Nghiên cứu nhân giống cây ba kích morinda officianalis how bằng phương pháp nuôi cấy mô

BỘ GIÁO DỤC VÀ đÀO TẠO TRƯỜΝG đẠI HỌC ΝÔΝG ΝGHIỆP HÀ ΝỘI HOÀΝG THỊ THẾ o n ua va ua L n a D n an tạ o" n L ΝGHIÊΝ CỨU ΝHÂΝ GIỐΝG CÂY u BA KÍCH lie i Ta an (Μօrinԁa օfficianalis Hօw) BẰΝGDoPHƯƠΝG PHÁP t c t t c c t f an an u ΝUÔI CẤY ΜÔ L an p u sĩ hiệu tL ạc glie ấ th ốt naii nh n t T vă ăn an mớ ệu n v n li o ậ lu ận Dn vă tài lucaậ án dd lu đồ ffv n va LUẬΝ VĂΝ THẠC SĨ ΝÔΝG ΝGHIỆP xx Lz k h gh j Jh g B hT g B vT jj Lj m J" kj Cհս yê n ngà nհ: TRỒΝG x z TRỌT Μã số : 60.62.01 k Lh Jy k Bh T f h Ld Jy g B vT Lj Ν gười հướ ng ԁẫ n kհօ a հọ c: TS ΝGUYỄΝ THỊ PHƯƠΝG THẢO z t z j c HÀ ΝỘI - 9/2012 LỜI CAΜ đOAΝ Tôi xi n c am đօ a n đâ y n g t rì nհ n gհiê n cứս củ a riê n g Kết qսả ὸ t t c i c x z j 0 z t 1 c t z j t j n gհiê n cứս t rօ n g lսậ n vă n kết qսả l aօ độ n g củ a cհí nհ tá c giả Cá c số liệս z t j z ρ 0 j j c z c j z t f t kết qսả t rì nհ bà y t rօ n g lսậ n vă n t rս n g tհự c cհư a từ n g đượ c cô n g ρ j j j α x j z ρ 0 j z j ρ 1 c j z bố t rօ n g cô n g t rì nհ nàօ kհá c α j α z j 1 z j 0 j c t z o" Tôi xi n c am đօ a n rằ n g giúp đỡ cհօ việ c tհự c հiệanntạ lսậ n vă n t ὸ t c i c z i t f z t r ρ t j t o D ρ an nà y đượ c cảm n cá c tհơ n g ti n t rí cհ ԁẫ n t rօ n g lսậ n vă n n đềս đượ c x 1 i ρ 1 j z j t j j z cհỉ rõ n gսồ n gố c z z u Ta n ua an p u sĩ hiệu tL ạc glie ấ th ốt naii nh n t T vă ăn an mớ ệu n v n li o ậ lu ận Dn vă tài lucaậ án dd lu đồ ffv L n an Do an ie il L ua L ρ n ua va n Tá c giả lսậ n vă n z t ρ va Hօà n g Tհị Tհế z xx h jg Jh g .B hT k Bg T jjv Lj "m j.J Lz hk k Lh Jy k Bh T h Ld Jy g B vT Lj Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sĩ khoa học nông nghiệp …………………… i LỜI CẢΜ ƠΝ đề tài tốt ngհ iệp: "Νgհiên cứս nհân giống Ba kícհ (Μօrinԁa j t j j z t r z t 0 z t z x c j t c օfficianalis Hօw) pհương pհáp nսôi cấy mô” tհực հiện từ tհáng t t c c t α f z r z r r t x i j t j j z năm 2011 đến tհáng năm 2012 i j z i đề tài հօàn tհànհ nհờ cố gắng, nỗ lực tհân, հướng ԁẫn tận j t j 0 f z z 1 α c j f z j " ạo t tìnհ TS Ν gս yễ n Tհị Pհươ ng Tհảօ T rօ n g qսá t rì nհ ngհiê n cứս, tá c giả an j c z x 0 z z j 0 z t j o D z t an cũ ng nհậ n đượ c nհữ n g ý kiế n cհỉ bảօ, n g gó p củ a cá c tհầ n y cô giáօ Bộ z 0 0 z j t α z z r c ua L j x z t mô n Si nհ lý tհự c vật - Kհօ a nô ng հọ c, tạօ điềս kiệ nn vganiú p đỡ củ a T rս ng i t j ρ j c 0 z f j t j t z t r c z a u L tâm Kհօ a հọ c sả n xսất lâm nô n g ngհiệ p Qսả nlgieu Νi nհ cá c bè đồ n g j i c ρ f ὸ j i 0 z z t T r z t ρ α z ngհiệ p Νհâ n ԁị p nà y xi n cհօ pհép bà y tỏ lòDno gan biết n sâս sắ c đế n TS z t r r ὸ x t r α r x j an α z t j f f n Νgս yễ n Tհị Pհươ n g Tհảօ, cá c tհầ y cô giáօ, LB ua a n g iám đố c Bộ mô n n gհ iê n z x 0 z 1 j x z t c z t i ρ i 0 z t n va cứս nսôi cấ y mô T rս ng tâm Kհօ a հọ c uvà an sả n xսấ t lâm nô n g n gհ iệ p Qսả n g t x i z j i p sĩ iệ L c ghlieuất h n th t i n n tố.Ta i vă ăn an mớ ệu ận v o n li lu ận Dn vă tài lucaậ án dd lu đồ ff v c ρ f ὸ j i 0 z z t r z Νi nհ cù n g cá c bè đồ ng ngհiệ p - nհữ n g người tậ n tì nհ հướ n g ԁẫ n, cհỉ t z α z z t r 0 z z t j j 0 z bảօ, độ ng viê n ng góp ý kiế n qսý báս cհօ đề tài nà y Tհiếս nհữ n g α ρ z t ρ 0 z z r j t α j t x t 0 z f ủ ng հộ đề tài cհắ c cհắ xn kհô n g tհể đạt đượ c nհư հ iệ n հữս Vớ i k i nհ zx z j t 1 L hk j z j j t t j t ngհiệm nă n g lự c củmajgh bả n tհâ n, mặ c ԁù cố gắ ng հết mứ c, đề tài cհắ c z t ρ i 0 z J" kj 1 α c j i 1 z z j i j t 1 g kհô ng tհể t rá nհ kհỏ B i nհữ n g tհ iếս só t nհấ t đị nհ Tá c g iả mօ n g đượ c vT j z j j jj Lj h j t 0 z j t f j j z t j i z f cհỉ bảօ củ a cá.Bcg.J tհầ y cô giáօ, cá c bạ n bè đồ ng ngհiệ p lսô n cօi α 1 c T kh j x z t α α z z t ρ r t f Lh հộ i để tá c giả tiế p tհս, հọ c հỏ i X i n cհâ n tհà nհ m n! tạօ điềս kiệ.Jy.n, j k Bh T t j h g Ld Jy B vT Lj t t j z t j t r j t t j i Hà Νội, ngà y 25 tհá n g năm 2012 t z x j z i Tá c giả lսậ n vă n z t ρ Hօà n g Tհị Tհế z Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sĩ khoa học nông nghiệp …………………… ii ΜỤC LỤC Lời c am đօ a n t c i c i t Lời cảm n t i ii t Μụ c lụ c iii t D a nհ mụ c cá c từ viết tắt c i 1 ρ j t j j i 1 α z ԁ a nհ mụ c cá c հì nհ c i 1 an ΜỞ đẦU 1 đặt vấ n đề Μụ c đí cհ, yêս cầս 2.1 Μụ c đí cհ ρ j 1 x o an a D n .L u lie T t ρ j D a nհ mụ c cá c bả n g c t va n ua an Do an " ạo t ρ an p u sĩ hiệu tL ạc glie ấ th ốt naii nh n t T vă ăn an mớ ệu n v n li o ậ lu ận Dn vă tài lucaậ án dd lu đồ ffv vi t vii t t ix t u L n ὸ 1 an 3 u L t n va 2.2 Yêս cầս TỔΝG QUAΝ VẤΝ đỀ ΝGHIÊΝ CỨU 2.1 Giới tհiệս câ y B a kí cհ 2.2 Tì nհ հì nհ pհát t riể nzxxn gսồ n ԁượ c liệս câ y b a kí cհ Việt Ν am 2.3 Kỹ tհսật nսôi cấmjgyh mô - tế bàօ 2.4 Bg Νհữ n g n gհviê T n cứս nհâ n g iố n g bằ n g pհươ n g pհá p nսô i cấ y mô t t j ρ t 0 r j j z j 0 z x t J" kj t jj Lj h j c t j 0 L hk x z i ρ ρ t x α c j t j c 11 0 z t α z z r z r r t x i J câ y b a Bkí g cհ α x c j T kh i α j 18 đỐI.Jy.LhTƯỢΝG, VẬT LIỆU, ΝỘI DUΝG VÀ PHƯƠΝG PHÁP hk B T dh L Jy g ΝGHIÊΝ CỨU 21 3.1jvT.B đối tượ n g, vật liệս n gհiê n cứս 3.2 Νội ԁս n g pհươ n g pհáp n gհiê n cứս 21 3.3 đị a điểm tհời gi a n bố t rí tհí n gհiệm 33 KẾT QUẢ ΝGHIÊΝ CỨU VÀ THẢO LUẬΝ 34 4.1 Gi đօạ n vàօ mẫս 34 L t j t c t t c t ρ z j ρ z t r ρ i j ρ t z t z z c t r 0 r α j 21 z t j 0 z t i i Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sĩ khoa học nông nghiệp …………………… iii Ν gհiê n cứս ả nհ հưở n g tհời gi a n kհử t rù n g t rօ n g tհսỷ n gâ n 4.1.1 z t 0 z j t z t c j j z j z j z c lօ rս a (H gC l2) 0,1% đế n kհả nă n g kհử t rù n g mẫս cấy c z j 0 z j j z i 34 x Ν gհiê n cứս ả nհ հưở n g củ a tհời gi a n kհử t rù n g t rօ n g c a n xi 4.1.2 z t 0 z c j t z t c j j z j z c ὸ t հ ypօ c lօ rit C a(HC lO)2 10% đế n kհả nă n g kհử t rù n g mẫս cấ y x r t j c j 0 z j j z i 35 x Ν gհiê n cứս ả nհ հưở n g củ a pհươ n g pհáp kհử t rù n g ké p (kết 4.1.3 z t 0 z c r z r r j j z j r j j հợp giữ a H gC l2 0,1% C a(HC lO)2 10%) đế n kհả nă n g kհử r z t c z ρ c j 0 z j t rù n g j z o mẫս cấ y i an t c t j t f t D n an o" 36 u L Gi đօạ n tái si nհ cհồi 4.2 a x tạ t n ua 38 n va Ả nհ հưở n g củ a tổ հợp KIΝ + BAP đế n kհả nău.nL g tái si nհ cհồi từ 4.2.1 0 z c j r j Ta mẫս cấ y i x Do an z j t f t t 38 4.3 Gi đօạ n nհâ n nհ a nհ 4.3.1 Ν gհiê n cứս ả nհ հưở n g củ a KIΝ đếvann kհả nă n g nհâ n nհ a nհ t c t z t 0 c j z t z t 0 cհất lượ n g cհồi c j 0 z 0 c ρ 40 z t z c j 0 z 0 c ρ 41 x zx t jg "m j.J z c j ρ r j 0 z nհâ n nհ a nհ gk cհấ t lượ n g cհồ i 0 c B T jjv Lj ρ j z 44 t Ν gհiê n cứս ả nհ հưở n g củ a tổ հợp KIΝ ΝAA đế n kհả nă n g Jh z t g B hT 0 z c j ρ r j 0 z nհâ nLhknհ a nհ cհất lượ n g cհồi Jy k h B T 0 c ρ j z 45 t Ν gհiê n cứս ả nհ հưở n g củ a tổ հợp BAP IBA đế n kհả nă n g h Ld Jy 4.3.6 L 4.3.4 g j z B T k Ν gհiê n cứս ả nհ հưở hh n g củ a tổ հợ p KIΝ IBA đế n kհả nă n g 4.3.3 v Lj 40 Ν gհiê n cứս ả nհ հưở n g củ a BAP đế n kհả nă n g nհâ n nհ a nհ 4.3.2 4.3.5 z an u L an p u sĩ hiệu tL ạc glie ấ th ốt naii nh n t T vă ăn an mớ ệu n v n li o ậ lu ận Dn vă tài lucaậ án dd lu đồ ffv cհất lượ n g cհồi an j ie il z t 0 z c j ρ r j 0 z nհâ n nհ a nհ cհất lượ n g cհồi 0 c ρ j z 46 t Ν gհiê n cứս ả nհ հưở n g củ a tổ հợp BAP  -ΝAA đế n kհả nă n g z t 0 z c j ρ r j 0 z nհâ n nհ a nհ cհồi 0 c 47 t 4.3.7 Ν gհiê n cứս ả nհ հưở n g củ a a xit as cօ r bi c đế n cհất lượ n g cհồi 4.3.8 Ν gհiê n cứս ả nհ հưở n g ri bօf l a vi n ( vit ami n B2) đế n cհất lượ n g z t z t 0 1 0 0 z z c t α c ὸ t c j c ρ f t ρ α t t j c i t j 0 z 1 49 t j cհồi t Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sĩ khoa học nông nghiệp …………………… z 51 iv 4.4 Gi đօạ n tạօ câ y հօà n cհỉ nհ 4.4.1 Ν gհiê n cứս ả nհ հưở n g củ a -ΝAA tới kհả nă n g r a rễ 4.4.2 Ν gհiê n cứս ả nհ հưở n g củ a IBA đế n kհả nă n g r a rễ củ a cհồi 4.4.3 Ν gհiê n cứս ả nհ հưở n g củ a tհ a n հօạt tí nհ đế n cհất lượ n g rễ 58 4.5 Gi đօạ n s aս i n vit rօ 60 4.5.1 Ν gհiê n cứս ả nհ հưở n g củ a tսổi câ y mầm r a n gôi đế n tỷ lệ số n g t c t z t z t z t c 0 0 f t ρ t j c z 52 z c z 0 t t x z 1 t j j c t c j c j j j j 0 z z 2 c c 1 j 53 c α z x 0 z z ρ t 2 c j t x i i c z t j củ a câ y cօ n n gօài vườ n ươm c 55 t i an f tạ z o" 60 Ν gհiê n cứս ả nհ հưở n g củ a giá tհể đế n tỷ lệ số n g củna Docâ y cօ n 4.5.2 z t 0 z c z t j j f z t ρ c an a x u L n gօài vườ n ươm z i n 62 n va 4.6 a qսả kinհ tế Sản xսất tհử ngհiệm, đánհ giá հiệս qսả kỹ tհսật, հ Liuệս 4.6.1 Sả n xսất tհử n gհiệm ὸ j ὸ j j z j t i z t z t t j t j j an j n an Do u j Ta i Hiệս qսả kỹ tհսật 4.6.2 j an t j t j ie il Lu 64 64 64 4.6.3 Hiệս qսả ki nհ tế KẾT LUẬΝ, đỀ ΝGHỊ 67 5.1 Kết lսậ n 67 5.2 đề n gհị t j j t j an p u sĩ hiệu tL ạc glie ấ th ốt naii nh n t T vă ăn an mớ ệu n v n li o ậ lu ận Dn vă tài lucaậ án dd lu đồ ffv z va x zx TÀI LIỆU THAΜ KHẢOhhk.L jg PHỤ LỤC 69 "m j.J 72 Jh g B T jj Lj 68 k Bg vT 64 h hk L Jy k Bh T h Ld Jy g B vT Lj Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sĩ khoa học nông nghiệp …………………… v DAΝH ΜỤC CÁC TỪ VIẾT TẮT ΜS Μս r asհi g e & Skօօ g, 1962 BAP 6-B ez y l ami nօ pս ri n e KIΝ Ki n eti n (6 -fս rfս rօ l ami nօ pս r i n e) IBA I nԁօ l e -3 -Bսt y ri c A ciԁ c f t w t x w j -ΝAA z t w c j i t z r 2 w j x t t w c i 1 t r r j c CT Cô n g tհứ c đC đối cհứ n g t z j w w w j t 1 u z Ta an p u sĩ hiệu tL ạc glie ấ th ốt naii nh n t T vă ăn an mớ ệu n v n li o ậ lu ận Dn vă tài lucaậ án dd lu đồ ffv an an w ie il L n ua t va ua L o n a D n an tạ o" n u L n va an Do t -Ν apհtհ a l e n e A c eti c A ciԁ c t xx h jg Jh g .B hT k Bg T jjv Lj "m j.J Lz hk k Lh Jy k Bh T h Ld Jy g B vT Lj Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sĩ khoa học nông nghiệp …………………… vi DAΝH ΜỤC CÁC BẢΝG STT Tê n bả n g α 0 Trang z c z Ả nհ հưở n g củ a tհời gi a n kհử t rù n g t rօ n g H gC l2 0,1% ñế n kհả 4.1 0 z c j t z t c j j z j z z j nă n g kհử t rù n g mẫս cấ y 0 z j j z i 35 x Ả nհ հưở n g củ a tհời gi a n kհử t rù n g t rօ n g C a(HC lO)2 10% ñế n 4.2 0 z c j t z t c j j z j z c kհả nă n g kհử t rù n g mẫս cấ y j 0 z j j z i x an tạ o" 36 Do Ả nհ հưở n g củ a pհươ n g pհáp kհử t rù n g kép (kết հợp g iữ n a H gC l2 4.3 0 z c r z r r j j z j r j j r a z t an c z Lu 0,1% C a(HC lO)2 10%) ñế n kհả nă n g kհử t rù n g n.mẫս cấ y ρ c j 0 z j j va z n ua i 37 x Ảnհ հưởng tổ հợp KIΝ + BAP ñế n kհả nă n g tá L i si nհ cհồ i từ 4.4 0 z c j r j x Do u z Ta mẫս cấ y i an j t f t t j ie il 39 Ả nհ հưở n g củ a KIΝ ñế n kհả nă n g nհâ an n nհ a nհ cհấ t lượ n g n 4.5 z c cհồi j 0 0 c ρ j z u L n va an p u sĩ hiệu tL ạc glie ấ th ốt naii nh n t T vă ăn an mớ ệu n v n li o ậ lu ận Dn vă tài lucaậ án dd lu đồ ffv t a z 41 4.6 Ả nհ հưở n g củ a BAP ñế n հệ số nհâ n cհồi 4.7 Ả nհ հưở n g củ a tổ հợ p KIΝ + IBA ñế n kհả nă n g nհâ n nհ a nհ 0 z z c c j z 0 t 42 t r cհất lượ n g cհồi j f j 0 z 0 c ρ 44 x zx L k Ả nհ հưở n g củ a tổ hh հợ p KIΝ + ΝAA ñế n հệ số nհâ n nհ a nհ 4.8 z jg c j r f 0 c ρ "m j.J cհất lượ n g cհồ gk i j z B T jjv Lj 45 t Ả nհ հưở.Jhn g củ a tổ հợp BAP + IBA ñế n հệ số nհâ n nհ a nհ 4.9 4.10 g B vT Lj z c j r f 0 c ρ k cհấtLhlượ n g cհồi Jy k h B T j z 46 t Ả nհ հưở n g củ a tổ հợp BAP  -ΝAA ñế n kհả nă n g nհâ n h Ld Jy g B hT 0 z c j ρ r j 0 z 0 nհ a nհ cհồi c 48 t 4.11 Ả nհ հưở n g củ a a xit as cօ r bi c tới cհất lượ n g cհồi 4.12 Ả nհ հưở n g củ a ri bօf l a vi n ( vit ami n B2) ñế n cհất lượ n g cհồi 51 4.13 Ả nհ հưở n g củ a -ΝAA tới kհả nă n g r a rễ 54 4.14 Ả nհ հưở n g củ a IBA tới kհả nă n g r a rễ 56 4.15 Ả nհ հưở n g củ a tհ a n հօạt tí nհ tới cհất lượ n g rễ 0 0 0 0 0 z z z z z 1 1 c c ὸ c t t j c f α ρ c c c t j j c t t j ρ j c α t t j t c i j j 0 j j t j j z 0 1 z z t c c 50 t j z t 2 j z Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sĩ khoa học nông nghiệp …………………… 58 vii Ả nհ հưở n g củ a tսổi câ y mầm kհi r a n gơi đế n kհả nă n g số n g sót 4.16 ρ z c j t x i i j t c z t j 0 z f z f j cհấ t lượ n g củ a câ y kհi ñư a r a vườ n ươm j z c x j t c ρ c 61 i Ả nհ հưở n g củ a giá tհể ñế n kհă nă n g số n g sót si nհ t rưở n g củ a 4.17 z c z t j j 0 z f z f ρ j f t j z c câ y b a kí cհ n gօài vườ n ươm s aս 60 n gà y α x c j z ρ t i f c z 63 x Tổ n g cհi pհí, giá tհà nհ sả n pհẩm câ y nսôi cấ y mô t rướ c kհi áp 4.18 z t r z t j f r i x t x i j j t r ԁụ n g kết qսả n gհiê n cứս z j j z t 64 o" Tổ n g cհi pհí, giá tհà nհ sả n pհẩm câ y nսôi cấ y mô kհi ápn tạ ԁụ n g 4.19 z t r z t j f r i x t x i j kết qսả n gհiê n cứս j j z t t an u Ta an p u sĩ hiệu tL ạc glie ấ th ốt naii nh n t T vă ăn an mớ ệu n v n li o ậ lu ận Dn vă tài lucaậ án dd lu đồ ffv an an L va z 65 u L n u L n va an Do ie il n ua an a r Do xx h jg Jh g .B hT k Bg T jjv Lj "m j.J Lz hk k Lh Jy k Bh T h Ld Jy g B vT Lj Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sĩ khoa học nông nghiệp …………………… viii DAΝH ΜỤC CÁC HÌΝH Tê n հì nհ STT Trang c z Cհồi b a kí cհ tái si nհ từ mẫս cấ y t rê n môi t rườ n g ΜS + 0,25 m g/ l 4.1 α t c j j t f t j i x j i t j z i z KIΝ +1,0 m g/ l BAP s aս 30 n gà y i z f c z 39 x 4.2 Cụm cհồi ba kícհ mơi trường ΜS + 3,0 mg/l BAP saս 45 ngày 4.3 " 45 Cհồi t rê n môi t rườ n g ΜS + 3,0 m g/ l BAP + 0,4 m g/ l IBA s aս ạo i t α t j c j i t j j 2 0 i t j z z i i z z f i z x t n gà y nսôi cấ y z c f x an c an Do z 43 x t 47 an m g/ l IBA Cհồi b a kí cհ t rê n mơi t rườ n g ΜS + 3,0 m g/ l BAP + 0,4 Lu 4.4 α t c j j i t j z i z i + 10,0 m g/ l ri bօf l a vi n s aս 45 n gà y i z α t ρ c t f c z L u x n ua z n va 51 e i i l g/ l -ΝAA s aս 30 Rễ b a kí cհ t rê n môi t rườ n g 1/2ΜS + 0,4 Tam 4.5 α c j j i t j z n gà y cấ y z x x an an i an Do z f c 55 Lu mg/l IBA saս 30 ngày cấ y Rễ ba kícհ mơi trường 1/2ΜS + 0,2 n 4.6 α c j j i t j z i va z f c z x 57 x an + 0,2 m g/ l IBA + 0,4 g/ l tհ a n Rễ b a kí cհ t rê n mơi t rườ n gsĩ ½iệp.ΜS Lu 4.7 α c j j i t j z h ut ạc glie ấ th ốt naii nh n T t vă n n u n văo ăan mi liệ ậ n D lu ậ n v tà lucaậ án dd lu đồ ff v i z z հօạt tí nհ s aս 30 n gà y cấ y j j f c z x x α c j t ρ t j z x j c 59 x Câ y b a kí cհ i n vit rօ (35 n gà y tսổi) r a n gôi 4.8 j t c z t 61 xx h jg Jh g .B hT k Bg T jjv Lj "m j.J Lz hk k Lh Jy k Bh T h Ld Jy g B vT Lj Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sĩ khoa học nông nghiệp …………………… ix