"Nghiên cứu phương pháp sản xuất và kiểm nghiệm nguyên liệu cho chế phẩm Probiotics có chứa Lactobacillus acidophilus " HƯỚNG DẪN THẨM ĐỊNH HỆ THỐNG PHÒNG SẠCH – LĨNH VỰC DƯỢC THEO GMP WHO VÀ ISO 1464[.]
HƯỚNG DẪN THẨM ĐỊNH HỆ THỐNG PHÒNG SẠCH – LĨNH VỰC DƯỢC THEO GMP-WHO VÀ ISO 14644:2022 ThS Nguyễn Thị Thu Hường Khoa Vi sinh – Viện Kiểm nghiệm Thuốc Trung ương NỘI DUNG • Giới thiệu nguyên tắc chung thiết kế phòng • Hướng dẫn IQ, OQ, PQ hệ thống phịng lĩnh vực dược • Phương pháp thẩm định tiêu kỹ thuật phòng TRANG TÀI LIỆU THAM KHẢO 1.WHO EXPERT COMMITTEE ON SPECIFICATION FOR PHARMACEUTICAL PREPARATIONS - 45TH REPORT (WHO TRS 961) (2011) 2.WHO EXPERT COMMITTEE ON SPECIFICATION FOR PHARMACEUTICAL PREPARATIONS - 45TH REPORT (WHO TRS 961) (2011) - ANNEX “WHO GOOD PRACTICES FOR PHARMACEUTICAL MICROBIOLOGY LABORATORIES” 3.WHO EXPERT COMMITTEE ON SPECIFICATION FOR PHARMACEUTICAL PREPARATIONS - 45TH REPORT (WHO TRS 961) (2011) – ANNEX “WHO GOOD MANUFACTURING PRACTICES FOR STERILE PHARMACEUTICAL PRODUCTS” 4.WHO EXPERT COMMITTEE ON SPECIFICATION FOR PHARMACEUTICAL PREPARATIONS - 56TH REPORT (WHO TRS 1044) (2022) – ANNEX “WHO GOOD MANUFACTURING PRACTICES FOR STERILE PHARMACEUTICAL PRODUCTS” 5.WHO EXPERT COMMITTEE ON SPECIFICATION FOR PHARMACEUTICAL PREPARATIONS - 48TH REPORT (TRS 986) (2014) ANNEX 2: WHO GOOD MANUFACTURING PRACTICES FOR PHARMACEUTICAL PRODUCTS: MAIN PRINCIPLES TRANG TÀI LIỆU THAM KHẢO Part 1: Classification of air cleanliness by particle concentration Part 3: Test methods Part 4: Design, construction and start-up 10 USP 43, (1116) Microbiological control and monitoring of aseptic processing environments 11 USP 43, (1117) Microbiological best laboratory practices TRANG ĐỊNH NGHĨA KHU VỰC SẠCH GLOSSARY “CLEAN AREA: AN AREA WITH DEFINED ENVIRONMENTAL CONTROL OF PARTICULATE AND MICROBIAL CONTAMINATION, CONSTRUCTED AND USED IN SUCH A WAY AS TO REDUCE THE INTRODUCTION, GENERATION, AND RETENTION OF CONTAMINANTS WITHIN THE AREA.” KHU VỰC SẠCH: MỘT KHU VỰC CĨ CÁC BIỆN PHÁP KIỂM SỐT MỨC ĐỘ NHIỄM TIỂU PHÂN VÀ VI SINH VẬT TRONG MÔI TRƯỜNG, ĐƯỢC XÂY DỰNG VÀ SỬ DỤNG SAO CHO GIẢM VIỆC TẠO NÊN VÀ LƯU GIỮ CÁC TẠP NHIỄM TRONG KHU VỰC ĐÓ TRANG ĐỊNH NGHĨA KHU VỰC SẠCH GLOSSARY “CLEANROOM • ROOM WITHIN WHICH THE NUMBER CONCENTRATION OF AIRBORNE PARTICLES IS CONTROLLED AND CLASSIFIED, AND WHICH IS DESIGNED, CONSTRUCTED AND OPERATED IN A MANNER TO CONTROL THE INTRODUCTION, GENERATION AND RETENTION OF PARTICLES INSIDE THE ROOM” • PHỊNG SẠCH LÀ PHỊNG ĐƯỢC KIỂM SỐT VÀ PHÂN LOẠI SỐ LƯỢNG HẠT TRONG KHƠNG KHÍ, ĐỒNG THỜI ĐƯỢC THIẾT KẾ, XÂY DỰNG VÀ VẬN HÀNH SAO CHO KIỂM SOÁT ĐƯỢC SỐ LƯỢNG HẠT ĐƯA VÀO, TẠO RA VÀ GIỮ LẠI BÊN TRONG PHỊNG” TRANG TĨM TẮT NGUN TẮC CHUNG THIẾT KẾ PHÒNG SẠCH WHO TRS 961, CÁC GIAI ĐOẠN SẢN XUẤT ĐƯỢC THIẾT KẾ TRONG CÁC PHỊNG SẠCH CĨ CẤP SẠCH PHÙ HỢP PHẢI THIẾT KẾ PHÒNG ĐỆM (CHANGE ROOMS) CĨ ĐỘ SẠCH VÀ THƠNG SỐ KỸ THUẬT PHÙ HỢP TRƯỚC KHI VÀO PHỊNG SẠCH (CLEANROOMS) PHỊNG ĐỆM CĨ THỂ THIẾT KẾ NHƯ MỘT AIRLOCK -PHÒNG THAY ĐỒ CUỐI CÙNG (FINAL CHANGE ROOM) CÓ CẤP SẠCH (Ở TRẠNG THÁI NGHỈ) BẰNG VỚI CẤP SẠCH MẶC TRANG PHỤC NÊN TÁCH RIÊNG PHÒNG ĐỆM VÀO VÀ RA ĐỐI VỚI KHU VỰC B -NÊN THIẾT KẾ CÁC PHÒNG ĐỆM CHO NHÂN VIÊN THAY TRANG PHỤC TÁCH RIÊNG VỚI PHÒNG ĐỆM CHUYỂN NGUYÊN VẬT LIỆU KHƠNG KHÍ CẤP VÀO PHỊNG SẠCH PHẢI ĐƯỢC LỌC QUA MÀNG LỌC CĨ HIỆU SUẤT LỌC THÍCH HỢP TRANG TĨM TẮT NGUN TẮC CHUNGTHIẾT KẾ PHỊNG SẠCH WHO TRS 961, KHƠNG NÊN CĨ SỰ THAY ĐỔI QUÁ “MỘT” CẤP SẠCH GIỮA AIRLOCK HOẶC HÀNH LANG VÀ PHÒNG THAY ĐỒ VD: HÀNH LANG D → AIRLOCK C → THAY ĐỒ B → PHÒNG SẠCH B GIỮA HAI CẤP SẠCH ĐƯỢC CHUYỂN TIẾP NHAU QUA AIRLOCK, CÁC PASSBOX DÙNG ĐỂ CHUYỂN DỤNG CỤ, MẪU GIỮA HAI KHU VỰC SẠCH KHÁC NHAU KHU VỰC CẤP SẠCH A,B ĐƯỢC THIẾT KẾ SAO CHO TẤT CẢ CÁC THAO TÁC ĐỀU ĐƯỢC QUAN SÁT TỪ BÊN NGOÀI CÁC BỀ MẶT TRONG PHỊNG SẠCH ĐỀU PHẢI TRƠN, NHẴN, KHƠNG THẤM, KHÔNG RẠN NỨT, CHỊU ĐƯỢC CHẤT TẨY RỬA, SÁT TRÙNG TRANG TĨM TẮT NGUN TẮC CHUNGTHIẾT KẾ PHỊNG SẠCH WHO TRS 961, THƠNG THƯỜNG CĨ CẤP SẠCH: A, B, C, D - CẤP SẠCH A: ĐÂY LÀ KHU VỰC SẠCH DÀNH CHO CÁC HOẠT ĐỘNG CÓ NGUY CƠ CAO NHƯ: DÂY TRUYỀN SẢN XUẤT VÔ TRÙNG, CHIẾT RĨT, ĐĨNG NẮP, MỞ BAO BÌ SƠ CẤP CẤP SẠCH A THƯỜNG ĐƯỢC TẠO RA BẰNG CÁC THIẾT BỊ ĐẶC BIỆT: KÍN, KHÍ CẤP SONG SONG, ĐẲNG HƯỚNG, TỒN BỘ DIỆN TÍCH BỀ MẶT CẤP SẠCH A CẦN GIẢM THIỂU CÁC THAO TÁC TRỰC TIẾP TỪ NHÂN VIÊN VÀO KHU VỰC A NÊN SỬ DỤNG CÁC THIẾT ISOLATOR HOẶC RABS (RESTRICTED ACCESS BARRIER SYSTEM) ĐỂ TẠO KHU VỰC CẤP SẠCH A - CẤP SẠCH B: THƯỜNG LÀ PHÒNG NỀN ĐẶT CẤP SẠCH A, CHÊNH LỆCH ÁP SUẤT KHƠNG KHÍ GIỮA CẤP B VÀ KHU VỰC LIỀN KỀ PHẢI ĐƯỢC THEO DÕI LIÊN TỤC TRANG TÓM TẮT NGUYÊN TẮC CHUNGTHIẾT KẾ PHÒNG SẠCH WHO TRS 961, 11 THI CƠNG PHỊNG SẠCH PHẢI ĐẢM BẢO KHƠNG CĨ CÁC KHE KẼ KHÓ VỆ SINH, HẠN CHẾ CÁC HỘC, NGĂN KÉO KHÔNG NÊN SỬ DỤNG CÁC CỬA DẠNG TRƯỢT 12 VẬT LIỆU SỬ DỤNG TRONG PHÒNG SẠNH PHẢI HẠN CHẾ TẠO RA CÁC HẠT BỤI, CHỊU ĐƯỢC TÁC ĐỘNG CỦA CÁC CHẤT SÁT KHUẨN, TẨY RỬA 13 THEO WHO TRS 1044 CHÊNH ÁP GIỮA HAI CẤP SẠCH KHÁC NHAU 10 PA THEO WHO TRS 961: CHÊNH ÁP GIỮA HAI CẤP SẠCH KHÁC TỐT NHẤT LÀ 15 PA ± PA , GIÁ TRỊ CHẤP NHẬN ĐƯỢC TỪ PA ĐẾN 20 PA 14 VIỆC THIẾT KẾ KHÍ ĐỘNG HỌC TRONG KHU VỰC SẠCH PHẢI PHÙ HỢP VỚI CẤP SẠCH VÀ MỤC ĐÍCH SỬ DỤNG CỦA KHU VỰC ĐĨ TRANG 10 PHƯƠNG PHÁP THẨM ĐỊNH PHÒNG SẠCH CÁC CHỈ TIÊU VI SINH VẬT RONG KHƠNG KHÍ VÀ BỀ MẶT * Số lượng VSV 1M3 khơng khí - Chọn vị trí lấy mẫu vùng có nguy cao: vị trí gió quẩn, đường khí ra, vị trí sa lắng bụi, vùng khó vệ sinh… - Cỡ mẫu: 1m3, tùy vào mức độ nhiễm vi sinh vật khu vực lấy mẫu mà định việc sử dụng hay nhiều đĩa mơi trường cho vi trí lấy mẫu - Số lượng mẫu lấy: theo đánh giá nguy phòng thử nghiệm TRANG 44 PHƯƠNG PHÁP THẨM ĐỊNH PHÒNG SẠCH CÁC CHỈ TIÊU VI SINH VẬT RONG KHƠNG KHÍ VÀ BỀ MẶT * Số lượng VSV 1M3 khơng khí - Tốc độ lấy mẫu: 25 lít/ phút đến 100 lít/ phút - Lựa chọn mơi trường dinh dưỡng để lấy mẫu: Môi trường Casein soyabean agar môi trường phù hợp với hệ vi sinh vật cần kiểm soát khu vực lấy mẫu MỘT SỐ THIẾT BỊ LẤY MẪU KHƠNG KHÍ TRANG 45 PHƯƠNG PHÁP THẨM ĐỊNH PHÒNG SẠCH CÁC CHỈ TIÊU VI SINH VẬT RONG KHƠNG KHÍ VÀ BỀ MẶT - Số lượng VSV 1M3 khơng khí: - Cần quan tâm đến khả thu hồi mẫu thiết bị lấy mẫu khơng khí BẢNG GIÁ TRỊ ĐIỀU CHỈNH THIẾT BỊ LẤY MẪU KHƠNG KHÍ MAS 100 NT TRANG 46 PHƯƠNG PHÁP THẨM ĐỊNH PHÒNG SẠCH CÁC CHỈ TIÊU VI SINH VẬT RONG KHƠNG KHÍ VÀ BỀ MẶT * Số lượng VSV 1M3 khơng khí: Lấy mẫu khơng khí cấp A Lấy mẫu vi sinh vật tong khơng khí cấp A Đĩa mơi trường dùng lần để kiểm tra vi sinh vật khơng khí TRANG 47 PHƯƠNG PHÁP THẨM ĐỊNH PHỊNG SẠCH CÁC CHỈ TIÊU VI SINH VẬT RONG KHƠNG KHÍ VÀ BỀ MẶT • Số lượng VSV 1M3 khơng khí: - Tần suất lấy mẫu: ( - Điều kiện nuôi cấy: 20 - 250C/5-7 ngày, tiếp tục 30 - 350C/3-5 ngày TRANG 48 PHƯƠNG PHÁP THẨM ĐỊNH PHÒNG SẠCH * Số lượng vi sinh vật bề mặt - Bề mặt nhẵn (sàn, bàn, thiết bị): dùng đĩa Rodac đường kính 5,5 cm - Bề mặt khơng nhẵn (góc cạnh): dùng phương pháp phết, dung dịch NaCl 0,9% + Tween 80 (0,7%) + Lecithin 0,1% - Chai lọ: dùng phương pháp tráng, dung dich tráng giống phương pháp phết , ngâm 30 phút - Chú ý: phải loại bỏ dư lượng chất khử trùng trước kiểm tra - Môi trường: Thạch casein đậu tương - ĐK ủ: 30 - 350C/3-5 ngày, tiếp tục 20 - 250C/5-7 ngày - Tần suất (VKN): + Định kì khu vực sạch: tháng/lần + Tủ ATSH, tủ nuôi cấy VSV: tuần/lần, TRANG 49 PHƯƠNG PHÁP THẨM ĐỊNH PHÒNG SẠCH * Số lượng VSV phương pháp đặt đĩa thạch: - Môi trường: Thạch casein đậu tương - Thời gian đặt: 4h - Số lượng mẫu lấy theo phân tích nguy (tham khảo ISO14644 Part 1) - ĐK ủ: 20 - 250C/5-7 ngày, tiếp tục 30 - 350C/3-5 ngày * Kiểm tra găng tay: - Môi trường, điều kiện ủ: Như - Sử dụng đĩa thạch, in ngón tay vào đĩa vào đĩa, kiểm tra găng - Tần suất: tiến hành phép thử vô khuẩn TRANG 50 PHƯƠNG PHÁP THẨM ĐỊNH PHÒNG SẠCH CHÊNH LỆCH ÁP SUẤT CÁC PHÒNG (ISO 14644-3: 2019, ANNEX B.1) - Sử dụng áp kế hiệu chuẩn - Hàng ngày: đồng hồ đo chênh áp gắn tường (9 h 14 h) - Chênh áp khu vực B với khu vực khác cần theo dõi thường xuyên Đồng hồ đo áp suất học Máy đo vi khí hậu đo áp suất TRANG 51 PHƯƠNG PHÁP THẨM ĐỊNH PHÒNG SẠCH KIỂM TRA HƯỚNG DỊNG KHÍ (Smoke test) (ISO 14644-3: 2019, ANNEX B.3) - Sử dụng thiết bị tạo khói phun vào khu vực cần kiểm tra Quan sát mô tả vào biểu mẫu báo cáo đồng thời quay camera lưu lại q trình kiểm tra Khơng sử dụng khói có trọng lượng lớn - Chú ý: Vật liệu tạo khói phải khơng gây nhiễm cho khu vực kiểm tra Smoke test sử dụng máy tạo hạt TRANG 52 PHƯƠNG PHÁP THẨM ĐỊNH PHÒNG SẠCH 8+9 ĐO NHIỆT ĐỘ, ĐỘ ẨM - Sử dụng nhiệt ẩm kế hiệu chuẩn - Hàng ngày: SD nhiệt ẩm kế (9 h 14 h) Nhiệt ẩm kế hiệu chuẩn Máy đo vi khí hậu đo nhiệt độ, độ ẩm TRANG 53 PHƯƠNG PHÁP THẨM ĐỊNH PHỊNG SẠCH 10 SỐ LẦN TRAO ĐỔI KHÍ * Sử dụng máy đo tốc độ gió - Đo tốc độ gió nguồn cấp N vị trí: a (m/h) (N = SQRT(10 xA); A: diện tích màng tính theo m2): - Đo diện tích màng lọc: b (m2) - Tính lưu lượng khí trao đổi h: c=ab (m3/h) - Tính thể tích khu vực thí nghiệm: d (m3) - Tính số lần trao đổi khí 1h: c/d (lần/h) - Tần suất: tháng/lần cấp B, năm với cấp C,D -Số lần trao đổi khí theo USP 2023: Máy đo vi khí hậu đo tốc độ gió + Cấp B: 100 lần/h + Cấp C: 50 lần/h + Cấp D: 20 lần/h TRANG 54 PHƯƠNG PHÁP THẨM ĐỊNH PHÒNG SẠCH 10 SỐ LẦN TRAO ĐỔI KHÍ (ISO 14644-3: 2019, ANNEX B.2) * Sử dụng máy đo lưu lượng gió - Đo lưu lượng khí họng cấp khí: c (m3/h) - Tính thể tích khu vực thí nghiệm: d (m3) - Tính số lần trao đổi khí 1h: c/d (lần/h) Máy đo lưu lượng gió - Số lần trao đổi khí Class B, C, D trạng thái làm việc phù hợp với thể tích phịng, số lượng thiết bị nhân viên đó, đảm bảo chất lượng khơng khí cấp + Class B: 100 lần/h (USP 43, 1116) + Class C: 50 lần/h (USP 43, 1116) + Class D: 20 lần/h (USP 43, 1116) TRANG 55 PHƯƠNG PHÁP THẨM ĐỊNH PHÒNG SẠCH * 11 ĐO TỐC ĐỘ GIÓ Sử dụng máy đo tốc độ gió hiệu chuẩn - Đo tốc độ gió nguồn cấp cách màng 15 cm, thường để đo tốc độ gió cấp A - Chia diên tích bề mặt màng lọc thành chia thành hàng hàng điểm mơ hình - Giá trị tốc độ gió màng HEPA cấp A đạt 0,45 m/s ± 20% (Annex WHO TRS 961) - Giá trị tốc độ gió ngang tầm làm việc cấp A đạt 0,45 m/s ± 20% (Annex WHO TRS 1044) TRANG 56 PHƯƠNG PHÁP THẨM ĐỊNH PHÒNG SẠCH 12 CÁC CHỈ TIÊU KHÁC * Cường độ ánh sáng: - Sử dụng máy đo cường độ ánh sáng hiệu chuẩn - Đo vị trí/khu vực - Khu vực làm việc: ≥ 400 Lux - Khu vực phụ trợ (airlock): ≥ 200 Lux - Tần suất: 12 tháng/lần (VKN) * Độ ồn: ≤ 65 dB - Sử dụng máy đo độ ồn hiệu chuẩn - Đo vị trí/khu vực - Tần suất: 12 tháng/lần * Cường độ đèn UV/passbox: ≥ 39,5 µW/cm2 - SD máy đo cường độ đèn UV hiệu chuẩn - Đo vị trí/passbox - Tần suất: 12 tháng/lần Xin trân trọng Cảm ơn Quý vị! TRANG 58