1 Giáo trình Chẩn đoán bệnh gia súc

Bộ giáo dục đào tạo Trờng đại học nông nghiệp hà nội TS.Chu đức thắng (Chủ biên) GS.Ts hồ văn nam PGS.TS.phạm ngọc thạch Chẩn đoán bệnh gia sóc Hµ néi - 2007 Mục lục Chương Phần mở ñầu I khái niệm nhiệm vụ mơn chẩn đốn bệnh gia súc 1 Khái niệm môn học Nhiệm vụ môn học II Phân loại chẩn đốn khái niệm triệu chứng – tiên lượng 1 Phân loại chẩn đốn 2 Khái niệm phân loại triệu chứng (symptoma) a Khái niệm b Phân loại Tiên lượng (Prognosis) III Các phương pháp chẩn đốn bệnh Các phương pháp khám lâm sàng a Quan sát - nhìn (Inspectio) b Sờ nắn (Palpatio) c Gõ (Percussio) d Nghe (Ausaltatio) Các phương pháp chẩn đốn phịng thí nghiệm a Phương pháp chẩn đốn ELISA (Enzyme Linked Immunosorbent Assay) b Phương pháp chẩn đốn kỹ thuật PCR (Polymerase Chain Reaction) c Phương pháp chẩn đốn siêu âm d Chẩn ñoán phương pháp X-quang 11 IV Trình tự khám bệnh 11 ðăng ký bệnh súc 11 Hỏi bệnh sử 12 Khám lâm sàng (tại chỗ) 13 u cầu q trình chẩn đốn bệnh 13 Chương 14 Khám chung 14 I Khám trạng thái gia súc 14 Thể cốt gia súc 14 Tư gia súc 14 Thể trạng gia súc (Constitutio) 15 II Khám niêm mạc 16 ý nghĩa chẩn đốn 16 Phương pháp khám 16 Những trạng thái thay ñổi màu sắc niêm mạc 16 III Khám hạch lâm ba 18 ý nghĩa chẩn đốn 18 Phương pháp khám 18 Những triệu chứng 19 IV Khám lông da 19 Trạng thái lông 19 Màu da 20 Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Giáo trình Giáo trình Chẩn đốn bệnh thú …………………….i Nhiệt ñộ da 20 Mùi da 21 ðộ ẩm da 21 ðàn tính da 21 Da sưng dày 21 Da mẩn (Eruptio) 22 V ðo thân nhiệt 23 Thân nhiệt 23 Sốt 24 Thân nhiệt thấp 26 Chương 27 Khám hệ tim mạch 27 I Sơ lược hệ tim mạch 27 Thần kinh tự ñộng tim 27 Thần kinh ñiều tiết hoạt ñộng tim 27 Thần kinh ñiều tiết mạch quản 28 Vị trí tim 28 II Khám tim 28 Nhìn vùng tim 28 Sờ vùng tim 29 Gõ vùng tim 29 Nghe tim 30 Tạp âm 32 ðịên tâm ñồ 33 III Khám mạch quản 35 Mạch ñập (Pulsus) 35 Khám tĩnh mạch 37 Khám chức tim 38 Chương 39 Khám hệ hô hấp 39 I Khám ñộng tác hô hấp 39 Tần số hô hấp 39 1.2 Nhịp thở 40 Thở khó 41 II Khám ñường hô hấp 41 Nước mũi 41 Khám niêm mạc mũi 42 Khám xoang mũi 42 Khám quản khí quản 43 Kiểm tra ho 43 III Khám ngực 43 Nhìn vùng ngực 44 Gõ vùng phổi 44 Nghe phổi 46 IV Chọc dò xoang ngực 49 ý nghĩa chẩn ñoán 49 Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Giáo trình Giáo trình Chẩn đốn bệnh thú …………………….ii Vị trí chọc dị 49 Kiểm nghiệm dịch thẩm xuất – dịch viêm hay dịch thẩm lậu- dịch phù 50 V Xét nghiệm ñờm 50 Chương 51 Khám hệ tiêu hóa 52 I Kiểm tra trạng thái ăn uống 52 Ăn 52 Uống 52 Cách lấy thức ăn, nước uống 52 Nuốt 53 Nhai lại 53 ợ 53 Nôn mửa 53 II Khám miệng 54 III Khám họng 55 IV Khám thực quản 55 V Khám diều gia cầm 56 VI Khám vùng bụng 57 Quan sát: 57 Sờ nắn vùng bụng: 57 VII Khám dày loài nhai lại 57 Khám cỏ 57 Khám tổ ong 59 Khám sách 60 Khám múi khế 60 VIII Khám dày ñơn 61 Dạ dày ngựa 61 Dạ dày lợn 61 Dạ dày chó, mèo 61 Dạ dày gia cầm 61 IX Xét nghiệm chất chứa dày 61 Cách lấy dịch dày 61 Xét nghiệm lý tính 62 Xét nghiệm tính chất hóa học 62 Xét nghiệm qua kính hiển vi 64 X Khám ruột 64 Khám ruột loài nhai lại 64 Khám ruột ngựa, la, lừa 65 Khám ruột non gia súc nhỏ 67 XI Khám phân 67 Khám phân mắt thường 68 Hóa nghiệm phân 69 XII Chọc dò xoang bụng 71 ý nghĩa chẩn đốn 71 Phương pháp chọc dò 71 XIII Khám gan 72 Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Giáo trình Giáo trình Chẩn đốn bệnh thú …………………….iii ý nghĩa chẩn đốn 72 Vị trí khám gan 72 Các xét nghiệm 73 Sinh thiết gan(biopsia) 79 Chương 81 Khám hệ thống tiết niệu 81 I Khám ñộng tác ñi tiểu 81 Tư ñi tiểu 81 Số lần ñi tiểu 81 II Khám thận 82 Những triệu chứng chung 82 Nhìn sờ nắn vùng thận 82 Thử nghiệm chức thận 83 III Khám bể thận 83 IV Khám bàng quang 84 VI Xét nghiệm nước tiểu 85 Những nhận xét chung 85 Hoá nghiệm nước tiểu 88 Xét nghiệm cặn nước tiểu 98 chương .102 KHáM Hệ THốNG thần KINH 102 I - Khám ðầU Và CộT SốNG 102 II - KHáM CHứC NĂNG THầN KINH TRUnG KHU 102 III - KHáM CHứC NĂNG VậN ðộNG 103 Trạng thái (bắp thịt) 103 Tính hiệp đồng vận động 103 Tê liệt 104 Co giật (Spasmus) 104 IV Khám CảM GIáC DA 105 V KHáM CáC KHí QUAN CảM GIáC 105 Khám thính giác 106 VII KHáM thần KINH THựC VậT 107 VIII XéT NGHIệM DịCH NãO Tuỷ 108 Chọc dò dịch não tủy 108 Kiểm tra lý tính dịch não tủy 109 Xét nghiệm dịch não tủy hố tính 109 Kiểm tra tế bào dịch não tủy 109 Chương 110 Xét nghiệm máu 110 I LấY MáU Xét NGHIệM 110 Vị trí lấy máu 110 Thời gian lấy máu: 111 Cách lấy máu 111 II XéT NGHIệM Lý TíNH 111 Màu Sắc 111 Tốc độ máu đơng 111 Trường ðại học Nơng nghiệp Hà Nội – Giáo trình Giáo trình Chẩn đốn bệnh thú …………………….iv ðộ vón máu 112 Sức kháng hồng cầu 114 Tốc ñộ huyết cầu (tốc ñộ huyết trầm) 115 III Hố tính máu 116 Huyết sắc tố (Hemoglobin) 116 ðộ kiềm dự trữ mỏu 117 ðường huyết 119 Bilirubin (sắc tố mật ) máu 123 Protein huyết 125 ðạm protit 129 Amoniac 130 Cholesterol máu 132 Canxi huyết 136 Lượng phospho vô huyết 137 IV Xét nghiệm tế bào máu 139 A Phương pháp xét nghiệm máy huyết học 142 nguyên tác 142 Miêu tả thiết bị 142 2.1 Nói chung 142 2.2 Bảng kết nối phận ñằng sau 143 2.3 Chức chất lỏng 143 Miêu tả phần mềm 143 3.1 Nói chung 143 3.2 Hệ thống thực ñơn : 143 Nguyên tắc hoạt ñộng 144 4.1 Phương pháp trở kháng : 144 4.2 ðọc hemoglobin 144 Thông số : 144 Phương pháp nhuộm giemsa 149 B Bạch cầu 151 * Số lượng bạch huyết cầu 151 Số lượng bạch cầu tăng 151 Bạch cầu toan (Eosinophil) 151 * Loại bạch cầu ngun sinh chất khơng có hạt 153 Cách xác định cơng thức bạch cầu 154 Cơng thức bạch cầu thay đổi 155 + Bạch cầu trung tăng ( Neutrocytosis): 155 * Hình thái bạch cầu thay đổi 156 C Số lượng tiểu cầu: 157 Trường ðại học Nơng nghiệp Hà Nội – Giáo trình Giáo trình Chẩn đốn bệnh thú …………………….v Chương Phần mở đầu I Khái niệm nhiệm vụ mơn chẩn đốn bệnh gia súc Khái niệm mơn học Chẩn đốn bệnh gia súc mơn học quan trọng chương trình đào tạo nghành thú y Bằng phương pháp chẩn đốn khác để phát triệu chứng bệnh Phân tích, tổng hợp triệu chứng từ rút kết luận bệnh làm sở cho việc phịng điều trị bệnh đạt hiệu cao Chẩn đốn nghĩa phán đốn qua triệu chứng để đưa kết luận chẩn đốn vật mắc bệnh Nhiệm vụ môn học a Nghiên cứu phương pháp chẩn đốn lâm sàng, xét nghiệm phịng thí nghiệm phương pháp khám chuyên biệt b Biết cách thu thập, đánh giá phân tích các triệu chứng c Giới thiệu kĩ thuật chẩn đốn tiên tiến, ñại áp dụng kinh nghiệm chẩn đốn bệnh thú y Các phương pháp chẩn đốn bệnh ứng dụng rộng rãi mơn học nghành thú y như: bệnh truyền nhiễm, bệnh ký sinh trùng, bệnh sản khoa, môn nội khoa điều trị học ðây mơn học sở ngành Thú y Mơn chẩn đốn bệnh gia súc trang bị cho học sinh lý luận kĩ thuật ñồng thời vận dụng kiến thức khoa học sở ñã học áp dụng vào thực tiễn thú y Một mặt giới thiệu lý luận kỹ thuật mới, mặt khác vận dụng tri thức khoa học sở ñã học vào thực tiễn Thú y Vì để học tốt mơn chẩn đốn bệnh, học sinh phải nắm vững kiến thức cần thiết ngành thú y: vật lý học, giải phẫu, tổ chức tế bào học, sinh lý học, vi sinh vật học bệnh lý học… Nhiệm vụ chẩn ñoán bệnh vận dụng phương pháp chẩn ñoán khác ñể phát hết triệu chứng biểu bệnh, đánh giá, phân tích, tổng hợp triệu chứng đó, rút kết luận bệnh Một chẩn đốn đúng, sớm điều kiện trước tiên để đề biện pháp phịng điều trị bệnh có kết cao Yêu cầu cán thú y phải nắm vững thành thạo phương pháp kĩ thuật chẩn đốn đồng thời vào thực tế chẩn đốn điều trị, để đúc rút kinh nghiệm thực tế sản xuất ðối tượng bệnh súc nhiều loại, ñặc ñiểm sinh lý cung biểu bệnh lý chúng khác Học sinh phải nắm vững ñặc ñiểm sinh lý biểu bệnh lý loại gia súc, áp dụng phương pháp chẩn đốn phù hợp ðồng thời vận dụng thành thạo phương pháp chẩn đốn, thu thập tồn triệu chứng, từ rút kết luận sớm xác vật mắc bệnh gì? II Phân loại chẩn đốn khái niệm triệu chứng – tiên lượng Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Giáo trình Giáo trình Chẩn đốn bệnh thú …………………….1 Phân loại chẩn đốn Theo phương pháp, chẩn ñoán ñược chia ra: a Chẩn ñoán trực tiếp: vào triệu chứng chủ yếu ñể ñi ñến kết luận chẩn đốn Ví dụ: vào triệu chứng tiếng thổi tâm thu ñể kết luận bệnh hẹp lỗ van nhĩ thất Thực hình thức chẩn đốn có kết có triệu chứng đặc trưng, điển hình b Chẩn đốn phân biệt: với triệu chứng phát ñược vật bị bệnh, liên hệ đến bệnh thường có triệu chứng, loại dần bệnh có điểm khơng phù hợp, cuối cịn lại bệnh có nhiều khả bệnh gia súc mắc c Chẩn đốn phải qua thời gian theo dõi: có nhiều ca bệnh triệu chứng khơng điển hình Sau khám khơng thể kết luận mà phải tiếp tục quan sát phát thêm triệu chứng từ có đủ để kết luận chẩn ñoán d Căn kết ñiều trị ñể chẩn đốn: có nhiều trường hợp hai bệnh có triệu chứng lâm sàng gần giống nhau, sau khám khó kết luận bệnh hay bệnh khác Cần ñiều trị hai bệnh theo kết mà rút kết luận chẩn đốn Theo thời gian, chẩn đốn có: a Chẩn đốn sớm: chẩn đốn kết luận thời kỳ đầu bệnh Chẩn đốn sớm có lợi cho điều trị phịng bệnh b Chẩn đốn muộn: Kết luận chẩn đốn vào cuối kỳ bệnh, chí gia súc chết, mổ khám có kết luận chẩn đốn Theo mức độ xác, chẩn đốn chia ra: a Chẩn đốn sơ bộ: Là sau khám cần có kết luận chẩn đốn để làm sở cho điều trị Chẩn đốn sơ tức chẩn đốn chưa thật xác, cần tiếp tục theo dõi để bổ sung b Chẩn đốn cuối kết luận chẩn đốn sau khám kỹ có triệu chứng đặc trưng qua kết điều trị c Chẩn đốn nghi vấn: trường hợp thường thấy lâm sàng thú y gặp ca bệnh mà triệu chứng khơng đặc trưng cho bệnh Kết luận nghi vấn lưu ý cần phải theo dõi tiếp bệnh kết ñiều trị để có kết luận xác Khái niệm phân loại triệu chứng (symptoma) a Khái niệm Triệu chứng biểu khác thường hay hình thái thể gia súc bị bệnh mà người khám thu thập quan sát ñược b Phân loại Theo phạm vi biểu hiện, chia triệu chứng làm hai loại: - Triệu chứng cục bộ: triệu chứng khí quan hay phận bệnh; âm ñục vùng ngực bệnh viêm phổi, âm bùng vùng hõm hông trái trâu bò bệnh chướng cỏ - Triệu chứng toàn thân: xuất phản ứng toàn thể ngun nhân gây bệnh Ví dụ: sốt, tim ñập nhanh, gia súc bỏ ăn, ủ rũ Trường ðại học Nơng nghiệp Hà Nội – Giáo trình Giáo trình Chẩn đốn bệnh thú …………………….2 C.vT.Bg.Jy.Lj.Tai lieu Luan vT.Bg.Jy.Lj van Luan an.vT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.Lj Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an Xét giá trị chẩn đốn, có loại triệu chứng sau ñây: - Triệu chứng ñặc thù: triệu chứng có bệnh gặp triệu chứng chẩn đốn bệnh Ví dụ: tĩnh mạch cổ dương tính (+) triệu chứng đặc thù bệnh hở van - Triệu chứng chủ yếu Ví dụ: bệnh viêm bao tim ngoại vật trâu bò, âm vỗ nước, tiếng cọ vùng tim triệu chứng chủ yếu; rối loạn tiêu hố, lại khó khăn, phù thũng số phận triệu chứng thứ yếu - Triệu chứng điển hình triệu chứng phản ánh q trình bệnh phát triển điển hình Ví dụ: bệnh viêm phổi thuỳ (Pneumonia crouposa) phát triển thường qua giai đoạn – sung huyết, gan hố giai ñoạn tiêu tan, gõ vùng phổi bệnh lúc ñầu có âm bùng hơi, sau giai đoạn có âm ñục cuối lại xuất âm bùng Trong nhiều bệnh mà triệu chứng lâm sàng không hoàn toàn theo quy luật thường thấy bệnh, gọi triệu chứng khơng điển hình - Triệu chứng cố ñịnh triệu chứng thường có số bệnh Ví dụ: tiếng ran (rhonchi) vùng phổi bệnh viêm phổi thuỳ, bệnh viêm phổi – phế quản Triệu chứng bệnh có lúc có, có lúc khơng, gọi triệu chứng ngẫu nhiên Ví dụ: hồng đản viêm ruột cata - Triệu chứng thường diễn xẩy xuốt q trình bệnh Ví dụ: bệnh viêm phế quản, ho triệu chứng trường diễn, xảy từ đầu đến cuối Cịn tiếng ran vùng phổi xuất giai ñoạn ñó, gọi triệu chứng thời - Hội chứng: nhiều triệu chứng xuất chồng chéo lên nhau, ví dụ: chứng đau bụng ngựa, chứng urê huyết, hồng đản, ỉa chảy hội chứng Bệnh nặng hay nhẹ có nhiều triệu chứng, có triệu chứng chủ yếu, triệu chứng thứ yếu, có lúc triệu chứng điển hình, có lúc triệu chứng khơng điển hình Phải nắm vững phương pháp chẩn đốn để phát hết triệu chứng; có kiến thức sâu bệnh lý triệu chứng bệnh cụ thể chẩn đốn bệnh nhanh xác Tiên lượng (Prognosis) Sau khám bệnh kỹ lưỡng, nắm bệnh tình, người khám dự kiến thời gian bệnh kéo dài, bệnh khác kế phát, khả cuối bệnh Công việc gọi tiên lượng Tiên lượng xác địi hỏi phải suy xét nhiều mặt Tiên lượng bệnh súc khơng phán đốn bệnh súc chết hay sống, mà phải dự kiến ñiều trị tốn bao nhiêu, có kinh tế hay khơng Chẩn đốn kết luận tại, tiên lượng kết luận cho tương lai bệnh súc Tiên lượng công việc phức tạp Người cán thú y muốn có khả tiên lượng tốt, có tri thức chưa đủ, cịn cần có kinh nghiệm cơng tác, biết đầy đủ giá trị kinh tế loại gia súc ñặc ñiểm cá biệt Có loại tiên lượng: Tiên lượng tốt: bệnh súc khơng có khả chữa lành mà cịn có giá trị kinh tế Tiên lượng khơng tốt: bệnh súc chết khơng thể lành hồn tồn, giá trị kinh tế; chữa chạy tốn, không kinh tế Trường ðại học Nơng nghiệp Hà Nội – Giáo trình Giáo trình Chẩn ñoán bệnh thú …………………….3 Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd.vT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.Lj.dtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn C.vT.Bg.Jy.Lj.Tai lieu Luan vT.Bg.Jy.Lj van Luan an.vT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.Lj Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an + Phương pháp ñếm buồng ñếm Số lượng hồng cầu máu lớn, cần phải pha lỗng đếm ðể pha loãng hồng cầu, thường dùng số dung dịch sau Một số dung dịch pha lỗng: Dung dịch Marcano Natri chlorur 0,6 g Natrixitrat 1,0 g Formol trung tính 36% 1ml Nước cất 97,4 ml Trộn ñều, quấy cho tan lọc Dung dịch Hayem Natri chlorur 1,0g 5,0g Natri sulfat kết tinh Na2SO4.10 H2O) (Hoặc Natri sulfat khan Na2SO4 2,5g) 0,5g Thuỷ ngân chlorur ( HgCl2) Nước cất tới 200ml Trộn ñều, quấy cho tan lọc Cho vài giọt eosin 2% ñể dung dịch có màu hồng nhạt dễ phân biệt Natri chlorur 7,0 g Kali chlorur 0,2 g Natri xitrat 5,0 g Magie sulfat 0,04 g Nước cất 100 ml Chú ý + Hai dung dịch (1 2) thường dùng + ống hút pha loãng hồng cầu thường dùng ống Thoma Hút máu ñến vạch 0,5, hút dung dịch pha lỗng đến 101 Như vậy, máu pha lỗng 200 lần + Buồng ñếm: thường dùng buồng ñếm Neubauer Goriaep Buồng đếm Neubauer Có buồng bên kích thước 3x3 mm2 Mối buồng có lớn, hình vng, kích thước 1x1 mm2 lớn góc có vạch chia 16 trung bình dùng để đếm bạch cầu Ơ lớn chia 25 trung bình, trung bình lại chia thành 16 ô nhỏ ðếm hồng cầu trung bình: góc Dụng cụ đếm hồng cầu Buồng đếm có bề dày 1/10 mm Lúc đậy Lamen lớn tạo thành thể tích 1/10 mm3 Hút máu vào ống pha lỗng đến vạch 0,5 Khơng nên hút nhiều máu Dùng tay lau máu ngồi Lập tức hút tiếp dung dịch lỗng vừa ñúng ñến 101 Lấy ống cao su ra, dùng ngón tay bịt đầu ống lại, đảo nhẹ cho máu ñược trộn ñều ðậy Lamen lên buồng ñếm Cho dung dịch cầu ñã pha loãng vào Chú ý bỏ ñi vài giọt ñầu ðợi –3 phút cho hồng cầu lắng xuống ñếm Cách ñếm Trường ðại học Nơng nghiệp Hà Nội – Giáo trình Giáo trình Chẩn đốn bệnh thú …………………….145 Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd.vT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.Lj.dtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn C.vT.Bg.Jy.Lj.Tai lieu Luan vT.Bg.Jy.Lj van Luan an.vT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.Lj Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an Mỗi có cạnh, ý hồng cầu nằm cạnh đếm hồng cầu cạnh Tính: Gọi số hồng cầu đếm trung bình M, số hồng cầu mm : M x 25 x 10 x 200 = M x 10.000 Số lượng hồng cầu bình thường Loại gia súc Ngựa Bị Trâu La, lừa Cừu Dê Lợn Chó Thỏ Gà Vịt Bình quân triệu mm3 8,5 6,0 6,0 13,6 9,4 13,1 5,7 6,5 6,0 3,5 3,0 Tối thiểu Tối ña 5,5 4,5 3,2 10,6 7,6 8,0 3,4 5,6 3,9 2,5 2,0 11,5 7,5 8,7 16,6 11,2 18,2 7,9 7,4 8,1 5,0 3,7 Khi có bệnh số lượng hồng cầu thay ñổi Số lượng hồng cầu giảm: + Thiếu máu máu; + Thiếu máu suy dinh dưỡng + Thiếu máu suy tuỷ, bệnh mãn tính, ký sinh trùng đường máu Số lượng hồng cầu tăng: thú y gặp Thường nguyên nhân làm thể nước bệnh gây ỉa chảy, nôn mửa, nhiều mồ hôi; bệnh có sốt cao,… * Tỷ khối huyết cầu Là tỷ lệ phần trăm khối hồng cầu chiếm thể tích máu định Máu để đo tỷ khối huyết cầu cần chống đơng thường dùng máu tĩnh mạch Phương pháp ño: theo phương pháp Wintrobe Dụng cụ - Máy ly tâm TH12 - ống ly tâm riêng (gọi ống hematocrit) - Bản dẻo Tiến hành - Lấy máu cần xét nghiệm ñến 2/3 ống hematocrit, sau chấm vào dẻo để vít ñầu ống hematocrit Máy ly tâm TH12 Thước ño ống hematocrit Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Giáo trình Giáo trình Chẩn đốn bệnh thú …………………….146 Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd.vT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.Lj.dtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn C.vT.Bg.Jy.Lj.Tai lieu Luan vT.Bg.Jy.Lj van Luan an.vT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.Lj Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an - ðưa ống ly tâm có máu vào máy ly tâm TH12 Sau ly tâm với tốc độ 3000 vịng/phút với khoảng thời gian 5phút - Sau ly tâm, ñưa ống ly tâm vào thang ño ñể ñọc chiều cao cột hồng cầu, tính tỷ lệ phần trăm khối hồng cầu máu tồn phần gọi hematocrit Bình thường, khối hồng cầu có lớp mỏng bạch cầu tiểu cầu khơng q 1% Nên đọc kết hematocrit chiều cao cột huyết cầu coi cột hồng cầu Trong số bệnh mà số lượng bạch cầu tăng nhiều, bệnh Leucamia cần đọc rõ cột hồng cầu, tiểu cầu, cột bạch cầu phần huyết tương + Hematocrit tăng: có ứ nước tế bào, bệnh tăng số lượng hồng cầu; + Hematocrit giảm: trường hợp thiếu máu, suy dinh dưỡng, bệnh mạn tính Chú ý: Khi ñọc kết cần ñể ñầu cột hồng cầu trùng với vạch thước ño, ñầu cột huyết tương trùng với vạch thước đo * Kích thước hồng huyết cầu Thể tích bình qn hồng huyết cầu Tính theo cơng thức: Thể tích bình qn hồng cầu, µ m3 = Tỷ khối huyết cầu (hematocrit) x10 Số triệu hồng cầu / mm3 Ví dụ: Số hồng cầu 3.600.000 1mm3, tỷ khối huyết cầu 39,2% 39,2 x 10 392 Thể tích bình qn hồng cầu = = = 109 µm3 3,6 3,6 ý nghĩa chẩn đốn - Thể tích hồng cầu tăng: trạng thái thiếu máu ưu sắc có đại hồng cầu hay hồng cầu khổng lồ - Thể tích hồng cầu giảm: trạng thái thiếu máu nhược sắc có hồng cầu nhỏ ðường kính bình qn hồng cầu ðo đường kính 200 – 500 hồng cầu kính hiển vi, lấy số bình qn Ví dụ: số hồng cầu có đường kính 6,5 µ m3 10% 6,5 x 10 = 65 µ m 60 % 7x60 = 420 7,5 µ m 20% 7,5 x 20 = 150 µ m 10% x 10 = 80 Vậy đường kính bình qn hồng cầu là: 715 = 7,15 100 Thể tích bình quân ðộ dày bình quân hồng cầu = ðường kính bình qn ẽ Ví dụ: Thể tích bình qn 87 µ m3 ðường kính bình qn: µ m Trường ðại học Nơng nghiệp Hà Nội – Giáo trình Giáo trình Chẩn đốn bệnh thú …………………….147 Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd.vT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.Lj.dtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn C.vT.Bg.Jy.Lj.Tai lieu Luan vT.Bg.Jy.Lj van Luan an.vT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.Lj Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an Vậy độ dày bình qn hồng cầu: 87 87 = = 2,26 3,1416 x 38,5 * Hình thái hồng cầu Phiết kính nhuộm tiêu máu Mục đích phiết kính dàn mỏng huyết cầu phiến kính sau nhuộm phân biệt loại huyết cầu dễ dàng Muốn vậy, phiến kính phải tuyệt đối sẽ, khơng có vết mờ, khơng toan khơng kiềm Phiến kính mua phải rửa nước lã, đun nước xà phịng, sau lại ñun nước lã, rửa thật sạch, chùi khô vải sô ngâm vào hỗn hợp cồn ete ( lượng nhau) để bảo quản Khi dùng lấy lau khơ Những phiến kính dùng phải rửa vết dầu xylon, sau lại xử lý Thường dùng máu tĩnh mạch tai Bỏ vài giọt dầu cho giọt lên rìa phiến kính Dùng phiến kính khác có cạnh phẳng (có thể mài cho phẳng), tốt dùng lamen, để vào phiến kính lại cho tiếp xúc với giọt máu Cho giọt máu chảy ñều sang hai bên Nếu giọt máu to nhấc lamen sang vị trí khác, với góc 45 ñộ, ñẩy nhẹ lamen phía ñằng phiến kính để dàn máu Một phiến kính tốt khơng q dày mỏng, phiết đặn Chú ý, giọt máu nên phiết phiến kính Muốn phiết phiến kính khác lấy giọt máu ðể phiến kính vừa phiết xong râm mát dùng dung dịch sau để cố định hình thái huyết cầu - Cồn metylic ( methanol), cố ñịnh phút - Cồn ethylic tuyệt ñối, cố ñịnh 10 – 20 phút - Axetôn phút - Cồn ethylic ether ethylic ( lượng nhau) 15 – 20 phút - Hỗn hợp axeton cồn methylic ( lượng nhau) phút Sau lúc cố định để phiến kính khơ khơng khí nhuộm Thường dùng thuốc nhuộm Giemsa, Wright ñể nhuộm Chất nhuộm màu chủ yếu hai thuốc nhuộm eosin methylen xanh dạng muối trung tính Tác dụng eosin: Eosin thuốc nhuộm thường dạng Natri eosinat, sản phẩm eosin toan tính cho thêm NaOH Trong Natri eosinat, eosin mang ñiện âm, phận nhuộm màu, thuốc nhuộm toan tính, dễ dàng kết hợp với vật thể mang ñiện âm ñể nhuộm màu Những hạt mang ñiện âm hạt kiềm tính tế bào dễ bị xanh methylen nhuộm gọi hạt kiềm Cũng vậy, hạt mà thân mang ñiện âm, ñiện dương nhau, nhuộm với thuốc nhuộm toan tính, kết hợp với thuốc nhuộm kiềm tính thành màu đỏ tím gọi hạt trung tính Cồn methylic: Là dung mơi tốt để hoà tan hỗn hợp xanh methylen eosin thuốc nhuộm kép Xanh methylen eosin có hồ tan có tác dụng nhuộm màu nhanh chóng Mặt khác, cồn ethylic nhờ khả rút nước cố định tốt hình thái tế bào Nhờ mà sau nhuộm hình thái tế bào giữ nguyên Trường ðại học Nơng nghiệp Hà Nội – Giáo trình Giáo trình Chẩn đốn bệnh thú …………………….148 Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd.vT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.Lj.dtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn C.vT.Bg.Jy.Lj.Tai lieu Luan vT.Bg.Jy.Lj van Luan an.vT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.Lj Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an Dung dịch ñệm: Khi nhuộm tế bào, thuốc nhuộm bắt màu Nếu cho tan cồn; phải pha thêm dung dịch đệm thuốc nhuộm bị phân tử protit hấp thụ dễ dàng nhuộm màu tốt Hơn nữa, q trình nhuộm hạt kiềm toan tế bào không giống nhau, từ nhuộm ñến kết thúc, pH mơi trường thay đổi dung dịch đệm khắc phục ñược tượng Dung dịch ñệm thường dùng có pH = 6,2 – Nếu thuốc nhuộm toan, bắt màu kém, tiêu nhuộm màu ñỏ nhạt, nhân không rõ; thuốc nhuộm kiềm, tiêu nhuộm ñậm, huyết cầu bắt màu xanh, hồng cầu bắt màu hơI ñen ðể khắc phục tiêu kiềm toan trên, nên dùng dung dịch kiềm nhẹ axit nhẹ để trung hịa Phương pháp nhuộm giemsa Thuốc nhuộm: Bột Giemsa 0,5g Glycerin trung tính C.P 33,0ml Cồn methanol A.R 33,0ml Cho bột giemsa vào cối ñã rửa sạch, thêm glycerin vào nghiền nhỏ chày sứ ðun cách thủy nhiệt ñộ 55 – 60 o C giờ, quấy ñều Sau cho cồn methanol vào Bảo quản dùng lâu dài Thuốc nhuộm dùng phải pha loãng 10 lần dung dịch ñệm nước cất trung tính ( 1:10) Tiến hành ðánh số tiêu để khỏi lẫn Cố ñịnh cồn methanol ( phút) thứ thuốc khác Cho thuốc nhuộm pha phủ lên lớp, nhuộm 25 – 30 phút Rửa nước, để khơ, xem vật kính dầu Phương pháp nhuộm Wright Thuốc nhuộm: Bột Wright: 0,1g Cồn Methanol A.R 60,0ml Cân xác 0,1 g Wright cho vào cối sứ nghiền nhỏ, thêm vào khoảng 1/5 lượng cồn methanol, tiếp tục nghiền cho thuốc nhuộm hòa tan hết cho tiếp cồn methanol lại Bảo quản dùng lâu dài Có thể cho thêm ml glyxerin trung tính để giảm bớt cồn bay hơI nhanh nhuộm làm cho tế bào nhuộm rõ ràng Tiến hành Cho phiến kính máu lên giá Nhỏ – giọt Wright phủ lớp lên tiêu Sau phút thêm vào – lần dung dịch ñệm nước cất, lắc nhẹ phiến kính để hịa với thuốc nhuộm Khoảng 10 phút rửa phiến kính nước Dựng phiến kính khơ khơng khí xem vật kính dầu Chú ý: - Thời gian nhuộm Wright tùy theo thuốc nhuộm nhiệt độ phịng mà định - Sau cho thuốc nhuộm vào khơng để thuốc nhuộm khơ tiêu cho dung dịch đệm pha lỗng Vì vậy, hạt thuốc nhuộm bám vào tế bào, tiêu nhuộm không rõ Với tiêu thuốc nhuộm khơ khắc phục cách nhỏ thêm vài giọt thuốc nhuộm, ñể hạt thuốc nhuộm bám vào tế bào tan cồn methanol, sau lại cho dung dịch đệm vào để pha lỗng Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Giáo trình Giáo trình Chẩn đốn bệnh thú …………………….149 Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd.vT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.Lj.dtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn C.vT.Bg.Jy.Lj.Tai lieu Luan vT.Bg.Jy.Lj van Luan an.vT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.Lj Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an * Hình thái hồng cầu thay đổi Hồng cầu động vật có vú hình ñĩa, không nhân, hai bên dày, nhuộm màu ñậm, mỏng màu nhạt Hồng cầu lạc đà hình trứng Hồng cầu gia cầm có nhân Trên tiêu nhuộm, hồng cầu bắt màu ñỏ nhạt, xung quanh ñậm, nhạt, loại hồng cầu toan Những dạng hồng cầu bệnh thường gặp - Thay ñổi màu sắc thể tích hồng cầu Về màu sắc có hồng cầu khơng bắt màu, có toan, có kiềm thứ lẫn lộn (ña sắc) + Hồng cầu bắt màu nhạt: Tế bào hồng cầu mỏng, Hemoglobin ít, nhuộm màu nhạt, nhiều tế bào màu ngồi rìa Thường thấy bệnh thiếu máu dung huyết, thiếu sắt, thiếu vitamin B6 + Hồng cầu bắt màu q đậm: nhuộm đỏ từ rìa vào trong; thấy bệnh thiếu máu có hồng cầu khổng lồ + Hồng cầu ña sắc: Trên tiêu có huyết cầu bắt màu xanh kiềm ðó hồng cầu non tủy xương bị kích thích mạnh - Thay đổi hình thù - Hồng cầu dị hình (Poikilocytosis) Trên tiêu máu có hồng cầu rìa khơng đều, hình lưỡi liềm, hình cây, hình sao,…Là dạng hồng cầu bệnh lý Hồng cầu dị hình xuất bệnh thiếu máu nặng, bệnh bại huyết + Hình lưỡi liềm: có huyết sắc tố S, hình bia có nhiều huyết sắc tố bào thai F,… thường gặp số bệnh có rối loạn huyết sắc tố + Hồng cầu loại bệnh thiếu máu huyết tán Hiện tượng hồng cầu dị hình dấu hiệu chứng tỏ hồng cầu bền vững tác dụng tan máu ñối với hồng cầu tái sinh khơng đầy đủ Dị hình thường kèm theo tượng khơng kích thước Chú ý: Những tiêu cố định khơng tốt, huyết cầu bị khơ, nhăn nheo lại gây nên tượng giống hồng cầu dị hình Những nguyên nhân sau làm cho tiêu hồng cầu nhăn nheo: - Phiết kính dày - Thời gian khơ lâu - Khi phíêt kính độ ẩm khơng khí q cao, lâu khơ ðể chỗ ẩm ướt q lâu - Hồng cầu to nhỏ khơng Hồng cầu bình thường to nhỏ khoảng 0,5 – µm Trên tiêu có hồng cầu bé, lại có hồng cầu to khác thường, to đến – µm, có đến - 12 µm Hồng cầu to nhỏ khơng triệu chứng quan tạo máu bị rối loạn Thấy bệnh thiếu máu suy tủy, suy dinh dưỡng, thiếu vitamin B12 + Hồng cầu có hạt (Granulophilocytosis) Trong hồng cầu cần có hạt nhỏ Sự xuất hồng cầu có hạt chứng tỏ xương bị kích thích bệnh thiếu máu Trong máu động vật khỏe có tỷ lệ hồng cầu có hạt: Cừu 0,02 – 0,18 ‰ ( phần nghìn) Lợn 2,7 – 15 ‰ Chó 0,1 – 0,3 ‰ Mèo 0,8 – 1,5 ‰ + Hồng cầu có tiểu thể Jolly: hạt nhỏ hình trịn hình trứng nhuộm màu đỏ ngun sinh chất; di tích nhân hồng cầu Hồng cầu Jolly thấy trường hợp thiếu máu nặng dung huyết Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Giáo trình Giáo trình Chẩn đốn bệnh thú …………………….150 Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd.vT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.Lj.dtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn C.vT.Bg.Jy.Lj.Tai lieu Luan vT.Bg.Jy.Lj van Luan an.vT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.Lj Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an + Hồng cầu có vịng cabot: hình nhẫn, hình số (8), hình vợt… Xếp bên tế bào; di tích nhân hồng cầu Thấy bệnh thiếu máu nặng + Hồng cầu có hạt kiềm bắt màu tím, xanh, to nhỏ khơng bám mặt hồng cầu Có người cho di tích ngun sinh chất phân hủy nhân dung giảI mà thành Hồng cầu có hạt kiềm triệu chứng suy tủy; có ý kiến cho tượng tái sinh hồng cầu + Hồng cầu có nhân: động vật nhỏ chó, chuột có hồng cầu có nhân cịn chủ yếu hồng cầu dạng trưởng thành Hồng cầu có nhân hồng cầu non B Bạch cầu * Số lượng bạch huyết cầu Dung dich pha loãng: Axit axetic 2ml Nước cất 98ml Cho vài giọt xanh methylen 1% ñể dung dịch có màu xanh Dụng cụ: - ống hút bạch cầu: Nhỏ ống hút hồng cầu có bi màu xanh - Buồng ñếm: giống ñếm hồng cầu Phương pháp ñếm: Hút máu ñến vạch 0,5, hút thêm dung dịch pha lỗng đến vạch 11, pha lỗng máu 20 lần ðếm lớn góc Gọi N số bạch cầu đếm lớn góc, số bạch cầu 1mm là: N x 10 x 20 = N x 50 Số lượng bạch cầu gia súc khỏe, nghìn / mm3 Loại gia súc Trung bình Tối thiểu Tối đa Ngựa 9,0 6,0 12,0 Bò 8,0 6,6 9,3 Trâu 8,8 8,5 12,4 Lợn 14,8 6,7 22,9 Chó 9,0 6,0 12,0 Gà 30,0 9,0 51,0 ý nghĩa chẩn đốn: Số lượng bạch cầu giảm: - Bệnh virus, thiếu máu ác tính, trúng độc - Suy tủy Số lượng bạch cầu tăng - Khi có thai, ăn no, sau lao động - Trong ña số bệnh nhiễm khuẩn mưng mủ: viêm phổi, viêm màng bụng, apxe - Những bệnh truyền nhiễm cấp tính vi trùng Trong bệnh leukosis, số lượng bạch cầu tăng nhiều, có ñến 300.000/1mm3 Bạch cầu toan (Eosinophil) Có thể tỷ lệ bạch cầu toan công thức bạch cầu để chẩn đốn Khi cần người ta đếm số lượng tuyệt đối Dung dịch pha lỗng: Dung dịch Dunger Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Giáo trình Giáo trình Chẩn đốn bệnh thú …………………….151 Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd.vT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.Lj.dtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn C.vT.Bg.Jy.Lj.Tai lieu Luan vT.Bg.Jy.Lj van Luan an.vT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.Lj Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an Eosin Axetôn Nước cất 0,1g 10,0ml 100,00ml Dung dịch Hinkleman Eosin 0,5ml Formol 0,5ml Axit fenic 0,5ml Nước cất 100,00ml Dụng cụ: buồng ñếm Neubauer ống hút bạch cầu Phương pháp ñếm: Hút máu ñến vạch hút tiếp dung dịch pha lỗng đến vạch 11, ñảo nhẹ 20 lần ðể yên ñể nhuộm huyết cầu Bỏ ñi vài giọt ñầu cho vào bên buồng ñếm, ñể yên phút ðếm số bạch cầu toan bên Sau nhuộm bạch cầu toan có màu ñỏ tươi Gọi M số bạch cầu toan ñếm ñược 18 ô (cả buồng ñếm) Số bạch cầu toan mm3 là: M x 10 x 10 = M x 5,6 18 Bạch cầu toan tăng: bệnh mẫn, bệnh da, bệnh ký sinh trùng, bệnh máu trắng Bạch cầu toan thời gian dài tiên lượng không tốt * Công thức bạch cầu Trước tiên cần phải làm phiết kính máu trình bày phần làm tiêu huyết cầu, lưu ý nên phiết kính dày để số lượng nhiều thuận lợi cho việc phân loại Các loại bạch cầu: Trên phiến kính, bạch cầu có loại sau: Loại bạch cầu nguyên sinh chất có hạt nhỏ bắt màu thuốc nhuộm rõ: Các loại bạch cầu Bạch cầu toan (Eosinophil): nguyên sinh chất có hạt toan bắt màu đỏ Eosin Tế bào hình trịn, trứng, đường kính – 10 µm Ngun sinh chất khơng bắt màu màu xanh xám nhạt Hạt rõ to bạch cầu toan ngựa; sau ñó thỏ, nhỏ hạt toan máu động vật cịn lại Nhân bạch cầu toan thường chia thành thùy Tùy theo mức ñộ phát triển khác nhân khác nhau; hình gậy phân nhánh Bạch cầu kiềm (Basophil): Hình trịn hình Các loại bạch cầu lê, đường kính khoảng – 15 µm Ngun sinh chất sáng, kết cấu không rõ; hạt kiềm trịn to nhỏ khơng đều, nhuộm màu tím đen Những hạt nguyên sinh chất dễ bị nước thuốc nhuộm ñi ñể lại khoảng trống Nhân bạch cầu kiềm thường đa dạng, rìa khơng rõ, có lúc hình lá, có lúc phân thùy, hình dây, hình thận Nhân bắt màu tím, cá biệt tế bào có kết cấu khơng rõ Trường ðại học Nơng nghiệp Hà Nội – Giáo trình Giáo trình Chẩn đốn bệnh thú …………………….152 Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd.vT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.Lj.dtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn C.vT.Bg.Jy.Lj.Tai lieu Luan vT.Bg.Jy.Lj van Luan an.vT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.Lj Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an Việc phân biệt giai ñoạn phát dục bạch cầu kiềm khó, rìa nhân xếp tiểu thùy nhân không rõ Trên thực tế chẩn đốn việc phân biệt khơng có ý nghĩa, số lượng bạch cầu kiềm ít, từ 0,1 – 2%, bình qn 0,5%.ở gia cầm tỷ lệ có cao Bạch cầu trung ( Neutrophil) nguyên sinh chất có hạt trung tính Bạch cầu trung máu ngoại vi thường có loại: bạch cầu nhân gậy bạch cầu nhân ñốt; loại bạch cầu non – ấu cầu tủy cầu ít, khoảng 0,5 – 1% Tủy cầu ( Myelocyte) loại bạch cầu trung non nhất, hình trịn, đường kính 10 – 13 µm Ngun sinh chất nhuộm màu đỏ nhạt, có màu tím nhạt, màu tro, có hạt bắt màu tím hơI đỏ Nhân trịn, dài hình hạt đậu, nhuộm màu nhạt khơng ấu cầu: Là giai ñoạn trung gian tủy cầu bạch cầu trung nhân gậy, đường kính khoảng 12 – 22 µm Nhân hình hạt đậu hình móng ngựa, kết cấu lỏng lẻo, nhuộm màu nhạt, khơng Ngun sinh chất nhuộm màu đỏ nhạt, có hạt bắt màu kiềm Bạch cầu trung nhân gậy: Hình trịn, đường kính 10 – 14 µm Ngun sinh chất bắt màu đỏ nhạt có pha xanh xám nhạt, có nhiều hạt nhỏ bắt màu tím nhạt, to nhỏ khơng Nhân dài hình móng ngựa, hình chữ S, hình gậy, nhuộm màu khơng Bạch cầu trung Bạch cầu trung nhân ñốt: loại bạch cầu trung già nhất, hình trịn, đường kính 10 – 15 µm Nguyên sinh chất bắt màu ñỏ nhạt, chứa nhiều hạt trung tính bắt màu đỏ xen lẫn màu vàng nhạt Nhân nhuộm màu tím sẫm, phân – tiểu thùy, có đến tiểu thùy Kết cấu hình chữ L, W, số 8,… * Loại bạch cầu ngun sinh chất khơng có hạt Lâm ba cầu: vào độ to nhỏ đặc trưng hình thái chia lâm ba cầu thành loại: ðại lâm ba : đường kính 10 – 19 µm, ngun sinh chất nhuộm màu xanh nhạt Nguyên sinh chất quanh nhân bắt màu nhạt phận khác Nhân hình trịn, hình thận, có hình tim dẹp Kết cấu khơng rõ Trung lâm ba: hình thái chung ñại lâm ba tiểu lâm ba Việc phân biệt tương đối khó Tiểu lâm ba: hình trịn, đường kính – 10 µm Ngun Lâm ba cầu sinh chất nhuộm màu xanh thẫm, có khơng bào li ti, quanh rìa nhân bắt màu xanh nhạt Nhân nhỏ trịn, có trịn dẹp hình hạt đậu màu tím sẫm Bạch cầu đơn nhân: (Monocyte) loại bạch cầu to bạch cầu máu ngoại vi, đường kính 12 – 20 µm; phần nhiều hình trịn, cá biệt hình trịn dài Ngun sinh chất bắt màu xanh xám nhạt màu khói xám Rìa nhân nhạt, khơng có hạt Nhân to, hình bầu dục, hình hạt đậu, hình thận, rìa khơng đều, bắt màu tím nhạt so với nhân lâm ba cầu Kết cấu nhân lỏng lẻo Tế bào tương (Plasmocyte) Là loại tế bào có nguồn gốc nhiều nơI, chủ yếu từ lâm ba cầu Nguyên sinh chất hình sợi tơ màu xanh, nhân hình trịn, hình tiom dẹp Bạch cầu đơn nhân Trường ðại học Nơng nghiệp Hà Nội – Giáo trình Giáo trình Chẩn đốn bệnh thú …………………….153 Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd.vT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.Lj.dtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn C.vT.Bg.Jy.Lj.Tai lieu Luan vT.Bg.Jy.Lj van Luan an.vT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.Lj Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an Loại tế bào máu gia súc ít, xuất nhiều bệnh có sinh nhiều kháng thể: bệnh truyền nhiễm, bệnh truyền nhiễm mãn tính * Bạch huyết cầu gia cầm Hình thái bạch cầu kiềm, lâm ba cầu, bạch cầu ñơn nhân gia cầm giống huyết cầu gia súc Chỉ riêng bạch cầu toan giống bạch cầu trung Bạch cầu toan đường kính – 11 µm, hình trịn, ngun sinh chất bắt màu xanh nhạt, có hạt trịn, ánh quang, nhỏ, phân bố ñều, bắt màu ñỏ tươI xanh nhạt * Công thức bạch cầu Là tỷ lệ phần trăm loại bạch cầu : bạch cầu kiềm, toan, trung, lâm ba cầu tế bào ñơn nhân, có lúc cịn tính tế bào tương Cơng thức Arneth Arneth (1940) ñã phân chia bạch cầu theo giai đoạn phát triển Ơng tính tỷ lệ loại bạch cầu trung có nhân ñốt ( múi), ñốt… Cooke ñã ñơn giản hóa xếp Arneth phân thành loại: nhân ñốt, 2ñốt, ñốt, ñốt loại nhân phân thành đốt Cơng thức Schilling Arneth Bạch cầu trung Tủy cầu Tế bào tủy ấu cầu Bạch cầu trung trưởng thành Nhân ñốt Nhân gậy Nhân Nhân lõm lõm I ñốt I Nhân ñốt II ñốt III ñốt IV ñốt V ñốt Cooke II III IV V Ponder ñốt ñốt ñốt ñốt Công thức Schilling Trong công thức bạch cầu, Schilling chia bạch cầu trung loại: tủy cầu, ấu cầu, trung tính nhân gậy trung tính nhân đốt Công thức bạch cầu biểu diễn sau: Tổng Bạch cầu trung Bạch Bạch Lâm ba ðơn Tế số bạch cầu cầu cầu nhân bào Tủy ấu Nhân Nhân cầu kiềm toan tương cầu cầu gậy ñốt Trong máu động vật khỏe hồn tồn khơng có tủy cầu, ấu cầu tế bào tương ít, khơng q 0,5% Bạch cầu kiềm, toan, đơn nhân không nhiều Bạch cầu trung lâm ba cầu chiếm tỷ lệ 50% ngựa, lợn, chó bạch cầu trung nhiều Các loại ñộng vật khác lâm ba cầu nhiều Cách xác định cơng thức bạch cầu Trên phiến kính đếm hết loại bạch cầu cho tổng số ñược 100 cái; 200 – 300 cái, Lấy số bình qn Dùng vật kính dầu hay vật kính 40 đếm theo cách sau: - ðếm góc theo hình chữ chi, góc 25 50 - ðếm đầu phíên kính theo hình chữ chi, ñếm từ bên sang bên kia, ñầu 50 Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Giáo trình Giáo trình Chẩn đốn bệnh thú …………………….154 Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd.vT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.Lj.dtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn C.vT.Bg.Jy.Lj.Tai lieu Luan vT.Bg.Jy.Lj van Luan an.vT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.Lj Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an - Cũng phiến kính, đếm theo hình chữ chi đầu, tổng cộng 100 Hai phương pháp ñầu thường dùng xác Chú ý: phiến kính bạch cầu thường phân bố khơng đều: đầu phiến kính bạch cầu ít, cuối phiến kính bạch cầu lại nhiều, ñặc biệt bạch cầu toan, bạch cầu trung lâm ba cầu Chỉ số nhân ( số chuyển nhân) Chỉ số nhân theo Shilling thương số bạch cầu trung non bạch cầu trung trưởng thành máu ngoại vi: Tủy cầu + ấu cầu + nhân gậy ( %) CNS = Nhân ñốt (%) 0+0+4 ngựa: = 50 12,5 0+0+4 bò: = 31 31 0+0+3 lợn: = 40 40 Công thức bạch cầu thay ñổi Công thức bạch cầu thay ñổi loại bệnh ý nghĩa chẩn đốn: + Bạch cầu trung tăng ( Neutrocytosis): - Sinh lý: sau ăn, lao ñộng nặng; tăng tạm thời; - Trong bệnh có nhiễm khuẩn cấp tính: viêm phổi, viêm họng, viêm dày – ruột; - Trong bệnh nhiễm khuẩn cấp tính vi khuẩn - Bạch cầu trung tăng, chủ yếu bạch cầu non, tổng số bạch cầu tăng chứng tỏ quan tạo máu bị kích thích mạnh, số lượng lớn máu ngoại vi bị phá hủy - Bạch cầu trung tăng, loại nhân đốt giảm so với mức bình thường, máu có nhiều bạch cầu bệnh thường nhiễm trùng nặng.Thấy bệnh truyền nhiễm cấp tính, bệnh gây bại huyết + Bạch cầu trung giảm: ( Neutropenia) - Các bệnh virus, số trường hợp nhiễm ñộc; - Nhiễm khuẩn nặng ( tối cấp tính), suy tủy xương + Lâm ba cầu tăng ( Lymphocytosis) - Nhiễm khuẩn mãn tính: Lao, bệnh lê dạng trùng trâu bò; - Các bệnh virus, bệnh nhiễm trùng cấp kỳ chuyểm biến tốt + Lâm ba cầu giảm: ( Lymphocytopenia) - Một số bệnh nhiễm khuẩn cấp; - Ung thư đường tiêu hóa, hơ hấp + Bạch cầu toan tăng ( Eosinophilia) Số bạch cầu toan tăng, tỷ lệ công thức bạch cầu tăng: - Tăng cao liên tục: bệnh ký sinh trùng, ký sinh trùng da, bệnh dị ứng: chàm, phản ứng huyết - Tăng nhẹ thoảng qua: thời kỳ lui bệnh nhiễm khuẩn cấp, dùng nhiều kháng sinh Trường ðại học Nơng nghiệp Hà Nội – Giáo trình Giáo trình Chẩn đốn bệnh thú …………………….155 Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd.vT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.Lj.dtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn C.vT.Bg.Jy.Lj.Tai lieu Luan vT.Bg.Jy.Lj van Luan an.vT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.Lj Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an + Bạch cầu toan giảm ( Eosinopenia): - Nhiễm khuẩn cấp tính, q trình nung mủ cấp; - Các trường hợp bệnh ác tính, bạch cầu toan cịn ít, có + Bạch cầu kiềm tăng ( Basophilia) Là loại bạch cầu có số lượng máu nhất, tỷ lệ cơng thức bạch cầu ngựa khoảng 0,0 – 1,0 %; trâu bò – 0,0 – 2,0 %; lợn – 0,0 – 1,0 %; đánh giá khối lượng qua cơng thức bạch cầu khó Bạch cầu kiềm tăng bệnh máu trắng, phản ứng tiêm huyết thanh, số bệnh ký sinh trùng Việc ñánh giá bạch cầu kiềm giảm qua cơng thức bạch cầu khơng đếm số lượng tuyệt đối chẩn đốn lâm sàng thú y làm + Bạch cầu đơn nhân tăng ( monocytosis) bệnh truyền nhiễm mãn tính, q trình nhiễm trùng Các bệnh Tripanosomoesis, piroplasmosis có bạch cầu đơn nhân tăng + Bạch cầu ñơn nhân giảm ( Monocytopenia) Số lượng bạch cầu ñơn nhân máu ít, tỷ lệ cơng thức bạch cầu khoảng 3% ngựa, 4% bị Vì vậy, phát bạch cầu đơn nhân giảm khó, trường hợp bệnh mà bạch cầu trung tăng nhiều, tỷ lệ bạch cầu ñơn nhân cơng thức bạch cầu Bạch cầu ñơn nhân giảm bệnh bại huyết cấp tính, bệnh mà bạch cầu trung tăng nhiều Bạch cầu ñơn nhân thời gian dài tiên lượng khơng tốt * Hình thái bạch cầu thay ñổi Bạch cầu thay ñổi có loại: tăng sinh biến chất Bạch cầu tăng sinh chủ yếu tượng máu tuần hoàn xuất nhiều bạch cầu non Trên tiêu nhuộm, tỷ lệ bạch cầu non kích thước lớn nhiều so với bình thường chiếm ưu Lâm ba cầu: máu gia súc khỏe tỷ lệ lâm ba cầu lớn; trung đại lâm ba cầu ít, khơng q % Nhưng bệnh truyền nhiễm nặng tỷ lệ hồn tồn thay đổi : tiểu lâm ba cầu ít, tiêu chủ yếu ñại lâm ba cầu có kích thước lớn ( đường kính 15 µ trở nên) Bạch cầu trung: có thay đổi tương tự, kích thước tế bào to bình thường Chú ý bạch cầu trung nhân gậy có kích thước lớn, có lớn đến 20 µm Về cấu trúc, bạch cầu trung bệnh lý nguyên sinh chất có vật thể nhỏ bắt màu kiềm Những vật thể lúc đầu mạng lưới màu xanh, sau thối hóa thành mảng, hạt nhỏ, rải rác khắp tế bào Nhười ta cho hạt protein thối hóa ảnh hưởng chất ñộc Chú ý bạch cầu trung non bắt màu kiềm ñầu ña sắc, khác với hạt kiềm Trong số bệnh nặng, hạt bệnh lý trên, tìm thấy tiểu thể bao hàm ( Doehle), vật thể hình thái to nhỏ khác nhau, tập trung ñám, nhuộm Giemsa bắt màu xanh da trời nhạt Thường gặp bệnh truyền nhiễm nặng trúng độc Bạch cầu thối hóa: Là bạch cầu có thay đổi cấu trúc, ñặc biệt nguyên sinh chất nhân Trong nguyên sinh chất xuất không bào to nhỏ đủ loại Trong tế bào có có hai khơng bào, nhiều khơng bào làm cho ngun sinh chất có chỗ trống lỗ chỗ Nhân bạch cầu thay ñổi rõ: nhuộm màu khác thường, teo lại, ñặc lại, phân nhiều nhánh xuất khơng bào Lâm ba cầu có thay đổi tương tự bạch cầu trung: Nguyên sinh chất nhuộm mờ, hạt nhỏ li ti màu xanh da trời ít, số tế bào hẳn Khơng bào Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Giáo trình Giáo trình Chẩn đốn bệnh thú …………………….156 Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd.vT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.Lj.dtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn C.vT.Bg.Jy.Lj.Tai lieu Luan vT.Bg.Jy.Lj van Luan an.vT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.Lj Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an nhiều, to nhỏ số lượng tế bào khơng giống Nhân phình ra, lỏng lẻo, nhuộm màu khơng Những trường hợp bệnh nặng, máu tìm thấy ngun bào lympho tế bào nhân chia nhánh Trong số trường hợp trúng ñộc bệnh truyền nhiễm nặng, bạch cầu đơn nhân có thay đổi: ngun sinh chất màu vàng xám có khơng bào Nhân phình hình thù khác thường, bắt màu nhạt khơng ñều Kích thước tế bào to hẳn Bạch cầu toan: Những hạt toan nguyên sinh chất bắt màu khác thường, to nhỏ khơng Nhân chia nhiều nhánh, nhuộm màu khơng Bạch cầu kiềm, nhân vỡ thành mảng, hạt kiềm tan không cịn hình thù thường thấy C Số lượng tiểu cầu: ðếm số lượng tiểu cầu Hóa chất: Magie sulfat 14% Dung dịch cố ñịnh HgCl2 0,1g Axit axetic giọt Cồn tuyệt ñối 10,0 ml Thuốc nhuộm: Giemsa Wright Cách ñếm: Theo Fonio: Lấy giọt máu tai, cho thêm giọt Magie sulfat 14% trộn Phiết kính để khơ khơng khí Nhuộm thuốc Wright cố định ( dung dịch trên) nhuộm thuốc nhuộm Giemsa ðếm vật kính dầu: ðếm 1000 hồng cầu tiểu cầu Ví dụ có M tiểu cầu số lượng tiểu cầu mm3 máu là: M x Số lượng hồng cầu mm3 máu 1000 Số lượng tiểu cầu gia súc khỏe, nghìn /mm3 Ngựa Trâu Cừu Lợn Gà Bị Dê Chó Thỏ Vịt 250 – 600 220 – 380 270 – 510 180 – 300 22 – 41 260 – 700 540 – 1000 190 – 570 120 – 480 70 – 120 Tế bào máu gia cầm Tiểu cầu tăng bệnh truyền nhiễm Tiểu cầu giảm: Thiếu máu truyền nhiễm ngựa * ðếm huyết cầu gia cầm Hồng cầu tiểu cầu gia cầm có nhân thành phương pháp dếm huyết cầu gia cầm, không giống ñếm huyết cầu gia súc Các ñếm gián tiếp: Dùng ống hút hồng cầu hút máu ñến vạch 0,5 hút tiếp nước sinh lý 0,85 % ñến vạch 101 ( pha lỗng 200 lần) theo cách đếm hồng cầu, đếm tổng số Trường ðại học Nơng nghiệp Hà Nội – Giáo trình Giáo trình Chẩn đốn bệnh thú …………………….157 Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd.vT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.Lj.dtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn C.vT.Bg.Jy.Lj.Tai lieu Luan vT.Bg.Jy.Lj van Luan an.vT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.Lj Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an huyết cầu có mm3 máu ( hồng cầu, bạch cầu, tiểu cầu) Sau phiết kính máu nhuộm tính tỷ lệ hồng cầu, bạch cầu, tiểu cầu 1000 huyết cầu đếm kính hiển vi Từ tỷ lệ suy số lượng loại huyết cầu 1mm3 máu Ví dụ: Tổng số huyết cầu mm máu 3,2 triệu, 1000 huyết cầu có 982 % hồng cầu , bạch cầu, 11 tiểu cầu Vậy: 982 Số hồng cầu = x 3.200.000 1000 Số bạch cầu = x 3.200.000 1000 11 Số tiểu cầu = x 3.200.000 1000 CÂU HỎI KIỂM TRA CHƯƠNG VIII: XÉT NGHIỆM MÁU Trình bày lấy máu xét nghiệm? Xét nghiệm lý tính máu? Xét nghiệm hố tính máu ý nghĩa chẩn đốn? Xét nghiệm tế bào máu ý nghĩa chẩn đốn? Trường ðại học Nơng nghiệp Hà Nội – Giáo trình Giáo trình Chẩn đốn bệnh thú …………………….158 Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd.vT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.Lj.dtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn C.vT.Bg.Jy.Lj.Tai lieu Luan vT.Bg.Jy.Lj van Luan an.vT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.Lj Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd.vT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.Lj.dtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn