Bộ YTÉ TRƯỜNG ĐẠI HỌC DƯỢC HÀ NỘI• • • • vũ CẢM TÚ TỎNG HỢP VÀ THỬ TÁC DỤNG ức CHẾ INDOLE AMIN 2,3 DIOXYGENASE 1 CỦA MỘT SỐ DẪN CHẤT ACETAMID MỚI MANG KHUNG 6 AMINO 1H INDAZOL KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP DƯỢ[.]
Bộ YTÉ TRƯỜNG ĐẠI • HỌC • DƯỢC • HÀ NỘI • vũ CẢM TÚ TỎNG HỢP VÀ THỬ TÁC DỤNG ức CHẾ INDOLEAMIN-2,3-DIOXYGENASE CỦA MỘT SỐ DẪN CHẤT ACETAMID MỚI MANG KHUNG 6-AMINO-1H-INDAZOL KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP DƯỢC sĩ HÀ NỘI - 2022 Bộ YTÉ TRƯỜNG ĐẠI HỌC DƯỢC HÀ NỘI vũ CẨM TÚ MÃ SINH VIÊN: 1701635 TÔNG HỢP VÀ THỬ TÁC DỤNG ức CHẾ INDOLEAMIN-2,3-DIOXYGENASE CỦA MỘT SÓ DẪN CHẤT ACETAMID MỚI MANG KHUNG 6-AMINO-1H-INDAZOL KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP DƯỢC sĩ Người hướng dẫn: PGS TS Trần Phương Thảo ThS Ngơ Xn Hồng Nơi thực hiện: Bộ mơn Hố dược HÃ NỘI - 2022 LỜI CẢM ƠN Những dòng khóa luận tốt nghiệp mình, tơi xin đuợc gửi lời cảm ơn sâu sắc đến nguời đà hỗ trợ, giúp đờ động viên suốt thời gian thục nghiên cứu, giúp hồn thành khóa luận cách tốt Trước hết, xin gửi lời cảm ơn chân thành đến hai thầy cô hướng dẫn thực đề tài này, PGS.TS Trần Phương Thảo - Bộ mơn Hóa dược Trường Đại học Dược Hà Nội ThS Ngơ Xn Hồng - Bộ mơn Hóa hừu Trường Đại học Dược Hà Nội Thầy cô không hướng dẫn tận tình tạo nhũng điều kiện thuận lợi cho tơi q trình nghiên cứu mà cịn cho tơi dẫn xác, kịp thời, lời khuyên động viên lúc gặp khó khăn Tơi xin gửi lời cảm ơn đến giảng viên, nghiên cứu viên anh chị kỹ thuật viên công tác Bộ mơn Hóa dược - Trường Đại học Dược Hà Nội, Khoa Hóa - Trường Đại học Tự nhiên Hà Nội giúp đỡ tạo điều kiện cho thực khóa luận Lời cuối, tơi xin gửi lời cảm ơn đến gia đình, bạn bè thành viên khác thực nghiên cứu Bộ mơn Hóa dược, đặc biệt TS Dương Tiến Anh, anh Nguyễn Hữu Long, anh Dương Văn Hiếu, em Nguyễn Thị Huế, em Trương Cao Minh, em Lê Thiên Bảo Long đồng hành, giúp đỡ, chia sẻ nỗi buồn vui khích lệ tơi suốt q trình thực khóa luận Hà Nội, ngày tháng năm Sinh viên Vũ Câm Tú MỤC LỤC LỜI CAM ƠN MỤC LỤC DANH MỤC CÁC KÝ HIỆU, CHỮ VIẾT TẮT DANH MỤC CÁC BẢNG DANH MỤC CÁC HÌNH VÊ DANH MỤC CÁC sơ ĐỒ ĐẶT VẤN ĐỀ CHƯƠNG 1: TỐNG QUAN 1.1 INDOLEAMIN-2,3-DIOXYGENASE VÀ BỆNH UNG THƯ 1.1.1 Khái niệm Indoleamin 2,3 dioxygenase 1.1.2 IDO dung nạp miễn dịch 1.1.3 Cơ chế ức chế miễn dịch IDO 1.2 CẤU TRÚC CỦA IDO1 VÀ CÁC CHẤT ức CHẾ IDO1 1.2.1 Cấu trúc IDO1 1.2.2 Cấu trúc chất ức chế 1DO1 1.2.3 Một số chất ức chế IDO1 nghiên cứu .8 1.3 MỘT SỐ PHẢN ỬNG ĐƯỢC THựC HIỆN TRONG ĐỀ TÀI 11 1.3.1 Phản ứng amid hóa 11 1.3.2 Phản ứng khử nhóm nitro thơm 13 CHƯƠNG 2: NGUYÊN LIỆU, THIÉT BỊ, NỘI DƯNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 15 2.1 NGUYÊN VẬT LIỆU VÀ THIẾT BỊ 15 2.1.1 Nguyên liệu, hóa chất 15 2.1.2 Thiết bị, dụng cụ nghiên cứu .16 2.2 NỘI DUNG NGHIÊN cứu 16 2.2.1 Tổng hợp hóa học 16 2.2.2 Đánh tác dụng ức chế IDO1 17 2.3 PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN cứu 17 2.3.1 Tổng họp hóa học 17 2.3.2 Thử tác dụng ức chế ID01 18 CHƯƠNG 3: THỤC NGHIỆM, KÉT QUÃ VÀ BÀN LUẬN 41 3.1 HÓA HỌC 21 3.1.1 Tổng họp hóa học 21 3.1.2 Kiềm tra độ tinh khiết 31 3.1.3 Xác định cấu trúc 32 3.2 THỬ TÁC DỤNG ức CHÉ IDO1 35 3.3 BÀN LUẬN 36 3.3.1 Các phản ứng tổng họp hóa học 36 3.3.2 Khắng định cấu trúc 40 3.3.3 Thử tác dụng ức chế IDO1 44 CHƯƠNG 4: KÉT LUẬN VÀ KIÉN NGHỊ 47 PHỤ LỤC DANH MỤC CÁC KÝ HIỆU, CHỮ VIẾT TẲT 13c-nmr ’h-nmr : Phổ cộng hưởng từ hạt nhân carbon 13 1-MT : 1-Methyl tryptophan AcOH : Acid acetic AhR : Aryl hydrocarbon receptor Amg-1 : A-(benzo[d] [ 1,3]dioxol-5-yl)-2-((5-(p-tolyl)thiazolo[2,3-c] [ 1,2,4]triazol3- yl)thio)acetamid APC : Te bào trình diện kháng ngun CDC13 : Dicloromethan deuteri hóa CDI : Carbonyldiimidazol d : Vạch đôi phổ NMR (doublet) DC : Tế bào đuôi gai DCM : Dicloromethan dd : Vạch chẻ đôi lần phổ NMR (doublet of doublet) DIPEA : VA-Disopropylethylamin DMAP : 4-Dimethylaminopyridin DMF : VA-dimethylformamid DMSO-íZố : Dimethylsulfoxid deuteri hóa EA : Ethyl acetat EDC : -Ethyl-3-(3-dimethylaminopropyl)carbodiimid EDTANa2 : Natri ethylendiamintetraacetat eIF2-a : Họp phần a Yếu tố khởi phát dịch mã Eukaryotic Initiation Factor (eIF2) GCN2 : General control nondipressible GLK-1 : Glucokinase HOBt : Hydroxybenzotriazol IDO : Indoleamin-2,3-dioxygenase IDO1 : Indoleamin-2,3-dioxygenase : Phổ cộng hưởng từ hạt nhân proton IDO2 : Indoleamin-2,3-dioxygenase IFN-ỵ : Interferon Ỵ IR : Phổ hồng ngoại MDSC : Te bào ức chế có nguồn gốc dịng tủy MeOH : Methanol MS : Phổ khối lượng mTOR : Mechanistic target of rapamycin NF-kB : Protein kiểm soát phiên mã (nuclear factor kappa-light-chain-enhancer) NK : Te bào diệt tự nhiên PD-1 : Program cell death PI : 4-Phenylimidazol s : Vạch đơn phổ NMR (singlet) t : Vạch ba phổ NMR (triplet) TAM : Đại thực bào liên quan đến khối u TEA : Triethylamin TDO : Tryptophan-2,3-dioxygenase TF-0 : Trasnforming growth factor p TLC : Sắc ký lóp mỏng Treg : Tế bào T điều hịa ỏ : Độ dịch chuyển hóa học DANH MỤC CÁC BẢNG Bảng 2.1 Danh mục hóa chất sử dụng nghiên cứu 15 Bảng 2.2 Cách pha dung dịch thử sinh học 19 Bảng 3.1 Chỉ số hóa lý hiệu suất tổng hợp chất Va-d 31 Bảng 3.2 Giá tri Rf nhiệt độ nóng chảy (t°nc) dẫn chất Va-d 32 Bảng 3.3 Giá tri phổ MS chất mục tiêu Va-d 33 Bảng 3.4 Dữ liệu phổ IR chất Va-d 33 Bảng 3.5 Dữ liệu phổ cộng hưởng từ ‘H-NMR dẫn chất Va-d 34 Bảng 3.6 Dữ liệu phổ cộng hưởng từ hạt nhân 13C-NMR cácdẫn chất Va-dError! Bookmarl Bảng 3.7 Kết thử ức chế ĨDO1 Va-d 36 DANH MỤC CÁC HÌNH VẼ Hình 1.1 Con đường kynurenin Hình 1.2 Sự dung nạp miễn dịch tế bào ung thư Hình 1.3 Ảnh hưởng thiếu hụt trytophan đến dung nạp miễn dịch IDO1 Hình 1.4 Co chế gây dung nạp miễn dịch IDO1 Hình 1.5 Cấu trúc phức hợp IDO1-PI lối vào kênh nhậpxuất chất Hình 1.6 Mơ hình cấu trúc chất ức chế IDO1 Hình 1.7 Cơng thức số chất ức chế IDO1 mang khung indol Hình 1.8 Cơng thức số chất ức chế IDO1 mang khung imidazol Hình 1.9 Cơng thức số chất ức chế IDO1 thuộc nhóm V-hydroxyamidin 10 Hình 1.10 Các chất ức chế IDO1 mang khung indazol 10 Hình 1.11 Các chất ức chế IDO1 mang khung 6-aminoindazol 11 Hình 3.1 Phổ TR chất Va 41 Hình 3.2 Phổ MS chất Va 42 Hình 3.3 Phổ ’H-NMR chất Va 43 Hình 3.4 Phổ 13C-NMR chất Va 44 DANH MỤC CÁC sơ ĐỒ Sơ đồ 1.1 Quá trình tạo amid nhờ tác nhân acyl hóa 11 Sơ đồ 1.2 Cơ chế tạo acyl clorid từ acid carboxylic SOC12 12 Sơ đồ 1.3 Phản ứng amid hóa one-pot với SOC12 có mặt TEA DCM 12 Sơ đồ 1.4 Cơ chế tạo acyl clorid với (COC1)2 có mặt DMF 13 Sơ đồ 1.5 Cơ chế khử hóa nhóm nitro thơm với kim loại mơi trường acid 13 Sơ đồ 1.6 Cơ chế oxy hóa Sn(II) thành Sn(IV) tạo ion [HSnC14]' 14 Sơ đồ 1.7 Khử hóa dẫn chất indazol SnCl2 alcol 14 Sơ đồ 3.1 Quy trình tổng hợp chung 22 Sơ đồ 3.2 Quy trình tổng họp chất II 21 So’ đồ 3.3 Quy trình tổng họp chất III 21 Sơ đồ 3.4 Quy trình tổng họp chất IVa-d 22 Sơ đồ 3.5 Quy trình tổng họp chất IVa 23 So’ đồ 3.6 Quy trình tổng hop chất IVb 24 Sơ đồ 3.7 Quy trình tổng hop chất IVc 25 Sơ đồ 3.8 Quy trình tổng họp chất IVd 26 So’ đồ 3.9 Quy trình tổng họp chất Va-d 26 Sơ đồ 3.10 Quy trình tổnghợp chất Va 26 Sơ đồ 3.11 Quy trình tổnghợp chất Vb 28 So’ đồ 3.12 Quy trình tổnghợp chất Vc 29 Sơ đồ 3.13 Quy trình tổnghợp chất Vd 30 Sơ đồ 3.14 Cơ chế hình thành hai sản phẩm alkyl 6-nitro-lH-indazol 37 So’ đồ 3.15 Cơ chế thủy phân ester tạo acid 38 Sơ đồ 3.16 Cơ chế amid hóa tạo dẫn chất IVa-d .39 cell tolerogenicity Immunological investigations 2012, 41(6-7), 738-764 13 Hoang, N.X., et al Design, synthesis and bioevaluation of novel 6-substituted aminoindazole derivatives as anticancer agents RSC Advances 2020, 10(73), 45199-45206 14 Hornyák, L., Dobos, N., Koncz, G., Karányi, z., Pali, D., Szabo, z., & Szekvolgyi, L The role of indoleamine-2, 3-dioxygenase in cancer development, diagnostics, and therapy Frontiers in immunology 2018, 151 15 Kadam, H K., & Tilve, s G Advancement in methodologies for reduction of nitroarenes RSC advances 2015, 5(101), 83391-83407 16 Kim, R Cancer immunoediting: from immune surveillance to immune escape Cancer Immunotherapy 2007, 9-27 17 Leggio, A., et al One-pot synthesis of amides from carboxylic acids activated using thionyl chloride Rsc Advances 2016, 6(41), 34468-34475 18 Li, M., Bolduc, A R., Hoda, M N., Gamble, D N., Dolisca, s B., Bolduc, A K., & Johnson, T s The indoleamine 2, 3-dioxygenase pathway controls complement-dependent enhancement of chemo-radiation therapy against murine glioblastoma Journal for immunotherapy of cancer 2014, 2(1), 1-13 19 Liu, X., et al Inhibition Mechanism of Indoleamine 2, 3-Dioxygenase (IDO1) by Amidoxime Derivatives and Its Revelation in Drug Design: Comparative Molecular Dynamics Simulations Frontiers in Molecular Biosciences 2020, 6, 164 20 Lob, s., Konigsrainer, A., Zieker, D., Briicher, B L., Rammensee, H G., opelz, G., & Terness, p IDO1 and IDO2 are expressed in human tumors: levobut not dextro-1-methyl tryptophan inhibits tryptophan catabolism Cancer immunology, immunotherapy 2009, 58(1), 153-157 21 Mbongue, J c., Nicholas, D A., Torrez, T w., Kim, N s., Firek, A F., & Langridge, w H The role of indoleamine 2, 3-dioxygenase in immune suppression and autoimmunity Vaccines 2015, 3(3), 703-729 22 Mellor, A L., & Munn, D H IDO expression by dendritic cells: tolerance and tryptophan catabolism Nature Reviews Immunology 2004, 4(10), 762-774 23 Mellor, A L., Chandler, p., Lee, G K., Johnson, T., Keskin, D B., Lee, J., & Munn, D H Indoleamine 2, 3-dioxygenase, immunosuppression and pregnancy Journal of reproductive immunology 2002, 57(1-2), 143-150 24 Mellor, A L., Chandler, p., Baban, B., Hansen, A M., Marshall, B., Pihkala, J., & Munn, D H Specific subsets of murine dendritic cells acquire potent T cell regulatory functions following CTLA4-mediated induction of indoleamine 2, dioxygenase International immunology 2004, 16(10), 1391-1401 25 Mellor, A L., Lemos, H., & Huang, L Indoleamine 2, 3-dioxygenase and tolerance: where are we now? Frontiers in immunology 2017, 8, 1360 26 Metz, R., et al Novel Tryptophan Catabolic Enzyme IDO2 Is the Preferred Biochemical Target of the Antitumor Indoleamine 2,3-Dioxygenase Inhibitory Compound d-l-Methyl-Tryptophan Cancer Research 2007, 67(15), 70827087 27 Moon, Y w., Hajjar, J., Hwu, p., & Naing, A Targeting the indoleamine 2, 3- dioxygenase pathway in cancer Journal for immunotherapy of cancer 2015, 3(1), 1-10 28 Munn, D H., & Mellor, A L IDO Pathway: Effect on Foxp3+ Tregs and Cancer Cancer Immunotherapy 2013, 583-596 29 Munn, D H., Shafizadeh, E., Attwood, J T., Bondarev, I., Pashine, A., & Mellor, A L Inhibition of T cell proliferation by macrophage tryptophan catabolism The Journal of experimental medicine 1999, 189(9), 1363-1372 30 Munn, D H., Sharma, M D., Baban, B., Harding, H p., Zhang, Y., Ron, D., & Mellor, A L GCN2 kinase in T cells mediates proliferative arrest and anergy induction in response to indoleamine 2, 3-dioxygenase Immunity 2005, 22(5), 633-642 31 Najfeld, V., Menninger, J., Muhleman, D., Comings, D E., & Gupta, s L Localization of indoleamine 2, 3-dioxygenase gene (INDO) to chromosome 8pl2—> pll by fluorescent in situ hybridization Cytogenetic and Genome Research 1993, 64(3-4), 231-232 32 Nguyen, N.T., et al Aryl hydrocarbon receptor negatively regulates dendritic cell immunogenicity via a kynurenine-dependent mechanism Proceedings of the National Academy of Sciences 2010, 107(46), 19961-19966 33 Orlandi, M., et al Recent Developments in the Reduction of Aromatic and Aliphatic Nitro Compounds to Amines Organic Process Research & Development 2016, 22(4), 430-445 34 Pandolfi, F., Cianci, R., Pagliari, D., Casciano, F., Bagala, c., Astone, A., & Barone, c The immune response to tumors as a tool toward immunotherapy Clinical and Developmental Immunology 2011, 2011 35 Peter, M E., Hadji, A., Murmann, A E., Brockway, s., Putzbach, w., Pattanayak, A., & Ceppi, p The role of CD95 and CD95 ligand in cancer Cell death & differentiation 2015, 22(4), 549-559 36 Pradhan, N., Paul, s., Deka, s J., Roy, A., Trivedi, V., & Manna, D Identification of Substituted 1H- Indazoles as Potent Inhibitors for Immunosuppressive Enzyme Indoleamine 2, 3- Dioxygenase ChemistrySelect 2017, 2(20), 5511-5517 37 Prendergast, G c., & Jaffee, E M Cancer immunologists and cancer biologists: why we didn't talk then but need to now Cancer Research 2007, 67(8), 3500-3504 38 Prendergast, G c., Smith, c., Thomas, s., Mandik-Nayak, L., Laury-Kleintop, L., Metz, R., & Muller, A J IDO in inflammatory programming and immune suppression in cancer In Tumor-induced immune suppression 2014, 311-346 39 Qian, s., He, T., Wang, w., He, Y., Zhang, M., Yang, L., & Wang, z Discovery and preliminary structure-activity relationship of IH-indazoles with promising indoleamine-2, 3-dioxygenase (IDO1) inhibition properties Bioorganic & Medicinal Chemistry 2016, 24(23), 6194-6205 40 Qian, s., Zhang, M., Chen, Q., He, Y., Wang, w., & Wang, z IDO as a drug target for cancer immunotherapy: recent developments in IDO inhibitors discovery RSC advances 2016, 6(9), 7575-7581 41 R Selvan, s., p Dowling, J., K Kelly, w., & Lin, J Indoleamine 2, 3dioxygenase (IDO): biology and target in cancer immunotherapies Current cancer drug targets 2016, 16(9), 755-764 42 Rõhrig, Ư F., Awad, L., Grosdidier, A., Larrieu, p., Stroobant, V., Colau, D., & Michielin, o Rational design of indoleamine 2, 3-dioxygenase inhibitors Journal of medicinal chemistry 2010, 53(3), 1172-1189 43 Soliman, H., Mediavilla-Varela, M., & Antonia, s Indoleamine 2, 3dioxygenase: is it an immune suppressor? Cancer journal (Sudbury, Mass.) 2010, 16(4) 44 Sugimoto, H., et al Crystal structure of human indoleamine 2,3-dioxygenase: Catalytic mechanism of 02 incorporation by a heme-containing dioxygenase Proceedings of the National Academy of Sciences 2006, 103(8), 2611-2616 45 Terness, p., Bauer, T M., Rose, L., Dufter, c., Watzlik, A., Simon, H., & opelz, G Inhibition of allogeneic T cell proliferation by indoleamine 2, 3dioxygenase-expressing dendritic cells: mediation of suppression by tryptophan metabolites The Journal of experimental medicine 2002, 196(4), 447-457 46 Wang, X X., Sun, s Y., Dong, Q Q., Wu, X X., Tang, w., & Xing, Y Q Recent advances in the discovery of indoleamine 2, 3-dioxygenase (IDO1) inhibitors MedChemComm 2019, 10(10), 1740-1754 47 Woodman, E.K., et al N, N'-Carbonyldiimidazole-Mediated Amide Coupling: Significant Rate Enhancement Achieved by Acid Catalysis with ImidazoleHCL Organic Process Research & Development 2009, 13(1), 106-113 48 Wu, H., Gong, J., & Liu, Y Indoleamine 2, 3-dioxygenase regulation of immune response Molecular medicine reports 2018, 17(4), 4867-4873 49 Yue, E.W., et al Discovery of Potent Competitive Inhibitors of Indoleamine 2,3-Dioxygenase with in Vivo Pharmacodynamic Activity and Efficacy in a Mouse Melanoma Model Journal of Medicinal Chemistry 2009, 52(23), 73647367 50 Yue, E.W., et al INCB24360 (Epacadostat), a Highly Potent and Selective Indoleamine-2,3-dioxygenase (IDO1) Inhibitor for Immuno-oncology ACS Medicinal Chemistry Letters 2017, 8(5), 486-491 51 Zaher, s s., Germain, c., Fu, H., Larkin, D F., & George, A J 3hydroxykynurenine suppresses CD4+ T-cell proliferation, induces Tregulatory-cell development, and prolongs corneal allograft survival Investigative ophthalmology & visual science 2011, 52(5), 2640-2648 52 Zaidi, N., & Jaffee, E M Immunotherapy transforms cancer treatment The Journal of Clinical Investigation 2019, 129(1), 46-47 53 Zarour, H M., DeLeo, A., Finn, o J., & Storkus, w J Categories of tumor antigens Holland-Frei Cancer Medicine 2003 54 Zhang, s G., Liang, c G., & Zhang, w H Recent advances in indazolecontaining derivatives: synthesis and biological perspectives Molecules 2018, 23(11), 2783 55 Zhang, Y., Kang, s A., Mukherjee, T., Bale, s., Crane, B R., Begley, T p., & Ealick, s E Crystal structure and mechanism of tryptophan 2, 3-dioxygenase, a heme enzyme involved in tryptophan catabolism and in quinolinate biosynthesis Biochemistry 2007, 46(1), 145-155 56 Coluccia, Antonio, et al, New Inhibitors of Indoleamine 2,3-Dioxygenase 1: Molecular Modeling Studies, Synthesis, and Biological Evaluation, Journal of Medicinal Chemistry 2016, 59(21), 9760-9773 57 Crosignani, Stefano, et al Discovery of a Novel and Selective Indoleamine 2,3Dioxygenase (IDO-1) Inhibitor 3-(5-Fluoro-lH-indol-3-yl)pyrrolidine-2,5- dione (EOS200271/PF-06840003) and Its Characterization as a Potential Clinical Candidate, Journal of Medicinal Chemistry 2017, 60(23), 9617-9629 58 Peng, Yi-Hui, et al Important Hydrogen Bond Networks in Indoleamine 2,3Dioxygenase (IDO1) Inhibitor Design Revealed by Crystal Structures of Imidazoleisoindole Derivatives with IDO1, Journal of Medicinal Chemistry 2015, 59(1), 282-293 59 Tojo, Shingo, et al Crystal Structures and Structure-Activity Relationships of Imidazothiazole Derivatives as ĨDO1 Inhibitors, ACS Medicinal Chemistry Letters 2014, 5(10), 1119-1123 60 Pradhan, Nirmalya, et al Identification of Substituted 1H-Indazoles as Potent Inhibitors for Immunosuppressive Enzyme Indoleamine 2,3-Dioxygenase 1, ChemistrySelect 2017, 2(20), 5511-5517 PHỤ LỤC Phụ lục Phổ IR chất Va Phụ lục Phổ IR chất Vb Phụ lục Phổ IR chất Vc Phụ lục Phổ IR chất Vd Phụ lục Phổ khối lượng chất Va Phụ lục Phổ khối lượng chất Vb Phụ lục Phổ khối lượng chất Vc Phụ lục Phổ khối lượng chất Vd Phụ lục Phổ 'H-NMR chất Va Phụ lục 10 Phổ 'H-NMR chất Vb Phụ lục 11 Phổ ^-NMR chất Vc Phụ lục 12 Phổ 'H-NMR chất Vd Phụ lục 13 Phổ l3C-NMR chất Va Phụ lục 14 Phổ 13C-NMR chất Vb Phụ lục 15 Phổ l 3C-NMR chất Vc Phụ lục 16 Phổ l3C-NMR chất Vd Comment: File name: C:\Program Files\LabSolutions\lR\Data\DH Duoc\2020\Ngo HoangMIlXlII - 9MII-9c 21-ispd No of Scans: 20 Intensity Moóc: %Transmi nance Min: 4(M) cm-1 Max: 4000 cm-1 Resolution: (cm-1] /Xtmosphere C orrection: OFF Phụ lục Phổ IR chất Va 50 ! !—T Ị—ĩ Ị * Ị T Ị ĩ T—Ị Ị H 4000 3600 3200 2800 2400 2000 1800 1600 1400 1200 1000 800 600 lll-9d cm-1 Comment: File name: C:\Program Files\LabSolutions\IR\Data\DH Duoc\2020\Ngo IloangMIIXIII - 9\lli-9dl.ispd No of Scans: 20 Intensity Mode: %Transmittance Min: 400 cm-1 Max: 4000 cm-1 Resolution: [cm-1] Atmosphere Correction: OFF Phu luc Phổ IR cùa chất Vb Comment File name: C:\Program Files\LabSolutions\lR\Data\DH Duoc\2020\Ngo HoangMINII - 9\lll-9fl jspd No of Scans: 20 Intensity Mode: %Transmittance Min: 400 cm-1 Max: 4000 cm-1 Resolution: ịcm-lỊ Atmosphere Correction: OFF Phụ lục Phổ IR chất Ve Comment: File name: C:\Program Files\LabSoIutionsVR\Data\DH Duoc\2020\Ngo HoangMINll - 9UH-9gl.tspd No of Scans: 20 Intensity Mode: STransmittancc Min: 400 cm-1 Max: 4000 cm-1 Resolution: (cm-1] Atmosphere Correction: OFF Phu luc Phổ IR cùa chất Vd x10 + Scan (rt: 1.6571 min) DHD_lll-9C_P0S.d 2.62.4- 301.0859 2.2- 21.81.61.41.2- 10.80.60.4- 339.0417 266.0948 0.2- 329.1170 234.1237 0' 351.1013 373.1428 256.1081 I ■ I 230 240 250 260 270 I I I 280 290 300 310 320 330 Counts vs Mass-to-Charge (m/z) I I I 340 350 360 370 380 Phụ lục Phổ khối lượng chất Va x10 + Scan (rt: 1.5830 min) DHD_lll-9D_POS.d 3.6 3.4301.0861 3.2 2.8- KLPT: 300,0778 2.6 2.4 2.2 1.8 1.6 1.4 339.0416 1.2 0.8- 0.6 0.4 0.2 146.0711 140 160 267.1246 206.0925 180 200 220 240 379.1156 260 280 300 320 340 360 Counts vs Mass-to-Charge (m/z) 380 Phụ lục Phổ khối lượng chất Vb 415.1558 400 420 453.1124 440 460 160 180 200 220 240 260 280 300 320 ế 340 Counts vs Mass-to-Charge (m/z) 360 Phụ lục Phổ khối lượng chất Vc Phụ lục Phô khôi lượng chât Vd 380 400 420 440 Hoang-III-9c rỢ^NỌỊ^^OCD^^iẠ^rìcMCNiẠ ooưìưìincN^cNnnoo^^^^iA «-1 o «rr-rr-rr-rrr-r-rtftftfsw ư> Current Data Parameters NAJC Hoang-xxx-9c EXPNO 32 PROCNO F2 - Acquisition Parameters cute 20190221 rise" 9.42 •NS7RUM spec: PROBHD an PABBO B8/ TOLPRƠG xg30 45334 TD SOLVENT CDC13 MS 1« D3 _2 SXH 10000.000 Hx 0.132388 Hx FXCftES 3.2747999 sec AO RG 191.38 CM 30.000 usee DE 8.30 w c TE 298.1 X 1.00000000 sec DI TDO SFO1 wc: Pl PLX1 F2 - Processing parameters SI 83334 SF 300.1300121 MHx NCM EX SSB LB 0.30 MX GB PC 1.00 I 9.5 9.0 8.5 8.0 7.5 7.0 6.5 6.0 5.5 5.0 4.5 4.0 CHANNEL fl 300.1330883 KHx 1H 9.80 usee 24.00000000 M 3.5 3.0 2.5 2.0 1.5 1.0 ppm Phụ lục Phổ *H-NMR chất Va III-9d or ^■■^■COCNOslr-ixyCỌCMOsíự^^ oc'ininmmcomromcN OMCJCMCM^OI'P'PVP'P^O ocn»n»nch*n»r>r-i\po oor*t^r-t-r-r-r^r* Current Data Parameters SAME Hoang-::x-9d EXPNO 10 PFOCNO F2 - Acquisition Parameters Date_ 20180924 Time" 1.31 omN spect PROBHD an PABBO BB/ PULPROG xg30 TD 43334 SOLVENT CDC13 NS 14 DS SWH 10000.000 Hx FXDRES 0.132388 Kx A 3.2747999 sec RG 191.38 CM 30.000 usee DE 4.30 usee TE 297.8 K DI 1.00000000 sec TD0 SFO1 NUC1 Pl PLW1 CWXMNFT fl AaaAAAAM 300.1330883 KHx 1H 9.80 usee 24.00000000 w F2 - Processing parameters sx 43334 SF 300.1300128 XHx XDW EK SSB LB 0.30 Hx GB PC 1.00 lạ’ íj 15^1 IỂI;I I I I I I I T I Ị Phu luc 10 Phổ ‘H-NMR chất Vb ppm Hoang-III9f Currant Data Parameters HÀKE Hoang-ix:9f EXPNO 62 PROCKO Data Time” ZNSTRUK PROSKD PULPROG TO SOLVEXT MS DS SMH FZE o eq o *p ơ\ eq ifi co cn C-* eq ư> •T eq r-HOơ'or-CMr^ooooơ' oooc'ocMin-rcooa'mcocncMininmvP ’rCM CJ ^coHhcjcocoino^fMC'iniDnH^^b • s cn \vXXŨẪỖ^/ I Current Data Parameters NAME Hoang-xx:9f EXPNO 60 PROCNO FZ • Acquisition rarameters Date_ 20181118 Tim” 23.37 XNSTRUK spect PROBHD M PABBO BB/ PULFROG TO 65536 SOLVENT CDC13 NS 4096 DS SXH 31250.000 Hz 0.476837 Hz FXDKES 1.0485760 sec AO RG 191.38 DM 16.000 usee DE 6.50 usee TE 298.6 K DI 2.00000000 sec Dll 0.03000000 sec TDG SFO1 NUC1 Pl PLX1 CHANNEL fl ■«»«*««« 125.7703637 MHz 13c 9.50 usee 90.00000000 X ■■■asaia CHANNEL f2 ôôôãô SFO2 500.1320005 MHz NUC2 1H CPDPRG(2 waltz!6 PCPD2 80.00 usee PLW2 24.00000000 w PLX12 0.36015001 N PLX13 0.23050000 X 180 160 140 120 80 100 60 40 20 ppm F2 - Processing paraneters sx 65536 SF 125.7577885 MHz XDK EK SSB LB 1.00 Hz GB PC 1.40 Phụ lục 15 Phổ 13C-NMR chất Vc Hoang-IIl9g o •-* o CMKí>ư)’r’rí*)