Nghiên cứu tái sinh cây sâm cau (curculigo orchioides gaertn ) bằng nuôi cấy mô lá

HỌC VIỆN NÔNG NGHIỆP VIỆT NAM KHOA CÔNG NGHỆ SINH HỌC KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP ĐỀ TÀI: NGHIÊN CỨU TÁI SINH CÂY SÂM CAU (Curculigo orchioides Gaertn.) BẰNG NUÔI CẤY MÔ LÁ HÀ NỘI, THÁNG 9/2021 HỌC VIỆN NÔNG NGHIỆP VIỆT NAM KHOA CƠNG NGHỆ SINH HỌC KHĨA LUẬN TỐT NGHIỆP ĐỀ TÀI: NGHIÊN CỨU TÁI SINH CÂY SÂM CAU (Curculigo orchioides Gaertn.) BẰNG NUÔI CẤY MÔ LÁ Sinh viên Ngành Khóa Người hướng dẫn : Nguyễn Thị Mai Lan : Công Nghệ Sinh Học : K62 : TS Nguyễn Văn Khiêm TS Nguyễn Thị Thúy Hạnh HÀ NỘI, THÁNG 9/2021 LỜI CAM ĐOAN Tôi xin cam đoan, số liệu kết nghiên cứu Khóa luận trung thực chưa sử dụng để bảo vệ báo cáo Tôi xin cam đoan, giúp đỡ cho Khóa luận cảm ơn thơng tin trích dẫn khóa luận rõ nguồn gốc Hà Nội, ngày 16 tháng năm 2021 Sinh viên Nguyễn Thị Mai Lan i LỜI CẢM ƠN Để hồn thành Khóa luận này, ngồi cố gắng nỗ lực thân, nhận nhiều quan tâm giúp đỡ nhiệt tình thầy cô, cán kỹ thuật, bạn bè người thân Trước hết xin gửi lời cảm ơn chân thành đến Khoa Công nghệ sinh học, Học Viện Nông nghiệp Việt Nam, tạo điều kiện cho qua trình thực Khóa luận tốt nghiệp Tơi xin bày tỏ lòng biết ơn sâu sắc đến TS Nguyễn Thị Thúy Hạnh TS Nguyễn Văn Khiêm dành nhiều thời gian, tâm huyết, nhiệt tình giúp đỡ hướng dẫn suốt trình thực Đề tài Khóa luận Đồng thời, tơi xin cảm ơn tới cán Trung tâm Nghiên cứu nguồn gen giống dược liệu Quốc gia – Viện Dược liệu giúp đỡ tạo điều kiện tốt để tơi hồn thành Khóa luận Cuối cùng, tơi xin trân thành cảm ơn gia đình, bạn bè bên cạnh ủng hộ, động viên giúp đỡ suốt trình học tập nghiên cứu Đề tài Hà Nội, ngày 16 tháng năm 2021 Sinh viên Nguyễn Thị Mai Lan ii MỤC LỤC LỜI CAM ĐOAN i LỜI CẢM ƠN ii DANH MỤC BẢNG v DANH MỤC HÌNH vi DANH MỤC CHỮ VIẾT TẮT vii TÓM TẮT viii PHẦN I MỞ ĐẦU 1.1 Đặt vấn đề 1.2 Mục đích 1.3 Yêu cầu PHẦN II TỔNG QUAN TÀI LIỆU 2.1 2.2 2.3 Giới thiệu chung sâm cau 2.1.1 Nguồn gốc phân bố .3 2.1.2 Phân loại 2.1.3 Đặc điểm thực vật học .4 2.1.4 Thành phần hóa học 2.1.5 Tác dụng dược lý .5 2.1.6 Công dụng Nhân giống gieo trồng sâm cau tự nhiên 2.2.1 Các phương pháp nhân giống dược liệu truyền thống 2.2.2 Kỹ thuật nhân giống gieo trồng sâm cau tự nhiên .10 Nghiên cứu kỹ thuật nuôi cấy mô tế bào thực vật 11 2.3.1 Cơ sở lý luận phương pháp nuôi cấy mô tế bào thực vật 11 2.3.2 Ý nghĩa, ưu, nhược điểm phương pháp nuôi cấy mô tế bào thực vật.11 2.3.3 Các bước trình nhân giống in vitro 12 2.3.4 Các yếu tố ảnh hưởng đến q trình ni cấy mơ tế bào thực vật 13 2.3.4.1 Vật liệu nuôi cấy .13 2.3.4.2 Chế độ khử trùng mẫu cấy 14 2.3.4.3 Điều kiện nuôi cấy 15 2.3.4.4 Môi trường dinh dưỡng 16 iii 2.3.4.5 Chất điều tiết sinh trưởng 17 2.3.5 Nuôi cấy mô tế bào để sản suất hợp chất thứ cấp 19 2.3.6 Một số nghiên cứu nhân giống in vitro sâm cau 20 PHẦN III VẬT LIỆU, NỘI DUNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 24 3.1 Đối tượng, vật liệu, địa điểm thời gian nghiên cứu 24 3.1.1 Đối tượng nghiên cứu 24 3.1.2 Vật liệu nghiên cứu: 24 3.1.3 Địa điểm thời gian nghiên cứu 24 3.2 3.3 Nội dung nghiên cứu 24 Phương pháp nghiên cứu 24 3.3.1 Phương pháp nuôi cấy in vitro 24 3.3.2 Phương pháp bố trí thí nghiệm 25 3.4 Các tiêu theo dõi 28 3.5 Phương pháp xử lý số liệu 28 PHẦN IV KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU VÀ THẢO LUẬN 29 4.1 4.2 Nghiên cứu tạo mô sẹo 29 4.1.1 Ảnh hưởng 2,4-D đến hình thành mơ sẹo từ mơ 29 4.1.2 Ảnh hưởng TDZ đến hình thành mơ sẹo từ mơ 30 4.1.3 Ảnh hưởng BAP α-NAA đến khả tạo mô sẹo từ mô 31 4.1.4 Ảnh hưởng BAP IBA đến khả tạo mô sẹo từ mô 33 Nghiên cứu tái sinh chồi từ mô sẹo 35 4.2.1 Ảnh hưởng BAP đến khả tái sinh chồi từ mô sẹo 36 4.2.2 4.3 Ảnh hưởng Kinetin đến khả tái sinh chồi từ mô sẹo 37 Nghiên cứu tạo rễ tạo hoàn chỉnh 38 4.3.1 Ảnh hưởng α-NAA đến khả tạo rễ in vitro chồi sâm cau 39 PHẦN V KẾT LUẬN VÀ ĐỀ NGHỊ 40 5.1 Kết luận 42 5.2 Đề nghị 42 TÀI LIỆU THAM KHẢO 42 PHỤ LỤC 49 iv DANH MỤC BẢNG Bảng 4.1 Ảnh hưởng TDZ đến hình thành mô sẹo từ sâm cau sau tuần nuôi cấy 30  Bảng 4.2 Ảnh hưởng BAP α-NAA đến khả tạo mô sẹo 32  Bảng 4.3 Ảnh hưởng BAP IBA đến khả tạo mô sẹo từ mô sâm cau .34  Bảng 4.4 Ảnh hưởng chất điều tiết sinh trưởng BAP đến khả tái sinh chồi từ mô sẹo 36  Bảng 4.5 Ảnh hưởng chất điều tiết sinh trưởng Kinetin đến khả tái sinh chồi từ mô sẹo .37  Bảng 4.6 Ảnh hưởng α-NAA đến khả tạo rễ in vitro chồi sâm cau (sau tuần nuôi cấy) 39  Bảng 4.7 Ảnh hưởng IBA đến khả tạo rễ in vitro chồi sâm cau 40  v DANH MỤC HÌNH Hình 4.1: Hình ảnh ni cấy tạo mô sẹo mô từ sâm cau môi trường bổ sung 2,4-D sau tuần .30  Hình 4.2: Ảnh hình thành mơ sẹo từ sâm cau môi trường bổ sung TDZ nồng độ khác sau tuần 31  Hình 4.3: Ảnh hình thành mơ sẹo từ sâm cau môi trường bổ sung BAP αNAA nồng độ sau tuần 33  Hình 4.4: Kết hình thành mơ sẹo từ sâm cau môi trường bổ sung BAP IBA nồng độ sau tuần 34  Hình 4.5: Hình ảnh tái sinh chồi từ mô sẹo sử dụng BAP nồng độ khác 37  Hình 4.6: Hình ảnh tái sinh chồi từ mô sẹo sử dụng kinetin nồng độ khác 38  Hình 4.7: Ảnh hưởng α-NAA đến khả tạo rễ in vitro chồi sâm cau .40  Hình 4.8: Ảnh hưởng IBA đến khả tạo rễ in vitro chồi sâm cau .41  vi DANH MỤC CHỮ VIẾT TẮT BAP CT 6-Benzyl Amino Purine Cơng thức CV% Sai số thí nghiệm 2,4-D 2,4-Dichlorphenoxy acetic acid ĐC Đối chứng IAA Indole acetic acid IBA Indole – – butyric acid IUCN Kin LSD0.05 MS α-NAA TDZ Cs International Union for Conservation Kinetin Độ lệch chuẩn mức ý nghĩa 5% Môi trường Murashige Skoog (1962) α-Naphthalene acetic acid Thidiazuron Cộng vii TÓM TẮT Sâm cau (Curculigo orchioides Gaertn.) số lồi có hoa thuộc họ Hypoxidaceae, loại thân thảo, sống lâu năm, có nhiều công dụng chữa bệnh Trong nghiên cứu này, tiến hành nghiên cứu tái sinh sâm cau (Curculigo orchioides Gaertn.) nuôi cấy mô Kết nghiên cứu tái sinh sâm cau hoàn chỉnh in vitro từ mô Môi trường MS (1962) +0,5 mg/l BAP+0,5 mg/l α-NAA mơi trường thích hợp để cảm ứng tạo mô sẹo từ sâm cau in vitro tuần Mơi trường MS có bổ sung 1mg/l kinetin mơi trường thích hợp để tái sinh chồi từ mơ sẹo Mơi trường rễ thích hợp cho chồi sâm cau MS + 0,5mg/l IBA viii 32 Rao K.S and Mishra S.H., (1996) Effect of rhizomes of Curculigo orchioides Gaertn on drug induce hepatoxicity Indian Drugs, 33(9):458-461 33 Bandyopadhyay U., Das D Banerjee R (1999) Reactive oxygen species: oxidative damage and pathogenesis CurrSci., 77(5):658-665 34 Venukumar M.R Latha M.S (2002) Antioxidant activity of Curculigo orchioides in carbon tretrachloride induced hepatopathy in rats Indian J Clin biochem, 17(2):80-87 35 Wu Q, Fu DX, Hou AJ, Lei QL, Liu ZJ, Chen JK, Zhou TS (2005) Antioxidative phenols and phenolic glycosides from Curculigo orchioides Chem Pharm Bull, 53(8):1065-1067 36 Wang YK, Hong YJ, Wei M, Wu Y, Huang ZQ, Chen RZ, Chen HZ (2010) Curculigoside attenuates human umbilical vein endothelial cell injury induced by H2O2 J ethnopharmacol, 132(1):233-239 37 Kang TH, Hong BN, Jung SY, Lee JH, So HS, Park R, You YO (2013) Curculigo orchioides protects cisplatin-induced cell damage Am J Chin Med, 41(2):425-441 38 Bafna A.R Mishra S.H (2006) Immunostimulatory effect of methanol extract of Curculigo orchioides on immunosuppressed mice J Ethnopharmacol, 104(12):1-4 39 Nie Y, Dong X, He Y, Yuan T, Han T, Rahman K, Qin L, Zhang Q (2013) Medicinal plants of genus Curculigo: traditional uses and a phytochemical and ethnopharmacological review J Ethnopharmacol, 147(3):547-563 40 Saba Irshad, Singh J., Jain S.P Khanuja S.P.S (2006) Curculigo orchioides Gaertn (Kali Musali) An endangered medicinal plant of commercial value Natural Product Radiance, 5(5):369-372 41 Thakur M and Dixit V.K (2007) Effect of some Vajikaran herbs on pendiculation activities and in vitro sperm count in male Sex Disabil, 25(4):203-207 42 Thakur M., Chauhan N.S., Bhargava S and Dixit V.K (2009) A comparative study on aphrodisiac activity of some Ayurvedic herbs in male albino rats Arch Sex Behav, 38(6):1009-1015 43 Chauhan N.S., Rao Ch.V Dixit V.K (2007) Effect of Curculigo orchioides rhizomes on sexual behaveiour of male rats Fitoterapia, 78(7-8):530-534 46 44 Thakur M., Chauhan N.S., Sharma V., Dixit V.K., Bhargava S (2012) Effect of Curculigo orchioides on hyperglycemia-induced oligospermia and sexual dysfunction inmale rats Int J Impot Res, 24(1):31-37 45 Chauhan N.S., Dixit V.K (2007) Antihyperglycemic activity of the ethanolic extract of Curculigo orchioides Gaertn rhizome in streptozotocin-induced diabetic rats Journal of pharmacy research, 7(8):747-753 46 Cao D.P, Y N Zheng, L P Qin, T Han, H Zhang, Khalid Rahman, Q Y Zhang (2008) Curculigo orchioides, a traditional Chinese medicinal plant, prevents bone loss in ovariectomized rats Maturitas, 59(4): 373-380 47 Jiao L, Cao DP, Qin LP, Han T, Zhang QY, Zhu Z, Yan F (2009) Antiosteoporotic activity of phenolic compounds from Curculigo orchioides Phytomedicine, 16:874-888 48 Liu L, Guo YH, Xin HL, Nie Y, Han T, Qin LP, Zhang QY (2011) Antiosteoporotic effects of benzyl benzoate glucosides from Curculigo orchioides in ovariectomized rats Zong Xi Yi Jie He Xue Bao, 10(12):1419-1426 49 Zhen-Hui Wang , Jian Huang, Xiao-Ci Ma, Guo-Yu Li, Yue-Ping Ma, Ning Li, JinHui Wang (2017) Phenolic glycosides from Curculigo orchioides Gaertn Fitoterapia, 86:64-69 50 Wang N, Zhang Q, Xin H, Shou D, Qin L (2017) Osteoblast cell membrane chromatography coupled with liquid chromatography and time – of - flight mass spectrometry for screening specific active components from traditional Chinese medicines Journal of separation science, 8:12-17 51 Pandit P, Singh A, Bafna AR, Kadam PV, Patil MJ (2008) Evaluation of Antiasthmatic Activity of Curculigo orchioides Gaertn Rhizomes Indian J Pharm Sci, 70:440-444 52 Jaiswal K, Batra KA, Mehta BK (1984) The Antimicrobial Efficiency of Root Oil Against Human Pathogenic Bacteria and Phytopathogenic Fungi Journal of Phytopathology 109(1): 90 – 93 53 Singh R Gupta A.K (2008) Antimicrobial and antitumor activity of the fractionated extract of Kali mussli (Curculigo orchioides) Int J Green Phảm, 2:3436 47 54 Nagesh K.S., Shanthamma C (2009) Antibacterial activity of Curculigo orchioides rhizome extract on pathogenic bacteria African Journal of Microbiology Research, 3:5-9 55 Murali V.P and Kuttan G (2016) Curculigoside augments cell – meduated immune responses in metastatic tumor – bearing animals Immunopharmacol Immunotoxicol, 38(4):264-269 56 K Vijayanarayana, Rashmi S Rodrigues, K S Chandrashekhar, E V S Subrahmanyam (2007) Evaluation of estrogenic activity of alcoholic extract of rhizomes of Curculigo orchioide J Ethnopharmacol, 114(2):241-245 57 W Jiang, F Fu, J Tian, H Zhu, J Hou (2011) Curculigoside A attenuates experimental cerebral ischemia injury in vitro and in vivo Neuroscience, 192:572579 58 Zhen Tian, Wei Yu, Hong-bao Liu, Nan Zhang, Xu-bo Li, Ming-gao Zhao, Shuibing Liu (2012) Neuroprotective effects of curculigoside against NMDA-induced neuronal excitoxicity in vitro Food Chem toxicol, 40(11):4010-4012 59 Pan YingNan, Zhang XiangJun, Meng Ping, Yu WeiHua, Chen ShaoZhen, Tang Jun, Huang SuMei, Zou Yu (2010) Tissue culture of medicinal plant Millettia speciosa Champ.Guangxi Agricultural Sciences, 41(6):523-525 60 Mulbagal, V & Tsay, H S (2004) Plant cell cultures-an alternative and efficient source for the production of biologically important secondary metabolites International Journal of Applied Science and Engineering, 2(1):29-48 61 Pant B (2014) Application of plant cell and tissue culture for the production of phytochemicals in medicinal plants Advances in Experimental Medicine and Biology, 808:25-39 62 Fett-Neto, A G., DiCosmo, F., Reynolds, W F & Sakata, K (1992) Cell culture of Taxus as a source of the antineoplastic drug taxol and related taxanes Biotechnology , 10(12):1572-5157 63 Thomas TD (2007) Pretreatment in thidiazuron improves the in vitro shoot induction from leaves in Curculigo orchioides Gaertn, an endangered medicinal plant Acta Physiol Plant 29(5):455-461 48 64 Zokae S, Sabzevar TE, Ghavidel RA (2016) Effect of Plant Hormone on Micropropagation and Callogenesis of Medicinal Plant (Curculigo orchioides), Journal of Agricultural Science and Engineering, 2(5):36-39 65 Adiyecha RP, Joshi J, Verma PU, Jasrai YT (2013) Direct And Indirect Organogenesis For Mass Multiplication Of An important-Medicinal But Endangered herb- Curculigo Orchioides Gaertn IJIRSET, 2/(12), pp 7205-7209 66 Nagesh KS and Shanthamma C (2016) An overview on tissue culture studies of Curculigo orchioides Gaertn: An endangered multi-potential medicinal herb Journal of Medicinal Plants Studies, 4(4):119-123 67 Suri SS, Arora DK, Ramawat KG (2009) A method for large-scale multiplication of Curculigo orchioides through bulbil formation from leaf explant in shake flsk culture Indian J Exp Biol 38(2):145-148 68 Wala BB and Jasrai YT (2003) Micropropagation of an Endangered Medicinal Plant : Curculigo orchioides Gaertn Plant Tissue Cult 13(1):13-19 69 Nagesh KS, Shanthamma C, Pullaiah T (2010) Somatic embryogenesis and plant regeneration in callus culture of Curculigo orchioides Gaertn Indian Journal of Biotechnology, 9:408-413 70 Nagesh KS (2008) High Frequency Multiple Shoot Induction of Curculigo orchioides Gaertn.: Shoot Tip V/S Rhizome Disc, Taiwania, 53(3): 242-247 71 Bhojwani SS, Dantu PK (2013) Plant Tissue Culture: An Introductory Text Springer, India 72 Haberlandt G (1902) Kulturversuche mit isolierten Pflanzenzellen Sitzungsber 73 George EF (1993) Plant propagation by tissue culture Part 1: the technology 74 R Gill, Praveen K (1993) SaxenaSomatic embryogenesis in Nicotiana tabacum L.: induction by thidiazuron of direct embryo differentiation from cultured leaf discs Plant Cell Report, 12:154-159 49 PHỤ LỤC Thí nghiệm 2: Ảnh hưởng TDZ đến khả tạo mô sẹo từ mô sâm cau BALANCED ANOVA FOR VARIATE TYLE FILE TDZ 3/ 8/21 17:17 :PAGE ANH HUONG CUA TDZ DEN KHA NANG TAO MO SEO TU MO LA CAY SAM CAU VARIATE V003 TYLE LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN SQUARES SQUARES F RATIO PROB ER LN ============================================================================= NLAI 3.46799 1.73400 0.36 0.712 CT 13859.4 3464.84 719.23 0.000 * RESIDUAL 38.5393 4.81742 * TOTAL (CORRECTED) 14 13901.4 992.956 TABLE OF MEANS FOR FACTORIAL EFFECTS FILE TDZ 3/ 8/21 17:17 :PAGE ANH HUONG CUA TDZ DEN KHA NANG TAO MO SEO TU MO LA CAY SAM CAU MEANS FOR EFFECT NLAI - NLAI NOS TYLE 48.0000 49.0200 49.0200 SE(N= 5) 0.981572 5%LSD 8DF 3.20081 - MEANS FOR EFFECT CT - CT NOS TYLE 3 30.8333 0.000000 3 56.6667 86.7333 69.1667 SE(N= 3) 1.26720 5%LSD 8DF 4.13222 - 50 ANALYSIS OF VARIANCE SUMMARY TABLE FILE TDZ 3/ 8/21 17:17 :PAGE ANH HUONG CUA TDZ DEN KHA NANG TAO MO SEO TU MO LA CAY SAM CAU F-PROBABLIITY VALUES FOR EACH EFFECT IN THE MODEL SECTION - VARIATE TYLE GRAND MEAN STANDARD (N= SD/MEAN | 15) DEVIATION NO BASED ON BASED ON OBS TOTAL SS RESID SS 31.511 2.1949 15 48.680 C OF V |NLAI % |CT | | | | | | | | | 4.5 0.7117 0.0000 Thí nghiệm 3: Ảnh hưởng BAP α-NAA đến khả tạo mô sẹo từ mô sâm cau BALANCED ANOVA FOR VARIATE TYLE FILE NAA 3/ 8/21 17:27 :PAGE ANH HUONG CUA BAP VA NAA DEN KHA NANG TAO MO SEO TU MO LA CAY SAM CAU VARIATE V003 TYLE LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN SQUARES SQUARES F RATIO PROB ER LN ============================================================================= NLAI 3.33333 1.66667 1.00 0.412 CT 11419.2 2854.79 ****** 0.000 * RESIDUAL 13.3334 1.66667 * TOTAL (CORRECTED) 14 11435.8 816.845 TABLE OF MEANS FOR FACTORIAL EFFECTS FILE NAA 3/ 8/21 17:27 :PAGE ANH HUONG CUA BAP VA NAA DEN KHA NANG TAO MO SEO TU MO LA CAY SAM CAU MEANS FOR EFFECT NLAI - NLAI NOS TYLE 31.5000 32.5000 32.5000 SE(N= 5) 0.577351 5%LSD 8DF 1.88268 - MEANS FOR EFFECT CT 51 - CT NOS TYLE 0.000000 79.1667 3 44.1667 24.1667 13.3333 SE(N= 3) 0.745357 5%LSD 8DF 2.43053 - ANALYSIS OF VARIANCE SUMMARY TABLE FILE NAA 3/ 8/21 17:27 :PAGE ANH HUONG CUA BAP VA NAA DEN KHA NANG TAO MO SEO TU MO LA CAY SAM CAU F-PROBABLIITY VALUES FOR EACH EFFECT IN THE MODEL SECTION - VARIATE TYLE GRAND MEAN STANDARD (N= SD/MEAN | 15) DEVIATION NO BASED ON BASED ON OBS TOTAL SS RESID SS 28.581 1.2910 15 32.167 C OF V |NLAI % |CT | | | | | | | | | 4.0 0.4115 0.0000 Thí nghiệm 4: Ảnh hưởng BAP IBA đến khả tạo mô sẹo từ mô sâm cau BALANCED ANOVA FOR VARIATE TYLE FILE IBA 3/ 8/21 17:46 :PAGE ANH HUONG CUA BAP VA IBA DEN KHA NANG TAOJ MO SEO TU MO LA CAY SAM CAU VARIATE V003 TYLE LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN SQUARES SQUARES F RATIO PROB ER LN ============================================================================= NLAI 833336 416668 0.21 0.816 CT 13576.7 3394.17 ****** 0.000 * RESIDUAL 15.8336 1.97920 * TOTAL (CORRECTED) 14 13593.3 970.952 TABLE OF MEANS FOR FACTORIAL EFFECTS FILE IBA 3/ 8/21 17:46 :PAGE ANH HUONG CUA BAP VA IBA DEN KHA NANG TAOJ MO SEO TU MO LA CAY SAM CAU 52 MEANS FOR EFFECT NLAI - NLAI NOS TYLE 49.5000 49.5000 49.0000 SE(N= 5) 0.629158 5%LSD 8DF 2.05162 - MEANS FOR EFFECT CT - CT NOS TYLE 3 68.3333 0.000000 3 86.6667 58.3333 33.3333 SE(N= 3) 0.812239 5%LSD 8DF 2.64863 - ANALYSIS OF VARIANCE SUMMARY TABLE FILE IBA 3/ 8/21 17:46 :PAGE ANH HUONG CUA BAP VA IBA DEN KHA NANG TAOJ MO SEO TU MO LA CAY SAM CAU F-PROBABLIITY VALUES FOR EACH EFFECT IN THE MODEL SECTION - VARIATE TYLE GRAND MEAN STANDARD (N= SD/MEAN | 15) DEVIATION NO BASED ON BASED ON OBS TOTAL SS RESID SS 31.160 1.4068 15 49.333 C OF V |NLAI % |CT | | | | | | | | | 2.9 0.8156 0.0000 Thí nghiệm ảnh hưởng BAP đến khả tái sinh chồi từ mô sẹo sâm cau BALANCED ANOVA FOR VARIATE SOCHOI FILE BAP 19/ 8/21 15: :PAGE anh huong cua BAP den kha nang tai sinh choi tu mo seo la sam cau VARIATE V003 SOCHOI LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF 53 MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= NLAI 116667E-01 583333E-02 CT 20.1633 * RESIDUAL 816650E-01 136108E-01 6.72111 0.43 0.673 493.81 0.000 * TOTAL (CORRECTED) 11 20.2567 1.84152 BALANCED ANOVA FOR VARIATE CHIEUCAO FILE BAP 19/ 8/21 15: :PAGE anh huong cua BAP den kha nang tai sinh choi tu mo seo la sam cau VARIATE V004 CHIEUCAO CA LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN SQUARES SQUARES F RATIO PROB ER LN ============================================================================= NLAI 816665E-03 408333E-03 CT 16.6946 * RESIDUAL 136501E-01 227501E-02 5.56487 0.18 0.840 ****** 0.000 * TOTAL (CORRECTED) 11 16.7091 1.51901 BALANCED ANOVA FOR VARIATE SOLA FILE BAP 19/ 8/21 15: :PAGE anh huong cua BAP den kha nang tai sinh choi tu mo seo la sam cau VARIATE V005 SOLA LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN SQUARES SQUARES F RATIO PROB ER LN ============================================================================= NLAI 551666E-02 275833E-02 CT 6.95189 * RESIDUAL 304832E-01 508054E-02 2.31730 0.54 0.610 456.11 0.000 * TOTAL (CORRECTED) 11 6.98789 635263 TABLE OF MEANS FOR FACTORIAL EFFECTS FILE BAP 19/ 8/21 15: :PAGE anh huong cua BAP den kha nang tai sinh choi tu mo seo la sam cau MEANS FOR EFFECT NLAI - NLAI NOS SOCHOI CHIEUCAO SOLA 2.57500 2.03000 1.82250 2.65000 2.05000 1.77000 2.62500 2.04250 1.79500 SE(N= 4) 0.583327E-01 0.238485E-01 0.356390E-01 54 5%LSD 6DF 0.201782 0.824959E-01 0.123281 - MEANS FOR EFFECT CT - CT NOS SOCHOI CHIEUCAO SOLA 1.10000 0.576667 0.803333 3.20000 2.82333 2.11000 3 4.43333 3.51667 2.84333 1.73333 1.24667 1.42667 SE(N= 3) 0.673568E-01 0.275379E-01 0.411523E-01 5%LSD 6DF 0.232998 0.952580E-01 0.142352 ANALYSIS OF VARIANCE SUMMARY TABLE FILE BAP 19/ 8/21 15: :PAGE anh huong cua BAP den kha nang tai sinh choi tu mo seo la sam cau F-PROBABLIITY VALUES FOR EACH EFFECT IN THE MODEL SECTION - VARIATE GRAND MEAN STANDARD (N= SD/MEAN | 12) NO OBS DEVIATION C OF V |NLAI % |CT | | | | | | | | | BASED ON BASED ON TOTAL SS RESID SS 1.3570 0.11667 4.5 0.6730 0.0000 SOCHOI 12 2.6167 CHIEUCAO 12 2.0408 1.2325 0.47697E-01 2.3 0.8402 0.0000 SOLA 12 1.7958 0.79703 0.71278E-01 4.0 0.6104 0.0000 Thí nghiệm ảnh hưởng Kinetin đến khả tái sinh chồi từ mô sẹo sâm cau BALANCED ANOVA FOR VARIATE SOCHOI FILE KI 19/ 8/21 14:52 :PAGE anh huong cua KI den kha nang tai sinh choi tu mo seo la sam cau VARIATE V003 SOCHOI LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN SQUARES SQUARES F RATIO PROB ER LN ============================================================================= NLAI 499999E-02 249999E-02 CT 31.5400 * RESIDUAL 950009E-01 158335E-01 10.5133 0.16 0.857 663.99 0.000 * TOTAL (CORRECTED) 11 31.6400 2.87636 BALANCED ANOVA FOR VARIATE CHIEUCAO FILE KI 19/ 8/21 14:52 55 :PAGE anh huong cua KI den kha nang tai sinh choi tu mo seo la sam cau VARIATE V004 CHIEUCAO LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN SQUARES SQUARES F RATIO PROB ER LN ============================================================================= NLAI 266665E-03 133333E-03 CT 24.3975 * RESIDUAL 120100E-02 200166E-03 8.13250 0.67 0.551 ****** 0.000 * TOTAL (CORRECTED) 11 24.3990 2.21809 BALANCED ANOVA FOR VARIATE SOLA FILE KI 19/ 8/21 14:52 :PAGE anh huong cua KI den kha nang tai sinh choi tu mo seo la sam cau VARIATE V005 SOLA LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN SQUARES SQUARES F RATIO PROB ER LN ============================================================================= NLAI 755000E-02 377500E-02 CT 20.0395 * RESIDUAL 139836E-01 233060E-02 6.67983 1.62 0.274 ****** 0.000 * TOTAL (CORRECTED) 11 20.0610 1.82373 TABLE OF MEANS FOR FACTORIAL EFFECTS FILE KI 19/ 8/21 14:52 :PAGE anh huong cua KI den kha nang tai sinh choi tu mo seo la sam cau MEANS FOR EFFECT NLAI - NLAI NOS SOCHOI CHIEUCAO SOLA 3.12500 2.44500 2.26750 3.10000 2.43500 2.31500 3.07500 2.44500 2.32500 SE(N= 4) 0.629156E-01 0.707401E-02 0.241381E-01 5%LSD 6DF 0.217635 0.244701E-01 0.834977E-01 - MEANS FOR EFFECT CT - CT NOS SOCHOI CHIEUCAO SOLA 1.10000 0.576667 0.803333 5.46667 4.49000 4.33000 56 3 3.56667 2.82000 2.34000 2.26667 1.88000 1.73667 SE(N= 3) 0.726487E-01 0.816836E-02 0.278723E-01 5%LSD 6DF 0.251303 0.282557E-01 0.964148E-01 ANALYSIS OF VARIANCE SUMMARY TABLE FILE KI 19/ 8/21 14:52 :PAGE anh huong cua KI den kha nang tai sinh choi tu mo seo la sam cau F-PROBABLIITY VALUES FOR EACH EFFECT IN THE MODEL SECTION - VARIATE GRAND MEAN STANDARD (N= SD/MEAN | 12) DEVIATION NO BASED ON BASED ON OBS TOTAL SS RESID SS C OF V |NLAI % |CT | | | | | | | | | SOCHOI 12 3.1000 1.6960 0.12583 4.1 0.8573 0.0000 CHIEUCAO 12 2.4417 1.4893 0.14148E-01 0.6 0.5510 0.0000 SOLA 12 2.3025 1.3505 0.48276E-01 2.1 0.2739 0.0000 Thí nghiệm 7: Ảnh hưởng NAA đến khả rễ in vitro sâm cau BALANCED ANOVA FOR VARIATE SORE FILE NAA 29/ 8/21 18:56 :PAGE VARIATE V003 SORE LN SOURCE OF VARIATION DF LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= NLAI 253335E-03 126668E-03 0.18 0.835 CT 21.4492 5.36231 ****** 0.000 * RESIDUAL 547841E-02 684801E-03 * TOTAL (CORRECTED) 14 21.4550 1.53250 BALANCED ANOVA FOR VARIATE CHIEUDAI FILE NAA 29/ 8/21 18:56 :PAGE VARIATE V004 CHIEUDAI SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= NLAI 305333E-02 152666E-02 2.34 0.157 CT 2.28143 570357 875.22 0.000 * RESIDUAL 521340E-02 651675E-03 * TOTAL (CORRECTED) 14 2.28969 163550 TABLE OF MEANS FOR FACTORIAL EFFECTS FILE NAA 29/ 8/21 18:56 :PAGE MEANS FOR EFFECT NLAI NLAI NOS 5 SORE 2.92600 2.91600 2.92200 CHIEUDAI 2.44800 2.47200 2.48200 SE(N= 5) 0.117030E-01 0.114164E-01 5%LSD 8DF 0.381623E-01 0.372278E-01 MEANS FOR EFFECT CT - 57 CT NOS 3 3 SORE 5.21333 2.88000 2.45000 2.24333 1.82000 CHIEUDAI 3.09000 2.75000 2.25667 2.18000 2.06000 SE(N= 3) 0.151085E-01 0.147386E-01 5%LSD 8DF 0.492673E-01 0.480609E-01 ANALYSIS OF VARIANCE SUMMARY TABLE FILE NAA 29/ 8/21 18:56 :PAGE F-PROBABLIITY VALUES FOR EACH EFFECT IN THE MODEL SECTION - VARIATE SORE CHIEUDAI GRAND MEAN (N= 15) NO OBS 15 2.9213 15 2.4673 STANDARD DEVIATION C OF V |NLAI SD/MEAN | BASED ON BASED ON % | TOTAL SS RESID SS | 1.2379 0.26169E-01 0.9 0.8352 0.40441 0.25528E-01 1.0 0.1573 |CT | | | 0.0000 0.0000 | | | | Thí nghiệm 8: Ảnh hưởng IBA đến khả rễ in vitro sâm cau BALANCED ANOVA FOR VARIATE SORE FILE IBA 29/ 8/21 19:11 :PAGE VARIATE V003 SORE LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= NLAI 333338E-03 166669E-03 0.33 0.729 CT 30.2556 7.56391 ****** 0.000 * RESIDUAL 399747E-02 499684E-03 * TOTAL (CORRECTED) 14 30.2600 2.16143 - 58 BALANCED ANOVA FOR VARIATE CHIEUDAI FILE IBA 29/ 8/21 19:11 :PAGE VARIATE V004 CHIEUDAI LN SOURCE OF VARIATION SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= NLAI 493332E-03 246666E-03 0.52 0.616 CT 3.36067 840167 ****** 0.000 * RESIDUAL 377309E-02 471636E-03 * TOTAL (CORRECTED) 14 3.36493 240352 TABLE OF MEANS FOR FACTORIAL EFFECTS FILE IBA 29/ 8/21 19:11 :PAGE MEANS FOR EFFECT NLAI NLAI NOS 5 DF SORE 7.60800 7.59800 7.60800 CHIEUDAI 3.72000 3.70600 3.71400 SE(N= 5) 0.999684E-02 0.971222E-02 5%LSD 8DF 0.325987E-01 0.316706E-01 MEANS FOR EFFECT CT CT NOS 3 3 SORE 5.21333 8.67333 9.34333 7.63667 7.15667 CHIEUDAI 3.09000 3.94333 4.40333 3.84667 3.28333 SE(N= 3) 0.129059E-01 0.125384E-01 5%LSD 8DF 0.420847E-01 0.408865E-01 - 59 ANALYSIS OF VARIANCE SUMMARY TABLE FILE IBA 29/ 8/21 19:11 :PAGE F-PROBABLIITY VALUES FOR EACH EFFECT IN THE MODEL SECTION - VARIATE SORE CHIEUDAI GRAND MEAN (N= 15) NO OBS 15 7.6047 15 3.7133 STANDARD DEVIATION C OF V |NLAI SD/MEAN | BASED ON BASED ON % | TOTAL SS RESID SS | 1.4702 0.22354E-01 0.3 0.7288 0.49026 0.21717E-01 0.6 0.6156 60 |CT | | | 0.0000 0.0000 | | | |