Khảo sát hiệu quả phối hợp kháng sinh in vitro trên staphylococcus aureus đề kháng methicillin

BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO BỘ Y TẾ ĐẠI HỌC Y DƯỢC THÀNH PHỐ HỒ CHÍ MINH - BÙI PHÁT ĐẠT KHẢO SÁT HIỆU QUẢ PHỐI HỢP KHÁNG SINH IN VITRO TRÊN STAPHYLOCOCCUS AUREUS ĐỀ KHÁNG METHICILLIN LUẬN VĂN THẠC SĨ KỸ THUẬT Y HỌC THÀNH PHỐ HỒ CHÍ MINH, NĂM 2021 BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO BỘ Y TẾ ĐẠI HỌC Y DƯỢC THÀNH PHỐ HỒ CHÍ MINH - BÙI PHÁT ĐẠT KHẢO SÁT HIỆU QUẢ PHỐI HỢP KHÁNG SINH IN VITRO TRÊN STAPHYLOCOCCUS AUREUS ĐỀ KHÁNG METHICILLIN NGÀNH: KỸ THUẬT XÉT NGHIỆM Y HỌC MÃ SỐ: 8720601 LUẬN VĂN THẠC SĨ KỸ THUẬT Y HỌC NGƯỜI HƯỚNG DẪN KHOA HỌC TS HUỲNH MINH TUẤN TS LÊ VĂN CHƯƠNG THÀNH PHỐ HỒ CHÍ MINH, NĂM 2021 LỜI CAM ĐOAN Tôi xin cam đoan cơng trình nghiên cứu riêng tơi, tất số liệu kết luận văn trung thực chưa công bố cơng trình khác Tác giả luận văn Bùi Phát Đạt i MỤC LỤC LỜI CAM ĐOAN i MỤC LỤC ii DANH MỤC CÁC CHỮ VIẾT TẮT iv DANH MỤC CÁC HÌNH v DANH MỤC CÁC BẢNG vi DANH MỤC CÁC BIỂU ĐỒ vii ĐẶT VẤN ĐỀ CHƯƠNG TỔNG QUAN TÀI LIỆU 1.1 Đại cương Staphylococcus aureus 1.2 Một số phương pháp phát Staphylococcus aureus đề kháng methicillin (MRSA) 1.3 Đại cương kháng sinh 11 1.4 Các kháng sinh điều trị Staphylococcus aureus đề kháng methicillin (MRSA) 12 1.5 Một số chế đề kháng kháng sinh Staphylococcus aureus 18 1.6 Phối hợp kháng sinh 25 CHƯƠNG ĐỐI TƯỢNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 34 2.1 Đối tượng nghiên cứu 34 2.2 Tiêu chuẩn chọn mẫu 34 2.3 Thời gian địa điểm nghiên cứu 34 2.4 Thiết kế nghiên cứu 34 2.5 Cỡ mẫu 35 2.6 Kỹ thuật chọn mẫu 35 2.7 Nội dung nghiên cứu 35 2.8 Sơ đồ nghiên cứu 36 2.9 Lựa chọn kháng sinh phối hợp 37 2.10 Phương pháp tiến hành 39 i 2.11 Phương tiện, dụng cụ thực nghiên cứu 51 2.12 Phương pháp thu thập số liệu xử lý số liệu 52 2.13 Kiểm soát sai lệch số liệu 53 2.14 Vấn đề y đức 54 2.15 Tính ứng dụng nghiên cứu 55 CHƯƠNG KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU 56 3.1 Tỉ lệ MRSA MSSA Staphylococcus aureus 56 3.2 Tỉ lệ MRSA, MSSA phân bố bệnh phẩm khoa lâm sàng 56 3.3 Khảo sát đề kháng kháng sinh hai nhóm MRSA MSSA Staphylococcus aureus 58 3.4 Phân bố nồng độ ức chế tối thiểu kháng sinh vancomycin, cefepime gentamicin dùng phối hợp kháng sinh 60 3.5 Thực phối hợp kháng sinh in vitro sử dụng phương pháp vi pha loãng (checkerboard) 62 CHƯƠNG BÀN LUẬN 69 4.1 Tỉ lệ MRSA Staphylococcus aureus, tỉ lệ MRSA phân bố loại bệnh phẩm khoa lâm sàng 69 4.2 So sánh tình hình đề kháng kháng sinh Staphylococcus aureus hai nhóm MRSA MSSA 72 4.3 Nồng độ ức chế tối thiểu kháng sinh vancomycin, cefepime gentamicin dùng phối hợp kháng sinh 73 4.4 Thực phối hợp kháng sinh in vitro sử dụng phương pháp vi pha loãng (checkerboard) 75 KẾT LUẬN 82 KIẾN NGHỊ 83 TÀI LIỆU THAM KHẢO PHỤ LỤC DANH MỤC CÁC CHỮ VIẾT TẮT Từ viết tắt Tiếng Anh Tiếng Việt ATCC American Type Culture Collection Hệ thống chủng chuẩn Hoa Kỳ CDC Centers for Disease Control and Trung tâm Kiểm sốt Phịng Prevention ngừa bệnh tật Hoa Kỳ CFU Colony Forming Unit Đơn vị hình thành khuẩn lạc CLSI Clinical and Laboratoty Standards Viện tiêu chuẩn Lâm sàng Institute Xét nghiệm Hoa Kỳ European Committee on Antibiotic Uỷ ban châu Âu thử nghiệm Susceptibility Testing kháng sinh đồ EUCAST FEP Cefepime FIC Fractional Inhibitory Concentration GEN Gentamicin Nồng độ ức chế phân đoạn KS Kháng sinh KSĐ Kháng sinh đồ MDR Multi Drug Resistant Đa kháng thuốc MIC Minimum Inhibitory Concentration Nồng độ ức chế tối thiểu MRSA Methicillin resistant S aureus đề kháng methicillin Staphylococcus aureus MSSA Methicillin susceptible S aureus nhạy cảm methicillin Staphylococcus aureus PBP Penicillin binding protein pK/pD Pharmacokinetics/Pharmacodynamics SCCmec Staphylococcal Cassette Dược động học/dược lực học Chromosome mec VAN Vancomycin WHO World Health Organization Tổ chức Y tế Thế giới DANH MỤC CÁC HÌNH Hình 1.1 S aureus tiêu nhuộm Gram Hình 1.2 Khuẩn lạc S aureus đĩa thạch máu Hình 1.3 Khả gây nhiễm S aureus Hình 1.4 Các loại gen SCCmec 20 Hình 1.5 Hình ảnh kháng sinh đồ sử dụng phương pháp khuếch tán 28 Hình 1.6 Kỹ thuật phối hợp kháng sinh sử dụng phương pháp E-test 30 Hình 1.7 Hình minh họa thông số pK/pD đánh giá tác động kháng sinh vi khuẩn thể 32 Hình 2.1 Sơ đồ nghiên cứu 36 Hình 2.2 Card GP trước sau thử nghiệm định danh vi khuẩn 41 Hình 2.3 Card AST P592 trước sau thử nghiệm kháng sinh đồ 41 Hình 2.4 Pha loãng kháng sinh vancomycin 43 Hình 2.5 Pha lỗng kháng sinh cefepime 45 Hình 2.6 Pha loãng kháng sinh gentamicin 46 Hình 2.7 Hình minh họa phối hợp hai kháng sinh sử dụng phương pháp vi pha loãng ô cờ (checkerboard) nhựa 96 giếng 50 Hình 2.8 Hình ảnh thực tế phối hợp hai kháng sinh sử dụng phương pháp vi pha lỗng cờ (checkerboard) nhựa 96 giếng 50 Hình 2.9 Đọc kết phối hợp kháng sinh ánh đèn 51 Hình 2.10 Chủng chuẩn sử dụng kiểm tra chất lượng kháng sinh 53 i DANH MỤC CÁC BẢNG Bảng 1.1 Ba mức đề kháng vancomycin 22 Bảng 1.2 Chỉ số FIC, tiêu chuẩn đánh giá phối hợp hai kháng sinh 29 Bảng 2.1 Điểm gãy kháng sinh thử nghiệm hệ thống Vitek Compact 40 Bảng 2.2 Biện luận tính nhạy cảm S aureus với kháng sinh thử nghiệm phối hợp: vancomycin, cefepime gentamicin 47 Bảng 2.3 Kiểm tra chất lượng kháng sinh 54 Bảng 3.1 Tỉ lệ MRSA, MSSA phân bố loại bệnh phẩm 57 Bảng 3.2 Tỉ lệ MRSA, MSSA phân bố khoa lâm sàng 58 Bảng 3.3 Tỉ lệ đề kháng kháng sinh Staphylococcus aureus 59 Bảng 3.4 Kết phối hợp kháng sinh vancomycin cefepime 63 Bảng 3.5 Giảm độ pha loãng MIC vancomycin phối hợp với cefepime 63 Bảng 3.6 MIC vancomycin cefepime đơn kết hợp 64 Bảng 3.7 Kết phối hợp kháng sinh vancomycin gentamicin 65 Bảng 3.8 Giảm độ pha loãng MIC vancomycin phối hợp với gentamicin 65 Bảng 3.9 Giảm độ pha loãng MIC gentamicin phối hợp với vancomycin 66 Bảng 3.10 Giảm MIC có ý nghĩa gentamicin có phối hợp với vancomycin 66 Bảng 3.11 MIC vancomycin gentamicin đơn kết hợp 67 i DANH MỤC CÁC BIỂU ĐỒ Biểu đồ 3.1 Tỉ lệ MRSA, MSSA Staphylococcus aureus 56 Biểu đồ 3.2 Tỉ lệ đề kháng kháng sinh MRSA MSSA 60 Biểu đồ 3.3 Kết MIC vancomycin 111 chủng MRSA 60 Biểu đồ 3.4 Kết MIC cefepime 111 chủng MRSA 61 Biểu đồ 3.5 Kết MIC gentamicin 53 chủng MRSA 61 Biểu đồ 3.6 Phân bố giá trị MIC kháng sinh vancomycin, cefepime gentamicin dùng phối hợp kháng sinh MRSA 62 Biểu đồ 3.7 Tỉ lệ ức chế tích luỹ (CIRs) vancomycin, cefepime đơn kết hợp Staphylococcus aureus đề kháng methicillin (MRSA) 64 Biểu đồ 3.8 Tỉ lệ ức chế tích luỹ (CIRs) vancomycin, gentamicin đơn kết hợp Staphylococcus aureus đề kháng methicillin (MRSA) 68 ĐẶT VẤN ĐỀ Staphylococcus aureus (S aureus) loại vi khuẩn có khả tồn lâu điều kiện môi trường khắc nghiệt, cư trú màng nhầy, da, gây bệnh hội nghiêm trọng thông qua trung gian độc tố gây nhiễm trùng xâm lấn sinh mủ người [40] Kháng sinh (KS) điều trị S aureus phát sớm penicillin, thức đưa vào điều trị năm 1945 Chỉ vài năm sau, người ta phát vi khuẩn S aureus đề kháng với KS [30] Sau vào năm 1959, methicillin bắt đầu sử dụng năm sau, chủng S aureus kháng methicillin phân lập gọi S aureus kháng methicillin (MRSA) [46] S aureus đề kháng methicillin hay penicillin M cách thay đổi cấu trúc PBP thành PBP2a khơng cịn lực với methicillin PBP2a khơng khơng cịn lực với methicillin, mà với tất KS β-lactam chất ức chế β-lactamase Do MRSA khơng kháng methicillin mà cịn kháng với tất β-lactam β-lactam phối hợp với ức chế βlactamase [19] S aureus đề kháng methicillin lan rộng khắp nơi giới Theo báo cáo Tổ chức Y tế Thế giới (WHO) năm 2014 khảo sát đề kháng KS khu vực lớn giới (Châu Phi, Châu Mỹ, Châu Âu, Đông Địa Trung Hải, Đơng Nam Á Tây Thái Bình Dương), báo cáo kháng KS làm tăng thời gian mắc bệnh nguy tử vong Những người nhiễm trùng MRSA có khả tử vong cao 64% so với nhiễm trùng khác Đề kháng KS làm tăng chi phí điều trị, thời gian nằm viện yêu cầu phải chăm sóc đặc biệt Các khu vực có tỉ lệ MRSA cao, cao khu vực Châu Mỹ, nhiễm trùng S aureus có đến 90% MRSA Ở khu vực Đơng Nam Á, số nơi khu vực có phần tư nhiễm trùng S aureus MRSA [79] Theo báo cáo Trung tâm kiểm soát phòng ngừa bệnh tật Bản quyền tài liệu thuộc Thư viện Đại học Y Dược TP.Hồ Chí Minh Phụ lục 1: PHIẾU THU THẬP THÔNG TIN BỆNH PHẨM- KẾT QUẢ KHÁNG SINH ĐỒ Lab ID: Số vào viện: Mã số chủng: Họ tên BN: Tuổi: Giới tính: Khoa Bệnh phẩm: Ngày cấy Ngày trả kết quả: KẾT QUẢ ĐỊNH DANH: KẾT QUẢ KHÁNG SINH ĐỒ: Kháng sinh Nhạy (S) Sensitive Kháng(R) Resistant Cefoxitin screen  MSSA (-)  MRSA (+) Vancomycin Benzylpenicillin Rifampicin Gentamicin Ciprofloxacin Oxacillin Moxifloxacin Erythromycin Linezolid Clindamycin Teicoplanin Tetracycline Tigecycline Fusidic Acid Trimethoprim/Sulfamethoxazole Tuân thủ Luật sở hữu trí tuệ Quy định truy cập tài liệu điện tử Ghi rõ nguồn tài liệu trích dẫn Bản quyền tài liệu thuộc Thư viện Đại học Y Dược TP.Hồ Chí Minh Phụ lục PHIẾU THU THẬP KẾT QUẢ MIC PHỐI HỢP KHÁNG SINH Vi khuẩn: Lab ID: 1, Vancomycin phối hợp với cefepime: MIC (VAN): MIC (FEP): Chỉ số FIC: Kết luận: 2, Vancomycin phối hợp với gentamicin: MIC (VAN): MIC (GEN): Chỉ số FIC: Kết luận: Tuân thủ Luật sở hữu trí tuệ Quy định truy cập tài liệu điện tử Ghi rõ nguồn tài liệu trích dẫn MIC (VAN có FEP) MIC (FEP có VAN) MIC (VAN có GEN) MIC (GEN có VAN) Bản quyền tài liệu thuộc Thư viện Đại học Y Dược TP.Hồ Chí Minh Phụ lục 3:          NỘI DUNG CHÍNH CÁC QUY TRÌNH NI CẤY PHÂN LẬP VK QUY TRÌNH CẤY MÁU Nguyên tắc: Cấy máu theo yêu cầu bác sĩ lâm sàng, thực nhanh, không chậm trể Qui trình lấy mẫu Tại khoa lâm sàng: Sát khuẩn vùng da rút máu cồn iod để khô; Rút 3-5 mL; Mở nút đậy phía chai mơi trường cấy máu pha bơm máu vào chai, xong đậy nắp lại; Kỹ thuật cần phải tránh ngoại nhiễm, nghi ngờ kim bị nhiễm cần phải loại bỏ lấy mẫu lại; Chai môi trường sau cấy máu nhanh chóng chuyển đến khoa xét nghiệm để đưa vào hệ thống tủ ủ Tại khoa xét nghiệm: Bộ phận tiếp nhận mẫu: tiến hành nhận mẫu theo quy định; Bộ phận kỹ thuật: nhận mẫu cho vào tủ ủ, tráng mẫu thường xuyên bề mặt thạch chai cấy pha (khoảng cách 3-4 tráng lần), quan sát chai cấy máu ngày.Khi có chai máu dương, nhanh chóng lấy chai máu dương tủ ủ thực theo quy trình sau: Chai máu (+)  Nhuộm Gram, Phân lập MC, BA, CA (ủ 35ºC/24h,(CO2/BA,CA))  Chọn khúm khẩn; Chạy trắc nghiệm sinh hóa định danh làm KSĐ hệ thống máy Vitek Compact Sau ngày khơng có dấu hiệu dương trả lời kết “khơng thấy vi khuẩn mọc” QUY TRÌNH CẤY ĐÀM ĐỊNH LƯỢNG  Nguyên tắc: Dùng dung dịch chứa thuốc long đàm để đánh tan mẫu đàm, tiếp tục pha loãng dung dịch NaCl 0,9% 106 Cấy định lượng để xác định vi khuẩn  Quan sát vi thể: - Nhuộm Gram đánh giá mẫu đàm:  Mẫu đàm đạt tiêu chuẩn để cấy khi: Bạch cầu > 25TB/QT10 TB biểu mô 3 Không áp dụng luận Vi sinh vật Vi sinh vật khơng điển khơng xác định hình - Quản lý chất lượng: - Kiểm tra hạn sử dụng loại card định danh, KSĐ; - Kiểm tra, bảo trì máy Vitek Compact theo định kỳ tháng để đảm bảo chất lượng định danh KSĐ; - Thực nội kiểm tra hàng tuần nhận lô card chủng chuẩn ATCC® Tn thủ Luật sở hữu trí tuệ Quy định truy cập tài liệu điện tử Ghi rõ nguồn tài liệu trích dẫn Bản quyền tài liệu thuộc Thư viện Đại học Y Dược TP.Hồ Chí Minh Phụ lục STT 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30 31 32 33 34 35 36 37 38 39 LAB ID MIC VK VAN 18574 18576 18637 18668 18713 18719 18720 18760 18788 18836 18847 18860 18882 18887 18932 18940 18946 18963 18978 18980 19000 19024 19047 19064 19088 19139 19158 19183 19185 19194 19217 19218 19263 19276 19309 19354 19355 19362 19367 0,5 0,5 0,5 0,5 0,5 0,5 0,5 0,5 0,5 0,5 0,5 0,5 0,5 0,25 0,25 0,5 0,5 0,25 0,5 0,25 0,25 0,5 0,25 0,5 0,25 0,5 0,5 0,5 0,5 0,5 0,5 0,5 0,5 0,5 0,5 0,5 0,5 0,5 KẾT QUẢ PHỐI HỢP KHÁNG SINH VANCOMYCIN VÀ CEFEPIME MIC MIC MIC VAN FEP FIC FEP (FEP) (VAN) 16 0,125 0,375 16 0,25 0,75 0,25 32 0,125 0,3125 32 0,25 0,5625 16 0,25 0,75 16 0,125 0,375 128 0,125 0,25781 0,125 0,5 16 0,125 0,25 16 0,125 0,375 32 0,125 0,3125 64 0,125 0,3125 32 0,25 0,5625 16 0,125 0,75 16 0,25 1,5 16 0,125 0,3125 0,25 0,625 16 0,125 0,75 64 0,25 0,5625 32 0,125 0,53125 16 0,125 0,75 16 0,25 32 0,125 0,53125 0,125 0,375 0,125 16 0,125 0,375 0,125 0,75 0,125 0,375 16 0,125 0,5 16 0,125 0,375 32 0,25 0,5625 16 0,125 0,3125 0,25 16 0,125 0,375 0,125 1,25 0,125 0,75 32 0,25 0,5625 16 0,125 0,3125 Tuân thủ Luật sở hữu trí tuệ Quy định truy cập tài liệu điện tử Ghi rõ nguồn tài liệu trích dẫn KẾT LUẬN Hiệp đồng Cộng Cộng Hiệp đồng Cộng Cộng Hiệp đồng Hiệp đồng Hiệp đồng Hiệp đồng Hiệp đồng Hiệp đồng Hiệp đồng Cộng Cộng Độc lập Hiệp đồng Cộng Cộng Cộng Cộng Cộng Cộng Cộng Hiệp đồng Cộng Hiệp đồng Cộng Hiệp đồng Hiệp đồng Hiệp đồng Cộng Hiệp đồng Cộng Hiệp đồng Độc lập Cộng Cộng Hiệp đồng Bản quyền tài liệu thuộc Thư viện Đại học Y Dược TP.Hồ Chí Minh STT 40 41 42 43 44 45 46 47 48 49 50 51 52 53 54 55 56 57 58 59 60 61 62 63 64 65 66 67 68 69 70 71 72 73 74 75 76 77 78 79 80 81 82 LAB ID MIC VK VAN 19397 19415 19428 19480 19491 19523 19525 19567 19571 19591 19595 19641 19665 19683 19687 19704 19712 19721 19726 19764 19785 19794 19804 19807 19820 19830 19840 19846 19855 19867 19872 19894 19911 19941 19967 19976 19980 20022 20023 20043 20060 20078 20082 0,5 0,5 0,5 0,5 0,5 0,5 0,5 0,25 0,5 0,5 0,5 0,5 0,5 0,5 0,25 0,5 0,25 0,5 0,5 0,25 0,5 0,25 0,5 0,5 0,5 0,5 0,5 0,5 0,5 0,5 0,25 0,5 0,5 0,5 0,5 0,25 0,25 0,5 0,5 0,25 0,5 0,25 MIC FEP 16 32 16 8 16 16 16 32 16 16 16 64 16 16 32 16 16 128 64 16 32 16 32 16 64 32 16 8 32 16 32 16 MIC VAN (FEP) 0,25 0,25 0,125 0,125 0,25 0,125 0,25 0,125 0,125 0,125 0,25 0,125 0,125 0,125 0,25 0,125 0,25 0,125 0,125 0,125 0,125 0,25 0,125 0,25 0,125 0,125 0,125 0,125 0,25 0,25 0,25 0,125 0,125 0,25 0,25 0,25 0,125 0,125 0,25 0,125 0,25 0,125 0,125 Tuân thủ Luật sở hữu trí tuệ Quy định truy cập tài liệu điện tử Ghi rõ nguồn tài liệu trích dẫn MIC FEP (VAN) 1 4 1 0,5 0,5 2 0,5 0,5 2 4 0,5 4 1 8 FIC 0,625 0,625 0,75 0,375 0,75 0,375 0,5625 0,75 0,5 0,5 0,5625 0,3125 0,3125 0,375 0,50781 0,53125 0,75 0,28125 0,75 0,625 0,5625 0,75 0,5625 0,28125 0,5 0,28125 0,5 0,625 0,625 0,625 0,53125 0,28125 0,625 0,75 0,625 0,625 0,75 0,625 0,375 1,5 0,28125 KẾT LUẬN Cộng Cộng Cộng Hiệp đồng Cộng Hiệp đồng Cộng Cộng Hiệp đồng Hiệp đồng Cộng Hiệp đồng Hiệp đồng Hiệp đồng Cộng Cộng Cộng Cộng Hiệp đồng Cộng Cộng Cộng Cộng Cộng Hiệp đồng Hiệp đồng Hiệp đồng Hiệp đồng Cộng Cộng Cộng Cộng Hiệp đồng Cộng Cộng Cộng Cộng Cộng Cộng Hiệp đồng Độc lập Hiệp đồng Cộng Bản quyền tài liệu thuộc Thư viện Đại học Y Dược TP.Hồ Chí Minh STT LAB ID MIC VK VAN 83 20066 0,5 84 20105 0,5 85 20119 0,5 86 20121 0,5 87 20165 0,5 88 20166 0,5 89 20188 0,5 90 20199 0,5 91 20205 0,5 92 20206 0,25 93 20211 94 20221 0,5 95 20224 0,5 96 20227 0,5 97 20245 0,25 98 20246 0,5 99 20306 0,5 100 20307 0,5 101 20319 0,5 102 20320 0,5 103 20324 0,5 104 20339 0,5 105 20342 0,5 106 20345 0,5 107 20374 0,5 108 20381 0,5 109 20403 0,5 110 20410 0,5 111 20440 0,5 Kết quả: Hiệp đồng: 50 Cộng: 57 Độc lập: Đối kháng: MIC FEP 16 8 64 16 16 16 16 16 32 32 16 16 16 64 16 16 32 8 16 32 32 16 MIC VAN (FEP) 0,125 0,125 0,125 0,125 0,125 0,25 0,125 0,25 0,125 0,125 0,125 0,125 0,125 0,125 0,25 0,25 0,125 0,125 0,25 0,125 0,125 0,25 0,25 0,25 0,25 0,125 0,25 0,125 0,25 MIC FEP (VAN) 1 1 1 0,5 2 4 1 chủng vi khuẩn, chiếm tỉ lệ chủng vi khuẩn, chiếm tỉ lệ chủng vi khuẩn, chiếm tỉ lệ chủng vi khuẩn, chiếm tỉ lệ Tuân thủ Luật sở hữu trí tuệ Quy định truy cập tài liệu điện tử Ghi rõ nguồn tài liệu trích dẫn FIC 0,5 0,375 0,375 0,3125 0,375 0,375 0,75 0,3125 0,625 0,375 0,3125 0,28125 0,375 1,25 0,53125 0,375 0,375 0,75 0,26562 0,375 0,75 0,5625 0,625 0,375 0,53125 0,28125 0,75 45% 51,3% 3,6% 0% KẾT LUẬN Hiệp đồng Hiệp đồng Hiệp đồng Hiệp đồng Hiệp đồng Cộng Hiệp đồng Cộng Hiệp đồng Cộng Hiệp đồng Hiệp đồng Hiệp đồng Hiệp đồng Độc lập Cộng Hiệp đồng Hiệp đồng Cộng Hiệp đồng Hiệp đồng Cộng Cộng Cộng Cộng Hiệp đồng Cộng Hiệp đồng Cộng Bản quyền tài liệu thuộc Thư viện Đại học Y Dược TP.Hồ Chí Minh Phụ lục STT LAB ID VK 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30 31 32 33 34 35 36 37 38 39 18637 18713 18719 18760 18788 18847 18882 18887 18946 18980 19047 19064 19139 19183 19194 19276 19354 19355 19362 19367 19397 19415 19428 19480 19491 19567 19571 19595 19687 19712 19794 19807 19830 19840 19846 19867 19872 19941 19967 KẾT QUẢ PHỐI HỢP KHÁNG SINH VANCOMYCIN VÀ GENTAMICIN MIC MIC MIC MIC VAN GEN FIC VAN GEN (GEN) (VAN) 0,5 16 0,25 0,75 0,5 16 0,25 0,5 16 0,125 0,375 0,5 32 0,125 0,28125 0,5 16 0,25 0,5 16 0,125 0,5 0,5 16 0,25 0,625 0,5 16 0,25 0,75 0,5 16 0,25 0,5625 0,5 64 0,125 0,375 0,5 32 0,125 0,5 0,5 16 0,125 0,5 0,25 16 0,25 1,5 0,5 0,125 0,75 0,5 32 0,25 0,5625 0,5 32 0,125 0,5 0,5 64 0,125 32 0,75 0,5 32 0,125 16 0,75 0,5 0,125 0,75 0,5 128 0,125 64 0,75 0,5 64 0,25 32 0,5 16 0,125 0,5 0,5 32 0,125 0,28125 0,5 16 0,25 0,5625 0,5 16 0,125 0,375 0,25 64 0,125 0,625 0,5 16 0,125 0,5 0,5 16 0,125 0,375 0,5 0,25 0,75 0,5 16 0,125 0,75 0,5 16 0,25 0,5625 0,5 16 0,25 0,625 0,5 16 0,125 0,75 0,5 16 0,125 0,5 0,5 16 0,125 0,3125 0,5 16 0,25 0,5 16 0,25 0,75 0,5 16 0,125 0,5 0,5 16 0,25 Tuân thủ Luật sở hữu trí tuệ Quy định truy cập tài liệu điện tử Ghi rõ nguồn tài liệu trích dẫn Kết luận Cộng Cộng Hiệp đồng Hiệp đồng Cộng Hiệp đồng Cộng Cộng Cộng Hiệp đồng Hiệp đồng Hiệp đồng Độc lập Cộng Cộng Hiệp đồng Cộng Cộng Cộng Cộng Cộng Hiệp đồng Hiệp đồng Cộng Hiệp đồng Cộng Hiệp đồng Hiệp đồng Cộng Cộng Cộng Cộng Cộng Hiệp đồng Hiệp đồng Cộng Cộng Hiệp đồng Cộng Bản quyền tài liệu thuộc Thư viện Đại học Y Dược TP.Hồ Chí Minh STT 40 41 42 43 44 45 46 47 48 49 50 51 52 53 LAB ID VK MIC VAN MIC GEN 20022 20023 20043 20060 20082 20066 20166 20211 20221 20246 20320 20345 20374 20381 Kết quả: Hiệp đồng: Cộng: Độc lập: Đối kháng: 0,25 0,5 0,5 0,5 0,25 0,5 0,5 0,5 0,5 0,5 0,5 0,5 0,5 16 32 32 16 16 16 32 32 32 16 32 16 16 16 21 31 MIC VAN (GEN) 0,125 0,125 0,125 0,125 0,125 0,125 0,125 0,125 0,125 0,25 0,125 0,125 0,25 0,25 MIC GEN (VAN) 16 8 16 8 chủng vi khuẩn, chiếm tỉ lệ chủng vi khuẩn, chiếm tỉ lệ chủng vi khuẩn, chiếm tỉ lệ chủng vi khuẩn, chiếm tỉ lệ Tuân thủ Luật sở hữu trí tuệ Quy định truy cập tài liệu điện tử Ghi rõ nguồn tài liệu trích dẫn FIC 0,75 0,3125 0,5 0,5 0,5 0,625 0,3125 0,3125 0,75 0,5625 39,6% 58,5% 1,9% 0% Kết luận Cộng Cộng Hiệp đồng Hiệp đồng Cộng Hiệp đồng Hiệp đồng Cộng Hiệp đồng Cộng Hiệp đồng Cộng Cộng Cộng Bản quyền tài liệu thuộc Thư viện Đại học Y Dược TP.Hồ Chí Minh Phụ lục CÁC CHỦNG VI KHUẨN CÓ MIC THAY ĐỔI CÓ Ý NGHĨA KHI PHỐI HỢP VANCOMYCIN VÀ GENTAMICIN Thay đổi MIC gentamicin có ý nghĩa Khi phối hợp với vancomycin, MIC gentamicin từ kháng thành nhạy 27 chủng (chiếm 50,9%) STT Lab ID 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 18637 18719 18760 18847 18882 18887 18946 19064 19194 19415 19428 19480 19491 19571 19595 19794 19807 19840 19846 19872 19941 20043 20060 20066 20221 20320 20374 MIC Gen (µg/mL) 16 16 32 16 16 16 16 16 32 16 32 16 16 16 16 16 16 16 16 16 16 32 16 16 32 32 16 MIC Gen có Van (µg/mL) 4 4 1 2 4 4 2 Tuân thủ Luật sở hữu trí tuệ Quy định truy cập tài liệu điện tử Ghi rõ nguồn tài liệu trích dẫn Nồng độ Van (µg/mL) 0,25 0,125 0,125 0,125 0,25 0,25 0,25 0,125 0,25 0,125 0,125 0,25 0,125 0,125 0,125 0,25 0,25 0,125 0,125 0,25 0,125 0,125 0,125 0,125 0,125 0,125 0,25 Hiệu R→S R→S R→S R→S R→S R→S R→S R→S R→S R→S R→S R→S R→S R→S R→S R→S R→S R→S R→S R→S R→S R→S R→S R→S R→S R→S R→S Bản quyền tài liệu thuộc Thư viện Đại học Y Dược TP.Hồ Chí Minh Khi phối hợp với vancomycin, MIC gentamicin từ kháng thành trung gian 17 chủng (chiếm 32,07%) MIC Gen Nồng độ Van Hiệu có Van (µg/mL) (µg/mL) 18713 16 0,25 R→I 18788 16 0,25 R→I 18980 64 0,125 R→I 19047 32 0,125 R→I 19139 16 0,25 R→I 19276 32 0,125 R→I 19567 64 0,125 R→I 19712 16 0,125 R→I 19830 16 0,125 R→I 10 19867 16 0,25 R→I 11 19967 16 0,25 R→I 12 20022 16 0,125 R→I 13 20082 16 0,125 R→I 14 20166 32 0,125 R→I 15 20246 16 0,25 R→I 16 20345 16 0,125 R→I 17 20381 16 0,25 R→I Khi phối hợp với vancomycin, MIC gentamicin từ trung gian thành nhạy chủng (chiếm 5,66%) STT Lab ID MIC Gen (µg/mL) STT Lab ID MIC Gen (µg/mL) 19183 19362 19687 8 MIC Gen có Van (µg/mL) 4 Tn thủ Luật sở hữu trí tuệ Quy định truy cập tài liệu điện tử Ghi rõ nguồn tài liệu trích dẫn Nồng độ Van (µg/mL) Hiệu 0,125 0,125 0,25 I→S I→S I→S Bản quyền tài liệu thuộc Thư viện Đại học Y Dược TP.Hồ Chí Minh Phụ lục BẢNG PHA LOÃNG KHI PHỐI HỢP KHÁNG SINH Vancomycin kết hợp cefepime Cefepime (µg/mL) (PC) 128 64 32 16 0,5 0,25 0,125 0,5 0,25 0,125 Vancomycin (ug/mL) 0,5 0,25 0,125 0,0625 Vancomycin kết hợp gentamicin Gentamicin (µg/mL) (PC) 128 64 32 16 Vancomycin (ug/mL) 0,5 0,25 0,125 0,0625 PC: positive control, chứng dương, giếng khơng có kháng sinh Tn thủ Luật sở hữu trí tuệ Quy định truy cập tài liệu điện tử Ghi rõ nguồn tài liệu trích dẫn