Mô phỏng mô hình gây suy sinh dục nữ bằng 4 vinylcyclohexen diepoxid (vcd) trên chuột nhắt ứng dụng khảo sát tác động hướng sinh dục nữ của cao chiết salove

BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO BỘ Y TẾ ĐẠI HỌC Y DƢỢC THÀNH PHỐ HỒ CHÍ MINH - PHẠM NGỌC ANH MƠ PHỎNG MƠ HÌNH GÂY SUY SINH DỤC NỮ BẰNG 4-VINYLCYCLOHEXEN DIEPOXID (VCD) TRÊN CHUỘT NHẮT ỨNG DỤNG KHẢO SÁT TÁC ĐỘNG HƢỚNG SINH DỤC NỮ CỦA CAO CHIẾT SALOVE LUẬN VĂN THẠC SĨ DƢỢC HỌC THÀNH PHỐ HỒ CHÍ MINH, NĂM 2022 BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO BỘ Y TẾ ĐẠI HỌC Y DƢỢC THÀNH PHỐ HỒ CHÍ MINH - PHẠM NGỌC ANH MƠ PHỎNG MƠ HÌNH GÂY SUY SINH DỤC NỮ BẰNG 4-VINYLCYCLOHEXEN DIEPOXID (VCD) TRÊN CHUỘT NHẮT ỨNG DỤNG KHẢO SÁT TÁC ĐỘNG HƢỚNG SINH DỤC NỮ CỦA CAO CHIẾT SALOVE CHUYÊN NGÀNH: DƢỢC LÝ VÀ DƢỢC LÂM SÀNG MÃ SỐ: 8720205 LUẬN VĂN THẠC SĨ DƢỢC HỌC THẦY HƢỚNG DẪN: PGS.TS ĐỖ THỊ HỒNG TƢƠI THÀNH PHỐ HỒ CHÍ MINH, NĂM 2022 MỤC LỤC Trang LỜI CAM ĐOAN i TÓM TẮT iii DANH MỤC CHỮ VIẾT TẮT v DANH MỤC HÌNH ix MỞ ĐẦU .1 CHƢƠNG TỔNG QUAN .3 1.1.Tổng quan suy sinh dục nữ .3 1.2.Mô hình gây suy giảm sinh dục nữ thực nghiệm 1.3.Một số nghiên cứu tác dụng hƣớng sinh dục nữ dƣợc liệu thành phần cao chiết Salove 14 CHƢƠNG ĐỐI TƢỢNG VÀ PHƢƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 20 2.1 Nguyên vật liệu 20 2.2 Thời gian địa điểm nghiên cứu 23 2.3 Phƣơng pháp nghiên cứu 24 2.4 X ết ph n t ch số iệu thống ê .33 CHƢƠNG KẾT QUẢ 34 3.1 Mô mô hình suy giảm sinh dục nữ chuột nhắt 4- vinylcyclohexen diepoxid (VCD) 34 3.2 Tác động hƣớng sinh dục nữ cao Salove .41 CHƢƠNG 4: BÀN LUẬN 48 KẾT LUẬN VÀ ĐỀ NGHỊ .56 TÀI LIỆU THAM KHẢO PHỤ LỤC i LỜI CAM ĐOAN Tôi xin cam đoan đ y cơng trình nghiên cứu riêng tơi dƣới hƣớng dẫn PGS.TS Đỗ Thị Hồng Tƣơi Kết số liệu luận văn trung thực chƣa đƣợc công bố nghiên cứu khoa học trƣớc đ y Thành phố Hồ Chí Minh, ngày tháng năm 2022 Tác giả luận văn Phạm Ngọc Anh ii LỜI CẢM ƠN Lời đầu tiên, tơi xin bày tỏ lịng biết ơn s u sắc tới Ban Giám hiệu, Phòng Quản lý Đào tạo Sau Đại học, Quý Thầy Cô hoa Dƣợc, Đại học Y Dƣợc Thành Phố Hồ Chí Minh, tạo điều kiện thuận lợi cho tơi q trình học tập thực luận văn Đặc biệt, xin g i lời cám ơn ch n thành đến cô PGS.TS Đỗ Thị Hồng Tƣơi, ngƣời thầy uôn quan t m, tận tình bảo, hƣớng dẫn tơi suốt trình học tập thực luận văn Tôi xin g i lời cảm ơn ch n thành đến bạn học viên, sinh viên àm việc học tập phịng thí nghiệm Trung tâm Khoa học Cơng nghệ Dƣợc Sài gịn (Sapharcen), Đại học Y Dƣợc giúp đỡ, hỗ trợ tơi nhiều trình học tập, làm việc thực luận văn Từ tận đáy ịng mình, tơi xin bày tỏ lịng biết ơn vơ hạn tới gia đình th n yêu, ngƣời bạn thân thiết n chỗ dựa vững chắc, khích lệ, cảm thơng động viên tơi úc hó hăn Trân trọng cám ơn Phạm Ngọc Anh iii TĨM TẮT Mơ mơ hình gây suy sinh dục nữ 4-vinylcyclohexen diepoxid (VCD) chuột nhắt ứng dụng khảo sát tác động hƣớng sinh dục nữ cao chiết Salove Học viên: Phạm Ngọc Anh Thầy hƣớng dẫn: PGS.TS Đỗ Thị Hồng Tƣơi Mở đầu: Đến nay, nhiều sản phẩm từ thảo dƣợc đƣợc nghiên cứu phát triển để phòng và/hoặc điều trị bệnh suy giảm chức sinh dục nữ Đề tài mô mơ hình giảm chức sinh dục nữ 4-vinylcyclohexen diepoxid (VCD) chuột nhắt ứng dụng khảo sát tác dụng kiểu estrogen cao th phối hợp dƣợc liệu Đƣơng quy, Sen, Nghệ, Tía tơ, Sâm Ngọc Linh collagen Đối tƣợng phƣơng pháp nghiên cứu: Chuột nhắt Swiss albino đƣợc gây suy sinh dục cách tiêm phúc mô VCD liều 160 mg/kg, 01 lần/ngày 15 ngày liên tiếp Sau đó, khảo sát tác động hƣớng sinh dục nữ cao th với liều cho uống 250 mg/kg 500 mg/kg so sánh với estradiol 0,5 mg/kg, 01 lần/ngày 30 ngày liên tiếp thông qua nồng độ estradiol huyết thanh, trọng ƣợng tƣơng đối t cung-buồng trứng tỷ lệ động dục dƣơng t nh cách quan sát loại tế bào phết tế bào m đạo Kết quả: So với chứng bệnh, chuột đƣợc uống cao th liều 250 mg/kg 500 mg/kg có trọng ƣợng tƣơng đối t cung-buồng trứng tăng lần ƣợt 6,18 lần 2,66 lần (p 0,05) Kết luận: Mơ thành cơng mơ hình suy giảm sinh dục nữ Cao th liều cho chuột nhắt uống 250 mg/kg thể tác động àm tăng nồng độ estradiol iv huyết thanh, tăng tỷ lệ động dục dƣơng t nh giúp hạn chế tăng trọng ƣợng thể chuột nhắt gây suy sinh dục nữ VCD SUMMARY Modeling accelerated ovarian induced by 4-vinylcyclohexene diepoxide in mice and screening for estrogenic activities of Salove extract Pham Ngoc Anh Supervisor: Assoc Prof Do Thi Hong Tuoi Introduction: Nowadays, a lot of medicinal plants and dietary supplement are produced for prevention and treatment of endocrine diseases This study simulates a model of female hypogonadism induced by 4-vinylcyclohexen diepoxid (VCD) in mice and investigates of estrogenic effects of the combination of Dang Gui, Lotus leaf, Turmeric, Perilla, Ngoc Linh Ginseng and collagen Materials and methods: VCD were injected intraperitoneally (i.p.) to Swiss albino female mice at dose of 160 mg/kg once daily for 15 consecutive days After a 30day treatment, the estrogenic effect was investigated at oral doses of 250 mg/kg and 500 mg/kg compared with estradiol 0.5 mg/kg, once a day for 30 consecutive days through serum 17β-estradiol, utero-ovarian relative weight and positive predictive value for estrus by observing cell types in vaginal smears Results: Compared with the disease, mice given doses of 250 mg/kg and 500 mg/kg had a relative weight of uterus-ovarian by 6.18 times and 2.66 times (p 0.05) Conclusion: Successfully simulated female hypogonadism model A dose given to mice orally at 250 mg/kg showed an effect on increasing serum concentration of 17β- estradiol , the positive predictive value for estrus and preventing weight gain in VCD mouse model of menopause v DANH MỤC CHỮ VIẾT TẮT Chữ viết tắt Tiếng Anh ACTH Adrenocorticotropin hormone AOF Accelerated ovarian failure Tiếng việt Hormon hƣớng vỏ thƣợng thận Suy buồng trứng cấp tốc Cao chiết với thành phần gồm Sâm Ngọc Linh 2%, Nghệ 17%, Sen 18%, Đƣơng quy 33%, T a tô 20% Cao Salove collagen 10% công ty TNHH Sâm Sâm nghiên cứu, sản xuất DHEA Dehydroepiandrosterone Dehydroepiandrosteron DHT Dihydrotestosterone Dihydrotestosteron Liều cao hông àm Dmax Chuột chết DMSO Dimethyl sulfoxide Dimethyl sulfoxid DPPH 2,2-diphenyl-1-picrylhydrazyl 2,2-diphenyl-1-picrylhydrazyl E1 Estrone Estron E2 17β-estradiol 17β-estradiol Ethylene diamine tetracetic EDTA acid ELISA Acid ethylen diamin tetracetic Enzyme-linked Xét nghiệm miễn dịch hấp thụ Immunosorbent Assay liên kết với Enzyme vi Thụ thể estrogen ER Estrogen Receptor FDA Food and Drug Administration FSH Follicle Stimulating Hormone GABA Gamma-aminobutyric GH Growth hormone Hormon tăng trƣởng Gonadotropin releasing Hormon giải phóng hormone gonadotropin GnRH HDL High density lipoprotein HPG Nội tiết tố kích thích nang trứng Lipoprotein tỉ trọng ph n t cao gonadal sinh dục Intraperitoneal injection Lethal dose for 50% of the animal LD 50 Dƣợc phẩm Hoa Kỳ Não – tuyến yên – tuyến dehydrogenase IP Thực phẩm Hypothalamic–pituitary– Hydroxysteroid 17-beta HSD17B1 Cục quản Enzym oxy hóa h estrogen androgen động vật có vú Tiêm phúc mơ Liều g y chết 50% thú vật th test population Hormone ch th ch hoàng thể LH Luteinizing hormone OD Optical density Mật độ quang OVX Ovariectomy Mơ hình cắt bỏ buồng trứng P4 Progesterone Progesteron vii POI Primary ovarian insufficiency SEM Standard error of the mean Suy buồng trứng sớm Sai số chuẩn giá trị trung bình Transforming Growth Factor Yếu tố chuyển đổi tăng trƣởng β1 β1 TNF Tumor necrosis factor Yếu tố hoại t u VCD 4-vinylcyclohexene diepoxid 4-vinylcyclohexen diepoxid VCH 4-vinylcyclohexene 4-vinylcyclohexen WHO World Health Organisation Tổ Chức Y Tế Thế Giới TGF-β1