Tổng hợp xanh nano bạc từ dịch chiết lá trầu không (piper betle) và thử hoạt tính kháng khuẩn, kháng nấm

TRƯỜNG ĐẠI HỌC LẠC HỒNG KHOA DƯỢC BÁO CÁO NGHIÊN CỨU KHOA HỌC ĐỀ TÀI TỔNG HỢP XANH NANO BẠC TỪ DỊCH CHIẾT LÁ TRẦU KHÔNG (PIPER BETLE) VÀ THỬ HOẠT TÍNH KHÁNG KHUẨN, KHÁNG NẤM ĐỒNG NAI, THÁNG 07/2020 TRƯỜNG ĐẠI HỌC LẠC HỒNG KHOA DƯỢC BÁO CÁO NGHIÊN CỨU KHOA HỌC ĐỀ TÀI TỔNG HỢP XANH NANO BẠC TỪ DỊCH CHIẾT LÁ TRẦU KHÔNG (PIPER BETLE) VÀ THỬ HOẠT TÍNH KHÁNG KHUẨN, KHÁNG NẤM ĐỒNG NAI, THÁNG 07/2020 LỜI CẢM ƠN Trước hết, em xin gửi lời cảm ơn chân thành đến TS., Phó Trưởng khoa Dược Trường Đại học Lạc Hồng quan tâm theo dõi, hướng dẫn tạo điều kiện thuận lợi để em hoàn thành đề tài nghiên cứu Em xin gửi lời cảm ơn sâu sắc đến ThS tận tình giúp đỡ, dạy bảo truyền đạt cho em kiến thức quý báu suốt thời gian em thực đề tài Em xin cảm ơn quý thầy mơn Dược liệu, Hóa hữu cơ, Hóa dược, Vi sinh, Hóa phân tích – Kiểm nghiệm giúp đỡ, tạo điều kiện tốt để em hồn nghiệm khảo sát có đề tài Em xin gửi lời cảm ơn đến gia đình, người thân bạn bè tạo điều kiện vật chất lẫn tinh thần, bên, ủng hộ, động viên, giúp đỡ em suốt khoảng thời gian học giảng đường đại học q trình hồn thành tốt đề tài Tuy nhiên, với kiến thức hạn chế nên tránh khỏi thiếu sót q trình thực hiện, mong nhận lời nhận xét, góp ý q thầy để đề tài hồn thiện Xin chân thành cảm ơn Sinh viên thực i MỤC LỤC LỜI CẢM ƠN MỤC LỤC i DANH MỤC TỪ VIẾT TẮT iii DANH MỤC HÌNH ẢNH iv DANH MỤC BẢNG v MỞ ĐẦU CHƯƠNG 1: TỔNG QUAN 1.1 Tổng quan hạt nano kim loại 1.1.1 Định nghĩa .3 1.1.2 Tính chất đặc trưng hạt nano kim loại 1.1.3 Phương pháp chế tạo nano kim loại 1.2 Kim loại bạc nano bạc .7 1.2.1 Giới thiệu kim loại bạc .7 1.2.2 Tính chất hạt nano bạc 1.2.3 Hoạt tính kháng khuẩn nano bạc .9 1.2.4 Ưu điểm nano bạc 10 1.2.5 Ứng dụng nano bạc .11 1.3 Tổng quan Trầu Không 13 1.3.1 Đặc điểm chung 13 1.3.2 Thành phần hóa học 13 1.3.3 Tác dụng dược lý 13 1.4 Vi khuẩn 14 1.4.1 Cầu khuẩn 14 1.4.2 Trực khuẩn mủ xanh 14 1.4.3 Nấm Candida albicans 15 1.5 Tổng quan chất bảo vệ 15 1.5.1 Chất bảo vệ Polyvinylpyrrolidon (PVP) .15 1.5.2 Acid ascorbic (Vitamin C hay L-Ascorbic acid) 16 1.6 Tình hình nghiên cứu 17 1.6.1 Tình hình nghiên cứu ngồi nước 17 1.6.2 Tình hình nghiên cứu nước 18 C.33.44.55.54.78.65.5.43.22.2.4 22.Tai lieu Luan 66.55.77.99 van Luan an.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.22 Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an ii CHƯƠNG 2: THỰC NGHIỆM 19 2.1 Đối tượng nghiên cứu 19 2.1.1 Cao từ Trầu không 19 2.1.2 Hoá chất .19 2.1.3 Thiết bị, dụng cụ thí nghiệm 19 2.1.4 Vi khuẩn, nấm .19 2.2 Phương pháp nghiên cứu .20 2.2.1 Xây dựng quy trình tổng hợp xanh nano bạc từ cao dược liệu 20 2.2.2 Khảo sát yếu tố ảnh hưởng tới tổng hợp nano bạc 22 2.2.3 Các phương pháp phân tích kết nano bạc .24 2.2.4 Thử nghiệm hoạt tính kháng khuẩn, nấm 24 CHƯƠNG 3: KẾT QUẢ VÀ BÀN LUẬN .26 3.1 Chiết xuất dược liệu .26 3.2 Kết khảo sát yếu tố ảnh hưởng đến trình tổng hợp nano bạc 26 3.2.1 Khảo sát nồng độ dung dịch cao 26 3.2.2 Khảo sát nồng độ dung dịch bạc nitrat 28 3.2.3 Khảo sát thời gian tổng hợp nano bạc 29 3.2.4 Khảo sát nhiệt độ tổng hợp nano bạc 30 3.2.5 Khảo sát tỷ lệ bạc nitrat/PVP .32 3.2.6 Khảo sát ảnh hưởng Acid ascorbic tổng hợp nano bạc 33 3.3 Kết khảo sát điều kiện tối ưu để tổng hợp nano bạc từ dịch cao .34 3.3.1 Thông số tối ưu tổng hợp nano bạc từ dịch chiết Trầu không .34 3.3.2 Kết phổ UV-Vis 35 3.3.3 Kết chụp TEM 36 3.3.4 Đánh giá độ ổn định 37 3.4 Kết thử hoạt tính kháng khuẩn, kháng nấm 38 CHƯƠNG 4: KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ .42 TÀI LIỆU THAM KHẢO Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd 77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77t@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn C.33.44.55.54.78.65.5.43.22.2.4 22.Tai lieu Luan 66.55.77.99 van Luan an.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.22 Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an iii DANH MỤC TỪ VIẾT TẮT Chữ viết tắt Tiếng Anh Tiếng Việt DNA Deoxyribonucleic axid Acid deoxyibonucleic LCST Lower critical solution temperature MIC Minimum Inhibitory Concentration Nhiệt độ tan giới hạn Nồng độc ức chế tối PEG Polyethylene glycol PNIPAM Poly(N-isopropylacrylamide) thiểu Polyethylen glycol Poly(Nisopropylacrylamide) Tiêu chuẩn sở TCCS TEM Transmission Electron Microscopy UV-Vis Ultraviolet–Visible Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd 77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77t@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn Kính hiển vi điện tử truyền qua Phổ tử ngoại–Khả kiến C.33.44.55.54.78.65.5.43.22.2.4 22.Tai lieu Luan 66.55.77.99 van Luan an.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.22 Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an iv DANH MỤC HÌNH ẢNH Hình 1.1 Cơ chế phá vỡ màng tế bào phản ứng oxy hóa 10 Hình 1.2 Sự phức hợp PVP hạt nano bạc 15 Hình 1.3 Cơng thức cấu tạo PVP 16 Hình 1.4 Cơ chế bảo vệ PVP lên hạt nano bạc .16 Hình 1.5 Cơng thức cấu tạo Acid ascorbic 16 Hình 2.1 Sơ đồ tổng hợp nano bạc từ dung dịch cao Trầu khơng 21 Hình 2.2 Sơ đồ tổng hợp nano bạc tối ưu từ dung dịch cao Trầu khơng 22 Hình 3.1 Mẫu nano bạc tổng hợp theo nồng độ dung dịch cao 27 Hình 3.2 Phổ UV-Vis mẫu khảo sát nồng độ dung dịch cao 27 Hình 3.3 Mẫu nano bạc tổng hợp theo nồng độ dung dịch bạc nitrat 28 Hình 3.4 Phổ UV-Vis mẫu khảo sát nồng độ dung dịch bạc nitrat .28 Hình 3.5 Mẫu nano bạc tổng hợp theo thời gian 29 Hình 3.6 Phổ UV-Vis mẫu khảo sát thời gian tổng hợp nano bạc 30 Hình 3.7 Mẫu nano bạc tổng hợp theo nhiệt độ 31 Hình 3.8 Phổ UV-Vis mẫu khảo sát nhiệt độ tổng hợp nano bạc 31 Hình 3.9 Mẫu nano bạc tổng hợp tỷ lệ bạc nitrat/PVP 1% 32 Hình 3.10 Phổ UV-Vis mẫu khảo sát tỷ lệ bạc nitrat/PVP 1% .32 Hình 3.11 Phổ UV-Vis mẫu khảo sát thể tích Acid ascorbic 33 Hình 3.12 Phổ UV-Vis mẫu khảo sát thể tích dung dịch thể tích Acid ascorbic 34 Hình 3.13 Mẫu nano bạc tối ưu 35 Hình 3.14 Phổ UV-Vis dung dịch nano bạc tối ưu .35 Hình 3.15 Ảnh TEM dung dịch nano bạc tối ưu 36 Hình 3.16 Phổ UV-Vis dung dịch nano bạc tối ưu sau quan sát 37 Hình 3.17 Mẫu nano sau ngày (bên trái) 60 ngày (bên phải) 37 Hình 3.18 Kết thử hoạt tính kháng khuẩn, nấm nano bạc 38 Hình 3.19 Kết xác định MIC nano bạc chủng vi khuẩn, nấm 39 Hình 3.20 Kết xác định MIC Peniciliin G chủng vi khuẩn, nấm 40 Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd 77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77t@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn C.33.44.55.54.78.65.5.43.22.2.4 22.Tai lieu Luan 66.55.77.99 van Luan an.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.22 Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an v DANH MỤC BẢNG Bảng 1.1 Số nguyên tử lượng bề mặt hạt nano hình cầu Bảng 1.2 Số nguyên tử bạc đơn vị thể tích Bảng 3.1 Kết độ ẩm cao từ dịch chiết Trầu không 26 Bảng 3.2 Số liệu tổng hợp nano bạc theo nồng độ dung dịch cao .26 Bảng 3.3 Số liệu tổng hợp nano bạc theo nồng độ dung dịch bạc nitrat .28 Bảng 3.4 Số liệu tổng hợp nano bạc theo thời gian .29 Bảng 3.5 Số liệu tổng hợp nano bạc theo nhiệt độ 30 Bảng 3.6 Số liệu tổng hợp nano bạc theo tỷ lệ bạc nitrat/PVP 1% 32 Bảng 3.7 Số liệu tổng hợp nano bạc theo thể tích Acid ascorbic 33 Bảng 3.8 Kết thử hoạt tính kháng khuẩn, nấm nano bạc 39 Bảng 3.9 Kết xác định MIC Penicillin G chủng vi khuẩn, nấm .41 Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd 77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77t@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn C.33.44.55.54.78.65.5.43.22.2.4 22.Tai lieu Luan 66.55.77.99 van Luan an.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.22 Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an MỞ ĐẦU Việt Nam phát triển lên theo định hướng xã hội chủ nghĩa với phát triển khoa học kỹ thuật gặt hái nhiều thành công Tiêu biểu lĩnh vực công nghệ nano, ngành phát triển mạnh mẽ ứng dụng rộng rãi nhiều lĩnh vực khác như: y học, sinh học, công nghệ xúc tác, công nghệ thông tin, quang học, dệt may, mỹ phẩm… Trong hạt nano kim loại nhận quan tâm đặc biệt từ nhiều nhà nghiên cứu sở hữu đặc tính kháng khuẩn hiệu khả xúc tác cho nhiều phản ứng khác Hạt nano kim loại thường tổng hợp phương pháp khử hóa học, xạ gamma, điện hóa, laser, thủy nhiệt, vi sóng,… Mặc dù vậy, phương pháp cịn có nhiều hạn chế sử dụng hóa chất độc hại, chi phí tổng hợp hay nhu cầu lượng cao [5] Các nhà khoa học nghiên cứu để tìm phương pháp kỹ thuật sản xuất hạt nano có đặc tính tốt gần gũi lành tính với mơi trường Một phương pháp xem xét nhiều sản xuất hạt nano kim loại sử dụng sinh vật Đặc biệt thực vật với ưu điểm nguồn tài nguyên sẵn có, nhiều hoạt chất khử mạnh có hoạt tính sinh học lựa chọn hàng đầu Trong có Trầu không, thuộc khu vực Đông Nam Á với nhiều dược tính, đặc biệt hoạt tính kháng khuẩn chống oxy hoá sử dụng để tổng hợp nano kim loại nhiều nhà nghiên cứu [31] Kết hợp ưu điểm nano bạc dịch chiết từ dược liệu, đề tài “Tổng hợp xanh nano bạc từ dịch chiết Trầu không (Piper betle) thử hoạt tính kháng khuẩn, kháng nấm” thực với hai mục tiêu chính: - Tổng hợp nano bạc từ dịch chiết Trầu khơng - Khảo sát hoạt tính kháng khuẩn, xác định nồng độ ức chế tối thiểu (MIC) nano bạc tổng hợp Nội dung nghiên cứu - Nghiên cứu quy trình chiết xuất dược liệu, tiêu chuẩn hoá cao dịch chiết dược liệu thu - Tổng hợp nano bạc từ dịch chiết Trầu không khảo sát yếu tố ảnh hưởng đến trình tổng hợp nano bạc - Thử hoạt tính kháng khuẩn hệ nano bạc tổng hợp từ quy trình xây dựng Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd 77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77t@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn C.33.44.55.54.78.65.5.43.22.2.4 22.Tai lieu Luan 66.55.77.99 van Luan an.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.22 Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an Ý nghĩa khoa học thực tiễn khoá luận Kết đề tài sở khoa học cho nghiên cứu tổng hợp xanh nano bạc từ dịch chiết dược liệu, nghiên cứu ứng dụng nano bạc lĩnh vực đời sống nói chung y học nói riêng Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd 77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77t@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn C.33.44.55.54.78.65.5.43.22.2.4 22.Tai lieu Luan 66.55.77.99 van Luan an.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.22 Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an 32 3.2.5 Khảo sát tỷ lệ bạc nitrat/PVP Quá trình thực với thơng số trình bày bảng 3.6 Bảng 3.6 Số liệu tổng hợp nano bạc theo tỷ lệ bạc nitrat/PVP 1% STT Mẫu Nồng độ Nồng độ Tỷ lệ Nhiệt Thời Bước Độ dung dịch AgNO3 VAgNO3/ độ gian sóng hấp cao (%) (M) VPVP 1% (oC) (phút) (nm) thu 1% 1/10 425 2,28 3% 1/5 428 2,58 5% 428 2,52 7% 17/40 428 2,43 9% 11/20 427 1,52 0,02 3/10 60 30 Hình 3.9 Mẫu nano bạc tổng hợp tỷ lệ bạc nitrat/PVP 1% Hình 3.10 Phổ UV-Vis mẫu khảo sát tỷ lệ bạc nitrat/PVP 1% Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd 77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77t@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn C.33.44.55.54.78.65.5.43.22.2.4 22.Tai lieu Luan 66.55.77.99 van Luan an.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.22 Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an 33 Nhận xét: Khi tỷ lệ thể tích bạc nitrat/thể tích PVP 1% tăng độ hấp thu tăng dần đạt giá trị cao mẫu 3% với tỷ lệ 1/5 (Amax=2,58) bước sóng 428 nm Nếu tiếp tục tăng tỷ lệ lên 11/20 (mẫu 9%) bước sóng với độ hấp thu giảm (A=1,52) Giải thích: Ở tỷ lệ cao lượng nano bạc tạo nhiều, hạt dễ kết tụ làm giảm độ hấp thu Tiếp tục quan sát ngày, mẫu tỷ lệ 3/10-11/20 (mẫu 5-9%) có xuất tủa lắng cho thấy mẫu khơng bền Vì chọn tỷ lệ thể tích bạc nitrat/thể tích PVP 1% tối ưu tỷ lệ 1/5 tương đương mẫu 3% để đảm bảo giá trị độ hấp thu cao 3.2.6 Khảo sát ảnh hưởng Acid ascorbic tổng hợp nano bạc Q trình thực với thơng số trình bày bảng 3.7 Bảng 3.7 Số liệu tổng hợp nano bạc theo thể tích Acid ascorbic STT Mẫu Tỷ lệ Nồng Nồng VAgNO3/ độ dung độ VPVP 1% dịch cao AgNO3 (%) (%) (M) VAcid Nhiệt Thời Bước Độ ascorbic độ gian sóng hấp (ml) (oC) (phút) (nm) thu 0,05ml 0,05 440 1,45 0,1 ml 0,1 429 1,73 0,15 ml 426 1,66 0,2 ml 0,2 426 1,86 0,25 ml 0,25 423 2,51 0,02 0,15 60 30 Hình 3.11 Phổ UV-Vis mẫu khảo sát thể tích Acid ascorbic Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd 77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77t@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn C.33.44.55.54.78.65.5.43.22.2.4 22.Tai lieu Luan 66.55.77.99 van Luan an.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.22 Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an 34 Hình 3.12 Phổ UV-Vis mẫu khảo sát thể tích dung dịch thể tích Acid ascorbic Nhận xét: Khi tăng thể tích Acid ascorbic từ 0,05-0,01 ml bước sóng tăng, độ hấp thu tăng Nhưng tăng thể tích từ 0,15-0,25 ml bước sóng giảm độ hấp thu tăng, có giá trị cao 0,25 ml (Amax=2,51) với bước sóng 423 nm Giải thích: Khi tăng thể tích Acid ascorbic dung dịch nano bạc bảo vệ khỏi trình oxy hóa tích tụ giúp hạt nano có ổn định từ làm tăng độ hấp thu Trong thời gian bảo quản không thấy dung dịch có tượng bị tụ bạc, dung dịch giữ màu sắc ban đầu mẫu Vì chọn thể tích Acid ascorbic tối ưu 0,25 ml để đảm bảo giá trị độ hấp thu cao 3.3 Kết khảo sát điều kiện tối ưu để tổng hợp nano bạc từ dịch cao 3.3.1 Thông số tối ưu tổng hợp nano bạc từ dịch chiết Trầu không - Nồng độ dung dịch cao: 1% - Nồng độ dung dịch bạc nitrat: 0,02 M - Thời gian tổng hợp nano bạc: 30 phút - Nhiệt độ tổng hợp nano bạc: 60 oC - Tỷ lệ dung dịch bạc nitrat/ PVP 1%: 3% - Thể tích dung dịch Acid ascorbic: 0,25 ml Nồng độ bạc tạo thành: 351 mg/L Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd 77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77t@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn C.33.44.55.54.78.65.5.43.22.2.4 22.Tai lieu Luan 66.55.77.99 van Luan an.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.22 Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an 35 Hình 3.13 Mẫu nano bạc tối ưu 3.3.2 Kết phổ UV-Vis Hình 3.14 Phổ UV-Vis dung dịch nano bạc tối ưu Nhận xét: Mẫu nano bạc tổng hợp từ dịch chiết Trầu khơng với điều kiện tối ưu có màu vàng nâu, dung dịch bền thời gian bảo quản Phổ UV-Vis cho thấy mẫu có độ hấp thu cực đại 2,15 bước sóng 423 nm Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd 77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77t@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn C.33.44.55.54.78.65.5.43.22.2.4 22.Tai lieu Luan 66.55.77.99 van Luan an.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.22 Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an 36 3.3.3 Kết chụp TEM Hình 3.15 Ảnh TEM dung dịch nano bạc tối ưu Nhận xét: Ảnh TEM cho thấy hạt nano bạc có dạng hình tựa cầu đa giác, hạt phân bố dung dịch Sử dụng phần mềm Image Tool 3.0 để đo kích thước hạt với thang đo 100 nm cho kết sau: Các hạt nano bạc có kích thước khoảng từ 5-36 nm tập trung chủ yếu 20 nm, kích thước trung bình 20 ± nm Hiện nước chưa có cơng trình, đề tài nghiên cứu công bố tổng hợp nano bạc từ dịch chiết Trầu không Tuy nhiên giới công bố nhiều nghiên cứu đề tài Năm 2014, Zongtao Zhang cộng nghiên cứu tổng hợp nano bạc từ dịch chiết Trầu không, nghiên cứu sử dụng phổ UV-Vis để kiểm tra hạt nano tạo thành phương pháp TEM để xác định hình dạng kích thước hạt Kết cho thấy hạt nano tạo thành phân tán tốt với cấu trúc hình cầu kích thước hạt khoảng từ 10 đến 30 nm với số sai lệch Trong tổng số hạt, khoảng 20% hạt 10 nm, 50% 20 nm 30% hạt có kích thước 30 nm, bước sóng cực đại 444 nm lớn bước sóng dung dịch nano bạc nghiên cứu (423 nm) [33] Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd 77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77t@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn C.33.44.55.54.78.65.5.43.22.2.4 22.Tai lieu Luan 66.55.77.99 van Luan an.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.22 Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an 37 3.3.4 Đánh giá độ ổn định Hình 3.16 Phổ UV-Vis dung dịch nano bạc tối ưu sau quan sát Hình 3.17 Mẫu nano sau ngày (bên trái) 60 ngày (bên phải) Nhận xét: Mẫu bảo quản điều kiện thường Sau 60 ngày quan sát, mẫu nano bạc tổng hợp từ dịch chiết Trầu khơng với điều kiện tối ưu có màu vàng nâu, dung dịch bền thời gian bảo quản Phổ UV-Vis sau 60 ngày có độ hấp thu cực đại 1,99 bước sóng 423 nm cho thấy ổn định kích thước hạt hệ nano bạc tối ưu Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd 77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77t@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn C.33.44.55.54.78.65.5.43.22.2.4 22.Tai lieu Luan 66.55.77.99 van Luan an.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.22 Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an 38 3.4 Kết thử hoạt tính kháng khuẩn, kháng nấm 3.4.1 Phương pháp Kirby Bauer Hình 3.18 Kết thử hoạt tính kháng khuẩn, nấm nano bạc Chú thích A: Nồng độ dung dịch nano 100% B: Nồng độ dung dịch nano 50% C: Nồng độ dung dịch nano 25% D: Nước cất lần d: Đường kính vịng kháng khuẩn, kháng nấm Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd 77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77t@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn C.33.44.55.54.78.65.5.43.22.2.4 22.Tai lieu Luan 66.55.77.99 van Luan an.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.22 Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an 39 Bảng 3.8 Kết thử hoạt tính kháng khuẩn, nấm nano bạc Tên vi khuẩn, nấm Đường kính vịng vơ Nồng độ dung khuẩn, nấm (mm) dịch nano (%) Pseudomonas aeruginosa 13 25 Staphylococcus aureus 13 25 Candida albicans 11 25 Streptococus faecalis 10 25 Nhận xét: Kết đường kính vịng kháng khuẩn, kháng nấm cho thấy mẫu nano bạc tạo thành từ dịch cao Trầu khơng có khả ức chế phát triển chủng vi khuẩn Pseudomonas aeruginosa, Staphylococcus aureus, Streptococus faecalis chủng nấm Candida albicans nồng độ pha loãng 25% Đường kính vịng vơ khuẩn Pseudomonas aeruginosa Staphylococcus aureus lớn có đường kính 13 mm Đường kính vịng kháng chủng nấm Candida albicans 11 mm chủng vi khuẩn Streptococus faecalis thấp chủng 10 mm 3.4.2 Xác định nồng độ ức chế tối thiểu (MIC) Hình 3.19 Kết xác định MIC nano bạc chủng vi khuẩn, nấm Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd 77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77t@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn C.33.44.55.54.78.65.5.43.22.2.4 22.Tai lieu Luan 66.55.77.99 van Luan an.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.22 Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an 40 Chú thích Ống C: Ống chứng gồm vi khuẩn mơi trường pha lỗng Ống 1: Nồng độ dung dịch nano 100% Ống 2: Nồng độ dung dịch nano 80% Ống 3: Nồng độ dung dịch nano 60% Ống 4: Nồng độ dung dịch nano 40% Ống 5: Nồng độ dung dịch nano 20% Ống 6: Nồng độ dung dịch nano 10% Ống 7: Nồng độ dung dịch nano 5% Ống 8: Nồng độ dung dịch nano 2,5% Hình 3.20 Kết xác định MIC Peniciliin G chủng vi khuẩn, nấm Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd 77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77t@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn C.33.44.55.54.78.65.5.43.22.2.4 22.Tai lieu Luan 66.55.77.99 van Luan an.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.22 Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an 41 Bảng 3.9 Kết xác định MIC Penicillin G chủng vi khuẩn, nấm Tên vi khuẩn, nấm Giá trị Nồng độ Giá trị MIC dung dịch MIC nano nano penicillin G bạc(mg/L) (%) (mg/L) Pseudomonas aeruginosa 70,2 20 24.000 Staphylococcus aureus 70,2 20 0,3 Candida albicans 70,2 20 Streptococus faecalis 70,2 20 Nhận xét: Cả chủng vi khuẩn Pseudomonas aeruginosa, Staphylococcus aureus, Streptococus faecalis chủng nấm Candida albicans có nồng độ thấp ức chế phát triển ống nghiệm thứ nồng độ pha loãng 20% tương đương giá trị MIC 70,2 mg/L So sánh với MIC penicillin G cho thấy hiệu lực kháng khuẩn mẫu nano bạc mạnh chủng Pseudomonas aeruginosa Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd 77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77t@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn C.33.44.55.54.78.65.5.43.22.2.4 22.Tai lieu Luan 66.55.77.99 van Luan an.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.22 Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an 42 CHƯƠNG 4: KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ 4.1 Kết luận Sau thời gian nghiên cứu, đề tài tổng hợp thành công dung dịch nano bạc phương pháp tổng hợp xanh từ dịch chiết Trầu khơng, hợp chất polyphenol đóng vai trị vừa chất khử, vừa chất bảo vệ q trình tổng hợp Phân tích phổ UVVis cho thấy hạt nano bạc tạo thành có đỉnh hấp thu khoảng bước sóng 423440 nm Phân tích ảnh TEM, hạt nano bạc có dạng hình tựa cầu hình đa giác phân bố dung dịch Các hạt nano bạc tổng hợp từ dịch chiết Trầu không 20 ± nm Kết thử hoạt tính kháng khuẩn cho thấy dung dịch hạt nano bạc tổng hợp từ dịch chiết dược liệu Trầu khơng có hoạt tính kháng lại ba chủng vi khuẩn nấm thử nghiệm Giá trị MIC mẫu nano bạc tổng hợp ba chủng vi khuẩn Pseudomonas aeruginosa, Staphylococcus aureus, Streptococus faecalis chủng nấm Candida albicans nồng độ pha loãng 20% 70,2 mg/L Sau quan sát 60 ngày, hệ nano bạc tạo thành với điều kiện tối ưu có màu vàng nâu, dung dịch bền thời gian bảo quản Phổ UV-Vis mẫu sau 60 ngày có độ hấp thu cực đại 1,99 bước sóng 423 nm cho thấy ổn định kích thước hạt nano hệ nano bạc tối ưu 4.2 Kiến nghị Tiếp tục nghiên cứu hoàn thiện phương pháp chế tạo hạt nano bạc để thu hạt nano bạc nhỏ hơn, đồng nghiên cứu sử dụng nguồn dịch chiết từ Trầu không rễ, thân để tổng hợp hạt nano bạc Khảo sát thêm yếu tố tốc độ khuấy, độ pH để tối ưu hóa quy trình tổng hợp Nghiên cứu, phát triển số chế phẩm từ nano bạc dùng da gel, thuốc mỡ, kiểm tra hoạt tính sinh học tính kích ứng sản phẩm Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd 77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77t@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn C.33.44.55.54.78.65.5.43.22.2.4 22.Tai lieu Luan 66.55.77.99 van Luan an.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.22 Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an TÀI LIỆU THAM KHẢO Tiếng Việt [1] Cao Minh Thì, Nguyễn Việt Long, Phạm Văn Việt (2012), “Nano kim loại oxit kim loại”, Nhà xuất Khoa học Kỹ Thuật, tr 16-17 [2] Cao Văn Dư, Ngơ Hồng Minh cộng (2011), “Nghiên cứu chế tạo vật liệu nano bạc môi trường glycerin sản phẩm ứng dụng”, Báo nghiên cứu khoa học, Khoa Dược, Đại học Lạc Hồng [3] Cao Văn Dư Nguyễn Xuân Chương (2011), “Tổng hợp khảo sát tính chất hạt nano đồng môi trường glycerin sử dụng phương pháp khử hydrazin hydarat nhiệt vi sóng”, Tạp chí Khoa học Công nghệ 51 (1B), 128-137 [4] Cao Văn Dư, Nguyễn Thị Phương Phong, Nguyễn Thị Kim Phượng (2013), “Nghiên cứu tổng hợp điều chỉnh kích thước hạt nano đồng hệ glycerin/ PVP”, Tạp chí Hóa học T.51 (2C), tr 745-749 [5] Dương Đức Tiến (1996), "Phân loại Vi khuẩn lam Việt Nam", NXB Nông nghiệp, tr 503 [6] Đỗ Tất Lợi (2004), Những thuốc vị thuốc Việt Nam, NXB Y học, Hà Nội [7] Kwang- Ho Choo cộng (2018), "Tổng hợp nano bạc từ chiết xuất hạt Nho", Tạp chí Khoa học & Công nghệ Việt Nam, tr 60-62 [8] Nguyễn Đức Nghĩa (2007), Hóa Học Nano: Công nghệ vật liệu nguồn, NXB Khoa Học Tự Nhiên Công Nghệ [9] Nguyễn Thị Phương Phong (2012), “Hóa học nano”, Giáo trình giảng dạy, Trường Đại học Lạc Hồng [10] Phạm Thế Chính, “Thành phần hóa học tinh dầu trầu (Piper betle L.) trồng Hải Dương”, Tạp chí Khoa học Cơng nghệ, 72(10), p 48-52 [11] Trần Nguyễn Minh Ân cộng (2016), “Tổng hợp xanh Nano bạc từ AgNO3 dịch chiết diếp cá”, Tạp chí Khoa học ĐHQGHN: Khoa học Tự nhiên Công nghệ, Tập 32, Số (2016), tr 188-192 [12] Trương Văn Tân (2009), Khoa học Công nghệ Nano, NXB Tri Thức [13] Vũ Đình Cự, Nguyễn Xuân Chánh (2004), Công nghệ nano điều khiển đến phân tử nguyên tử, NXB Khoa học Kỹ thuật Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd 77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77t@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn C.33.44.55.54.78.65.5.43.22.2.4 22.Tai lieu Luan 66.55.77.99 van Luan an.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.22 Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an Tiếng Anh [14] Bobo, et al (2016), “Nanoparticle-Based Medicines: A Review of FDA Approved Materials and Clinical Trials to Date”, Pharm Res., 33, pp.2373-2387 [15] Deepti Singh, et al (2018) “Hydroxychavicol, a key ingredient of Piper betle induces bacterial cell death by ADN damage and inhibition of cell division” Free Radical Biology and Medicine, 120, p 62-71 [16] Diane O Inglis, Martha B Arnaud, Jonathan Binkley, Prachi Shah, “The Candida genome database incorporates multiple Candida species: multispecies search and analysis tools with curated gene and protein information for Candida albicans and Candida glabrata”, Department of Genetics, Stanford University Medical School, Stanford, CA 94305-5120, USA [17] D Jain, H Kumar Daima, “Synthesis of plant-mediated silver nanoparticles using papaya fruit extract and evaluation of their anti microbial activities”, Department of Botany, University of Rajasthan, Jaipur, 302004-12, India [18] Gini George, Jeya Jothi (2015), "In vitro screening of antibacterial and antifungal activity of Marsilea quadrifolia (Marsileaceae) Linn extract" American Journal of Phytomedicine and Clinical Therapeutics, 3(4): p 313-329 [19] Ghodsieh Bagherzade (2017) ''Green synthesis of silver nanoparticles using aqueous extract of saffron (Crocus sativus L.) wastages and its antibacterial activity against six bacteria'' Asian Pacific Journal of Tropical Biomedicine 7(3), p 227-233 [20] Jain, S., Jain, A., Kachha wah, P., & Devra, V (2015), “Synthesis and size control of copper nanoparticles and their catalytic application”, Transactions of Nonferrous Metals Society of China, 25(12), p 3995-4000 [21] K Mallikarjuna, G Narasimha (2011), “Green synthesis of silver nanoparticles using Ocimum leaf extract and their characterization”, Department of Physics, Sri Venkateswara University, Tirupati-517502, India [22] Kenneth J Ryan Ray, C George (2004), Medical microbiology [23] Kenneth Todar (2006), "Todar's online textbook of bacteriology", University of Wisconsin-Madison Department of Bacteriology Madison, Wis, USA [24] K Periyanayagam, et al (2012) “Pharmacognostical and Phyto-physicochemical profile of the leaves of Piper betle L var Pachaikodi (Piperaceae)-Valuable assessment of its quality” Asian Pacific Journal of Tropical Biomedicine, 2(2), p 506-510 Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd 77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77t@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn C.33.44.55.54.78.65.5.43.22.2.4 22.Tai lieu Luan 66.55.77.99 van Luan an.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.22 Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an [25] Mayer, F L., Wilson, D., & Hube, B (2013), “Candida albicanspathogenicity mechanisms”, Virulence, 4(2), p 119–128 [26] Mali Wirotesangthong, et al (2008), “Inhibitory effects of Piper betle on production of allergic mediators by bone marrow-derived mast cells and lung epithelial cells”, International Immunopharmacology, 8(3), p 453-457 [27] Monalisha Rath, et al (2014), “Synthesis of silver nano particles from plant extract and its application in cancer treatment: a review” International journal of plant, animal and environmental sciences 4(3): p 137-145 [28] PJ Bremer, Fletcher, GC,Osborne, C, (2004), "Staphyloccocus aureus New Zealand Institute for crop and food research limited" [29] P.K Khanna, S Gaikwad, P.V Adhyapak, N Singh,R Marimuthu (2007), “Synthesis and characterization of copper nanoparticles”, Materials Letters 61, p 47114714 [30] Ramezan Ali Ataee, et al (2014), "Determination of vancomycin minimum inhibitory concentration for ceftazidime resistant Streptococcus pneumoniae in Iran" Ann Clin Microbiol Antimicrob, 13(1), p 45-53 [31] Sarma, C., Rasane, P., Kaur, S., Singh, J., Singh, J., Gat, Y., … Dhawan, K (2018) Antioxidant and antimicrobial potential of selected varieties of Piper betle L (Betel leaf) Anais Da Academia Brasileira de Ciências [32] Shana Kelley, Ted Sargent (2012), Introduction to Nanotechnology: The New Science of Small, The Great Courses [33] Shanmuga Praba, J Jeyasundari, Y Brightson Arul Jacob, “Synthesis of silver nano particles using piper betle and its antibacterial activity”, Eur Chem Bull., 2014, 3(10), 1014-1016 [34] Srinivasan Ramanathan, et al (2016) “Piper betle and its bioactive metabolite phytol mitigates quorum sensing mediated virulence factors and biofilm of nosocomial pathogen Serratia marcescens in vitro” Journal of Ethnopharmacology 193, p 592603 [36] Zongtao Zhang, Bin Zhao, and Liming Hu, “PVP Protective Mechanism of Ultrafine Silver Powder Synthesized by Chemical Reduction Processes”, Journal of solid state chemistry 121, 105–110 (1996) article no 0015 Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd 77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77t@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn C.33.44.55.54.78.65.5.43.22.2.4 22.Tai lieu Luan 66.55.77.99 van Luan an.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.22 Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd 77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77t@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn