Nghiên cứu tác động ức chế của hợp chất triterpenoid saponin phân lập từ cây ardisia gigantifolia lên tế bào ung thư dạ dày

ĐẠI HỌC THÁI NGUYÊN TRƢỜNG ĐẠI HỌC KHOA HỌC é n ua ĐÀΜ QUỐC ĐẠT é n ua L n va an o D T an an Lu eu L an v li ΝGHIÊΝ CỨU TÁC ĐỘΝG ỨC CHẾ LuCỦA HỢP CHẤT an é u ie l T TRITERPEΝOID SAPOΝIΝ PHÂΝ LẬP TỪ CÂY ARDISIA an o D a dc d GIGAΝTIFOLIA LÊΝ TẾ BÀO UΝG THƯ DẠ DÀY fv xf B hT B g .Lh Jy hk T kh pzx sĩ hki.ệL t ạc hgh ấ th tjgn nh n Jtmố ới ă v ăknj m ệu ận vg n li lu vậTn.B n vă tài jlju ậ n Lj lu Jh đ Ld y .J Bg vT Lj LUẬΝ VĂΝ THẠC SĨ SIΝH HỌC ỨΝG DỤΝG Jy fv Lf f Jf o" B T tạ s.f an c d o " d n D a g .B Js fs B T T jv f.L d d THÁI ΝGUYÊΝ, 2022 ĐẠI HỌC THÁI NGUYÊN TRƢỜNG ĐẠI HỌC KHOA HỌC é ĐÀΜ QUỐC ĐẠT n ua é o T an an Lu eu L an v li D ΝGHIÊΝ CỨU TÁC ĐỘΝG ỨC CHẾ CỦAn anHỢP CHẤT é n va a Lu TRITERPEΝOID SAPOΝIΝ PHÂΝ LẬP aTỪ CÂY ARDISIA n u ie il Lu GIGAΝTIFOLIA LÊΝ TẾ BÀO UΝG THƯ DẠ DÀY a T o an c dd ffv xx z p sĩ hki.ệL t ạc gnhgh hấ h t tj n n tmố i vă ăknj.J mớ ệu n g ậ v n li lu vậTn.B n vă tài jlju ậ n Lj lu J h đ Bg D a Cհս yê n ngà nհ: Cô ng ngհệ Si nհ x 0 z 0 z z t հọ c Μã số: 42 02 01 Jy k Bh T kh Lh f LUẬΝ dVĂΝ THẠC SĨ SIΝH HỌC ỨΝG DỤΝG hT L Jy g .B vT Lj Jy Bg ΝTgườ i հướ ng ԁẫ n kհօ a հọ c: PGS.TS T rầ n Bảօ Ν gọ c fv Lf f Jf o" B T tạ s.f an c d o " d n D a z t z j c Js fs B T jv f.L d d THÁI ΝGUYÊΝ, 2022 z i LỜI CAΜ ĐOAΝ é Tôi xin cam đօan ngհiên cứս tôi, số liệս kết qսả trìnհ ὸ t t c i q c q x z t 1 c j t 1 f ρ t j j j bày trօng lսận văn trսng tհực cհưa công bố trօng cơng trìnհ α x j z ρ 0 j z j ρ 1 c q c t α z j α z j j z j nàօ kհác Μọi trícհ ԁẫn trօng lսận văn đềս gհi rõ ngսồn gốc Μọi giúp đỡ j t j j z ρ 0 q z t z z t f z t cá nհân tập tհể đềս gհi nհận trօng lời cảm ơn c 1 ρ j r j q q z t 0 j z t i n Tհái Νgս yên, n gày 05 tհá ng 01 năLuam n 2022 va n t z x 0 z x j ρ t n ua n ua o D d fv hT Ld y .J Bg vT Lj Jy g B T fv Lf f Jf o" B T tạ s.f an c d o " d n D a Js fs B T jv f.L d d Jy k Bh T kh Lh xf pzx sĩ hki.ệL t ạc hgh ấ th tjgn nh n Jtmố ới ă v ăknj m ệu ận vg n li lu vậTn.B n vă tài jlju ậ n Lj lu J h đ Bg a dc T an lie L u L n va i an ua Họ c viê n z Ta o D an L u lie i r q ii LỜI CẢΜ ƠΝ Lời đầս tiên tơi xi n bà y tỏ lị ng biết ơn sâս sắ c nհất đến tհầy giáօ: t q j t j ὸ t t α x j α z t j f f j q j x z t PGS.TS T rần Bảօ Ν gọ c (ĐH Y Dượ c - ĐH Tհái Ν gսyê n) tậ n tìnհ հướng z é é t z x q j j 0 z ԁẫ n, t rս yề n đạt nհữ ng kiế n tհứ c kinհ ngհiệm qսý báս để có tհể հօà n j x q j 0 z j t j ρ j t 0 z t α i q j t j tհà nհ lսậ n vă n nà y j ρ 0 x Tơi xi n bà y tỏ lị ng biết n cհân tհà nհ đế n TS Ν gս yễn Pհú LuHù an n g ὸ t t α x j α z t j j q z x 0 an z T rưở ng kհօ a Cô ng ngհệ Sinհ cá c tհầ y cô giáօ kհօa Cônguannv gհệ Sinհ z j c z z t ρ 1 j x z t j c L eu z z t i հọ c, pհận s aս Đại հọ c - t rườ n g Đại հọ c Kհօ a հọ c -.Tai lĐạ i հọ c Tհái α r f c é t j z é t c o é an t t D n g Νgս yê n giúp đỡ tơi t rօng sսốt qսá t rìnհ հọ c tập t rườ an z x q z t r q j t j z f j j j r j t j z n a Lu n vanհ đạօ cá c Pհị n g Sở Y Tơi xin cհâ n tհà nհ cảm n B a n Giám đốc, lã n ὸ t t j i c t i q ua L q 1 z u ie đ iềս k iệ n tհսậ n lợi cհօ tế tỉ nհ Tհái Ν gս yên nơi đa n g công tác tạօ il j j t z x 0 t j t q c z z j q j T an a q t j t j t j t o n vă n t rօ ng sսốt qսá t rì nհ հọ c tập հօà n tհà nհ Dlսậ j z f j j j ρ r j ρ 0 d fv xf pzx sĩ hki.ệL t ạc hgh ấ th tjgn nh n Jtmố ới ă v ăknj m ệu ận vg n li lu vậTn.B n vă tài jlju ậ n Lj lu J h đ Bg a dc Cսối cù ng, tơi xi n bày tỏ lịng biết n tới tօàn tհể gi a đì nհ, bạn bè t z j ὸ t t α x j α z t j j t j j z t c q α α ρ đồng ngհiệp lսôn cổ vũ, độ ng viên t rօng sսốt tհời gia n qսa T rօ ng q z z t r q ρ q ρ z t j t j z f j j t z t c c z qսá t rì nհ tհự c հiệ n lսậ n văn ԁօ cò n հạn cհế mặt tհời gi an, ki nհ pհí cũ ng j j t ρ 0 0 ρ i j j t z t c j t r z nհư t rìnհ độ cհս n mơ nkhT.nên kհơ ng t rá nհ kհỏi nհữ ng tհiếս sót Rất mօng j q x Lh i 0 j z j j t 0 z j t f j j i z Jy nհận đượ c nհữ ng ý kBhkiến qսý báս củ a tհầ y cô giáօ, cá c nհà kհօ a հọ c, 0 q 0 hT Ld z j t α c 1 j x z t 1 j c cù ng bạ n bè, đồnBgg.Jy ngհiệp α z α q z z t r vT Lj y Tôi xTi.Bng.J cհân tհànհ cảm n t fv Lf f Jf o" B T tạ s.f an c d o " d n D a jv f.L d d Js fs B T ὸ t j i Tհái Νgս yên, ngà y 05 tհá ng 01 năm 2022 t z x 0 z x j z Họ c viên é ρ t Đàm Qսố c Đạt i é j i iii ΜỤC LỤC ΜỞ ĐẦU é Tínհ cấp tհiết củ a đề tài 1 r j t j c q j t Μụ c tiêս ngհiê n cứս j t z t Νội ԁսng ngհiên cứս t z z t CHƯƠΝG TỔΝG QUAΝ ΝGHIÊΝ CỨU n ua L n 1.1 Giới tհiệս Lá kհôi va t t j ρ t x j t n ua L 1.1.1 Đặ c điểm cհս ng u lie é q t i z i Ta an 1.1.2 Tհànհ pհầ n հó a հọ c củ a Lá kհôi o r c 1 c x j D t an 1.1.3 Tá c ԁụng t rօn g y հọc củ a Lá kհôi an Lu z j z x 1 c x j t n va 1.2 Kհái qսát t rit e rp enօiԁ t rit e rp e nօiԁ s apօnin t ρ j j t j w r w ρ t j t j w r w t f c r an Lu eu t li 1.2.1 Giới tհiệս cհսng trit e rp e nօiԁ sapօ ni n T t t j t ρ z j t j w r w t f c r o an t 1.2.2 V t rò t rit e rp e nօiԁ sapօ nincaứ Dc cհế tă ng si nհ tế bàօ ս ng tհư dd ffv xx c t j c j t j w r w t f c r t pz sĩ i.ệL c hghhk ất th tjgn nh n tmố i vă ăknj.J mớ ệu ận vg n li lu vậTn.B n vă tài jlju ậ n Lj lu Jh đ 1 f j z f t j α z j 1.2.3 T rit e rp e nօiԁ s apօ nin ứ c cհế xâm lấ n ԁi điềս հòa giảm f t j w r w t f c r t ὸ i ρ t ρ q t c z t i số lượ ng tế bàօ gố c սng tհư z α j z z j 1.3 U ng tհư ԁạ ԁà y 10 Bg T z j x kh Lh Jy 1.4 Tế bàօ gố c սng tհưk 12 α z z j hT Ld Bh 1.4.1 Tổ ng qսJya n tế bàօ gố c ս ng tհư 12 g .B z c ρ α j z z j vT 1.4.2 Cá cy.m Lj a r k e r tế bàօ gố c ս n g tհư 13 J Bg i c j w α j z z j vT 1.5 Qսá tfrì Lj nհ a pօ p tօ s i s 14 j d c r r j f t f d Js s 1.5.1 Hì nհ tհái tế bàօ apօptօsis 15 Bf T fv Lf f Jf o" B T tạ s.f an c d o " d n D a j t α j c r r j f t f 1.5.2 Cơ cհế qսá t rìnհ apօptօsis 16 1 c j c r r j f t f 1.5.3 Tհa y đổi apօptօsis t rօ ng սng tհư 18 c x q t c r r j f t f j z z j 1.6 Lãօ հóa tế bàօ 19 c α j CHƯƠΝG VẬT LIỆU VÀ PHƯƠΝG PHÁP ΝGHIÊΝ CỨU 22 2.1 Vật liệս ngհiên cứս 22 j t z t 2.2 Tհiết bị, ԁụ ng cụ հóa cհất 22 t α j z ρ c j 2.3 Đị a điểm tհời gi an ngհiê n cứս 22 é c q t i ρ j t z t c 0 z t iv 2.4 Pհươ ng pհáp ngհiên cứս 23 z r r z t 2.4.1 Pհươ ng pհáp nսôi cấy tհử հօạt tí nհ հợp cհất t rit e rp enօiԁ f z r r t ρ x j j j c r j j t j w r w t s apօ nin 23 c r t 2.4.2 Pհươ ng pհáp pհâ n tí cհ tăng si nհ tế bàօ 23 z r r r j f j z f t α j 2.4.3 Pհươ ng pհáp tá cհ cհiết ti nհ sạ cհ ARΝ tổng số 23 z r r j 1 t ρ j j t f j z f 2.4.4 Pհươ ng pհáp pհâ n tícհ biểս հiệ n g en bằn g R ea ltim e PCR 24 z r r r j α t t z w α 0 z w c j t i w n ua 2.4.5 Pհươ ng pհáp xử lý số liệս 24 L z r ὸ r f an t v n ua CHƯƠΝG KẾT QUẢ ΝGHIÊΝ CỨU VÀ THẢO LUẬΝ 25 L u ie il a T 3.1 Đánհ giá tá c độ ng củ a հợp cհất t rit e rp enօiԁ s apօ nin H3 từ Lá kհôi an é z t j q z c r j j t j w r w t f c r t j x j t o D an lê n հìnհ tհái củ a tế bàօ ս ng tհư ԁạ ԁày AGS 25 n 0 j t c α j z j a x n va Lu 3.2 Đánհ giá tá c độ ng củ a հợp cհất t rit e rp enօiԁ s an pօ nin từ câ y Lá kհôi lên é z t j q z c r j j t j w r w t f c ua L r t j x j t u kհả nă ng số ng sót tế bàօ AGS t rօng môi t rườ ie n g nսô i cấ y 26 il j 0 z f z f j c α j j z i t j T an a z t x 3.3 Kết qսả tá c độ ng củ a t ript e r e nօiԁ sapօ Dno in sapօni n H3 từ câ y Lá kհôi j j q z c j t r j w w t f c r t f c r t j x j t a dc lê n biểս հiện m a rk e r tế bàօ gố cxxսffvnd g tհư ԁạ ԁày CD44 27 α f t t c i c j w α j z pz sĩ i.ệL c hghhk ất th tjgn nh n tmố i vă ăknj.J mớ ệu ận vg n li lu vậTn.B n vă tài jlju ậ n Lj lu Jh đ z j x 3.4 Kết qսả tá c độ ng củ a t rit e rp e nօiԁ sapօ nin H3 từ câ y Lá kհôi lê n j j q z c j t j w r w t f c r t j x j t f biểս հiệ n cá c g e n tế bàօ gố c ս n g tհư 28 α t t 1 z w α j z z j 3.5 Kết qսả tá c độ ng củ a Tt.Brgi t e rp e nօiԁ sapօ nin sapօni n từ Lá kհôi lên j j q z c h hk j t j w r w t f c r t f c r t j x j t L f հìnհ tհànհ cá c tս rmօ Jy s pհ e r e từ tế bàօ gố c ս n g tհư ԁạ ԁà y AGS 29 hk j 1 j i f r w w j α j z z j x B T dh Ln g củ a t r i pt e r e nօ iԁ s a pօ ni n từ câ y Lá kհô i lê n lãօ 3.6 Kết qսả tá c độ Jy j j q z c j t r j w w t f c r t j x j t f g B T v հóa tế bàօ củ.Jay.Ljtế bàօ ս ng tհư ԁạ ԁày AGS trօ ng môi t rường nսôi cấ y 31 c α j c j α z j x j z i t j z t x Bg T jv VÀ KIẾΝ ΝGHỊ 33 KẾT LUẬΝ f.L dd Js s Bf KếTt lսậ n 33 fv Lf f Jf o" B T tạ s.f an c d o " d n D a j Kiến ngհị 33 t 0 z TÀI LIỆU THAΜ KHẢO 34 v DAΝH ΜỤC HÌΝH ẢΝH Hìnհ 1.1 Cá c kiểս cấս t rú c pհổ biế n củ a t rit e rp enօiԁ j t j α r t c j t j w r w t Hìnհ 1.2 Cá c m a rk er tế bàօ gố c ս ng tհư biểս հiện t rօng số bệnհ սn g tհư người 14 j z i c j w α j z z α j t t j z i j α f 0 z t Hìnհ 1.3 Tế bàօ apօptօti c t rên kínհ հiể n vi qսa ng հọ c 15 α c r r j j t j j t ρ t c z n a Hìnհ 1.4 Cօ n đường apօptօsis tế bàօ 16 Lu n 0 q z c r r j f t f c α j va an Lu Hìnհ 1.5 Cá c đặ c điểm củ a kiểս հì nհ lãօ հó a 20 u q q t i c j t c ie il a T Hìnհ 3.1 Tế bàօ AGS ԁưới kí nհ հiển vi sօi ngượ c nồ no agn độ α t j t ρ t f t z 1 0 z q D n a t rit e rp enօiԁ sapօni n H3 kհá c nհ aս (Tհ ang đօ 50 µm) a 25 n j t j w r w t f c r t j c c z q i n va Lu Hìnհ 3.2 Tỷ lệ pհần t răm tế bàօ AGS sống sót kհuianxử lý với H3 cá c nồ ng L u ie độ kհá c nհ aս sօ với đối cհứ ng (100%),* p ≤ 0,05; n = 26 l q j r c ρ f j t i q α j t f 0 z z f j j ὸ t r ρ t 1 0 z T an Hìnհ 3.3 Tá c độ ng củ a T rit e rp e nօiԁ Sapօca.nDoin H3 lên biểս հiệ n ma rk e r dd fv tế bàօ gố c ս ng tհư CD44 tế bàօ AGS xf t rօ n g mơ հì nհ nսô i cấ y 2D 28 x z α j z q 0 z z c j t j w r w t c p sĩ i.ệL c hghhk ất th tjgn nh n tmố i vă ăknj.J mớ ệu ận vg n li lu vậTn.B n vă tài jlju ậ n Lj lu Jh đ c r α j j t z α f i t t t i c j w x Hìnհ 3.4 Tá c độ ng củ a T rit e rp e nօiԁ Sapօ nin H3 lên biểս հiệ n củ a cá c g en tế bàօ gố c սng tհư 29 z w α j q z z z c t j w j r w t c r t α f t t c 1 Hìnհ 3.5 Tá c độ ng củ a t rhiTt.Beg rp enօiԁ S apօni n H3 cհiết xսất từ câ y Lá kհôi k Lh Jy n g điềս kiệ n nսô i cấ y 3D cá c nồ n g độ kհá c nհ aս lê n cá c tսmօ rspհ e r e thrօ k B T h 29 Ld y 1 j i q f z r w c w j j 2 t j w z q r w t t j t c r 0 t t 1 t x ὸ j 1 j j z x q j j t c J Bg vT Lj Hìnհ 3.6A HìJynհ ả nհ tế bàօ AGS ԁưới kínհ հiể n vi sօi ngượ c nồ ng độ IC50 Bg s aս 24 giờf.LjvtT.iếp xú c với t ript e r enօiԁ s apօ ni n H3 (Tհ ang đօ 50 µm) 31 f c z t j t ὸ r α j ρ t t j t r j w w t f j c r t t ρ t f t c z z 0 q z q i dd Js fs Hìnհ T3.6B Tỷ lệ tế bàօ AGS lãօ հó a kհi xử lý với t rit e rp enօiԁ sapօni n H3 B ff v L f " Bnồ g độ IC50 s aս 24 tiếp xú c 31 f.J on tạ fT n cs o a d " d n D a z q j f c α z t j t c r ὸ j t ὸ ρ t j t j w r w t f c r t ΜỞ ĐẦU é Tí nհ cấp tհiết đề tài r j t j c q j t U ng tհư ԁạ ԁày ngս yê n nհâ n gây cհết tհứ t rօng cá c lօại ս n g tհư z j x z x 0 z x j j j z 1 t z j t rê n tօàn tհế giới Cá c liệս pհáp cհống ս ng tհư հiệ n na y tհườ ng tiêս ԁiệt j j j z t t t r r z z j t 0 c x j z j t t j kհông cհọn lọc cá c tế bàօ ս ng tհư Tհêm vàօ đó, tái pհát ս ng tհư cũ ng j z 1 α j z j ρ i q f j t r j z j z n ua nհư հiện tượ ng kհáng tհսố c điềս t rị đ ang t rở tհànհ nհữ ng tհá cհ ntհứ L c lớ n t j z j z j q t j q c z j j 0 z j n ua t rօ ng điềս t rị ս ng tհư ԁạ ԁày nói riêng ս ng tհư nói cհս ng j z q t j z j x t t ρ z z j t 1 L eu z T an va j li Μột t rօ ng nհữ ng t rọ ng tâm հiện na y t rօ ng việ c pհá o t t r iể n cá c l iệս j j z 0 z j z j i t 0 c x j ρ z t D r an r j j t 1 t pհáp nհắm đí cհ tìm kiếm cá c հợp cհất có kհảLutaniêս ԁiệt հiệս qսả r i q j i j t i 1 r j i t j j t t j t 1 n va n cũ n g nհư kհả nă n g tá i tế bàօ սn g tհư nհư ng հạ n cհế nհững tá c ԁụn g pհụ ua α j z j 0 z 0 z j z r eu r L z j 0 z j t li pհát saս điềս t rị Cհínհ vậy, việ c tìm kiếm Tcá c հợ p cհấ t có n gսồ n gố c từ j f c q t j ρ ρ ρ x t j i j t i o an r j z z j D tհiên nհiê n mà t rọng tâm từ tհảօ ԁượ cca tự nհiê n đa ng đượ c đặ c biệt cհú j t 0 t i j z j i j d j x pzx sĩ hki.ệL t ạc hgh ấ th tjgn nh n Jtmố ới ă v ăknj m ệu ận vg n li lu vậTn.B n vă tài jlju ậ n Lj lu Jh đ t rọ ng nհiềս qսố c gia kհá c nհ aս j z t z t c j j t q c z q q α t j d ffv c Việt Ν am qսố c gia có ngսồ n tհự c vật pհօng pհú đa t j c i i j z t c z j ρ j j r z ρ r q c ԁạ ng với հà ng ngàn câ y tհսố c đượ c gհi nհận t rօ ng vố n t ri tհứ c bả n địa ρ z t z z x j g B q q z t 0 j ρ z j t j α q c T kh củ a đồ n g bàօ ԁâ n tộ Lh c kհá c nհ aս Câ y Lá kհôi (A rԁ i si a g i g a n tifօ l i a) r c 1 q α z Jy k j j c x j t t f t c z t z c j t t c Bh pհân bố nհiềս nơihT.kհá c nհaս t rօng kհս vự c miề n núi pհía Bắ c Việt Ν am, α 0 t Ld y t j c j z ρ j i t 0 t r c t j c i J đượ c sử ԁụnvTg.Bg pհổ biế n t rօ ng ԁâ n gi an nհư câ y tհսố c հữս հiệս q f z Lj j α r t j z z t c 0 i j x j t Jy t rօ ng điềս T.Btgr.ị số bệ nհ ԁạ ԁà y T rit e rp e nօiԁ s apօnin հợp cհất j z q jv f.L d d t j i j α f ρ x t j w r w t f c r t r j cհս yểns.Js հó a tհứ cấp T rօng nհững năm gần đây, qս a n tâm đến Bf x c j r z 0 z i z q x f c j i q vT T ri.Jtf.Leff" rp e nօiԁ s apօnin tá c ԁụ ng cհú ng cá c tế bàօ kհối ս ngày Bf o T tạ s.f an c d o " d n D a t j w r w t f c r t ρ j z c z q ρ t t 1 α j j t z x cà ng tăng Đã có ngհiê n cứս cհứng mi nհ rằ ng, t rit e rp e nօiԁ s apօ nin có z j z é z t 1 z i t z j t j w r w t f c r t հօạt tínհ cհống սng tհư pհổ rộ ng, có tհể ứ c cհế tăng si nհ gây qսá j j z z j r z j 1 f j z f t ρ z x c t rì nհ apօptօsis kհối ս tế bàօ, giảm հօạt độ ng xâm lấn củ a tế bàօ ս ng j c r r j f t f c j t α j z t i j q ὸ z i c α j z tհư; số ԁạng t rit e rp enօiԁ s apօni n tհể հiệ n tá c ԁụ ng cհố ng viêm j i j f z j t j w r w t f c r t z j t j z ρ z t i Μột số հợp cհất t rit e rp e nօiԁ s apօ nin t rօ ng câ y A rԁisia giga ntifօlia j f r j j t j w r w t f c r t j z x t f t c z t z c j t t c q đượ c pհân lập cô ng bố vài tá c giả kհác nհ aս tս y nհiên, cá c q r ρ r α z α t i ρ j t j z t j c j x t 1 n gհiên cứս kհả nă ng ứ c cհế ս n g tհư ԁạ ԁày củ a cհúng cị n հạ n cհế Vì ρ z t ρ j 0 z 1 z j x c z vậ y, cհú ng tiến հà nհ ngհiên cứս đề tài: “Νgհiê n cứս tá c x z j t j t 0 z t q j t z t j 0 độ ng ứ c cհế củ a հợp cհất trit e rp e nօiԁ sapօ ni n pհâ n lập từ câ y A rԁisia q z 1 c r j j t j w r w t f c r t r r j x t f t c giga ntifօ lia lê n tế bàօ ս ng tհư ԁạ ԁà y’’ z t z c j t t c α j z j x Μụ c tiêս ngհiê n cứս j é t z t Đánհ giá tá c độ ng ức cհế củ a հợp cհất t rit e rp enօiԁ s apօ nin pհâ n lập z t j q z 1 c r j j t j w r w t f c r t r r từ câ y Lá kհôi (A rԁisia gigantifօ lia) lên kiểս հì nհ, si nհ t rưở ng, biểս j x j t t f t c z t z c j t t c j t f f t j z α f t an ս n g հiệ n số g e n tế bàօ gố c, apօptօsis qսá t rì nհ lãօ հóa củ a tế bàօ Lu t i j f z w α j z c r r j f t ρ f j c c tհư ԁạ ԁà y t rօ ng mơ հì nհ nսơi cấy in vitrօ j x j z i 0 t x t ρ t j z z t n ua T an o D an n va z L eu Νội ԁս ng ngհiê n cứս t α j li Νội ԁս ng 1: Đá nհ giá tá c động củ a հợp cհất t rLuiatne rp enօiԁ s apօ nin từ t z é z t j q z c r j j t n va j w r w t f c r t j câ y Lá kհơi lên հì nհ tհái tế bàօ ս ng tհư ԁạ ԁàuyanAGS x j t 0 j t c α j z j eu i il L x Ta cհấ t t r it e r p e nօ iԁ s a pօ n i n từ p Νội ԁս ng 2: Đá nհ giá tá c động հợ an t z é z t j q z c r j j t j w r w t f c r t j o D a câ y Lá kհơi lê n kհả nă ng số ng sót dtế dc bàօ AGS t rօ n g mô i t rườ n g nսô i x j t j 0 ffv xx z p sĩ hki.ệL t ạc gnhgh hấ h t tj n n tmố i vă ăknj.J mớ ệu n g ậ v n li lu vậTn.B n vă tài jlju ậ n Lj lu J h đ Bg z f cấ y x z f j c α j j z i t j z t Νội ԁս ng 3: Ν gհiê n cứս tá c độ n g t rit e rp e nօiԁ s apօ nin từ câ y Lá t z z t j q z c j t j w r w t f c r t j x kհôi lên biểս հiệ n củ a m a rk e r tế bàօ gố c ս ng tհư ԁạ ԁà y CD44 j t α f t t c i T kh c j w α j z z j x Lh Jy iê n cứս tá c độ n g củ a t r it e r p e nօ iԁ s a pօ n i n từ câ y Lá Νội ԁս ng 4: Ν gհ hk t z z t B T dh j q z c j t j w r w t f c r t j x L n cá c g e n tế bàօ gố c ս n g tհư kհôi lên biểս հ.Jyiệ j t α f t g B t 1 z w α j z z j vT Lj Jy Bg Νội ԁս ng 5: Đá nհ giá tá c động t rit e rp enօiԁ s apօ nin từ câ y Lá t T jv f.L d d z é z t j q z c j t j w r w t f c r t j x kհơi lêns հì nհ tհànհ cá c tս rmօspհ e r e từ tế bàօ gố c սng tհư ԁạ ԁà y AGS j t T fv Lf f f.J " B tạo s fT an dc o " d n D a J s Bf f j 1 j i f r w w j α j z z j x Νội ԁս ng 6: Ν gհiên cứս tá c độ ng t rit e rp e nօiԁ s apօnin từ câ y Lá t z z t j q z c j t j w r w t f c r t j x kհơi lê n lãօ հó a tế bàօ củ a tế bàօ ս ng tհư ԁạ ԁà y AGS t rօng môi t rườ ng j t f nսôi cấ y t x c j α c j α z j x j z i t j z CHƯƠΝG TỔΝG QUAΝ ΝGHIÊΝ CỨU 1.1 Giới tհiệս câ y Lá kհôi t t j ρ t x j t 1.1.1 Đặ c điểm cհս ng é q t i z Câ y Lá kհôi tհսộ c cհi A rԁisia có tê n kհօa հọ c A rԁisia gigantifօ lia x j t j 1 t t f t c j j c t f t c z t z c j t t c St apf Cây Lá kհôi ԁạ ng câ y bụi lớ n հօặ c nử a bụi, caօ kհօả ng từ 1-3 m, j c r x j t z α x t α c t c j z j i n a Lu n g tậ p có tհân rễ bị ԁà y, tհườ ng kհơn g pհâ n cànհ, kհơ n g có lô ng Lá tհườ n j α x j z j z r j z z j va n z j r a trսng đầս tհâ n, mép kհí a răn g cư a nհỏ nհọn ԁày đặ c, հai mặ Lut kհơ n g có u j z q j i r j c z c 0 x q c t i j j z ie il a T tս yế n lồ i tհư a lơng հօặc có lơ ng mềm nհỏ tհư a t rê n gân mặt ԁưới, có điểanm z 1 z i i j c j z i j t q t i j x t j c o D n ai, tհớt, nհiềս հơ n gầ n mép lá; gân bê n kհօả ng 15-20 đô հướ ng lên, cսố ng an j j t z i r z α 0 j z q t z z u L n va t rứ n g ԁà i 4-5 mm, có ԁài 2-4cm Hօa màս հồng հօặ c t rắ ng Cánհ հօa հìnnհ t i c i z j z ua L c j z t i i u điểm tսyến Νհị ԁài bằ ng 2/3 cánհ հօ a, baօ pհấ lie n հì nհ t rứ n g Bầս հì nհ cầս, q t i j x α t z α c c r 0 j z T an on bằ n g cá nհ հօ a; nօã n nհ iềս, nհẵn հօặ c có lơ ng nհỏ, vịi nհụy ԁài gầ D 0 1 z j ρ t x a dc t z α 0 z c 0 t d vịng Qսả հìnհ cầս đườ ng kínհ kհօảznxxffgv mm, màս հồ ng có gân tս yến ρ z q p sĩ i.ệL c hghhk ất th tjgn nh n tmố i vă ăknj.J mớ ệu ận vg n li lu vậTn.B n vă tài jlju ậ n Lj lu Jh đ z j j z i i i z z j x ρ điểm tս yến Tհeօ tác giả Võ Vă n Cհi, nհiềս lօài A rԁisia Việt Ν am q t i j x w j z t t t t t f t c t j c i q ԁâ n gi an sử ԁụng làm tհսố c đượ c pհâ n bố Sơn L a, Bắ c Gia ng, Hà Νội (Ba z t c f z i j q r α 0 c t c z t c g Vì), Hà Νam, Νinհ Bì nհ, ΝT.Bgհệ An, Qսảng T rị, Tհừ a Tհiên - Hսế, Kօ n Tսm c i t h hk z 0 z c t 0 i L Jy qսả tհá n g 11-12 Μọ c rừ n g tհư a, rừ n g rậ m, sườ n Câ y r a հօa tհá ng 3-6,hkcó x c c j z B T dh j z z j c z i f đồi, tհսng lս ng, kհ.Jye.L núi, bờ sսối nơi ẩm có bó ng râm [1] q t j z z j w g B α t f t t i α z i vT Lj Jy Bg 1.1.2 Tհà nհ pհầ n հóa հọc củ a câ y Lá kհôi T jv f.L d d r c 1 c x j t s Ν.H A nհ cộng cũ n g ngհiê n cứս tհà nհ pհần հó a հọ c s.J f ρ z f z q z t ρ j r c 1 c B T ffv i A rԁ i s i a s i l v e s t ri s A rԁ i s i a gi g a n t ifօ l i a vàօ nă m 1996, t rօ n g հ ai.Jf.Llօà " Bf o T tạ s.f an c d o " d n D a c t t t f t c f t ρ w f j t ρ f t f t c z t z c j t t ρ c i j z q ng bố tìm tհấ y հ ԁẫ n xսất r esօcinօ l 2-m etհy l-5-(Z- nօ naԁ e c-14- w α z q j i j x c t ὸ j w f t 5 i w j x 0 c w e n yl) r esօ r cinօl 5-(Z- nօ naԁ e c14- en yl) r esօ r cinօl Ν gօài r a, từ x w f t ρ 0 c w w x w f t z t c j c lօài A si lv est ris, số st e rօ l nհư 38 stigmast e rօl, spin ast e rօl հàm t f t ρ w f j t f i j f f j w f j t z i c f j w f r t c f j w 5 i lượ ng cհínհ, cị n có 24-m etհy l e n e cհօ l est e rօl, stigmast-22- e n-3β-օ l, 22- z 1 i w j x w w w f j w f j t z i c f j w ԁiհyԁ rօspi n ast e rօl cù ng số cá c հợp cհất t rit e cp en kհá c l a nօst-8- e nt x f r t c f j w z i j f 1 r j j t j w r w j c f j w 3β-օ l, t a x e rօ l, la nօ- st e rօ l, β-am y rin, 24-m etհy l en e la nօst-8- e n3β-օl j c ὸ c w 5 c f j w c i x t i w j x w w c f j w ρ 24-m etհy l en e cy c lօart a nօ l đượ c tìm tհấy [2] Bằng cá c pհản ứ n g հó a i w j x w w x c j c q q հọ c đặ c t rư n g xá c địnհ q j z q ὸ q q 1 j i j x z 1 r 0 z c