Khóa luận tốt nghiệp nghiên cứu đặc điểm sinh học và đánh giá hiệu lực phòng trừ ruồi đục trái bactrocera sp gây hại quả vú sữa của nấm paecilomyces

HỌC VIỆN NÔNG NGHIỆP VIỆT NAM KHOA CÔNG NGHỆ SINH HỌC - KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP ĐỀ TÀI: “NGHIÊN CỨU ĐẶC ĐIỂM SINH HỌC VÀ ĐÁNH GIÁ HIỆU LỰC PHÒNG TRỪ RUỒI ĐỤC TRÁI Bactrocera sp GÂY HẠI QUẢ VÚ SỮA CỦA NẤM Paecilomyces” Sinh viên thực : NGUYỄN THỊ TÚ UN Khóa : 62 Ngành : CƠNG NGHỆ SINH HỌC Giảng viên hướng dẫn : TS NGUYỄN ĐỨC THÀNH TS NGUYỄN THỊ LÂM HẢI HÀ NỘI – NĂM 2021 LỜI CAM ĐOAN Tôi xin cam đoan kết nghiên cứu trình bày khóa luận trung thực, khách quan chưa dùng bảo vệ để lấy học vị Tôi xin cam đoan giúp đỡ cho việc thực khóa luận cảm ơn, thơng tin trích dẫn khóa luận rõ nguồn gốc Hà Nội, ngày 05 tháng 10 năm 2021 Sinh viên Nguyễn Thị Tú Uyên i LỜI CẢM ƠN Để hồn thành khóa luận này, xin gửi lời cảm ơn đến đến thầy cô khoa Công nghệ sinh học, quý thầy Cô Học viện nông nghiệp Việt Nam tao hội cho học tập, rèn luyện tích lũy kiến thức, kỹ để thực khóa luận Đặc biệt, xin chân thành cảm ơn sâu sắc đến TS Nguyễn Đức Thành TS Nguyễn Thị Lâm Hải tận tình dẫn, theo dõi đưa lời khun bổ ích giúp tơi giải vấn đề gặp phải trình thực đề tài hồn thành khóa luận Tơi xin gửi lời cảm ơn chân thành tới Ban Giám đốc Viện Di truyền Nông nghiệp, Bộ môn Công nghệ Vi sinh - Viện Di truyền Nông nghiệp nhiệt tình giúp đỡ tạo điều kiện thuận lợi cho suốt thời gian thực đề tài Cuối cùng, tơi xin bày tỏ lịng biết ơn chân thành tới tất người thân, bạn bè người bên cạnh động viên giúp đỡ trình học tập thực đề tài Hà Nội, ngày 05 tháng 10 năm 2021 Sinh viên Nguyễn Thị Tú Uyên ii MỤC LỤC   LỜI CAM ĐOAN i LỜI CẢM ƠN ii MỤC LỤC iii DANH MỤC CHỮ VIẾT TẮT vi DANH MỤC BẢNG vii DANH MỤC HÌNH viii TÓM TẮT ix PHẦN MỞ ĐẦU 1.1 Đặt vấn đề 1.2 Mục đích yêu cầu đề tài 1.2.1 Mục đích 1.2.2 Yêu cầu PHẦN TỔNG QUAN TÀI LIỆU 2.1 Cây vú sữa 2.1.1 Phân loại khoa học 2.1.2 Đặc điểm chung vú sữa 2.1.3 Tình hình sản xuất vú sữa giới 2.1.4 Tình hình sản xuất vú sữa Việt Nam 2.2 Nấm Paecilomyces 2.2.1 Phân loại phân bố nấm Paecilomyces 2.2.2 Đặc điểm hình thái nấm Paecilomyces 2.2.3 Đặc điểm sinh học nấm Paecilomyces 2.2.4 Cơ chế nấm ký sinh gây bệnh côn trùng 2.2.5 Triệu chứng biểu côn trùng nhiễm nấm Paecilomyces 2.2.6 Ứng dụng nấm Paecilomyces phịng trừ trùng gây hại 2.3 Ruồi đục trái Bactrocera sp 10 2.3.1 Thành phần loài phân bố ruồi đục trái 10 iii 2.3.2 Đặc điểm khả gây hại ruồi đục trái 11 2.3.3 Biện pháp phòng trừ 12 PHẦN NỘI DUNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 15 3.1 Vật liệu nghiên cứu 15 3.2 Địa điểm thời gian nghiên cứu 15 3.3 Nội dung nghiên cứu 15 3.4 Phương pháp nghiên cứu 16 3.4.1 Phân lập, định danh nấm Paecilomyces mẫu thu thập 16 3.4.2 Phương pháp đánh giá ảnh hưởng số yếu tố đến sinh trưởng, phát triển mẫu nấm Paecilomyces tuyển chọn 17 3.4.3 Phương pháp đánh giá hoạt tính sinh học nấm Paecilomyces tuyển chọn 19 3.4.4 Phương pháp đánh giá hiệu lực phòng trừ ruồi đục trái Bactrocera sp mẫu nấm Paecilomyces tuyển chọn 21 3.5 Phương pháp xử lý số liệu 22 PHẦN KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU VÀ THẢO LUẬN 23 4.1 Phân lập định danh nấm Paecilomyces 23 4.1.1 Kết phân lập 23 4.1.2 Định danh nấm Paecilomyces tuyển chọn dựa vào mơ tả hình thái 24 4.2 Ảnh hưởng số yếu tố đến sinh trưởng, phát triển nấm Paecilomyces tuyển chọn 25 4.2.1 Ảnh hưởng môi trường nuôi cấy đến sinh trưởng, phát triển nấm Paecilomyces TG.VK-04 26 4.2.2 Ảnh hưởng pH đến sinh trưởng, phát triển nấm Paecilomyces TG.VK-04 27 4.2.3 Ảnh hưởng nồng độ muối NaCl đến sinh trưởng, phát triển nấm Paecilomyces TG.VK-04 29 4.2.4 Ảnh hưởng nguồn cacbon đến sinh trưởng, phát triển nấm Paecilomyces TG.VK-04 30 iv 4.2.5 Ảnh hưởng nguồn nitơ đến sinh trưởng, phát triển nấm Paecilomyces TG.VK-04 32 4.3 Đánh giá hoạt tính phân giải nấm Paecilomyces tuyển chọn 33 4.3.1 Đánh giá hoạt tính phân giải protein 33 4.3.2 Đánh giá hoạt tính phân giải cellulose 34 4.4 Đánh giá hiệu lực phòng trừ ruồi đục trái Bactrocera nấm Paecilomyces tuyển chọn 36 PHẦN KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ 38 5.1 Kết luận 38 5.2 Kiến nghị 39 TÀI LIỆU THAM KHẢO 40 PHỤ LỤC 44 v DANH MỤC CHỮ VIẾT TẮT TT Chữ viết tắt Diễn giải chữ viết tắt B dorsalis Bactrocera dorsalis CMA Corn Meal Agar CMC Carboxymethyl Cellulose agar CT Công thức Ctv Cộng tác viên CFU Colony forming unit (Số đơn vị khuẩn lạc) CZA Czapek Agar ĐBSCL Đồng sông Cửu Long PDA Potato Dextrose Agar 10 PDB Potato Dextrose Broth 11 PGA Potato Gelatine Agar 12 Sp Species vi DANH MỤC BẢNG Bảng 4.1 Kết phân lập nấm Paecilomyces 23 Bảng 4.2 So sánh đặc điểm hình thái nấm TG.VK-04 mơi trường PDA 24 Bảng 4.3 Ảnh hưởng môi trường nuôi cấy đến sinh trưởng, phát triển nấm Paecilomyces TG.VK-04 26 Bảng 4.4 Ảnh hưởng pH đến sinh trưởng, phát triển nấm Paecilomyces TG.VK-04 môi trường PDA 28 Bảng 4.5 Ảnh hưởng nồng độ muối NaCl đến sinh trưởng, phát triển nấm Paecilomyces TG.VK-04 môi trường PDA 29 Bảng 4.6 Ảnh hưởng nguồn cacbon đến sinh trưởng, phát triển nấm Paecilomyces TG.VK-04 môi trường PDA 30 Bảng 4.7 Ảnh hưởng nguồn nitơ đến sinh trưởng, phát triển nấm Paecilomyces TG.VK-04 môi trường PDA 32 Bảng 4.8 Khả phân giải protein nấm Paecilomyces TG.VK-04 34 Bảng 4.9 Khả phân giải cellulose nấm Paecilomyces TG.VK-04 sau ngày nuôi cấy 35 Bảng 4.10 Hiệu lực phòng trừ ruồi đục trái Bactrocera sp nấm Paecilomyces TG.VK-04 36  vii DANH MỤC HÌNH Hình 2.1 Đặc điểm hình thái nấm Paecilomyces lilacinus 6  Hình 2.2 Triệu chứng gây hại ruồi đục trái vú sữa 12 Hình 4.1 Đặc điểm hình thái mẫu nấm TG.VK-04 25  Hình 4.2 Ảnh hưởng môi trường nuôi cấy đến sinh trưởng, phát triển nấm Paecilomyces TG.VK-04 27  Hình 4.3 Ảnh hưởng pH đến sinh trưởng, phát triển 29  Hình 4.4 Ảnh hưởng nồng độ muối NaCl đến sinh trưởng, phát triển nấm Paecilomyces TG.VK-04 30  Hình 4.5 Ảnh hưởng nguồn cacbon đến sinh trưởng, phát triển nấm Paecilomyces TG.VK-04 32  Hình 4.6 Ảnh hưởng nguồn nitơ đến sinh trưởng, phát triển nấm Paecilomyces TG.VK-04 33  Hình 4.7 Hoạt tính phân giải protein nấm Paecilomyces TG.VK-04 34  Hình 4.8 Hoạt tính phân giải cellulose nấm Paecilomyces TG.VK-04 sau ngày nuôi cấy 35  Hình 4.9 Nấm Paecilomyces TG.VK-04 ký sinh trùng 37  viii TĨM TẮT Với đề tài “Nghiên cứu đặc điểm sinh học đánh giá hiệu lực phòng trừ ruồi đục trái Bactrocera sp gây hại vú sữa nấm Paecilomyces ”, chúng tơi tiến hành phân lập nấm Paecilomyces có khả ký sinh, diệt trừ ruồi đục trái Bactrocera Sau tiến hành khảo sát ảnh hưởng số yếu tố môi trường đến khả sinh trưởng, phát triển, đồng thời đánh giá hoạt tính phân giải cellulose, protein nấm Paecilomyces tuyển chọn Các mẫu côn trùng bị nấm ký sinh thu thập tỉnh Tiền Giang, cấy trực tiếp mẫu mơi trường PDA có bổ sung kháng sinh phân lập thành công mẫu nấm Paecilomyces từ mẫu côn trùng thu thập Căn vào đặc điểm hình thái, đặc điểm sinh lý sinh hóa mẫu nấm TG.VK-04, chúng tơi xác định mẫu nấm có nhiều đặc điểm giống nấm Paecilomyces Mẫu nấm TG.VK-04 sử dụng để đánh giá hoạt tính khả sinh trưởng, phát triển số điều kiện môi trường, kết cho thấy: mẫu nấm Paecilomyces TG.VK-04 sinh trưởng, phát triển tốt môi trường CZA, ngưỡng pH 6, nguồn cacbon mật rỉ đường, nguồn nitơ KNO3 có khả chịu mặn muối NaCl với nồng độ 1- 5% tốt nồng độ muối 1% Mẫu nấm TG.VK-04 có hoạt tính phân giải cellulose, protein Trong điều kiện in vitro, hiệu lực phòng trừ ruồi đục trái Bactrocera sp mẫu nấm TG.VK-04 đạt 85,7% đến 100% pha phát dục Kết định danh dựa vào mơ tả đặc điểm hình thái mẫu nấm TG.VK-04 giống với đặc điểm nấm Paecilomyces, tạm thời đặt tên Paecilomyces TG.VK-04 ix 5.2 Kiến nghị Nghiên cứu kỹ thuật nhân sinh khối nấm Paecilomyces TG.VK-04 nhằm mục đích tạo chế phẩm vi sinh để ứng dụng phòng trừ ruồi đục trái vú sữa đồng ruộng 39 TÀI LIỆU THAM KHẢO A Tiếng Việt Nguyễn Thị Thu Cúc (2000) Côn trùng nhện gây hại ăn biện pháp phịng trừ Nhà xuất Nơng Nghiệp, 342 trang Nguyễn Thị Thanh Hiền (2014) Nghiên cứu đặc điểm sinh học, sinh thái học chủ yếu loài ruồi đục phương đông Bactrocera dorsalis Hendel hại ăn biện pháp phòng chống theo hướng tổng hợp Mộc Châu, Sơn La Luận án tiến sĩ Nông nghiệp, Viện khoa học nông nghiệp Việt Nam tr 27-28 Lê Tấn Hưng, Võ Thị Hạnh, Lê Thị Bích Phượng, Trần Thạnh Phong, Trương Thị Hồng Vân, Somsak Sivichai (2010) Nấm ký sinh côn trùng Vườn Quốc gia Cát Tiên: nguồn tài nguyên quý cho ứng dụng sinh học Hội nghị Khoa học kỷ niệm 35 năm Viện Khoa học Công nghệ Việt Nam Hà Nội Trần văn Huy (2012) Nghiên cứu số đặc điểm sinh học nấm Paecilomyces sp khả sử dụng phòng trừ rầy nâu hại lúa, Luận văn Thạc sĩ Nông nghiệp, Viện khoa học Nông Nghiệp Việt Nam Nguyễn Văn Huỳnh Võ Thanh Hoàng (1997) Sâu bệnh gây hại ăn Nhà xuất Nơng Nghiệp, Thành phố Hồ Chí Minh Lê Đức Khánh, Nguyễn Thị Thanh Hiền, Đào Đăng Tựu, Trần Thanh Tồn, Phan Minh Thơng, Vũ Thị Thuỳ Trang, Đặng Đình Thắng, Vũ Văn Thanh (2004) Báo cáo thực năm thứ dự án Quản lý ruồi hại nâng cao suất rau Việt nam, Báo cáo hội nghị khoa học Viện Bảo vệ thực vật năm 2004 Phạm Văn Lầm (2013) “Các lồi trùng nhện nhỏ gây hại trồng phát Việt Nam”, Nhà xuất Nông nghiệp Trần Văn Mão (2004) Sử dụng côn trùng vi sinh vật có ích Tập II Sử dụng vi sinh vật có ích Nhà xuất Nơng nghiệp Hà Nội Trương Huỳnh Ngọc, Nguyễn Thị Thu Cúc (2010) Côn trùng gây hại vú sữa (Chrysophyllum Catitol.) số địa bàn vùng Đồng sông Cửu Long đặc điểm sinh học sâu róm Euproctis subnotata Tạp chí khoa học tr 209-220 10 Minh Tân (2018) Phòng trừ ruồi đục khổ hoa chế phẩm sinh học Báo Quảng Nam Truy cập từ https://www.2lua.vn/article/phong-tru-ruoi-duc-kho-qua-bang-che-phamsinh-hoc5ab478a5e49519d33e8b456b.htmlngày24/8/2021 11 Phạm Thị Thùy (2004) Công nghệ sinh học bảo vệ thực vật NXB đại học quốc gia Hà Nội.335 trang 12 Phạm Thị Thùy, Nguyễn Thị Bắc, Đồng Thanh, Trần Thanh Tháp, Hồng Cơng Điền Nguyễn Đậu Tồn (1995) Nghiên cứu công nghệ sản xuất ứng dụng chế phẩm nấm Beauveria Metarhizium để phòng trừ số sâu hại trồng Tuyển tập cơng trình nghiên cứu bảo vệ thực vật Viện Bảo vệ thực vật: 189-200 13 Nguyễn Trang (2019) Tỉnh trồng vú sữa nhiều Việt Nam Truy cập từ https://thoidai.com.vn/tinh-nao-trong-nhieu-vu-sua-nhat-viet-nam-77342.html ngày 24/8/2021 14 Minh Trí (2018) Trái vú sữa Tiền Giang trước hộ vàng Báo ảnh dân tộc miền núi Truy cập từ https://dantocmiennui.vn/trai-vu-sua-tien-giang-truoc-co-hoivang/173918.html ngày 24/8/2021 40 B Tiếng Anh 15 Abbott W S (1925) A method for computing the effectiveness of an insecticide Journal of econmic entomology, 18: 265 - 269 16 Allwood A.J (1996), “Biology and Ecology: Prerequisites for understanding and managing fruit flies (Dipters: Tephritidae)”, In: Management of Fruit flies in The Pacific ACIAR proceedings N0 76 A.J.Allwood and R.A.I.Drew 171-178 17 Bai, H., Wang, X., Zhou, Y., & Zhang, L (2012) Preparation and characterization of poly (vinylidene fluoride) composite membranes blended with nano-crystalline cellulose Progress in Natural Science: Materials International, 22(3), 250-257 18 Barnett H L and B H Barry (1972) Illutrated genera of imperfect fungi Burgess Publishing company Minneapolis Minnesota 250pp 19 Bharati, T., J.H Kulkarni, P.U Krishnaraj and A.R Algawadi (2007) Effect of different carbon sources on the biomass of Pacilomyces Karnataka J Agric Sci., 20: 310-311 20 Boucias, D.G and J.C Pendland (1998) Principles of insect pathology Kluwer Academic Publishers, Boston, USA 7pp 21 Cendana, S.M; Bernardo P Gabriel and Edwin D Magallona (1984) Insect pests of fruit plants in the Philippines, 85p 22 Chase A R., Osborne L S and Ferguson V M (1986) Selective isolation of the enomopathogenic fungi Beauveria bassiana and Metarhizium anisopliae from an artificial porting medium Florida entomology, 69: 285 - 292 23 Choi, Y J., Hwang, H K and Lee, W H (1999) The production of artificial fruiting body of Paecilomyces japonica Kor J.Mycol 27(2): 87-93 24 Drew R.A.I (2010), “Chapter 6: Fruit fly pest management” In: International Agricultural biosecurity Fruit flies, Biology, biosecurity, pest management and taxonomy, International centre for the management of pest fruit flies, tr 16-17, tr 43-53, tr 50-51 25 Drew R.A.I., (2010), “Chapter 6: Fruit fly pest management” In: International Agricultural biosecurity Fruit flies, Biology, biosecurity, pest management and taxonomy, International centre for the management of pest fruit flies:50-51 26 Dwayne, D.H and G.K George (1993) Identification of molecular variants in mitochondrial DNAs of member of the genara Beauveria, Verticilum, Pacilomyces, Tolypocladium and Metarhizium Applied and Environmental Microbiology, 59 (12): 4283-4288 27 Evans, H.C (1982) Entomogenous fungi in tropical forest ecosystems: an appraisal Ecological Entomology 7(1): 47–60 28 Fei, G E., Yin, H U A N G., & Lin, G U I (2010) Effect of controlling dissolved oxygen tension on cell growth and nucleoside production in the mycelium of Paecilomyces tenuipes in a 30L fermentor Science and Technology of Food Industry, 07 29 Hau V Doan and Thao P Le (2020) Chrysophyllum cainito: A Tropical Fruit with Multiple Health Benefits doi: 10.1155/2020/7259267 30 Ian M.White and Marlene M Elson- Harris, (1992), “Fruit flies of economic significance: Their identification and bionomics”.C-A-B International, Redwood Press Ltd, Melhshan, UK 180-241 41 31 Kunimi, Y.(2005) Current status and prospects on the use of insect pathogens as biocontrol agents Journal Agrochemicals Japan 86: 2-6 32 Khachatourians G G., Hayden T P., Bidochka M J., & (1992) Entomopathogenicity of several fungi toward the English grain aphid (Homoptera: Aphididae) and enhancement of virulence with host passage of Paecilomyces farinosus Journal of Economic Entomology, 85(1), 58-64 33 Liang, Z Q (1981) Two new species of Paecilomyces from insect Acta Microbiol Sin., 21, 31-34 34 Morton C.O., P.R Hirsch, B.R Kerry (2004) Infection of plant-parasitic nematodes by nematophagous fungi – a review of the application of molecular biology to understand infection processes and to improve biological control, Nematology, 161-170 35 Morton J F (1987), Fruits of Warm Climates, Echo Point Books and Media, Brattleboro, VT, USA 36 Orwa C., Mutua A., Kindt R., Jamnadass R., Anthony S (2009) Agroforestree Database: A Tree Reference and Selection Guide Version 4.0 Nairobi, Kenya: World Agroforestry Centre 37 Parker I M., I López, J J Petersen, N Anaya, L Cubilla-Rios, and D Potter (2010), “Domestication syndrome in caimito (Chrysophyllum cainito L.): fruit and seed characteristics,” Economic Botany, vol 64, no 2, pp 161–175 38 Pau C.G., C.T.S Leong, S.K Wong, L Eng, M Jiwan, F.R Kundat, Z.F.B.A Aziz, O.H Ahmed, and N.M (2012) Majid, Isolation of indigenous strains of Paecilomyces lilacinus with antagonistic activity against Meloidogyne incognita, International Journal of Agriculture and Biology, 14, 197-203 39 Qian, M H Hu, Q B., Ren, S X and An, X C (2007) Insecticidal activity influence of destruxins on the pathogenicity of Paecilomyces javanicus against Spodoptera litura Journal of Applied Entomology, 131(4), 262-268 40 Rayati, D J., Aryantha, I N P., Arbianto, P., Ganesha, J., and Indonesia, B (2001) The optimization of nutrient factors in spore production of Paecilomyces fumosoroseus (Wize) Brown & Smith with submerged–surface fermentation system In The Fifth Symposium on Agri-Bioche, March-11-2001 Tokyo, Japan 41 Reza, T H., K.P Azi, G Mark, and M Javad (2006) Variation in virulence of Beauveria bassiana isolates and its relatedness to some morphological charateristics Biocontrol Science and Technology: 525-534 42 Roberts D W.(1989) World picture of biological control of insects by fungi Memorias Instituto Oswaldo Cruz, 84, 89-100 43 Robl, D., Sung, L B., Novakovich, J H., Marangoni, P R., Zawadneak, M A C., Dalzoto, P R., & Pimentel, I C (2009) Spore production in Paecilomyces lilacinus (Thom.) Samson strains on agro-industrial residues Brazilian Journal of Microbiology, 40, 296-300 44 Roger Vargas, R.L., J.D Stark T.Nishida (1990), “Population dynamics, habitat preference and season distribution patterns of Oriental fruit fly and melon fly (Diptera: Tephritidae) in an agriculture area Eviron Entomol., 19 (6), tr.1820-1828 42 45 Samson, R A., Houbraken, J., Varga, J., and Frisvad, J C (2009) Polyphasic taxonomy of the heat resistant ascomycete genus Byssochlamys and its Paecilomyces anamorphs Persoonia, 22, 14 46 Samson, R.A (1974) Paecilomyces and some allied hyphomycetes Studies in Mycology Centraalbureau voor Schimmelcultures, Baarn: 116 pp 47 Schoch CL, et al NCBI Taxonomy: a comprehensive update on curation, resources and tools Database (Oxford) (2020): baaa062 PubMed: 32761142 PMC: PMC7408187 48 Sosnowska, D., S Bałazy, L Prishchepa and N Mikulskaya (2004) Biodiversity of Arthropod Pathogens in the Białowieza Forest Journal of Plant Protection Research, 44 (4): 313-321 49 Sung Mi Shim et al (2003) The optimal culture conditions affecting the mycelial growth and fruiting body formation of Paecilomyces fumosoroseus, http://synapse.koreamed.org/Synapse/Data/PDFData/0184MB/mb-31-214.pdf 50 U.S Environmental Protection Agency Office of Pesticide Programs Biopesticides and Pollution Prevention Division (6/7/2005), Paecilomyces lilacinusstrain 251 PC Code 028826 51 Xuanwu Wan, Francesco Nardi, Bin Zhang, Yinghong (2011), Oriental fruit fly, Bactrocera dorsalis, in China: Origin and Gradual Inland Range expansion associated with Population Growth 52 Yahia E M., Gutierrez-Orozco F Star apple (Chrysophyllum cainito L.) In: Yahia E M., editor Postharvest Biology and Technology of Tropical and Subtropical Fruits London, UK: Woodhead Publishing; 2011 pp 392–398 53 Yoshinori, T and K.K Harry (1993) Insect Pathology Academic Press: 666pp 43 PHỤ LỤC Thành phần môi trường nuôi cấy - Môi trường WA (Water Agar): Agar : 20 g Nước cất : 1.000 ml - Môi trường PDA (Potato Dextrose Agar): Khoai tây : 200 g Dextrose : 20 g Agar : 20 g Nước cất : 1.000 ml - Môi trường CZA (Czapek Agar) - NaNO3 : 30 g FeSO4 7H2O : 0,01 g MgSO4 7H2O : 0,5 g KCl : 0,5 g K2HPO4.3H2O : 2g Agar : 20 g Nước cất : 1.000 ml Môi trường CMA (Corn Meal Agar): Bột ngô : 20 g Agar : 20 g Nước cất : 1.000 ml - Môi trường CMC (Carboxylmethyl Cellulose Agar): KH2PO4.7H2O : g FeSO4.7H2O : 0,1 g Cao thịt bò :2g NaCl :3g CMC : 10 g 44 Agar : 20 g Nước cất : 1.000 ml - Môi trường PGA (Potato Gelatine Agar): Khoai tây : 200 g Gelatine : 20 g Agar : 20 g Nước cất : 1.000 ml Mơi trường PDA có bổ sung nguồn cacbon khác nhau: glucose, saccharose, mật rỉ đường Mơi trường PDA có bổ sung nguồn nitơ khác nhau: KNO3, cao thịt bò, NH4NO3 1) Ảnh hưởng môi trường nuôi cấy đến sinh trưởng, phát triển nấm Paecilomyces TG.VK-04 BALANCED ANOVA FOR VARIATE 3_NSC FILE MT 29/ 8/** 0: PAGE Anh huong cua moi truong nuoi cay den su sinh truong, phat trien cua nam Paecilomyces TG.VK-04 VARIATE V003 3_NSC LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= CT$ 1480.22 740.111 ****** 0.000 * RESIDUAL 2.44676 407794 * TOTAL (CORRECTED) 1482.67 185.334 BALANCED ANOVA FOR VARIATE 5_NSC FILE MT 29/ 8/** 0: PAGE Anh huong cua moi truong nuoi cay den su sinh truong, phat trien cua nam Paecilomyces TG.VK-04 VARIATE V004 5_NSC LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= CT$ 105.680 52.8400 155.41 0.000 * RESIDUAL 2.04001 340001 * TOTAL (CORRECTED) 107.720 13.4650 BALANCED ANOVA FOR VARIATE 7_NSC FILE MT 29/ 8/** 0: PAGE Anh huong cua moi truong nuoi cay den su sinh truong, phat trien cua nam Paecilomyces TG.VK-04 VARIATE V005 7_NSC 45 LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= CT$ 32.0000 16.0000 129.73 0.000 * RESIDUAL 739999 123333 * TOTAL (CORRECTED) 32.7400 4.09249 TABLE OF MEANS FOR FACTORIAL EFFECTS FILE MT 29/ 8/** 0: PAGE Anh huong cua moi truong nuoi cay den su sinh truong, phat trien cua nam Paecilomyces TG.VK-04 MEANS FOR EFFECT CT$ CT$ CMA PDA CZA NOS 3 3_NSC 10.0000 36.3333 38.0000 5_NSC 55.5000 61.7000 63.5000 7_NSC 86.0000 90.0000 90.0000 SE(N= 3) 0.368689 0.336651 0.202759 5%LSD 6DF 1.27535 1.16453 0.701374 ANALYSIS OF VARIANCE SUMMARY TABLE FILE MT 29/ 8/** 0: PAGE Anh huong cua moi truong nuoi cay den su sinh truong, phat trien cua nam Paecimyces TG.VK-04 F-PROBABLIITY VALUES FOR EACH EFFECT IN THE MODEL SECTION - VARIATE 3_NSC 5_NSC 7_NSC GRAND MEAN (N= 9) NO OBS 28.111 60.233 88.667 STANDARD DEVIATION C OF V |CT$ SD/MEAN | BASED ON BASED ON % | TOTAL SS RESID SS | 13.614 0.63859 2.3 0.0000 3.6695 0.58310 1.0 0.0000 2.0230 0.35119 0.4 0.0001 46 | | | | 2) Ảnh hưởng pH đến sinh trưởng, phát triển nấm Paecilomyces TG.VK-04 BALANCED ANOVA FOR VARIATE 3_NSC FILE PH 29/ 8/** 0:16 PAGE Anh huong cua pH den su sinh truong, phat trien cua nam Paecilomyces TG.VK-04 VARIATE V003 3_NSC LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= CT$ 844.080 422.040 ****** 0.000 * RESIDUAL 1.59998 266664 * TOTAL (CORRECTED) 845.680 105.710 BALANCED ANOVA FOR VARIATE 5_NSC FILE PH 29/ 8/** 0:16 PAGE Anh huong cua pH den su sinh truong, phat trien cua nam Paecilomyces TG.VK-04 VARIATE V004 5_NSC LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= CT$ 8.00000 4.00000 12.00 0.000 * RESIDUAL 2.00000 333333 * TOTAL (CORRECTED) 10.0000 1.25000 TABLE OF MEANS FOR FACTORIAL EFFECTS FILE PH 29/ 8/** 0:16 PAGE Anh huong cua pH den su sinh truong, phat trien cua nam Paecilomyces TG.VK-04 MEANS FOR EFFECT CT$ CT$ pH pH pH NOS 3 3_NSC 45.5000 48.3000 26.5000 5_NSC 90.0000 90.0000 88.0000 SE(N= 3) 0.298141 0.333333 5%LSD 6DF 1.03132 1.15305 ANALYSIS OF VARIANCE SUMMARY TABLE FILE PH 29/ 8/** 0:16 PAGE Anh huong cua pH den su sinh truong, phat trien cua nam Paecilomyces TG.VK-04 F-PROBABLIITY VALUES FOR EACH EFFECT IN THE MODEL SECTION - VARIATE 3_NSC 5_NSC GRAND MEAN (N= 9) NO OBS 40.100 89.333 STANDARD DEVIATION C OF V |CT$ SD/MEAN | BASED ON BASED ON % | TOTAL SS RESID SS | 10.282 0.51639 1.3 0.0000 1.1180 0.57735 0.6 0.0086 47 | | | | 3) Ảnh hưởng nồng độ muối đến sinh trưởng phát triển nấm Paecilomyces TG.VK-04 BALANCED ANOVA FOR VARIATE 3_NSC FILE MUOI 29/ 8/** 0:21 PAGE Anh huong cua nong muoi den su sinh truong, phat trien cua nam Paecilomyces TG.VK-04 VARIATE V003 3_NSC LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= CT$ 234.500 117.250 469.01 0.000 * RESIDUAL 1.49998 249997 * TOTAL (CORRECTED) 236.000 29.5000 BALANCED ANOVA FOR VARIATE 5_NSC FILE MUOI 29/ 8/** 0:21 PAGE Anh huong cua nong muoi den su sinh truong, phat trien cua nam Paecilomyces TG.VK-04 VARIATE V004 5_NSC LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= CT$ 314.480 157.240 189.44 0.000 * RESIDUAL 4.98004 830007 * TOTAL (CORRECTED) 319.460 39.9325 BALANCED ANOVA FOR VARIATE 7_NSC FILE MUOI 29/ 8/** 0:21 PAGE Anh huong cua nong muoi den su sinh truong, phat trien cua nam Paecilomyces TG.VK-04 VARIATE V005 7_NSC LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= CT$ 693.500 346.750 ****** 0.000 * RESIDUAL 1.24001 206669 * TOTAL (CORRECTED) 694.740 86.8425 BALANCED ANOVA FOR VARIATE 9_NSC FILE MUOI 29/ 8/** 0:21 PAGE Anh huong cua nong muoi den su sinh truong, phat trien cua nam Paecilomyces TG.VK-04 VARIATE V006 9_NSC LN SOURCE OF VARIATION SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= CT$ 50.0000 25.0000 75.00 0.000 * RESIDUAL 2.00000 333333 * TOTAL (CORRECTED) 52.0000 6.50000 TABLE OF MEANS FOR FACTORIAL EFFECTS DF FILE MUOI 48 29/ 8/** 0:21 PAGE Anh huong cua nong muoi den su sinh truong, phat trien cua nam Paecilomyces TG.VK-04 MEANS FOR EFFECT CT$ CT$ 1% NaCl 3% NaCl 5% NaCl NOS 3 3_NSC 43.0000 37.0000 30.5000 5_NSC 74.0000 70.2000 60.0000 7_NSC 90.0000 75.5000 69.0000 9_NSC 90.0000 90.0000 85.0000 SE(N= 3) 0.288673 0.525993 0.262468 0.333333 5%LSD 6DF 0.998568 1.81949 0.907919 1.15305 ANALYSIS OF VARIANCE SUMMARY TABLE FILE MUOI 29/ 8/** 0:21 PAGE Anh huong cua nong muoi den su sinh truong, phat trien cua nam Paecilomyces TG.VK-04 F-PROBABLIITY VALUES FOR EACH EFFECT IN THE MODEL SECTION - VARIATE 3_NSC 5_NSC 7_NSC 9_NSC GRAND MEAN (N= 9) NO OBS 36.833 68.067 78.167 88.333 STANDARD DEVIATION C OF V |CT$ SD/MEAN | BASED ON BASED ON % | TOTAL SS RESID SS | 5.4314 0.50000 1.4 0.0000 6.3192 0.91105 1.3 0.0000 9.3189 0.45461 0.6 0.0000 2.5495 0.57735 0.7 0.0001 | | | | 4) Ảnh hưởng nguồn cacbon đến sinh trưởng, phát triển nấm Paecilomyces TG.VK-04 BALANCED ANOVA FOR VARIATE 3_NSC FILE CACBON 29/ 8/** 0:28 PAGE Anh huong cua nguon cacbon den su sinh truong, phat trien cua nam Paecilomyces TG.VK-04 VARIATE V003 3_NSC LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= CT$ 31.5000 15.7500 45.43 0.000 * RESIDUAL 2.08000 346667 * TOTAL (CORRECTED) 33.5800 4.19750 BALANCED ANOVA FOR VARIATE 5_NSC FILE CACBON 29/ 8/** 0:28 PAGE Anh huong cua nguon cacbon den su sinh truong, phat trien cua nam Paecilomyces TG.VK-04 VARIATE V004 5_NSC LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= CT$ 161.340 80.6700 ****** 0.000 * RESIDUAL 279994 466657 * TOTAL (CORRECTED) 161.620 20.2025 49 TABLE OF MEANS FOR FACTORIAL EFFECTS FILE CACBON 29/ 8/** 0:28 PAGE Anh huong cua nguon cacbon den su sinh truong, phat trien cua nam Paecilomyces TG.VK-04 MEANS FOR EFFECT CT$ CT$ Glucose Saccharose mat ri duong NOS 3 3_NSC 48.0000 45.0000 49.5000 5_NSC 78.1000 82.2000 88.4000 SE(N= 3) 0.339935 0.124721 5%LSD 6DF 1.17589 0.431428 ANALYSIS OF VARIANCE SUMMARY TABLE FILE CACBON 29/ 8/** 0:28 PAGE Anh huong cua nguon cacbon den su sinh truong, phat trien cua nam Paecilomyces TG.VK-04 F-PROBABLIITY VALUES FOR EACH EFFECT IN THE MODEL SECTION - VARIATE 3_NSC 5_NSC GRAND MEAN (N= 9) NO OBS 47.500 82.900 STANDARD DEVIATION C OF V |CT$ SD/MEAN | BASED ON BASED ON % | TOTAL SS RESID SS | 2.0488 0.58878 1.2 0.0004 4.4947 0.21602 0.3 0.0000 | | | | 5) Ảnh hưởng nguồn nitơ đến sinh trưởng, phát triển nấm Paecilomyces TG.VK-04 BALANCED ANOVA FOR VARIATE 3_NSC FILE NITO 29/ 8/** 0:34 PAGE Anh huong cua nguon nito den su sinh truong, phat trien cua nam Paecilomyces TG.VK04 VARIATE V003 3_NSC LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= CT$ 64.5000 32.2500 179.17 0.000 * RESIDUAL 1.08000 180000 * TOTAL (CORRECTED) 65.5800 8.19750 BALANCED ANOVA FOR VARIATE 5_NSC FILE NITO 29/ 8/** 0:34 PAGE Anh huong cua nguon nito den su sinh truong, phat trien cua nam Paecilomyces TG.VK-04 VARIATE V004 5_NSC LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= CT$ 74.2200 37.1100 60.18 0.000 * RESIDUAL 3.70000 616667 - 50 * TOTAL (CORRECTED) 77.9200 9.74000 BALANCED ANOVA FOR VARIATE 7_NSC FILE NITO 29/ 8/** 0:34 PAGE Anh huong cua nguon nito den su sinh truong, phat trien cua nam Paecilomyces TG.VK04 VARIATE V005 7_NSC LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= CT$ 518.000 259.000 386.56 0.000 * RESIDUAL 4.02006 670010 * TOTAL (CORRECTED) 522.020 65.2525 BALANCED ANOVA FOR VARIATE 9_NSC FILE NITO 29/ 8/** 0:34 PAGE Anh huong cua nguon nito den su sinh truong, phat trien cua nam Paecilomyces TG.VK04 VARIATE V006 9_NSC LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= CT$ 620.216 310.108 ****** 0.000 * RESIDUAL 906722 151120 * TOTAL (CORRECTED) 621.122 77.6403 TABLE OF MEANS FOR FACTORIAL EFFECTS FILE NITO 29/ 8/** 0:34 PAGE Anh huong cua nguon nito den su sinh truong, phat trien cua nam Paecilomyces TG.VK04 MEANS FOR EFFECT CT$ CT$ KNO3 NH4NO3 CAO THIT BO NOS 3 3_NSC 19.5000 15.5000 13.0000 5_NSC 33.5000 29.4000 26.5000 7_NSC 71.0000 56.0000 54.0000 9_NSC 90.0000 87.5667 71.3000 SE(N= 3) 0.244949 0.453382 0.472585 0.224440 5%LSD 6DF 0.847317 0.847317 1.63475 0.776375 ANALYSIS OF VARIANCE SUMMARY TABLE FILE NITO 29/ 8/** 0:34 PAGE Anh huong cua nguon nito den su sinh truong, phat trien cua nam Paecilomyces TG.VK04 F-PROBABLIITY VALUES FOR EACH EFFECT IN THE MODEL SECTION - VARIATE 3_NSC 5_NSC 7_NSC 9_NSC GRAND MEAN (N= 9) NO OBS 16.000 29.800 60.333 82.956 STANDARD DEVIATION C OF V |CT$ SD/MEAN | BASED ON BASED ON % | TOTAL SS RESID SS | 2.8631 0.42426 2.7 0.0000 3.1209 0.78528 2.6 0.0002 8.0779 0.81854 1.4 0.0000 8.8114 0.38874 0.5 0.0000 51 | | | | 6) Hiệu lực phòng trừ ruồi đục trái Bactrocera sp nấm Paecilomyces TG.VK-04 BALANCED ANOVA FOR VARIATE 1_NSP FILE HIEU LUC 15/ 9/** 13:54 PAGE Hieu luc phong tru ruoi duc trai Bactrocera sp cua nam Paecilomyces TG.VK-04 VARIATE V003 1_NSP LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= CT$ 496.896 248.448 ****** 0.000 * RESIDUAL 753330 125555 * TOTAL (CORRECTED) 497.649 62.2061 BALANCED ANOVA FOR VARIATE 2_NSP FILE HIEU LUC 15/ 9/** 13:54 PAGE Hieu luc phong tru ruoi duc trai Bactrocera sp cua nam Paecilomyces TG.VK-04 VARIATE V004 2_NSP LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= CT$ 800.820 400.410 597.61 0.000 * RESIDUAL 4.02009 670015 * TOTAL (CORRECTED) 804.840 100.605 BALANCED ANOVA FOR VARIATE 3_NSP FILE HIEU LUC 15/ 9/** 13:54 PAGE Hieu luc phong tru ruoi duc trai Bactrocera sp cua nam Paecilomyces TG.VK-04 VARIATE V005 3_NSP LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= CT$ 4355.71 2177.85 ****** 0.000 * RESIDUAL 2.31348 385580 * TOTAL (CORRECTED) 4358.02 544.753 BALANCED ANOVA FOR VARIATE 4_NSP FILE HIEU LUC 15/ 9/** 13:54 PAGE Hieu luc phong tru ruoi duc trai Bactrocera sp cua nam Paecilomyces TG.VK-04 VARIATE V006 4_NSP LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= CT$ 2915.85 1457.92 ****** 0.000 * RESIDUAL 406869 678115E-01 * TOTAL (CORRECTED) 2916.26 364.532 BALANCED ANOVA FOR VARIATE 5_NSP FILE HIEU LUC 15/ 9/** 13:54 PAGE Hieu luc phong tru ruoi duc trai Bactrocera sp cua nam Paecilomyces TG.VK-04 VARIATE V007 5_NSP LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF SQUARES 52 MEAN SQUARES F RATIO PROB ER LN ============================================================================= CT$ 408.980 204.490 ****** 0.000 * RESIDUAL 140034 233391E-01 * TOTAL (CORRECTED) 409.120 51.1400 TABLE OF MEANS FOR FACTORIAL EFFECTS FILE HIEU LUC 15/ 9/** 13:54 PAGE Hieu luc phong tru ruoi duc trai Bactrocera sp cua nam Paecilomyces TG.VK-04 MEANS FOR EFFECT CT$ CT$ sau non nhong truong SE(N= 5%LSD NOS 3 3) 6DF CT$ sau non nhong truong NOS 3 1_NSP 20.7000 3.33333 16.7333 2_NSP 37.0000 13.9000 25.0000 3_NSP 76.0000 22.2333 52.2333 4_NSP 85.7000 43.6333 76.1000 0.204577 0.707664 0.472587 1.63475 0.358506 1.24013 0.150346 0.520070 5_NSP 100.000 85.7000 100.000 SE(N= 3) 0.882026E-01 5%LSD 6DF 0.305107 ANALYSIS OF VARIANCE SUMMARY TABLE FILE HIEU LUC 15/ 9/** 13:54 PAGE Hieu luc phong tru ruoi duc trai Bactrocera sp cua nam Paecilomyces TG.VK-04 F-PROBABLIITY VALUES FOR EACH EFFECT IN THE MODEL SECTION - VARIATE 1_NSP 2_NSP 3_NSP 4_NSP 5_NSP GRAND MEAN (N= 9) NO OBS 13.589 25.300 50.156 68.478 95.233 STANDARD DEVIATION C OF V |CT$ SD/MEAN | BASED ON BASED ON % | TOTAL SS RESID SS | 7.8871 0.35434 2.6 0.0000 10.030 0.81854 3.2 0.0000 23.340 0.62095 1.2 0.0000 19.093 0.26041 0.4 0.0000 7.1512 0.15277 0.2 0.0000 53 | | | |