Xác định hoạt tính giảm đường huyết của dịch chiết từ hoa cây sứ trắng (plummeri rubra l var actifollia (poir ) bailey )tại khánh hòa

TRƯỜNG CAO ĐẲNG SƯ PHẠM NHA TRANG KHOA TỰ NHIÊN - TỔ HÓA SINH    ĐỀ TÀI NGHIÊN CỨU KHOA HỌC XÁC ĐỊNH HOẠT TÍNH GIẢM ĐƯỜNG HUYẾT CỦA DỊCH CHIẾT TỪ HOA CÂY SỨ TRẮNG (PLUMERI RUBRA L VAR ACUTIFOLIA (POIR.) BAILEY) TẠI KHÁNH HÒA THỰC HIỆN HUỲNH THỊ HỒNG TRANG Khánh Hòa, 5/2015 CHỨNG NHẬN KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU KHOA HỌC Đề tài: “XÁC ĐỊNH HOẠT TÍNH GIẢM ĐƯỜNG HUYẾT CỦA DỊCH CHIẾT TỪ HOA CÂY SỨ TRẮNG (PLUMERI RUBRA L VAR ACUTIFOLIA (POIR.) BAILEY) TẠI KHÁNH HÒA”, Ths Huỳnh Thị Hồng Trang thực hiện; Hội đồng Khoa học cấp trường nghiệm thu vào ngày 30 tháng năm 2015, kết xếp loại: Khá Chủ tịch Hội Đồng (Ký ghi rõ họ tên) i Trong suốt thời gian tiến hành đề tài, nhận nhiều quan tâm giúp đỡ đồng nghiệp mơn Hóa Sinh, khoa Tự nhiên, trường CĐSP Nha Trang Tôi xin chân thành cảm ơn giúp đỡ quý giá Đặc biệt, xin gởi lời cảm ơn chân thành đến lãnh đạo khoa Tự Nhiên, thầy cô phòng Quản lý khoa học – quan hệ quốc tế, lãnh đạo trường CĐSP Nha Trang tạo điều kiện thuận lợi để tơi hồn thành đề tài Một lần xin chân thành cảm ơn! Khánh Hòa, tháng năm 2015 Tác giả Huỳnh Thị Hồng Trang ii DANH MỤC CHỮ VIẾT TẮT ATP : Adenosine triphotphate CC : Cao cồn CN : Cao nước cs : Cộng CT : Cao toàn phần ĐTĐ : Đái tháo đường [G] : Nồng độ glucose huyết WHO : Tổ chức Y tế giới iii DANH MỤC BẢNG Số hiệu bảng Tên bảng Trang Tiêu chuẩn chẩn đoán bệnh ĐTĐ Hàm lượng cao toàn phần hoa sứ trắng 23 DANH MỤC HÌNH Số hiệu hình Tên hình Trang Cơ chế tác dụng insulin Cơ chế giải phóng insulin Cây sứ trắng 20 DANH MỤC BIỂU ĐỒ Số hiệu biểu đồ Tên biểu đồ Nồng độ đường huyết trước sau dùng insulin chế phẩm Ảnh hưởng dịch chiết hoa sứ mơ hình chuột tăng glucose huyết glucose ngoại sinh iv Trang 24 25 MỤC LỤC Chứng nhận kết nghiên cứu Lời cảm ơn Danh mục bảng, hình, biểu đồ Mục lục Phần mở đầu……………………………………… ………………….…….….… 1 Lý chọn đề tài………….……………… …………………… …….…… … Mục tiêu đề tài……………………… ………………………… …….…… … Phần nội dung Chương Tổng quan tài liệu…………… ……………………… …….…….… 1.1 Bệnh đái tháo đường………………………………… …………………….… 1.1.1 Khái niệm phân loại bệnh đái tháo đường…………………………….….… 1.1.2 Tình hình bệnh đái tháo đường giới Việt Nam…………… ……9 1.1.3 Nghiên cứu điều trị đái tháo đường thảo dược…………………………….11 1.2 Tổng quan sứ……… …………………………………………………… 14 1.2.1 Đặc điểm sinh học…………………………………………………………… 14 1.2.2 Thành phần hóa học………………………………………….……………… 15 1.2.3 Tác dụng dược lý…………………………………………….……………… 17 1.3 Giới thiệu phương pháp chiết soxhlet…………………….……………….… 18 1.3.1 Nguyên tắc chiết soxhlet……………………………………………………… 18 1.3.2 Ưu nhược điểm phương pháp chiết soxhlet……………………… … 18 Chương Đối tượng phương pháp nghiên cứu……… ………………… 20 2.1.Đối tượng nghiên cứu…………………………………………………………… 20 2.1.1 Đối tượng động vật………………………………………….……………… .20 2.1.2 Đối tượng thực vật………………………………………….……………………20 2.2.Phương pháp chuẩn bị mẫu…………………………………………………… 20 2.3.Phương pháp thí nghiệm……………………………………………………… … 20 2.3.1 Xác định hàm lượng chất khô……………………………………………… ….20 2.3.2 Phương pháp chiết cao tồn phần……………………………………………… 20 2.3.3 Phương pháp thử hoạt tính giảm đường huyết chuột thí nghiệm….…… 21 2.3.4 Định lượng đường huyết…………………………………………………….… 22 v Phần Kết thảo luận 23 Hàm lượng cao toàn phần hoa sứ trắng…………………………………………23 Tác dụng hạ đường huyết chuột thí nghiệm……………………………….… 23 2.1 Ảnh hưởng chế phẩm CT chiết nước CT chiết cồn lên nồng độ glucose huyết chuột nhắt trắng bình thường……………………………………… .23 2.2 Ảnh hưởng cao chiết hoa sứ nồng độ glucose huyết chuột nhắt trắng gây tăng đường huyết thực nghiệm glucose ngoại sinh…………………… 24 Phần Kết luận kiến nghị………………………………… ……………….….… 27 4.1 Kết luận………… ……………………………………………………………… 27 4.2 Kiến nghị………………………………… ………………………………….… 27 Tài liệu tham khảo …………………………………………………………… … …28 Phụ lục vi PHẦN MỞ ĐẦU Lý chọn đề tài Tác dụng chữa bệnh hợp chất thiên nhiên nhà hóa sinh y dược học giới quan tâm Nhiều thành tựu lĩnh vực góp phần to lớn việc bảo vệ sức khỏe người Các dược liệu từ nguồn tổng hợp sử dụng thường đắt tiền có nhiều tác dụng phụ nguy hiểm diệt tế bào máu, tế bào miễn dịch tế bào niêm mạc ruột Do vậy, xu hướng tìm kiếm khai thác giá trị hoạt chất thiên nhiên có nguồn gốc thảo mộc, có tác dụng tương tự thuốc tổng hợp an toàn cho người sử dụng độc dễ dung nạp Vấn đề thu hút ý nhiều nhà nghiên cứu nhiều quốc gia giới [19] Đã từ lâu người biết đái tháo đường (ĐTĐ) bệnh rối loạn chuyển hóa biến chứng mà gây gần làm sáng tỏ Từ năm 90 kỷ XX, chuyên gia y tế dự báo “Thế kỷ 21 kỷ bệnh rối loạn chuyển hố” Bệnh ĐTĐ gây nhiều biến chứng nguy hiểm nguyên nhân gây nhồi máu tim, đột quỵ, suy thận giai đoạn cuối mù lòa…Bệnh ĐTĐ xem “đại dịch” nước phát triển [1] Việc sử dụng thực phẩm bổ sung có nguồn gốc từ thiên nhiên cho bệnh nhân ĐTĐ có tác dụng phối hợp với việc điều trị thuốc Việt Nam ta sở hữu nguồn tài nguyên thực vật nói chung, tài nguyên thực vật chứa hợp chất tự nhiên có hoạt tính sinh học nói riêng đa dạng Đây nguồn dược liệu quý, tiềm năng, có giá trị kinh tế xã hội lớn lao Ngày nay, với phát triển ngành sinh học, hóa học hợp chất tự nhiên dược học, hàng chục ngàn hoạt chất có cỏ phát hiện, nghiên cứu, chế biến làm thuốc chữa bệnh [11] Có thể nói, nguồn hợp chất tự nhiên có hoạt tính sinh học mà cỏ có khả sinh tổng hợp tích lũy vơ to lớn hiểu biết người phần nhỏ nhiều hạn chế Do đó, việc tìm kiếm, khai thác giá trị hợp chất thiên nhiên có nguồn gốc thảo mộc sử dụng việc bảo vệ sức khỏe người trở nên cần thiết Một số thực vật có tác dụng trị bệnh sứ trắng Vỏ có tác dụng tẩy, lợi tiểu sát trùng, dùng chữa chứng bệnh táo bón lâu ngày, thủy thũng, bí tiểu [2] Hoa có tác dụng hạ huyết áp nhanh tương đối bền vững [10] Tại Trung Quốc, hoa sứ sử dụng loại trà thảo dược Tại Nam Phi, sứ 24 loài thực vật dùng để điều trị đái tháo đường Ngoài ra, sứ sử dụng y học truyền thống người Togo để điều trị bệnh đái tháo đường vết thương Xuất phát từ vấn đề với tìm hiểu thực tế, để góp phần bổ sung thêm hoạt tính sinh học hoa sứ trắng làm phong phú thêm nguồn dược liệu hỗ trợ điều trị bệnh đái tháo đường; chúng tơi thực đề tài: “Xác định hoạt tính giảm đường huyết dịch chiết từ hoa sứ trắng (Plumeria rubra L var acutifolia (Poir.) Bailey) Khánh Hòa” Mục tiêu đề tài: Xác định khả làm giảm số đường huyết dịch chiết từ hoa sứ trắng thông qua thử nghiệm chuột nhắt trắng Mục tiêu cụ thể: - Xác định hàm lượng cao toàn phần chiết nước cất chiết ethanol làm chế phẩm để thử hoạt tính - Xác định hoạt tính hạ đường huyết loại cao chiết chuột - Xác định khả ức chế hấp thu glucose ngoại sinh loại cao chiết từ hoa sứ chuột thí nghiệm PHẦN NỘI DUNG Chương TỔNG QUAN 1.1 BỆNH ĐÁI THÁO ĐƯỜNG 1.1.1 Khái niệm phân loại bệnh đái tháo đường 1.1.1.1 Khái niệm Danh từ bệnh ĐTĐ (Diabetes mellitus) có nguồn gốc từ tiếng Hy Lạp (diabetes: nước chảy ống siphon) tiếng La Tinh (mellitus: ngọt), danh từ y học Việt Nam dịch diabetes mellitus ĐTĐ Theo tổ chức Y tế Thế giới (WHO), ĐTĐ “một hội chứng có đặc tính biểu tăng glucose máu hậu việc thiếu/hoặc hồn tồn insulin có liên quan đến suy yếu tiết hoạt động insulin” [30] Còn theo Hiệp hội ĐTĐ Hoa Kỳ đưa định nghĩa ĐTĐ: “là bệnh rối loạn mạn tính, có thuộc tính sau: tăng glucose máu; kết hợp với bất thường chuyển hóa carbohydrate, lipid protein; bệnh ln gắn với xu hướng phát triển bệnh lý thận, mắt, thần kinh bệnh tim mạch khác” Các chuyên gia thuộc Ủy ban chẩn đoán phân loại bệnh ĐTĐ Hoa Kỳ đưa định nghĩa ĐTĐ: “là nhóm bệnh chuyển hóa có đặc điểm tăng glucose máu, hậu thiếu hụt tiết insulin, khiếm khuyết hoạt động insulin, hai” Nói tóm lại: “ĐTĐ tình trạng rối loạn chuyển hóa phức tạp nhiều nguyên nhân, đặc trưng tăng glucose máu, khiếm khuyết tiết insulin, và/hoặc đề kháng insulin Tình trạng tăng đường huyết mạn tính gây tổn thương nhiều quan mắt, thận, thần kinh, tim mạch máu” [1, 20] Bảng 1.1 thể tiêu chuẩn chẩn đoán bệnh ĐTĐ, Hiệp hội ĐTĐ Mỹ kiến nghị năm 1997 nhóm chuyên gia bệnh ĐTĐ WHO công nhận vào năm 1998, tuyên bố áp dụng vào năm 1999 [7] Bảng Tiêu chuẩn chẩn đoán bệnh ĐTĐ Đường huyết tương >200mg/dl (11,1 mmol/l) kèm triệu chứng tiểu nhiều, uống nhiều, sụt cân Đường huyết lúc đói > 126mg/dl (7,0 mmol/l) sau lần thử