(Luận văn) nghiên cứu nhân giống cây gừng núi đá ( zingiber purpureum roscoe) bằng phương pháp in vitro

ĐẠI HỌC THÁI NGUYÊN TRƢỜNG ĐẠI HỌC NÔNG LÂM - - lu an HOÀNG TRUNG SƠN n va tn to Tên đề tài: (Zingiber purpureum Roscoe) BẰNG PHƢƠNG PHÁP IN VITRO p ie gh NGHIÊN CỨU NHÂN GIỐNG CÂY GỪNG NÚI ĐÁ oa nl w d KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP ĐẠI HỌC nf va an lu :Chính quy z at nh oi lm ul Hệ đào tạo Chuyên ngành:Công nghệ sinh học Khoa :CNSH - CNTP z :2012 - 2016 m co l gm @ Khóa học an Lu Thái Nguyên - 2016 n va ac th si ĐẠI HỌC THÁI NGUYÊN TRƢỜNG ĐẠI HỌC NÔNG LÂM - - lu HOÀNG TRUNG SƠN an va Tên đề tài: n NGHIÊN CỨU NHÂN GIỐNG CÂY GỪNG NÚI ĐÁ to p ie gh tn (Zingiber purpureum Roscoe) BẰNG PHƢƠNG PHÁP IN VITRO d oa nl w KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP ĐẠI HỌC lu : Chính quy nf va an Hệ đào tạo Chuyên ngành: Công nghệ sinh học lm ul : K44 - CNSH Khoa : CNSH - CNTP Khóa học z at nh oi Lớp : 2012 - 2016 Giảng viên hƣớng dẫn :1 PGS.TS Ngơ Xn Bình z m co l gm @ ThS Nguyễn Thị Tình an Lu Thái Nguyên - 2016 n va ac th si i LỜI CẢM ƠN Được trí ban giám hiệu nhà trường, ban chủ nhiệm Khoa Công nghệ sinh học Công nghệ thực phẩm thời gian thực tập tốt nghiệp em thực đề tài: “ Nghiên cứu nhân giống Gừng núi đá ( Zingiber purpureum Roscoe) phương pháp in vitro” Qua tháng thực tập Viện Nghiên cứu Phát triển lâm nghiệp phía bắc đến em hồn thành đề tài Để đạt kết ngày hôm em xin chân thành cảm ơn ban giám hiệu nhà trường, ban chủ nhiệm khoa lu thầy cô giáo môn công nghệ sinh học, anh chị phịng cơng an nghệ sinh học Viện Nghiên cứu Phát triển lâm nghiệp tạo điều va n kiện giúp đỡ em suốt thời gian thực đề tài to gh tn Em xin bày tỏ lịng biết ơn sâu sắc tới thầy giáo PGS.TS.Ngơ Xn ie Bình, giáo Ths Nguyễn Thị Tình chị Phạm Thị Thảo tận tình p bảo, hướng dẫn em thời gian thực đề tài nl w Cuối cùng, xin cảm ơn gia đình tạo điều kiện tốt d oa chỗ dựa tinh thần cho trình học tập ,cảm ơn bạn bè an lu giúp đỡ thời gian vừa qua Do thời gian thực tập đề tài có giới hạn nf va nên đề tài tránh khỏi sai sót Tơi mong nhận z at nh oi thiện lm ul đóng góp ý kiến chân thành từ thầy cô bạn để đề tài hoàn Em xin chân thành cảm ơn ! Thái nguyên, ngày 23 tháng 05 năm 2016 z co l gm @ Sinh viên thực m Hoàng Trung Sơn an Lu n va ac th si ii DANH MỤC CÁC BẢNG Trang Bảng 4.1 Kết nghiên cứu ảnh hưởng thời gian khử trùng dung dịch HgCl2 0,1% đến hiệu khử trùng mẫu 25 Bảng 4.2 Kết nghiên cứu ảnh hưởng số loại môi trường nuôi cấy (MS, B5, WPM) đến khả tái sinh chồi Gừng núi đá sau tuần 27 Bảng 4.3 Kết nghiên cứu ảnh hưởng nồng độ BA đến khả nhân nhanh chồi Gừng núi đá sau tuần 30 Bảng 4.4 Kết nghiên cứu ảnh hưởng nồng độ Kinetin đến khả nhân lu an nhanh chồi Gừng núi đá sau tuần .32 n va Bảng 4.5 Kết nghiên cứu ảnh hưởng nồng độ BA kết hợp với NAA đến tn to khả nhân nhanh chồi Gừng núi đá sau tuần 34 Bảng 4.6 Kết nghiên cứu ảnh hưởng nồng độ NAA đến khả cảm ứng gh p ie hình thành rễ Gừng núi đá sau tuần 36 Bảng 4.7 Kết nghiên cứu ảnh hưởng số loại giá thể đến khả sinh trưởng d oa nl w phát triển in vitro vườn ươm sau tuần 38 nf va an lu z at nh oi lm ul z m co l gm @ an Lu n va ac th si iii DANH MỤC CÁC HÌNH Trang Hình 4.1 Biểu đồ thể ảnh hưởng thời gian khử trùng dung dịch HgCl2 0,1% đến hiệu khử trùng mẫu 26 Hình 4.2 Ảnh củ Gừng núi đá giai đoạn tái sinh chồi 26 Hình 4.3 Biểu đồ thể ảnh hưởng môi trường MS , B5 WPM đến khả tái sinh chồi gừng núi đá 28 Hình 4.4 Ảnh tái sinh chồi Gừng núi đá sau tuần nuôi cấy môi trường MS .28 lu Hình 4.5 Biểu đồ thể ảnh hưởng nồng độ BA đến khả nhân nhanh an va chồi Gừng núi đá 30 n Hình 4.6 Ảnh mô Gừng núi môi trường nhân nhanh MS có bổ sung nồng độ to tn BA 1,5mg/l sau tuần 31 p ie gh Hình 4.7 Biểu đồ thể ảnh hưởng nồng độ Kinetin đến khả nhân nhanh chồi Gừng núi đá 32 HÌnh 4.8 Ảnh chồi gừng núi đá môi trường nhân nhanh bổ sung Kinetin w oa nl 1mg/l .33 d Hình 4.9 Biểu đồ thể ảnh hưởng nồng độ BA kết hợp NAA đến khả an lu nhân nhanh chồi Gừng núi đá .35 nf va Hình 4.10 Ảnh chồi Gừng núi đá môi trường nhân nhanh MS bổ sung BA kết lm ul hợp với NAA sau tuần với nồng độ BA 1,5mg/l nồng độ NAA 0,5 mg/l 35 z at nh oi Hình 4.11 Biểu đồ thể ảnh hưởng nồng độ NAA đến khả cảm ứng rễ gừng núi đá 37 Hình 4.12 Ảnh Gừng núi đá rễ môi trường MS bổ sung nồng độ NAA z gm @ 0,5 mg/l sau tuần 37 Hình 4.13 Biểu đồ thể ảnh hưởng số loại giá thể đến khả sinh l trưởng phát triển in vitro vườn ươm 39 co m Hình 4.14 ảnh Gừng núi đá trồng giá thể đất + trấu hun +mùn (1:2:1) an Lu sau tuần .40 n va ac th si iv DANH MỤC TỪ, CỤM TỪ VIẾT TẮT lu an n va ADN : Acid deoxyribonucleic B1 : Thiamin B3 : Nicotinic ac B5 : Gamborg's B6 : Pyridoxine BA : 6- Benzylaminopurine CT : Công thức Đ/C : Đối chứng IAA : Indol axetic acid to MT : Mơi trường TN : Thí nghiệm : Coefficient of Variation p ie gh tn Kinetin : 6-Furfurylaminopurine nl w CV : Least Significant Difference Test d oa LSD : Murashige and Skoog‟s NAA : α - Naphlene axetic acid nf va an 2,4-D lu MS :2,4-Dichlorophenoxy acetic acid z at nh oi lm ul z m co l gm @ an Lu n va ac th si v MỤC LỤC PHẦN 1: MỞ ĐẦU 1.1 Đặt vấn đề 1.2.Mục đích nghiên cứu 1.3.Yêu cầu 1.4 Ý nghĩa khoa học thực tiến đề tài 1.4.1 Ý nghĩa khoa học lu 1.4.2 Ý nghĩa thực tiến an PHẦN 2: TỔNG QUAN TÀI LIỆU va n 2.1 Giới thiệu Gừng núi đá gh tn to 2.1.1 Phân loại ie 2.1.2.Đặc điểm hình thái p 2.1.3 Đặc điểm phân bố nl w 2.1.4 Sinh thái, trồng trọt d oa 2.1.5 Thành phần hóa học tác dụng dược lý an lu 2.2 Cơ sở khoa học nuôi cấy mô tế bào thực vật (in vitro) nf va 2.2.1 Khái niệm nuôi cấy mô tế bào thực vật lm ul 2.2.2 Tính tồn tế bào z at nh oi 2.2.3 Phản phân hóa phân hóa tế bào 2.2.4 Điều kiện môi trường nuôi cấy mô tế bào thực vật 2.3 Tình hình nghiên cứu Gừng núi đá nước giới 13 z gm @ 2.3.1 Tình hình nghiên cứu giới 13 2.3.2 Tình hình nghiên cứu nước 14 l co PHẦN 3: ĐỐI TƢỢNG, NỘI DUNG VÀ PHƢƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU16 m 3.1 Đối tượng phạm vi nghiên cứu 16 an Lu 3.1.1 Đối tượng 16 n va ac th si vi 3.1.2 Phạm vi nghiên cứu 16 3.2 Địa điểm, thời gian nghiên cứu 16 3.2.1 Địa điểm nghiên cứu 16 3.2.2 Thời gian nghiên cứu 16 3.3 Điều kiện nuôi cấy 16 3.4 Nội dung nghiên cứu 17 3.5 Phương pháp nghiên cứu 17 3.5.1 Chuẩn bị môi trường nuôi cấy in vitro 17 lu 3.5.2 Phương pháp bố trí thí nghiệm 17 an PHẦN 4: KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU VÀ THẢO LUẬN 25 n va tn to 4.1 Kết nghiên cứu ảnh hưởng thời gian khử trùng dung dịch HgCl2 0,1% đến hiệu khử trùng mẫu 25 p ie gh 4.2 Kết nghiên cứu ảnh hưởng số loại môi trường nuôi cấy (MS, B5, WPM) đến khả tái sinh chồi Gừng núi đá 27 nl w 4.3 Kết nghiên cứu ảnh hưởng nồng độ BA đến khả nhân nhanh chồi Gừng núi đá 29 d oa 4.4 Kết nghiên cứu ảnh hưởng nồng độ Kinetin đến khả nhân nhanh chồi Gừng núi đá 31 an lu nf va 4.5 Kết nghiên cứu ảnh hưởng nồng độ BA Kết hợp với NAA đến khả nhân nhanh chồi Gừng núi đá 33 lm ul z at nh oi 4.6 Kết nghiên cứu ảnh hưởng nồng độ NAA đến khả cảm ứng rễ Gừng núi đá 36 4.7 Kết nghiên cứu ảnh hưởng số loại giá thể đến khả sinh trưởng phát triển in vitro vườn ươm 38 z PHẦN 5: KẾT LUẬN VÀ ĐỀ NGHỊ………………….………………… 41 @ l gm 5.1 Kết luận 41 5.2 Kiến nghị 42 co m TÀI LIỆU THAM KHẢO 43 an Lu n va ac th si PHẦN MỞ ĐẦU 1.1 Đặt vấn đề Họ Gừng bao gồm khoảng 47 chi 1.000 loài , phân bố vùng nhiệt đới cận nhiệt đới, chủ yếu nam đông nam châu Á Ở Việt Nam biết gần 20 chi gần 100 loài, Gừng núi đá lồi có giá trị lớn [13] Tên khoa học Zingiber purpureum Roscoe , họ Gừng zingiberaceae, lu thuộc chi Gừng zingiber, Gừng Zingiberales Cây Gừng núi đá cao khoảng an từ 0,3-1m, thân rễ dạng củ phân nhiều nhánh [12] va n Từ đời nhà Minh Trung Quốc nhà y học tiếng Lý Thời Châu viết gh tn to “ Bản Thảo Cương Mục” sau: “Gừng đắng mà khơng hơi, ie đắng xua tà, đuổi ác, ăn sống, ăn chín, ngâm giấm, làm tương, p ngâm muối, xào với mật, đường Cũng làm rau, làm kẹo, làm thuốc nl w có lợi” d oa Nước Gừng tính ôn có công dụng long đờm chữa ho Vỏ Gừng tính mát an lu có cơng dụng tỳ vị, tiêu viêm ,sưng, Gừng khơ tính nhiệt, dùng ấm, có cơng lm ul hóa, hoạt huyết nf va dụng giải hàn, trừ tỳ vị hư hàn Lá Gừng có tính ơn có tác dụng hỗ trợ tiêu z at nh oi Ngày với khoa học kỹ thuật phát triển Gừng có tác dụng đặc biệt phát hoạt tính kháng virus, chống oxy hóa kháng khuẩn Tuy nhiên nguồn gen họ Gừng có nguy mát nhanh z @ khai thác mức l gm Theo định số 80/2005QĐ- BNN Bộ Nông nghiệp Phát triển co Nông thôn từ năm 2005 Gừng núi đá xếp vào nhóm thực m phẩm quý cần bảo tồn Vì Gừng núi đá cần có định hướng an Lu để bảo tồn đắn để phục vụ tương lai [20] n va ac th si Do chúng tơi tiến hành nghiên cứu đề tài: “Nghiên cứu giống Gừng núi đá (Zingiber purpureum Roscoe ) phương pháp in vitro” 1.2.Mục đích nghiên cứu Nghiên cứu thành cơng quy trình nhân giống Gừng núi đá phương pháp in vitro 1.3.Yêu cầu - Xác định thời gian khử trùng thích hợp - Xác định mơi trường ni cấy thích hợp đến khả tái sinh lu Gừng núi đá an - Xác định ảnh hưởng chất kích thích sinh trưởng (BA, va n Kinetin, NAA) đến qua trình nhân nhanh chồi, rễ chồi Gừng núi đá to gh tn - Xác định ảnh hưởng nồng độ NAA đến khả cảm ứng rễ - Xác định loại giá thể phù hợp đến khả sinh trưởng phát p ie chồi Gừng núi đá nl w triển in vitro vườn ươm d oa 1.4 Ý nghĩa khoa học thực tiến đề tài an lu 1.4.1 Ý nghĩa khoa học nf va Kết nghiên cứu xây dựng biện pháp kỹ thuật nhân giống lm ul Gừng núi đá phương pháp in vitro Đánh giá chất kích thích sinh z at nh oi trưởng, thành phân môi trường ni cấy thời gian khử trùng quy trình nhân giống Gừng núi đá phương pháp in vitro 1.4.2 Ý nghĩa thực tiến z - Đề xuất quy trình nhân nhanh giống Gừng núi đá phương @ m - Bảo tồn loại dược liệu quý co lượng cao phục vụ cho sản xuất l gm pháp nuôi cấy in vitro, để đảm bảo cung cấp số lượng lớn giống có chất an Lu n va ac th si 43 TÀI LIỆU THAM KHẢO I Tiếng Việt Lê Trần Bình, Hồ Hữu Nhi, Lê Thị Muội (1997) Công nghệ sinh thực vật cải tiến giống trồng, NXB Nông Nghiệp, Hà Nội Ngơ Xn Bình, Bùi Hảo Hồn, Nguyễn Thị Thúy Hà (2003),Giáo trình cơng nghệ sinh học, NXB Nơng Nghiệp, Hà Nội Võ Văn Chi, Dương Đức Tiếu (1978) Phân loại thực vật bậc cao, NXB Đại học Trung học chuyên nghiệp, Hà Nội lu Võ Văn Chi (2004) Từ điển thực vật thông dụng - Tập 2, NXB Khoa học an Kỹ thuật va n Trương Thị Đẹp (2009), Thực vật dược, NXB Giáo Dục gh tn to Lê Trần Đức (1997), Cây thuốc Việt Nam, NXB Nông Nghiệp, Hà Nội ie Nguyễn Như Hiền (2009), Công nghệ sinh học – Tập – Sinh học phân tử p tế bào – sở khoa học công nghệ sinh học, NXB Giáo Dục oa nl w Đặng Văn Hoài, Phan Văn Hồ Nam, Võ Thị Bạch Huệ (2011), “So sánh thành phần tinh dầu Gừng dại Gừng trâu thuộc chi Zingiber họ d nf va 21 an lu Gừng (Zingiberaceae)”, Tạp chí Y học Thành phố Hồ Chí Minh, 4(1): 16- lm ul Hà Thành Kiên (2011), “Thuyết minh đề tài nghiên cứu khoa học phát z at nh oi triển công nghệ Ứng dụng khoa học công nghệ nhân giống Gừng đá phương pháp nuôi cấy mô tế bào”, Trung tâm ứng dụng tiến KH CN, Sở KH CN tỉnh Lạng Sơn z 10.Viện Dược Liệu ( 2004), Cây thuốc động vật làm thuốc Việt Nam I, l gm @ Nhà Xuất khoa học kỹ thuật, Hà Nội co 11 Trần Thị Lệ, Trương Thị Bích Phượng, Trần Thị Triêu Hà (2008), Giáo m trình Công nghệ sinh học thực vật, Nxb Nông nghiệp, Hà Nội an Lu n va ac th si 44 12.Đỗ Tất Lợi Những thuốc vị thuốc Việt Nam [Book] - Hà Nội : [s.n.], 2000 13 Hoàng Thị Sản Phân loại thực vật học [Book] - NXB Giáo Dục : [s.n.], 2009 14 Nguyễn Kim Thanh, Nguyễn Thuận Châu (2005), Giáo trình sinh lý học thực vật, Nxb Giáo dục, Hà Nội 15 Vũ Văn Vụ, Vũ Thanh Tâm, Hoàng Minh Tân (2009), Sinh lý học thực vật, Nxb Giáo Dục lu II Tài liệu tiếng anh an 16.Adinkudik K Lincy, Azhimala B Remashree, Bhaskaran Sasikumar va n (2009), “Indirect and direct somatic embryogenesis from aerial stem gh tn to explant of ginger (Zingiber officinale Roscoe), Acta Bot Croat., 68(1), p ie p.93-103 17 Anwar Hossain, Lutful Hassan, Abdul Khaleq Patwary, M Sultan Mia, nl w Syed Dilnawaz Ahmad, Asad Hussain Shah and Farhat Batool (2010), d oa „Establishment of a suitable and reproducible protocol for in vitro nf va p.1065-1074 an lu regeneration of ginger (Zingiber officinale Roscoe)”, Pak J Bot., 42(2), lm ul 18.Muhammad Shahinozzaman, Muhammad Omar Faruq, Mustafa Abul z at nh oi Kalam Azad and Muhammad Nurul Amin (2013), “Studies on in vitro propagation of an important medicinal plant-Curcuma zedoaria Roscoe using rhizome explants”, Persian Gulf Crop Protection, 2(4), p.1-6 z @ 19 Q Z Faridah, A H A Abdelmageed, A A Julia, R Nor Hafizah (2011), l gm “Efficient in vitro regeneration of Zingiber zerumbet Smith (a valuable m Biotechnology, 10(46), p.9303-9308 co medicinal plant) plantlets from rhizome bud explants”, African Journal of an Lu n va ac th si 45 II Tài liệu trích dẫn từ INTERNET 20 Quyết định số 80/2005/QĐ-BNN ngày 05 tháng 12 năm 2005 Bộ Nông nghiệp Phát triển nông thôn: http://thuvienphapluat.vn/vanban/Tai-nguyen-Moi-truong/Quyet-dinh-80-2005-QD-BNN-Danh-mucnguon-gen-cay-trong-quy-hiem-can-bao-ton/8471/noi-dung.aspx 21.http://www.khoahocchonhanong.com.vn/modules.php?name=News&file=articl e&sid=13169 lu an n va p ie gh tn to d oa nl w nf va an lu z at nh oi lm ul z m co l gm @ an Lu n va ac th si PHỤ LỤC Phụ lục Một số hình ảnh minh họa lu an n va Sau tuần Hình Mẫu gia đoạn tái sinh p ie gh tn to Sau tuần d oa nl w nf va an lu z at nh oi lm ul z @ Sau tuần Sau tuần m co l gm Hình Mẫu giai đoạn nhân nhanh an Lu n va ac th si lu an va n Sau tuần Sau tuần p ie gh tn to Hình Mẫu giai đoạn rễ d oa nl w nf va an lu z at nh oi lm ul z @ m co l gm Hình Mẫu sau 30 ngày an Lu n va ac th si Phụ lục Kết xử lý số liệu Bảng 5.1 Ảnh hƣởng thời gian khử trùng dung dịch HgCl2 0,1% đến hiệu khử trùng mẫu lu an n va p ie gh tn to BALANCED ANOVA FOR VARIATE TLMS FILE SON 15/ 5/16 10:33 :PAGE anh huong cua thoi gian khu trung bang HgCl2 0,1% den hieu qua khu trung mau VARIATE V003 TLMS LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ====================================================================== ======= CT$ 811.111 270.370 18.25 0.001 * RESIDUAL 118.504 14.8130 * TOTAL (CORRECTED) 11 929.615 84.5104 TABLE OF MEANS FOR FACTORIAL EFFECTS FILE SON 15/ 5/16 10:33 :PAGE anh huong cua thoi gian khu trung bang HgCl2 0,1% den hieu qua khu trung mau MEANS FOR EFFECT CT$ CT$ NOS TLMS 60.0000 66.6700 82.2233 73.3333 d oa nl w lu nf va an SE(N= 3) 2.22208 5%LSD 8DF 7.24599 ANALYSIS OF VARIANCE SUMMARY TABLE FILE SON 15/ 5/16 10:33 :PAGE anh huong cua thoi gian khu trung bang HgCl2 0,1% den hieu qua khu trung mau F-PROBABLIITY VALUES FOR EACH EFFECT IN THE MODEL SECTION - VARIATE GRAND MEAN STANDARD DEVIATION C OF V |CT$ | (N= 12) SD/MEAN | | NO BASED ON BASED ON % | | OBS TOTAL SS RESID SS | | TLMS 12 70.557 9.1930 3.8488 5.5 0.0008 z at nh oi lm ul z m co l gm @ an Lu n va ac th si Bảng 5.2 Ảnh hƣởng môi trƣờng MS, B5, WPM đến khả tái sinh chồi gừng núi đá lu an n va p ie gh tn to BALANCED ANOVA FOR VARIATE TLTS FILE TLSKN 13/ 5/16 22: :PAGE anh huong cua moi truong MS, B5, WPM den kha nang tai sinh choi Gung nui da VARIATE V003 TLTS LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ====================================================================== ======= CT$ 1755.56 877.778 39.50 0.001 * RESIDUAL 133.333 22.2222 * TOTAL (CORRECTED) 1888.89 236.111 TABLE OF MEANS FOR FACTORIAL EFFECTS FILE TLSKN 13/ 5/16 22: :PAGE anh huong cua moi truong MS, B5, WPM den kha nang tai sinh choi Gung nui da MEANS FOR EFFECT CT$ NOS TLTS 83.3333 73.3333 50.0000 d oa nl nf va an lu w CT$ z at nh oi lm ul SE(N= 3) 2.72165 5%LSD 6DF 9.41464 ANALYSIS OF VARIANCE SUMMARY TABLE FILE TLSKN 13/ 5/16 22: :PAGE anh huong cua moi truong MS, B5, WPM den kha nang tai sinh choi Gung nui da F-PROBABLIITY VALUES FOR EACH EFFECT IN THE MODEL SECTION - VARIATE GRAND MEAN STANDARD DEVIATION C OF V |CT$ | (N= 9) SD/MEAN | | NO BASED ON BASED ON % | | OBS TOTAL SS RESID SS | | TLTS 68.889 15.366 4.7140 6.8 0.0006 z m co l gm @ an Lu n va ac th si Bảng 5.3 Ảnh hàm lƣợng BA đến khả nhân nhanh chồi gừng núi đá lu an n va p ie gh tn to BALANCED ANOVA FOR VARIATE HSN FILE HSN 13/ 5/16 22:42 :PAGE anh huong cua nong BA den kha nang nhan nhanh choi Gung nui da VARIATE V003 HSN LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ====================================================================== ======= CT$ 910667 227667 10.67 0.001 * RESIDUAL 10 213333 213333E-01 * TOTAL (CORRECTED) 14 1.12400 802857E-01 TABLE OF MEANS FOR FACTORIAL EFFECTS FILE HSN 13/ 5/16 22:42 :PAGE anh huong cua nong BA den kha nang nhan nhanh choi Gung nui da MEANS FOR EFFECT CT$ - CT$ d oa nl w nf va an lu NOS HSN 1.73333 2.06667 2.20000 2.50000 2.10000 z at nh oi lm ul SE(N= 3) 0.843274E-01 5%LSD 10DF 0.265719 ANALYSIS OF VARIANCE SUMMARY TABLE FILE HSN 13/ 5/16 22:42 :PAGE anh huong cua nong BA den kha nang nhan nhanh choi Gung nui da F-PROBABLIITY VALUES FOR EACH EFFECT IN THE MODEL SECTION - VARIATE GRAND MEAN STANDARD DEVIATION C OF V |CT$ | (N= 15) SD/MEAN | | NO BASED ON BASED ON % | | OBS TOTAL SS RESID SS | | HSN 15 2.1200 0.28335 0.14606 6.9 0.0014 z m co l gm @ an Lu n va ac th si Bảng 5.4 Ảnh hƣởng nồng độ kinetin đến khả nhân nhanh chồi Gừng núi đá lu an n va p ie gh tn to BALANCED ANOVA FOR VARIATE HSN FILE HSN 13/ 5/16 23:17 :PAGE anh huong cua nong Kinetin den kha nang nhan nhanh choi Gung nui da VARIATE V003 HSN LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ====================================================================== ======= CT$ 2.08400 521000 45.97 0.000 * RESIDUAL 10 113333 113333E-01 * TOTAL (CORRECTED) 14 2.19733 156952 TABLE OF MEANS FOR FACTORIAL EFFECTS FILE HSN 13/ 5/16 23:17 :PAGE anh huong cua nong Kinetin den kha nang nhan nhanh choi Gung nui da MEANS FOR EFFECT CT$ CT$ NOS HSN 1.76667 2.06667 3 2.86667 2.33333 2.03333 d oa nl w nf va an lu z at nh oi lm ul SE(N= 3) 0.614636E-01 5%LSD 10DF 0.193674 ANALYSIS OF VARIANCE SUMMARY TABLE FILE HSN 13/ 5/16 23:17 :PAGE anh huong cua nong Kinetin den kha nang nhan nhanh choi Gung nui da F-PROBABLIITY VALUES FOR EACH EFFECT IN THE MODEL SECTION - VARIATE GRAND MEAN STANDARD DEVIATION C OF V |CT$ | (N= 15) SD/MEAN | | NO BASED ON BASED ON % | | OBS TOTAL SS RESID SS | | HSN 15 2.2133 0.39617 0.10646 4.8 0.0000 z m co l gm @ an Lu n va ac th si Bảng 5.5 Ảnh hƣởng nồng độ BA Kết hợp NAA đến khả nhân nhanh chồi Gừng đá lu an n va p ie gh tn to BALANCED ANOVA FOR VARIATE HSN FILE HSN 13/ 5/16 23:36 :PAGE anh huong cua nong BA ket hop voi NAA den kha nang nhan nhanh choi Gung nui da VARIATE V003 HSN LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ====================================================================== ======= CT$ 2.64667 441111 31.94 0.000 * RESIDUAL 14 193334 138095E-01 * TOTAL (CORRECTED) 20 2.84000 142000 TABLE OF MEANS FOR FACTORIAL EFFECTS FILE HSN 13/ 5/16 23:36 :PAGE anh huong cua nong BA ket hop voi NAA den kha nang nhan nhanh choi Gung nui da MEANS FOR EFFECT CT$ NOS HSN 1.93333 2.23333 2.33333 2.66667 3.10000 2.40000 2.13333 d oa nl nf va an lu z at nh oi lm ul w CT$ z SE(N= 3) 0.678467E-01 5%LSD 14DF 0.205794 ANALYSIS OF VARIANCE SUMMARY TABLE FILE HSN 13/ 5/16 23:36 :PAGE anh huong cua nong BA ket hop voi NAA den kha nang nhan nhanh choi Gung nui da F-PROBABLIITY VALUES FOR EACH EFFECT IN THE MODEL SECTION - VARIATE GRAND MEAN STANDARD DEVIATION C OF V |CT$ | (N= 21) SD/MEAN | | NO BASED ON BASED ON % | | OBS TOTAL SS RESID SS | | HSN 21 2.4000 0.37683 0.11751 4.9 0.0000 m co l gm @ an Lu n va ac th si Bảng 5.6 Bảng kết nghiên cứu ảnh hƣởng hàm lƣợng củaNAA đến khả cảm ứng rễ chồi gừng núi đá lu an n va p ie gh tn to BALANCED ANOVA FOR VARIATE SRTC FILE XONGROI 22/ 5/16 16:18 :PAGE anh huong cua nong NAA den kha nang cam ung re Gung nui da VARIATE V003 SRTC LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ====================================================================== ======= CT$ 2.00400 501000 50.10 0.000 * RESIDUAL 10 999999E-01 999999E-02 * TOTAL (CORRECTED) 14 2.10400 150286 TABLE OF MEANS FOR FACTORIAL EFFECTS FILE XONGROI 22/ 5/16 16:18 :PAGE anh huong cua nong NAA den kha nang cam ung re Gung nui da MEANS FOR EFFECT CT$ - CT$ d oa nl w nf va an lu NOS SRTC 3.06667 3.40000 4.06667 3.70000 3.16667 z at nh oi lm ul SE(N= 3) 0.577350E-01 5%LSD 10DF 0.181925 ANALYSIS OF VARIANCE SUMMARY TABLE FILE XONGROI 22/ 5/16 16:18 :PAGE anh huong cua nong NAA den kha nang cam ung re Gung nui da F-PROBABLIITY VALUES FOR EACH EFFECT IN THE MODEL SECTION - VARIATE GRAND MEAN STANDARD DEVIATION C OF V |CT$ | (N= 15) SD/MEAN | | NO BASED ON BASED ON % | | OBS TOTAL SS RESID SS | | SRTC 15 3.4800 0.38767 0.10000 2.9 0.0000 z m co l gm @ an Lu n va ac th si Bảng 5.7 Ảnh hƣởng gia thể đến khả sinh trƣởng phát triển in vitro vƣờn ƣơm lu an n va p ie gh tn to BALANCED ANOVA FOR VARIATE TLCS FILE SL 14/ 5/16 15: :PAGE anh huong cua gia the den kha nang sinh truong va phat trien cua cay in vitro o ngoai vuon uom VARIATE V003 TLCS LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ====================================================================== ======= CT$ 422.222 211.111 9.50 0.014 * RESIDUAL 133.333 22.2222 * TOTAL (CORRECTED) 555.556 69.4444 TABLE OF MEANS FOR FACTORIAL EFFECTS FILE SL 14/ 5/16 15: :PAGE anh huong cua gia the den kha nang sinh truong va phat trien cua cay in vitro o ngoai vuon uom MEANS FOR EFFECT CT$ CT$ NOS TLCS 80.0000 86.6667 3 96.6667 d oa nl w an lu nf va SE(N= 3) 2.72166 5%LSD 6DF 9.41464 ANALYSIS OF VARIANCE SUMMARY TABLE FILE SL 14/ 5/16 15: :PAGE anh huong cua gia the den kha nang sinh truong va phat trien cua cay in vitro o ngoai vuon uom F-PROBABLIITY VALUES FOR EACH EFFECT IN THE MODEL SECTION - VARIATE GRAND MEAN STANDARD DEVIATION C OF V |CT$ | (N= 9) SD/MEAN | | NO BASED ON BASED ON % | | OBS TOTAL SS RESID SS | | TLCS 87.778 8.3333 4.7140 5.4 0.0144 z at nh oi lm ul z m co l gm @ an Lu n va ac th si Phụ lục Môi trƣờng Bảng Môi trƣờng MS – Murashige and Skoog’s Component Stock Slution (g/l) I NH4NO3 KNO3 82,5 95 II MgSO4.7H2O MgSO4.4H2O ZnSO4.7 H2O CuSO4.5H2O CaCl2.2H2O KI CoCl2.6H2O KH2PO4 H3BO3 Na2MoO4.2H2O FeSO4.7H2O Na2EDTA.2H2O 37,0 2,23 1,058 0,0025 44,0 0,083 0,0025 17,0 0,62 0,025 2,784 3,724 10 Nicotin acid Glycine ThiamineHCl PyridoxineHCl 100 100 100 100 0,5 2,0 0,1 0,5 5,8 z at nh oi lu Bottle an n va IV p ie gh tn to III nf va an lu Vitamin lm ul Inositol Sucrose Agar PH Final concentratic (mg/l) 1.650,0 1.900,0 370,0 22,3 10,6 0,025 440,0 0,83 0,025 170,0 6,2 0,25 27,58 37,25 mg/100ml 0,5 2,0 0,1 0,5 100,0 30.000,0 8.000,0 10 10 10 d oa nl w V Amount to take preparation (ml) 20 z m co l gm @ an Lu n va ac th si Bảng Môi trƣờng B5 – Gamborg’s Bottle lu an n va p ie gh tn to Stock Slution (g/l) KNO3 (NH4)2SO4 MgSO4.7H2O NaH2PO4.H2O MnSO4.H2O H3BO3 ZnSO4.7 H2O KI Na2MoO4.2H2O CuSO4.5H2O CoCl2.6H2O FeSO4.7H2O Na2EDTA CaCl2.2H2O 250 13,4 15,0 15 1,0 0,3 0,2 0,075 0,025 0,0025 0,0025 2,785 3,725 15,0 oa Final concentratic (mg/l) 10 10 150,0 10,0 3,0 2,0 0,75 0,25 0,025 0,025 27,85 37,25 150,0 160 2500,0 134,0 10 10 10 mg/100ml 100 100 100 d Nicotinin acid Thiamine HCl Pyridoxine HCl nf va an lu Vitamins 10 1,0 10,0 1,0 8000,0 5,6 – 5,8 z at nh oi lm ul Sucrose Agar PH Amount to take preparation (ml) 20 10 nl w Inositol Component z m co l gm @ an Lu n va ac th si Bảng Môi trƣờng WPM – Woody Plant Medium Nồng độ Muối khoáng Nồng độ Muối khoáng (mg/l) (mg/l) 400 H3BO3 6,2 Ca(NO3)2.4H2O 556 ZnSO4.7H2O 8,6 CaCl2.2H2O 96 Na2EDTA.2H2O 37,2 MgSO4.7H2O 370 CuSO4.5H2O 0,25 K2SO4 990 FeSO4.7H2O 27,8 K2PO4 170 MgSO4.4H2O 22,3 Na2MoO4.2H2O 0,25 100 Nicotinic acid 0,5 0,5 Thiamine HCl 1,0 nl 2,0 Agar 6,0 Sucrose 20 lu NH4NO3 an n va Myo- inositol p ie gh tn to Các chất hữu w Pyridoxine HCl Glycine d oa 5,6 – 5,8 nf va an lu PH z at nh oi lm ul z m co l gm @ an Lu n va ac th si