Nghiên cứu nhân nhanh và ra rễ in vitro của cây hà thủ ô đỏ (polygonum multiflorum thumb)

HỌC VIỆN NÔNG NGHIỆP VIỆT NAM KHOA CÔNG NGHỆ SINH HỌC - - KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP ĐỀ TÀI: “NGHIÊN CỨU NHÂN NHANH VÀ RA RỄ IN VITRO CỦA CÂY HÀ THỦ Ô ĐỎ (Polygonum multiflorum Thunb.)” HÀ NỘI – 2022 HỌC VIỆN NÔNG NGHIỆP VIỆT NAM KHOA CÔNG NGHỆ SINH HỌC - - KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP ĐỀ TÀI: “NGHIÊN CỨU NHÂN NHANH VÀ RA RỄ IN VITRO CỦA CÂY HÀ THỦ Ô ĐỎ (Polygonum multiflorum Thunb.)” Người thực : Nguyễn Trung Hiếu Mã sinh viên : 637026 Khóa : K63 Khoa : Cơng nghệ sinh học Giảng viên hướng dẫn : TS Nông Thị Huệ HÀ NỘI – 2022 LỜI CAM ĐOAN Em xin cam đoan kết số liệu đề tài “Nghiên cứu nhân nhanh rễ in vitro Hà thủ đỏ” cơng trình nghiên cứu độc lập qua việc tự nghiên cứu, tìm tài liệu với hướng dẫn TS Nông Thị Huệ khơng có chép nguồn khác, chưa có cơng bố cơng trình nghiên cứu Trong báo cáo có sử dụng số nguồn tài liệu tham khảo trích dẫn nguồn thích rõ ràng Em hồn tồn chịu trách nhiệm trước khoa Cơng nghệ sinh học, môn Công nghệ Sinh học Thực vật nhà trường cam đoan Hà Nội, ngày tháng năm 2022 Sinh viên thực Nguyễn Trung Hiếu i LỜI CẢM ƠN Lời đầu tiên, em xin cảm ơn sâu sắc tới cô TS Nông Thị Huệ tận tình hướng dẫn, phân tích tận tâm giúp đỡ suốt q trình làm khóa luận Tiếp theo, em xin gửi lời cảm ơn chân thành tới thầy khoa Cơng nghệ sinh học nói chung thầy cô Bộ môn Công nghệ Sinh học Thực vật nói riêng trực tiếp giảng dạy truyền đạt kiến thức hữu ích thời gian học tập Học viện Nông nghiệp Việt Nam Em bày tỏ lòng biết ơn đến Ban Giám đốc Học viện Nông nghiệp Việt Nam tạo điều kiện thuận lợi để tơi hồn thành đề tài Cuối cùng, em gửi lời cảm ơn đến gia đình, bạn bè, người thân bên giúp đỡ, động viên chỗ dựa tinh thần vững để hồn thành khóa luận Hà Nội, ngày tháng năm 2022 Sinh viên Nguyễn Trung Hiếu ii MỤC LỤC LỜI CAM ĐOAN i LỜI CẢM ƠN ii MỤC LỤC iii DANH MỤC BẢNG .v DANH MỤC HÌNH ẢNH vi DANH MỤC CHỮ VIẾT TẮT vii TÓM TẮT viii PHẦN 1: MỞ ĐẦU 1.1 Tính cấp thiết đề tài .1 1.2 Mục đích .2 1.3 Yêu cầu .2 PHẦN 2: TỔNG QUAN TÀI LIỆU 2.1 Giới thiệu chung hà thủ ô đỏ 2.1.1 Nguồn gốc 2.1.2 Phân loại .3 2.1.3 Công dụng Hà thủ ô đỏ 2.1.4 Đặc điểm, hình thái 2.1.5 Phân bố, sinh thái, thu hoạch 2.1.6 Tổng quan phương pháp nhân giống Hà thủ ô đỏ 2.1.7 Tổng quan chất hóa học dùng .7 2.1.8 Tình hình nhân giống in vitro nước giới PHẦN 3: VẬT LIỆU, NỘI DUNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 11 3.1 Vật liệu nghiên cứu 11 3.1.1 Vật liệu .11 3.1.2 Hóa chất dụng cụ 11 3.1.3 Địa điểm thời gian nghiên cứu 11 3.2 Nội dung phương pháp nghiên cứu .12 3.3 Phương pháp nghiên cứu 14 3.3.1 Phương pháp chuẩn bị vật liệu 14 iii 3.3.2 Phương pháp chuẩn bị mẫu nhân nhanh 14 3.3.3 Chuẩn bị môi trường MS 14 3.3.4 Phương pháp nhân nhanh quy trình thực .14 3.3.5 Phương pháp bố trí thí nghiệm xử lý số liệu .15 PHẦN 4: KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN .16 4.1 Nghiên cứu nhân nhanh in vitro chồi Hà thủ ô đỏ .16 4.1.1 Ảnh hưởng BA-αNAA đến nhân nhanh chồi in vitro Hà thủ ô đỏ .16 4.1.2 Ảnh hưởng Kinetin α-NAA đến nhân nhanh chồi in vitro Hà thủ ô đỏ .19 4.2 Nghiên cứu rễ in vitro Hà thủ ô đỏ 22 4.2.1 Ảnh hưởng α-NAA đến rễ in vitro Hà thủ ô đỏ 22 4.2.2 Ảnh hưởng THT đến rễ in vitro Hà thủ ô đỏ 25 PHẦN 5: KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ .28 5.1 Kết luận 28 5.2 Kiến nghị 28 TÀI LIỆU THAM KHẢO .29 PHỤ LỤC 31 iv DANH MỤC BẢNG Bảng 4.1: Ảnh hưởng BA-αNAA đến nhân nhanh chồi in vitro Hà thủ ô đỏ (sau tuần nuôi cấy) 16 Bảng 4.2: Ảnh hưởng Kinetin α-NAA đến nhân nhanh chồi in vitro Hà thủ ô đỏ (sau tuần nuôi cấy) 19 Bảng 4.3: Ảnh hưởng α-NAA đến khả rễ Hà thủ ô đỏ (sau tuần nuôi cấy) 22 Bảng 4.4: Ảnh hưởng THT đến rễ in vitro Hà thủ ô đỏ (sau tuần nuôi cấy) 25 v DANH MỤC HÌNH ẢNH Hình 2.1: Cây hà thủ đỏ Hình 2.2: Các phận Hà thủ ô đỏ Hình 3.1: Cây Hà thủ ô đỏ in vitro 11 Hình 4.1: Chồi Hà thủ đỏ mơi trường có bổ sung BA BA-αNAA sau tuần 18 Hình 4.2: Chồi Hà thủ đỏ mơi trường có bổ sung Kinetin αNAA sau tuần 21 Hình 4.3: Hình ảnh rễ Hà thủ đỏ môi trường bổ sung α-NAA sau tuần 24 Hình 4.4: Hình ảnh rễ Hà thủ đỏ môi trường bổ sung THT sau tuần 27 vi DANH MỤC CHỮ VIẾT TẮT αNAA Alpha Naphathaleneasetic Acid Ki Kinetin BA 6- benzyladenine MS Môi trường nuôi cấy theo Murashige Skoog (1962) THT Than hoạt tính GOT Glutamat Oxaloacetat Transaminase GPT Glutamat Pyruvat Transaminase Lux Đơn vị đo độ sáng BAP 6-benzylaminopurine TDZ Thidiazuron 2,4D 2,4-dichloropheneacetic acid vii TÓM TẮT Cây Hà thủ đỏ lồi dược liệu quý có tên sách đỏ Việt Nam cần bảo vệ Nghiên cứu tập trung vào việc nghiên cứu cơng thức khác nhằm tìm môi trường nhân nhanh rễ tốt cho Hà thủ ô đỏ cho hệ số nhân giống cao, chồi sinh trưởng khỏe mạnh, có rễ tốt khỏe nhằm tăng cường khả sống sót đưa vườn ươm Dựa kết thu thơng qua thí nghiệm nhân nuôi in vitro Hà thủ ô đỏ, rút điều kiện tối ưu bao gồm: Môi trường nhân nhanh chồi tốt nhất: MS + 1mg/L BA + 0,4mg/L αNAA với hệ số nhân chồi đạt 17,2 chồi/mẫu chiều cao trung bình 4,25cm, xanh, thân mập Môi trường rễ tốt MS + 0,25mg/L αNAA cho tỷ lệ rễ đạt 100%, chiều dài rễ trung bình 11,75cm số rễ mẫu trung bình 7,55 rễ\mẫu, rễ dài, màu trắng viii MT nền: MS Nhận xét Kết nghiên cứu bảng 4.3 cho thấy tất cơng thức có bổ sung αNAA kể công thức đối chứng không bổ sung αNAA môi trường nuôi cho tỷ lệ tạo rễ cao 90% Công thức ĐC cho tỷ lệ tạo rễ cao 95,33%, nhiên rễ hình thành có chiều dài rễ số rễ trung bình đạt thấp nhất, đạt 5,94 cm số rễ/mẫu đạt 4,74 rễ, rễ mọc thưa sẫm màu Đối với công thức có bổ sung αNAA, chiều dài rễ số rễ trung bình cải thiện đáng kể Cụ thể sau: Khi tăng nồng độ αNAA lên 0,25 mg/l số chiều dài, số lượng , tăng lên Và với mức nồng độ αNAA 0,25 mg/l cho kết vượt trội so với mẫu đối chứng công thức bổ sung αNAA khác mặt số đặc điểm, số gần gấp đôi so với mẫu đối chứng, 100% tỉ lệ rễ, chiều dài rễ trung bình 11,75 cm số rễ trung bình mẫu 7,55 rễ/mẫu Tuy nhiên, tăng tiếp nồng độ αNAA lên 0,5 – 0,75 - mg/l số chiều dài, số lượng rễ lại có xu hướng giảm dần Ở nồng độ αNAA mg/l, chiều dài rễ 9,56 cm, số lượng rễ 5,35 rễ/mẫu, rễ mọc chậm, dài, màu trắng Như nồng độ cao αNAA có tác dụng ức chế phát triển chất lượng rễ Kết tạo rễ Hà thủ ô Phạm Minh Tâm cộng (2012) cao chút so với kết nghiên cứu môi trường MS bổ sung 0,5 mg/l αNAA Kết luận bổ sung vào môi trường 0,25 mg/l αNAA thu kết tốt với 100% tỉ lệ rễ, chiều dài rễ trung bình 11,75 cm số rễ trung bình mẫu 7,55 cái, rễ mọc nhiều, dài, trắng 23 Đối chứng 0,25mg/l αNAA 0,5mg/l αNAA 0,75mg/l αNAA 1mg/l αNAA Hình 4.3: Hình ảnh rễ Hà thủ ô đỏ môi trường bổ sung α-NAA sau tuần 24 4.2.2 Ảnh hưởng THT đến rễ in vitro Hà thủ ô đỏ Với mục đích nghiên cứu ảnh hưởng THT đến khả rễ in vitro Hà thủ đỏ, thí nghiệm bố trí mơi trường MS có bổ sung THT nồng độ từ 0-1 g/l Kết nghiên cứu sau tuần thể bảng 4.4: Bảng 4.4: Ảnh hưởng THT đến rễ in vitro Hà thủ ô đỏ (sau tuần nuôi cấy) Nồng độ THT(g/l) CT Tỉ lệ rễ Chiều dài rễ (%) (cm) Số lượng rễ Đặc điểm rễ (rễ\mẫu) CT1 (ĐC) 17,00b 2,90e 1,70d Rễ thưa, ngắn, sẫm màu, mảnh CT2 0,25 17,78b 3,27d 2,17c Rễ thưa, trung bình, màu trắng, mảnh CT3 0,5 16,00b 4,75c 1,84d Rễ thưa, trung bình, màu trắng, mảnh CT4 0,75 98,33a 5,03b 4,87b Rễ nhiều, dài, màu trắng, mập CT5 100a 7,16a 5,71a Rễ nhiều, dài, màu trắng, mập LSD0,05 5,12 0,37 0,2 CV% 5,5 4,3 3,3 Ghi chú: Các ký tự a, b, c cột thể khác biệt có ý nghĩa mặt thống kê MT nền: MS Nhận xét Kết nghiên cứu bảng 4.4 cho thấy công thức có bổ sung THT với nồng độ 0,25 0,5 g/L cho tỉ lệ rễ thấp 20%, cơng thức có bổ sung THT với nồng độ 0,75 g/L cho tỉ lệ rễ cao 90% Công thức ĐC 25 cho tỷ lệ tạo rễ cao 17%, nhiên rễ hình thành có chiều dài rễ số rễ trung bình đạt thấp đạt 2,9 cm số rễ/mẫu đạt 1,7 rễ, rễ mọc thưa Các công thức bổ sung THT nồng độ 0,25 0,5 g/L rễ chậm so với công thức bổ sung THT nồng độ 0,75 g/L Đối với công thức có bổ sung THT, chiều dài rễ số rễ trung bình cải thiện đáng kể Điều cho thấy rễ dài mập khả sống sức bám vào giá thể cao Cụ thể sau: Dựa vào bảng 4.4 ta thấy tất công thức bổ sung THT nồng độ từ 0,25- 0,5 g/l số chiều dài, số lượng, tỉ lệ rễ và không khác biệt so với mẫu đối chứng, đạt mức 16 - 17,78%, dài trung bình 3,27- 4,75 cm, số rễ trung bình 1,84 - 2,27 rễ\mẫu Khi tăng tiếp nồng độ THT lên 0,75- g/l số chiều dài, số lượng, tỉ lệ rễ bắt đầu tăng nhiều rễ Đặc biệt nồng độ THT mức g/l khiến tỉ lệ rễ tăng gấp nhiều lần, 100% tỉ lệ rễ, dài trung bình 7,16 cm, số rễ trung bình 5,71 rễ\mẫu Như vậy, so sánh thí nghiệm rễ Hà thủ ô đỏ, nhận thấy việc dung αNAA 0,25 mg/L hiệu so với dùng THT 26 Đối chứng 0,25 g/L THT 0,5 g/L THT g/L THT 0,75 g/L THT Hình 4.4: Hình ảnh rễ Hà thủ ô đỏ môi trường bổ sung THT sau tuần 27 PHẦN 5: KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ 5.1 Kết luận TN1: Khi bổ sung vào môi trường mg/l BA 0,4 mg/l αNAA thu kết tốt với trung bình 17,2 chồi/mẫu chiều cao chồi trung bình 4,25 cm, xanh đậm, chồi to khỏe TN2: Khi bổ sung vào môi trường 0,5 mg/l Ki 0,2 mg/l αNAA thu kết tốt với trung bình 13 chồi/mẫu chiều cao chồi trung bình 4,25 cm, xanh, chồi to khỏe TN3: Khi bổ sung vào môi trường 0,25 mg/l αNAA thu kết tốt với 100% tỉ lệ rễ, chiều dài rễ trung bình 11,75 cm số rễ trung bình mẫu 7,55 cái, rễ mọc nhiều, dài, trắng TN4: Khi bổ sung vào môi trường g/l αNAA thu kết tốt với 100% tỉ lệ rễ, chiều dài rễ trung bình 7,16 cm số rễ trung bình mẫu 5,71 cái, rễ mọc nhiều, dài, trắng Nghiên cứu hoàn thiện quy trình nhân nhanh invitro Hà thủ ô đỏ với điều kiện tối ưu bao gồm: • Nhân nhanh mơi trường dinh dưỡng khống MS có bổ sung1mg/l BA + 0,4mg/l αNAA cho kết tốt với trung bình 17,2 chồi/mẫu chiều cao trung bình 4,25cm, xanh, thân mập • Ra rễ mơi trường dinh dưỡng khống MS có bổ sung 0,25mg/l αNAA cho kết tốt với 100% tỉ lệ rễ, chiều dài rễ trung bình 11,75cm số rễ mẫu trung bình 7,55 rễ\mẫu, rễ dài, màu trắng 5.2 Kiến nghị Tiếp tục nghiên cứu tỉ lệ sống khả sinh trưởng, phát triển in vitro giá thể môi trường đất 28 TÀI LIỆU THAM KHẢO Tài liệu tiếng Việt Bùi Ái Nhân (2021) Hà thủ ô: Tác dụng thuốc từ dược liệu.Viện Y dược cổ truyền dân tộc Bùi Văn Thắng (2017) Nhân giống in vitro Hà thủ o đỏ (Polygonum multifonum Thunb) Tạp chí khoa học công nghệ lâm nghiệp số 4-2017 Đỗ Tất Lợi (2004) Những thuốc vị thuốc Việt Nam Nhà xuất Y học Hoàng Thị Kim Hồng (2011) Nghiên cứu khả tái sinh chồi cụm chồi cấy in vitro Hà thủ ô đỏ (Polynum multiflorum thunb.) Tạp chí khoa học, Đại học Huế, số 64, 2011 Nguyễn Văn Việt (2017) Ứng dụng kĩ thuật in vitro nhân giống Trường Đại học Lâm nghiệp Phạm Minh Tâm (2012) Nghiên cứu quy trình nhân giống in vitro từ Hà thủ ô đỏ Khóa luận tốt nghiệp, Trường Đại học Nông lâm thành phố Hồ Chí Minh Phạm Thanh Huyền (2017) Nghiên cứu nhân giống Hà thủ ô đỏ [Fallopia multiflora (Thumb.) Haraldson] hom thân Tạp chí khoa học Công nghệ Nông nghiệp Việt Nam-số 4(77)2017 Trần Thị Kim Thu (2008) Nghiên cứu nhân giống invitro Hà thủ ô đỏ (Polygonum multifonum Thunb) Luận văn Thạc sĩ, trường Đại học Khoa học, Đại học Huế Trần Thị Liên (2004) Nghiên cứu xây dựng quy trình nhân giống vơ tính lồi Hà thủ kĩ thuật in vitro Luận văn Thạc sĩ Nông nghiệp, trường Đại học Nông nghiệp I, Hà Nội 10 Trương Công Phi & Nguyễn Xuyến Thành Thắng (2012) Xây dựng quy trình nhân giống invitro Hà thủ ô đỏ (Polygonum multifonum Thunb) Luận văn tốt nghiệp trường Đại học Lạc Hồng khoa Công nghệ sinh học-môi trường 11 Vũ Quốc Luận (2019) Nghiên cứu ảnh hưởng nguồn mẫu, chất điều hòa sinh trưởng hệ thống nuôi cấy lên khả nhân nhanh rễ bất định Hà Thủ Ô đỏ ni cấy in vitro Tạp chí khoa học cơng nghệ Việt Nam Tài liệu nước Bounda GA & Feng YU (2015) Review of clinical studies of Polygonum multiflorum Thunb and its isolated bioactive compounds Pharmacognosy Res 29 (2015) Jul-Sep;7(3):225-36 doi: 10.4103/0974-8490.157957 PMID: 26130933; PMCID: PMC4471648 Krishana, K P & Sanu D J (2017) Morphogenesis of Aloe vera: The “Medicinal Wonder” plant 130 Journal of Medicinal Plants Studies, 5(6), 130-134 Li-Chang lin (2003) Experiments on bud formation from the stem segment Scientific journal, 26:1467-1471 Longfei Lin, Boran Ni & Hongmei Lin (2005) Traditional usages, botany, phytochemistry, pharmacology and toxicology of Polygonum multiflorum Thunb.: A review Journal of ethnopharmacology,159:159-183 Murashige T & Skoog F (1962) A revised medium for rapid growth and bioassays with tabacco tissue culture Physiol plant,15:473-497 30 PHỤ LỤC Phụ lục 1: Các thành phần môi trường nuôi cấy Bảng 1: Môi trường MS Thành phần MS I MS II MS III Hóa chất NH4NO3 1650 KNO3 1900 CaCl2.H2O 440 MgSO4.7H2O 370 KH2PO4 170 H2BO3 6,2 MnSO4.H2O 16,9 ZnSO4.7H2O 8,6 KI 0,83 Na2MoO4.2H2O 0,25 CuSO4.5H2O 0,25 CoCl2.6H2O 0,25 FeSO4.7H2O 28 Na2EDTA 37,5 Myo – inositol MS IV Hàm lượng (mg/L) Thiamine – HCl (B1) Pyridoxine – HCl (B6) Acide Nicotinique 31 100 11 0,5 Phụ lục 2: Xử lý số liệu irisat Thí nghiệm 1: BA- NAA BALANCED ANOVA FOR VARIATE SC FILE XUAN 26/ 8/** 14:15 PAGE VARIATE V003 SC LN SOURCE OF VARIATION DF LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= CT 93.9893 23.4973 77.98 0.000 NL 693335E-01 346668E-01 0.12 0.892 * RESIDUAL 2.41068 301334 * TOTAL (CORRECTED) 14 96.4693 6.89067 BALANCED ANOVA FOR VARIATE CC FILE XUAN 26/ 8/** 14:15 PAGE VARIATE V004 CC SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= CT 1.61920 404800 35.32 0.000 NL 169381E-01 846907E-02 0.74 0.511 * RESIDUAL 916860E-01 114607E-01 * TOTAL (CORRECTED) 14 1.72782 123416 TABLE OF MEANS FOR FACTORIAL EFFECTS FILE XUAN 26/ 8/** 14:15 PAGE MEANS FOR EFFECT CT CT NOS 3 3 SC 10.4667 11.2000 13.5333 10.6000 17.0667 CC 3.48667 3.52667 4.05800 3.48000 4.25333 SE(N= 3) 0.316930 0.618082E-01 5%LSD 8DF 1.03348 0.201550 MEANS FOR EFFECT NL NL NOS 5 SC 12.6400 12.6000 12.4800 CC 3.79680 3.77000 3.71600 SE(N= 5) 0.245493 0.478764E-01 5%LSD 8DF 0.800528 0.156120 ANALYSIS OF VARIANCE SUMMARY TABLE FILE XUAN 26/ 8/** 14:15 PAGE 32 F-PROBABLIITY VALUES FOR EACH EFFECT IN THE MODEL SECTION - VARIATE SC CC GRAND MEAN (N= 15) NO OBS 15 12.573 15 3.7609 STANDARD DEVIATION C OF V |CT SD/MEAN | BASED ON BASED ON % | TOTAL SS RESID SS | 2.6250 0.54894 4.4 0.0000 0.35131 0.10705 2.8 0.0001 |NL | | | 0.8923 0.5108 | | | | Thí nghiệm 2: Kinetin-NAA BALANCED ANOVA FOR VARIATE SC FILE XUAN 26/ 8/** 14:34 PAGE VARIATE V003 SC LN SOURCE OF VARIATION DF LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= CT 13.0865 3.27163 26.13 0.000 NL 104533E-01 522666E-02 0.04 0.960 * RESIDUAL 1.00181 125227 * TOTAL (CORRECTED) 14 14.0988 1.00706 BALANCED ANOVA FOR VARIATE CC FILE XUAN 26/ 8/** 14:34 PAGE VARIATE V004 CC SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= CT 1.21971 304927 26.97 0.000 NL 160133E-01 800666E-02 0.71 0.524 * RESIDUAL 904535E-01 113067E-01 * TOTAL (CORRECTED) 14 1.32617 947267E-01 TABLE OF MEANS FOR FACTORIAL EFFECTS FILE XUAN 26/ 8/** 14:34 PAGE MEANS FOR EFFECT CT CT NOS 3 3 SC 10.2000 13.0667 11.4667 11.5333 11.0267 CC 3.48667 4.21667 3.47333 3.54667 3.52000 SE(N= 3) 0.204309 0.613913E-01 5%LSD 8DF 0.666232 0.200191 MEANS FOR EFFECT NL NL NOS SC 11.4400 33 CC 3.65000 5 11.4400 11.4960 3.60800 3.68800 SE(N= 5) 0.158257 0.475535E-01 5%LSD 8DF 0.516061 0.155067 ANALYSIS OF VARIANCE SUMMARY TABLE FILE XUAN 26/ 8/** 14:34 PAGE F-PROBABLIITY VALUES FOR EACH EFFECT IN THE MODEL SECTION - VARIATE SC CC GRAND MEAN (N= 15) NO OBS 15 11.459 15 3.6487 STANDARD DEVIATION C OF V |CT SD/MEAN | BASED ON BASED ON % | TOTAL SS RESID SS | 1.0035 0.35387 3.1 0.0002 0.30778 0.10633 2.9 0.0002 |NL | | | 0.9596 0.5244 | | | | Thí nghiệm 3: NAA rễ BALANCED ANOVA FOR VARIATE TL RA RE FILE XUAN 26/ 8/** 14:38 PAGE VARIATE V003 TL RA RE LN SOURCE OF VARIATION DF LN SOURCE OF VARIATION DF LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= CT 209.067 52.2667 142.55 0.000 NL 400000 200000 0.55 0.604 * RESIDUAL 2.93333 366667 * TOTAL (CORRECTED) 14 212.400 15.1714 BALANCED ANOVA FOR VARIATE CD FILE XUAN 26/ 8/** 14:38 PAGE VARIATE V004 CD SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= CT 68.7640 17.1910 762.68 0.000 NL 281332E-02 140666E-02 0.06 0.940 * RESIDUAL 180322 225402E-01 * TOTAL (CORRECTED) 14 68.9471 4.92479 BALANCED ANOVA FOR VARIATE SR FILE XUAN 26/ 8/** 14:38 PAGE VARIATE V005 SR SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= CT 14.8465 3.71163 244.16 0.000 NL 265334E-02 132667E-02 0.09 0.917 * RESIDUAL 121614 152018E-01 * TOTAL (CORRECTED) 14 14.9708 1.06934 - 34 TABLE OF MEANS FOR FACTORIAL EFFECTS FILE XUAN 26/ 8/** 14:38 PAGE MEANS FOR EFFECT CT CT NOS 3 3 TL RA RE 95.3333 100.000 90.6667 100.000 100.000 CD 5.94333 11.7500 11.3333 11.2000 9.56000 SR 4.74000 7.55000 6.71667 6.35000 5.35000 SE(N= 3) 0.349603 0.866799E-01 0.711847E-01 5%LSD 8DF 1.14002 0.282654 0.232126 MEANS FOR EFFECT NL NL NOS 5 TL RA RE 97.0000 97.4000 97.2000 CD 9.93800 9.96600 9.96800 SR 6.13400 6.16000 6.13000 SE(N= 5) 0.270801 0.671420E-01 0.551394E-01 5%LSD 8DF 0.883056 0.218943 0.179804 ANALYSIS OF VARIANCE SUMMARY TABLE FILE XUAN 26/ 8/** 14:38 PAGE F-PROBABLIITY VALUES FOR EACH EFFECT IN THE MODEL SECTION - VARIATE TL RA RE CD SR GRAND MEAN (N= 15) NO OBS 15 97.200 15 9.9573 15 6.1413 STANDARD DEVIATION C OF V |CT SD/MEAN | BASED ON BASED ON % | TOTAL SS RESID SS | 3.8951 0.60553 0.6 0.0000 2.2192 0.15013 1.5 0.0000 1.0341 0.12330 2.0 0.0000 |NL | | | 0.6035 0.9397 0.9168 | | | | Thí nghiệm 4: THT rễ BALANCED ANOVA FOR VARIATE TL RA RE FILE XUAN 26/ 8/** 14:41 PAGE VARIATE V003 TL RA RE LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= CT 24357.9 6089.47 822.99 0.000 NL 63.7345 31.8673 4.31 0.053 * RESIDUAL 59.1934 7.39917 * TOTAL (CORRECTED) 14 24480.8 1748.63 - 35 BALANCED ANOVA FOR VARIATE CD FILE XUAN 26/ 8/** 14:41 PAGE VARIATE V004 CD LN SOURCE OF VARIATION DF LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= CT 34.2206 8.55515 215.09 0.000 NL 490000E-01 245000E-01 0.62 0.568 * RESIDUAL 318203 397753E-01 * TOTAL (CORRECTED) 14 34.5878 2.47056 BALANCED ANOVA FOR VARIATE SR FILE XUAN 26/ 8/** 14:41 PAGE VARIATE V005 SR SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= CT 42.8172 10.7043 918.02 0.000 NL 370533E-01 185266E-01 1.59 0.262 * RESIDUAL 932818E-01 116602E-01 * TOTAL (CORRECTED) 14 42.9476 3.06768 TABLE OF MEANS FOR FACTORIAL EFFECTS FILE XUAN 26/ 8/** 14:41 PAGE MEANS FOR EFFECT CT CT NOS 3 3 TL RA RE 17.0000 98.3333 16.0000 100.000 17.7767 CD 2.90000 5.02667 4.75000 7.15667 3.26667 SR 1.69667 4.87333 1.83667 5.71333 2.17333 SE(N= 3) 1.57047 0.115145 0.623437E-01 5%LSD 8DF 5.12116 0.375477 0.203297 MEANS FOR EFFECT NL NL NOS 5 TL RA RE 47.0000 50.6000 51.8660 CD 4.55000 4.69000 4.62000 SR 3.19000 3.28000 3.30600 SE(N= 5) 1.21648 0.891912E-01 0.482913E-01 5%LSD 8DF 3.96683 0.290843 0.157473 - 36 ANALYSIS OF VARIANCE SUMMARY TABLE FILE XUAN 26/ 8/** 14:41 PAGE F-PROBABLIITY VALUES FOR EACH EFFECT IN THE MODEL SECTION - VARIATE TL RA RE CD SR GRAND MEAN (N= 15) NO OBS 15 49.822 15 4.6200 15 3.2587 STANDARD DEVIATION C OF V |CT SD/MEAN | BASED ON BASED ON % | TOTAL SS RESID SS | 41.817 2.7201 5.5 0.0000 1.5718 0.19944 4.3 0.0000 1.7515 0.10798 3.3 0.0000 37 |NL | | | 0.0534 0.5676 0.2623 | | | |