Xây dựng quy trình định lượng đồng thời rutin và hederacosid C trong cao chiết và một số chế phẩm trên thị trường từ Thường xuân (Hedera helix L. Araliaceae) bằng HPLC
Tài liệu hạn chế xem trước, để xem đầy đủ mời bạn chọn Tải xuống
1
/ 70 trang
THÔNG TIN TÀI LIỆU
Thông tin cơ bản
Định dạng
Số trang
70
Dung lượng
2,02 MB
Nội dung
TRƢỜNG ĐẠI HỌC LẠC HỒNG KHOA DƢỢC BÁO CÁO NGHIÊN CỨU KHOA HỌC ĐỀ TÀI: XÂY DỰNG QUY TRÌNH ĐỊNH LƢỢNG ĐỒNG THỜI RUTIN VÀ HEDERACOSID C TRONG CAO CHIẾT VÀ MỘT SỐ CHẾ PHẨM TRÊN THỊ TRƢỜNG TỪ THƢỜNG XUÂN (HEDERA HELIX L ARALIACEAE) BẰNG PHƢƠNG PHÁP SẮC KÍ LỎNG HIỆU NĂNG CAO TRƢỜNG ĐẠI HỌC LẠC HỒNG KHOA DƢỢC BÁO CÁO NGHIÊN CỨU KHOA HỌC ĐỀ TÀI: XÂY DỰNG QUY TRÌNH ĐỊNH LƢỢNG ĐỒNG THỜI RUTIN VÀ HEDERACOSID C TRONG CAO CHIẾT VÀ MỘT SỐ CHẾ PHẨM TRÊN THỊ TRƢỜNG TỪ THƢỜNG XUÂN (HEDERA HELIX L ARALIACEAE) BẰNG PHƢƠNG PHÁP SẮC KÍ LỎNG HIỆU NĂNG CAO ĐỒNG NAI, THÁNG 05/2021 ii MỤC LỤC MỤC LỤC ii DANH MỤC CHỮ VIẾT TẮT iv DANH MỤC BẢNG v DANH MỤC HÌNH vii LỜI CẢM ƠN viii ĐẶT VẤN ĐỀ CHƢƠNG TỔNG QUAN .3 1.1 THƢỜNG XUÂN 1.1.1 Đặc điểm thực vật .3 1.1.2 Thành phần hóa học [21] 1.1.3 Tác dụng dƣợc lý .9 1.2 TÌNH HÌNH NGHIÊN CỨU TRONG VÀ NGỒI NƢỚC 12 1.2.1 Tình hình nghiên cứu nƣớc 12 1.2.2 Tình hình nghiên cứu ngồi nƣớc 13 CHƢƠNG ĐỐI TƢỢNG – PHƢƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 15 2.1 ĐỐI TƢỢNG NGHIÊN CỨU, HÓA CHẤT VÀ TRANG THIẾT BỊ 15 2.1.1 Đối tƣợng nghiên cứu .15 2.1.2 Chất đối chiếu 15 2.1.3 Dung mơi hóa chất .15 2.1.4 Trang thiết bị 15 2.2 PHƢƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 16 2.2.1 Xây dựng thẩm định quy trình định lƣợng đồng thời rutin HdC số chế phẩm thị trƣờng từ Thƣờng Xuân phƣơng pháp HPLC [7] 16 2.2.2 Khảo sát thực vật học Thƣờng Xuân trồng Đà Lạt 21 2.2.3 Xây dựng thẩm định quy trình định lƣợng đồng thời rutin HdC cao Thƣờng Xuân trồng Đà Lạt phƣơng pháp HPLC [18],[24] 21 CHƢƠNG KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU 26 iii 3.1 XÂY DỰNG VÀ THẨM ĐỊNH QUY TRÌNH ĐỊNH LƢỢNG ĐỒNG THỜI RUTIN VÀ HDC TRONG MỘT SỐ CHẾ PHẨM TRÊN THỊ TRƢỜNG TỪ THƢỜNG XUÂN BẰNG PHƢƠNG PHÁP HPLC 26 3.1.1 Xây dựng quy trình định lƣợng đồng thời rutin HdC số chế phẩm thị trƣờng từ Thƣờng Xuân 26 3.1.2 Thẩm định quy trình định lƣợng đồng thời rutin HdC số chế phẩm thị trƣờng từ Thƣờng Xuân .27 3.1.3 Ứng dụng quy trình định lƣợng số chế phẩm siro lƣu hành thị trƣờng 37 3.2 KHẢO SÁT THỰC VẬT HỌC LÁ THƢỜNG XUÂN Ở ĐÀ LẠT 37 3.3 XÂY DỰNG VÀ THẨM ĐỊNH QUY TRÌNH ĐỊNH LƢỢNG ĐỒNG THỜI RUTIN VÀ HDC TRONG CAO LÁ THƢỜNG XUÂN BẰNG PHƢƠNG PHÁP HPLC 43 3.3.1 Chiết cao Thƣờng xuân trồng Đà Lạt 43 3.3.2 Xây dựng quy trình định lƣợng đồng thời rutin HdC cao Thƣờng Xuân 43 3.3.3 Thẩm định quy trình định lƣợng đồng thời rutin HdC cao Thƣờng Xuân 44 CHƢƠNG KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ 55 4.1 KẾT LUẬN 55 4.2 KIẾN NGHỊ 56 TÀI LIỆU THAM KHẢO 57 iv DANH MỤC CHỮ VIẾT TẮT Chữ viết tắt 13 C-NMR Tiếng Anh 13 C Nuclear Magnetic Resonance Tiếng Việt Phổ cộng hƣởng từ hạt nhân 13C H-NMR Proton Nuclear Magnetic Resonance Phổ cộng hƣởng từ hạt nhân proton 1H DEPT Distortionless Enhancement by Polarisation Transfer HdC HMBC Hederacosid C Heteronuclear Multiple Bond Correlation HPLC High Performance Liquid Sắc ký lỏng hiệu cao Chromatography HSQC Heteronuclear Single Quantum Coherence IR InfraRed Quang phổ hồng ngoại MIC Minimum Inhibitory Concentration Nồng độ tối thiểu ức chế vi khuẩn MS Mass Spectrometry Khối phổ RSD (%) Relative Standard Deviation Độ lệch chuẩn tƣơng đối SD Standard Deviation Độ lệch chuẩn TB Trung bình TX Thƣờng xuân UV Ultraviolet Tia tử ngoại C.33.44.55.54.78.65.5.43.22.2.4 22.Tai lieu Luan 66.55.77.99 van Luan an.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.22 Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an C.33.44.55.54.78.65.5.43.22.2.4 22.Tai lieu Luan 66.55.77.99 van Luan an.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.22 Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an v DANH MỤC BẢNG Bảng 1.1 Thành phần hóa học TX Bảng 2.1 Danh mục dung môi hóa chất sử dụng phân tích .15 Bảng 2.2 Danh mục thiết bị sử dụng phân tích 15 Bảng 2.3 Các dung dịch khảo sát tính tuyến tính 18 Bảng 2.4 Các dung dịch khảo sát độ 20 Bảng 2.5 Các dung dịch khảo sát tính tuyến tính 23 Bảng 2.6 Các dung dịch khảo sát độ 25 Bảng 3.1 Kết xác định tính tƣơng thích hệ thống rutin siro .27 Bảng 3.2 Kết xác định tính tƣơng thích hệ thống HdC siro .28 Bảng 3.3 Kết xác định phƣơng trình hồi quy hệ số tuyến tính 29 rutin siro 29 Bảng 3.4 Kết xác định phƣơng trình hồi quy hệ số tuyến tính 30 HdC siro 30 Bảng 3.5 Kết xác định độ lặp lại rutin siro .32 Bảng 3.6 Kết xác định độ lặp lại HdC siro .32 Bảng 3.7 Kết xác định độ xác trung gian rutin siro 33 Bảng 3.8 Kết xác định độ xác trung gian HdC siro 34 Bảng 3.9 Kết xác định độ rutin siro 35 Bảng 3.10 Kết xác định độ HdC siro .36 Bảng 3.11 Kết hàm lƣợng rutin hederacosid C số siro .37 Bảng 3.12 Kết xác định tính tƣơng thích hệ thống rutin cao TX 45 Bảng 3.13 Kết xác định tính tƣơng thích hệ thống HdC cao TX 45 Bảng 3.14 Kết xác định phƣơng trình hồi quy hệ số tuyến tính rutin cao TX 47 Bảng 3.15 Kết xác định phƣơng trình hồi quy hệ số tuyến tính HdC cao TX 48 Bảng 3.16 Kết xác định độ lặp lại rutin cao TX 50 Bảng 3.17 Kết xác định độ lặp lại HdC cao TX 50 Bảng 3.18 Kết xác định độ xác trung gian rutin cao TX 51 Bảng 3.19 Kết xác định độ xác trung gian HdC cao TX 52 Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd 77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77t@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd 77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77t@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn C.33.44.55.54.78.65.5.43.22.2.4 22.Tai lieu Luan 66.55.77.99 van Luan an.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.22 Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an C.33.44.55.54.78.65.5.43.22.2.4 22.Tai lieu Luan 66.55.77.99 van Luan an.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.22 Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an vi Bảng 3.20 Kết xác định độ rutin cao TX .53 Bảng 3.21 Kết xác định độ HdC cao TX .54 Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd 77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77t@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd 77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77t@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn C.33.44.55.54.78.65.5.43.22.2.4 22.Tai lieu Luan 66.55.77.99 van Luan an.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.22 Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an C.33.44.55.54.78.65.5.43.22.2.4 22.Tai lieu Luan 66.55.77.99 van Luan an.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.22 Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an vii DANH MỤC HÌNH Hình 1.1 Cây Thƣờng xuân .3 Hình 1.2 Cụm Thƣờng Xuân Hình 1.3 Phản ứng thủy phân hederacosid C thành α-hederin 10 Hình 3.1 Sắc kí đồ mẫu thử (1), mẫu đối chiếu (2) mẫu dung mơi (3) 29 Hình 3.1 Đƣờng biểu diễn tƣơng quan tuyến tính nồng độ diện tích pic rutin siro 30 Hình 3.2 Đƣờng biểu diễn tƣơng quan tuyến tính nồng độ diện tích pic HdC siro 31 Hình 3.3 Đoạn thân Thƣờng xuân thu hái Đà Lạt 38 Hình 3.4 Vi phẫu cắt ngang thân TX .39 Hình 3.5 Vi phẫu góc thân TX 39 Hình 3.6 Cấu tạo giải phẫu thân Thƣờng xuân .40 Hình 3.7 Vi phẫu cắt ngang gân giữ Thƣờng xuân .41 Hình 3.8 Vi phẫu phiến Thƣờng xuân 41 Hình 3.9 Vi phẫu cắt ngang toàn phần gỗ cuống Thƣờng xuân 42 Hình 3.10 Các cấu tử bột dƣợc liệu Thƣờng xuân 43 Hình 3.11 Sắc kí đồ mẫu hỗn hợp đối chiếu (1) mẫu thử cao TX (2) 47 Hình 3.12 Đƣờng biểu diễn tƣơng quan tuyến tính nồng độ diện tích pic rutin 48 Hình 3.13 Đƣờng biểu diễn tƣơng quan tuyến tính nồng độ diện tích pic HdC 49 Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd 77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77t@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd 77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77t@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn C.33.44.55.54.78.65.5.43.22.2.4 22.Tai lieu Luan 66.55.77.99 van Luan an.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.22 Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an C.33.44.55.54.78.65.5.43.22.2.4 22.Tai lieu Luan 66.55.77.99 van Luan an.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.22 Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an viii LỜI CẢM ƠN Đầu tiên, em xin gửi lời cảm ơn chân thành tri ân sâu sắc đến Thầy Cô khoa Dƣợc trƣờng đại học Lạc Hồng, đặc biệt Thầy Cơ mơn Hóa phân tích – Kiểm nghiệm, mơn Bào chế môn Thực vật dƣợc giúp đỡ tạo điều kiện tốt để em hoàn thành đề tài báo cáo tốt nghiệp Em xin chân thành cảm ơn Thầy Th.S Nguyễn Việt Cƣờng Thầy Ds Võ Văn Lệnh nhiệt tình hƣớng dẫn, giúp đỡ em tìm tài liệu liên quan, nhƣ giúp chỉnh sửa thiếu sót q trình em thực đề tài nghiên cứu Trong trình học tập làm báo cáo khó tránh khỏi sai sót, mong Thầy, Cơ bỏ qua giúp em hồn thiện Đồng thời trình độ lý luận nhƣ kinh nghiệm thực tiễn hạn chế nên báo cáo có thiếu sót, em mong nhận đƣợc ý kiến đóng góp từ phía Thầy, Cơ để em học thêm đƣợc nhiều kinh nghiệm hoàn thành tốt Em xin chân thành cảm ơn! Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd 77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77t@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd 77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77t@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn C.33.44.55.54.78.65.5.43.22.2.4 22.Tai lieu Luan 66.55.77.99 van Luan an.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.22 Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an C.33.44.55.54.78.65.5.43.22.2.4 22.Tai lieu Luan 66.55.77.99 van Luan an.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.22 Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an ĐẶT VẤN ĐỀ Thƣờng xuân mọc tự nhiên miền Tây, miền Trung, miền Nam Châu Âu nhƣng di thực đến Bắc Mỹ Châu Á [5],[24] Cây Thƣờng xuân đƣợc sử dụng rộng rãi nhƣ loại thảo dƣợc để điều trị ho có đờm viêm phế quản mãn tính [9],[33] Các nghiên cứu xác nhận hoạt động chống co thắt, kháng khuẩn, kháng nấm, chống oxy hóa, kháng u, chống viêm chất chiết xuất từ Thƣờng xuân [23],[14] Trong đó, nhóm hợp chất chứa hoạt tính sinh học có tác dụng rõ rệt điều trị ho viêm đƣờng hơ hấp nhóm saponin flavonoid cụ thể hederacosid C, α-hederin rutin Hiện dạng bào chế từ Thƣờng xuân đƣợc quan tâm nhiều, đặc biệt dạng bào chế đƣờng uống dành cho trẻ em nhƣ siro ho, Siro ho chứa cao thƣờng xuân nhập từ châu Âu có thị phần lớn Việt Nam Để san sẻ thị phần cịn nhiều tiềm hàng loạt sản phẩm siro chứa cao Thƣờng xuân nội địa đƣợc đƣa thị trƣờng Vấn đề chất lƣợng sản phẩm chƣa đƣợc kiểm soát chặt chẽ Cụ thể, chƣa có chuyên luận siro ho từ Thƣờng xuân Dƣợc điển Việt Nam Việc xác định hàm lƣợng thành phần có hoạt tính chế phẩm thực cần thiết để đánh giá tính hiệu nghiệm an toàn chúng Mặt khác, nguồn nguyên liệu để sản xuất siro phụ thuộc hoàn toàn vào nhập khẩu, nguồn gốc khơng rõ ràng Chƣa có chuyên luận riêng để kiểm tra chất lƣợng cao nguyên liệu nhập Trong đó, Thƣờng xuân (Hedera helix L.) đƣợc di thực Việt Nam đƣợc trồng nhƣ cảnh Đà Lạt (Lâm Đồng) Tuy nhiên chƣa đƣợc nhân rộng chƣa có nhiều cơng trình nghiên cứu ứng dụng Từ lý trên, đề tài “Xây dựng quy trình định lƣợng đồng thời rutin hederacosid C cao chiết số chế phẩm thị trƣờng từ Thƣờng xuân (Hedera helix L Araliaceae) HPLC” đƣợc thực với mục tiêu cụ thể nhƣ sau: Xây dựng thẩm định quy trình định lƣợng đồng thời rutin HdC số chế phẩm siro ho thị trƣờng từ Thƣờng xuân phƣơng pháp HPLC; Khảo sát thực vật học Thƣờng xuân Đà Lạt; Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd 77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77t@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd 77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77t@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn C.33.44.55.54.78.65.5.43.22.2.4 22.Tai lieu Luan 66.55.77.99 van Luan an.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.22 Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an C.33.44.55.54.78.65.5.43.22.2.4 22.Tai lieu Luan 66.55.77.99 van Luan an.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.22 Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an 47 (2) Hình 3.11 Sắc kí đồ mẫu hỗn hợp đối chiếu (1) mẫu thử cao TX (2) Nhận xét: Dung dịch thử cho pic có thời gian lƣu tƣơng ứng với pic rutin pic HdC sắc ký đồ dung dịch đối chiếu Sắc ký đồ mẫu placebo, mẫu dung mơi khơng có pic thời gian lƣu với pic rutin pic HdC Kết luận: Quy trình định lƣợng đồng thời rutin hederacosid C cao Thƣờng xuân đạt yêu cầu tính đặc hiệu 3.3.3.3 Tính tuyến tính Chuẩn bị mẫu nhƣ mục 2.2.3.2 Tiến hành sắc ký nhƣ mô tả Kết quả: Rutin Bảng 3.14 Kết xác định phƣơng trình hồi quy hệ số tuyến tính rutin cao TX Nồng độ chất cần phân tích mẫu Diện tích pic (µg/ml) - x (mAU*s) - y 0,196 39,688 0,979 20,199 1,958 403,814 2,350 483,984 4,895 987,370 STT Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd 77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77t@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd 77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77t@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn C.33.44.55.54.78.65.5.43.22.2.4 22.Tai lieu Luan 66.55.77.99 van Luan an.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.22 Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an C.33.44.55.54.78.65.5.43.22.2.4 22.Tai lieu Luan 66.55.77.99 van Luan an.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.22 Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an 48 Phƣơng trình hồi quy: = 201,49x + 5,0105 Hệ số tƣơng quan: r2 = 0,9998 Rutin 1200.000 y = 201.49x + 5.0105 R² = 0.9998 1000.000 800.000 600.000 400.000 200.000 0.000 0.000 1.000 2.000 3.000 4.000 5.000 6.000 Hình 3.12 Đƣờng biểu diễn tƣơng quan tuyến tính nồng độ diện tích pic rutin Khảo sát đƣờng biểu diễn diện tích pic theo nồng độ phân tích rutin Độ dốc: a = 201,49 Tung độ gốc: b = 5,0105 Vì: p-value phƣơng trình = 9,47*10-7 < α = 0,05 Phƣơng trình hồi quy tƣơng thích p-value (a) = 9,47*10-7 < α = 0,05 Hệ số a có ý nghĩa thống kê p-value (b) = 0,297 > α = 0,05 Hệ số b khơng có ý nghĩa thống kê Kết luận: Vậy phƣơng trình hồi quy rutin y = 201,49x Hederacosid C Bảng 3.15 Kết xác định phƣơng trình hồi quy hệ số tuyến tính HdC cao TX Nồng độ chất cần phân tích mẫu Diện tích pic (µg/ml) - x (mAU*s) - y 3,822 43,236 19,110 207,143 STT Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd 77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77t@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd 77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77t@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn C.33.44.55.54.78.65.5.43.22.2.4 22.Tai lieu Luan 66.55.77.99 van Luan an.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.22 Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an C.33.44.55.54.78.65.5.43.22.2.4 22.Tai lieu Luan 66.55.77.99 van Luan an.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.22 Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an 49 38,220 416,215 45,864 499,902 95,550 1039,464 Phƣơng trình hồi quy: = 10,87x + 0,7973 Hệ số tƣơng quan: r2 = HdC 1200.000 1000.000 800.000 y = 10.87x + 0.7973 R² = 600.000 400.000 200.000 0.000 0.000 50.000 100.000 150.000 Hình 3.13 Đƣờng biểu diễn tƣơng quan tuyến tính nồng độ diện tích pic HdC Khảo sát đƣờng biểu diễn diện tích pic theo nồng độ phân tích HdC Độ dốc: a = 10,87 Tung độ gốc: b = 0,7973 Vì: p-value phƣơng trình = 1,18*10-5 < α = 0,05 Phƣơng trình hồi quy tƣơng thích p-value (a) = 1,18*10-5 < α = 0,05 Hệ số a có ý nghĩa thống kê p-value (b) = 0,567 > α = 0,05 Hệ số b khơng có ý nghĩa thống kê Kết luận: Vậy phƣơng trình hồi quy HdC y = 10,87x Kết luận chung: Quy trình định lƣợng đồng thời rutin hederacosid C cao Thƣờng xn có tính tuyến tính Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd 77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77t@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd 77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77t@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn C.33.44.55.54.78.65.5.43.22.2.4 22.Tai lieu Luan 66.55.77.99 van Luan an.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.22 Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an C.33.44.55.54.78.65.5.43.22.2.4 22.Tai lieu Luan 66.55.77.99 van Luan an.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.22 Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an 50 3.3.3.4 Độ lặp lại Chuẩn bị mẫu nhƣ mục 2.2.3.2 Tiến hành sắc ký nhƣ mô tả Kết quả: Rutin Bảng 3.16 Kết xác định độ lặp lại rutin cao TX Hàm lƣợng rutin cao STT Diện tích pic (mAU*s) 272,314 1,143 269,284 1,130 265,479 1,114 265,300 1,114 269,461 1,131 267,282 1,122 Trung bình 268,187 1,126 (%) SD 0,011 RSD (%) 1,005 Nhận xét: Giá trị RSD (%) kết định lƣợng hàm lƣợng rutin có mẫu thử 1,005% ≤ 2,0% Kết luận: Đạt Hederacosid C Bảng 3.17 Kết xác định độ lặp lại HdC cao TX Hàm lƣợng HdC cao STT Diện tích pic (mAU*s) 284,944 22,652 292,050 23,217 291,375 23,163 285,323 22,682 287,755 22,875 Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd 77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77t@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd 77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77t@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn (%) C.33.44.55.54.78.65.5.43.22.2.4 22.Tai lieu Luan 66.55.77.99 van Luan an.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.22 Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an C.33.44.55.54.78.65.5.43.22.2.4 22.Tai lieu Luan 66.55.77.99 van Luan an.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.22 Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an 51 284,490 22,616 Trung bình 287,656 22,868 SD 0,266 RSD (%) 1,163 Nhận xét: Giá trị RSD (%) kết định lƣợng hàm lƣợng HdC có mẫu thử 1,163% ≤ 2,0% Kết luận: Quy trình định lƣợng đồng thời rutin hederacosid C cao Thƣờng xuân đạt yêu cầu độ lặp lại 3.3.3.5 Độ xác trung gian Chuẩn bị mẫu nhƣ mục 2.2.3.2 Tiến hành sắc ký nhƣ mô tả Kết quả: Rutin Bảng 3.18 Kết xác định độ xác trung gian rutin cao TX Ngƣời phân tích 1: Trà My Ngƣời phân tích 2: Hồng Vƣơng Hệ thống HPLC-DAD: Agilent 1260 Hệ thống HPLC-DAD: Agilent 1260 Diện tích pic Hàm lƣợng rutin Diện tích pic Hàm lƣợng rutin (mAU*s) cao (%) (mAU*s) cao (%) 272,314 1,143 264,66 1,111 269,284 1,130 265,833 1,116 265,479 1,114 268,386 1,127 265,300 1,114 263,911 1,108 269,461 1,131 266,885 1,120 267,282 1,122 268,842 1,129 STT Trung bình: 1,126 (%) Trung bình: 1,118 (%) RSD (%): 1,005% RSD (%): 0,745% Kết ngƣời phân tích Trung bình: 1,122 (%) RSD (%): 0,912% Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd 77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77t@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd 77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77t@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn C.33.44.55.54.78.65.5.43.22.2.4 22.Tai lieu Luan 66.55.77.99 van Luan an.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.22 Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an C.33.44.55.54.78.65.5.43.22.2.4 22.Tai lieu Luan 66.55.77.99 van Luan an.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.22 Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an 52 Khảo sát kết định lƣợng hai kiểm nghiệm viên: Ta có: P-value = 0,225056 > α = 0,05 Kết luận: Vậy kết định lƣợng hàm lƣợng rutin cao kiểm nghiệm viên khác khơng có ý nghĩa thống kê Hederacosid C Bảng 3.19 Kết xác định độ xác trung gian HdC cao TX Ngƣời phân tích 1: Trà My Ngƣời phân tích 2: Hồng Vƣơng Hệ thống HPLC-DAD: Agilent 1260 Hệ thống HPLC-DAD: Agilent 1260 Diện tích pic Hàm lƣợng HdC Diện tích pic Hàm lƣợng HdC (mAU*s) cao (%) (mAU*s) cao (%) 284,944 22,652 285,154 22,669 292,050 23,217 280,192 22,274 291,375 23,163 288,808 22,959 285,323 22,682 282,209 22,435 287,755 22,875 287,114 22,824 284,490 22,616 282,452 22,454 STT Trung bình: 22,868 (%) Trung bình: 22,602 (%) RSD (%): 1,163% RSD (%): 1,152% Kết ngƣời phân tích Trung bình: 22,735 (%) RSD (%): 1,261% Khảo sát kết định lƣợng hai kiểm nghiệm viên: Ta có: P-value = 0,111642 > α = 0,05 Kết luận: Vậy kết định lƣợng hàm lƣợng HdC cao kiểm nghiệm viên khác khơng có ý nghĩa thống kê Kết luận chung: Quy trình định lƣợng đồng thời rutin hederacosid C cao Thƣờng xuân đạt yêu cầu độ xác trung gian 3.3.3.6 Độ Chuẩn bị mẫu nhƣ mục 2.2.3.2 Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd 77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77t@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd 77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77t@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn C.33.44.55.54.78.65.5.43.22.2.4 22.Tai lieu Luan 66.55.77.99 van Luan an.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.22 Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an C.33.44.55.54.78.65.5.43.22.2.4 22.Tai lieu Luan 66.55.77.99 van Luan an.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.22 Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an 53 Tiến hành sắc ký nhƣ mô tả Kết quả: Rutin Bảng 3.20 Kết xác định độ rutin cao TX Mức Bình định nồng độ mức 25 ml 80% 100% 120% Nồng độ chuẩn thêm vào Diện tích pic Nồng độ Tỷ lệ chuẩn tìm hồi phục thấy (%) 8A 1,566 328,727 1,541 98,38 8B 1,566 337,874 1,585 101,21 8C 1,566 333,681 1,565 99,92 TB 99,838 SD 1,417 RSD (%) 1,420 10A 1,958 419,757 1,982 101,25 10B 1,958 412,804 1,949 99,53 10C 1,958 415,427 1,961 100,18 TB 100,317 SD 0,870 RSD (%) 0,867 12A 2,350 492,629 2,336 99,41 12B 2,350 496,129 2,353 100,13 12C 2,350 495,967 2,352 100,10 TB 99,882 SD 0,408 RSD (%) 0,408 Nhận xét: Tỷ lệ phục hồi nằm khoảng 98,0% đến 102,0% giá trị RSD (%) ≤ 2,0% Kết luận: Vậy quy trình định lƣợng rutin cao TX đạt yêu cầu độ Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd 77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77t@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd 77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77t@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn C.33.44.55.54.78.65.5.43.22.2.4 22.Tai lieu Luan 66.55.77.99 van Luan an.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.22 Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an C.33.44.55.54.78.65.5.43.22.2.4 22.Tai lieu Luan 66.55.77.99 van Luan an.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.22 Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an 54 Hederacosid C Bảng 3.21 Kết xác định độ HdC cao TX Mức Bình định nồng độ mức 25 ml 80% 100% 120% Nồng độ chuẩn thêm vào Diện tích pic Nồng độ Tỷ lệ chuẩn tìm hồi phục thấy (%) 8A 30,576 339,127 30,095 98,43 8B 30,576 344,861 30,621 100,15 8C 30,576 346,876 30,806 100,75 TB 99,775 SD 1,207 RSD (%) 1,210 10A 38,220 429,552 38,398 100,47 10B 38,220 426,987 38,163 99,85 10C 38,220 423,584 37,850 99,03 TB 99,783 SD 0,719 RSD (%) 0,721 12A 45,864 511,032 45,880 100,04 12B 45,864 515,956 46,332 101,02 12C 45,864 513,989 46,152 100,63 TB 100,561 SD 0,496 RSD (%) 0,493 Nhận xét: Tỷ lệ phục hồi nằm khoảng 98,0% đến 102,0% giá trị RSD (%) ≤ 2,0% Kết luận: Vậy quy trình định lƣợng HdC cao TX đạt yêu cầu độ Kết luận chung: Quy trình định lƣợng đồng thời rutin hederacosid C cao Thƣờng xuân đạt yêu cầu độ Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd 77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77t@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd 77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77t@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn C.33.44.55.54.78.65.5.43.22.2.4 22.Tai lieu Luan 66.55.77.99 van Luan an.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.22 Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an C.33.44.55.54.78.65.5.43.22.2.4 22.Tai lieu Luan 66.55.77.99 van Luan an.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.22 Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an 55 CHƢƠNG KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ 4.1 KẾT LUẬN Sau thời gian thực đề tài, với mục tiêu đề ra, đề tài đạt đƣợc kết sau: Khảo sát quy trình định lƣợng đồng thời rutin HdC số chế phẩm thị trƣờng từ Thƣờng xuân phƣơng pháp HPLC: xây dựng đƣợc chƣơng trình gradient pha động tách riêng pic rutin pic HdC riêng khỏi pic khác đạt thông số sắc ký, quy trình định lƣợng kéo dài 33 phút Thẩm định quy trình định lƣợng đồng thời rutin HdC số chế phẩm siro thị trƣờng từ Thƣờng xuân phƣơng pháp HPLC đạt tính tƣơng thích hệ thống, tính đặc hiệu, độ lặp lại (RSD (%)rutin = 0,438%; RSD (%)HdC = 0,879%), độ xác trung gian, độ với tỷ lệ hồi phục rutin 100,46% - 101,44% HdC 99,41% - 101,06% Quy trình sau thẩm định đƣợc ứng dụng định lƣợng số chế phẩm siro thị trƣờng Kết cho thấy số siro có hàm lƣợng rutin HdC cao nhƣng có nhiều chế phẩm chứa hàm lƣợng hai hoạt chất thấp, chí khơng chứa Khảo sát mô tả đƣợc đặc điểm điển hình TX Đà Lạt (hình thái, vi phẫu, bột dƣợc liệu) So sánh đối chứng với tài liệu tham khảo cho thấy tƣơng đồng Đã xây dựng đƣợc quy trình định lƣợng đồng thời rutin HdC cao chiết từ TX Đà Lạt phƣơng pháp HPLC cho thông số sắc ký phù hợp với quy trình định lƣợng kéo dài 33 phút Thẩm định quy trình định lƣợng đồng thời rutin HdC cao chiết từ Thƣờng xuân phƣơng pháp HPLC đạt tính tƣơng thích hệ thống, tính đặc hiệu, độ lặp lại (RSD (%)rutin = 1,005; RSD (%)HdC = 1,163), độ xác trung gian, độ với tỷ lệ hồi phục rutin 98,38% - 101,25% HdC 98,43% - 101,02% Nhờ quy trình định lƣợng đồng thời rutin HdC cao chiết cho thấy hai hoạt chất mẫu cao chiết từ Thƣờng xuân trồng Đà Lạt có hàm lƣợng cao Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd 77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77t@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd 77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77t@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn C.33.44.55.54.78.65.5.43.22.2.4 22.Tai lieu Luan 66.55.77.99 van Luan an.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.22 Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an C.33.44.55.54.78.65.5.43.22.2.4 22.Tai lieu Luan 66.55.77.99 van Luan an.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.22 Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an 56 (cụ thể rutin 1,126% HdC 22,868%), hồn tồn thay nguồn ngun liệu nhập sản xuất chế phẩm từ Thƣờng xuân 4.2 KIẾN NGHỊ Tiếp tục nghiên cứu phát triển dạng chế phẩm khác từ Thƣờng xuân dùng điều trị ho Khảo sát hàm lƣợng rutin HdC mẫu Thƣờng xuân thu hái vùng khác nƣớc ta Đánh giá ảnh hƣởng điều kiện thổ nhƣỡng, khí hậu thời điểm thu hái đến hàm lƣợng rutin HdC mẫu Thƣờng xuân Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd 77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77t@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd 77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77t@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn C.33.44.55.54.78.65.5.43.22.2.4 22.Tai lieu Luan 66.55.77.99 van Luan an.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.22 Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an C.33.44.55.54.78.65.5.43.22.2.4 22.Tai lieu Luan 66.55.77.99 van Luan an.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.22 Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an 57 TÀI LIỆU THAM KHẢO Tài liệu Tiếng Việt [1] Võ Văn Chi (1997), Từ điển thuốc Việt Nam, Nhà xuất Y học Hà Nội, tr.396 [2] Võ Văn Chi, Trần Hợp (1999), Cây cỏ có ích Việt Nam – tập 1, Nhà xuất Giáo dục Việt Nam, tr.711 [3] Trịnh Thị Điệp, Nguyễn Thị Hoàng Mai, Phùng Văn Trung (2016), “Xây dựng phƣơng pháp định lƣợng đồng thời hederacosid C α-hederin Thƣờng xuân (Hedera helix L.) HPLC”, Tạp chí Dược liệu, 21(6), tr.388-393 [4] Trịnh Thị Điệp, Phạm Thị Mai Hiên (2016), “Các hợp chất triterpen flavonoid glycosid phân lập từ thƣờng xuân (Hedera helix L.) trồng Đà Lạt”, Tạp chí Dược học, 56(5), tr.65-69 Tài liệu Tiếng Anh [5] Al-Snafi A.E (2018), “Pharmacological and therapeutic activities of Hedera helix – A review”, IOSR Journal Of Pharmacy, 8(5), pp.41-53 [6] Amara-Mokrane YA, Lehucher-Michel MP, Balansard G, Duménil G, Botta A (1996), “Protective effects of alfa-hederin, chlorophyllin and ascorbic acid towards the induction of micronuclei by doxorubicin incultured human lymphocytes”, Mutagenesis, 11(2), pp.161-167 [7] Bezruk, I., Kotvitska, A., Korzh, I., Materiienko, A., Gubar, S., Budanova, L., Georgiyants, V (2020), “Combined Approach to the Choice of Chromatographic Methods for Routine Determination of Hederacosid C in Ivy Leaf Extracts, Capsules, and Syrup”, Scientia Pharmaceutica, 88(2), pp.24 [8] Cioaca C., Margineanu C., and Cucu V (1978), “The saponins of Hedera helix with antibacterial activity”, Pharmazie, 33(9), pp.609610 [9] Cwientzek, U., Ottillinger, B., Arenberger, P (2011), “Acute bronchitis therapy with ivy leaves extracts in a two-arm study A double-blind, Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd 77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77t@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd 77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77t@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn C.33.44.55.54.78.65.5.43.22.2.4 22.Tai lieu Luan 66.55.77.99 van Luan an.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.22 Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an C.33.44.55.54.78.65.5.43.22.2.4 22.Tai lieu Luan 66.55.77.99 van Luan an.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.22 Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an 58 randomised study vs an other ivy leaves extract”, Phytomedicine, 18(13), pp.1105-1109 [10] Eguale T., et al (2007), “Haemonchus contortus: in vitro and in vivo anthelmintic activity of aqueous and hydro-alcoholic extracts of Hedera helix”, Exp Parasitol, 116(4), pp.340-345 [11] Facino RM, Carini M, Stefani R, Aldini G, Saibene L (1995), “Anti-elastase and anti-hyaluronidase activitiesof saponins and sapogenins from Hedera helix, Aesculus hippocastanum, and Ruscus aculeatus: factorscontributing to their efficacy in the treatment of venous insufficiency”, Arch Pharm (Weinheim), 328(10), pp.720-724 [12] Frank Runkel, Wolfgang Schneider, Oliver Schmidt, Georg Maximilian Engelhard (2011), “Process for preparing an extract from ivy leaves”, Google Patent, US7943184B2 [13] Gepdiremen A, Mshvildadze V, Süleyman H, Elias R (2005), “Acute antiinflammatory activity of four saponinsisolated from ivy: alpha-hederin, hederasaponin-C, hederacolchiside-E and hederacolchiside-F incarrageenaninduced rat paw edema”, Phytomedicine, 12(6-7), pp.440-444 [14] Greunke C., Hage-Hülsmann A., Sorkalla T., Keksel N., Felix H (2015), “Pulmonary pharmacology & therapeutics a systematic study on the influence of the main ingredients of an ivy leaves dry extract on the β2-adrenergic responsiveness of human airway smooth muscle cells”, Pulm Pharmacol Ther., 31, pp.92-98 [15] Gruenwald J, Brendler T, Jaenicke C (2000), “PDR for Herbal Medicines Medical Economics Company”, Montvale, pp.284-285 [16] Gulcin I., et al (2004), “Antioxidant activity of saponins isolated from ivy: alpha-hederin, hederasaponin C, hederacolchiside E and hederacolchiside F”, Planta Med, 70(6), pp.561-563 Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd 77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77t@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd 77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77t@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn C.33.44.55.54.78.65.5.43.22.2.4 22.Tai lieu Luan 66.55.77.99 van Luan an.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.22 Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an C.33.44.55.54.78.65.5.43.22.2.4 22.Tai lieu Luan 66.55.77.99 van Luan an.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.22 Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an 59 [17] Hofmann D., Hecker M., and Volp A (2003), “Efficacy of dry extract of ivy leaves in children with bronchial asthma review of randomized controlled trials”, Phytomedicine, 10(2-3), pp.213-220 [18] Holzinger F and Chenot J F (2011), “Systematic review of clinical trials assessing the effectiveness of ivy leaf (Hedera helix) for acute upper respiratory tract infections”, Evid Based Complement Alternat Med., p.382789 [19] ICH harmonised tripartite guideline, Validation of analytical procedures: Text and methodology,2005 [20] Jeong H G and Park H Y (1998), “The prevention of carbon tetrachlorideinduced hepatotoxicity in mice by alpha-hederin: inhibiton of cytochrome P450 2E1 expression”, Biochem Mol Biol Int., 45(1), pp.163-170 [21] Lutsenko, Y U L I A., Bylka, W I E S Ł A W A., Matlawska, I., & Darmohray, R O M A N (2010), “Hedera helix as a medicinal plant”, Herba polonica, 56(1), pp.83-96 [22] Mendel M., et al (2011), “The effect of the whole extract of common ivy (Hedera helix) leaves and selected active substances on the motoric activity of rat isolated stomach strips”, J Ethnopharmacol, 134(3), pp.796-802 [23] Mendel, M., Chłopecka, M., Dziekan, N., Wiechetek, M (2011), “The effect of the whole extract of common ivy (Hedera helix) leaves and selected active substances on the motoric activity of rat isolated stomach strips”, J Ethnopharmacol, 134, pp.796-802 [24] Metcalfe, D J (2005), “Hedera helix L.”, Journal of Ecology, 93(3), pp.632648 [25] Miao Yu, Young June Shin, Nanyoung Kim, Guijae Yoo, SeonJu Park and Seung Hyun Kim (2015), “Determination of Saponins and Flavonoids in Ivy Leaf Extracts Using HPLC-DAD”, Journal of Chromatographic Science, 53, pp.478-483 [26] Sieben, A., Prenner, L., Sorkalla, T., Wolf, A., Jakobs, D., Runkel, F., Häberlein, H (2009), “α-Hederin, but not hederacosid c and hederagenin from Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd 77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77t@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd 77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77t@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn C.33.44.55.54.78.65.5.43.22.2.4 22.Tai lieu Luan 66.55.77.99 van Luan an.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.22 Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an C.33.44.55.54.78.65.5.43.22.2.4 22.Tai lieu Luan 66.55.77.99 van Luan an.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.22 Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an 60 Hedera helix, affects the binding behavior, dynamics, and regulation of β2adrenergic receptors”, Biochemistry, 48, pp.3477-3482 [27] Stauss-Grabo M., Atiye S., Warnke A., Wedemeyer R.S., Donath F., Blume H.H (2011), “Observational study on the tolerability and safety of film-coated tablets containing ivy extract (Prospan® Cough Tablets) in the treatment of colds accompanied by coughing”, Phytomedicine, 18, pp.433-436 [28] Suleyman H., et al (2003), “Acute and chronic antiinflammatory profile of the ivy plant, Hedera helix, in rats”, Phytomedicine, 10(5), pp.370-374 [29] Tedlaouti F G M., Delmas F, Timon-David P, Elias R, Vidal-Ollivier E, Grespin F, Balansard G (1991), “Antitrypanosomial activity of some saponins from Calendula arvensis, Hedera helix and Sapindus mukurossi”, Planta Med, 57(2), pp.A78 [30] Trute A, Gross J, Mutschler E, Nahrstedt A (1997), “In vitro antispasmodic compounds of the dry extractobtained from Hedera helix”, Planta Med, 63(2), pp.125-129 [31] Villani P, Orsière T, Sari-Minodier I, Bouvenot G, Botta A (2001), “In vitro study of the antimutagenic activity ofalphahederin”, Ann Biol Clin (Paris), 59(3), pp.285-289 [32] European Medicines Evaluation Agency (2003), European Scientific Cooperative on Phytotherapy (E/S/C/O/P) - Monographs 2nd еd., Stuttgart, pp.241-247 [33] European Medicines Agency (2017), Assessment Report on Hedera helix L., Folium [34] European Pharmacopoeia 10th (2019), EMA/HMPC/325716/2017 [35] European Pharmacopoeia 7th ed Monograph 01 (2010), EDQM Council of Europe, pp.2008-2148 Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd 77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77t@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd 77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77t@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn C.33.44.55.54.78.65.5.43.22.2.4 22.Tai lieu Luan 66.55.77.99 van Luan an.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.22 Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd 77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77t@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn