(Luận văn thạc sĩ) nghiên cứu ảnh hưởng của một số chất kích thích sinh trưởng đến khả năng tái sinh chồi, nhân nhanh và ra rễ của cây gừng núi đá (zingiber purpureum roscoe)

ĐẠI HỌC THÁI NGUYÊN TRƯỜNG ĐẠI HỌC NÔNG LÂM PHẠM THỊ THỦY Tên đề tài: NGHIÊN CỨU ẢNH HƯỞNG CỦA MỘT SỐ CHẤT KÍCH THÍCH SINH TRƯỞNG ĐẾN KHẢ NĂNG TÁI SINH CHỒI, NHÂN NHANH VÀ RA RỄ CỦA CÂY GỪNG NÚI ĐÁ (Zingiber purpureum Roscoe) KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP ĐẠI HỌC Hệ đào tạo: Chính quy Chun ngành: Cơng nghệ Sinh học Khoa: CNSH-CNTP Khóa học: 2010-2014 Thái Nguyên, 2014 n ĐẠI HỌC THÁI NGUYÊN TRƯỜNG ĐẠI HỌC NÔNG LÂM PHẠM THỊ THỦY Tên đề tài: NGHIÊN CỨU ẢNH HƯỞNG CỦA MỘT SỐ CHẤT KÍCH THÍCH SINH TRƯỞNG ĐẾN KHẢ NĂNG TÁI SINH CHỒI, NHÂN NHANH VÀ RA RỄ CỦA CÂY GỪNG NÚI ĐÁ (Zingiber purpureum Roscoe) KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP ĐẠI HỌC Hệ đào tạo: Chính quy Chuyên ngành: Cơng nghệ Sinh học Khoa: CNSH-CNTP Khóa học: 2010-2014 Giảng viên hướng dẫn: PGS.TS Ngơ Xn Bình Khoa CNSH-CNTP - Trường Đại học Nông Lâm Thái Nguyên CN Vi Đại Lâm Khoa CNSH-CNTP - Trường Đại học Nông Lâm Thái Nguyên Thái Nguyên, năm 2014 n Lời cảm ơn Được đồng ý Ban Giám hiệu nhà trường, Ban Chủ nhiệm khoa Công nghệ Sinh học-Công nghệ Thực phẩm, thời gian thực tập em tiến hành thực đề tài “Nghiên cứu ảnh hưởng số chất kích thích sinh trưởng đến khả tái sinh chồi, nhân nhanh rễ Gừng Núi Đá (Zingiber purpureum Roscoe)” Kết thúc thời gian thực tập Phịng Thí nghiệm Khoa Cơng nghệ Sinh họcCơng nghệ Thực phẩm, đến em hồn thành đề tài tốt nghiệp Để đạt kết ngày hôm nay, em xin gửi lời cảm ơn chân thành tới Ban Giám hiệu Trường Đại học Nông Lâm Thái Nguyên, Ban Chủ nhiệm Khoa Công nghệ Sinh học-Công nghệ Thực phẩm thầy cô giáo Khoa tạo điều kiện tốt cho em suốt thời gian thực tập Em xin bày tỏ lòng biết ơn sâu sắc đến thầy giáo Ngơ Xn Bình giáo Nguyễn Thị Tình tận tình bảo, giúp đỡ hướng dẫn em thời gian thực đề tài Em xin cảm ơn thầy giáo Vi Đại Lâm kĩ sư Nguyễn Văn Hiền tạo điều kiện tốt cho em trình tiến hành hồn thành khóa luận Cuối cùng, em xin cám ơn gia đình tạo điều kiện vật chất tốt ln chỗ dựa tinh thần cho em trình thực tập; cảm ơn bạn bè giúp đỡ em thời gian vừa qua Do thời gian thực đề tài có hạn nên khơng thể tránh cịn nhiều thiếu sót, em mong nhận đóng góp ý kiến chân thành từ thầy cô bạn để đề tài hoàn thiện Em xin chân thành cảm ơn! Thái Nguyên, tháng năm 2014 Sinh viên Phạm Thị Thủy n DANH MỤC BẢNG Bảng 2.1 Thành phần 100 g phần củ ăn gừng Bảng 2.2 Diện tích, suất, sản lượng Gừng giới qua số năm (2006-2012) Bảng 2.3 Diện tích sản lượng trồng gừng số quốc gia giai đoạn 2010-2012 Bảng 2.4 Tổng giá trị xuất gừng số quốc gia giai đoạn 2008-2011 Bảng 2.5 Khối lượng giá trị nhập gừng số quốc gia qua năm (2004-2011) 10 Bảng 2.6 Tổng khối lượng giá trị xuất gừng Việt Nam qua năm (2000-2011) 11 Bảng 2.7 Các nguyên tố đa lượng dạng sử dụng 14 Bảng 4.1 Kết ảnh hưởng GA3 đến khả tái sinh chồi Gừng Núi Đá (sau 20 ngày) 28 Bảng 4.2 Kết ảnh hưởng GA3 kết hợp với BA đến khả tái sinh chồi Gừng Núi Đá (sau 20 ngày) 31 Bảng 4.3 Kết ảnh hưởng GA3 kết hợp với NAA đến khả tái sinh chồi Gừng Núi Đá (sau 20 ngày) 34 Bảng 4.4 Kết ảnh hưởng BA đến khả nhân nhanh Gừng Núi Đá (sau 40 ngày) 36 Bảng 4.5 Kết ảnh hưởng Kinetin đến khả nhân nhanh chồi Gừng Núi Đá (sau 40 ngày) 39 Bảng 4.6 Kết ảnh hưởng NAA đến khả rễ Gừng Núi Đá (sau 30 ngày) 41 Bảng 4.7 Kết ảnh hưởng NAA kết hợp với BA đến khả rễ Gừng Núi Đá (sau 30 ngày) 44 n DANH MỤC HÌNH Hình 2.1 Một số hình ảnh Gừng Núi Đá Hình 4.1 Ảnh hưởng GA3 đến khả tái sinh chồi Gừng Núi Đá (sau 20 ngày) 29 Hình 4.2 Ảnh hưởng GA3 kết hợp với BA đến khả tái sinh chồi Gừng Núi Đá (sau 20 ngày) 33 Hình 4.3 Ảnh hưởng GA3 kết hợp với NAA đến khả tái sinh chồi Gừng Núi Đá (sau 20 ngày) 35 Hình 4.4 Ảnh hưởng BA đến khả nhân nhanh Gừng Núi Đá (sau 40 ngày) 37 Hình 4.5 Ảnh hưởng Kinetin đến khả nhân nhanh Gừng Núi Đá (sau 40 ngày) 40 Hình 4.6 Ảnh hưởng NAA đến khả rễ Gừng Núi Đá (sau 30 ngày) 43 Hình 4.7 Ảnh hưởng NAA kết hợp với BA đến khả rễ Gừng Núi Đá (sau 30 ngày) 46 n DANH MỤC CÁC TỪ, CỤM TỪ VIẾT TẮT 2,4 D : 2,4 Diclorophenoxy acetic acid BA : 6-Benzylaminopurine Cs : Cộng CT : Công thức CV : Coeficient of Variation Đ/c : Đối chứng GA3 : Gibberellic acid IAA : Indole-3-acetic acid IBA : Indole butyric acid Kinetin : 6-Furfurylaminopurine LSD : Least Singnificant Difference Test MS : Murashige & Skoog (1962) MT : Môi trường NAA : α-naphthalene acetic acid TDZ : Thidiazuron n MỤC LỤC MỤC LỤC Phần MỞ ĐẦU 1.1 Đặt vấn đề 1.2 Mục đích đề tài 1.3 Yêu cầu đề tài 1.4 Ý nghĩa khoa học ý nghĩa thực tiễn đề tài Phần TỔNG QUAN TÀI LIỆU 2.1 Giới thiệu chung chi Gừng (Zingiber) 2.1.1 Nguồn gốc phân loại 2.1.1.1 Nguồn gốc 2.1.2 Đặc điểm thực vật học 2.1.3 Giới thiệu Gừng Núi Đá (Zingiber purpureum Roscoe) 2.1.4 Giá trị số loài thuộc chi Gừng (Zingiber) 2.1.4.1 Giá trị dinh dưỡng 2.1.4.2 Giá trị kinh tế 2.1.4.3 Giá trị y học 2.2 Tình hình sản xuất tiêu thụ Gừng giới Việt Nam 2.2.1 Tình hình sản xuất tiêu thụ gừng giới 2.2.1.1 Tình hình sản xuất gừng giới 2.2.2.2 Tình hình tiêu thụ gừng giới 2.2.2 Tình hình sản xuất tiêu thụ gừng Việt Nam 10 2.2 Khái niệm sở khoa học nuôi cấy mô-tế bào thực vật 11 2.2.1 Khái niệm 11 n 2.2.2 Cơ sở khoa học nuôi cấy mô-tế bào thực vật 12 2.2.2.1 Tính tồn tế bào 12 2.2.2.2 Sự phân hóa tế bào 12 2.2.2.3 Sự phản phân hóa tế bào 12 2.3 Một số yếu tố ảnh hưởng đến trình nuôi cấy mô tế bào thực vật 13 2.3.1 Vật liệu nuôi cấy 13 2.3.2 Điều kiện nuôi cấy 13 2.3.3 Môi trường dinh dưỡng 13 2.3.3.1 Nguồn Cacbon 14 2.3.3.2 Các nguyên tố khoáng đa lượng, vi lượng 14 2.3.3.3 Vitamin 15 2.3.3.4 Các chất hữu tự nhiên 15 2.3.3.5 Các thành phần khác 15 2.3.3.6 pH môi trường 15 2.3.3.7 Các chất điều hòa sinh trưởng 16 2.4 Tình hình nghiên cứu số thuộc chi Gừng (Zingiber) giới Việt Nam 17 2.4.1 Tình hình nghiên cứu giới 17 2.4.2 Tình hình nghiên cứu Việt Nam 19 Phần VẬT LIỆU, NỘI DUNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 21 3.1 Vật liệu, hóa chất thiết bị nghiên cứu 21 3.1.1 Vật liệu 21 3.1.2 Hóa chất sử dụng 21 3.1.3 Thiết bị nghiên cứu 21 3.2 Địa điểm thời gian nghiên cứu 21 n 3.2.1 Địa điểm nghiên cứu 21 3.2.2 Thời gian nghiên cứu 21 3.3 Nội dung nghiên cứu 22 3.3.1 Nội dung 1: Nghiên cứu ảnh hưởng số chất kích thích sinh trưởng (GA3, BA, NAA) đến khả tái sinh chồi Gừng Núi Đá (Zingiber purpureum Roscoe) 22 3.3.2 Nội dung 2: Nghiên cứu ảnh hưởng số chất kích thích sinh trưởng (BA, Kinetin) đến khả nhân nhanh Gừng Núi Đá (Zingiber purpureum Roscoe) 22 3.3.3 Nội dung 3: Nghiên cứu ảnh hưởng số chất kích thích sinh trưởng (NAA, BA) đến khả rễ Gừng Núi Đá (Zingiber purpureum Roscoe) 22 3.4 Phương pháp nghiên cứu 22 3.4.1 Phương pháp tạo vật liệu vô trùng 22 3.4.2 Phương pháp nghiên cứu nội dung 1: Nghiên cứu ảnh hưởng số chất kích thích sinh trưởng (GA3, BA, NAA) đến khả tái sinh chồi Gừng Núi Đá (Zingiber purpureum Roscoe) 23 3.4.2.1 Thí nghiệm 1: Nghiên cứu ảnh hưởng GA3 đến khả tái sinh chồi Gừng Núi Đá 23 3.4.2.1 Thí nghiệm 2: Nghiên cứu ảnh hưởng GA3 kết hợp với BA đến khả tái sinh chồi Gừng Núi Đá 24 3.4.2.3 Thí nghiệm 3: Nghiên cứu ảnh hưởng GA3 kết hợp với NAA đến khả tái sinh chồi Gừng Núi Đá 24 3.4.3 Phương pháp nghiên cứu nội dung 2: Nghiên cứu ảnh hưởng số chất kích thích sinh trưởng (BA, Kinetin) đến khả nhân nhanh Gừng Núi Đá (Zingiber purpureum Roscoe) 24 3.4.3.1 Thí nghiệm 4: Nghiên cứu ảnh hưởng BA đến khả nhân nhanh chồi Gừng Núi Đá 25 n 3.4.3.2 Thí nghiệm 5: Nghiên cứu ảnh hưởng Kinetin đến khả nhân nhanh chồi Gừng Núi Đá 25 3.4.4 Phương pháp nghiên cứu nội dung 3: Nghiên cứu ảnh hưởng số chất kích thích sinh trưởng (NAA, BA) đến khả rễ Gừng Núi Đá (Zingiber purpureum Roscoe) 26 3.4.4.1 Thí nghiệm 6: Nghiên cứu ảnh hưởng NAA đến khả rễ Gừng Núi Đá 26 3.4.4.2 Thí nghiệm 7: Nghiên cứu ảnh hưởng NAA kết hợp với BA đến khả rễ Gừng Núi Đá 26 3.5 Phương pháp đánh giá xử lý số liệu 27 Phần KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU VÀ THẢO LUẬN 28 4.1 Nghiên cứu ảnh hưởng số chất kích thích sinh trưởng đến khả tái sinh chồi Gừng Núi Đá 28 4.1.1 Kết ảnh hưởng GA3 đến khả tái sinh chồi Gừng Núi Đá (Zingiber purpureum Roscoe) 28 4.1.2 Kết ảnh hưởng GA3 kết hợp với BA đến khả tái sinh chồi Gừng Núi Đá (Zingiber purpureum Roscoe) 31 4.1.3 Kết ảnh hưởng GA3 kết hợp với NAA đến khả tái sinh chồi Gừng Núi Đá (Zingiber purpureum Roscoe) 33 4.1.4 Kết ảnh hưởng BA đến khả nhân nhanh Gừng Núi Đá (Zingiber purpureum Roscoe) 36 4.1.5 Kết ảnh hưởng Kinetin đến khả nhân nhanh Gừng Núi Đá (Zingiber purpureum Roscoe) 38 4.1.6 Kết ảnh hưởng NAA đến khả rễ Gừng Núi Đá (Zingiber purpureum Roscoe) 41 4.1.7 Kết ảnh hưởng NAA kết hợp với BA đến khả rễ Gừng Núi Đá (Zingiber purpureum Roscoe) 44 Phần KẾT LUẬN VÀ ĐỀ NGHỊ 47 n 46 CT (NAA 0,5 mg/l + BA 0,0 mg/l) cho tỷ lệ rễ thấp (73,33%), rễ trung bình CT (NAA 0,5 mg/l + BA 0,5 mg/l) cho tỷ lệ rễ 80%, rễ tốt CT (NAA 0,5 mg/l + BA 1,0 mg/l) cho tỷ lệ rễ 90%, rễ tốt CT (NAA 0,5 mg/l + BA 2,0 mg/l) cho tỷ lệ rễ cao 96,67%, rễ phát triển tốt Hình 4.7 Ảnh hưởng NAA kết hợp với BA đến khả rễ Gừng Núi Đá (sau 30 ngày) n 47 Phần KẾT LUẬN VÀ ĐỀ NGHỊ 5.1 Kết luận Từ thực tế tiến hành thí nghiệm kết thu được, em đưa số kết luận sau: - Môi trường tốt cho tái sinh chồi Gừng Núi Đá (Zingiber officinale Roscoe) mơi trường có mặt GA3 0,5 mg/l kết hợp với BA 1,0 mg/l cho tỷ lệ tái sinh đạt 93,33%, chất lượng chồi tốt, chồi mập - Khả nhân nhanh chồi tốt mơi trường có BA 4,0 mg/l hệ số nhân chồi đạt 2,8 lần, chồi xanh, mập, phát triển tốt - Mơi trường có bổ sung NAA 0,5 mg/l kết hợp với BA 2,0 mg/l tốt cho rễ Gừng Núi Đá (Zingiber officinale Roscoe), tỷ lệ rễ đạt 96,67%, rễ dài, nhiều lông hút 5.2 Đề nghị Để tiếp tục hồn thiện quy trình nhân giống in vitro Gừng Núi Đá (Zingiber officinale Roscoe) em xin có số kiến nghị sau: - Tiếp tục nghiên cứu ảnh hưởng chất kích thích sinh trưởng khác tới khả tái sinh chồi, nhân nhanh rễ Gừng Núi Đá (Zingiber officinale Roscoe) - Tiếp tục nghiên cứu ảnh hưởng số yếu tố khác tới q trình ni cấy nhằm hồn thiện quy trình nhân giống in vitro Gừng Núi Đá (Zingiber officinale Roscoe) - Tách chiết nghiên cứu tác dụng hợp chất Gừng Núi Đá (Zingiber officinale Roscoe) n 48 TÀI LIỆU THAM KHẢO Tài liệu Tiếng Việt Nguyễn Quốc Bình (1994), Tạp chí Sinh học, 16(4), 143-145 Nguyễn Quốc Bình (1995), Tạp chí Sinh học, 17(4), 135-137 Võ Văn Chi (2004), Từ điển thực vật thông dụng-tập 2, Nxb Khoa học Kĩ thuật Trịnh Đình Đạt (2007), Công nghệ sinh học, tập bốn-Công nghệ di truyền, Nxb Giáo dục Phạm Văn Hai Đinh Thị Diệu Trang (2011), “Nghiên cứu xác định thành phần hóa học thân rễ Gừng dại tỉnh Bình Định”, Tạp chí Khoa học Cơng nghệ, 1(42), p 117-124 Trần Thị Việt Hoa, Trần Thị Phương Thảo, Vũ Thị Thanh Tâm (2007), Tạp chí phát triển Khoa học Cơng nghệ, tập 10, số 04-200 Đặng Văn Hồi, Phan Văn Hồ Nam, Võ Thị Bạch Huệ (2011), “So sánh thành phần tinh dầu gừng dại gừng trâu thuộc chi Zingiber họ Gừng (Zingiberaceae)”, Tạp chí Y học Thành phố Hồ Chí Minh, 4(1): 16-21 Nguyễn Thanh Huệ, Trịnh Minh Khang, Nguyễn Tấn Hoàng Sơn, Nguyễn Thị Bích Thuyền (2012), “Khảo sát thành phần hóa học hoạt tính kháng vi sinh vật tinh dầu gừng (Zingiber officinale Rosc) tinh dầu tiêu (Piper nigrum L)”, Tạp chí Khoa học, 21a, trang 139-143 Nguyễn Như Khanh, Nguyễn Văn Đính (2011), Giáo trình chất điều hòa sinh trưởng thực vật, Nxb Giáo dục Việt Nam 10 Hà Thành Kiên (2011), “Thuyết minh đề tài nghiên cứu khoa học phát triển công nghệ Ứng dụng khoa học công nghệ nhân giống Gừng đá phương pháp nuôi cấy mô tế bào”, Trung tâm ứng dụng tiến KH CN, Sở KH CN tỉnh Lạng Sơn n 49 11 Trần Thị Lệ, Trương Thị Bích Phượng, Trần Thị Triêu Hà (2008), Giáo trình Công nghệ sinh học thực vật, Nxb Nông nghiệp, Hà Nội 12 Đặng Ngọc Phúc, Nguyễn Thanh Tùng, Dương Thị Thùy Châu, Trương Thị Bích Phượng (2011), “Nhân giống in vitro sa nhân tím (Amomum longiligulare T.L.Wu)”, Tạp chí Cơng nghệ Sinh học, 9(4A): 689-698 13 Hồng Thị Sản (2006), Phân loại học thực vật, Nxb Đại học Sư phạm 14 Nguyễn Kim Thanh, Nguyễn Thuận Châu (2005), Giáo trình sinh lý học thực vật, Nxb Giáo dục, Hà Nội 15 Nguyễn Thị Huyền Trang, Lê Thị Thủy Tiên (2012), “Tăng hệ số nhân nhanh chồi hoa Salem tím (Limonium sinuatum L Mill) cách sử dụng kết hợp chất điều hòa sinh trưởng thực vật adenine ni cấy in vitro”, Tạp chí sinh học, 34, 219-226 16 Võ Châu Tuấn (2014), “Nghiên cứu nuôi cấy mô tế bào nghệ đen (Curcuma zedoaria Roscoe) khảo sát khả tích lũy số hợp chất có hoạt tính sinh học chúng”, Luận án tiến sĩ, Đại học Khoa học-Đại học Huế 17 Vũ Văn Vụ, Nguyễn Mộng Hùng, Lê Hồng Điệp (2009), Công nghệ sinh học tập 2-Công nghệ sinh học tế bào, Nxb Giáo dục 18 Quyết định 80/2005/QĐ-BNN Bộ Nông nghiệp Phát triển nông thôn 19 Quyết định số 56/2007/QĐ-BNN năm 2007 “Về việc bổ sung 12 loài trồng vào danh mục loài trồng bảo hộ phân công đơn vị thực khảo nghiệm DUS” Tài liệu Tiếng Anh 20 Adinkudik K Lincy, Azhimala B Remashree, Bhaskaran Sasikumar (2009), “Indirect and direct somatic embryogenesis from aerial stem explant of ginger (Zingiber officinale Roscoe), Acta Bot Croat., 68(1), p.93-103 21 A K Goyal, K Ganguly, T Mishra and A Sen (2010), “In vitro multiplication of Curcuma longa Linn.-an important medicinal zingiber”, NBU Journal of Plant Sciences, 4, p.21-24 n 50 22 Anwar Hossain, Lutful Hassan, Abdul Khaleq Patwary, M Sultan Mia, Syed Dilnawaz Ahmad, Asad Hussain Shah and Farhat Batool (2010), ‘Establishment of a suitable and reproducible protocol for in vitro regeneration of ginger (Zingiber officinale Roscoe)”, Pak J Bot., 42(2), p.1065-1074 23 Arora Manesha, Punetha H , Prakash Om, Gaur A K , Pant A K (2012), “Optimization of in vitro Regeneration Schedule of Zingiber Chrysanthum Rosc Plantlets from Rhizome bud explants”, International Journal of Agriculture, Enviroment and Biotechnology, 5(2), p.83-88 24 B Ayenew, W Tefera, B Kassahun (2012), “In vitro propagation of Ethiopian ginger (Zingiber officinale Rosc.) cultivars: Evaluation of explant types and hormone combinations”, African Journal of Biotechnology, 11(16), p.39113918 25 Christine Stanley and Chan Lai Keng (2007), “Micropropagation of Curcuma zedoaria Roscoe and Zingiber zerumbet Smith”, Biotechnology, 6(4), p.555560 26 Chukwuemeka Kanu Nkere, Egbichi Nnenna Adaoha Mbanaso (2010), “Optimizing concentrations of growth regulators for in-vitro ginger propagation”, Journal of Agrobiology, 27(2), p.61-65 27 FAOSTAT (2014), http://faosat.fao.org/ 28 Josue Jack F Malamug, Haruhisa Inden, Tadashi Asahira (1991), “Plantlet regeneration and propagation from ginger callus”, Scientia Horticulturae, 48(1-2), p.89-97 29 J R Rout, S K Palai, S Samantaray and P Das (2001), “Effect of growth regulator and culture conditions on shoot multiplication and rhizome formation in ginger (Zingiber officinale Rosc.) in vitro”, In vitro Cell Dev Biol.-Plant, 37, p.814-819 30 J R Rout, Santi Lata Sahoo and Ritarani Das (2011), “An attempt to conserve Withania somnifera (L.) Dunal-a highly essential medicinal plant, through in vitro culture”, Pak J Bot., 43(4), p.1837-1842 n 51 31 Kambaska, K.B and Santitala, S (2009), “Effect of plant growth regulator on micropropagation of ginger (Zingiber officinale Rosc.) cv-Suprava and Suruchi”, Journal of Agricultural Technology, 5(2), p.271-280 32 Kambaska Kumar Behera, Debashrita Pani and Santilata Sahoo (2010), “Effect of Plant Growth Regulator on In vitro Multiplication of Turmeric (Curcuma longa L cv.Ranga)”, International Journal of Biological Technology, 1(1), p.16-23 33 M Chithra, K P Martin, C Sunandakumari, P V Madhusoodanan (2005), “Protocol for rapid propagation, and to overcome delayed rhizome formation in field established in vitro derived plantlets of Kaempferia galanga L”, Scientia Horticulturae, 104, p.113-120 34 M N Hamirah, H B Sani, P C Boyce and S L Sim (2010), “Micropropagation of Red ginger (Zingiber montanum Koenig), a medicinal plant”, AsPac J Mol Biol, 18(1), p.127-130 35 Mohamed S Abbas, Hussein S Taha, Usama I Aly, Hattem M El-Shabrawi, El-Sayed I Gaber (2011), “In vitro propagation of ginger (Zingiber officinale Rosco)”, Journal of Genetic Engineering and Biotechnology, 9, p.165-172 36 Mrudul V Shirgurkar, C K John and Rajani S Nadgauda (2001), “Factors affecting in vitro microrhizome production in turmeric”, Plant Cell, Tissue and Organ Culture, 64, p.5-11 37 Muhammad Shahinozzaman, Muhammad Omar Faruq, Mustafa Abul Kalam Azad and Muhammad Nurul Amin (2013), “Studies on in vitro propagation of an important medicinal plant-Curcuma zedoaria Roscoe using rhizome explants”, Persian Gulf Crop Protection, 2(4), p.1-6 38 Noguchi, Y and O Yamakawa (1988), “Rapid clonal propagation of ginger (Zingiber officinale Rosc.), Japan J Breed, 38, p.437-442 39 P N Ravindran and K Nirmal Babu (2005), Ginger: The Genus Zingiber, CRC Press 40 Q Z Faridah, A H A Abdelmageed, A A Julia, R Nor Hafizah (2011), “Efficient in vitro regeneration of Zingiber zerumbet Smith (a valuable n 52 medicinal plant) plantlets from rhizome bud explants”, African Journal of Biotechnology, 10(46), p.9303-9308 41 S M Balachandran, S R Bhat, K P S Chandel (1990), “In vitro clonal multiplication of Turmeric (Curcuma spp.) and Ginger (Zingiber officinale Rosc.)”, Plant Cell Report, 8, p.521-524 42 Thayamini H Seran (2014), “In vitro Propagation of Ginger (Zingiber officinale Rosc.) through Direct Organogenesis: A Review”, Pakistan Journal of Biological Sciences, p.1-10 43 Toshi Masuda and Akiko Jitoe (1994), “Antioxidative and Antiinflammatory Compounds from Tropical Gingers: Isolation, Structure Determination, and Activities of Cassumunins A, B, and C, New Complex Curcuminoids from Zingiber cassumunar”, 42(9), p.1850-1856 44 T R Sharma, B M Singh (1997), “High-frequency in vitro multiplication of disease-free Zingiber officinale Rosc.”, Plant Cell Report, 17, p.68-72 45 USDA (2014), http://ndb.nal.usda.gov/ 46 Yongqiang Zheng, Yanmei Liu, Mi Ma, Kun Xu (2008), “ Increasing in vitro microrhizome production of ginger (Zingiber officinale Roscoe)”, Acta Physiol Plant, 30, p.513-519 n PHỤ LỤC 1: MÔI TRƯỜNG NUÔI CẤY Table 1: Preparation of modified Murashige and Skoog’s (MS medium) Bottle I II III IV V Vitamin Component NH4NO3 KNO3 MgSO4.7H2O MnSO4.4H2O ZnSO4.7H2O CuSO4.5H2O CaCl2.2H2O KI CoCl2.6H2O KH2PO4 H3BO4 Na2MoO4.2H2O FeSO4.7H2O Na2EDTA.2H2O Nicotinic acid Glycine Thiamine acid Pyridocine HCl Stock Solution (g/l 82,5 95 37 2,23 1,058 0,0025 44 0,083 0,0025 17 0,62 0,025 2,784 3,724 mg/100ml 100 100 100 100 Amount to take preparation (ml) 20 10 10 10 10 0,5 2,0 0,1 0,5 Final concentratic (mg/l) 1.650,0 1.900,0 370,0 22,3 10,6 0,025 440,0 0,83 0,025 170,0 6,2 0,25 27,85 37,25 0,5 2,0 0,1 0,5 Sucrose 20.0000,0 Agar 5.000,0 pH 5,6-5,8 n PHỤ LỤC 2: KẾT QUẢ XỬ LÝ SỐ LIỆU Thí nghiệm 1: Kết ảnh hưởng GA3 đến khả tái sinh chồi Gừng núi (sau 20 ngày) BALANCED ANOVA FOR VARIATE T.SINH FILE TNG 11 29/ 5/14 10:13 :PAGE anh huong cua GA3 den kha nang tai sinh choi VARIATE V003 T.SINH LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= CT$ 2026.13 506.533 44.21 0.000 * RESIDUAL 10 114.565 11.4565 * TOTAL (CORRECTED) 14 2140.70 152.907 TABLE OF MEANS FOR FACTORIAL EFFECTS FILE TNG 11 29/ 5/14 10:13 :PAGE anh huong cua GA3 den kha nang tai sinh choi MEANS FOR EFFECT CT$ CT$ NOS 3 3 T.SINH 50.0000 60.0000 83.3300 56.6700 70.0000 SE(N= 3) 1.95418 5%LSD 10DF 6.15770 ANALYSIS OF VARIANCE SUMMARY TABLE FILE TNG 11 29/ 5/14 10:13 :PAGE anh huong cua GA3 den kha nang tai sinh choi F-PROBABLIITY VALUES FOR EACH EFFECT IN THE MODEL SECTION - VARIATE T.SINH GRAND MEAN (N= 15) NO OBS 15 64.000 STANDARD DEVIATION C OF V |CT$ SD/MEAN | BASED ON BASED ON % | TOTAL SS RESID SS | 12.366 3.3847 5.3 0.0000 n | | | | Thí nghiệm 2: Kết ảnh hưởng GA3 kết hợp với BA đến khả tái sinh chồi Gừng núi (sau 20 ngày) BALANCED ANOVA FOR VARIATE T.SINH FILE TNG 23 29/ 5/14 10:58 :PAGE anh huong cua GA3 vva BA den tai sinh choi VARIATE V003 T.SINH LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= CT$ 1291.13 430.378 41.42 0.000 * RESIDUAL 83.1266 10.3908 * TOTAL (CORRECTED) 11 1374.26 124.933 TABLE OF MEANS FOR FACTORIAL EFFECTS FILE TNG 23 29/ 5/14 10:58 :PAGE anh huong cua GA3 vva BA den tai sinh choi MEANS FOR EFFECT CT$ CT$ NOS 3 3 T.SINH 66.6700 70.0000 93.3300 80.0000 SE(N= 3) 1.86108 5%LSD 8DF 6.06879 ANALYSIS OF VARIANCE SUMMARY TABLE FILE TNG 23 29/ 5/14 10:58 :PAGE anh huong cua GA3 vva BA den tai sinh choi F-PROBABLIITY VALUES FOR EACH EFFECT IN THE MODEL SECTION - VARIATE T.SINH GRAND MEAN (N= 12) NO OBS 12 77.500 STANDARD DEVIATION C OF V |CT$ SD/MEAN | BASED ON BASED ON % | TOTAL SS RESID SS | 11.177 3.2235 4.2 0.0001 n | | | | Thí nghiệm 3: Kết ảnh hưởng GA3 kết hợp với NAA đến khả tái sinh chồi Gừng núi (sau 20 ngày) BALANCED ANOVA FOR VARIATE T.SINH FILE TNG 29/ 5/14 11: :PAGE anh huong cua GA3 va NAA den tai sinh choi VARIATE V003 T.SINH LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= CT$ 891.533 297.178 16.95 0.001 * RESIDUAL 140.236 17.5295 * TOTAL (CORRECTED) 11 1031.77 93.7972 TABLE OF MEANS FOR FACTORIAL EFFECTS FILE TNG 29/ 5/14 11: :PAGE anh huong cua GA3 va NAA den tai sinh choi MEANS FOR EFFECT CT$ CT$ NOS 3 3 T.SINH 63.3300 70.0000 80.0000 56.6700 SE(N= 3) 2.41726 5%LSD 8DF 7.88244 ANALYSIS OF VARIANCE SUMMARY TABLE FILE TNG 29/ 5/14 11: :PAGE anh huong cua GA3 va NAA den tai sinh choi F-PROBABLIITY VALUES FOR EACH EFFECT IN THE MODEL SECTION - VARIATE T.SINH GRAND MEAN (N= 12) NO OBS 12 67.500 STANDARD DEVIATION C OF V |CT$ SD/MEAN | BASED ON BASED ON % | TOTAL SS RESID SS | 9.6849 4.1868 6.2 0.0010 n | | | | Thí nghiệm 4: Kết ảnh hưởng BA đến khả nhân nhanh chồi Gừng núi (sau 40 ngày) BALANCED ANOVA FOR VARIATE NNHANH FILE TNG 42 4/ 6/14 9:37 :PAGE anh huong cua BA den kha nang nhan nhanh VARIATE V003 NNHANH LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= CT$ 4.55136 1.13784 281.64 0.000 * RESIDUAL 10 404005E-01 404005E-02 * TOTAL (CORRECTED) 14 4.59176 327983 TABLE OF MEANS FOR FACTORIAL EFFECTS FILE TNG 42 4/ 6/14 9:37 :PAGE anh huong cua BA den kha nang nhan nhanh MEANS FOR EFFECT CT$ CT$ NOS 3 3 NNHANH 1.17000 1.60000 1.90000 2.20000 2.80000 SE(N= 3) 0.366972E-01 5%LSD 10DF 0.115634 ANALYSIS OF VARIANCE SUMMARY TABLE FILE TNG 42 4/ 6/14 9:37 :PAGE anh huong cua BA den kha nang nhan nhanh F-PROBABLIITY VALUES FOR EACH EFFECT IN THE MODEL SECTION - VARIATE NNHANH GRAND MEAN (N= 15) NO OBS 15 1.9340 STANDARD DEVIATION C OF V |CT$ SD/MEAN | BASED ON BASED ON % | TOTAL SS RESID SS | 0.57270 0.63561E-01 3.3 0.0000 n | | | | Thí nghiệm 5: Kết ảnh hưởng Kinetin đến khả nhân nhanh chồi Gừng núi (sau 40 ngày) BALANCED ANOVA FOR VARIATE NNHANH FILE TNG 53 4/ 6/14 10: :PAGE anh huong cua kienetin den nhan nhanh VARIATE V003 NNHANH LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= CT$ 2.83044 707610 170.10 0.000 * RESIDUAL 10 415996E-01 415996E-02 * TOTAL (CORRECTED) 14 2.87204 205146 TABLE OF MEANS FOR FACTORIAL EFFECTS FILE TNG 53 4/ 6/14 10: :PAGE anh huong cua kienetin den nhan nhanh MEANS FOR EFFECT CT$ CT$ NOS 3 3 NNHANH 1.00000 1.27000 1.50000 2.30000 1.47000 SE(N= 3) 0.372378E-01 5%LSD 10DF 0.117338 ANALYSIS OF VARIANCE SUMMARY TABLE FILE TNG 53 4/ 6/14 10: :PAGE anh huong cua kienetin den nhan nhanh F-PROBABLIITY VALUES FOR EACH EFFECT IN THE MODEL SECTION - VARIATE NNHANH GRAND MEAN (N= 15) NO OBS 15 1.5080 STANDARD DEVIATION C OF V |CT$ SD/MEAN | BASED ON BASED ON % | TOTAL SS RESID SS | 0.45293 0.64498E-01 4.3 0.0000 n | | | | Thí nghiệm Kết ảnh hưởng NAA đến khả rễ Gừng núi (sau 30 ngày) BALANCED ANOVA FOR VARIATE RARE FILE TNG 29/ 5/14 11:37 :PAGE anh huong cua NAA den re VARIATE V003 RARE LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= CT$ 2306.93 576.733 48.87 0.000 * RESIDUAL 10 118.012 11.8012 * TOTAL (CORRECTED) 14 2424.94 173.210 TABLE OF MEANS FOR FACTORIAL EFFECTS FILE TNG 29/ 5/14 11:37 :PAGE anh huong cua NAA den re MEANS FOR EFFECT CT$ CT$ NOS 3 3 RARE 50.0000 86.6700 73.3300 70.0000 60.0000 SE(N= 3) 1.98336 5%LSD 10DF 6.24964 ANALYSIS OF VARIANCE SUMMARY TABLE FILE TNG 29/ 5/14 11:37 :PAGE anh huong cua NAA den re F-PROBABLIITY VALUES FOR EACH EFFECT IN THE MODEL SECTION - VARIATE RARE GRAND MEAN (N= 15) NO OBS 15 68.000 STANDARD DEVIATION C OF V |CT$ SD/MEAN | BASED ON BASED ON % | TOTAL SS RESID SS | 13.161 3.4353 5.1 0.0000 n | | | | Thí nghiệm 7: Kết ảnh hưởng NAA kết hợp với BA đến khả rễ Gừng núi (sau 30 ngày) BALANCED ANOVA FOR VARIATE RARE FILE TNG 29/ 5/14 11:42 :PAGE anh huong cua NAA va BA den re VARIATE V003 RARE LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= CT$ 967.133 322.378 23.28 0.000 * RESIDUAL 110.765 13.8456 * TOTAL (CORRECTED) 11 1077.90 97.9907 TABLE OF MEANS FOR FACTORIAL EFFECTS FILE TNG 29/ 5/14 11:42 :PAGE anh huong cua NAA va BA den re MEANS FOR EFFECT CT$ CT$ NOS 3 3 RARE 73.3300 80.0000 90.0000 96.6700 SE(N= 3) 2.14830 5%LSD 8DF 7.00539 ANALYSIS OF VARIANCE SUMMARY TABLE FILE TNG 29/ 5/14 11:42 :PAGE anh huong cua NAA va BA den re F-PROBABLIITY VALUES FOR EACH EFFECT IN THE MODEL SECTION - VARIATE RARE GRAND MEAN (N= 12) NO OBS 12 85.000 STANDARD DEVIATION C OF V |CT$ SD/MEAN | BASED ON BASED ON % | TOTAL SS RESID SS | 9.8990 3.7210 4.4 0.0004 n | | | | ... THỊ THỦY Tên đề tài: NGHIÊN CỨU ẢNH HƯỞNG CỦA MỘT SỐ CHẤT KÍCH THÍCH SINH TRƯỞNG ĐẾN KHẢ NĂNG TÁI SINH CHỒI, NHÂN NHANH VÀ RA RỄ CỦA CÂY GỪNG NÚI ĐÁ (Zingiber purpureum Roscoe) KHÓA LUẬN TỐT... ảnh hưởng số chất kích thích sinh trưởng (GA3, BA, NAA) đến khả tái sinh chồi Gừng Núi Đá (Zingiber purpureum Roscoe) -Nghiên cứu ảnh hưởng GA3 đến khả tái sinh chồi Gừng Núi Đá - Nghiên cứu ảnh. .. QUẢ NGHIÊN CỨU VÀ THẢO LUẬN 4.1 Nghiên cứu ảnh hưởng số chất kích thích sinh trưởng đến khả tái sinh chồi Gừng Núi Đá 4.1.1 Kết ảnh hưởng GA3 đến khả tái sinh chồi Gừng Núi Đá (Zingiber purpureum