõi sức khỏe chuột điều trị MeV Số TT Tiêu chí theo dõi Vận động Đáp ứng với kích thích Phân chuột Da chuột Trước điều trị Mức độ đánh giá Bình thường Kém 20 Con 20 Con 20 Con 20 Con Sau điều trị (ngày 27th) Mức độ đánh giá Bình thường Kém 20 Con 20 Con 20 Con 20 Con Trọng lượng (gam) 100 Nhóm tiêm MeV p>0,05 Control 80 60 40 20 h h N gà y 28 t 25 t h N gà y 22 t h N gà y 18 t h N gà y 15 t h N gà y 11 t th gà y N th gà y N gà y N N gà y th Biểu đồ 3.14 Thay đổi trọng lượng chuột sau điều trị MeV 18 B A Kích thước u sau tiêm MeV Kích thước u trước tiêm MeV 52,88±6,24 264,58±77,27 57,6±5,81 Biểu đồ 3.8 Kết kích thước khối u sau điều trị MeV (A) So sánh ngày điều trị thứ 1; (B) So sánh ngày điều trị thứ 28 Biểu đồ 3.9 So sánh thời gian sống tỉ lệ sống-chết chuột sau điều trị MeV p=0,0001 2= 19,62 Hình 3.7 Kết flow cytometry tế bào u H460 chết theo chương trình A B Biểu đồ 3.10 Tỉ lệ tế bào u H460 chết theo chương trình sau điều trị MeV C D Biểu đồ 3.11 Kết tỉ lệ tế bào miễn dịch mô u tế bào H460 chuột nude sau điều trị MeV 19 3.4.4 Hình ảnh siêu cấu trúc tế bào u phổi H460 A549 sau điều trị virus vaccine sởi n hn n n n hn hn hn n n n bt bt bt bt n bt bt hn n hn bt Hình 3.9 Hình ảnh siêu cấu trúc tế bào u H460 không nhiễm virus n n n Hình 3.8 Hình ảnh siêu cấu trúc tế bào H460 hoại tử sau tiêm MeV bq n bq n bq hb n n n n n Hình 3.11 Siêu cấu trúc MeV xâm nhập vào tế bào u phổi H460 hb n bq kb n n Hình 3.10 Hình ảnh siêu cấu trúc tế bào u H460 chết theo chương trình sau tiêm MeV 11 3.4.5 Kết giải phẫu bệnh u tế bào H460 cấy ghép chuột nude sau điều trị MeV 12 13 14 Hình 3.12 Hình ảnh giải phẫu bệnh tế bào u phổi bình thường Hình 3.13 Hình ảnh giải phẫu bệnh tế bào u phổi hoại tử sau tiêm MeV 15 CHƯƠNG 4: BÀN LUẬN 4.1 Tăng sinh dòng tế bào Vero, H460 A549 in vitro 4.1.1 Tăng sinh dịng tế bào Vero Chúng tơi sử dụng tế bào Vero để tăng sinh chuẩn độ virus Tế bào Vero ni cấy trì mơi trường DMEM thêm 10% FBS 1% kháng sinh (Hình 3.3) 4.1.2 Ni cấy, tăng sinh dịng tế bào H460 A549 Nghiên cứu sử dụng dòng tế bào ung thư H460 A549 Các dòng tế bào ni cấy trì mơi trường DMEM có thêm 10% FBS 1% kháng sinh Các bước gieo, 20 trì thu hoạch tế bào chúng tơi làm quy trình Tế bào H460 A549 chứng minh giữ nguyên thụ cảm thể bề mặt CD46 Nectin-4 tế bào phổi bình thường 4.2 Tăng sinh virus vaccine sởi Chuẩn độ TCID50 Đầu tiên, tăng sinh tế bào Vero Sau đó, nhiễm MeV vào tế bào Vero để tăng MeV Enders J.F cộng (1949) chứng minh phương pháp thực rộng rãi để tăng sinh virus Chuẩn độ virus bước quan trọng nghiên cứu Phổ biến phương pháp TCID50 Reed L.J cộng (1938) mô tả nghiệm pháp TCID50 Năm 2001, LaBarre D.D cộng đưa cơng thức tính TCID50 hồn chỉnh 4.3 Virus vaccine sởi ly giải tế bào H460 A540 in vitro 4.3.1 Ly giải trực tiếp cách tạo hợp bào in vitro Kết nghiên cứu cho thấy MeV ly giải tế bào H460 A549 qua tạo hợp bào rõ ràng thời điểm nhiễm virus 3-6 ngày in vitro, rõ thời điểm ngày thứ 3-5 sau nhiễm Tế bào nhiễm MeV tạo hợp bào lan rộng (Hình 3.6) Hợp bào thường chết sau vài ngày E-H Lin cộng (2009) chứng minh protein hợp màng F virus tạo hợp vào ly giải tế bào ung thư phổi người in vitro 4.3.2 Đánh giá hiệu MeV ly giải tế bào H460 A549 nghiệm pháp MTT Nghiệm pháp MTT đánh giá tỉ lệ tế bào H460 A549 chết in vitro sau nhiễm MeV ngày thứ 4, pha loãng nồng độ MeV thành MOI 0,1 MOI Kết cho thấy, tỉ lệ tế bào H460 A549 sống hai nhóm nhiễm MeV thấp (p < 0,05) so với nhóm chứng Ở tế bào A549 H460 nhiễm MeV, tỉ lệ tế bào sống nhóm nhiễm MeV liều MOI thấp (p0,05) (Biểu đồ 3.12A), tương đồng với nghiên cứu Lê Duy Cương (2019) Nghiên cứu chứng minh MeV có tác dụng làm chậm phát triển khối u tế bào H460 ghép đùi chuột nude so với nhóm chứng (p