Nghiên cứu nhân giống và nuôi trồng nấm đầu khỉ (hericium erinaceus)

TRƯỜNG ĐẠI HỌC LÂM NGHIỆP VIỆT NAM VIỆN CÔNG NGHỆ SINH HỌC LÂM NGHIỆP o0o KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP NGHIÊN CỨU NHÂN GIỐNG VÀ NUÔI TRỒNG NẤM ĐẦU KHỈ (HERICIUM ERINACEUS) NGÀNH : CÔNG NGHỆ SINH HỌC MÃ SỐ : 7420201 Giáo viên hướng dẫn : TS Nguyễn Thị Hồng Gấm Sinh viên thực : Kha Văn Trung Lớp : K61 – CNSH Khóa học : 2016 - 2020 Hà Nội, 2020 LỜI CẢM ƠN Trong trình thực luận văn tốt nghiệp em nhận giúp đỡ tận tình từ thầy giáo thuộc viện Công nghệ sinh học Lâm nghiệp - trường Đại học Lâm nghiệp Em xin gửi lời cảm ơn sâu sắc đến cô TS Nguyễn Thị Hồng Gấm người trực tiếp hướng dẫn, giúp đỡ đóng góp ý kiến q báu để em hồn thành đề tài Đồng thời, em xin gửi lời cảm ơn tới thầy cô giáo thuộc môn Công nghệ tế bào tạo điều kiện giúp đỡ em suốt trình thực đề tài Thơng qua q trình thực đề tài, em học nhiều điều rút nhiều học kinh nghiệm quý báu Vì kiến thức thân cịn hạn chế, q trình thực đề tài khơng tránh khỏi sai sót, em kính mong nhận ý kiến đóng góp thầy Em xin chân thành cảm ơn! Hà Nội, ngày tháng năm 2020 Sinh viên thực Kha Văn Trung ĐẶT VẤN ĐỀ Ở Việt Nam giới, nấm ăn biết đến từ hàng ngàn năm có mùi vị hương thơm hấp dẫn Khơng thế, nhiều cơng trình nghiên cứu cho thấy nấm ăn có giá trị dinh dưỡng cao, khơng giàu hàm lượng protein, glucid, lipid, mà chứa nhiều chất khống, đặc biệt axit amin khơng thay thế, vitamin thiết yếu Vitamin A, Vitamin B, Vitamin C, Vitamin D, Vitamin E… Trong y học, nấm ăn biết đến phương thuốc để: điều hịa hut áp, chống béo phì, tăng sức đề kháng, phòng chống ung thư Nấm coi loại “rau sạch”, “thịt sạch”, không trồng đất, khơng phải phân bón, khơng phun thuốc trừ, thời gian trông thu hoạch nhanh, nên sản phẩm dễ dàng đạt đạt tiêu chuẩn “rau sạch” Hơn thế, trồng nấm công việc không phức tạp, nguyên liệu dễ kiếm Trước hết, cung cấp nguồn thực phẩm phục vụ tiêu dùng hàng ngày Nếu trồng nhiều bán nấm tươi, phơi sấy khơ, tạo nguồn thu nhập đáng kể cho gia đình xã hội Phế thải sau thu hoạch hết nấm chuyển sang làm phân bón, chất đốt,… Sản xuất nấm nghề nghiệp phù hợp với nông nghiệp, nơng thơn nước ta Mỗi năm, tính sản lượng rơm rạ, bã mía, thân lõi ngơ, mùn cưa, phế loại nhà máy dệt, gỗ,… đạt 40 triệu Đây nguồn nguyên liệu dồi để trồng nấm mà quốc gia giới có nguồn nguyên liệu dồi nước ta Hàng triệu lao động nông nghiệp thành phố, thị xã, thị trấn, tham gia sản xuất nấm Những điều kiện khác như: vốn đầu tư, khoa học cơng nghệ, thời tiết khí hậu đặc biệt thị trường tiêu thụ nước xuất hoàn toàn cho phép nhanh chóng phát triển sản xuất nấm quy mô lớn Trên thị trường tiêu thụ nước, loại nấm cao cấp như: đầu khỉ, đùi gà, nấm kim châm, nấm ngọc châm, nấm trà tân, nấm rơm, nấm hương, … có giá trị bán cao gấp đến lần loại nấm ăn thông thường Nhận thấy tiềm phát triển, giá trị kinh tế nấm Đầu khỉ đem lại nên việc nghiên cứu phát triển giống nấm Việt Nam điều kiện cần thiết, đa dạng hóa chủng nấm góp phần thúc đẩy nghề ni trồng nấm Việc chọn nguyên liệu sản xuất nấm khâu quan trọng tăng xuất, chất lượng nấm thành phẩm Nguyên liệu đạt yêu cầu cần phải đạt yêu cầu có sẵn nhiều địa phương, dễ bảo quản chế biến, cho xuất chất lượng cao Vì vậy, với giúp đỡ tận tình Nguyễn Thị Hồng Gấm thầy cô Viện Công nghệ sinh học Lâm nghiệp, em tiến hành thực đề tài: “Nghiên cứu nhân giống nuôi trồng nấm Đầu khỉ (Hericium erinaceus)” PHẦN TỔNG QUAN VỀ VẤN ĐỀ NGHIÊN CỨU 1.1 Khái quát nấm Đầu khỉ 1.1.1 Giới thiệu nấm Đầu khỉ Nấm Đầu khỉ thuộc: Giới nấm: Fungi Ngành: Basidiomycota Lớp:Agaricomycetes Bộ: Russulates Họ: Hericiaceae Chi: Hericium Lồi: Hericium erinaceus Nấm Đầu khỉ có tên khoa học Hericium erinaceus thuộc họ Hericiaceae loài nấm ăn sử dụng loại dược liệu Nấm Đầu khỉ cịn có tên gọi khác nấm Hầu Thủ, nấm Lơng Nhím, Lion’s mane (Châu Âu), Yamabushitake (Nhật Bản) 1.1.2 Đặc điểm hình thái phân bố nấm Đầu khỉ Quả thể Nấm Đầu khỉ thường hình cầu hình elip, mọc riêng rẽ thành chùm, khơng phân nhánh có kích thước - 30cm Nấm Đầu khỉ có nhiều sợi dài dạng lơng dày đặc, rũ xuống đầu khỉ, lúc già tua dài chuyển sang màu vàng trông bờm sư tử Quả thể non tua ngắn, trưởng thành tua dài - 6cm đường kính từ 1,8 - 3mm Quả thể non có màu trắng đến trắng ngà, thịt màu trắng, già nấm ngả sang màu vàng đến vàng sậm Quả thể cắt dọc mơ thịt có màu trắng kem, để lâu ngồi khơng khí ngả sang màu nâu đến nâu vàng, có hương thơm dễ chịu Bào tử sinh bề mặt sợi tua Bào tử màu trắng, kích thước 7mm, hình cầu hay gần cầu, trơn hay nhăn Hình 1.1: Quả thể nấm Đầu khỉ Trong tự nhiên, nấm Đầu khỉ tự sản xuất thức ăn riêng mà lấy chất dinh dưỡng từ vật chủ, sinh trưởng phát triển thân cành lớn, sống gỗ mục từ cuối tháng đến tháng 12 Chúng lồi nấm ơn đới phát triển nơi khí hậu mát mẻ Nhiệt độ thích hợp để nấm phát triển 18 - 24ºC, nhiệt độ tối ưu nuôi trồng 20ºC Nấm Đầu khỉ tìm thấy tự nhiên khắp vùng ơn đới phía Bắc, bao gồm châu Âu, châu Á Bắc Mỹ Theo ghi nhận nhà khoa học nấm xuất 435 địa phương 23 quốc gia châu Âu có sách đỏcủa 13 quốc gia Anh, Pháp Ở sốnước châu Á Trung Quốc, Nhật Bản loại nấm lại phổ biến sử dụng loại nấm ăn dược liệu Tại Việt Nam nấm Đầu khỉ trồng thử nghiệm nhiều nơi, chủ yếu vùng có khí hậu mát mẻ Đà Lạt, Lâm Đồng, Hà Tĩnh, Hải Phòng, Hưng Yên, Hà Nội 1.1.3 Thành phần dinh dưỡng Nấm Đầu khỉđược biết đến cách hàng trăm năm truyền thống ẩm thực Trung Quốc Nhật Bản Nấm Đầu khỉ loại thực phẩm bổ dưỡng, có mức cung cấp lượng vừa phải, thành phần dinh dưỡng cân đối, giàu chất khoáng vitamin Tuy nhiên điều kiện nuôi trồng khác khác thànhphần dinh dưỡng, hàm lượng amino acid Các kết phân tích Mizuno cộng thành phần nấm Đầu khỉ trồng Trung Quốc Nhật Bản thể bảng sau: Bảng 1.1: Thành phần dinh dưỡng nấm Đầu Khỉ 100g nấm khô Nấm Cát Lâm, Nấm Nagano, Trung Quốc Nhật Bản Tro 8,87g 9,01g Protein thô 29,30 g 27,67 g Chất béo thô 4,68 g 4,56 g Chất xơ 7,13 g 40,15 g Glucid 50,02 g 18,66 g Năng lượng 335 Cal 227 Cal P 856 mg 1010 mg Fe 18 mg 17,5 mg Ca mg 2,9 mg Na - 2,1 mg K - 4307 mg Mg - 117,2 mg Zn - 8,0 mg Thành phần Vitamin B1 0,69mg 3,83mg Vitamin B2 1,89 mg 3,14 mg Vitamin B6 - 0,41 mg Vitamin B12 - 0,15 mg Vitamin A 0,01 mg - Niacin - 16,17 mg Provitamin D - 451,4 mg Vitamin B1 B2 trội loại sản phẩm nấm, song có lẽ nấm Nhật Bản giàu loại vitamin hơn, provitamin D, có khảnăng chuyển hóa thành vitamin D2 D3 giúp điều hòa trao đổi phospho-calcium, chống bệnh cịi xương trẻ em, bệnh lỗng xương, yếu xương Đáng lưu ý thu hái, chế biến, việc phơi khô nấm tươi, làm hương vị nấm ngon hơn, hợp với vị so với nấm tươi Nấm Đầu khỉ phong phú nguồn khoáng chất, giàu vitamin K, P, Mg,… với hàm lượng P chiếm cao, đặc biệt có Ge, kim loại cực có hoạt tính chống ung thư Đặc biệt nấm Đầu khỉ có diện đầy đủ số 16 loại acid amin thiết yếu cần cho thể người động vật 1.2 Vai trò nấm tự nhiên đời sống người 1.2.1 Vai trò nấm tự nhiên Nấm vị trí phân loại sinh học: Hiện đại hệ thống phân loại R.H.Whiteker (1969) hệ thống phân loại giới chấp nhận, theo hệ thống giới chia làm giới: Giới khởi sinh Giới nguyên sinh Giới nấm Giới thực vật Giới động vật Ngồi cịn có hệ thống phân loại A.L.Takhtadjan (1973) chia giới thành giới sau: Giới Mycota: Gồm vi khuẩn vi khuẩn lam Giới nấm Giới thực vật Giới động vật Dù theo quan điểm nấm coi giới riêng tương đương với giới thực vật động vật hệ thống phân loại Hầu hết loại nấm khơng có khả quang hợp thực vật nấm khơng có đời sống tự dưỡng (Autroph) mà có đời sống dị dưỡng (Hetetroph) Cũng vi sinh vật, nấm đóng vai trị quan trọng khâu chu trình tuần hồn vật chất tự nhiên, phân hủy hợp chất phức tạp thành hợp chất đơn giản chất vô cơ, trả lại nguồn dinh dưỡng cho đất Nấm giải vấn đề phế thải hành tinh khắc phục “vết thương” thiên nhiên người tạo hoạt động sống Hơn nửa tổng lượng sinh khối cối sản sinh chưa sử dụng, chủ yếu rơm rạ, thân cây, cành nhỏ, gốc rễ phế liệu, phế loại nhà máy công nghiệp Hiện nay, nhiều nước xây dưng ông nghệ ni trồng nhiều loại nấm có chất lượng loại nguyên liệu này, số nước bắt đầu sử dụng rác thải để làm giá thể ni trồng nấm Mơt khía cạnh quan trọng nấm ăn vai trò chúng nghề trồng rừng Cho tới biết hàng trăm lồi nấm có quan hệ cộng sinh với hàng chục thực vật bậc cao bao gồn gỗ rừng, ăn quả, cảnh, thuốc cung lương thực Ý nghĩa kinh tế nấm nghề rừng không sản lượng thu hái hàng năm mà nấm cịn đóng vai trị quan trọng việc trồng lại rừng vùng hoang mạc vùng đồi núi trọc rộng lớn Những cơng trình nghiên cứu gần đẫ chir rằng, biện pháp quan trọng bậc nhát nghề rừng trồng thông non chủ động rễ nấm, nhiều vùng rừng nước ta vùng rừng giới cải tạo đường 1.2.2 Vai trò nấm đời sống người 1.2.2.1 Giá trị dinh dưỡng nấm Ngoài đặc điểm nhiều đạm, mỡ, calo, nấm ăn cịn có chất có ích cho thể đa đường, khoáng sinh tố, chất đạm nấm ăn , thực vật , động vật nguồn đạm quan trọng lồi người sau Theo phân tích nhà khoa học, chất hữu 112 lồi nấm ăn, hàm lượng bình qn protein 25%, lipid 8%, gluxit 60%( đường 58%, xơ 8%), chất tro 7% Hàm lượng chất hữu lồi nấm ăn có khác nhiều, có quan hệ mật thiết với ngoại cảnh điều kiện sống Protein Hàm lượng protein có chứa hầu hết loại nấm cao (nấm mỡ 47,42% tính theo chất khơ, nấm rơm 33.77%, …) Khơng thế, protein nấm lại có chứa khoảng 17-19 loại axit amin leucine, iso leucine, tyrosin, methionine, phenylalaline, lysine, histidine, arginie, cystine, tryptophane, asparagine, threonine, glutamine, proline, glycine, valine, có loại axit amin cần thiết cho thể người, loại có chứa thức ăn từ thực vật Theo tài liệu thống kê nấm mỡ, nấm hương, nấm kim vàng, nấm đầu khỉ, nấm mộc nhĩ,… hàm lượng axit amin cần thiết chiếm 40,53% tổng lượng axit amin lên Dưới đáy đống ủ nên lót vật liệu dễ nước, ủ ngồi trời nên có nilon che mưa Mùn cưa ủ ngày Bước 3: Đóng bịch: Trộn nguyên liệu với bột nhẹ phụ gia (cám ngô, cám gạo), kiểm tra độ ẩm đạt 62-65% Đóng bịch: túi nilon chịu nhiệt, kích thước 25x35cm, có cổ nút nút bơng Khối lượng đạt từ 1,2-1,5kg/ túi Bước 4: Khử trùng bịch nguyên liệu: Khử trùng nguyên liệu nồi hấp vô trùng nhiệt độ 120-1250C (áp suất 1,2-1,5atm) thời gian từ 90-120ph Sau lấy để nguội hẳn Yêu cầu: Nguyên liệu chín từ ngồi, vi sinh vật chết hồn tồn, mùn cưa khơng q khơ khơng q ẩm Bước 5: Cấy giống Dùng que cấy lấy nhẹ nhàng giống cho bề mặt chai nguyên liệu, tránh dập nát giống Lượng giống thích hợp 10-15g cho chai nguyên liệu Chú ý: giống cấy phải độ tuổi, không bị nhiễm nấm mốc, vi khuẩn, nấm dại… tránh để chai giống bị nhiễm khuẩn trình cấy cách đặt chai giống nằm ngang Sau cấy giống cần đậy nắp chai, vận chuyển vào khu vực ươm sợi Bước 6: Ươm sợi: Nhà ươm sợi đảm bảo sẽ, thơng thống, độ ẩm đạt 75-85%, khơng có ánh sáng ánh sáng yếu, nhiệt độ 22-250C 22 Chai chứa giá thể cấy giống chuyển vào phòng ươm sợi đặt giá, chai cách 5cm Trong thời gian ươm sợi không tưới nước trực tiếp lên chai nấm, hạn chế tối đa việc vận chuyển Bước 7: Ra thể chăm sóc, thu hái: Ra thể phương pháp kích thích miệng chai Dùng thìa/panh cấy cào nhẹ lớp sợi giống bề mặt chai, đậy nắp chai hở lỗ Khi thể nấm bắt đầu hình thành, kết hợp việc tạo độ ẩm khơng khí tưới nước trực tiếp vào chai nấm tùy theo điều kiện thời tiết từ 3-5 lần/ ngày Tiêu chuẩn hái thể: quan sát thấy thể chắc, đường kính mũ nấm đạt từ 5-8cm; trước thu hái nấm tạm dừng việc tưới nấm cách 5-6h Cách thu hái: dùng tay thuận cầm dao để cắt sát chân nấm, cho thể vào túi nilon mềm Hái nấm khơng để sót phần gốc miệng chai nấm Nếu sót phải lấy hết để nấm tiếp đợt sau tốt Chú ý: Nấm Đầu khỉ sau thu hái đợt tiếp tục nấm lứa thứ Trong thời gian nghỉ không tưới nấm trực tiếp vào bịch nấm mà phải chờ đến xuất nấm miệng chai tưới trực tiếp nước vào Bảng 2.2: Ảnh hưởng hàm lượng thành phần chất tới khả ăn lan hệ sợi nấm Đầu khỉ Công thức T1 T2 T3 T4 Chiều dài hệ sợi nấm ăn lan (cm) 10 ngày 20 ngày 30 ngày 40 ngày 23 Đặc điểm hệ sợi nấm Bảng 2.4: Ảnh hưởng hàm lượng thành phần chất tới khả thể nấm Đầu khỉ Công Khối lượng thể Đặc điểm thức thể nấm trung bình T1 T2 T3 T4 2.5 Phương pháp thu thập xử lý số liệu a Phương pháp thu thập số liệu - Số liệu thu thập phương pháp thông kê tương ứng với tiêu nghiên cứu cơng thức bố trí thí nghiệm - Đo đường kính hệ sợi nấm ăn lan (trong thí nghiệm ảnh hưởng hàm lượng đường, hàm lượng khoai tây đến khả ăn lan hệ sợi nấm Sò vàng môi trường nhân giống cấp 1) với quy ước đồng tất bề mặt bình (diện tích bề mặt thạch nhau) - Đặc điểm hệ sợi nấm dày hay mỏng, đồng hay không đồng đều, sinh trưởng mạnh hay yếu - Thời gian TB qua thể - Số lượng cụm, thể - Khối lượng nấm TB/bịch sau thu hoạch - Đặc điểm sinh trưởng thể nấm Sò vàng (Cụm đồng hay không đều, thịt nấm dày hay mỏng, mép nhăn hay xẻ rãnh) b Xử lý số liệu + Tỷ lệ bình nhiễm = Số bình nhiễm Tổng số bình cấy giống × 100% Tổng đường kính thể + Đường kính TB thể = Tổng số thể 24 Tổng khối lượng thể + Khối lượng TB thể = Tổng số thể - Xử dụng công thức tính xác xuất thống kê phần mềm EXCEL 5.0 để xử lý đánh giá kết 25 PHẦN KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 3.1 Kết phân lập giống gốc nấm Đầu khỉ Từ thể nấm Đầu khỉ ban đầu phân lập thành công giống gốc phục vụ cho nhân giống cấp I Hình 3.1: Kết phân lập giống gốc nấm Đầu khỉ 3.2 Kết nhân giống cấp môi trường thạch Muốn nhân giống loại nấm nào, điều trước tiên cần có mơi trường dinh dưỡng thích hợp Từng loại nấm khác nhu cầu dinh dưỡng khác nhau, phải đảm bảo đầy đủ nguồn dinh dưỡng chủ yếu như: nguồn nitơ, nguồn cacbon, khoáng chất, vitamin Nghiên cứu ảnh hưởng hàm lượng khoai tây đến khả ăn lan hệ sợi nấm Đầu khỉ môi trường nhân giống cấp I Sợi giống gốc phân lập từ phần cấy vào cơng thức thí nghiệm sau: 7g/l agar+ 20g/l đường sucrose + hàm lượng khoai tây thay đổi bảng sau: 26 Bảng 3.1: Kết ảnh hưởng hàm lượng khoai tây đến khả ăn lan hệ sợi nấm Đầu khỉ Môi trường nhân giống cấp Hàm CTTN lượng khoai tây (g/l) Đường kính hệ sợi nấm ăn lan (cm) Sau Sau Sau ngày Sau 12 ngày Đặc điểm hệ Sau15 sợi ngày Sợi nấm CT1 100 0,2 0,4 0,7 1,2 1,8 mảnh, ăn lan yếu Sợi nấm to, ăn CT2 200 0,4 0,7 1,4 2,2 2,7 an Sợi nấm to CT3 300 0,7 1,1 1,7 2,5 3,2 khoẻ, ăn lan mạnh Từ bảng 3.1: Ta thấy hàm lượng khoai tây có ảnh hưởng khác biệt đến ăn lan hệ sợi nấm môi trường nhân giống cấp I Theo bảng xu hướng đường kính hệ sợi ăn lan tăng hàm lượng khoai tây tăng theo công thức Cơng thức CT3 (300g khoai/l) có đường kính hệ sợi nấm ăn lan nhanh khoẻ (3,2 sau 15 ngày) Và công thức CT2 hàm lượng khoai (200g/l) hệ sợi nấm ăn lan khỏe, sau 15 ngày hệ sợi nấm ăn lan 2,7cm Cơng thức CT1 hàm lượng khoai 100g/l sợi nấm ăn lan sau 15 ngày 1,8cm điều chứng tỏ hàm lượng khoai khơng đủ dinh dưỡng để hệ sợi nấm ăn lan nhanh phát triển mạnh Vậy cho thấy công thức tốt để nhân giống nấm Đầu khỉ là: công thức CT3 (300g/l khoai tây+20g/l đường sucrose + 7g/l agar) 27 Hình 3.2: Các bình giống cấp I sau 10 ngày nuôi cấy 3.3 Kết nhân giống cấp giá thể hạt thóc Mục đích nhân giống cấp nhân giống nấm với số lượng lớn để phục vụ sản xuất Giống cấp thường nhân chai thủy tinh hay túi nilon có miệng nút nhựa làm nút Nhân giống nấm cấp phải đảm bảo hệ sợi nấm ăn lan mạnh, hệ sợi nấm dày, không bị mắc bệnh sinh lí sợi nấm Ở mơi trường nhân giống cấp sử dụng loại thóc có bổ sung thêm phụ gia với tỷ lệ khác để tìm loại thóc hàm lượng phụ gia thích hợp cho nhân giống nấm Đầu khỉ Nghiên cứu ảnh hưởng hàm lượng phụ gia đến khả ăn lan hệ sợi giống cấp Chất phụ gia chất cho thêm vào môi trường giá thể ni cấy nhằm kích thích sinh trưởng, phát triển hệ sợi nấm giai đoạn bung sợi Hệ sợi nấm sử dụng chất dễ lấy mơi trường nhân giống để kích thích hệ sợi nấm sinh trưởng ổn định hệ thống tiết enzyme phân giải chất cellulose, lignin cám gạo, cám ngô nguồn cung cấp cacbon, đạm, vitamin cho sinh trưởng hệ sợi nấm, làm giảm q trình lão hóa suy thối giống q trình cấy chuyển giống Chính vậy, việc nghiên cứu ảnh hưởng chất bổ sung đưa tỷ lệ phù hợp cho sinh trưởng hệ sợi nấm cần thiết ý nghĩa 28 Các thí nghiệm bố trí sử dụng loại thóc tẻ phối trộn với hàm lượng phụ gia khác để tìm cơng thức mơi trường nhân giống cấp II thích hợp Cơng thức: thóc tẻ + phụ gia+1% bột nhẹ Kết thu trình bày bảng 3.2 Bảng 3.2: Kết đánh giá khả ăn lan hệ sợi công thức nhân giống cấp STT Công thức phối trộn 99% thóc + 1% bột nhẹ Thời gian, tốc độ ăn lan Đặc điểm hệ sợi Sau 20 ngày hệ sợi Hệ sợi mảnh, ăn lan tới đáy bình, yếu ĐC tốc độ ăn lan chậm 95% thóc+ 2% cám gạo + Sau 16 ngày hệ sợi Hệ sợi phát triển 2% bột ngô+ 1% bột nhẹ C1 ăn lan kín đáy bình, tốt, đồng đều, tốc dộ ăn lan nhanh khỏe mạnh, dày, trắng 90% thóc + 5% cám gạo + Sau 14 ngày hệ sợi Hệ 4% bột ngô + 1% bột nhẹ sợi ăn lan kín đáy triển phát tốt, bình, tốc độ ăn lan đồng đều, khỏe C2 nhanh mạnh, dày, trắng 85% thóc + 8% cám gạo + Sau 18 ngày hệ sợi Hệ sợi phát triển 6% bột ngô + 1% bột nhẹ C3 ăn lan kín đáy bình, tốt, đồng đều, tốc độ ăn lan khỏe mạnh, dày, nhanh 29 trắng Từ bảng hình cho ta thấy tốc độ ăn lan hệ sợi điều kiện nuôi cấy công thức phối trộn khác khác Công thức C2 có tốc độ ăn lan hệ sợi tốt 14 ngày, chất lượng hệ sợi tốt, đồng đều, sợi khỏe trắng Đặc điểm hệ sợi C1 C3 tương đối tốt, sợi dày, trắng, tốc độ ăn lan nhanh(16 - 18 ngày) Môi trường ĐC nhất, thời gian kèo dài 20 ngày mà hệ sợi yếu mảnh, môi trường thiếu dinh dưỡng cho sợi nấm phát triển.Vì sử dụng giống nấm sản xuất mơi trường C2 90% thóc + 5% cám gạo+ 4% cám ngô+ 1% bột nhẹ để phục vụ cho bước nghiên cứu 3.4 Kết nghiên cứu kỹ thuật nuôi trồng nấm Đầu khỉ Cơ chất ni trồng có ảnh hưởng lớn đến sinh trưởng, phát triển khả nấm Sò vàng Kết theo dõi trình bày bảng 3.3 Bảng 3.3: Kết ảnh hưởng hàm lượng thành phần chất tới khả ăn lan hệ sợi nấm Đầu khỉ Công thức Chiều dài hệ sợi nấm ăn lan (cm) ngày 10 ngày 15 ngày 20 ngày T1 1,23 2,54 5,32 12,03 T2 2,41 4,46 8, 98 18,23 T3 2,32 4,73 8, 87 19,12 T4 3,45 6,98 13,56 27,43 30 Đặc điểm hệ sợi nấm Hệ sợi ăn lan chậm, yếu Hệ sợi ăn lan tốt, sợi mảnh Hẹ sợi ăn lan tốt, sợi khoẻ Hệ sợi ăn lan nhanh, sợi khoẻ Hình 3.3: Bịch nấm sau 15 ngày cấy giống Từ bảng 3.3 hình 3.2 3.3 ta thấy chiều dài hệ sợi tất công thức tăng dần qua ngày, thấy chênh lệch chiều dài lệch nhau.Khối lượng thể công thức khác Tuy nhiên cơng thức đối chứng T1 hệ sợi lan chậm hẳn thể nhỏ so với cơng thức khác khơng bổ sung mùn trầm.Đối với cơng thức T4 hệ sợi lan nhanh, khoẻ nhấtvà khối lượng thể lớn nhấtcho thấy mùn trầm cho khả ăn lan hệ sợi tốt mùn keo Ở công thức T2 T3 hệ sợi ăn lan tương đối tốt thể đạt tiêu chuẩn có bổ sung hai loại mùn cưa 31 Kết luận công thức T4 (65% mùn trầm + 25% mùn keo + 5% cám gạo + 4% bột ngô + 1% bột nhẹ) công thức phù hợp tốt để nuôi trồng nấm Đầu khỉ, sau cơng thức T2 (45% mùn trầm + 40% mùn keo + 10% cám gạo + 8% bột ngô + 2% bột nhẹ) công thức T3 (50% mùn trầm + 40% mùn keo + 5% cám gạo + 4% bột ngơ + 1% bột nhẹ) thích hợp cho ăn lan hệ sợi nấm Đầu khỉ Bảng 3.4: Kết ảnh hưởng hàm lượng thành phần chất tới khả thể nấm Đầu khỉ Công Khối lượng thể thức trung bình T1 90g Quả thể to, trắng, tua T2 100g Quả thể to, trắng, tua T3 100g Quả thể to, trắng, tua T4 110g Quả thể to, trắng, tua Đặc điểm thể nấm 32 Hình 3.4: Quả thể nấm Đầu khỉ chất nuôi trồng khác 33 KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ Kết luận Sau trình nghiên cứu thực nghiệm đưa số kết luận sau: Đã phân lập thành công giống gốc nấm Đầu khỉ từ thể nấm Đầu khỉ ban đầu Công thức tốt để nhân giống cấp I Đầu khỉ công thức: 300g/l khoai tây+ 20g/l đường sucrose + 7g/l agar Ở cơng thức hệ sợi nấm có khả sinh trưởng tốt, sợi nấm khỏe, to, ăn lan đồng Công thức tốt để nhân giống cấp II Đầu khỉ cơng thức: 90% thóc + 5% cám gạo+ 4% cám ngô+ 1% bột nhẹ Ở công thức hệ sợi ăn lan nhanh nhất, sợi nấm khỏe to, ăn lan đều, màu trắng đồng Công thức tốt để phối trộn nguyên liệu công thức: 65% mùn trầm + 25% mùn keo + 5% cám gạo + 4% bột ngô + 1% bột nhẹ Ở công thức hệ sợi nấm phát triển tốt nhất, đạt hiệu suất sinh học nấm Đầu khỉ cao Tồn Do thời gian khả thân hạn chết nên chưa nghiên cứu ảnh hưởng môi trường hay chế độ chăm sóc đến khả hình thành phát triển thể nấm Đầu khỉ Kiến nghị Cần tiếp tục nghiên cứu thêm loại nguyên liệu nuôi trồng cho hiểu cao 34 TÀI LIỆU THAM KHẢO Tài liệu tiếng việt Đinh Xuân Linh Cộng sự, “Đánh giá thực trạng chiến lược nghiên cứu, phát triển nấm Việt Nam” (tháng 12, năm 2008), báo cáo tham luận hội thảo chuyên đề “Sản xuất, chế biến tiêu thụ Nấm ăn – nấm dược liệu” Ninh Bình Đinh Xuân Linh, Thân Đức Nhã, Nguyễn Hữu Đống, Nguyễn Thị Sơn Kỹ thuật trồng, chế biến nấm ăn nấm dược liệu (2008), tài liệu Viện Di Truyền NôngNghiệp Nguyễn Hữu Đống, 2003, Nuôi trồng chế biến nấm ăn nấm làm thuốc chữa bệnh Nhà xuất Nông Nghiệp Nguyễn Hữu Đống, Đinh Xuân Linh, Nguyễn Thị Sơn, Zani Federico (2005), Nấm ăn sở khoa học kỹ thuật nuôi trồng, Nhà xuất Nông Nghiệp HàNội Nguyễn Lân Dũng (2005), Công nghệ nuôi trồng nấm tập I, Nhà xuất nông nghiệp HàNội Nguyễn Lân Dũng (2009), Công nghệ nuôi trồng nấm tập I, II, Nhà xuất Nông Nghiệp HàNội Trịnh Tam Kiệt tác giả khác (2001), Danh lục loài thực vật Việt Nam tập I phần Nấm (trang 218- trang 350), Nhà xuất Nông Nghiệp Viện Di truyền nông nghiệp Việt Nam, “Hội thảo phát triển nghề sản xuất nấm ăn nấm dược liệu” Tài liệu tiếng anh Shu-Hui Hu; Jinn-Chyi Wang; Juang-Lin Lien; Ean-Tun Liaw & MinYen Lee (March 2006) "Antihyperglycemic effect of polysaccharide from 35 fermented broth of Pleurotus citrinopileatus" Applied Microbiology and Biotechnology 10.Shu Hui Hu; Zeng Chin Liang; Yi Chen Chia; Juang Lin Lien; Ker Shaw Chen; Min Yen Lee & Jinn Chyi Wang (2006) "Antihyperlipidemic and Antioxidant Effects of Extracts from Pleurotus citrinopileatus" Journal of Agricultural and Food Chemistry 11.Parmasto, Erast (July 1987) "Pleurotus citrinopileatus, one of the favourites" Trang web 12.https://namhauthu.vn/nuoi-trong/ky-thuat-trong-cham-soc-nam-dau-khicho-nang-suat-cao/ 13 https://www.namlimxanh.com/nam-dau-khi-dac-diem-tac-dung-va-cachdung-nam-dau-khi.html 36