HỌC VIỆN NÔNG NGHIỆP VIỆT NAM KHOA CÔNG NGHỆ SINH HỌC KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP ĐỀ TÀI: THỬ NGHIỆM NHÂN GIỐNG LỒNG ĐÈN (FUCHSIA MAGELLANICA) BẰNG PHƯƠNG PHÁP NUÔI CẤY MÔ Hà Nội - 2021 HỌC VIỆN NÔNG NGHIỆP VIỆT NAM KHOA CƠNG NGHỆ SINH HỌC KHĨA LUẬN TỐT NGHIỆP ĐỀ TÀI: THỬ NGHIỆM NHÂN GIỐNG LỒNG ĐÈN (FUCHSIA MAGELLANICA) BẰNG PHƯƠNG PHÁP NUÔI CẤY MÔ Người thực : HỒNG NGỌC HÀ Khóa : K62CNSHB Ngành : CƠNG NGHỆ SINH HỌC Người hướng dẫn : PGS.TS NGUYỄN THANH HẢI ThS NGUYỄN THỊ THƠM Hà Nội - 2021 LỜI CAM ĐOAN Tơi xin cam đoan: Bài khóa luận tốt nghiệp cơng trình nghiên cứu thực cá nhân, thực dựa sở nghiên cứu lý thuyết, kiến thức chuyên ngành, nghiên cứu khảo sát tình hình thực tiễn hướng dẫn khoa học PGS.TS Nguyễn Thanh Hải Các số liệu, bảng biểu kết khóa luận trung thực, nhận xét, phương hướng đưa xuất phát từ thực tiễn kinh nghiệm có Một lần xin khẳng định trung thực lời cam đoan Hà Nội, ngày tháng năm 2021 Người thực Hoàng Ngọc Hà i LỜI CẢM ƠN Để hoàn thành báo cáo tốt nghiệp này, cố gắng nỗ lực thân nhận ủng hộ, giúp đỡ nhiệt tình mặt thầy cô giáo, tập thể cá nhân Với lịng biết ơn sâu sắc, tơi xin gửi lời cảm ơn chân thành tới PGS.TS Nguyễn Thanh Hải ThS Nguyễn Thị Thơm dành nhiều thời gian, tâm huyết bảo, giúp đỡ suốt q trình thực tập Tơi xin gửi lời cảm ơn tới tập thể Thầy, Cô giáo khoa Công Nghệ Sing Học tạo điều kiện thuận lợi, giúp đỡ tơi hồn thành khóa luận Tơi khơng quên công lao Thầy, Cô giáo trường Học Viện Nơng Nghiệp Việt Nam tận tình dạy bảo suốt năm học qua Cuối cùng, tơi xin bày tỏ lịng biết ơn tới người thân gia đình, bạn bè bên tơi, chăm sóc, động viên, giúp đỡ suốt thời gian thực đề tài tốt nghiệp Xin chân thành cảm ơn! Hà Nội, ngày tháng năm 2021 Người thực Hoàng Ngọc Hà ii MỤC LỤC LỜI CAM ĐOAN i LỜI CẢM ƠN ii MỤC LỤC iii DANH MỤC CÁC KÍ HIỆU, CÁC CHỮ VIẾT TẮT v DANH MỤC BẢNG vi DANH MỤC BIỂU ĐỒ vii DANH MỤC HÌNH ẢNH viii TÓM TẮT ix Phần I: MỞ ĐẦU 1.1 Tên đề tài 1.2 Đặt vấn đề 1.3 Mục đích, yêu cầu nghiên cứu 1.4 Ý nghĩa đề tài 1.4.1 Ý nghĩa khoa học 1.4.2 Ý nghĩa thực tiễn Phần II: TỔNG QUAN TÀI LIỆU 2.1 Nguồn gốc 2.2 Vị trí phân loại 2.3 Đặc điểm thực vật học 2.4 Yêu cầu ngoại cảnh hoa Lồng Đèn 2.5 Kỹ thuật nhân giống hoa Lồng Đèn 2.5.1 Nhân giống hữu tính 2.5.2 Nhân giống vô tính 2.6 Nhân giống phương pháp nuôi cấy mô Phần III: NỘI DUNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 3.1 Đối tượng 3.2 Vật liệu nuôi cấy iii 3.3 Thời gian 3.4 Nội dung nghiên cứu 3.5 Phương pháp nghiên cứu 3.5.1 Ảnh hưởng loại hóa chất, thời gian, nồng độ đến kết khử trùng 3.5.2 Ảnh hưởng nhóm Cytokinine đến khả tạo chồi hoa Lồng Đèn 10 3.5.3 Ảnh hưởng Gibberellin đến khả nhân chồi hoa Lồng Đèn 11 3.5.4 Ảnh hưởng nhóm Auxin đến khả rễ Lồng Đèn 12 3.6 Các tiêu theo dõi 13 3.7 Phương pháp xử lý số liệu 13 Phần IV: KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 14 4.1 Ảnh hưởng loại hóa chất, thời gian, nồng độ đến kết khử trùng 14 4.2 Ảnh hưởng nhóm Cytokinine đến khả tạo chồi hoa Lồng Đèn 16 4.3 Ảnh hưởng Gibberellin đến khả nhân chồi hoa Lồng Đèn 22 4.4 Ảnh hưởng nhóm Auxin đến khả rễ hoa Lồng Đèn 23 Phần V: KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ 27 5.1 Kết luận 27 5.2 Kiến nghị 27 Phụ Biểu 28 Số liệu thu thập 30 iv DANH MỤC CÁC KÍ HIỆU, CÁC CHỮ VIẾT TẮT ABT: Super Transplantone BAP: Benzyl Amino Purin GA3 Gibberellic IBA: Indol Butiric Acid Kn: Kinetin MS: Musashige Skoog Sd: Sai tiêu chuẩn Tb: Trung bình v DANH MỤC BẢNG Bảng 4.1: Ảnh hưởng nồng độ, thời gian, loại hóa chất đến khả khử trùng 15 Bảng 4.2: Ảnh hưởng kinetin đến hệ số nhân chồi 17 Bảng 4.3: Ảnh hưởng BAP đến hệ số nhân chồi 18 Bảng 4.4: Ảnh hưởng kinetin + BAP đến hệ số nhân chồi 20 Bảng 4.5: Ảnh hưởng GA3 đến hệ số nhân chồi 22 Bảng 4.6: Ảnh hưởng IBA đến khả rễ 23 Bảng 4.7: Ảnh hưởng ABT đến khả rễ 25 vi DANH MỤC BIỂU ĐỒ Biểu đồ 4.1: Ảnh hưởng Kinetin đến sinh trưởng phát triển chồi Lồng Đèn 17 Biểu đồ 4.2: Ảnh hưởng BAP đến sinh trưởng phát triển chồi Lồng Đèn 19 Biểu đồ 4.3: Ảnh hưởng kinetin + BAP đến sinh trưởng phát triển chồi Lồng Đèn 21 Biểu đồ 4.4: Ảnh hưởng GA3 đến sinh trưởng phát triển chồi Lồng Đèn 22 Biểu đồ 4.5: Ảnh hưởng IBA đến khả rễ Lồng Đèn 24 Biểu đồ 4.6: Ảnh hưởng ABT đến khả rễ Lồng Đèn 25 vii DANH MỤC HÌNH ẢNH Hình 4.1: Hình ảnh khử trùng mẫu 16 Hình 4.2: Ảnh hưởng Kinetin đến khả nhân nhanh chồi sau tuần nuôi cấy 18 Hình 4.3: Ảnh hưởng BAP đến khả nhân nhanh chồi sau tuần nuôi cấy 19 Hình 4.4: Ảnh hưởng Kinetin+BAP đến khả nhân nhanh chồi sau tuần nuôi cấy 21 Hình 4.5: Ảnh hưởng GA3 đến khả nhân nhanh chồi sau tuần nuôi cấy 23 Hình 4.6: Ảnh hưởng IBA đến khả rễ sau tuần ni cấy 24 Hình 4.7: Ảnh hưởng ABT đến khả rễ sau tuần nuôi cấy 26 viii Kết chạy ANOVA Anova: Single Factor SUMMARY Groups Count Sum Average Variance ĐC 45 129 2,866667 1,072727 0,1 mg/l kn + 1,5 mg/l BAP 45 199 4,422222 1,294949 0,2 mg/l kn + 1,5 mg/l BAP 45 249 5,533333 1,254545 0,3 mg/l kn + 1,5 mg/l BAP 45 201 4,466667 0,4 mg/l kn + 1,5 mg/l BAP 45 164 3,644444 1,143434 0,5 mg/l kn + 1,5 mg/l BAP 45 164 3,644444 1,007071 1,5 mg/l BAP 45 174 3,866667 1,027273 1,3 ANOVA Source of Variation SS df Between Groups 192,330 Within Groups 356,4 Total MS F P-value F crit 32,05503 27,70187 2,09E-26 2,128061 308 1,157143 548,730 314 49 Ảnh hưởng GA3 đến khả nhân chồi Lồng Đèn Số chồi/cụm chồi STT ĐC GA3 0,2 mg/l 0,4 mg/l 0,6 mg/l 0,8 mg/l 2 11 6 4 5 7 4 6 10 11 11 12 13 7 14 4 15 7 16 17 18 19 20 7 21 11 22 4 23 6 10 24 9 25 50 26 27 6 28 6 29 5 30 6 31 4 32 8 33 34 11 35 36 6 37 5 38 39 7 40 41 7 11 42 43 6 44 45 11 Tb 2,71 4,56 6,02 6,78 6,36 Sd 0,73 1,08 1,56 1,98 1,71 51 Kết chạy ANOVA Anova: Single Factor SUMMARY Groups Count Sum Average Variance ĐC 45 122 2,711111 0,528283 0,2 mg/l 45 205 4,555556 1,161616 0,4 mg/l 45 271 6,022222 2,431313 0,6 mg/l 45 305 6,777778 3,90404 0,8 mg/l 45 286 6,355556 2,916162 ANOVA Source of Variation SS df MS F P-value F crit Between Groups 498,3733 124,5933 56,93658 6,43E-33 2,412682 Within Groups Total 481,4222 220 2,188283 979,7956 224 52 Chiều dài chồi (cm) STT ĐC GA3 0,2 mg/l 0,4 mg/l 0,6 mg/l 0,8 mg/l 2,5 5,8 3,0 8,2 6,5 4,0 4,4 4,5 7,0 5,2 2,0 4,0 4,8 6,4 5,0 3,2 5,3 3,5 5,3 7,5 2,5 5,0 5,7 6,5 6,3 5,0 4,5 6,5 5,3 5,7 1,2 4,5 7,4 6,0 4,8 2,0 4,8 6,5 5,0 5,4 3,2 6,0 5,7 5,5 7,3 10 2,0 5,6 5,3 7,0 6,2 11 1,2 6,2 6,2 8,5 5,1 12 2,0 5,4 5,5 7,5 5,0 13 2,5 5,9 6,1 7,2 6,8 14 3,0 5,7 5,0 7,0 5,0 15 3,0 6,5 5,0 8,5 6,6 16 2,5 5,3 6,0 5,6 7,5 17 1,8 5,2 5,0 8,5 6,5 18 1,4 4,5 5,5 6,5 5,5 19 2,1 6,0 6,0 6,8 5,2 20 4,2 6,5 6,2 6,6 5,0 21 3,0 5,3 5,0 6,4 5,0 22 3,0 6,0 4,5 5,7 6,5 23 2,5 5,0 4,8 6,4 5,0 24 1,2 5,5 3,5 5,3 7,5 25 0,8 5,6 3,0 6,5 7,0 26 1,0 5,0 7,0 5,5 7,0 53 27 2,5 6,3 6,4 5,3 5,0 28 2,3 7,5 5,0 6,3 5,5 29 3,0 5,5 6,4 5,6 5,8 30 2,0 5,3 6,0 5,6 5,0 31 2,5 5,5 6,5 6,0 5,5 32 4,0 5,0 5,5 6,5 7,3 33 2,5 5,3 5,8 6,8 6,7 34 3,0 5,0 5,7 6,5 6,3 35 3,4 5,5 6,5 5,3 5,7 36 1,5 3,5 7,4 6,0 4,8 37 4,0 5,0 6,5 5,0 5,4 38 2,0 5,0 5,7 5,5 7,3 39 3,0 6,5 6,5 5,6 7,5 40 2,5 6,5 5,5 5,0 6,8 41 2,1 5,5 7,0 6,3 7,2 42 1,6 5,3 7,0 7,5 6,0 43 3,5 6,3 6,5 6,0 5,5 44 2,4 5,6 5,5 6,5 7,3 45 2,5 5,6 5,8 6,8 5,7 Tb 2,51 5,45 5,65 6,33 6,03 Sd 0,90 0,74 1,05 0,94 0,92 54 Kết chạy ANOVA Anova: Single Factor SUMMARY Groups Count Sum Average Variance ĐC 45 113,1 2,513333 0,818455 0,2 mg/l 45 245,2 5,448889 0,540283 0,4 mg/l 45 254,42 5,653778 1,107592 0,6 mg/l 45 284,8 6,328889 0,887101 0,8 mg/l 45 271,4 6,031111 0,837646 ANOVA Source of Variation SS Between Groups 425,2976 Within Groups Total df MS P-value F crit 106,3244 126,8462 5,79E-56 2,412682 184,4074 220 0,838215 609,705 F 224 55 Ảnh hưởng IBA đến khả rễ hoa lồng đèn Số mẫu rễ Hóa chất Nồng độ Số mẫu/lặp Số mẫu rễ Tỷ lệ rễ (%) 45 11 24,44 0,5 mg/l 45 42 93,33 1,0 mg/l 45 45 100,00 1,5 mg/l 45 43 95,56 2,0 mg/l 45 42 93,33 ĐC IBA 56 Chiều dài rễ (cm) STT ĐC IBA 0,5 mg/l 1,0 mg/l 1,5 mg/l 2,0 mg/l 3,8 4,5 7,4 6,0 4,8 3,5 4,8 6,5 5,0 5,4 4,0 6,0 5,7 5,5 7,3 3,2 6,5 6,5 5,6 7,5 3,5 4,3 3,5 5,5 5,3 2,3 5,3 4,5 7,0 6,6 2,1 5,8 3,0 8,2 6,5 3,7 4,4 4,5 7,0 5,2 4,0 4,7 6,0 8,5 5,3 10 2,2 5,6 5,3 7,0 6,2 11 2,1 6,2 6,2 8,5 5,3 12 2,2 5,4 5,5 7,5 5,0 13 3,9 4,3 2,7 5,0 4,8 14 3,5 4,3 3,5 5,5 5,3 15 2,3 5,3 4,5 7,0 6,6 16 2,1 5,8 3,0 8,2 6,5 17 3,7 4,4 4,5 7,0 5,2 18 4,0 4,7 6,0 8,5 5,3 19 2,2 5,6 5,3 7,0 6,2 20 3,2 4,5 5,5 6,5 5,5 21 3,8 6,0 6,0 6,8 5,2 22 3,8 6,5 6,2 6,6 5,0 23 3,8 5,5 5,0 6,4 5,0 24 4,0 5,3 3,5 5,3 7,5 25 2,1 6,8 3,0 6,5 7,0 26 2,1 5,0 7,0 5,5 7,0 57 27 2,0 3,6 6,4 5,3 5,5 28 4,0 4,2 5,0 6,3 5,5 29 2,0 5,5 6,4 5,6 5,0 30 2,0 5,3 6,0 5,6 5,0 31 4,0 5,5 6,5 6,0 5,5 32 2,0 5,0 5,5 6,5 7,3 33 3,9 5,3 5,0 2,5 5,6 34 2,1 5,0 5,5 4,0 3,0 35 2,1 4,5 7,3 3,0 6,0 36 3,8 4,5 7,4 6,0 4,8 37 3,5 4,8 6,5 5,0 5,4 38 4,0 6,0 5,7 5,5 7,3 39 3,2 6,5 6,5 5,6 7,5 40 3,9 4,0 4,8 6,4 5,0 41 4,0 5,3 3,5 5,3 7,5 42 2,1 3,6 6,4 5,3 5,0 43 2,1 4,2 5,0 6,3 5,5 44 2,0 5,5 6,4 5,6 5,8 45 3,2 5,3 6,0 5,6 5,0 Tb 3,04 5,14 5,38 6,10 5,77 Sd 0,83 0,78 1,27 1,27 0,99 58 Kết chạy ANOVA Anova: Single Factor SUMMARY Groups Count Sum Average Variance ĐC 45 0,5 mg/l 45 231,1 1,0 mg/l 45 242,1 5,38 1,608455 1,5 mg/l 45 274,5 6,1 1,611364 2,0 mg/l 45 259,8 Source of Variation SS df Between Groups 260,0924 Within Groups 241,9594 220 Total 502,0519 224 136,7538 3,038973 0,686735 5,135556 0,614616 5,773333 0,977909 ANOVA MS F P-value F crit 65,02311 59,12183 7,81E-34 2,412682 1,099816 59 Ảnh hưởng ABT đến khả rễ hoa lồng đèn Số mẫu rễ Hóa chất Nồng độ ĐC ABT Số mẫu/lặp Số mẫu rễ Tỷ lệ rễ (%) 45 11 24,44 0,5 mg/l 45 33 73,33 1,0 mg/l 45 36 80,00 1, mg/l 45 31 68,89 2,0 mg/l 45 28 62,22 60 Chiều dài rễ (cm) STT ĐC ABT 0,5 mg/l 1,0 mg,l 1,5 mg/l 2,0 mg/l 5 2 3 5 4 4 5 7 6 5 10 11 5 12 6 13 6 14 5 15 16 10 17 5 18 5 19 2 2 20 2 2 21 22 23 24 25 3 26 10 61 27 3 28 6 29 4 30 5 31 32 33 5 34 35 5 36 3 6 37 38 3 5 39 6 40 5 41 6 42 4 43 44 3 5 45 6 Tb 2,73 4,13 4,56 5,76 4,47 Sd 0,89 1,22 1,29 1,60 1,10 62 Kết chạy ANOVA Anova: Single Factor SUMMARY Groups Count Sum §C 45 123 0,5 mg/l 45 186 1,0 mg/l 45 205 1,5 mg/l 45 259 2,0 mg/l 45 201 SS df MS F P-value F crit 211,04 52,76 34,2777 3,12E-22 2,41268 338,622 220 1,53919 549,662 224 ANOVA Source of Variation Between Groups Within Groups Total Average Variance 2,73333 0,79090 4,13333 1,48181 4,55555 1,66161 6 5,75555 2,55252 4,46666 1,20909 63