Khóa luận tốt nghiệp nghiên cứu nhân giống vịt cỏ vân đình bằng thụ tinh nhân tạo sử dụng môi trường pha loãng tinh gia cầm

HỌC VIỆN NÔNG NGHIỆP VIỆT NAM KHOA CÔNG NGHỆ SINH HỌC  KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP ĐỀ TÀI: ‘‘NGHIÊN CỨU NHÂN GIỐNG VỊT CỎ VÂN ĐÌNH BẰNG THỤ TINH NHÂN TẠO SỬ DỤNG MƠI TRƯỜNG PHA LOÃNG TINH GIA CẦM” HÀ NỘI – 9/2021 HỌC VIỆN NÔNG NGHIỆP VIỆT NAM KHOA CÔNG NGHỆ SINH HỌC  KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP ĐỀ TÀI: ‘‘NGHIÊN CỨU NHÂN GIỐNG VỊT CỎ VÂN ĐÌNH BẰNG THỤ TINH NHÂN TẠO SỬ DỤNG MƠI TRƯỜNG PHA LOÃNG TINH GIA CẦM” Sinh viên thực : Vũ Thị Loan Lớp : K62CNSHC MSV : 623747 Ngành : Công nghệ sinh học Giáo viên hướng dẫn : ThS Ngô Thành Trung ThS Nguyễn Quốc Trung HÀ NỘI - 9/2021 LỜI CAM ĐOAN Tôi xin cam đoan cơng trình nghiên cứu thân tơi Các số liệu, kết nêu khóa luận trung thực chưa công bố cơng trình nghiên cứu khác Tơi xin cam đoan thơng tin trích dẫn khóa luận rõ nguồn gốc Tác giả Vũ Thị Loan i LỜI CẢM ƠN Để hoàn thành báo cáo tốt nghiệp này, nỗ lực phấn đấu thân, tơi cịn nhận nhiều giúp đỡ, hướng dẫn tận tình cá nhân, tập thể đơn vị khác Với lòng biết ơn sâu sắc xin gửi lời cảm ơn chân thành tới: thầy giáo ThS Nguyễn Quốc Trung thầy giáo ThS Ngô Thành Trung dành nhiều thời gian, tâm huyết bảo, giúp đỡ suốt trình thực tập Tơi xin gửi lời cảm ơn tới thầy giáo, cô giáo cán Bộ môn Sinh học phân tử Công nghệ sinh học ứng dụng - Khoa Công nghệ sinh học, Bộ môn Ngoại - Sản - Khoa Thú Y Nhóm nghiên cứu mạnh Công nghệ hỗ trợ sinh sản Chọn tạo giống Động vật - Học viện Nông nghiệp Việt Nam tạo điều kiện thuận lợi, giúp đỡ tơi hồn thành khố luận Tơi xin chân thành cảm ơn thầy giáo, cô giáo Học viện Nơng nghiệp Việt Nam tận tình dạy bảo suốt năm học qua Cuối xin bày tỏ lòng biết ơn tới người thân gia đình ln bên tơi, chăm sóc, động viên tơi tồn thể bạn bè giúp đỡ suốt thời gian thực đề tài tốt nghiệp Hà Nội, ngày 10 tháng năm 2021 Sinh viên Vũ Thị Loan ii MỤC LỤC LỜI CAM ĐOAN i LỜI CẢM ƠN ii MỤC LỤC iii DANH MỤC BẢNG vi DANH MỤC HÌNH vii TÓM TẮT BÁO CÁO viii PHẦN I MỞ ĐẦU 1.1 Đặt vấn đề 1.2 Mục đích nghiên cứu PHẦN II TỔNG QUAN TÀI LIỆU .4 2.1 Những thành tựu công nghệ thụ tinh nhân tạo nhân nhanh đàn gia cầm thủy cầm giới 2.2 Tình hình chăn nuôi thủy cầm Việt Nam 11 2.3 Về giống vịt cỏ Vân Đình .16 2.3.1 Giới thiệu giống vịt cỏ Vân Đình 16 2.3.2 Đặc tính sinh dục vịt cỏ Vân Đình 18 2.4 Về tình hình nghiên cứu ứng dụng cơng nghệ thụ tinh nhân tạo vịt Việt Nam 20 2.5 Các thành phần vai trị thành phần hóa học mơi trường bảo quản tinh loài gia cầm 24 PHẦN III ĐỐI TƯỢNG, VẬT LIỆU, NỘI DUNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 27 3.1 Đối tượng, vật liệu nghiên cứu .27 3.1.1 Đối tượng .27 3.1.2 Hóa chất dụng cụ thí nghiệm 28 3.2 Thời gian địa điểm nghiên cứu 30 3.3 Nội dung nghiên cứu bố trí thí nghiệm 30 3.4 Phương pháp nghiên cứu 31 iii 3.4.1 Phương pháp điều tra tình hình chăn ni vịt Cỏ Vân Đình .31 3.4.2 Phương pháp tuyển chọn đàn vịt cỏ Vân Đình thí nghiệm 32 3.4.3 Phương pháp chuẩn bị vịt trống lấy tinh .33 3.4.4 Phương pháp đánh giá chất lượng tinh vịt trống 34 3.4.5 Phương pháp pha loãng bảo quản tinh vịt 38 3.4.6 Phương pháp dẫn tinh nhân tạo 40 3.4.7 Phương pháp ấp soi trứng .40 3.4.8 Phương pháp xử lý số liệu 41 PHẦN IV KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 42 4.1 Kết điều tra tình hình chăn ni vịt cỏ Vân Đình địa bàn huyện Ứng Hòa, thành phố Hà Nội .42 4.2 Kết đánh giá tiêu chất lượng tinh nguyên vịt cỏ Vân Đình ni lồng .49 4.3 Kết đánh giá suất sinh sản vịt có Vân Đình mái ni lồng 51 4.4 Kết đánh giá chất lượng tinh bảo quản 10oC vịt cỏ Vân Đình .52 4.5 Kết đánh giá hiệu thụ tinh nhân tạo cho vịt cỏ Vân Đình .54 PHẦN V KẾT LUẬN VÀ ĐỀ NGHỊ 57 5.1 Kết luận 57 5.2 Đề nghị 57 TÀI LIỆU THAM KHẢO .58 PHỤ LỤC 61 iv DANH MỤC CÁC KÝ HIỆU, CÁC CHỮ VIẾT TẮT Viết tắt Giải nghĩa A Hoạt lực tinh trùng BPSE Beltsville Poultry Semen Extender C Nồng độ tinh trùng cs Cộng K Tỷ lệ tinh trùng kỳ hình V Tổng thể tích lần lấy tinh SST Sperm storage tubules UVJ Uterovaginal juncture SAS Statistical Analysis Systems v DANH MỤC BẢNG Bảng 3.1 Quy ước thang tính điểm hoạt lực .36 Bảng 4.1 Chất lượng tinh nguyên vịt trống thí nghiệm (tần suất khai thác ngày/lần ngày/lần) 49 Bảng 4.2 Bảng đánh giá tiêu sinh sản vịt mái Vân Đình 52 Bảng 4.3 Các tiêu đánh giá chất lượng tinh bảo quản dạng lỏng 10oC môi trường thí nghiệm BPSE sau giờ, 24 48 53 Bảng 4.4 Kết đánh giá hiệu thụ tinh nhân tạo Vịt cỏ Vân Đình .55 vi DANH MỤC HÌNH Hình 2.1 Ảnh giống Vịt cỏ Vân Đình 17 Hình 3.1 Ảnh vịt mái vịt trống thí nghiệm 27 Hình 3.2 Hình ảnh vịt ni thí nghiệm 28 Hình 3.3 Hóa chất 28 Hình 3.4 Ống Fancol, ống Eppendorf, cân kĩ thuật, kính hiển vi, la men, lam kính, buồng đếm hồng cầu 29 Hình 3.5 Mơ hình tuyển chọn đàn vịt cỏ Vân Đình thí nghiệm 33 Hình 3.6 Phương pháp khai thác tinh dịch vịt trống .34 Hình 3.7 Dụng cụ để khai thác tinh dịch vịt trống .34 Hình 3.8 Một số dạng tinh trùng kì hình tham khảo 37 Hình 3.9 Minh họa số dạng tinh trùng kì hình 37 Hình 3.10 Buồng đếm Neu Bauer 38 Hình 3.11 Dẫn tinh nhân tạo cho vịt 40 Hình 3.12 Máy ấp trứng .41 Hình 4.1 Một số hình ảnh điều tra tình hình chăn ni vịt 48 vii TÓM TẮT BÁO CÁO Nghiên cứu thực nhằm nhân giống vịt cỏ Vân Đình thụ tinh nhân tạo có sử dụng mơi trường pha loãng tinh gia cầm Nghiên cứu gồm nội dung tương ứng với thí nghiệm: (i) Điều tra tình hình chăn ni vịt cỏ Vân Đình địa bàn huyện Ứng Hòa, thành phố Hà Nội; (ii) Đánh giá tiêu chất lượng tinh nguyên vịt cỏ Vân Đình; (iii) Đánh giá tiêu sinh sản 100 vịt mái Vân Đình; (iv) Đánh giá chất lượng tinh bảo quản 10oC vịt cỏ Vân Đình; (v) Đánh giá hiệu thụ tinh nhân tạo cho vịt cỏ Vân Đình Chất lượng tinh bảo quản đánh giá xác định tiêu gồm hoạt lực tinh trùng (điểm), tỷ lệ tinh trùng kì hình (%) mốc thời gian bảo quản 24 48 Sử dụng 10 vịt cỏ Vân Đình trống ni Mơ hình Trung tâm cơng nghệ hỗ trợ sinh sản chọn tạo giống động vật - Học viện Nông nghiệp Việt Nam cho nghiên cứu Kết cho thấy chất lượng tinh vịt cỏ Vân Đình tương đối tốt, chất lượng tinh dịch khai thác ngày/lần cho tiêu thể tích hoạt lực tốt đáp ứng nhu cầu thí nghiệm Bảo quản tinh vịt cỏ Vân Đình 10 oC, sau 48 bảo quản hoạt lực tinh trùng giảm mạnh Cụ thể, sau 24 bảo quản hoạt lực tinh trùng 72,3±2,26, sau 48 bảo quản hoạt lực giảm 44,8±3,01 Tỷ lệ tinh trùng kì hình (%) mẫu tăng theo thời gian bảo quản đạt chất lượng tất mốc thời gian ( |t| 0.0002 2.5 Pr >= |M| 0.0625 S 7.5 Pr >= |S| 0.0625 Quantiles (Definition 5) Quantile Estimate 100% Max 17.00 99% 17.00 95% 17.00 90% 17.00 75% Q3 16.03 50% Median 25% Q1 13.48 13.04 10% 11.04 5% 11.04 65 1% 11.04 0% Min 11.04 The SAS System 02:05 Friday, September 4, 2021 31 The UNIVARIATE Procedure Variable: diffpq1pq2 Extreme Observations -Lowest Highest Value Obs Value 11.04 11.04 13.04 13.04 13.48 13.48 16.03 16.03 17.00 17.00 Obs The SAS System Obs parameter pq1 02:05 Friday, September 4, 2021 32 pq2 1 65.69 52.65 58.72 45.24 64.21 48.18 67.24 50.24 58.54 47.50 78.24 68.33 80.05 65.50 77.24 67.24 82.56 70.86 10 85.24 72.32 11 64.85 53.40 12 62.50 52.24 13 58.61 50.50 14 55.37 57.00 15 65.56 62.00 66 The SAS System Obs parameter pq1 02:05 Friday, September 4, 2021 33 pq2 diffpq1pq2 78.24 68.33 9.91 2 80.05 65.50 14.55 77.24 67.24 10.00 82.56 70.86 11.70 85.24 72.32 12.92 The SAS System 02:05 Friday, September 4, 2021 34 The UNIVARIATE Procedure Variable: diffpq1pq2 Moments N Sum Weights Mean 11.816 Sum Observations 59.08 Std Deviation 1.97722786 3.90943 Skewness 0.4779589 Uncorrected SS Variance Kurtosis -1.3400186 713.727 Corrected SS Coeff Variation 16.7334788 15.63772 Std Error Mean 0.88424318 Basic Statistical Measures Location Mean Variability 11.81600 Median 11.70000 Mode Std Deviation 1.97723 Variance Range 3.90943 4.64000 Interquartile Range 2.92000 Tests for Location: Mu0=0 Test Student's t -Statistic- -p Value -t 13.36284 Pr > |t| 0.0002 67 Sign M 2.5 Pr >= |M| 0.0625 Signed Rank S 7.5 Pr >= |S| 0.0625 Quantiles (Definition 5) Quantile Estimate 100% Max 14.55 99% 14.55 95% 14.55 90% 14.55 75% Q3 50% Median 25% Q1 12.92 11.70 10.00 10% 9.91 5% 9.91 1% 9.91 0% Min 9.91 The SAS System 02:05 Friday, September 4, 2021 35 The UNIVARIATE Procedure Variable: diffpq1pq2 Extreme Observations -Lowest Highest Value Obs Value 9.91 9.91 10.00 10.00 11.70 11.70 12.92 12.92 14.55 14.55 The SAS System Obs 02:05 Friday, September 4, 2021 36 68 Obs parameter pq1 pq2 1 65.69 52.65 58.72 45.24 64.21 48.18 67.24 50.24 58.54 47.50 78.24 68.33 80.05 65.50 77.24 67.24 82.56 70.86 10 85.24 72.32 11 64.85 53.40 12 62.50 52.24 13 58.61 50.50 14 55.37 57.00 15 65.56 62.00 The SAS System Obs parameter pq1 pq2 02:05 Friday, September 4, 2021 37 diffpq1pq2 64.85 53.40 11.45 62.50 52.24 10.26 3 58.61 50.50 8.11 55.37 57.00 -1.63 65.56 62.00 3.56 The SAS System 02:05 Friday, September 4, 2021 38 The UNIVARIATE Procedure Variable: diffpq1pq2 Moments N Mean 6.35 Std Deviation 5.3819188 Variance Skewness Uncorrected SS Sum Weights Sum Observations 31.75 28.96505 -0.8874132 Kurtosis -0.4973449 317.4727 Corrected SS Coeff Variation 84.7546268 Std Error Mean 69 115.8602 2.40686726 Basic Statistical Measures Location Mean Variability 6.350000 Median 8.110000 Mode Std Deviation 5.38192 Variance 28.96505 Range 13.08000 Interquartile Range 6.70000 Tests for Location: Mu0=0 Test -Statistic- -p Value Student's t Sign t 2.638284 M Signed Rank Pr > |t| 0.0577 1.5 Pr >= |M| 0.3750 S 6.5 Pr >= |S| 0.1250 Quantiles (Definition 5) Quantile Estimate 100% Max 11.45 99% 11.45 95% 11.45 90% 11.45 75% Q3 10.26 50% Median 25% Q1 8.11 3.56 10% -1.63 5% -1.63 1% -1.63 0% Min -1.63 The SAS System 02:05 Friday, September 4, 2021 39 70 The UNIVARIATE Procedure Variable: diffpq1pq2 Extreme Observations -Lowest Highest Value Obs Value -1.63 -1.63 3.56 3.56 8.11 8.11 10.26 10.26 11.45 11.45 Obs 71