Khảo sát thành phần hóa học và hoạt tính sinh học cao ethyl acetate của lá sa kê (artocarpus altilis (parkinson) fosberg)

TRƯỜNG ĐẠI HỌC CẦN THƠ KHOA KHOA HỌC TỰ NHIÊN BỘ MƠN HĨA HỌC  LÊ THỊ THẢO NGUYÊN KHẢO SÁT THÀNH PHẦN HÓA HỌC VÀ HOẠT TÍNH SINH HỌC CAO ETHYL ACETATE CỦA LÁ SA KÊ (Artocarpus altilis (PARKINSON) FOSBERG) LUẬN VĂN TỐT NGHIỆP ĐẠI HỌC CHUYÊN NGÀNH CỬ NHÂN HÓA DƯỢC CẦN THƠ, 2014 TRƯỜNG ĐẠI HỌC CẦN THƠ KHOA KHOA HỌC TỰ NHIÊN BỘ MƠN HĨA HỌC  LÊ THỊ THẢO NGUYÊN KHẢO SÁT THÀNH PHẦN HÓA HỌC VÀ HOẠT TÍNH SINH HỌC CAO ETHYL ACETATE CỦA LÁ SA KÊ (Artocarpus altilis (PARKINSON) FOSBERG) LUẬN VĂN TỐT NGHIỆP ĐẠI HỌC CHUYÊN NGÀNH CỬ NHÂN HÓA DƯỢC CÁN BỘ HƯỚNG DẪN TS NGUYỄN TRỌNG TUÂN CẦN THƠ, 2014 Trường Đại Học Cần Thơ Cộng Hòa Xã Hội Chủ Nghĩa Việt Nam Khoa Khoa Học Tự Nhiên Bộ Mơn Hóa Học Độc Lập - Tự Do - Hạnh Phúc  NHẬN XÉT ĐÁNH GIÁ CỦA CÁN BỘ HƯỚNG DẪN Cán hướng dẫn: TS Nguyễn Trọng Tuân Đề tài: Sinh viên thực hiện: Lê Thị Thảo Nguyên MSSV: 2112058 Lớp: Hóa Dược – Khóa: 37 Nội dung nhận xét: a) Nhận xét hình thức LVTN: b) Nhận xét nội dung LVTN (đề nghị ghi chi tiết đầy đủ):  Đánh giá nội dung thực đề tài:  Những vấn đề hạn chế: c) Nhận xét sinh viên tham gia thực đề tài (ghi rõ nội dung sinh viên chịu trách nhiệm thực có): d) Kết luận, đề nghị điểm: Cần Thơ, ngày… tháng… năm 2014 Cán hướng dẫn TS Nguyễn Trọng Tuân Trường Đại Học Cần Thơ Cộng Hòa Xã Hội Chủ Nghĩa Việt Nam Khoa Khoa Học Tự Nhiên Bộ Môn Hóa Học Độc Lập - Tự Do - Hạnh Phúc  NHẬN XÉT ĐÁNH GIÁ CỦA CÁN BỘ PHẢN BIỆN Cán phản biện: …………………………………………………………… Đề tài: Sinh viên thực hiện: Lê Thị Thảo Nguyên MSSV: 2112058 Lớp: Hóa Dược – Khóa: 37 Nội dung nhận xét: a) Nhận xét hình thức LVTN: b) Nhận xét nội dung LVTN (đề nghị ghi chi tiết đầy đủ):  Đánh giá nội dung thực đề tài:  Những vấn đề hạn chế: c) Nhận xét sinh viên tham gia thực đề tài (ghi rõ nội dung sinh viên chịu trách nhiệm thực có): d) Kết luận, đề nghị điểm: Cần Thơ, ngày… tháng… năm 2014 Cán hướng dẫn TS Nguyễn Trọng Tuân LỜI CẢM ƠN Em xin chân thành cảm ơn đến: Quý thầy Khoa Khoa Học Tự Nhiên nói riêng q thầy trường Đại học Cần Thơ nói chung dạy dỗ, truyền đạt kiến thức quý báu suốt năm học tập trường Thầy Nguyễn Trọng Tuân tận tình hướng dẫn, bảo với lời khun bổ ích q trình làm luận văn Thầy Bộ mơn Hóa Học, Khoa Khoa Học Tự Nhiên, Trường Đại Học Cần Thơ tạo điều kiện tốt phịng thí nghiệm, trang thiết bị, dụng cụ để hoàn thành tốt luận văn Cảm ơn anh chị cao học K20 lớp Hóa Dược K37 giúp đỡ suốt thời gian vừa qua Và cảm ơn gia đình ln chỗ dựa vững để có thêm động lực làm tốt việc Chân thành cảm ơn! Cần Thơ, tháng 12 năm 2014 Lê Thị Thảo Nguyên i TÓM TẮT Cao ethyl acetate sa kê (Artocarpus altilis (Parkinson) Fosberg) định tính có chứa nhóm chức: gycoside, flavonoid, steroid, phenol cô lập chất AA-Ea1 AA-Ea1 xác định qua quang phổ hồng ngoại FT - IR νmax (KBr) cm-1: 3408,18 cm-1 (-OH); 2927,13 cm-1 (=C-H) Hoạt tính kháng oxi hóa cao ethyl acetate phân đoạn sắc ký nhanh – cột khô phương pháp DPPH IC50 cao Ea = 25,8883 μg/mL, Ea:Me (95:5) = 24,9131 μg/mL, Ea:Me (9:1) = 37,2866 μg/mL, Ea:Me (8:2) = 21,3245, Ea:Me (7:3) = 15,8614 Ea:Me (6:4) = 39,3759 μg/mL cao với IC50 vitamin C 4,0257 μg/mL; chứng tỏ cao có khả kháng oxi hóa yếu mẫu chuẩn Từ khóa: Sa kê (Artocarpus altilis (Parkinson) Fosberg), DPPH ii ABSTRACT Ethyl acetate extract of Artocarpus altilis (Parkinson) Fosberg leaves of qualitative analysis contains organic functional group as: gycoside, flavonoid, steroid, phenol Isolation of the chemical components from Artocarpus altilis (Parkinson) Fosberg leaves found AA-Ea1 from ethyl acetate extract by column chromatography method Structures of AA-Ea1 have been elucidated by FT IR spectroscopic νmax (KBr) cm-1: 3408,18 cm-1 (-OH); 2927,13 cm-1 (=C-H) Testing antioxidant activity use DPPH free radical method IC50 of Ea = 25,8883 μg/mL, Ea:Me (95:5) = 24,9131 μg/mL, Ea:Me (9:1) = 37,2866 μg/mL, Ea:Me (8:2) = 21,3245 μg/mL, Ea:Me (7:3) = 15,8614 μg/mL Ea:Me (6:4) = 39,3759 μg/mL has higher IC50 vitamin C (4,0257 μg/mL) Therefor, these extracts have lower antioxidant activity than positive control Keywords: Artocarpus Altilis (Parkinson) Fosberg, DPPH iii LỜI CAM ĐOAN Tôi xin cam đoan luận văn hoàn thành dựa kết nghiên cứu hướng dẫn TS Nguyễn Trọng Tuân Kết nghiên cứu luận luận văn chưa dùng cho luận văn cấp khác Cần Thơ, ngày 01 tháng 12 năm 2014 Cán hướng dẫn TS Nguyễn Trọng Tuân Sinh viên thực Lê Thị Thảo Nguyên iv MỤC LỤC LỜI CẢM ƠN i TÓM TẮT ii ABSTRACT iii LỜI CAM ĐOAN iv MỤC LỤC v DANH SÁCH BẢNG viii DANH SÁCH HÌNH x DANH MỤC TỪ VIẾT TẮT xii CHƯƠNG GIỚI THIỆU 1.1 Đặt vấn đề 1.2 Mục tiêu nghiên cứu 1.3 Nội dung nghiên cứu CHƯƠNG TỔNG QUAN TÀI LIỆU 2.1 Đại cương sa kê 2.1.1 Danh pháp: 2.1.2 Sinh thái phân bố 2.1.3 Hình thái thực vật 2.1.4 Công dụng 2.1.5 Thành phần dinh dưỡng 2.1.6 Tác dụng dược lý 2.1.7 Các nghiên cứu thành phần hóa học sa kê nước 2.2 Tổng quan gốc tự chất chống oxi hóa 10 2.2.1 Gốc tự 10 2.2.2 Chất chống oxi hóa 11 v 2.3 Phương pháp khảo sát hoạt tính kháng oxi hóa phương pháp sử dụng gốc tự DPPH 12 2.3.1 Khái niệm DPPH 12 2.3.2 Định nghĩa cách xác định IC50 13 CHƯƠNG PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 15 3.1 Phương tiện nghiên cứu 15 3.1.1 Địa điểm 15 3.1.2 Dụng cụ thiết bị thí nghiệm 15 3.1.3 Hóa chất 15 3.2 Phương pháp nghiên cứu 15 3.2.1 Phương pháp tách chiết 15 3.2.2 Phương pháp phân lập tinh chế 16 3.3 Thực nghiệm 16 3.3.1 Khảo sát sơ thành phần hóa học cao ethyl acetate 16 3.3.2 Chuẩn bị nguyên liệu 19 3.3.3 Điều chế cao 19 3.3.4 Phân lập tinh chế hợp chất từ cao ethyl acetate 20 3.3.5 Khảo sát hoạt tính kháng oxy hóa cao ethyl acetate phân đoạn sắc ký nhanh – cột khô phương pháp sử dụng gốc tự DPPH 22 CHƯƠNG KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 28 4.1 Kết định tính cao ethyl acetate 28 4.2 Kết trình tách chiết chất từ cao ethyl acetate 28 4.3 Hoạt tính kháng oxi hóa cao ethyl acetate phân đoạn sắc ký nhanh-cột khô phương pháp sử dụng gốc tự DPPH 30 4.3.1 Hoạt tính kháng oxi hóa vitamin C 30 4.3.2 Hoạt tính kháng oxi hóa cao ethyl acetate 30 4.3.3 Hoạt tính kháng oxi hóa cao Ea:Me (95:5) 31 vi Kết đo OD dịch chiết cao ethyl acetate (λ=517 nm) STT V2 mL dịch chiết cao Ea Nồng độ dịch chiết cao Ea (μg/mL) 0,02 0,04 0,06 0,08 0,1 10 20 30 40 50 OD (λ=517 nm) 0,2155 0,1712 0,1339 0,0870 0,0521 0,0440 % ức chế 20,5568 37,8654 59,62877 75,82367 79,58237 Bảng 3.7 Kết đo OD phần trăm ức chế theo nồng độ cao Ea 3.3.5.3 Khảo sát hoạt tính kháng oxi hóa cao Ea:Me (95:5) Với dịch chiết cao Ea:Me (95:5) có nồng độ 1000 μg/mL Tiến hành khảo sát hoạt tính kháng oxi hóa cao Ea:Me (95:5), lấy V mL dung dịch theo bảng sau: V2 mL dịch chiết cao DPPH (mL) Ea:Me (95:5) 1,9 0,1 1,88 0,02 0,1 1,87 0,03 0,1 1,86 0,04 0,1 1,85 0,05 0,1 1,84 0,06 0,1 Bảng 3.8 Thể tích Me, dịch chiết cao Ea:Me (95:5) DPPH cần lấy STT V1 mL MeOH Lắc đều, ủ 30 phút bóng tối điều kiện phịng Kết đo OD dịch chiết cao Ea:Me (95:5) (λ=517 nm) V2 mL dịch chiết STT cao Ea:Me (95:5) 0,02 0,03 0,04 0,05 0,06 Nồng độ dịch chiết cao Ea:me (95:5) (μg/mL) 10 15 20 25 30 OD (λ=517 nm) % ức chế 0,2179 0,1725 0,1490 0,1292 0,1076 0,0899 20,8352 31,6200 40,7067 50,6195 58,7425 Bảng 3.9 Kết đo OD phần trăm ức chế theo nồng độ cao Ea:Me (95:5) LÊ THỊ THẢO NGUYÊN 2112058 24 3.3.5.4 Khảo sát hoạt tính kháng oxi hóa cao Ea:Me (9:1) Với dịch chiết cao Ea:Me (9:1) có nồng độ 1000 μg/mL Tiến hành khảo sát hoạt tính kháng oxi hóa cao Ea:Me (9:1), lấy V mL dung dịch theo bảng sau: STT V1 mL MeOH 1,9 1,89 1,87 1,85 1,83 1,81 V2 mL dịch chiết Ea:Me (9:1) 0,01 0,03 0,05 0,07 0,09 DPPH (mL) 0,1 0,1 0,1 0,1 0,1 0,1 Bảng 3.10 Thể tích Me, dịch chiết cao Ea:Me (9:1) DPPH cần lấy Lắc đều, ủ 30 phút bóng tối điều kiện phòng Kết đo OD dịch chiết cao Ea:Me (9:1) (λ=517 nm) Nồng độ dịch chiết OD cao Ea:Me (9:1) % ức chế (λ=517 nm) (μg/mL) 0 0,2198 0,01 0,2101 4,4131 0,03 15 0,1737 20,9736 0,05 25 0,1456 33,7579 0,07 35 0,1145 47,9071 0,09 45 0.0898 59,1446 Bảng 3.11 Kết đo OD phần trăm ức chế theo nồng độ cao Ea:Me (9:1) V2 mL dịch chiết STT cao Ea:Me (9:1) 3.3.5.5 Khảo sát hoạt tính kháng oxi hóa cao Ea:Me (8:2) Với dịch chiết cao Ea:Me (8:2) có nồng độ 1000 μg/mL Tiến hành khảo sát hoạt tính kháng oxi hóa cao Ea:Me (8:2), lấy V mL dung dịch theo bảng sau: V2 mL dịch chiết cao DPPH (mL) Ea:Me (8:2) 1,9 0,1 1,89 0,01 0,1 1,87 0,03 0,1 1,85 0,05 0,1 1,83 0,07 0,1 1,81 0,09 0,1 Bảng 3.12 Thể tích Me, dịch chiết cao Ea:Me (8:2) DPPH cần lấy STT V1 mL MeOH LÊ THỊ THẢO NGUYÊN 2112058 25 Lắc đều, ủ 30 phút bóng tối điều kiện phịng Kết đo OD dịch chiết cao Ea:Me (8:2) (λ=517 nm) V2 mL dịch STT chiết cao Ea:Me (8:2) 0,01 0,03 0,05 0,07 0,09 Nồng độ dịch chiết cao Ea:Me(8:2) (μg/mL) 15 25 35 45 OD (λ=517 nm) % ức chế 0,2108 0,1806 0,1368 0,0939 0,0345 0,0309 14,3263 35,1043 55,4554 83,6337 84,0132 Bảng 3.13 Kết đo OD phần trăm ức chế theo nồng độ cao Ea:Me (8:2) 3.3.5.6 Khảo sát hoạt tính kháng oxi hóa cao Ea:Me (7:3) Với dịch chiết cao Ea:Me (7:3) có nồng độ 1000 μg/mL Tiến hành khảo sát hoạt tính kháng oxi hóa cao Ea:Me (7:3), lấy V mL dung dịch theo bảng sau: STT V1 mL MeOH 1,9 1,88 1,87 1,86 1,85 1,84 V2 mL dịch chiết cao Ea:Me (7:3) 0,02 0,03 0,04 0,05 0,06 DPPH (mL) 0,1 0,1 0,1 0,1 0,1 0,1 Bảng 3.14 Thể tích Me, dịch chiết cao Ea:Me (7:3) DPPH cần lấy Lắc đều, ủ 30 phút bóng tối điều kiện phịng Kết đo OD dịch chiết cao Ea:Me (7:3) (λ=517 nm) V2 mL dịch Nồng độ dịch chiết OD STT chiết cao Ea:Me cao Ea:Me (7:3) % ức chế (λ=517 nm) (7:3) (μg/mL) 0 0,2146 0,02 10 0,1524 28,9841 0,03 15 0,1140 46,8779 0,04 20 0,0764 64,3988 0,05 25 0,0477 77,7726 0,06 30 0,0402 81,2674 Bảng 3.15 Kết đo OD phần trăm ức chế theo nồng độ cao Ea:Me (7:3) LÊ THỊ THẢO NGUYÊN 2112058 26 3.3.5.7 Khảo sát hoạt tính kháng oxi hóa cao Ea:Me (6:4) Với dung chiết cao Ea:Me (6:4) có nồng độ 1000 μg/mL Tiến hành khảo sát hoạt tính kháng oxi hóa cao Ea:Me (6:4), lấy V mL dung dịch theo bảng sau: STT V1 mL MeOH 1,9 1,89 1,87 1,85 1,83 1,81 V2 mL dịch chiết cao DPPH (mL) Ea:Me (6:4) 0,1 0,01 0,1 0,03 0,1 0,05 0,1 0,07 0,1 0,09 0,1 Bảng 3.16 Thể tích Me, dịch chiết cao Ea:Me (6:4) DPPH cần lấy Lắc đều, ủ 30 phút bóng tối điều kiện phòng Kết đo OD dịch chiết cao Ea:Me (6:4) (λ=517 nm) STT V2 mL dịch chiết cao Ea:Me (6:4) 0,01 0,03 0,05 0,07 0,09 Nồng độ dịch chiết cao Ea:Me (6:4) (μg/mL) 15 25 35 45 OD % ức chế (λ=517 nm) 0,2178 0,2064 0,1815 0,1493 0,1179 0,0951 5,2341 16,6666 31,4508 45,8677 56,3360 Bảng 3.17 Kết đo OD phần trăm ức chế theo nồng độ cao Ea:Me (6:4) LÊ THỊ THẢO NGUYÊN 2112058 27 CHƯƠNG KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 4.1 Kết định tính cao ethyl acetate Loại nhóm chức Tên thuốc thử Hiện tượng Kết Alkaloid Dragendorff Khơng có tủa cam – nâu Phản ứng âm tính Glycoside Tollens Tủa bạc đen Phản ứng dương tính Cyanidin Chuyển thành màu cam H2SO4 đậm đặc Chuyển màu cam đậm Phenol FeCl3 Chuyển màu xanh đen Phản ứng dương tính Steroid Salkowski Chuyển màu đỏ đậm Phản ứng dương tính Flavonoid Phản ứng dương tính Bảng 4.1 Kết định tính cao Ea 4.2 Kết trình tách chiết chất từ cao ethyl acetate Khối lượng cao ethyl acetate thu sau chiết từ kg nguyên liệu mẫu 39,8863 g Với 39,8843 g cao ethyl acetate tiến hành chạy sắc ký nhanh – cột khô Thấy phân đoạn (2,8956 g) với hệ dung môi giải ly sắc ký cột Ea:Me (7:3), bảng mỏng giải ly hệ Ea:Me (4:1) có vết có Rf khoảng 0,5 0,62 vệt tập kéo dài Hình 4.1 SKLM phân đoạn LÊ THỊ THẢO NGUYÊN 2112058 28 Tiếp tục sắc ký cột với phân đoạn 4, hệ dung môi giải ly sắc ký cột Ea 100% tăng dần đến Me 100% Thấy phân đoạn 4E (0,144 g), dung môi giải ly sắc ký cột Ea:Me (5:1), dung môi giải ly sắc ký lớp mỏng Ea:Me (4:1) có vết cách xa Hình 4.2 SKLM phân đoạn 4E Khảo sát tiếp tục phân đoạn 4E, hệ dung môi giải ly sắc ký cột Ea:Me (9:1) tăng dần Me 100% Thấy phân đoạn 4E1 (5 mg), dung môi giải ly sắc ký cột Ea:Me (9:1), dung môi giải ly sắc ký lớp mỏng Ea:Me:H2O:acid (10:2:1:1) có vết trịn Rf = 0,263 Từ cao Ea ban đầu qua nhiều trình phân tách cô lập chất AAEa1 (5 mg) Đặc điểm AA-Ea1 bột màu trắng, tan methanol, tan tốt DMSO Thông tin nhận từ IR νmax (KBr) cm-1: 3408,18 cm-1 (-OH); 2927,13 cm-1 (=C-H) Hình 4.3 SKLM phân đoạn 4E1 LÊ THỊ THẢO NGUYÊN 2112058 Hình 4.4 Hợp chất AA-Ea1 29 4.3 Hoạt tính kháng oxi hóa cao ethyl acetate phân đoạn sắc ký nhanh-cột khô phương pháp sử dụng gốc tự DPPH 4.3.1 Hoạt tính kháng oxi hóa vitamin C 70 y = 15,51x - 12,44 R² = 0,993 phần trăm ức chế 60 50 40 30 20 10 0 Nồng độ (μg/mL) Hình 4.5 Phần trăm ức chế vitamin C theo nồng độ (μg/mL) Phần trăm ức chế nồng độ vitamin C thể dạng đường thẳng với phương trình: y = 15,51x – 12,44; với R2 = 0,993 Từ đồ thị suy giá trị IC50 vitamin C là: IC50 = 4,0257 (μg/mL) phần trăm ức chế 4.3.2 Hoạt tính kháng oxi hóa cao ethyl acetate 90 80 70 60 50 40 30 20 10 y = 1,907x + 0,631 R² = 0,998 10 15 20 25 Nồng độ (μg/mL) 30 35 40 45 Hình 4.6 Phần trăm ức chế cao Ea theo nồng độ (μg/mL) LÊ THỊ THẢO NGUYÊN 2112058 30 Phần trăm ức chế nồng độ dịch chiết cao Ea thể dạng đường thẳng với phương trình: y = 1,907x – 11,73; với R2 = 0,998 Từ đồ thị suy giá trị IC50 dịch chiết cao Ea là: IC50 = 25,8883 (μg/mL) 4.3.3 Hoạt tính kháng oxi hóa cao Ea:Me (95:5) 70 y = 1,97x + 0,921 R² = 0,998 phần trăm ức chế 60 50 40 30 20 10 0 10 15 20 25 30 35 nồng độ (μg/mL) Hình 4.7 Phần trăm ức chế cao Ea:Me (95:5) theo nồng độ (μg/mL) Phần trăm ức chế nồng độ dịch chiết cao Ea:Me (95:5) thể dạng đường thẳng với phương trình: y = 1,97x + 0,921; với R2 = 0,998 Từ đồ thị suy giá trị IC50 dịch chiết cao Ea:Me (95:5) là: IC50 = 24,9131 (μg/mL) LÊ THỊ THẢO NGUN 2112058 31 4.3.4 Hoạt tính kháng oxi hóa cao Ea:Me (9:1) 70 y = 1,364x - 0,859 R² = 0,996 phần trăm ức chế 60 50 40 30 20 10 0 10 20 30 40 50 nồng độ (μg/mL) Hình 4.8 Phần trăm ức chế cao Ea:Me (9:1) theo nồng độ (μg/mL) Phần trăm ức chế nồng độ dịch chiết cao Ea:Me (9:1) thể dạng đường thẳng với phương trình: y = 1,364x - 0,859; với R2 = 0,996 Từ đồ thị suy giá trị IC50 dịch chiết cao Ea:Me (9:1) là: IC50 = 37,2866 (μg/mL) 4.3.5 Hoạt tính kháng oxi hóa cao Ea:Me (8:2) 90 y = 2,311x + 0,719 R² = 0,995 80 phần trăm ức chế 70 60 50 40 30 20 10 0 10 20 30 40 nồng độ (μg/mL) Hình 4.9 Phần trăm ức chế cao Ea:Me (8:2) theo nồng độ (μg/mL) LÊ THỊ THẢO NGUYÊN 2112058 32 Phần trăm ức chế nồng độ dịch chiết cao Ea:Me (8:2) thể dạng đường thẳng với phương trình: y = 2,311x + 0,719; với R2 = 0,995 Từ đồ thị suy giá trị IC50 dịch chiết cao Ea:Me (8:2) là: IC50 = 21,3245 (μg/mL) 4.3.6 Hoạt tính kháng oxi hóa cao Ea:Me (7:3) 90 y = 3,139x + 0,211 R² = 0,999 80 phần trăm ức chế 70 60 50 40 30 20 10 0 10 15 20 25 30 Nồng độ (μg/mL) Hình 4.10 Phần trăm ức chế cao Ea:Me (7:3) theo nồng độ (μg/mL) Phần trăm ức chế nồng độ dịch chiết cao Ea:Me (7:3) thể dạng đường thẳng với phương trình: y = 3,139x + 0,211; với R2 = 0,999 Từ đồ thị suy giá trị IC50 dịch chiết cao Ea:Me (7:3) là: IC50 = 15,8614 (μg/mL) LÊ THỊ THẢO NGUYÊN 2112058 33 4.3.7 Hoạt tính kháng oxi hóa cao Ea:Me (6:4) 70 y = 1,314x - 1,740 R² = 0,996 phần trăm ức chế 60 50 40 30 20 10 0 10 20 30 40 50 Nồng độ (μg/mL) Hình 4.11 phần trăm ức chế cao Ea:Me (6:4) theo nồng độ (μg/mL) Phần trăm ức chế nồng độ dịch chiết cao Ea:Me (6:4) thể dạng đường thẳng với phương trình: y = 1,314x – 1,740; với R2 = 0,996 Từ đồ thị suy giá trị IC50 dịch chiết cao Ea:Me (6:4) là: IC50 = 39,3759 (μg/mL) 4.3.8 Nhận xét chung khả kháng oxi hóa dịch chiết loại cao Khả kháng oxi hóa dịch chiết cao tuyến tính theo nồng độ Điều cho thấy loại dịch chiết có chứa hợp chất có khả kháng oxi hóa tác dụng với DPPH dẫn đến phần trăm ức chế tăng lên IC50 vitamin C loại dịch chiết cao Vitamin C IC50 (μg/mL) 4,0257 Ea Ea:Me (95:5) Ea:Me (9:1) Ea:Me (8:2) Ea:Me (7:3) Ea:Me (6:4) 25,8883 24,9131 37,2866 21,3245 15,8614 39,3759 Bảng 4.2 IC50 vitamin C loại dịch chiết cao LÊ THỊ THẢO NGUYÊN 2112058 34 40 39,3759 37,2866 35 30 25,8883 IC50 25 24,9131 21,3245 20 15,8614 15 10 4,0257 Vitamin C Ea Ea:Me (95:5) Ea:Me (9:1) Ea:Me (8:2) Ea:Me (7:3) Ea:Me (6:4) Hình 4.12 IC50 vitamin C loại dịch chiết cao So sánh với IC50 vitamin C (4,0257 μg/mL): Các dịch chiết lại có IC50 Ea = 25,8883 μg/mL, Ea:Me (95:5) = 24,9131 μg/mL, Ea:Me (9:1) = 37,2866 μg/mL, Ea:Me (8:2) = 21,3245 μg/mL Ea:Me (7:3) = 15,8614 μg/mL Ea:Me (6:4) = 39,3759 μg/mL cao với IC50 vitamin C; điều cho thấy dịch chiết cao có khả kháng oxi hóa yếu mẫu chuẩn LÊ THỊ THẢO NGUYÊN 2112058 35 CHƯƠNG KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ 5.1 Kết luận Sau thực đề tài “Khảo sát thành phần hóa học hoạt tính sinh học cao ethyl acetate sa kê Artocarpus altilis (Parkinson) Fosberg”, thu kết sau: Xác định nhóm chức hữu có cao ethyl acetate: glycoside, flavonoid, phenol steroid Sắc ký cột cao ethyl acetate sau nhiều phân đoạn thu chất với đặc điểm AA-Ea1 bột màu trắng, tan methanol, tan tốt DMSO Thông tin nhận từ quang phổ FT - IR νmax (KBr) cm-1: 3408,18 cm-1 (-OH); 2927,13 cm-1 (=C-H) Khảo sát khả kháng oxi hóa cao ethyl acetate phân đoạn Ea:Me 95:5; 9:1; 8:2;7:3; 6:4 phương pháp sử dụng gốc tự DPPH cho thấy cao có khả kháng oxi hóa yếu mẫu chuẩn (vitamin C) 5.2 Kiến nghị Xác định cấu trúc hóa học chất AA-Ea1 Khảo sát thành phần hóa học cuả phân đoạn khác cao ethyl acetate cao chiết khác từ sa kê Tìm hiểu hoạt tính kháng oxi hóa cao phương pháp khác phương pháp thử hoạt tính ức chế gốc tự NO, phương pháp ức chế enzyme XO, phương pháp FTC LÊ THỊ THẢO NGUYÊN 2112058 36 TÀI LIỆU THAM KHẢO [1] Nguyễn Kim Phi Phụng, 2007 Phương pháp cô lập hợp chất hữu cơ, Đại Học Quốc Gia TP Hồ Chí Minh [2]http://www.sakevietnam.vn/index.php/kien-thuc/thanh-phan-dinhduong.html [3] Mukesh S Sikarwar, Boey Jia Hui, Kumutha Subramaniam, Bavani Devi Valeisamy, Ling Kar Yean, Kaveti Balaji 2014 A review on Artocarpus altilis (Parkinson) Fosberg (breadfuit) Journal of Applied Pharmaceutical Vol.4 (08), pp 91-97 [4]http://www.vacvina.org.vn/Story/vn/phobienkienthuc/phobienkienthuc/201 3/12/745.html [5] Lê Trần Thị Hải Yến, 2013 Evaluating the alpha-glucosidase inhibition of the Artocarpus altilis Fosberg leaves Luận văn tốt nghiệp thạc sĩ Trường Đại Học Quốc Gia TP Hồ Chí Minh [6]http://www.blogsuckhoe.com/mot-so-bai-thuoc-tri-benh-tu-cay-sa-ke.html [7] Nguyễn Quang Vĩnh Nguyên, Nguyên Thị Ngọc Lợi, 2013 Khảo sát thành phần hóa học lồi địa y Dirinaria Applanata (Fee) D.D.Awasthi Luận văn tốt nghiệp đại học Trường Đại Học Cần Thơ LÊ THỊ THẢO NGUYÊN 2112058 37 PHỤ LỤC Phổ IR hợp chất AA-Ea1 LÊ THỊ THẢO NGUYÊN 2112058 38