Giá trị phát hiện dna mycobacterium tuberculosis trong mẫu niêm mạc miệng bằng kỹ thuật real time pcr trong chẩn đoán lao phổi

BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO BỘ Y TẾ ĐẠI HỌC Y DƯỢC THÀNH PHỐ HỒ CHÍ MINH - TRẦN PHƯỚC THỊNH NGHIÊN CỨU GIÁ TRỊ PHÁT HIỆN DNA MYCOBACTERIUM TUBERCULOSIS TRONG MẪU NIÊM MẠC MIỆNG BẰNG KỸ THUẬT REAL-TIME PCR TRONG CHẨN ĐOÁN LAO PHỔI LUẬN VĂN THẠC SĨ KỸ THUẬT XÉT NGHIỆM Y HỌC THÀNH PHỐ HỒ CHÍ MINH - NĂM 2020 BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO BỘ Y TẾ ĐẠI HỌC Y DƯỢC THÀNH PHỐ HỒ CHÍ MINH - TRẦN PHƯỚC THỊNH NGHIÊN CỨU GIÁ TRỊ PHÁT HIỆN DNA MYCOBACTERIUM TUBERCULOSIS TRONG MẪU NIÊM MẠC MIỆNG BẰNG KỸ THUẬT REAL-TIME PCR TRONG CHẨN ĐOÁN LAO PHỔI Chuyên ngành: Kỹ thuật xét nghiệm y học Mã số: 8720601 LUẬN VĂN THẠC SĨ KỸ THUẬT XÉT NGHIỆM Y HỌC HƯỚNG DẪN KHOA HỌC: PGS.TS TRẦN DIỆP TUẤN TS LÊ VĂN CHƯƠNG Thành phố Hồ Chí Minh - Năm 2020 LỜI CẢM ƠN Đề tài “Nghiên cứu giá trị phát DNA Mycobacterium tuberculosis mẫu niêm mạc miệng kỹ thuật real-time PCR chẩn đoán lao phổi” chủ đề lựa chọn để thực luận văn tốt nghiệp Chương trình đào tạo trình độ Thạc sĩ Kỹ thuật xét nghiệm y học Quá trình nghiên cứu thực mang lại cho nhiều trải nghiệm, kiến thức q báu, khả tìm tịi nghiên cứu để ứng dụng thực hành nghề nghiệp lẫn sống Bên cạnh niềm vinh dự thân học tập Đại học Y Dược Tp Hồ Chí Minh, Bộ môn Xét nghiệm Trung tâm kiểm chuẩn chất lượng xét nghiệm y học - sở đào tạo khối ngành khoa học sức khỏe có chuyên ngành xét nghiệm giàu truyền thống danh tiếng nước ta khu vực Để hồn thành q trình nghiên cứu hồn thiện luận văn này, lời xin bày tỏ lòng tri ân, trân trọng tới tất bệnh nhân cho học chân thực suốt trình học tập, làm việc đặc biệt bệnh nhân ln sẵn lịng để tham gia nghiên cứu Tơi xin bày tỏ lịng biết ơn sâu sắc đến Thầy Phó Giáo sư, Tiến sĩ Trần Diệp Tuấn Chủ tịch Hội đồng trường, Hiệu trưởng Đại học Y Dược Tp Hồ Chí Minh, Người Thầy với trọng trách chèo lái thuyền Đại học Y Dược dành thời gian quý báu để giúp đỡ hướng dẫn tơi xun suốt q trình thực nghiên cứu đặc biệt thời điểm mang tính định giá trị cơng trình Tơi xin bày tỏ lòng biết ơn sâu sắc đến Thầy Tiến sĩ Lê Văn Chương, Phó Giám đốc Trung tâm Kiểm chuẩn chất lượng xét nghiệm y học, Đại học Y Dược Tp Hồ Chí Minh, Người Thầy, Người Anh lớn với tâm huyết, tiên phong động viên, tạo niềm tin cho việc học tập nâng cao trình độ, theo đuổi đường chọn Thầy người trực tiếp hướng dẫn, diễn giải chia sẻ đến kỹ thuật chi tiết q trình hồn thành nghiên cứu Tơi xin bày tỏ lịng biết ơn sâu sắc đến Ban Giám hiệu, Phòng Đào tạo Sau đại học, Phịng Nghiên cứu khoa học - Cơng nghệ, Bộ môn Xét nghiệm, Trung i tâm Kiểm chuẩn chất lượng xét nghiệm y học thuộc Đại học Y Dược Tp Hồ Chí Minh; Ban Giám đốc, Quý Lãnh đạo, Quý Anh Chị đồng nghiệp Khoa, Phòng Bệnh viện Phạm Ngọc Thạch, Tp Hồ Chí Minh giúp đỡ tạo điều kiện thuận lợi toàn thời gian liên hệ công tác lấy mẫu nghiên cứu đề tài Đặc biệt, xin gửi lời tri ân sâu sắc đến Thầy Phó Giáo sư, Tiến sĩ Vũ Quang Huy, Trưởng Bộ môn Xét nghiệm, Giám đốc Trung tâm Kiểm chuẩn chất lượng xét nghiệm y học, Đại học Y Dược Tp Hồ Chí Minh Người Thầy với tầm nhìn rộng lớn ngành xét nghiệm ln có đánh giá tồn diện để định hướng tạo điều kiện tốt cho chúng tơi hồn thiện cơng trình nghiên cứu cách trọn vẹn Cuối điểm tựa vững tơi sống để hồn thành tốt q trình học tập cơng tác Tôi xin khắc ghi công ơn sinh thành nuôi dưỡng Cha, Mẹ Cảm ơn người Vợ thương yêu bên cạnh chia sẻ, giúp đỡ dù lúc thuận lợi hay khó khăn Xin cảm ơn Gia đình hai bên Nội, Ngoại, Bạn bè, Q Thầy Cơ Anh Chị Em cấp trên, đồng nghiệp, sinh viên giúp đỡ, động viên chia sẻ khó khăn thời gian tơi học tập hồn thành luận văn Thành phố Hồ Chí Minh, tháng năm 2020 Trần Phước Thịnh i LỜI CAM ĐOAN Tôi Trần Phước Thịnh, học viên lớp Thạc sĩ Kỹ thuật xét nghiệm y học, niên khóa 2018 - 2020 Đại học Y Dược Thành phố Hồ Chí Minh Tôi xin cam đoan: Đây luận văn thân trực tiếp thực hướng dẫn Thầy Phó Giáo sư, Tiến sĩ, Bác sĩ TRẦN DIỆP TUẤN Thầy Tiến sĩ LÊ VĂN CHƯƠNG Công trình khơng trùng lặp với nghiên cứu khác cơng bố Tồn số liệu thông tin nghiên cứu trung thực, khách quan xác nhận chấp thuận sở nơi nghiên cứu Thành phố Hồ Chí Minh, ngày tháng Tác giả Luận văn TRẦN PHƯỚC THỊNH năm 2020 DANH MỤC CHỮ VIẾT TẮT Acid-Fast Bacillus AFB Trực khuẩn kháng acid Acquired Immunodeficiency Syndrome AIDS Hội chứng suy giảm miễn dịch mắc phải Bacille de Koch BK Trực khuẩn Koch Base pairs bp Cặp base nitơ Colony forming unit CFU Đơn vị hình thành khuẩn lạc Cycle threshold Ct Chu kì ngưỡng phản ứng real-time PCR DNA Deoxyribonucleic Acid dNTP Nucleoside triphosphate EDTA Ethylenediaminetetraacetic acid Human Immunodeficiency Virus HIV Vi rút gây suy giảm miễn dịch người Insertion sequence IS Đoạn DNA chèn Line Probe Assay LPA Kỹ thuật lai đầu dò Mycobacteria other than Mycobacterium tuberculosis MOTT Các Mycobacteria vi khuẩn lao Mycobacteria Growth Indicator Tube MGIT Nuôi cấy vi khuẩn lao ống thị MTB Mycobacterium tuberculosis Mycobacterium tuberculosis complex MTBC Các lồi thuộc nhóm vi khuẩn lao Nontuberculous mycobacteria NTM Các Mycobacteria vi khuẩn lao Real-time Polymerase Chain Reaction Real-time PCR Phản ứng chuỗi Polymerase thời gian thực Polymerase Chain Reaction PCR Phản ứng chuỗi polymerase RNA Ribonucleic Acid Reverse transcription Polymerase Chain Reaction RT-PCR Phản ứng chuỗi polymerase chép ngược RIF Rifampicin RMP Thermus aquaticus Taq (polymerase) Vi khuẩn sử dụng để phân lập men DNA polymerase chịu nhiệt World Health Organization WHO Tổ chức Y tế Thế giới i MỤC LỤC LỜI CẢM ƠN i LỜI CAM ĐOAN iii DANH MỤC CHỮ VIẾT TẮT .iv MỤC LỤC vi DANH MỤC BẢNG x DANH MỤC HÌNH xii DANH MỤC BIỂU ĐỒ, SƠ ĐỒ xiii ĐẶT VẤN ĐỀ CHƯƠNG TỔNG QUAN TÀI LIỆU 1.1 Tình hình bệnh lao 1.1.1 Tình hình bệnh lao giới .3 1.1.2 Tình hình bệnh lao Việt Nam .4 1.2 Đại cương vi khuẩn lao 1.2.1 Đặc điểm phân loại sinh học 1.2.2 Đặc điểm hình thái học 1.2.3 Đặc điểm tăng trưởng nuôi cấy .6 1.2.4 Đặc điểm gây bệnh vi khuẩn lao 1.2.5 Chẩn đoán bệnh lao phổi 1.3 Mẫu bệnh phẩm xét nghiệm vi sinh chẩn đoán lao phổi 11 1.3.1 Mẫu đàm ho khạc tự nhiên 11 1.3.2 Một số bệnh phẩm khác 12 1.3.3 Những thách thức chẩn đoán lao phổi với mẫu bệnh phẩm đàm 13 1.4 Một số kỹ thuật xét nghiệm chẩn đoán vi khuẩn lao 15 1.4.1 Xét nghiệm nhuộm soi trực tiếp 15 1.4.2 Xét nghiệm nuôi cấy vi khuẩn lao 17 i 1.4.3 Xét nghiệm sinh học phân tử 17 1.5 Kỹ thuật phát DNA Mycobacterium tuberculosis phản ứng real-time PCR 24 1.5.1 Đoạn gen chèn IS 6110 24 1.5.2 Phản ứng real-time PCR 25 1.6 Một số nghiên cứu liên quan đề tài .30 CHƯƠNG ĐỐI TƯỢNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 33 2.1 Đối tượng nghiên cứu .33 2.1.1 Dân số nghiên cứu 33 2.1.2 Tiêu chuẩn chọn vào 33 2.1.3 Tiêu chuẩn loại 33 2.1.4 Địa điểm thời gian nghiên cứu 34 2.2 Phương pháp nghiên cứu 34 2.2.1 Thiết kế nghiên cứu 34 2.2.2 Cỡ mẫu .34 2.2.3 Nội dung nghiên cứu 35 2.2.4 Phương pháp tiến hành 36 2.2.5 Phân tích xử lý số liệu 50 2.3 Đạo đức nghiên cứu y sinh học 52 CHƯƠNG KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU 53 3.1 Đặc điểm đối tượng nghiên cứu .53 3.1.1 Đặc điểm giới tính .53 3.1.2 Đặc điểm độ tuổi phân bố nhóm tuổi .54 3.1.3 Đặc điểm nghề nghiệp số yếu tố nguy .55 ii 3.1.4 Đặc điểm lâm sàng hình ảnh Xquang phổi 57 3.1.5 Kết thu thập mẫu đàm mẫu phết niêm mạc miệng .58 3.1.6 Kết xét nghiệm mẫu đàm 60 3.2 Giá trị mẫu phết niêm mạc miệng chẩn đoán lao phổi 62 3.2.1 Kết phát DNA Mycobacterium tuberculosis mẫu phết niêm mạc miệng bệnh nhân nghi ngờ mắc lao phổi 62 3.2.2 Giá trị phát DNA Mycobacterium tuberculosis mẫu phết niêm mạc miệng chẩn đoán lao phổi 63 3.2.3 Giá trị mẫu phết niêm mạc miệng trường hợp không lấy mẫu đàm thời điểm khám .65 3.3 Phân tích số yếu tố liên quan đến âm tính giả mẫu phết niêm mạc miệng 66 3.3.1 Yếu tố bệnh lý đái tháo đường ăn uống trước lấy mẫu 66 3.3.2 Yếu tố mật độ vi khuẩn 67 CHƯƠNG BÀN LUẬN .69 4.1 Đặc điểm đối tượng nghiên cứu .69 4.1.1 Đặc điểm giới tính .69 4.1.2 Đặc điểm độ tuổi phân bố nhóm tuổi .71 4.1.3 Đặc điểm nghề nghiệp số yếu tố nguy .73 4.1.4 Đặc điểm lâm sàng hình ảnh Xquang phổi 75 4.1.5 Kết thu thập mẫu đàm mẫu phết niêm mạc miệng 77 4.1.6 Kết xét nghiệm mẫu đàm 78 4.2 Giá trị mẫu phết niêm mạc miệng chẩn đoán lao phổi 81 4.2.1 Kết phát DNA Mycobacterium tuberculosis mẫu phết niêm mạc miệng bệnh nhân nghi ngờ mắc lao .81 ル ″′‐ )″ g`:プιグ ￨`′ `´ 'gl'aO ε′ ′ ∂ブ9ι ′ ′771'″ ″了 力ασSγ ″ 1'′ ″ 9!′ ￨'1'′ /2′ p力 」 δ″g■ 00 )α メ カ '`7,7ι BO Y TE CoNG IIOA XA IIoI CHU NGIIIA VIttT NAM〔 D本 IⅡ oC Y DJσ C Doc lap― Tり do― IIanh phic TⅡ ANH PHO HO CHIⅣ IINⅡ 7]´ _力 iδ C'力 ′ノ l夕 ″ ′ 7,4gaッ イ 乃 ´ η gF ηタノ,2θ 2θ ダ′ ,′ KET LUAN HoIDONG DANH GIA LU本 N VAN TH本 C SI Cttn ci quy6t dinh s6 3967/QD― DHYD,ngay 21/9/2018 cia Hieu tru6ng Daihoc Y Dじ OC TP.H6Chi NIinh vさ viec cOng nhan hOC Vien trinh thac sI kh6a 2018-2020; Cttn ci quyё t dinh s6 2115/QD― DHYD 21/8/2020 cia Hieu trlr6ng Dai hoc Y DITgc TP.Hら Chf Minh vさ viec lap Hoi dδ ng danh gM luan vttn thac sl cho hoc vien Tran Phlr`c Thinh Ngay 15/9/2020 tai Dai hOc Y DuOc TP.H6Chf Minh,Hoi dOng da hOp chinh thic de hQc vien b△ o ve luan vttn trl・ 6c IIoi dong De tai:Nghien ciu gii tri phit hien DNA]Ⅵ :ycobacteriuln tubercu10sis trOng miu niOm mOc mieng bing ky thuat real… time PCR chin doin lao ph6i ChuyOn nganh::Kly thuat x6t nghic11l y h9c卜4a s6:8720601 Sau hoc vien trinh bay luan vln va tra lさ i cau h6i cia cac phム n bien, cAc vien IIoi d6ng;IIOi dふ ng da hop vath6ng nhttt cic nOi dung sau: 1.Nhing ket luan lkhoa hOc cσ bin,nhi・ ng diCIn‐ ■6i,d6ng gop ln6'i cia luan vttn: NghiOn cm c6 cach ti6p can m6itrong l△ yl蒟 u benh ph△ m d6 xac dinh vi khuan la。 ,xic dinh dlroc tinh kha thi cia phu,。 ng phip lΔ y n15u v6i gia tri dO nhay 74,4シ va dic hieu 100シ dic biet giai quyet dtrgc ll■ ot sO tinh hu6ng kh6 khttn lay mau dam 2.(〕 σs6 khoa h9C,do tin cay cia nhi'ng luan diCIIl v】 ket luan neu luan v】 n: PhlFOng phap va thiet ke nghiOn Ciu pht hgp,ky thuat Xё thり c t nghielll dlToC hien c6 tin cay cao,d11 lieu dugc xic nhan b6i dOn vi nghien ciu.IKOt luan stt ding va bam stt cac muc tieu 1イ 2′ グ)''gグ′″σ′ 7gツ aO σ ″∂′?ι ′ ″ノ′771'a′ 7/′7α σ γ″∂ ッ∂ ″1'′ 6・ 2′ )α ′ P力 δ ′ ,g Sα ″五 力Oε `′ 3.Y nghia va l′ luan va thΨ C ti5n,nhing da nghisi dlng cic k6t qui nghien cll,u cia de tailuan vう n: (E)6′ nghTa l′ luan va thり C tiOn thOng qua kOt qua va ban luan tAc gia da cho thay sv kha thi va giai quy6t ducc vム n dё lり a chOn inau benh phanl thay th6 trOng inot so truδ ng hop kh6ng lay duocI.lau daln 'c dip llng cic yOu cau cia luan vttn: 4.卜 任 ■ E)五p ing duOC yOu cau cia luan vユ n thac si ky thuat xё t nghiel■ l y hOC Sau da chinh sia theO gOp y cia IIOi dOng dinh gll luan Van 5。 :Nhlng dienl can b6 sung,sia chia cia luan v】 n: Chinh sia va b6 sung theo bien ban h9p hoi dong danh gia luan vttn thac sI 6.Ket luan: Cin ci vao k6t qua b6 phi6u(100シ tin thanh)IIoi dら ng dinh gi`luan vttn da nghi Hieu tru6ng cong nhan hoc vithac si chO hoc vien Tran Ph116c Thinh CHU TICH HOI PGS.TS.VU ANG IIUY CONG HOA XA HOICHU NGHIA VIET NAM DOc lap― TV - Hanh phrlc BAN NHAN XET LUAN VAN TH4C SI ―Da tai:Nghien ciu gia tri phtt hien DNA Mycobacterium′ ク ′ οis bθ ″ θ ν s」 mau niem mac mieng bふng k,thu∼ Real― time PCR ch△ n doin lao ph6i。 Tran PhlF6C Thinh ―HoC Vien:Tran Phu6C Thinh,TrtF挽lg DH Y Dugc TP Hさ ‐Chuyen nganh:Ky thuれ xё Chi Minh t nghiem Y hoc.Ma s6:8720601 ‐N‐ guむ i nhan xё t:TS BS Nguyen IIIu Lan ―E)on vicOng t`c:Benh vien Pham NgOC Thach NoIDUNG NH4N XET: 1.T6ng quan chung: can phat hien s6・ l va diさ u tri s6nl benh nhan lao ph6i dang hoat tinh d6 ngttn chぅ n sv lay truyen vi khuan 卜 ycobacteriunl tuberculosis IIau het cic xё t 碩 nghienl chan doin benh laO hien deu dva vao v19c lay lnau dむ nl tむ nhむng benh nhan lao c6 trieu chmg.Tuy nhien,rit血 61行 duoc mau dam c6 c血 l119ng tre nh6 va nhttng benh nhan 16n tu6i va nhttng dang benh lao c6 s6 11FOng Vi tring laO ft.Chat luCllg inau dむ nl Cing khOng dふ ng nhム t Ca(6F benh nhan nglIむ 11“ ho hac c6 dき m.Hm n,a,viec l行 dむm taO cAc nf dung c6 chia vi khuin lao c6 kha nlng lay nhi5m,gay nguy hi6m cho nhan vien y te Va benh nhan xung quanh.:N.hサ ng thich thic tlng len trOng trucng h9p ph`t hien laO Chi dOng V6i S(5 11FOng 161l benh nhan Can c6 cac phtFOng ph`p lΔ y inau benh laO dё dang hOn,an tOan hσ n Va hieu qua hm.cic nghien cm gan dtt da dΔ nh gM cac cach l△ y mau x6t nttiem thay th6 khiC,Ching han nhlF nu6C bot,n116C ti6u,1■ lau Va Chat CO dOC trOng hCi th6 th6 ra.Th各 血6ng may,山 血gmhnけ thuぬ g c6 nhり holc dlc hieu thわ hon so vol dむnl Da c6 nghien ciu dinh gii viec phet mieng de thay the viec lay mau dam xё t nghiem vi khu△ n lao.S61u∝ lg trvc khu△ n lao c6 th6 tich tり niem mac mieng cia benh nhan lao di d6 c6 th6 phtt hien bふ ng phuollg phip PCR dinh lu∝ lg nhu Gen Xpei cho k6t qua rtt kha quan.C6klla nこ ng d“ dl10C 90%so v6i mau damo L∼ ph6t mieng da thVC hien,血 Ong g∼ dau dぬ ,L6ng xam l△n va khOng tao dung c6 ch`a vi khuan lao.′ l行 I｀ r△ i nguOC V6i viec khac danl,viec mh bttg ph6t mieng chi mtt vai gtt d6 hott tham va nong c猛 L6ng gian rieng d6恩 lac nh6.Vi vay,phuα lg phap phtt hien DINAル タθ ο bα σ たr′ ″ ′ 励θ rθ ν わsお mau niem mac mieng bら ng “ ky thua real― time PCR chan doan lao ph6ila mOt cich tiep can m6itoi Viet Nam,ap dung phuα lg phip xё t nghiem c6 nhay cao de xic dinh tinh kha thi cia mot mau benh pham m6i chan doan lao ph6io Mau phet nienl rnac inieng c6 the c6 1nat vi khuan thap nhmlg dさ lay va c6 th6 1ay nhiё u lan d6 x6t nghiem gi`p tttng xic su`t phit hien bttng ching vi khuan hoc tき d6gitp dieu tri kip thむ i(gianl nguOn lay)va diさ u tri ding(g■m ti le khing thu6c va giam lang phi nguふ n lvc)。 Nen dさ tai nghien ciu``Gia tri phtt hien DNA]Ⅵ lycobacterium tuberculosis blng phlF∝lg phip Realtime PCR trOng ch△ n dOin lao ph6i"rtt hay va c6 gii trithVC t6 2.U'u di6m,nhlrgc di6m cia luan vttn va noi dung,hinh thic: /Tinh c昴 血i6t,thむ i sy,′ nghia th、 Ictitt va noa hoc cia dさ tai? TrOng chi6n luoc chΔ in dttt benh lao vao n沈 ln 2030 cia VietlNain cing nhu tren toan cau vao nttm 2035 cia WHO,x6t nghiem ch△ n ch△n doin xac dinh vi khuin l五 6d6ng vai trё then ch&v6i mot s6 yeu cau nhu c6 nhay t6t d6 phtt hien dlroc bふ ng ch`ng vi khu△ n,kδ t qua xё t nghiein cho ph6p quy6t dinh btt dau diさ u trl lao,benh nhan c6 th6 nhan k6t qua ngay,x6t nghiem nhanh (da dang thlFC hien tai CO S6 y t6 Ving Sau Ving Xa)ima tvu trung 10i la d“ duOC muC tieu Xay dung dlFOc he th6ng phё ng chan doin laO khOng dlFa VaO phδ ng Xё t nghiem,khOng d、ra vao mau dam.Trong d6,mot xa nghiem vi sinh ch△ n doAn vi khu△ n lao duoc xem la hieu qua cac nさ n tang ky thu"phai cang dlFoC d(m gian h6a d6 xac dinh cic dau chi da bi&1lhu cic acid nucleic dュ d6vむ a daln baO tinh chinh xic vシ c hieu ad(m■ gian d6 c6 th6`p dung tuy6n y t6 cσ s6,ュ gay v6i sv phtt tri6n manh mё cia khoa hoc― ky thu∼ dら c biet la x`t nghiem sinh hoc phan ti,di6n hinll la xё t nghiem Xpe■ MTB/RIF(th6 he Ultr→ c6gi6i han phtt hien c6 th6 d“ t6i du6i lo t6 bao vi Hlu△ ntrong l mL mau dam nhlmg V6i nhinlg thaO taC ky thu"rtt dOn gian Va an tOan,ChlFa k6 nhting th6 he tiep theO Va Ca nh枷 lg k,thu"khic sO cang hoan thien hon n,a nhu ve mtt chi phf,gi6i h"phit hien vi nu猛 nhmg d6ity"g v6i mat thあ Tuy山 ien inau benll ph△ In cing g6p phan khOng nh6 ky thuat xё t nghienl vi khuan hoc,dぅc biet hon trOng chan doin lao phOilai si dung inau benh phanl danl,tuy la mau c6 th6 c6 mat vi khu△ n caO dO xu△ t phtt tき vi tri t6n thlF∝ lg,mau lai c6 ttt chit nhけ 山&,mOng dさ ng ttit va dδ bil∼ mau sai hoic hOng l△ y dugc mau lam giam dO nhay cia cac ky thu餌 k6。 (k6ca ky thu∼ Mots6 mh thay th6thv統lg xam lin,t6n kё m va“ i nhiさ u dam ca。 )mOt cich dAng h6i ky thuat ca0 1ai g“ han ch6 khitri6n khai va y t6 co s6 hoic b6i chh phaitam soit chi dongo viec l行 mau benh ph△ m bong thatt cong hoic hOng dat chitlu"g la thuollg xay inau daln(khi so sinh v6i cac inau benh phanltrong cac benh l′ nhiam miC)hi6n tile phat hien Vi nu△ n Vh cё nthわ (50-70%)mic di cic k, thuれ Xё t nghiem da r〔 it phtt tri6no Nhu vay nghien cttu dam bao tinh thδ i sV Va c6′ nghia thVC thVC tian cing nhu dugc thi6t k6 va si dung quy trinh k, thuat dlrOC thalll khaO ttF CiC nguOn Chfnih thOng Va CO gll trl nen Van daln ba0 ducc tinh khOa hoc。 /Kh6ng th∼ sy ting l如 cia da tai nghien c血 v6ic`c cOng trinh,luan v独 da dtFOC COng b6 trOng Va ngOai nU6C;tinh t口 ung thLFC,rO rang Vふ day di trOng trich dan tailieu tham kha。 / Sy pht h9p gi,a ten dさ tai v6i nOi dung,gila nOi dung v6i chuyen nganh va llla so chuyen ngainh Ten de tai pht h9p V6i nol dung de tai.T'ic gia thvc hien de tai nghien cttu,ng dung k'thuat X6t nghienl d6 XiC dinh gii tri Cia inau benh ph△ trirlh dO Ci nhan ky thuat x6t nghienl y hoc va tv thvc hien xё in rn6i,tic gia c6 t nghienl nghien ciu,n6i cach khac tac gia slレ dung ky thuat xё t nghieln d6 giai quy6t vin da trOng lanl Sang(y hoC),Vay da tai c6 s、 F pht h9p v6i chuyen nganh Ky thuat xё t nghienl y h9c va da tai d119c thvc hien lnot cich cong phu,vき a taln,pht hop v6ilmta so dao tao trillll thaC sI / K16t qua nghien cilュ m.6i cia tac giム ,d6ng g6p m.6i cho sV phit tri6n khoa hoc.Y nghia khOa hoc,gia tri va tin cay cia nhttng ket qua d6 Nghien cm c6 cach ti6p c“ m6i l行 mh benh ph△ m d6 xac dinh vi nu猛 la。 ,xac ditt duoc titt thi cta phumg ph如 1行 mau,it ttΔ t la vさ mュ ts血 hoC Vi da XaC dinil dlFoC DNA cta vi khuan trOng mau v6itile ien 70%,de xlc dinh S、 F Xuat hien E)1ヾ A d6 c6 the la te bao sOng,hay vi khuan da chet hay chila mot mau DNA tV mau benh ph△ m,can nhttng nghien cttu v6i cac phuσllg phap khic nhll nuoi cay Theo d,lieu y vm duoc cong b6,phumg ph如 1行 mau duoc nghien cm bit ngu6n tt cach lay mau tЮ ng Hhh vvc thi y,cu the la xic dinh vi khuan lao tren C`C10ai linh trtF6ng,■ 10t S6 it CaC nghien Ciu tren nguむ i da duOC nghien Ciu cic khu vり c khic tren th6 gi6i,tai Viet Nam chlra ghi nhan nghien cttu ttrong tV, ket qua nghien ciu c6 tinh m6i vi phan inh duOC Cu the phan dan SO lay nlau tai c`c khu vり c dia l′ khic nhau(ching t09),diau kien x6t nghiein cu th6 tai nci lay mau K16t qua nghien ciu tin cay v6i StF XiC nhan Cia CO quan nghien Ciu / Uu di6nl Va nhlFoC di6nl Va nOi dung,k6tC△ u Va hinh thiC Cia luan Vttn 士Иδ″ ′ ″ツ タ ″′ r cttα J″ ′ aヵ 〕ヵ働協 ル タ ッ `″ `ガ “ “ ‐Luan vュ n dtroc trinh bay rё rang,noi dung c6 chOn ta,khong lam dung tき vi6t tこ t(Si 19C,doc biet r△ t it 15i chinh dung tき Vi6t tttt pht hop)t● O Canl giic dδ doc da theO doi,lnach vユ n c6 tinh dさ ng bO cao viec si dung cic cap cia cac ti6u invc,dOan vュn va viec si dung thuat ng載 ,don vi luむng。 ―Luan vln duOC phan b6 day di cac phan theo yeu cia mOtluan vhn,gふ m: +D■ v△ndさ ,muc tieu nghien ciu: trang 十TOng quan tailieu: 34 trang +Phuσ ng phip va dOityong NC: 20 trang 十Ket qua nghien ciu: +Ban luan: 16 trang 22 trang 十Ket luan: trang +Kien nghi: l trang。 ‐Nllin chung k(St c`u luan vttn can d(Si,phan phu luc tic gia b6 sung s6 1ieu nghien cill rtt cu th6,trinh bay da hi6u va gi`p luan vュ n tr6 nen chi ti6t,tin cay va khoa hOc。 _Tuy nhien nOi dung phan t6ng quan tai lieu cδ n tlFong d6i dai(so v6i nh,1lg phan cё n lai),nl・ c di tic gia da tap trung dian giai nh,ng nOi dung can thi(st vさ CaC ky thuat Chi y(Su duOC Si dung trOng nghien ciu.C6th6 xenl xё t rit ngin cё n lくhoalng …Tac 25‐ 30 trang gia cδ n si dung mOts6 ch vm mmgtinh bi“ ng(da dinh dh tЮ nglu如 van),nen chuyen sang the chi dOng pht hop hon vュ n phong khoa hoc 士レ 4θ ″ ′ ′″″g′ ″″θ “ _Phan dat van de:tic gia dこ t van dё pht hop v6iten de tai va inuC tieu nghien cttu,dan dtt tき vin da chung d6n vin dさ rieng biet va nlang chan doin va cu6i Cing la hu61lg Va0 1n,C tieu XiC dinh gii tri Cia inau ph6t nienl:mtac nlieng chan doin lao ph6i Phan t6ng quan tailieu:nhin Chung nOi dung day di ki(Sn thttc co ban d6 c6 th6 hi6u duOC′ nghia Cia dさ tai,tiC gia tap trung VaO nhむ 1lg nOi dung c6 1ien quan d(Sn truc ti(sp d(sn da tai,doc biet la cic ky thuat xё t nghielll.Tuy nhien nOi dung dai CIFOng vさ vi khu△ n laO c6 th6 xeln xё t vi(St ngttn gOn hcn n,a dΔ rit ngttn phan t6ng quan tai lieu,can d(Si v6i cic phan kh`c _Phan phlFong ph`p va doitl.。 1lg nghien c`u:nghien cttu dビ 。c thiet ke dang cttt ngang d6 xic dinll gia tri cia inau benh phanl.Trinh ty thu dung,thu thap d, lieu nghien Citi Va C`C ky thu"Xё t nghiem duOc n16 ta ILot cich logic va trinh tV thoi gian,th6 hien sv dさ ng thuan cia benh nhan viec thanl gia nghien ctru,the hien rё ngじ む i thalll gla cic glai doan nghien ciu nhu kh`11l va ghi llhan cac diu hieu lain sang,xquang duoc h6 trg b6i cac bic si chuyen khoa tai phδ ng khinl,k(St qua Xё t nghienl rnau danl dlFoC ghi nhan tai khOa Vi Sinh,IBenh Vien Pham NgOC Thach va phan ky thua thu thap,xil′ va x6t nghiem real_time PCR mau ph6t niem mac mieng duOC tic gtt trVC ti6p thVC hien.Tuy nhien tic gia can in6 ta r5 hon quy trinh ki611ltra chΔ tluong cia cic x6t nghienl danl dlroc thvC hien tai Khoa Vi sinh,cing nhu quy trinh danl bao tinh khich quan gi,a k6t qua x6t nghiem mau dam va mau niem mac mieng(trhh w thu thap k6t qua mau dam― chay x6t nghiem ph6t niem mac mieng,t`c gia c6 bi6t k6t qua xё t nghiem dam trlr6c chay mau ph6t niem mac mieng?!),quy trinh ki6m tra chttlumg xёt nghiem mau phet niem mac mieng ‐Phh k6t qua,btt lutt phM k6t甲 ムduoC trinh bけ tlFOng d6i t6t,bhg Va bieu dO ngttn gon va c6 strlua chOn phlrong phap trinh bay pht hOp gita bang, bi6u dさ trも n va bi6u dさ coto Dら c biet ghi nhan mot s6 y6u t6 b猛 19i thu thap mau dam d6 1am rё gM tricia mau ph6t niem mac mieng■ hien duoc tinh Sing t,O Cia tiC gia,ChlFa C6 nhimg nghien ciu tlFOng tv.Mlc di c0 1nau phan k6t qua chua qul 16n llllung da ln6 htF6ng nghien Ciu t6t -lKet luan va kien nghi:Tac gia dua ketluall da glai quyet duoc muc‐ tieu ban dau da dれ ra(2k6tluan dau cho muc tieu gM tri cia mau ph6t niem mac mieng va l k&luan vё anh hlr&lg cia mot s6 y6u t6 1e sv du∝ lg tinh gia cta mau ph6t niem maC mieng).TaC gia dlFa ki6n nghi pht h叩 tian va th6 hien duoc kha nmg nhれ v猛 品 ch ,mang mhthり C nghien cttu cia tic gia… mot dieu can thiet dao t.。 trinh dO sau dai hoc / Noi dung luan vこ n da dtFoC COng b6 tren top Chi,k'y6u hOi nghi khOa hoC nao va gii tri cta cic cong trinh da cong bo? Noi dung luan v五 1■ chlFa duoC C01lg bO tren tap San/kナ yeu khOa hoC naO.Van de nghiell c`u kha m6i ll16,va benh lao cing la inot van de chung cia nhieu qu6c gia,lnang tinh cong dOng nen tic gia c6 the can nhユ c cOng b6 qu6cte.Mttt kh`c COng bO nghien ciu cing danl bao hoan nhiem V,Cta inOt nglFむ i nghien c`u,tttc phai c6 d6ng g6p lai cho y van,xa hon la giip dO nhing benh nhan da ho trg cho nghien ciu cia tic gia /′ Nh,ng vAn da can b6 sung va sia chta: 一L5i chinh tatrang vi6t侵 lbふng ti6ng Anh trang IV va V ― TaC gia ding phlFOng phip Rea卜 time PCR d6 phtt hien DNA M.働 ma cu th6 1a doan DNA chё n IS6110,nhШ 18 DOng Nain A tゥ le vi khu△ n lao khOng c6 doan DNA chё n IS6110 dao dong 8-11%va VN#5%.Nhu vay sO mtt di mOt S6benh dO khOng th6 phtt hien bふ ng phlF∝ lg phip Real― time PCR ― TaisaO khOng ding Xpe■ MTB/RIF Ultra nla dung PCR real… tinle? ― ]B6sung phan chOng chi dinh lay danl kich thich _ cich ding tき ,khOng th6ng nhat lic thi phun dung bang nu6c inu6i baO hё a lic khac l,i phun bttng n116C inu6i lFu truCng?NtF6C Inu6i Uu truCng ba0 nhieu phan trttnl ―Lic thil∼ dam kich thich lic thll行 dam tic dOng, 一 Trang 20:B6sung them chi dinh Xpe■ M:TB/RIF 1ao trё em。 一 Trang 22:Xpe■ MTB/RIF ― Trang 24:GenoTypelMTBDRplus ver 2.0 - Trang 86:real… tilne PC)R ca thtFOng inai Va ty tOi uu h6a la gl? ― Va cac 16i chinh ta khic 3。 K6tluan: /Noi dung va hinh thic lu“ vh nけ d如 mg dl10C lu“ vm thac sl chWen nghanh x6t nghienl /′I｀ 6i dOng y de tic gia dlFoC COng nhan hoC VIthaC Sl y hoC Sau da Sia Chla va bo sung theo gop y ルク″ヵ,″gaッ ノ ィ′ ヵ蒻 g θ9″ 夕 2θ 2θ ル π∂cヵ ′ “ NGぴ さINHAN XЁ T (k】 夕Va ghirё ho ten) TS.BS Nguyen H■ u Lan ´″て ノ a″ ヵε ヵ。/ヵ ′ν″ヵ′″χι /′ ッ タ2「 Aィ D本 IⅡ oC Y DU'OC TP.Ⅱ O CHi MINH CONG ă X HOI C NGHIAVIET NAMi Doc lap‐ Tr do― :Hlnh phic ⅡOA BAN NHAN XET LUAN VAN THAC SI ―De tai: NghiOn ciu gii tri phit hien DNA Л ι α ε たF′ ぅ′ “ `θ niem mac mieng bう ng k,thuat ι ′′ ′ι θ s`istrong mau `“ “ “ “ real― time PCR chan doin lao ph6i" ―HOc vien: Tran Phlrθ c Thinh,Doih9c Y Drgc Tp.H6Chf Minh ―Chuyen nganh: K,thuat x6t nghiel■ y h9C ă4a s6: 8720601 -Ng i nhan x6t: GsoTs.Bs.Nguyen Thanh Blo ―D(m vicOng“ c:Khoa Y,Dli h9c Y Dlrcc TpoIItt ChfMinh NOIDUNG NHAN XET l.Tfnh cllp thi6t,thむ isy,′ nghia khoa h9c va thΨ c ti5n cia da tぅ i FS gay Benh la0 1a lnot benh truyさ n nhiarn dO Aィ ン ε ο bα θ ′ θ ″ク 7,2′ ν θ ″ ι ε ク ′ ο s」 z・ ra,cho den van thu hit duoc sv quan tanl 16n cia cic nha chuyen in6n tren th(S gi6i vi tile rnic benh va ti le tl)vong cao,di chttng va hau qua vさ lnュ t kinh t6-xa hOi kёm theo.Hien sv lan rong cia HIV/AIDS tren th6 gi6i khi6n benh lao gia tttng cing nhu tinh hinih khing thu6c cia vi khuan lao dang la ln6i 10 ngai16n C▲ C nu6C dang ph▲ ttri6n Cing nhu C`C ntF6C phit tri6n viec phtt hien san d6 diさ u tri benh lao va ngュ n chan sv lan tru,an cia cac ching vi khuin lao da khing thu6c cOng dふ ng la rit quan tr9ng quan l′ benh ho.Tuy nhien viec chtt doin iao ph6i鶴 貼6ng da dhg cac trieu ch軸 g lam shg n6ng dic hieu va viec l∼ dam laln mau bett ph△ m thuむ ng quy xё t nghienl cing gap lnot s6 kh6 khttn nhtF benh nhan khOng th6 ho khac tv nhien h。 c mau dam k6m ch猛 ぅ x6t nghiem.vi vay muc tieu cia dさ tai nhふ m 1げ ∝lg lam giam dO nhay cia cic nghien cttu gia tri cia ph6t niem maC mieng ch△ n doin lao bふ ng xё t nghiem DNA ふ ′ ″ θ θ ′ ν ″ ぅ´α ,み ′ zあ θ ′ ε ν わsJs la dip l'mg duOc yeu cau thり ctさ Viet Nam νあ蒻′ 力ι 力 ο′ 力 滋″ガ′ ′ッ タ む′ 2「 2。 Sy khOng tring IIp de t】 i Dさ tai kh6ng tnng l“ cac cOng trinh,luれ れ luれ van da cOng b6.Viec trich dan tailieu tham khム o r6 rang,tmng thvc va dム y di 3.Sy phi hgp gtta ten dё tai v`i noi dung,gi■ a noi dung v“ chuyOn nganh va lna so chuyon nganh Day la dさ tai c6 noi dung thuan tiy xё t nghieln vi sinh nen hoan toan phi h9pv(`,i chuyen nganh ky thuat xё t nghienl va rna s6 chuyen nganh 4.K6t qui nghiOn ciu ma cia tic gil,d6ng g6p m“ cho sy phit tri6n khoa h9c′ nghia khoa h9c,gii tri vう tin cay cia nhing ket qui d6 ィ I.Kι ′ gヵ ′ ′ ″ α ?″ ′″ “`″ “ K6t qua da d6ng g6p thOng tin m6i,c6gi`tri thVC tian vさ ph△ m gi▲ tri mau benh la ph6t niem mac mieng d6 chin doin lao ph6i bふ ng ky thuat real― time PCR.Cu the: ―Dax`c dinh dtrOC nhay,do dic hieu,gii trl tien dOin ducng va gill trl tien doin aln si dung k6t qua k6t quム xё t nghiem Xpel■ MTB//RIF Ultra mau darn lalin tieu chuan chan doan,lan luigt la 74,4%,100%,100%va 79,2% ăDinh gia du9C linot s6 y6u t6 inh hu&lg d6n arn tinh gia cia x6t nghieln mau ph6tniem mac mieng d6 n m matdo vi bu△ n thわ ,be血 山an c6五 n u6ng tru6c l∼ mau イ 2.Dρ ′ gル ι ″ ′ακ力″И ′ ツι li“ `′ `夕 c`c phucllg phap nghien cttu va c`c ky thuat ip dung nghien ciu nhtr ll■ ta luan vこ n la hOan tOan pht hOp v6i noi dung nghien ciu cich i`y mau benh phim gふ m phさ t niem mac mieng va mau dam duoc ti6n hanh ding chu△ no C▲ c ky thuれ nhuoln soi AFB trvc ti6p,Xpe■ 卜」 :TB/RIF va real― time PCR dtFoC tien hanh tai Benh vien Pham NgOC Thach va Trung taln Kiem chuan chtt lucllg xё t nghieln y hoc― Daih9c Y Dugc TP.H6Chi Minh(2 don vi c6 trinh dO chuyen lnOn ky thuat cao)nen ket qua c6 tin cay cao Aイ ″ ″励″ 力θ 力 あ ο′ ´′ν a 2「 あ,滋 励χ 5.I_/u va nhlrgc di6nl va noi dung,k6tciu v】 hinh thic luan v】 n if.ハ i∂ J″ ″g “ 士u'u di6m: _cic nOi dung nghien ciu hoan toan pht hop v(`ri nnuc tieu ăPhanTOng quan t6ng hgp d119c c`c s6 1ieu co gii trl Cia cic tic giム va ngoai nじ 6c va hoan toan lien quan den c`c rnuc tieu nghien ciu ―Phucllg ―ゝ 4ら c ph`p nghien cttu pht h9p,cac ky thuat si dung c6 chilll x`c cao。 di c6 nhiさ u s6 1ieu,nhung tic gia da trinh bay cic k(St quム theo lllot trinh tv r6 rang,c6nhan xё t sat hqp ―Trong phan ban luan,tic gia da binl sat rnり c tieu va kδ t qua nghien c`u, c6day dli s6 1ieu so sanh v6i cic tac giム trOng va ngOai n116c 士Nhrcc dienl: ―Khi bユ ng x`c dinh gii tri ph6t nielm lmac inieng cia benh nhan nghi laO ph6i ky thu"real― time PCR,c6mot sO nhugc diem sau: + Tieu chuan chan doin vang iィ ン ε ′ ″ 。ゎ αε θ ′ ν 772 ′ ク bθ ′ θ′ 。 sぉ la phucng zι phip nu6i cay chi khOng phai Xipe■ ― 卜ゝ 4au )イ TB/RIF phet nielll rnac chi dtrgc nghien c`u so sinh v6i nll盆 u danl,kh6ng duoc so s▲ nh v6i rnot s6 1nau benh phanl khac khong xain lan hOュ c xalll lan nllFC t6i thi6u ina nhiさ u tiC gia nghien ciu cho thay c6 gii tri si dung caO nhtr dich inti hong,dich da day bュ ng string test,va phan +Tac gia khOng soi nhuom AFB trり C ti6p tむ mau ph6t niem mac mieng de so sinh v6i soi trlJc tiep lnau danl?viso s`nh nhui vay sё co gll trl tich ctlc h∝1la so s`nh gitta real― time PCR phet niem mac mieng v6i soitruc tiep mau daln ■2.IirD″ 力 ′ Й漁 ` ―Phan ket Cau CiC ChtFOng tilF tOng quan tai lieu den dOi tlICng nghien Ciu Va phtFOng phip nghien Ciu,ket qua,ban luan Va kien nghi dip llng dlrgC yeu cau cia rn6t luan vttn thac sl _I― Iinh thici trinh bay dOp,vln phong r6 rang va de hieu んイ′ 励 η力ι力οr力 ′ ′力´″χど/′ ッタ2, 2′ :ソ 6.:Nh"ng van d6 b6 sung va sia chia …Phan tong quan kh`dai,can ngan gon sic tich h。 s`ch gi4o khoa.Dic biet muc l.4.“ Mot s6貯 thu"xё t 11,kh6ng viet d116i dang nghiem ch△ n dOin vi khu△ n lao hien nay''tき trang 15 den trang 33 1en den 19 trang la qu`dai,rn6i phucng ph▲ p xё t nghiem chi nen ngin gon vさ nguyen Йc va gii tri ch△ n doin la di ―Trong phan ketluan s6 si dung mau ph6t niem mac mieng nhu mot mau b6 sung cho mau dam “ (khi chualay duOc mau dam)c6the giip giam tile benh nhan phai chiu xam lan de l∼ mau dam hoic k6。 dai thさ i gian chm d。 猛" Doc k6tluan nay,nguむ i doc sC hi6u tき b6sung"trOng k6t luan c6 nghia “ la thay■ e mau dam.Nhlmg thay the c6 6n kh6ng khitile ducng tinh trOng mau phOt niem mac mieng la 71,4%so v6i mau dam kich ifch va 75%so v6i mau daln n9p tre 7.Ket luan D)ay la de tai c6 1nuC tieu r6 rang,phucllg phip nghien ciu c6 tinh khoa hOC Va dO tin Cay CaO,dtFa dlloC nhttng k(Stluan va ki(Sn nghi c6 gia tri vさ inュ t khoa h9c lan thvc tien.Dap ttlg cic yeu cau ve mtt noi dung va hinh thic d6i v6i ln6t luan vttn thac sI De nghi HOi dOng Cham luan vttn cOng nhan h9c vi Thac si Ky thuれ nghieln y hoc chO hoc vien ・ffi∂ 7:ン ′ ユ C力 ′ 4'″ 力 ,4gα l)′ ゴ 5′乃 湧″ θ 94夕 ″ 22θ 2θ g・ NGIJさ INHAN XЁ T GSoTSoNGUYEN THANH BA0 xё t ′ ′ νあ グ)″ g″ ぁ′ g ν ao ε クびノ ν´ ″ッ ク ″′ ヵα 9り ″′ ,′ `sγ BO Y TE DAIHOC Y DJσ C THANH PHO HO CHIⅣ IINH g sα γDα ノ ′ ″″ ソ どPヵ δ ヵθε CONG ⅡOA XA HOICHU NGHIA VIET NAM Doc Lap― TT do― IIanh Phic GrAy xAc NHAN BA eo suNG, stla cntla LUAN vAN THEo v mmx Hbr DoNG oAxn'crA rulx vAx'rnac si ― HOC Vien:Tran PhlF6C Thinh ―De tai:NghiOn ciu gii tri phit hien DNAル ら,cθ bα ″ ″2′″ ι ″ Jθ sお ι `″ `″ 1'“ mau niem mac mieng b】 ng ky thuat real― time PCR chan doin lao ph6i。 ―Chuyen nganh::K:,thuat x6t nghicln y h9c.… - NgtFむ i hu6ng dan: .IMia s6:8720601 1。 PGS.TS.Tran I)iep Tuan 2e TS.LOヽ ア 五n Chtrσ ng Luan vln da d119C b6 sung va sia chき a cu the cac dienl nhu sau: 1.:Rit ngan,can d6i dai phan tOng quan tailieu 2.IRtit gOn phan ket luan: ―B6phtt gid thieu cu the m6i benh nhan da d119C lay bao nhieu mau cac x6tnJliernicu the(da dugc gia thieu phan phumg phap nghien cttu va ket qua)。 ―B6phan in6 ta ket qua chi tiet s6 benll nhan duOc phit hien]DiNA vi khuan lao Hlau phet nielin inac nlieng nh61n phai phun dung lay danl kich thich hoュ c nop dalll tre(da duOc rn6 ta phan ket qua)6 ketluan s6 3.Ⅳ16 ta rё hon quy trinh thu thap ket qua mau dam― phet niem mac mieng de danl bao tinh khich quan ―B6sung′ “ ma h6a mau''trong llFu dO nghien Ciu 4。 Trinh bay them quy trhh kiem tra ch飢 lumg x6t nghiem mau phet niem nlaC rn19ng ―B6sung bム ng in6 ta cach thザ C hien in6i 16 chay x6t nghieln rcal― tilte PCR mau ph6t niem mac mieng va cich bien luan c`c tru洸 lg h《 p cia mau Chung de X`C dinh gia trl Cia 16 Xё t nghie111l trOng phan phtFOng ph▲ p nghien Cuu 5。 Chinh sia lδ i chinh tム ,vttn phOng va si dung th6ng nhat cic thuat ng七 B6sung phan ch6ng chi dinh lay daln kich thich,b6sung chi dinh Xipe■ MTB/RIF 1ao廿 eln 6。 Chinh sia lai k6t luan s6 th6 hien duOC rё gi:itri cia mau ph6t niem mac mieng truong h"kh6ng l△ y d119c mau dam 7。 ―B6sung′ “ si dung mau phet niem mac mieng trtr6c chi dinh phun khf dung l行 dam HCh thiCh hOiC trOng thむ ig血 bett nllM Chua nOp dtFoC mh dam" '″ Aイ ′ν〃)′ g σι 0,?g ν aο `'γ ゛ ′ と ′ノ ν´ ′ッ ク ″′ 力α びノ 9クァ `sγ ′ ″σ どP力 δ 7g Sα ′ツ Dα ′ 力θ ι `ィ 8.Vё lai llru d6 quy trinh nghien clim the hien cic truё ng h9p loai trき nhtng mau dam c6 AFB duσ ng tinh,Xpen am tinh,nhan k6t qua xё t nghiem dam n6u th6a cac dieu kien m6ithVC hien xё t nghiem phet niem mac mieng: _B6sung y trOng lげ udふ noi dung thvc hien real― time PCR Inau ph6t nieln lllac lnieng sau da``xerll x(`tth6a cic tieu chuan chOn vao va loaira" ―Vё lail■ Fu d6 dO dai cac mm tenth6 hienthittFtrOng quytrinh Xё t nghiem 9.Lam rё y6u t6 thむ i gian m u6ng cia be血 山舗trlr6c hil∼ mh: ― Trong phtt k6t qua da c6 tntt bけ thむ i gianこ n u6ng tw6cl行 mau cia benh nhan(tき 45d6n180 phit),cic trucng hOp ttn u6ng tru6c khil△y lnau d116i 30 phitsO khOng thu dung vao nghien ciu loo stt dung tai lieu g6c viec trich dan nhむ ngnoi dung ki6n thic coban: ―B6 sung tai lieu:R.Koch(1882), ''The etiology of tuberculosis", Reviews ofinictious discases,vol.4(no.6),pp.1270-1274 ―B6sung tai lieu:K.Ⅳ Iullis,F.Faloona,S.Schart et al(1986),"Specific enzynlatic anlplincation of DNA in vitro:the polyn■ erase chain reaction",Cold Spring I:Iarbor syn■ posia on quantitative biology,vol.51,pp.263-273 ăB6sung tai lieu: L.Garibyan,N.Avashia(2013),"Research techniques made sinlple:polymerase chain reaction(PCR)",The Jourllal of investigttive dennatology,vol.133(no.3),pp.e6" 、 g θ rP.〃δcヵ ′ 」 ィ ァ ″ ヵ ,′ ″ 4夕 ″2θ2θ ,4gaッ ノヱ.′ ′ NGUOIHU6NG DÅ N (K′ ten HOC VIЁ (Ky t6n ghi rd h9 t6n) N rO h9 t€n) ′ ′ ′ DIEP TUAN TS.LЁ VAN CⅡ U'σ NG Tran Phr`c Thinh // CIIU TICH HOIDONG DANH GIA LUAN (Ky t6n vd ghi rd hq t6n) PGS.TS.VU Q G HUY