Nghiên cứu thành phần hóa học và hoạt tính sinh học của hai loài an xoa (helicteres hirsuta) và màng kiêng (pterospermum truncatolobatum) thuộc họ trôm (sterculiaceae) tại việt nam

BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO TRƯỜNG ĐẠI HỌC SƯ PHẠM HÀ NỘI LÊ THỊ KHÁNH LINH NGHIÊN CỨU THÀNH PHẦN HĨA HỌC VÀ HOẠT TÍNH SINH HỌC CỦA HAI LOÀI AN XOA (HELICTERES HIRSUTA) VÀ MÀNG KIÊNG (PTEROSPERMUM TRUNCATOLOBATUM) THUỘC HỌ TRÔM (STERCULIACEAE) TẠI VIỆT NAM LUẬN ÁN TIẾN SĨ HÓA HỌC Hà Nội - 2022 BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO TRƯỜNG ĐẠI HỌC SƯ PHẠM HÀ NỘI LÊ THỊ KHÁNH LINH NGHIÊN CỨU THÀNH PHẦN HÓA HỌC VÀ HOẠT TÍNH SINH HỌC CỦA HAI LỒI AN XOA (HELICTERES HIRSUTA) VÀ MÀNG KIÊNG (PTEROSPERMUM TRUNCATOLOBATUM) THUỘC HỌ TRÔM (STERCULIACEAE) TẠI VIỆT NAM Chuyên ngành: Hóa học Hữu Mã số: 9.44.01.14 LUẬN ÁN TIẾN SĨ HÓA HỌC NGƯỜI HƯỚNG DẪN KHOA HỌC: PGS TS ĐẶNG NGỌC QUANG PGS TS PHẠM HỮU ĐIỂN Hà Nội – 2022 MỤC LỤC LỜI CAM ĐOAN LỜI CẢM ƠN MỤC LỤC DANH MỤC CHỮ VIẾT TẮT MỞ ĐẦU CHƯƠNG TỔNG QUAN 1.1 Thực vật họ Trôm 1.1.1 Giới thiệu chung 1.1.2 Thành phần hóa học họ Trơm 1.2 Thực vật chi Helicteres họ Trôm 1.2.1 Giới thiệu chung 1.2.2 Thành phần hóa học thực vật chi Thâu kén 1.2.3 Ứng dụng thực vật chi Helicteres 14 1.2.4 Cây An xoa 15 1.3 Thực vật chi Pterospermum họ Trôm 20 1.3.1 Giới thiệu chung 20 1.3.2 Thành phần hóa học 21 1.3.3 Ứng dụng chi Pterospermum 23 1.3.4 Cây Màng kiêng 24 1.4 Phương pháp Docking chất ức chế MUS81 25 1.4.1 Phương pháp Docking 25 1.4.2 Các chất ức chế wMUS81 26 CHƯƠNG PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU VÀ THỰC NGHIỆM 28 2.1 Phương pháp nghiên cứu 28 2.1.1 Thu thập mẫu 28 2.1.2 Phương pháp xử lý tạo cao chiết 28 2.1.3 Phương pháp xác định cấu trúc hợp chất 29 2.1.4 Phương pháp nghiên cứu hoạt tính sinh học 29 2.1.5 Phương pháp Docking 29 2.1.6 Thiết bị, dụng cụ hóa chất 29 2.2 Thực nghiệm 30 2.2.1 Cây An xoa 30 2.2.2 Cây Màng kiêng 40 2.2.3 Phương pháp mô docking phân tử với wMUS81 44 CHƯƠNG KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 47 3.1 Cây An xoa 47 3.1.1 Xác định cấu trúc hợp chất 47 3.1.2 Hoạt tính sinh học cao chiết 80 3.1.3 Hoạt tính gây độc tế bào ung thư chất 82 3.2 Cây Màng kiêng 83 3.2.1 Xác định cấu trúc hợp chất 83 3.2.2 Hoạt tính sinh học cao chiết 110 3.2.3 Hoạt tính gây độc tế bào ung thư chất 110 3.3 Kết docking triterpenoid với protein wMUS81 111 KẾT LUẬN 115 DANH MỤC CƠNG TRÌNH CÔNG BỐ CỦA LUẬN ÁN 117 TÀI LIỆU THAM KHẢO 118 MỞ ĐẦU Ô nhiễm môi trường dẫn đến việc phát sinh loại bệnh dịch bệnh ung thư, AIDS, COVID-19… chưa tìm thuốc đặc trị Trong công bố Tổ chức Y tế giới, năm 2020 tồn cầu có 19,3 triệu người mắc ung thư, 9,96 triệu người chết ung thư Hằng năm Việt Nam có khoảng 70000 người chết bệnh ung thư có khoảng 200000 ca mắc Do đó, việc tạo loại thuốc mới, có hiệu chữa trị nhiều loại bệnh tật điều cần thiết Để đáp ứng nhu cầu đó, việc nghiên cứu hóa thực vật ý, thu hút quan tâm rộng rãi nhà khoa học Điển việc tìm taxol từ Thơng đỏ, vinblastine vincristine từ Dừa cạn…ứng dụng làm thuốc chữa ung thư Việt Nam quốc gia có tính đa dạng sinh học cao với gần 12000 loài thực vật bậc cao thuộc 2256 chi, 305 họ (4% tổng số loài, 15% tổng số, 75% tổng số họ thực vật lớn) Hệ thực vật rừng không mệnh danh xanh điều hịa khí hậu mà cịn mang đến tiềm to lớn thuốc đóng vai trò nòng cốt việc bảo vệ sức khỏe hạnh phúc cộng đồng giới Với số lượng lớn vậy, nhiều thuốc xa lạ với người dân người dân chưa có kiến thức đầy đủ tác dụng cách sử dụng Trong tìm hiểu loại thảo dược lưu truyền từ đời sang đời khác Việt Nam, nhân dân ta sử dụng lồi thực vật họ Trơm (Sterculiaceae) để điều trị hiệu nhiều bệnh khác Trong dân gian, An xoa (Helicteres hirsuta) thuộc chi Thâu kén họ Trôm (Sterculiaceae) sử dụng để điều trị bệnh kiết lỵ, bệnh sởi, Một ứng dụng đáng ý khác loại chữa bệnh liên quan đến gan tốt Tuy nhiên, nghiên cứu hóa thực vật chúng hạn chế Cây Màng kiêng (Pterospermum truncatolobatum) số lồi thuộc chi Pterospermum họ Trôm (Sterculiaceae) phát Việt Nam Cho đến nay, Màng kiêng nhắc đến phân loại thực vật Trên giới, số hoạt chất phân lập từ loài thuộc chi Helicteres chi Pterospermum Tại Việt Nam, cơng trình nghiên cứu hóa dược hai lồi cịn hạn chế Kết khảo sát cho thấy cao chiết hai loài có khả ức chế phát triển tế bào KB mức mạnh Vì vậy, “Nghiên cứu thành phần hóa học hoạt tính sinh học hai loài An xoa (Helicteres hirsuta) Màng kiêng (Pterospermum truncatolobatum) thuộc họ Trôm (Sterculiaceae) Việt Nam” đề tài luận án CHƯƠNG 1.1 TỔNG QUAN Thực vật họ Trôm 1.1.1 Giới thiệu chung Họ Trơm (Sterculiaceae) có 68 chi với khoảng 1100 loài phân bố chủ yếu vùng nhiệt đới, cận nhiệt ơn đới [1], có chi Helicteres, Pterospermum Vào năm 1807, E P Ventenat ex Salisbury tìm họ Trơm Cho đến nay, vài cơng trình nghiên cứu phân loại chi họ Trơm Backer C A (1963), Feng K M (1984), Chamlong Pengklai (2001) [2], [3], [4] Ở Việt Nam, GS Võ Văn Chi ghi nhận họ Trơm có 15 chi với 34 lồi làm thuốc [5] Thực vật họ Trôm thân bụi thân gỗ Vỏ thân thường tiết chất nhầy kéo thành sợi Ở số lồi, có khác hình thái non với trưởng thành Ngoài tùy tuổi cây, chúng có nhiều hình dạng, kích thước khác thường rụng sớm Hoa loài mọc đơn độc thành cụm, thường có lơng [6] 1.1.2 Thành phần hóa học họ Trôm Theo thống kê đến năm 2015, gần 200 hợp chất tinh từ họ Trơm Chúng phân loại thành nhóm hợp chất alkaloid, phenyl propanoid, flavonoid, terpenoid hợp chất khác hydrocarbon, quinone, đường, lactone, phenolic, lignan, amide amine với số hoạt tính sinh học đáng ý khả gây độc tế bào, kháng sinh, kháng viêm, chống oxi hóa [7] Cụ thể sau: Nhóm 1: Các hợp chất alkaloid Alkaloid họ Trơm có khung quinolone, cyclopeptide, pseudooxindol purine,… Trong đó, cyclopeptide hợp chất chi Melochia Ví dụ, scutianine B (1) melanovine A (2) tìm thấy rễ loài Melochia tomentosa thu hái Curacao [8] Sau đó, ba cyclopeptide alkaloid khác frangufoline (3) franganine (4) phát loài Melochia corchorifolia Ấn Độ [9] O O O O O O NH HN NH HN HN HN O O N N Ngoài ra, hợp chất waltherione A (5) alkaloid tách từ rễ M chamaedrys thân Waltheria douradinha thu hái Brazil [10], [11] Cũng từ loài Waltheria douradinha này, ba alkaloid (6-8) phân lập [12] O O O O O O O O OH OH N H N H O O O O N H OH N H Năm 1978, hợp chất quinolone alkaloid melovinone (3,7,8trimethoxy-2-methyl-5(5’-phenylpentyl)-4-quinolinone, 9) chất cũ (10-12) tìm thấy rễ M tomentosa [13] O O O H3CO OCH3 N H N H OCH3 10 O O O O N H H3CO N H OCH3 12 11 Nhóm 2: Các hợp chất phenyl propanoid Các dẫn xuất cinnamic acid (13-16) tìm thấy lồi Theobroma cacao [14] Ngồi ra, Vardamides cộng tìm scopolin (17) scopoletin (18) loài Scaphopetalum thonneri [15] O O HO OH HO OH HO 13 14 HO HO COOH COOH O O O OH OH HO HO O OH OH HO 15 16 OH HO HO OH O O H3CO HO O O H3CO 17 O 18 O Nhóm 3: Các hợp chất flavonoid (+)-catechin (19), (-)-epicatechin (20) leucocyanidin (21) flavan tinh từ hạt Theobroma cacao trồng Liverpool (Vương quốc Anh) [14] OH OH HO O HO OH O OH OH OH OH OH 19 20 OH HO O OH OH OH OH 21 Đặc biệt, bốn flavonoid có chứa nhóm sulfate (22-25) flavonoid khác (24-32) tìm thấy lồi Wissadula periplocifolia thu hái Brazil Một số hợp chất có khả ức chế mạnh phát triển tế bào ung thư [16] 22 X1=X4=OH, X2= OSO3H, X3=H 23 X1=OSO3H, X2= OH, X3= H X4=OCH3 24 X1=OSO3H, X2= X3= H X4=OCH3 25 X1= OH, X2=OSO3H, X3= H X4= OCH3 OH HO O O R1 O O O OH O HO 26 R1= OH OH OH 27 R1= H 28 X1=OH, X2=H X3=OCH3 29 X1=OH, X2=H X3=OH 30 X1=OH, X2=OH X3=OH 31 X1=OH, X2=OH X3=OCH3 32 X1=OCH3, X2=H X3=OCH3 113 L5 Mitoxantrone Hình 3-62 Mơ tương tác phối tử với amino acid vùng hoạt động protein MUS81 (A) Cấu hình tương tác 2D-pharmacophore; (B) Cấu hình tương tác 3D- pharmacophore Phân tích tương tác hình 3-62 cho thấy, đa số amino acid quan trọng cấu thành nên vùng hoạt động wMUS81 (Leu62, His63, Asn65, Asn 68, Arg69) có tham gia tạo liên kết với chất ức chế chuẩn Mitoxantrone Kết mô tương tác số hợp chất thể hoạt tính kháng u, có hai hợp chất M3 L5 thể lực liên kết mạnh với wMUS81 kèm theo tương tác tạo thành với amino acid quan trọng vùng hoạt động đích protein Qua nhận định bước đầu hai hoạt chất thể hoạt tính kháng u thơng qua chế bất hoạt đích sinh học protein wMUS81 114 Hợp chất M3 quan sát tạo liên kết hydro với Arg59 His63, bên cạnh đó, liên kết phối tử protein củng cố bền vững thêm thông qua liên kết không cực với Arg69 Ala74 Hợp chất L5 hình thành liên kết hydro với amino acid Asn65, Val67, Arg69 Các liên kết yếu tạo thành với Leu62 His63 góp phần tăng cường lực liên kết hợp chất với đích protein nghiên cứu Kết sở khởi đầu, định hướng cho nghiên cứu sâu chất ức chế protein wMUS81 mơ hình thực nghiệm in vitro in vivo 115 KẾT LUẬN Sau thời gian nghiên cứu thực đề tài, đạt kết nghiên cứu sau đây: Về thành phần hóa học: - Cây An xoa: Đã phân lập xác định cấu trúc hóa học 14 hợp chất, có hợp chất từ rễ (L1÷L9), hợp chất từ thân (L10-L14) An xoa Đó methyl betulinate (L1), stigmasterol (L2), 3β-benzoylbetulinic acid (L3), methyl 3,4dihydroxybenzoate (L4), 3β-O-trans-caffeoylbetulinic acid (L5), p-hydroxybenzoic acid (L6), β-amyrin (L7), 3,5-dimethoxy gallic acid (L8) betulinic acid (L9), icosanoic acid (L10), 3β-hydroprotosta-17(20),24-dien-21-oic acid (L11), 5,7dihydroxy-4’-methoxy-flavone-8-yl O-β-D-glucopyranoside (L12), methyl caffeate (L13), 5,8-dihydroxy-4’,7-dimethoxy-flavone (L14) Trong đó, hợp chất 3βbenzoylbetulinic acid (L3) chất - Cây Màng kiêng: Lần phân lập xác định cấu trúc hóa học hợp chất Đó β-sitosterol (M1), icosanoic acid (M2), bentulonic acid (M3), simiarenol (M4), stigmasterol (M5), stigmasterol glucoside (M6), β-taraxerol (M7), 2-methoxy benzoic acid (M8) Trong đó, cấu trúc M4 M7 cịn xác định X-ray đơn tinh thể Về hoạt tính sinh học Đã tiến hành thử hoạt tính chống oxi hóa, hoạt tính kháng vi sinh vật Một số hợp chất phân lập tiến hành thử khả gây độc tế bào dòng ung thư Các kết thu cho thấy: - Cao phân đoạn EtOAc mẫu thân - rễ có hoạt tính chống oxi hóa mạnh với IC50 tương ứng 0,112 0,117 mg/ml - Kết thử nghiệm khả ức chế dòng tế bào ung thư biểu mô KB cho thấy: cao chiết từ An Xoa (TLE, RH, RE, RB) cao chiết (PH, PD, PE PB) từ Màng kiêng có hoạt tính (IC50 dao động từ 7,4 đến 182,51 μg/ml) Trong đó, cao chiết EtOAc rễ An xoa Màng kiêng có khả gây độc tế bào ung thư dòng KB mạnh với IC50 3,23 µg/ml 7,6 µg/ml - Cao chiết butanol mẫu thân - rễ An xoa có khả ức chế mạnh L fermentum với IC50 2,95 1,55 µg/ml - Kết thử nghiệm hoạt tính gây độc dịng tế bào ung thư SK-Lu-1, HepG2, Hela, SK-Mel-2, AGS 13 chất phân lập cho thấy chất từ An xoa (L1, L5, L9, L10, L11, L14) hai hợp chất từ Màng kiêng (M3, M4) có hoạt tính 116 Kết docking phân tử Kết mô tương tác số hợp chất thể hoạt tính kháng tế bào ung thư, có hai hợp chất M3 L5 thể lực liên kết mạnh với wMUS81 kèm theo tương tác tạo thành với amino acid quan trọng vùng hoạt động đích protein Qua nhận định bước đầu hai hoạt chất thể hoạt tính gây độc tế bào ung thư thông qua chế bất hoạt đích sinh học protein wMUS81 117 DANH MỤC CƠNG TRÌNH CƠNG BỐ CỦA LUẬN ÁN Pham Huu Dien, Phong Thị Thanh Huyen, Le Thi Khanh Linh, Dang Ngoc Quang Cytotoxic constituents from aerial parts of Helicteres hirsuta plant, collected in Binh phuoc province, Journal of Science, Hue University, 127, 111-117, 2018 Diem Thi Thuy Dung, Trinh Huyen Trang, Le Thi Khanh Linh, Dao Van Tan, Le Thi Phuong Hoa Second metabolites and antioxidant, antimicrobial, anticancer activities of Helicteres hirsuta root extract Academia Journal of Biology, 40, 45–51, 2018 Dang Ngoc Quang, Nguyen Thanh Chung, Le Thi Khanh Linh, Ta Ngoc Quynh, Dang Kim Ngoc, Hoang Thi Nhung, Pham Huu Dien Cytotoxic constituents from Helicteres hirsuta collected in Vietnam, Natural Product Research, 34, 585-589, 2020 (SCIE) Le Thi Khanh Linh, Thongphet Chansounom, Nguyen Quang Tuyen, Dang Ngoc Quang Chemical constituents of the dichloromethane fraction of Pterospermum truncatolobatum collected in Lang Son province HNUE Journal of Science, Natural Sciences, 66, 127-133, 2021 Le Thi Khanh Linh, Nguyen Thu Uyen, Pham Huu Dien, Dang Ngoc Quang Cytotoxic constituents from Vietnamese Pterospermum truncatolobatum Indian Journal of Natural Products and Resources, 13(1), 32-35, 2022 (Scopus) Le Thi Khanh Linh, Pham Quoc Long, Pham Thi Hong Minh, Le Thi Phuong Hoa, Pham Minh Quan, Dang Ngoc Quang Potential wMUS81 inhibitory activity of triterpenoids isolated from Helicteres hirsuta and Pterospermum truncatolobatum revealed by molecular docking simulation Vietnam Journal of Chemistry, 2022 (Scopus) (submitted) 118 TÀI LIỆU THAM KHẢO [1] Zhang X C., Gilbert M G (2013), Flora of China 12, The USA, pp 305-310 [2] Backer C A., R C Bakhuizen vanden brink (1963), Flora of Java, vol 1, Netherlands, pp 401-418 [3] Pengklai C (2001), Flora of Thailand, vol 7, BangKok, pp 539-574 [4] Feng K M (1984), Flora yunanica 2, pp 160-165 [5] Vo V C (2012), Từ điển thuốc Việt Nam 2, NXB Y học, pp 1010-1013 [6] Pham T N (2018), Nghiên cứu phân loại chi thuộc họ Trôm (Sterculiaceae Vent.) Việt Nam, Luận văn thạc sĩ [7] Ahmat N., Al Muqarrabun L.M.R (2015), "Medicinal uses, phytochemistry and pharmacology of family Sterculiaceae: A review" European Journal of Medicinal Chemistry, vol 1, pp 514-530 [8] Hadacek F., Greger H (2000), "Test of antifungal natural products: methodolagies, comparability of result and assay choise" Phytochemical Analysis, vol 11, no 3, pp 137-147 [9] Shukla Y.N., Bhakuni R.S., Thakur R.S (1987), "Cyclopeptide alkaloids from Melochia corchorifolia" Phytochemistry, vol 26, pp 324-325 [10] Vieira E.R., Hoelzel S.C.S.M., Giacomelli S.R., Dalcol I.I., Zanatta N., Morel A.F (2005), "An unusual quinolinone alkaloid from Waltheria douradinha" Phytochemistry, vol 66, pp 1163-1167 [11] Dias G.C., Gressler V., Hoenzel S.C., Silva U.F., Dalcol II., Morel AF (2007), "Constituents of the roots of Melochia chamaedrys" Phytochemistry, vol 68, pp 668-672 [12] Gressler V., Stüker C.Z., Dias Gde O., Dalcol II., Burrow R.A., Schmidt J., Wessjohann L., Morel A.F (2008), "Quinolone alkaloids from Waltheria douradinha" Phytochemistry, vol 69, pp 994-999 [13] Shukla Y.N., Kapadia G.J., Basak S.P (1978), "Melovinone, an open chain analogue of melochinone from Melochia tomentosa" Phytochemistry, vol 17, pp 1444-1445 [14] Collin H.A., Jalal M.A.F (1977), "Polyphenols of mature plant, seedling and 119 tissue cultures of Theobroma cacao" Phytochemistry, vol 16, pp 1377-1380 [15] Vardamides J.C., Azebaze A.G., Nkengfack A.E., Van Heerden F.R., Fomum Z.T., Ngando T.M., Conrad J., Vogler B., Kraus W (2003), "Scaphopetalone and scaphopetalumate, a lignan and a triterpene ester from Scaphopetalum thonneri" Phytochemistry, vol 62, pp 647-650 [16] Teles Y.C., Horta C.C., Agra Mde F., Siheri W., Boyd M., Igoli J.O., Gray A.I., de Souza Mde F (2015), "New Sulphated Flavonoids from Wissadula periplocifolia (L.) C Presl (Malvaceae)" Molecules, vol 20, no 11, pp 2016120172 [17] Tripathi S.K., Biswal B.K (2018), "Pterospermum acerifolium (L.) wild bark extract induces anticarcinogenic effect in human cancer cells through mitochondrial-mediated ROS generation" Mol Biol Rep., vol 45, no 6, pp 2283-2294 [18] Fernandes D.A., Souza M.S.R., Teles Y.C.F., Oliveira L.H.G., Lima J.B., Conceiỗóo A.S., Nunes F.C., Silva T.M.S., Souza M.F.V (2018) "New Sulphated Flavonoids and Larvicidal Activity of Helicteres velutina K Schum (Sterculiaceae)" Molecules, vol 23, no 11, pp 2784 [19] Chen C.M., Chen Z.T., Hong Y.L (1990), "Constituents of Formosan antitumor folk medicine Part A mansonone from Helicteres angustifolia" Phytochemistry, vol 29, pp 980-982 [20] Blois M.S (1958), “Antioxidant determination by the use of a stable free radical”, Nature, 181, pp 1199 - 1200 [21] Vo V C (1999), Từ điển thuốc Việt Nam, NXB Y học, pp 1230-1232 [22] Dang V.S., Dang M.Q., Hoang N.S (2020), "Helicteres binhthuanensis V.S.Dang (Malvaceae, Helicteroideae), a new species from southern Vietnam" PhytoKeys, vol 166, pp 87–95 [23] Wang M., Liu W (1987), "A naphthoquinone from Helicteres angustifolia" Phytochemistry, vol 26, pp 578-579 [24] Chen Z.T., Lee S.W., Chen C.M (1994), "New flavonoid glycosides of Helicteres angustifolia" Heterocycles, vol 38, pp 1399-1406 120 [25] Chen W.L., Tang W.D et al (2006), "Pregnane, coumarin and lupan derivatives and cytotoxic constituent from Helicteres angustifolia" Phytochemistry, vol 67, no 10, pp 1041-1047 [26] Chen W., Tang W., Lou L., Zhao W (2006), "Pregnane, coumarin and lupane derivativesand cytotoxic constituents from Helicteres angustifolia" Phytochemistry, pp 1041-1047 [27] Pan M.H., Chen C.M (2008), "Cytotoxic triterpenoids from the roots bark of Helicteres angustifolia" Chemistry and Biodiversity, vol 5, pp 565-574 [28] Wang G.C., Li T., Wei Y.R., Zhang Y.B., Li Y.L., Sze S.C., Ye W.C (2012), "Two pregnane derivatives and a quinolone alkaloid from Helicteres angustifolia" Fitoterapia, vol 83, pp 1643-1647 [29] Huang Q., Huang R., Wei L., Chen Y., Lv S., Liang C., Zhang X., Yin F., Li H., Zhuo L., Lin X (2013), "Antiviral activity of methyl helicterate isolated from Helicteres angustifolia (Sterculiaceae) against hepatitis B virus" Antiviral Res, vol 100, pp 373-381 [30] Yin X., Lu Y., Cheng Z.H., Chen D.F., (2016), "Anti-Complementary components of Helicteres angustifolia" Molecules, vol 21, no 11, p 1506 [31] Bean M.F., Antoun M Abramson D., Chang C.J (1985), "Cucurbitacin B and isocucurbitacin B: cytotoxic components of Helicteres isora" J Nat Prod, vol 48, p 500 [32] Ramesh P., Yavarajan C.R (1995), "A new flavone methyl ether from Hecliteres isora" J Nat Prod., vol 58, pp 1242-1243 [33] Satake T., Kamiya K., Saiki Y (1999), "Studies on Jamu and the medicinal resources in Indonesia Part Studies on the constituents of fruits of Helicteres isora L." Chem Pharm Bull., vol 44, pp 1444- 1447 [34] Tezuka Y., Terazono M., Kusumoto T.I (1999), "Helisterculins A and B, two new (7.5’,8.2’)-neolignans, and helisorin, the first (6.4’, 7.5’,8.2’)-neolignan, from the Indonesian medicinal plant Helicteres isora" Helv.Chim Acta, vol 8, pp 408-417 [35] Tezuka Y., Terazono M., Kusumoto T.I (2000), "Helicterins A-F, six new dimeric (7.5’, 8.2’)-neolignans from the Indonesian medicinal plant Helicteres 121 isora" Helv.Chim Acta, vol 83, pp 2908-2919 [36] Kamiya K., Saiki Y., Hama T.(2001), "Flavoinoid glucuronides from Helicteres isora" Phytochemistry, vol 57, pp 297-301 [37] Vennila S., Bupesh G., Saravanamurali K., SenthilKumar V., SenthilRaja R., Saran N., Magesh S (2014), "Insilico docking study of compounds elucidated from Helicteres isora fruits with ampkinase- insulin receptor" Bioinformation, vol 10, no 5, pp 263-266 [38] Truong B N (2012), Nghiên cứu thành phần hố học số lồi thực vật có hoạt tính chống lao vườn quốc gia Cúc Phương, Luận án tiến sĩ hóa học [39] Luu H T., Nguyen H C., Tran H D., Trinh T M D., Pham T C., Tran T.H Hanh, Tran H Q., Nguyen H.D., Nguyen X C., Nguyen H N., Chau V M (2021), "Sulphated flavones and pregnane-type steroids from Helicteres viscida" Natural Product Research, vol 35, no 20, pp 3390-3395 [40] Li K., Yu Y., Sun S., Liu Y., Garg S., Kaul S.C., Lei Z., Gao R., Wadhwa R., Zhang Z (2016), "Functional characterization of anticancer activity in the aqueous extract of Helicteres angustifolia L roots" PloS ONE, vol 11, no 3, p e0152017 [41] Varghese E, Sathia Narayanan S, Gopal RV, Nair A, Chittethu AB, Anson TA (2011), "Anticancer activity of chloroform extract of Helicteres isora" Int.J of Pharm.& Tech., vol 3, no 2, pp 2560-2564 [42] Basniwal P.K et al (2009), "In-vitro antioxidant activity of hot aqueous extract of Helicteres isora Linn Fruits" Nat Prod Radiance, vol 8, no 5, p 483 – 487 [43] Tran V T., Vo T M H (2017), “Nghiên cứu khả kháng khuẩn hoạt tính chống oxi hóa dịch chiết an xoa (Helicteres hirsuta Lour.)” Tuyển tập hội nghị khoa học toàn quốc sinh thái tài nguyên sinh vật lần thứ 7, pp 1496-1501 [44] Le T H Yen; Nguyen T.N.; Nguyen T.Q.; Pham T H N.; Luu T.B N (2016), Sơ nghiên cứu thành phần hóa học tác dụng ức chế số dịng tế bào ung thư an xoa (Helicteres hirsuta Loureiro), Báo cáo đề tài NCKH cấp sở, Trường Cao đẳng Y tế Hà Nội 122 [45] Le T.H Y., Nguyen T T H., Nguyen T.N., Ta V B., Thai T H Oanh (2017), “Nghiên cứu tác dụng chống viêm, giảm đau cao lỏng chiết từ an xoa (Helicteres hirsuta Lour.) chuột nhắt thực nghiệm” Tạp chí Dược học, tâ ̣p 496, pp 56-59 [46] Chin Y.M., Jones W.P., Rachman (2006), "Cytotoxic lignans from the stems of Helicteres hirsuta collected in Indonesia" Phytotherapy Research, vol 20, pp 62-65 [47] Nguyen H D., Le T P (2016), “Khảo sát thành phần hóa học hoạt tính gây độc tế bào HepG2 an xoa (Helicteres hirsuta L.)” Tạp chí Khoa học Trường Đại học Cần Thơ, tâ ̣p 47, pp 93-97 [48] Nguyen T.T., Kretschmer N., Pferschy-Wenzig E.M., Kunert O., Bauer R (2019) “Triterpenoidal and Phenolic Compounds Isolated from the Aerial Parts of Helicteres hirsuta and their Cytotoxicity on Several Cancer Cell Lines”, Natural Product Communications, vol.14, no.1, pp.7-10 [49] Hoang D T., Truong T T H., Nguyen T.T H., T M D., Do T T., Nguyen P K N., Le C V C., Hoang L T A (2020) “Phenolic and flavonoid compounds isolated from ethyl acetate fraction of Helicteres hirsuta Lour collected in Thua Thien Hue”, Tạp chí Y-dược học quân sự, Tập 8, Trang 122-128 [50] Tran T K M (2019) Phân tích cấu trúc số hợp chất An xoa (Helicteres hirsuta L.) Việt Nam phương pháp hóa lý đại Luận văn thạc sĩ hóa học [51] Le D K., Hoang M H (2020) “Triterpenoids isolated from Helicteres hirsuta”, Journal of Technical Education Science, vol.56, pp.12-16 [52] Huynh L N T., Phan H X., L V T (2021) “Hoạt tính bảo vệ gan hợp chất phân lập từ an xoa (helicteres hirsuta) thu hái Gia Lai”, Tạp chí Khoa Học Cơng Nghệ, Trường Đại học Khoa học, ĐH Huế, Tập 18, số 2, trang 6574 [53] Le N.T., Van H.T., Nguyen N.T.P, Le V.S., Chu V.H., Vu T.H.A., Nguyen Q.H., Nguyen H.D., Trinh N.N., Pham V.T (2021) “Chemical profiles and antibacterial, antioxidant, cytotoxicactivities of acetone extract from leaves of Helicteres hirsuta Lour.”, Journal of Science and Technology, Vol.52B, pp.62-69 123 [54] Dixit P., Khan M.P., Swarnkar G., Chattopadhyay N., and Maurya R (2011), "Osteogenic constituents from Pterospermum acerifolium Willd flowers" Bioorganic & Medicinal Chemistry Letters, vol 21, no 15, p 4617–4621 [55] Nahar N., Khan M S H., Mosihuzzaman M., Rashid M A (2015), "Neolignan and megastigmane glycosides from the leaves of Pterospermum semisagittatum" Original articles, vol 60, p 72–74 [56] Li H., Huang G., Liu B., Liu Y., Zhan R., Chen (2014), "A new naphthol from the twigs and leaves of Pterospermum yunnanense" Nat Prod Res, vol 28, no 19, pp 1539-1543 [57] Li S., Shi Y., Shang X.Y., Cui B.S., Yuan Y., Chen X.G., Yang Y.C., Shi J.G., (2009), "Triterpenoids from the roots of Pterospermum heterophyllum Hanc" Journal of Asian Natural Products Research, vol 11, no 7, pp 652-657 [58] Yang L., Liu R., Fan A., Zhao J., Zhang Y., He J (2020), "Chemical Composition of Pterospermum heterophyllum Root and its Anti-Arthritis Effect on Adjuvant-Induced Arthritis in Rats via Modulation of Inflammatory Responses" Front Pharmacol, vol 11, pp.1-13 [59] Chopra R N., Nayar S L., Chopra I C (1956), Glossary of Indian Medicinal Plants, New Delhi, India: Council of Scientific & Industrial Research [60] Dixit P., Chand K., Khan M.P., Siddiqui J.A., Tewari D., Ngueguim F.T., Chattopadhyay N., Maurya R (2012), "Phytoceramides and acylated phytosterol glucosides from Pterospermum acerifolium Willd seed coat and their osteogenic activity" Phytochemistry, vol 81, pp 117-125 [61] Li H., Huang G., Liu B., Liu Y., Zhan R., Chen Y (2014) "A new naphthol from the twigs and leaves of Pterospermum yunnanense" Natural Product Research: Formerly, pp 1539-1543 [62] Basnet B K., Siwakoti M (2018), "Pterospermum truncatolobatum Gagnepain (Sterculaceae): A new addition to the flora of Nepal" Banko Janakari, vol 28, no 1, pp 48-49 [63] Paul T K (2013), "Pterospermum truncatolobatum Gagnepain [Sterculiaceae] – an addition to the floral of Myanmar" Pleione, vol 7, no 2, pp 571-573 124 [64] Lopez-Vallejo F et al (2011), "Integrating virtual screening and combinatorial chemistry for accelerated drug discovery", Comb Chem High Throughput Screen Vol.14, no.6, pp 475-87 [65] Kitchen D B et al (2004), "Docking and scoring in virtual screening for drug discovery: methods and applications", Nat Rev Drug Discov, vol.3, no.11, pp 935-49 [66] Kikuchi K et al (2013) “Structure-specific endonucleases Xpf and Mus81 play overlapping but essential roles in DNA repair by homologous recombination” Cancer Res Vol.73, pp.4362–4371 [67] Fadden A.J., Schalbetter S., Bowles M., Harris R., Lally J., Carr A.M., McDonald N.Q (2013) “A winged helix domain in human MUS81 binds DNA and modulates the endonuclease activity of MUS81 complexes”, Nucleic Acids Res., vol.41, pp.9741–9752 [68] Lu R et al (2019) “MUS81 participates in the progression of serous ovarian cancer associated with dysfunctional DNA repair system’’, Front Oncol 9, e01189 [69] Zhong A., Zhang H., Xie S., Deng M., Zheng H., Wang Y., Chen M., Lu R, Guo L (2018) “Inhibition of MUS81 improves the chemical sensitivity of olaparib by regulating MCM2 in epithelial ovarian cancer”, Oncol Rep Vol.39, pp.1747–1756 [70] Xie S., Zheng H., Wen X., Sun J., Wang Y., Gao X., Guo L., Lu R (2016) “MUS81 is associated with cell proliferation and cisplatin sensitivity in serous ovarian cancer”, Biochem Biophys Res Commun Vol.476, pp.493–500 [71] Waterhouse A.L (2002), “Determination of total phenolics, In current Protocols”,Food Analytical Chemistry, I1.1.1 - I1.1.8 [72] Sapkota K., Park S.E., Kim J.E., Kim S., Choi H.S., Chun H.S., Kim S.J (2010), “Antioxidant and antimelanogenic properties of chestnut flower extract”, Biosci Biotechnol Biochem, vol.74, pp 1527-1533 [73] Schrodinger L.L.C The PyMOL molecular graphics system Version 2.2.2 2015 125 [74] Frisch, M.J., Trucks, G.W., Schlegel, H.B., Scuseria, G.E., Robb, M.A., Cheeseman, J.R., et al (2009) Gaussian 09 Rev d.01 Wallingford, CT [75] Fadden, A.J., et al (2013) “A winged helix domain in human MUS81 binds DNA and modulates the endonuclease activity of MUS81 complexes” Nucleic Acids Research, vol.41, No.21, pp 9741-9752 [76] Morris, G.M., et al (2009) “AutoDock4 and AutoDockTools4: Automated docking with selective receptor flexibility”, Journal of Computational Chemistry, vol.30, no16, pp 2785-2791 [77] Pham H.N.T., Vuong Q.V., Bowyer M C., Scarlett C J (2017), "Optimization of ultrasound-assisted extraction of Helicteres hirsuta Lour for enhanced total phenolic compound and antioxidant yield" Journal of Applied Research on Medicinal and Aromatic Plants, vol 7, pp 113-123 [78] Jain A., Sinha P., Desai N.S (2014), "Estimation of flavonoid, phenol content and antioxidant potential of Indian screw tree (Helicteres isora L.)" International Journal of Pharmaceutical Sciences and Research, vol 5, no 4, pp 1320-1330 [79] Pham H.N.T., Nguyen V.T., Vuong Q.V., Bowyer M.C., Scarlett C.J (2017), "Phytochemical profiles and antioxidant capacity of the crude extracts, aqueous and saponin-enriched butanol fractions of Helicteres hirsuta Lour leaves and stems" Chemical Papers-Slovak Academy of Sciences, vol 71, no 11, pp 1-10 [80] Choi J.Y., Choi E.H., Jung H.W., Oh J.S., Lee W.H., Lee J.G., Son J.K., Kim Y., Lee S.H (2008), "Melanogenesis inhibitory compounds from Saussureae radix" Arch Pharm Res., vol 31, no 3, pp 294-299 [81] Pierre L.L., Moses M.N (2015), "Isolation and Characterisation of Stigmasterol and β-Sitosterol from Odontonema strictum (Acanthaceae)" Journal of Innovations in Pharmaceuticals and Biological Sciences, vol 2, no 1, pp 8895 [82] Maria de L., e Silva, Juceni P David et al (2012), "Bioactive oleanane, lupane and ursane triterpene acid derivatives" Molecule, vol 17, pp 12197-12205 [83] Aminah N.S., Yulvia A., Tanjung M (2017), "Methyl 3,4-dihydroxybenzoate 126 and 9,10-dihydrophenanthrene-2,4,7-triol two phenolic compounds from Dioscorea alata L and their antioxidant activity" AIP Conference Proceeding 1888, no 020050 [84] Cho J.Y., Kim C.M., et al (2013), "Caffeoyl triterpenes from pear (Pyrus pyrifolia Nakai) fruit peals and their antioxidant activities against oxidation of rat blood plasma" J Agrical Food Chem., vol 61, no 19, pp 4563-4569 [85] Gealt M.A (1982), "Isolation of β-amyrin from the fungus Aspergillus nidulans" Microbiology, vol 129, p 543 – 546 [86] Liao C.R., Kuo Y.H (2014), "Studies on cytotoxic constituents from the leaves of Elaeagans oldhamii Maxim in non-small cell lung cancer A549 cells" Molecule, vol 19, pp 9515 -9534 [87] Bisoli E., Garcez W.S., Hamerski L., Tieppo C., Garcez F.R (2008), "Bioactive pentacyclic triterpenes from the stems of Combretum laxum." Molecules, vol 13, pp 2717-2728 [88] Sharaf M., El-Ansari M A., Saleh N A M (1998), "A new flavonoid from the roots of Glossostemon bruguieri" Fitoterapia, vol 69, no 1, p 47–48 [89] Roosevelt A G., Rafael R A R et al (2011), "Phenolic compounds from Sidastrum micranthum (A St.-Hil.) fryxell and evaluation of acacetin and 7,4'Di-O-methylisoscutellarein as motulator of bacterial drug resistence" Quím Nova, vol 34, no 8, pp 1801-1807 [90] Teles Y.S F., Chaves O.S (2015), "Chemical constituents from Sidastrum paniculatum and evaluation of the leishmanicidal activity" Revista Brasileira de farmacognosia, vol 25, pp 363-368 [91] Li K., Lei Z (2015), "In vitro and in vivo bioactivities of aqueous and ethanol extracts from Helicteres angustifolia L root" Journal of Ethnopharmacology, vol 172, pp 61-69 [92] Hoang T H., Pham T T C (2006), “Một số thành phần hóa sinh hoạt tính sinh học dịch ép từ thịt mƣớp đắng (Momordica charantia L.)” Tạp chí Sinh học, 28, tr 75 [93] Nguyen V M (2007), Thực hành hóa sinh học, NXB Đại học Quốc gia Hà 127 Nội, tr 108-109 [94] Conforti F., Statti G., Loizzo M R., Sacchetti G., Poli F., Menichini F (2005), "In Vitro Antioxidant Effect and Inhibition of a -Amylase of Two Varieties of Amaranthus caudatus Seeds" Biology and Pharmaceutical Bullentin, vol 28, pp 1098-1102 [95] Chaturvedula V.S.P., Prakash I (2012), "Isolation of Stigmasterol and βSitosterol from International the Current dichloromethane Pharmaceutical extract of Journal, Rubus vol suavissimus" 1, no 9, DOI:10.3329/icpj.v1i9.11613 [96] Satiraphan M., Pamonsinlapatham P., Sotanaphun U., Sittisombut C., Raynaud F., Garbay C., Michel S (2012), "Lupane trierpenes from the leaves of the tropical rain forest tree Hopea odorata Roxb and their cytotoxic activities" Biochemical systematics and ecology, vol 44, pp 407-412 [97] Chakravarty A K., Masuda K., Suzuki H., Ageta H (1994), "Unambiguous assignment of 13C chemical shifts of some hopane and migrated hopane derivatives by 2D NMR" Tetrahedron, vol 50, pp 2865-2876 [98] Oladimeji A.O., Oladosu I.A., Jabeen A., Faheem A., Mesaik M.A., Ali M.S (2017), "Immunomodulatory activities of isolated compounds from the rootbark of Cussonia arborea" Pharmaceutical biology, vol 55, no 1, pp 22402247 [99] Hernández-Chávez I., Torres-Tapia L W., Simá-Polanco P., Cedillo-Rivera R., Moo-Puc R., and Peraza-Sánchez S R (2012), "Antigiardial activity of Cupania dentata bark and its constituents" Journal of the Mexican Chemical Society, vol 56, no 2, pp 105-108 [100] Tareq F S., Sohrab Md H., Chowhdury AM., S., U., Afroz F., Al-Mansur M., Hasan C.M (2009), "Phytochemical studies on the Leaves of Xylia dolabriformis," Journal of Pharmaceutical Sciences, vol 8, no 2, pp 171-172