Khóa luận tốt nghiệp nghiên cứu nhân giống vi thủy canh và in vitro cây lan kim tuyến (anoectochilus formosanus)

  HỌC VIỆN NÔNG NGHIỆP VIỆT NAM KHOA CÔNG NGHỆ SINH HỌC - - KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP ĐỀ TÀI: “NGHIÊN CỨU NHÂN GIỐNG VI THỦY CANH VÀ IN VITRO CÂY LAN KIM TUYẾN (ANOECTOCHILUS FORMOSANUS).” HÀ NỘI – 2021     HỌC VIỆN NÔNG NGHIỆP VIỆT NAM KHOA CÔNG NGHỆ SINH HỌC - - KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP ĐỀ TÀI: “NGHIÊN CỨU NHÂN GIỐNG VI THỦY CANH VÀ IN VITRO CÂY LAN KIM TUYẾN (ANOECTOCHILUS FORMOSANUS).” Sinh viên thực : MAI THỊ QUỲNH Lớp : K62CNSHB Mã SV : 620535 Giảng viên hướng dẫn : PGS TS ĐỒNG HUY GIỚI HÀ NỘI – 2021     LỜI CAM ĐOAN Tơi xin cam đoan khóa luận hồn tồn hồn thiện tìm tịi nghiên cứu khoa học thân hướng dẫn PGS.TS Đồng Huy Giới, khoa Công nghệ Sinh học, Học viện Nông Nghiệp Việt Nam Tôi xin cam đoan số liệu, hình ảnh, kết trình bày luận văn trung thực Các thông tin, tài liệu tham khảo luận văn ghi rõ nguồn gốc Tôi xin chịu trách nhiệm lời cam đoan trước hội đồng nhà trường Hà Nội, ngày 15 tháng 09 năm 2021 Sinh viên Mai Thị Quỳnh     i   LỜI CẢM ƠN Để hồn thành khóa luận này, cố gắng nỗ lực thân, em nhận nhiều quan tâm cá nhân tập thể, em xin gửi lời cảm ơn chân thành Lời em xin bày tỏ lịng biết ơn sâu sắc đến giảng viên PGS.TS Đồng Huy Giới – Bộ môn Sinh học – Khoa Công nghệ Sinh học – Học viện Nông nghiệp Việt Nam dành thời gian tâm huyết, tận tình giúp đỡ trực tiếp hướng dẫn em suốt q trình thực khóa luận tốt nghiệp Em xin chân thành cảm ơn thầy giáo, cô giáo Học viện Nơng nghiệp Việt Nam tận tình dạy bảo em suốt năm học qua Cuối em xin gửi tới gia đình, bạn bè, tập thể lớp K62CNSHB người phịng thí nghiệm lời cảm ơn tình cảm chân thành động viên giúp đỡ quý báu mà người dành cho em suốt thời gian qua Em xin chân thành cảm ơn! Hà Nội, ngày 15 tháng 09 năm 2021 Sinh viên Mai Thị Quỳnh   ii   MỤC LỤC LỜI CAM ĐOAN i LỜI CẢM ƠN ii MỤC LỤC iii DANH MỤC CHỮ VIẾT TẮT v DANH MỤC BẢNG vi DANH MỤC HÌNH vi TÓM TẮT vii PHẦN I: MỞ ĐẦU 1.1 Đặt vấn đề 1.2 Mục đích yêu cầu 1.2.1 Mục đích 1.2.2 Yêu cầu PHẦN II: TỔNG QUAN TÀI LIỆU 2.1 Giới thiệu lan Kim Tuyến 2.1.1 Phân loại 2.1.2 Đặc điểm thực vật học 2.2 Thực trạng khai thác nhân giống lan Kim Tuyến 2.2.1 Thực trạng khai thác Việt nam 2.2.2 Nhân giống lan Kim Tuyến 2.3 Các nghiên cứu lan Kim tuyến 10 2.3.1 Tình hình nghiên cứu lan Kim tuyến Việt Nam 10 2.3.2 Tình hình nghiên cứu lan Kim tuyến giới 11 PHẦN III: VẬT LIỆU, NỘI DUNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 15 3.1 Đối tượng, vật liệu, thời gian, địa điểm, môi trường nghiên cứu 15 3.1.1 Đối tượng, vật liệu nghiên cứu 15 3.1.2 Địa điểm thời gian nghiên cứu 15 3.1.3 Môi trường nuôi cấy 16   iii   3.2 Nội dung phương pháp nghiên cứu 16 3.2.1 Nội dung nghiên cứu 16 3.2.2 Phương pháp nghiên cứu: 16 PHẦN IV: KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 22 4.1 Ảnh hưởng BAP đến nhân nhanh chồi lan Kim Tuyến in vitro vi thuỷ canh 22 4.2 Ảnh hưởng nồng độ BA kết hợp với Kinetin đến nhân nhanh chồi lan Kim Tuyến in vitro vi thuỷ canh 24 4.3 Ảnh hưởng nồng độ α- NAA đến tạo rễ chồi lan Kim Tuyến in vitro vi thủy canh 27 4.4 Ảnh hưởng tổ hợp α - NAA, than hoạt tính nano bạc đến tạo rễ chồi lan Kim Tuyến in vitro vi thủy canh 29 4.5 Đánh giá khả sinh trưởng lan Kim Tuyến in vitro vi thủy canh vườn ươm sau tuần 31 PHẦN V: KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ 34 5.1 Kết luận 34 5.2 Kiến nghị 34 TÀI LIỆU THAM KHẢO 35 PHỤ LỤC 37     iv   DANH MỤC CHỮ VIẾT TẮT STT Viết tắt Viết đầy đủ BA Benzyl adenin CT Công thức CV% ĐC LSD 0,05 MS NXB α - NAA NS 10 THT 11 Cs Sai số thí nghiệm Đối chứng Độ lệch tiêu chuẩn mức ý nghĩa 5% Môi trường Murashige and Skoog - 1962 Nhà xuất α – Napthalene acetic acid Nano Sliver Than hoạt tính Cộng     v   DANH MỤC BẢNG Bảng Ảnh hưởng nồng độ BA đến nhân nhanh chồi lan Kim Tuyến in vitro vi thuỷ canh sau tuần nuôi cấy 22 Bảng Ảnh hưởng Kinetin kết hợp với BA đến khả tạo chồi lan Kim Tuyến in vitro vi thủy canh sau tuần nuôi cấy 25 Bảng Ảnh hưởng α - NAA đến tạo rễ chồi lan Kim Tuyến in vitro vi thủy canh sau tuần nuôi cấy 27 Bảng 4 Ảnh hưởng tổ hợp có 1mg/L α - NAA, than hoạt tính nano bạc đến tạo rễ chồi lan Kim Tuyến in vitro vi thủy canh 30 Bảng Khả sinh trưởng lan Kim Tuyến in vitro vi thủy canh vườn ươm sau tuần 32   vi   DANH MỤC HÌNH Hình 2.1 Ảnh lan Kim Tuyến tự nhiên (Anoectochilus formosanus) Hình 2.2 Ảnh hoa lan Kim Tuyến (Anoectochilus formosanus) Hình 4.1 cụm chồi lan Kim Tuyến môi trường MS BA in vitro vi thủy canh (VTC) ) sau tuần ni cấy 24 Hình 4.2 cụm chồi lan Kim Tuyến môi trường MS, Kinetin có 1,5 mg/l BA in vitro vi thủy canh (VTC) ) sau tuần nuôi cấy 26 Hình 4.3 Chồi lan Kim Tuyến mơi trường MS α – NAA in vitro vi thủy canh (VTC) 29 Hình 4.4 Cụm chồi lan Kim Tuyến mơi trường MS, có 1mg/L α – NAA, than hoạt tính (THT) nano bạc ( NS) in vitro vi thủy canh (VTC) 31    vii   TÓM TẮT Lan Kim Tuyến loại địa lan, tìm thấy Phân họ Orchidoideae, khoảng 35 chi khoảng 450 lồi Loại địa lan có hoa nhỏ mầu sắc vân đa dạng, đẹp Các loài Lan Kim Tuyến quý Lồi cho giá trị cao giới sinh vật cảnh, loài Anoectochilus albo-lineatus Par.et Rchb.f tiếng, có hình ảnh tất tạp chí cảnh Lồi có giá trị cao lĩnh vực y học, Anoectochilus formosanus hay Anoectochilus roxburghii Nhưng số lượng ít, mọc rải rác bị khai thác mức (với hình thức khai thác tận diệt) nên lan Kim tuyến tự nhiên có nguy bị tuyệt chủng Bên cạnh nghiên cứu nhân giống vi thủy canh in vitro lan Kim Tuyến cách tốt để góp phần vào cơng tác bảo tồn lồi lan rừng Việt Nam hướng đến việc nhân nhanh phục vụ cho thương mại hóa lồi hoa đẹp có giá trị kinh tế cao   viii   offcinarum L.) xác định mơi trường bổ sung 4ppm thích hợp Và kết theo giống với công bố tác giả Nguyễn Thị Kim Yến Cộng sự, 2013 nghiên cứu ảnh hưởng than hoạt tính ni cấy thống khí lên khả sinh trưởng phát triển hoa Đồng Tiền (Gerbera jamesonii) in vitro ex vitro, xác định bổ sung 1g/l than hoạt tính tốt mg/L THT + mg/L NS In vitro mg/L THT + mg/L NS VTC mg/L THT + mg/L NS In vitro mg/L THT + mg/L NS In vitro mg/L THT + mg/L NS VTC mg/L THT + mg/L NS VTC mg/L THT + mg/L NS In vitro mg/L THT + mg/L NS VTC Hình 4.4 Cụm chồi lan Kim Tuyến mơi trường MS, có 1mg/L α – NAA, than hoạt tính (THT) nano bạc ( NS) in vitro vi thủy canh (VTC) 4.5 Đánh giá khả sinh trưởng lan Kim Tuyến in vitro vi thủy canh vườn ươm sau tuần Mẫu lan Kim Tuyến in vitro vi thủy canh thí nghiệm trồng giá thể xơ dừa Kết sau tuần quan sát bảng sau:   31   Bảng Khả sinh trưởng lan Kim Tuyến in vitro vi thủy canh ngồi vườn ươm sau tuần Ni cấy In vitro VTC Công thức Nồng Nồng Nồng độ độ độ NS NAA THT (ppm) (mg/l) (g/l) Tỉ lệ mẫu sống (%) Chiều cao (cm) Đặc điểm CT1 0 90c 4,49c CT2 1 95b 4,62b Cây màu xanh trắng, yếu, héo Cây màu xanh trắng, yếu, héo CT3 95b 4,59b Cây màu xanh vàng, héo CT4 1 91c 4,87a CT5 0 100a 4,23e CT6 1 100a 4,33d CT7 100a 4,4c CT8 1 100a 4,56b Cây màu xanh vàng Cây màu xanh đậm, điểm nâu, khỏe Cây màu xanh đậm, xanh nâu nhạt, khỏe Cây màu xanh đậm, xanh nâu khỏe Cây màu xanh đậm, xanh nâu khỏe LSD 2,1 0,1 0,05% CV% 1,5 2,4 Chú thích: Các chữ khác a, b, c,… cột thể sai khác có ý nghĩa mức α = 0,05 Qua bảng ta thấy, tiêu chiều cao khơng có sai khác, không lớn Cây nuôi cấy vi thủy canh cho khả tuyệt đối 100% Cây in vitro cho khả với tỉ lệ cao 90-95% Nguyên nhân vi thủy canh nuôi môi trường nghèo dinh dưỡng nên rễ khỏe mạnh, dễ dàng thích nghi ni mơi trường bên ngồi so với in vitro nuôi bịch Sau 14 ngày cây, có nguồn gốc vi thủy canh thích nghi tốt nhiều so với có nguồn gốc in vitro Điều khẳng định qua số công bố gần Nhut cộng (2006), Hoàng Thanh Tùng cộng (2015) Kết cho thấy, nuôi cấy vi thủy canh cho tỉ lệ mẫu sống tuyệt đối cao ni cấy in vitro ni cấy vi thủy canh gần với điều kiện tự nhiên nên việc dưỡng   32   vườn ươm thuận lợi giai đoạn sau vườn ươm, thích ứng với môi trường CT1 CT2 CT3 CT4 CT5 CT6 CT7 CT8 Hình 4.6 Cây lan Kim Tuyến in vitro vi thủy canh ngồi vườn ươm Chú thích: CT1, CT2, CT3, CT4 - Cây in vitro CT5, CT6, CT7, CT8- Cây vi thủy canh   33   PHẦN V: KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ 5.1 Kết luận Từ kết bước đầu thu rút số kết luận sau: 1) Mơi trường ½ MS + 1,5 mg/L BAP cho phát sinh cụm chồi tốt với tỉ lệ lên mẫu bật chồi in vitro vi thủy canh là: 95,42% 97,08% 2) Mơi trường ½ MS + 1,5 mg/L BAP + 0,5 mg/L Kinetin tối ưu cho nhân nhanh chồi lan Kim Tuyến với tỉ lệ mẫu bật chồi vi thủy canh in vitro đạt 100%; với hệ số nhân chồi 3,21 lần, chiều cao chồi 3,63 cm điều kiện in vitro hệ số nhân chồi 2,86 lần, chiều cao chồi 2,88 cm điều kiện vi thủy canh 3) Mơi trường ½ MS + mg/L α-NAA + mg/L THT + ppm NS tốt cho tạo rễ với 5,08 rễ điều kiện in vitro 3,49 rễ điều kiện vi thủy canh 4) Khi vườn ươm giá thể xơ dừa, 100% mẫu vi thủy canh sống, có mầu xanh nâu đặc trưng giống, khỏe; 90 -95% in vitro sống, yếu, xanh nhạt vàng, yếu có biểu héo 5.2 Kiến nghị 1) Tiếp tục nghiên cứu ảnh hưởng chất điều tiết sinh trưởng khác lan Kim Tuyến in vitro vi thủy canh để hoàn thiện quy trình nhân giống 2) Mở rộng để đưa sản xuất quy mô công nghiệp nhằm sản xuất số lượng lớn nhằm bảo vệ nguồn dược liệu quý đáp ứng nhu cầu sử dụng lan Kim Tuyến (A Formosanus)   34   TÀI LIỆU THAM KHẢO Tài liệu nước Nguyễn Tiến Bân (2005), Danh mục loài thực vật Việt Nam, Tập 3, Nxb Nơng nghiệp, Hà Nội Hồng Thanh Tùng, Trương Thị Bích Phượng, Dương Tấn Nhựt (2015), hệ thống vi thủy canh nhân giống Cúc Trắng (Chrysanthemum Morifolium), Tạp chí Cơng nghệ Sinh học, 13(4), tr 1127-1137 Đồng Huy Giới, Bùi Thị Thu Hương (2019) “Nghiên cứu sử dụng nano nhân giống in vitro lan Hồ Điệp Vàng” Tạp chí khoa học cơng nghệ Lâm nghiệp số năm 2019 Tạp chí “Sinh học thực vật tổng hợp Trung Quốc”, tập 48 số 3, tháng 3/2006, trang 359-363 Nguyễn Thị Quỳnh cs (2005), “Nghiên cứu ảnh hưởng yếu tố môi trường lên tăng trưởng số thân gỗ nhiệt đới cận nhiệt đới điều kiện nuôi cấy in vitro”, Hội nghị tổng kết NCCB KHTN, tr 42-44 Vũ Văn Vụ (1994), Sinh lý học thực vật,Nhà xuất Khoa học – kỹ thuật, Hà Nội, tr 182-237 Lê Thị Kim Đào (2001) “Nghiên cứu thử nghiệm nhân số giống trồng rừng phương pháp nuôi cấy mô (Bạch đàn, Hơng, Giổi xanh, Trầm hương)”, Tạp chí sinh học, 23, 3, tr.46-50 Phùng Văn Phê, Nguyễn Thị Hồng Gấm, Nguyễn Trung Thành, Nghiên cứu kỹ thuật nhân nhanh chồi In vitro loài Lan Kim tuyến (Anoectochilus roxburghii (Wall.) Lindl)”, Tạp chí Khoa học ĐHQGHN, 26(4), 248-253, 2010 Năm 2012, Nguyễn Quang Thạch, Phí Thị Cẩm Miện “Nghiên cứu kĩ thuật nhân giống loài lan Kim Tuyến (Anoectochilus setaceus Blume), in vitro bảo tồn nguồn dược liệu quý”, Tạp chí Khoa học Phát triển, tập 10, số 4, tr597-603 10 Nguyễn Đức Tuấn cộng năm 2017 – Nghiên cứu nhân giống in vitro lan Hoàng Thảo Kèn (Dendrobium Lituiflorum) 11 Nguyễn Văn Kết, Nguyễn Văn Vinh năm 2010 – Nghiên cứu khả nhân giống loài lan Hoàng Thảo Sáp (Dendrobium crepidatum Lindl, & Paxt,) 12.Nguyễn Thị Sơn, Từ Bích Thủy, Đặng Thị Nhàn, Nguyễn Thị Lý Anh, Hoàng Thị Nga, Nguyễn Quang Thạch (2014), nhân giống in vitro Lan   35   Dendrobium officinale Kimura set migo (Thạch Hộc Thiết Bì) Tạp chí khoa học phát triển S.8(12), tr.1274-1282 13 Đồng Huy Giới (2017), Nghiên cứu sử dụng chế phẩm nano ni cấy mơ Mía (Saccharum offcinarum L.) Tạp chí khoa học Công nghệ Nông nghiệp Việt Nam, 6(79), tr 35-40 14 Nguyễn Thị Kim Yến cs (2013), Ảnh hưởng than hoạt tính ni cấy thống khí lên khả sinh trưởng phát triển hoa Đồng Tiền (Gerbera jamesonii) in vitro ex vitro, Tạp chí khoa học Cơng nghệ, 4:427434 Tài liệu nước Ganganrasad A, Latha PG, Seeni S (2000), “Micropropagation of terrestrial, orchids, Anoectochilus sikkimensis and Anoectochilus regalis”, Indian J Exp Biol, 38(2), pp 149-154 Hahn EJ, Bea JH, Lee YB (2000) Growth and photosynthetic characteristics of Chrysanthemum plantlets as assected by pH and EC of nutrient solution in microponic culture JK Soci Hort Sci 41(1): 12-15 Yih-Juh Shiau, Abhay P sagare, Uei – Chin Chen, Shu – Ru Yang, and Hsin – Sheng Tsay (2001), “Biomass production of Anoectochilus formoshnus hayata in a bioreactor system”, Journal of Plant biology, 50(5), pp 573 576 N.V Ket, E.J Hahn, S.Y Park, D Chakrabarty and K.Y Paek, 2004 “Micropropagation of an endangered orchid Anoectochilus formosanus”, Biologia Plantarum 48(3), pp 339 – 344 XF Xu (2008), Study On Mass Propagation Of Seeding And Culture Of Anoectochilus, Masters of Agricultural Sciences, Agricultural extension, China Zhang F, Guo S (2009), “Appication of SPSS orthogonal design in tissue culture of Anoectochilus roxburghii”, Zhongguo Zhong Yao Za Zhi Zhou Yumei, Chen Li, Cui YongYi, Paek KeeYoeup (2009), “Construction of rapid propagation System for Anoectochilus formosanus”, Journal of Northeast Sorestry University, 37(12), pp 43-47 Qiu Yue, Gong, Ning, Zang KuiYi (2010), “Seed germination and the protocorm multipliktion of Anoectochilus roxburghii”, Guihaia, 2010-04, pp.555-559 N Hameed et al (2006) In vitro micropagation of disease free rose (Rosa indica L.) Mycopath, (2): 35-38     36   PHỤ LỤC TN1: ANH HUONG CUA NONG ĐO BAP ĐEN SU NHAN NHANH CHOI LAN KIM TUYEN IN VITRO VA VI THUY CANH BALANCED ANOVA FOR VARIATE HSNC FILE X1 2/ 7/21 15: :PAGE anh huong BAP VARIATE V004 HSNC LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= BA 8.07775 2.01944 185.07 0.000 CT$ 678003 678003 62.14 0.000 NL 452666E-02 226333E-02 0.21 0.816 BA*CT$ 844047 211012 19.34 0.000 * RESIDUAL 18 196408 109116E-01 * TOTAL (CORRECTED) 29 9.80074 337956 BALANCED ANOVA FOR VARIATE CCC FILE X1 2/ 7/21 15: :PAGE anh huong BAP VARIATE V005 CCC LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= BA 2.90879 727197 14.90 0.000 CT$ 417720 417720 8.56 0.009 NL 573800E-01 286900E-01 0.59 0.571 BA*CT$ 153347 383367E-01 0.79 0.551 * RESIDUAL 18 878687 488159E-01 * TOTAL (CORRECTED) 29 4.41592 152273 BALANCED ANOVA FOR VARIATE TLCTS FILE X1 2/ 7/21 15: :PAGE anh huong BAP VARIATE V006 TLCTS LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= BA 17960.4 4490.11 524.36 0.000 CT$ 45.3133 45.3133 5.29 0.032 NL 29.9630 14.9815 1.75 0.201 BA*CT$ 121.164 30.2909 3.54 0.027 * RESIDUAL 18 154.136 8.56310 * TOTAL (CORRECTED) 29 18311.0 631.414 TABLE OF MEANS FOR FACTORIAL EFFECTS FILE X1 2/ 7/21 15: :PAGE anh huong BAP MEANS FOR EFFECT BA BA   NOS 6 6 HSNC 1.01167 1.80667 2.12167 2.60667 1.91500 CCC 1.01833 1.07167 1.27167 1.88333 1.18500 37 TLMBC 26.1717 55.8267 83.5117 95.0217 79.1733   SE(N= 6) 0.426450E-01 0.901997E-01 1.19465 5%LSD 18DF 0.126704 0.267997 3.54947 MEANS FOR EFFECT CT$ CT$ NOS 15 15 I V HSNC 2.04267 1.74200 CCC 1.40400 1.16800 TLCTS 69.1700 66.7120 SE(N= 15) 0.269710E-01 0.570473E-01 0.755562 5%LSD 18DF 0.801349E-01 0.169496 2.24488 MEANS FOR EFFECT NL NL NOS 10 10 10 HSNC 1.87500 1.90000 1.90200 CCC 1.32900 1.22600 1.30300 TLCTS 68.0550 66.6640 69.1040 SE(N= 10) 0.330326E-01 0.698684E-01 0.925370 5%LSD 18DF 0.981448E-01 0.207589 2.74941 MEANS FOR EFFECT BA*CT$ BA 1 2 3 4 5 CT$ I V I V I V I V I V NOS 3 3 3 3 3 HSNC 1.04000 0.983333 1.89333 1.72000 2.23667 2.00667 3.08667 2.12667 1.95667 1.87333 CCC 1.06667 0.970000 1.09333 1.05000 1.41000 1.13333 2.06000 1.70667 1.39000 0.980000 TLMBC 26.8300 25.5133 55.0833 56.5700 84.2333 82.7900 95.4233 94.6200 84.2800 74.0667 SE(N= 3) 0.603091E-01 0.127562 1.68949 5%LSD 18DF 0.179187 0.379004 5.01971 ANALYSIS OF VARIANCE SUMMARY TABLE FILE X1 2/ 7/21 15: :PAGE anh huong BAP F-PROBABLIITY VALUES FOR EACH EFFECT IN THE MODEL SECTION - VARIATE HSNC CCC TLMBC   GRAND MEAN (N= 30) NO OBS 30 1.8923 30 1.2860 30 67.941 STANDARD DEVIATION C OF V |BA SD/MEAN | BASED ON BASED ON % | TOTAL SS RESID SS | 0.58134 0.10446 5.5 0.0000 0.39022 0.22094 1.7 0.0000 25.128 2.9263 4.3 0.0000 38 |CT$ | | | 0.0000 0.0088 0.0321 |NL | | | 0.8163 0.5706 0.2009 |BA*CT$ | | | 0.0000 0.5514 0.0267 | | | |   TN2: ANH HUONG CUA NONG ĐO BAP VA KINETIN ĐEN SU NHAN NHANH CHOI LAN KIM TUYEN IN VITRO VA VI THUY CANH BALANCED ANOVA FOR VARIATE HSNC FILE X2 2/ 7/21 15:23 :PAGE anh huong BAP va Kinetin VARIATE V004 HSNC LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= KI 13.3344 2.66689 154.35 0.000 CT$ 1.07814 1.07814 62.40 0.000 NL 390722E-01 195361E-01 1.13 0.342 KI*CT$ 267047 534094E-01 3.09 0.029 * RESIDUAL 22 380128 172786E-01 * TOTAL (CORRECTED) 35 15.0988 431395 BALANCED ANOVA FOR VARIATE CCC FILE X2 2/ 7/21 15:23 :PAGE anh huong BAP va Kinetin VARIATE V005 CCC LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= KI 6.67636 1.33527 171.44 0.000 CT$ 1.03700 1.03700 133.14 0.000 NL 304999E-02 152500E-02 0.20 0.825 KI*CT$ 667514 133503 17.14 0.000 * RESIDUAL 22 171351 778867E-02 * TOTAL (CORRECTED) 35 8.55527 244436 BALANCED ANOVA FOR VARIATE TLMBC FILE X2 2/ 7/21 15:23 :PAGE anh huong BAP va Kinetin VARIATE V006 TLMBC LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= KI 19849.9 3969.99 ****** 0.000 CT$ 249.114 249.114 99.39 0.000 NL 186665 933325E-01 0.04 0.964 KI*CT$ 88.6347 17.7269 7.07 0.000 * RESIDUAL 22 55.1425 2.50648 * TOTAL (CORRECTED) 35 20243.0 578.372 TABLE OF MEANS FOR FACTORIAL EFFECTS FILE X2 2/ 7/21 15:23 :PAGE anh huong BAP va Kinetin MEANS FOR EFFECT KI KI NOS 6 6 6 HSNC 1.08333 2.00500 2.36833 3.03333 2.18500 1.60333 CCC 2.09333 2.04500 2.44167 3.25167 2.14667 2.04667 TLMBC 28.1667 55.6000 88.1667 100.000 80.5667 74.0500 SE(N= 6) 0.536634E-01 0.360293E-01 0.646333 5%LSD 22DF 0.157386 0.105668 1.89560 MEANS FOR EFFECT CT$   39   CT$ NOS 18 18 I V HSNC 2.21944 1.87333 CCC 2.50722 2.16778 TLMBC 73.7222 68.4611 SE(N= 18) 0.309826E-01 0.208015E-01 0.373161 5%LSD 22DF 0.908671E-01 0.610077E-01 1.09442 MEANS FOR EFFECT NL NL NOS 12 12 12 HSNC 2.00000 2.06583 2.07333 CCC 2.33833 2.32583 2.34833 TLMBC 71.1917 71.0583 71.0250 SE(N= 12) 0.379457E-01 0.254766E-01 0.457027 5%LSD 22DF 0.111289 0.747189E-01 1.34039 MEANS FOR EFFECT KI*CT$ KI 1 2 3 4 5 6 CT$ I V I V I V I V I V I V NOS 3 3 3 3 3 3 HSNC 1.15000 1.01667 2.15667 1.85333 2.50667 2.23000 3.20667 2.86000 2.34333 2.02667 1.95333 1.25333 CCC 2.17333 2.01333 2.26667 1.82333 2.73333 2.15000 3.62667 2.87667 2.20000 2.09333 2.04333 2.05000 TLMBC 30.8333 25.5000 59.9333 51.2667 90.5000 85.8333 100.000 100.000 85.2333 75.9000 75.8333 72.2667 SE(N= 3) 0.758915E-01 0.509531E-01 0.914053 5%LSD 22DF 0.222578 0.149438 2.68078 ANALYSIS OF VARIANCE SUMMARY TABLE FILE X2 2/ 7/21 15:23 :PAGE anh huong BAP va Kinetin F-PROBABLIITY VALUES FOR EACH EFFECT IN THE MODEL SECTION - VARIATE HSNC CCC TLMBC   GRAND MEAN (N= 36) NO OBS 36 2.0464 36 2.3375 36 71.092 STANDARD DEVIATION C OF V |KI SD/MEAN | BASED ON BASED ON % | TOTAL SS RESID SS | 0.65681 0.13145 6.4 0.0000 0.49441 0.88253E-01 3.8 0.0000 24.049 1.5832 2.2 0.0000 40 |CT$ | | | 0.0000 0.0000 0.0000 |NL | | | 0.3418 0.8251 0.9637 |KI*CT$ | | | 0.0290 0.0000 0.0005 | | | |   TN3: ANH HUONG CUA NONG ĐO NAA DEN SU TAO RE CHOI LAN KIM TUYEN IN VITRO VA VI THUY CANH BALANCED ANOVA FOR VARIATE SR/C FILE X4 2/ 7/21 15:27 :PAGE anh huong NAA VARIATE V004 SR/C LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= NAA 6.26628 2.08876 260.92 0.000 CT$ 331350 331350 41.39 0.000 NL 585833E-02 292917E-02 0.37 0.704 NAA*CT$ 141817 472722E-01 5.91 0.008 * RESIDUAL 14 112076 800543E-02 * TOTAL (CORRECTED) 23 6.85738 298147 BALANCED ANOVA FOR VARIATE CCR FILE X4 2/ 7/21 15:27 :PAGE anh huong NAA VARIATE V005 CCR LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= NAA 2.22225 740749 84.60 0.000 CT$ 1.59650 1.59650 182.35 0.000 NL 902500E-02 451250E-02 0.52 0.613 NAA*CT$ 401312 133771 15.28 0.000 * RESIDUAL 14 122576 875540E-02 * TOTAL (CORRECTED) 23 4.35166 189203 BALANCED ANOVA FOR VARIATE TLMRR FILE X4 2/ 7/21 15:27 :PAGE anh huong NAA VARIATE V006 TLMRR LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= NAA 16838.9 5612.97 ****** 0.000 CT$ 249.228 249.228 190.07 0.000 NL 280000 140000 0.11 0.899 NAA*CT$ 86.9796 28.9932 22.11 0.000 * RESIDUAL 14 18.3577 1.31126 * TOTAL (CORRECTED) 23 17193.8 747.555 TABLE OF MEANS FOR FACTORIAL EFFECTS FILE X4 2/ 7/21 15:27 :PAGE anh huong NAA MEANS FOR EFFECT NAA NAA NOS 6 6 SR/C 1.10000 1.91833 2.49167 2.13333 CCR 0.868333 1.13000 1.66667 1.45000 TLMRR 29.3433 76.3767 100.000 85.6600 SE(N= 6) 0.365272E-01 0.381999E-01 0.467487 5%LSD 14DF 0.110795 0.115869 1.41799 MEANS FOR EFFECT CT$ -   41   CT$ NOS 12 12 I V SR/C 2.02833 1.79333 CCR 1.53667 1.02083 TLMRR 76.0675 69.6225 SE(N= 12) 0.258287E-01 0.270114E-01 0.330563 5%LSD 14DF 0.783440E-01 0.819316E-01 1.00267 MEANS FOR EFFECT NL NL NOS 8 SR/C 1.92250 1.92125 1.88875 CCR 1.27250 1.30500 1.25875 TLMRR 72.9950 72.7450 72.7950 SE(N= 8) 0.316335E-01 0.330821E-01 0.404855 5%LSD 14DF 0.959515E-01 0.100345 1.22802 MEANS FOR EFFECT NAA*CT$ NAA 1 2 3 4 CT$ I V I V I V I V NOS 3 3 3 3 SR/C 1.17667 1.02333 1.93667 1.90000 2.71333 2.27000 2.28667 1.98000 CCR 1.04333 0.693333 1.22000 1.04000 2.03667 1.29667 1.84667 1.05333 TLMRR 33.0300 25.6567 80.7633 71.9900 100.000 100.000 90.4767 80.8433 SE(N= 3) 0.516573E-01 0.540228E-01 0.661126 5%LSD 14DF 0.156688 0.163863 2.00534 ANALYSIS OF VARIANCE SUMMARY TABLE FILE X4 2/ 7/21 15:27 :PAGE anh huong NAA F-PROBABLIITY VALUES FOR EACH EFFECT IN THE MODEL SECTION - VARIATE SR/C CCR TLMRR   GRAND MEAN (N= 24) NO OBS 24 1.9108 24 1.2788 24 72.845 STANDARD DEVIATION C OF V |NAA SD/MEAN | BASED ON BASED ON % | TOTAL SS RESID SS | 0.54603 0.89473E-01 4.7 0.0000 0.43497 0.93570E-01 7.3 0.0000 27.341 1.1451 1.6 0.0000 42 |CT$ | | | 0.0000 0.0000 0.0000 |NL | | | 0.7041 0.6128 0.8991 |NAA*CT$ | | | 0.0081 0.0001 0.0000 | | | |   TN4: ANH HUONG CUA NONG ĐO NAA, THAN HOAT TINH VA NANO BAC ĐEN SU TAO RE CHOI LAN KIM TUYEN IN VITRO VA VI THUY CANH SINGLE EFFECT ANOVA FOR UNBALANCED DATA FILE DD 24/ 8/21 14:18 :PAGE tn4 ANOVA FOR SINGLE EFFECT - NSTHT -VARIATE TREATMENT MS - DF RESIDUAL MS - DF F-RATIO F-PROB SR 7.6899 0.52173 20 14.74 0.000 CDR 0.10252 0.31611E-01 20 3.24 0.043 ANOVA FOR SINGLE EFFECT - CT$ -VARIATE TREATMENT MS - DF RESIDUAL MS - DF F-RATIO F-PROB SR 1.6414 11 1.2874 12 1.28 0.340 CDR 0.57155E-01 11 0.25921E-01 12 2.20 0.095 ANOVA FOR SINGLE EFFECT - NL -VARIATE TREATMENT MS - DF RESIDUAL MS - DF F-RATIO F-PROB SR 0.18713E-01 1.5937 21 0.01 0.989 CDR 0.45125E-02 0.44321E-01 21 0.10 0.903 ANOVA FOR SINGLE EFFECT - NSTHT*CT$ -VARIATE TREATMENT MS - DF RESIDUAL MS - DF F-RATIO F-PROB SR 1.5948 21 0.65022E-02 245.28 0.004 CDR 0.44060E-01 21 0.72500E-02 6.08 0.150 TABLE OF MEANS FOR FACTORIAL EFFECTS FILE DD 24/ 8/21 14:18 :PAGE tn4 MEANS FOR EFFECT NSTHT NSTHT NOS 6 6 SR 1.71500 3.17500 2.23167 4.28833 CDR 1.43833 1.55000 1.49667 1.74000 SE(N= 6) 0.294882 0.725842E-01 5%LSD 20DF 0.869894 0.214121 MEANS FOR EFFECT CT$ CT$ NOS SR CDR I NSTHT SR CDR   CT$ I V NO OBS 24 2.8525 24 1.5563 NOS SR | |$ | BASED ON BASED ON TOTAL SS RESID SS 1.2069 1.2624 0.20214 0.21053 43 CDR C OF V |VU % | | | | 4.3 0.0000 0.3401 3.5 0.0432 0.0950 | | 0.9892 0.9032 | | 0.0035 0.1499 | |   THI NGHIEM 5: ĐANH GIA KHA NANG SINH TRUONG CAY LAN KIM TUYEN IN VITRO VA VI THUY CANH NGOAI VUON UOM BALANCED ANOVA FOR VARIATE TLMS FILE VUONUOM 23/ 8/21 18:25 :PAGE thi nghiem VARIATE V004 TLMS LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= VU 26.2605 8.75349 4.29 0.022 CT$ 317.335 317.335 155.53 0.000 NL 1.55927 779636 0.38 0.693 CT$*NL 1.55927 779636 0.38 0.693 * RESIDUAL 15 30.6051 2.04034 * TOTAL (CORRECTED) 23 377.320 16.4052 BALANCED ANOVA FOR VARIATE CCC FILE VUONUOM 23/ 8/21 18:25 :PAGE thi nghiem VARIATE V005 CCC LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= VU 389079 129693 11.23 0.000 CT$ 418704 418704 36.26 0.000 NL 220750E-01 110375E-01 0.96 0.409 CT$*NL 833333E-05 416666E-05 0.00 1.000 * RESIDUAL 15 173196 115464E-01 * TOTAL (CORRECTED) 23 1.00306 436114E-01 TABLE OF MEANS FOR FACTORIAL EFFECTS FILE VUONUOM 23/ 8/21 18:25 :PAGE thi nghiem MEANS FOR EFFECT VU VU NOS 6 6 TLMS 95.2233 97.3933 97.4217 95.4167 CCC 4.35833 4.47833 4.49667 4.71167 SE(N= 6) 0.583144 0.438680E-01 5%LSD 15DF 1.75780 0.132234 MEANS FOR EFFECT CT$ CT$ I V NOS 12 12 TLMS 92.7275 100.000 CCC 4.64333 4.37917 SE(N= 12) 0.412345 0.310193E-01 5%LSD 15DF 1.24295 0.935032E-01 MEANS FOR EFFECT NL   44   NL NOS 8 TLMS 96.2250 96.7213 96.1450 CCC 4.55375 4.49500 4.48500 SE(N= 8) 0.505018 0.379908E-01 5%LSD 15DF 1.52230 0.114518 MEANS FOR EFFECT CT$*NL CT$ I I I V V V NL 3 NOS 4 4 4 TLMS 92.4500 93.4425 92.2900 100.000 100.000 100.000 CCC 4.68500 4.62750 4.61750 4.42250 4.36250 4.35250 SE(N= 4) 0.714203 0.537271E-01 5%LSD 15DF 2.15286 0.161952 ANALYSIS OF VARIANCE SUMMARY TABLE FILE VUONUOM 23/ 8/21 18:25 :PAGE thi nghiem F-PROBABLIITY VALUES FOR EACH EFFECT IN THE MODEL SECTION - VARIATE TLMS CCC   GRAND MEAN (N= 24) NO OBS 24 96.364 24 4.5112 STANDARD DEVIATION C OF V |VU SD/MEAN | BASED ON BASED ON % | TOTAL SS RESID SS | 4.0503 1.4284 1.5 0.0224 0.20883 0.10745 2.4 0.0004 45 |CT$ | | | 0.0000 0.0000 |NL | | | 0.6932 0.4089 |CT$*NL | | | 0.6932 0.9996 | | | |